CS220793B2 - Diagnostic means for evidence of leucosytes in the body liquids by acte leucosytury and method of making the active agent - Google Patents
Diagnostic means for evidence of leucosytes in the body liquids by acte leucosytury and method of making the active agent Download PDFInfo
- Publication number
- CS220793B2 CS220793B2 CS795702A CS570279A CS220793B2 CS 220793 B2 CS220793 B2 CS 220793B2 CS 795702 A CS795702 A CS 795702A CS 570279 A CS570279 A CS 570279A CS 220793 B2 CS220793 B2 CS 220793B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- naphthalene
- azo
- alanyloxy
- leukocytes
- benzyloxycarbonyl
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 7
- 239000013543 active substance Substances 0.000 title 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 title 1
- UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N Naphthalene Chemical group C1=CC=CC2=CC=CC=C21 UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 115
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 51
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N monobenzene Natural products C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 18
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims abstract description 13
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N Quinoline Chemical group N1=CC=CC2=CC=CC=C21 SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 9
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims abstract description 8
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims abstract description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Chemical group 0.000 claims abstract description 5
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims abstract description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims abstract description 3
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims abstract 2
- 239000000987 azo dye Substances 0.000 claims description 14
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 14
- -1 polyethyleneoxy Polymers 0.000 claims description 14
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 7
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 6
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 claims description 6
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims description 5
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims description 5
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 claims description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 4
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 claims description 4
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical group OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 claims description 3
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 claims description 3
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims description 3
- 125000001273 sulfonato group Chemical group [O-]S(*)(=O)=O 0.000 claims description 3
- LNETULKMXZVUST-UHFFFAOYSA-N 1-naphthoic acid Chemical group C1=CC=C2C(C(=O)O)=CC=CC2=C1 LNETULKMXZVUST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 claims description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims description 2
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000000043 benzamido group Chemical group [H]N([*])C(=O)C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 claims 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000001820 oxy group Chemical group [*:1]O[*:2] 0.000 claims 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 abstract description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 abstract 2
- 125000004442 acylamino group Chemical group 0.000 abstract 1
- 125000005529 alkyleneoxy group Chemical group 0.000 abstract 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical group 0.000 abstract 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 abstract 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 44
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 33
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 27
- 239000000123 paper Substances 0.000 description 23
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 244000172533 Viola sororia Species 0.000 description 12
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical class C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 9
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 9
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 8
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 7
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 7
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 6
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 6
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 6
- ZYECOAILUNWEAL-NUDFZHEQSA-N (4z)-4-[[2-methoxy-5-(phenylcarbamoyl)phenyl]hydrazinylidene]-n-(3-nitrophenyl)-3-oxonaphthalene-2-carboxamide Chemical compound COC1=CC=C(C(=O)NC=2C=CC=CC=2)C=C1N\N=C(C1=CC=CC=C1C=1)/C(=O)C=1C(=O)NC1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1 ZYECOAILUNWEAL-NUDFZHEQSA-N 0.000 description 5
- 125000000751 azo group Chemical group [*]N=N[*] 0.000 description 5
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 5
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 5
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 5
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 4
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 4
