CS223616B1 - Způsob přípravy monensinu B - Google Patents
Způsob přípravy monensinu B Download PDFInfo
- Publication number
- CS223616B1 CS223616B1 CS679081A CS679081A CS223616B1 CS 223616 B1 CS223616 B1 CS 223616B1 CS 679081 A CS679081 A CS 679081A CS 679081 A CS679081 A CS 679081A CS 223616 B1 CS223616 B1 CS 223616B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- monensin
- preparing
- glucose
- days
- known manner
- Prior art date
Links
Landscapes
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Předmětem vynálezu je způsob přípravy kokeidiostatického antibiotika monensinu B, podle kterého se kultivuje mutantní kmen Streptomyces cinnamonensis 179, uložený ve sbírce mikroorganismů University j. E. Purkyně v Brně pod č. CCM 3504, v subsmersní kultuře při 25 až 42 °C 3 až 6 dní v kapalném živném prostředí, které obsahuje v hmotnostní koncentraci glukózu 1 až 8 % sójovou mouku 1 až 2 % síran železitý 0,02 až 0,2 % uhličitan vápenatý 0,3 % chlorid sodný 0,3 % propionát sodný 0,1 až 0,4 % načež se výsledný produkt izoluje známým způsobem.
Description
Předmětem vynálezu je způsob přípravy kokeidiostatického antibiotika monensinu B, podle kterého se kultivuje mutantní kmen Streptomyces cinnamonensis 179, uložený ve sbírce mikroorganismů University j. E. Purkyně v Brně pod č. CCM 3504, v subsmersní kultuře při 25 až 42 °C 3 až 6 dní v kapalném živném prostředí, které obsahuje v hmotnostní koncentraci glukózu 1 až 8 % sójovou mouku 1 až 2 % síran železitý 0,02 až 0,2 % uhličitan vápenatý 0,3 % chlorid sodný 0,3 % propionát sodný 0,1 až 0,4 % načež se výsledný produkt izoluje známým způsobem.
Vynález se týká způsobu přípravy monensinu B fermentací kmene Streptomyces cinnamonensis sp. 179.
Při výrobě monensinu (kokcldiostatického antibiotika A 3823) podle US patentu číslo 3 501 568 fermentací kmene Streptomyces ATCG 15413 vzniká komplex 4 monensinových antibiotik A, B, C, D, které se liší svojí biologickou aktivitou.
Způsobem přípravy monensinu podle vynálezu bylo změnami ve složení fermentační půdy dosaženo regulace tvorby jednotlivých složek komplexu tak, že vzniká v převážné míře pouze monensin B.
Předmětem vynálezu je tedy způsob přípravy monensinu B, jehož podstatou je, že se kultivuje mutantní kmen Streptomyces cinnamonensis 179, uložený ve Sbírce mikroorganismů University J. E. Purkyně v Brně pod č. CCM 3504, v subsmerzní kultuře při 25 až 4)2 °C 3 až 6 dní v kapalném živném prostředí, které obsahuje v hmotnostní koncentraci glukózu 1 až 6 % sójovou mouku 1 až 2 % síran železitý 0,02 až 0,2 % uhličitan vápenatý 0,3 % chlorid sodný 0,3 % propionát sodný 0,1 až 0,4 % načež se výsledný produkt izoluje známým způsobem.
Dále je uveden příklad způsobu přípravy podle vynálezu.
Příklad
Příprava monensinu B submerzní fermentací na živné půdě s propionátem sodným.
Spory mutantního produkčního kmene Streptomyces cinnamonensis 179 se naočkují na šikmý živný agar následujícího složení v hmotnostní koncentraci
| kvasičný extrakt | 0,4 % |
| sladinový extrakt | 1,0 % |
| glukóza | 0,4 % |
| oxold agar | 3,0 % |
| voda dest. | do 11 |
| pH | 7,3 |
Zaočkovaná půda se kultivuje při 28 °C 10 dní. Spory se smyjí 10 ml sterilní dest. vody a 1 ml získané suspenze se očkuje 50 mililitry inokulační půdy v 500 ml varných baňkách.