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L sodium sulphate Substances [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 4
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010050791 Leukocyturia Diseases 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229950011260 betanaphthol Drugs 0.000 description 3
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 3
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 3
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 229940086542 triethylamine Drugs 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QVHJQCGUWFKTSE-YFKPBYRVSA-N (2s)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)OC(C)(C)C QVHJQCGUWFKTSE-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- GKQHIYSTBXDYNQ-UHFFFAOYSA-M 1-dodecylpyridin-1-ium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCC[N+]1=CC=CC=C1 GKQHIYSTBXDYNQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical compound CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UXFQFBNBSPQBJW-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-methylpropane-1,3-diol Chemical compound OCC(N)(C)CO UXFQFBNBSPQBJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PLIKAWJENQZMHA-UHFFFAOYSA-N 4-aminophenol Chemical compound NC1=CC=C(O)C=C1 PLIKAWJENQZMHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 2
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003668 acetyloxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(=O)O[*] 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 230000000093 cytochemical effect Effects 0.000 description 2
- 239000012954 diazonium Substances 0.000 description 2
- 150000001989 diazonium salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 2
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 2
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 2
- VKGRRZVYCXLHII-OLFWPHQKSA-N (-)-stercobilinogen Chemical compound CC[C@@H]1[C@@H](C)C(=O)N[C@H]1CC1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(C[C@H]3[C@@H]([C@@H](CC)C(=O)N3)C)N2)CCC(O)=O)N1 VKGRRZVYCXLHII-OLFWPHQKSA-N 0.000 description 1
- QQWACHGKILUHGB-VKHMYHEASA-N (2s)-2-isocyanatopropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)N=C=O QQWACHGKILUHGB-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- QIVUCLWGARAQIO-OLIXTKCUSA-N (3s)-n-[(3s,5s,6r)-6-methyl-2-oxo-1-(2,2,2-trifluoroethyl)-5-(2,3,6-trifluorophenyl)piperidin-3-yl]-2-oxospiro[1h-pyrrolo[2,3-b]pyridine-3,6'-5,7-dihydrocyclopenta[b]pyridine]-3'-carboxamide Chemical compound C1([C@H]2[C@H](N(C(=O)[C@@H](NC(=O)C=3C=C4C[C@]5(CC4=NC=3)C3=CC=CN=C3NC5=O)C2)CC(F)(F)F)C)=C(F)C=CC(F)=C1F QIVUCLWGARAQIO-OLIXTKCUSA-N 0.000 description 1
- NUIURNJTPRWVAP-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Dimethylbenzidine Chemical compound C1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=CC=2)=C1 NUIURNJTPRWVAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GNPUIRFDBYALRI-UHFFFAOYSA-N 4-methyl-9h-carbazole Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C=CC=C2C GNPUIRFDBYALRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238876 Acari Species 0.000 description 1
- 229910002703 Al K Inorganic materials 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920003043 Cellulose fiber Polymers 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021591 Copper(I) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000007649 L alpha amino acids Chemical group 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N L-Alanine Natural products C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101500006448 Mycobacterium bovis (strain ATCC BAA-935 / AF2122/97) Endonuclease PI-MboI Proteins 0.000 description 1
- 235000007265 Myrrhis odorata Nutrition 0.000 description 1
- 241000480805 Oxyna Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 240000001090 Papaver somniferum Species 0.000 description 1
- 235000008753 Papaver somniferum Nutrition 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 240000004760 Pimpinella anisum Species 0.000 description 1
- 235000012550 Pimpinella anisum Nutrition 0.000 description 1
- BHEJOQCIBOLMNS-UHFFFAOYSA-N Stercobilinogen Natural products CCC1C(C)C(=O)NC1CC2=NC(Cc3[nH]c(CC4NC(=O)C(CC)C4C)c(C)c3CCC(=O)O)C(=C2C)CCC(=O)O BHEJOQCIBOLMNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N Thiazole Chemical compound C1=CSC=N1 FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 235000005811 Viola adunca Nutrition 0.000 description 1
- 240000009038 Viola odorata Species 0.000 description 1
- 235000013487 Viola odorata Nutrition 0.000 description 1
- 235000002254 Viola papilionacea Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UCTLHLZWKJIXJI-LXIBVNSESA-N [(3s,8r,9s,10r,13s,14s)-17-chloro-16-formyl-10,13-dimethyl-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15-decahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl] acetate Chemical compound C([C@@H]12)C[C@]3(C)C(Cl)=C(C=O)C[C@H]3[C@@H]1CC=C1[C@]2(C)CC[C@H](OC(=O)C)C1 UCTLHLZWKJIXJI-LXIBVNSESA-N 0.000 description 1
- FMVKYSCWHDVMGO-UHFFFAOYSA-N [3-[(2-methylphenyl)carbamoyl]naphthalen-2-yl] 2-chloroacetate Chemical compound CC1=CC=CC=C1NC(=O)C1=CC2=CC=CC=C2C=C1OC(=O)CCl FMVKYSCWHDVMGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ITBPIKUGMIZTJR-UHFFFAOYSA-N [bis(hydroxymethyl)amino]methanol Chemical compound OCN(CO)CO ITBPIKUGMIZTJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IPBVNPXQWQGGJP-UHFFFAOYSA-N acetic acid phenyl ester Natural products CC(=O)OC1=CC=CC=C1 IPBVNPXQWQGGJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N acetic acid;zinc Chemical compound [Zn].CC(O)=O.CC(O)=O ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 1
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 150000007933 aliphatic carboxylic acids Chemical group 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Chemical class 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000001348 alkyl chlorides Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- JXLHNMVSKXFWAO-UHFFFAOYSA-N azane;7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole-4-sulfonic acid Chemical compound N.OS(=O)(=O)C1=CC=C(F)C2=NON=C12 JXLHNMVSKXFWAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940125717 barbiturate Drugs 0.000 description 1
- HNYOPLTXPVRDBG-UHFFFAOYSA-N barbituric acid Chemical compound O=C1CC(=O)NC(=O)N1 HNYOPLTXPVRDBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001559 benzoic acids Chemical class 0.000 description 1
- PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N benzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CC=C1 PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KXHPPCXNWTUNSB-UHFFFAOYSA-M benzyl(trimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 KXHPPCXNWTUNSB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000000051 benzyloxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])O* 0.000 description 1
- JWAZRIHNYRIHIV-UHFFFAOYSA-N beta-hydroxynaphthyl Natural products C1=CC=CC2=CC(O)=CC=C21 JWAZRIHNYRIHIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 150000001244 carboxylic acid anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001733 carboxylic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- OXBLHERUFWYNTN-UHFFFAOYSA-M copper(I) chloride Chemical compound [Cu]Cl OXBLHERUFWYNTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OPQARKPSCNTWTJ-UHFFFAOYSA-L copper(ii) acetate Chemical compound [Cu+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O OPQARKPSCNTWTJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 150000004683 dihydrates Chemical class 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 230000001206 effect on leukocytes Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000058 esterolytic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 description 1
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- JMMWKPVZQRWMSS-UHFFFAOYSA-N isopropanol acetate Natural products CC(C)OC(C)=O JMMWKPVZQRWMSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 150000002790 naphthalenes Chemical class 0.000 description 1
- 150000005209 naphthoic acids Chemical class 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical group C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- LQNUZADURLCDLV-UHFFFAOYSA-N nitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CC=C1 LQNUZADURLCDLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 101150032584 oxy-4 gene Proteins 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000003617 peroxidasic effect Effects 0.000 description 1
- 125000000951 phenoxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(O*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002943 quinolinyl group Chemical group N1=C(C=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000010902 straw Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012209 synthetic fiber Substances 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 1
- YZYKBQUWMPUVEN-UHFFFAOYSA-N zafuleptine Chemical compound OC(=O)CCCCCC(C(C)C)NCC1=CC=C(F)C=C1 YZYKBQUWMPUVEN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004246 zinc acetate Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B43/00—Preparation of azo dyes from other azo compounds
- C09B43/18—Preparation of azo dyes from other azo compounds by acylation of hydroxyl group or of mercapto group
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5094—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for blood cell populations
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Ecology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
Vynález se týká diagnostického prostředku k důkazu ' leukocytů v tělních tekutinách .
při akutní leukocyturii. Tento diagnostický prostředek sestává ze savého nosiče impregnovaného chromogenem, pufrem s rozsahem pH od ' 6 do 10, a popřípadě smáčedlem a/ /nebo komplexotvorným činidlem, který jako chromogen obsahuje ester azobarviva obecného vzorce
A-N=N-B(.OR)n
Podle vynálezu se dále připravují estery azobarviv obecného ' vzorce I tím, že se nechají reagovat sloučeniny obecného vzorce
A-N=N~B(0H)„ s kyselinami 'obecného vzorce
HO—R popřípadě s jejich reaktivními deriváty.
Diagnostický prostředek podle vynálezu je vhodný k důkazu leukocytů v tělních tekutinách, zejména . při akutní leukocyturii.
Vynález se týká diagnostického prostředku к důkazu leukocytů v tělních tekutinách při akutní leukocyturii a způsobu výroby účinné složky.
Důkaz leukocytů v tělních tekutinách, zejména v moči, zaujímá významné místo při diagnostice onemocnění ledvin a urogenitálního traktu.
Dosud se tento důkaz prováděl namáhavým počítáním leukocytů v neodstředěné moči nebo v sedimentu moči. Oběhá metodám je přirozeně společné, že jsou při nich brány v úvahu jen intaktní leukocyty. Na druhé straně je známo, že rychlost lyse leukocytů v závislosti na prostředí moči enormně kolísá. Tak je například v močích se silně alkalickým prostředím nutno počítat s hodnotami poločasu leukocytů pouze 60 minut. Následkem pak jsou příliš nízké hodnoty leukocytů, popřípadě při delších dobách stání moči dokonce falešně negativní výsledky.