Inokulační půda má následující složení v hmotnostní koncentraci sójová mouka 1,5 % glukóza 2,5 %
CaCO3 0,3 %
NaCl 0,3 %
Fe2(SO4)3 0,03 % veda do 1 1 pH 6,4
Půda před očkováním se sterilizuje při 120 °C a tlaku 100 kP po dobu 35 min. Zaočkované Inokulační baňky se kultivují 20 až 24 hodin při 38 °C na rotační třepačce o frekvenci 168 kyvů za min. Produkční baňky se očkují 2 % obj. inokula.
Složení produkční půdy v hmotnostní koncentraci sójová mouka 1,5 % glukóza 5,0 % propionát sodný 0,2 %
CaCO3 0,3 %
Fe(SO4)3 0,03 % pH 6,4
Naočkovaná produkční půda v 500 ml varných baňkách se kultivuje při 38 °C, 120 hod. na výše popsané rotační třepačce.
Po skončení fermentace se upraví pH fermentační tekutiny 10% roztokem sody na hodnotu 8 až 9 a směs se zfiltruje. Filtrát se extrahuje 3X chloroformem a spojené extrakty se odpaří za vakua. Filtrační koláč se extrahuje 4X methanolem, filtráty se spojí, za sníženého tlaku se oddestiluje rozpouštědlo a odparek se dosuší. Odparky získané z filtrátu i koláče se rozpustí ve 100 ml methanolu, roztok se smísí se 100 ml 10 % hmot. vodného roztoku chloridu sodného a směs se extrahuje 3X vždy 100 ml petroletheru.
Petroletherové extrakty se spojí a protřepou 3X se 100 ml směsi methanolu s 10 procenty hmot. roztokem chloridu sodného v objemovém poměru 4 : 1. Vodně-methanolické výtřepky se spojí a smísí s 10 % hmot. roztokem NaCl, takže výsledná směs obsahuje 40 objemových % roztoku NaCl. Tato směs se extrahuje 3X chloroformem, chloroformový extrakt se odpaří a dosuší za vakua. Získaný monensinový komplex obsahuje 75 % monensinu B.
Celkový obsah monensinů v submersních kulturách je stanovován spektrofotometricky takto: 4 ml submersní kultury se extrahují 8 ml směsí hexan-chloroform (4 : lj, 1 ml získaného extraktu se zředí 5X butanolem a přidají se 2 ml vanilinového činidla (3 % vanilin v 1,5 % ethanolícké kyselině sírové). Směs se zahřívá 5 min. na vroucí vodní lázni a po ochlazení se ihned změří absorbance při 526 nm. Množství monensinu se odečete z kalibrační křivky.
Jednotlivé faktory monesinového komplexu a jejich vzájemný poměr jsou určovány chromatografií na tenké vrstvě síllkagelu (na deskách Silufol — Kavalier) v systému: heptan-ethylacetát-methanol (5:4:1 V/V/V). Detekce se provádí postřikem chromatogramu 3% roztokem vanilinu v 1,5% ethano223616 lické kyselině sírové a následným záhřevem desky na 110 °C. Submersní kultura po skončení fermentace se extrahuje směsí hexan-chloroform (4 : 1) a extrakt se odpaří do sucha. Odparek se rozpustí v malém množství chloroformu a použije pro nanášení na chromatogram.
Odparky získané způsobem popsaným v příkladu lze použít přímo pro přípravu monenslnového premixu k výrobě medikovaných krmiv pro výkrm ve velkochovech.
V případě potřeby lze získat čistý monensin B. Odparek se rozpustí a odbarví aktivním uhlím a filtrát se dále čistí chromatografií na sloupci silikagelu známým způsobem.
K eluci se použije postupně chloroform a jeho směs s methanolem. Na základě výsledků TLC se spojí frakce obsahující žádaný faktor a z odparku se krystalizací ze směsi n-hexan-chloroform získá čistý produkt.