Nehledě na chyby způsobené v důsledku lyse, skýtá kvantitativní mikroskopické stanovení leukocytů v neodstředěné, homogenizované moči v počítací komůrce pravdivé hodnověrné výsledky. V praxi se však této metody používá jen zřídka, neboť je namáhavá, únavná a vyžaduje mnoho času a zaškolený personál.
Převážná většina stanovení leukocytů v moči se v lékařské praxi provádí v zorném poli běžným způsobem za použití sedimentu moči. Pro toto stanovení se musí nejdřív získat sediment odstředěním. Přitom se však obohacují také další složky moči, jako například soli a epitetální buňky, které mohou značně ztěžovat mikroskopické počítání leukocytů. Kolísání obsahu sedimentu, nehomogenita sedimentu, jakož i rozdílné mikroskopické zvětšení nebo rozdílné optické vybavení mikroskopu, vedou к tomu, že obvyklé údaje o počtu leukocytů v mikroskopickém zorném poli mohou být zatíženy chybami několika set procent.
Úkolem předloženého vynálezu bylo tudíž připravit diagnostický prostředek, pomocí kterého by bylo možno stanovit leukocyty v tělních tekutinách jednoduchým a snadným způsobem a pokud možno rychle a úplně.
Jako· princip důkazu pro takovéto stanovení leukocytů se nabízí enzymatická reakce, protože leukocyty obsahují široké spektrum enzymů.
V americkém patentním spisu 3 087 794 je již popsáno stanovení leukocytů spočívající v peroxidativní aktivitě, která se vyskytuje u granulocytárních leukocytů. Savý nosič. který je impregnován peroxidem vodíku a organickým indikátorem, například o-tolidinem, ukazuje přítomnost leukocytů vznikem barevného oxidačního produktu. Takovýto test však má podstatné nevýhody. Na straně jedné jsou peroxidatické reakce značně narušovány zcela obecně redukovanými látkami v moči, jako například askorbovou kyselinou.
Na straně druhé jsou uváděny na různých místech literatury [viz například L. Mettler, Med. Welt 23, 399 (1972)] údaje o nestabilitě peroxidázy leukocytů v prostředí moči, které vedou к falešně negativním výsledkům.
Již několik let mají v histo- a cytochemické enzymologii své pevné místo kolorimetrické analytické metody, které spočívají na esterolytické aktivitě enzymů přítomných ve stanovovaných systémech (srov. například A. G. E. Pearse, Histochemistry, Theoretical and Applied). V principu se přitom používá bezbarvých nebo slabě zbarvených esterů, které se enzymatickým štěpením rozpadají většinou na bezbarvé kyselinové a rovněž bezbarvé alkoholické či h nolické složky. Tyto složky se pak reakcí následující po zmýdelnění převedou na barev né produkty (například kopulací s diazoniovými solemi nebo oxidačními reakcemi).
Tak popisují například F. Schmalzl a H. Braunsteiner v Klín. Wschr. 46, 642 (1968) specifický cytochemický důkaz leukocytární sterázy za použití naftol-AS-D-chloracetátu jako substrátu a za použití diazoniové soli к tvorbě barevné sloučeniny.
Pro diagnostické prostředky к rychlému a jednoduchému důkazu leukocytů v tělních tekutinách, jako například v moči, se však ukázaly dvousložkové systémy tohoto typu jako nevhodné, vzhledem к tomu, že s diazaniovými solemi reagují — jak známo — mnohé sloučeniny vyskytující se v moči, jako uroibilinogen, sterkobilinogen, bilirubin a další. Kromě toho je tento důkaz často příliš necitlivý. Tak například nevykazují žádnou reakci vzorky obsahující 5000 leukocytů/μΐ.
S překvapením bylo nyní zjištěno, že sc získají stabilní a rychle ukazující diagnostické prostředky, pomocí kterých lze dobře stanovovat leukocyty v tělních tekutinách, když se jako substrátu pro důkaz esteráz vyskytujících se v neutrofilních granulocytárních leukocytech použije esterů azobarviv.
Předmětem předloženého vynálezu je tudíž diagnostický prostředek к důkazu leukocytů v tělních tekutinách, sestávající ze savého nosiče, který je impregnován chromogeném, pufrem s rozsahem pH 6 až 10, a popřípadě smáčedlem a/nebo komplexotvorným činidlem, spočívající v tom. že jako chromogen obsahuje ester azobarvíva obecného vzorce I
A—N=N—B(OR)h (I) v němž
A znamená pětičlenný nebo šestičlenný, popřípadě s benzenovým jádrem anelovaný zbytek s jedním až dvěma heteroatorny ze skupiny tvořené dusíkem, sírou a kyslíkem, který je popřípadě substituován halogenem, :5 alkylovou skupinou s 1 a-z- 5. atomy uhlíku nebo/a alkoxyskupmou s 1 až 5 atomy uhlíku, nebo znamená jednou až třikrát alkylovou skupinou s 1 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupinou s 1 až 5 -atomy uhlíku, nttroskupinou, sulíonatosku^nou a/nebo benzoyh aminoskupinou substituovanou fenylovou skupinu,
B znamená popřípadě jednou až dvaJkrát sulfonatoskupinou, alkoxyskupinou s 1 až 5 atomy uhlíku -a/nebo alkoxypolyethyienoxyskupinou s 1 až 5 atomy uhlíku v -alkoxylové čáslti substituovaný zbytek benzenu, naftalenu nebo chinolinu,
R znamená zbytek alifatické karboxylové kyseliny -s 1 až 5 atomy uhlíku, zbytek benzoové kyseliny nebo naftoové kyseliny, nebo zbytek aminokyseliny nebo peptidu chráněný na terminálním atomu dusíku a n znamená číslo 1 nebo- 2.
Veškeré estery -azobarviv obecného vzorce I - jsou novými sloučeninami.
Předmětem předloženého vynálezu je -tudíž i způsob jejich výroby.
Při výrobě nových -esterů azobarviv obecného vzorce I -se může používat o -sobě známých metod syntézy fenylesterů. Výhodně se _ o sobě známým způsobem nechají reagovat -odpovídající -azobarviva obecného vzorce II '
A—N=N—B(OH)n (II) v němž
A, B a n mají shora uvedený význam, -s kyselinami obecného vzorce III
HO—R (III) v němž
R má -shora uvedený význam, popřípadě s jejich reaktivními deriváty.
Jako reaktivních derivátů při -výrobě esterů karboxylové kyseliny -se používá příslušných anhydridů karboxylové kyseliny, popřípadě choridů karhoxylové ^selin^ popřípadě za přídavku terciárních aminů. K výrobě esterů aminokyselin a -esterů popudů se používá metod syntézy, které jsou obvyklé v chemii peptidů.
Azobarviva obecného- vzorce II jsou známé látky [srov. například H. R. Hovind. The Analyst, 100, 769 (1975)] nebo se mohou vyrábět analogicky jako známé sloučeniny.
Halogenem v definici -symbolu A je fluor, chlor a brom, výhodně brom.
„Alkylovou skupmou“ v definici symbolu A jakož i „aikoxyskupmou“ ve významu symbolů A a B se rozumí -alkylové a alkoxylové skupiny obsahující 1 až 5, výhodně 1 až 3 atomy uhlíku, přičemž zvláště výhodnými jsou methylová skupina, methoxyskupina a ethoxyskupina.
Jako „a^oxypotyalkylenoxyskupma“ je zcela zvláště výhodná 3,6-dioxaheptyioxyskupina.
„Sulfonatoskupinou“ v definici symbolů A a B -se rozumí jak zbytek sulfonové kyseliny -samotný, tak i jeho- soli -s kovy, výhodně soli s kovy alkalických zemin a -soli alkalických kovů, přičemž zvláště výhodná je sodná sůl.
Jako zbytek alifatické karboxylové -kyseliny -ve významu su-bstttuentu R -přicházejí v úvahu zbytky alifatických karboxylových kyselin s 1 až 5, výhodně -s 1 až 3 atomy uhlíku nebo také aromatických karboxylových kyselin, jako například benzoové a naftoové kyseliny. Zcela zvláště výhodné jsou acetylové -a benzoylové zbytky.
Jako -zbytky aminokyselin ve významu substituentu R přicházejí v úvahu zbytky přírodních L-a-ammokyselin, zejména glycinu, L-alaninu a L-fenylalaninu.