Claims (1)
- PŘEDMĚTZpůsob přípravy monensinu B, vyznačený tím, že se kultivuje mutantní kmen Streptomyces cinnamonensis 179 CCM 3504, v subsmersní kultuře při 25 až 42 °C 3 až 6 dní v kapalném živném prostředí, které obsahuje v hmotnostní koncentraci glukózu 1 až 6 % i ynAlezu sójovou mouku 1 až 2 % síran železitý 0,02 až 0,2 °/o uhličitan vápenatý 0,3 % chlorid sodný 0,3 % propionát sodný 0,1 až 0,4 % načež se výsledný produkt izoluje známým způsobem.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS679081A CS223616B1 (cs) | 1981-09-15 | 1981-09-15 | Způsob přípravy monensinu B |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS679081A CS223616B1 (cs) | 1981-09-15 | 1981-09-15 | Způsob přípravy monensinu B |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS223616B1 true CS223616B1 (cs) | 1983-11-25 |
Family
ID=5415733
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS679081A CS223616B1 (cs) | 1981-09-15 | 1981-09-15 | Způsob přípravy monensinu B |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS223616B1 (cs) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104557964A (zh) * | 2014-12-15 | 2015-04-29 | 山东齐发药业有限公司 | 一种高纯度莫能菌素钠精品的制备方法 |
-
1981
- 1981-09-15 CS CS679081A patent/CS223616B1/cs unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104557964A (zh) * | 2014-12-15 | 2015-04-29 | 山东齐发药业有限公司 | 一种高纯度莫能菌素钠精品的制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE69228239T2 (de) | A 83543 Verbindungen und Verfahren zu ihrer Herstellung | |
| JPH0734740B2 (ja) | 抗菌性ｃｌ−１５７７を生産できる放線菌 | |
| SU1308200A3 (ru) | Способ получени биологически активного комплекса @ 6049 и штамм @ @ @ . @ . 6049-продуцент биологически активного комплекса @ 6049 | |
| Kobinata et al. | A new antibiotic, antlermicin A | |
| SU509246A3 (ru) | Способ получени антибиотика | |
| JPH05504469A (ja) | Ａ８３５４３回収方法 | |
| EP0333024A2 (de) | Neue 10-Ring-Lactone, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung | |
| SU1151219A3 (ru) | Способ получени антибиотика | |
| US3224945A (en) | Process for the production of ergot alkaloids | |
| CS223616B1 (cs) | Způsob přípravy monensinu B | |
| DE2445581C3 (de) | Verfahren zur Herstellung von D-Gluconsäure-dlactam | |
| SU517265A3 (ru) | Способ получени азотсодержащего антибиотика | |
| SU751332A3 (ru) | Способ получени антибиотического комплекса а-35512 | |
| EP0073329A1 (en) | Process for producing the antibiotic nosiheptide | |
| DE69816621T2 (de) | Macrolide mit antitumoraktivität | |
| CS225938B1 (cs) | Způsob přípravy monensinu A | |
| EP0042172B1 (en) | Antibiotic compounds, pharmaceutical compositions containing such compounds, process for production thereof | |
| SU1296010A3 (ru) | Способ получени 19-эпидианемицина и штамм @ @ АТСС 39205,используемый дл получени 19-эпидианемицина | |
| JPH04261180A (ja) | １３β−１３−デオキシ−２２，２３−ジヒドロアベルメクチン−Ｂｌａ／Ｂｌｂアグリコンの微生物学的製造 | |
| DE3419076A1 (de) | Neues antitumor-antibiotikum 81-484 und seine herstellung | |
| EP0259778B1 (de) | Antibiotisch wirksames Gentisinsäurederivat | |
| CN109182180A (zh) | 一种灰棕褐链霉菌及其发酵生产巴弗洛霉素a1的应用 | |
| CA1113874A (en) | Antibiotic bl580 zeta from streptomyces hydroscopicus | |
| US4430431A (en) | Producing fusafungine | |
| JPS5998087A (ja) | ナルゲニシンｃ↓１ |