Zbytkem peptidu v defimm substituentu R se rozumí di-, tri-, tetra- a pentapeptidy, výhodně di- a tripeptidy, přičemž jako· -složky -aminokyselin nacházejí použití -výhodně shora zmíněné aminokyseliny.
Postranní řetězce —OR mohou být vázány na benzenový, naftalenový, popřípadě chinolinový kruh v každé libovolné poloze. Azo-skupiny mají však být vázány vždy v ortho- nebo/a v para-poioze k substituentu — OR.
Estery azobarviv -obecného- vzorce I, které se používají - jako chromogeny podle vyn^ez^ se použív-ají v -koncentracích od - 10~4 do> W-1 ηιοί/ϋΐη výhodně W3 až 10~2 m°^/ /litr impregnačního roztoku.
Další složkou diagnostického prostředku pro důkaz -leukocytů je vhodný systém pufru. Přitom přicházejí v úvahu pufry fosfátové, barbiturátové, borátové, tris-(hydroxymethyl)aml·nome'tha'nové, tzv. „tris“, 2-amino-2-methyl-i,3-propandiolové (tzv. Amediol) nebo aminokyselinové, přičemž hodnota pH a kapacita pufru musí být -voleny tak, aby se po- ponoření testovacího proužku do- -tělní tekutiny upravila hodnota pH na tomto proužku na 6 až 10, výhodně na 7 až 9.
Dále je výhodné používat pH výrotiě diagnostických prostředků podle -vynálezu, k důkazu leukocytů v tělních tekutinách navíc ještě tensidů, protože v jejich přítomnosti -se mohou dosahovat kratší reakční doby. Výhodně se používá kationaktivních smáčedel, jako například_ kvartérních amoniových, pyridiniových nebo imldazoliových solí v koncentr-acích od -0,05 do 2 výhodně od 0,1 do 0,5 °/o.
Další složkou diagnostického prostředku pro důkaz -leukocytů může být vhodné komplexotvorné činidlo. Výhodně se používá -solí kovů, například železa, mědi, chrómu, kobaltu, niklu, manganu -a zinku, které reagují s o-hydroxyazobarvivy vznikajícími působením esterů azobarviv na leukocytární -esterázy za vzniku komplexních chelátů obsahujírích kov -a za současného zintenzwnění barevného odstínu. Tím se dosáhne kratších reakčních dob a nižších mezí k provedení analýzy. Komplexotvorná činidla se používají v koncentracích od 10“4 do IP1 mol/ /htr, výhodně od 10-3 do 10“2 mol/11'tr impregnačního roztoku.
Pro výrobu diagnostického prostředku podle .vynálezu se výhodně používá savého nosiče, jako například ПН-гаС-пНю papíru, celulózy nebo ’ rouna ze syntetických vláken, který se impregnuje roztoky potřebných činidel, která se obvykle používají pro výrobu testovacích proužků (substrát, pufr, popřípadě tensidy, komplexotvorná činidla atd.) ve snadno těkavých rozpouštědlech, jako je například ·voda, methanol, ethanol nebo aceton.
Impregnace se provádí účelně ve dvou oddělených stupních: nejdříve se provede impregnace vodným roztokem, který obsahuje pufr · a další ve vodě rozpustné přísady. Potom se provede impregnace roztokem sloučeniny obecného vzorce I.
Ve speciálních případech je · možno používat také obráceného pořadí. Hotové 'testovací papíry se mohou používat jako takové nebo se o sobě známým způsobem přilepí na držátko· nebo se výhodně vloží mezi plastickou hmotu a jemnou síťovinu a všechny vrstvy se slisují (viz německý patentní spis č. 2 118 455).
Získají se diagnostické prostředky, které po ponoření do zkoumané · tělní tekutiny rychle a jednoduše ukazují na přítomnost leukocytů změnou barvy.
Vzhledem k tomu, že aktivita esteráz přítomných v neutrotilních granulocýtárních leukocytech zůstává plně zachována i po proběhnutí lyse, jsou diagnostickými prostředky podle vynálezu indukovány jak intaktní leukocyty, tak i leukocyty po prob^nutí lyse. Nedochází tudíž к chybám v tífoledku tyse.
Příklad 1
Filtrační papír (například výrobek firmy Schleicher + Schull 23 SL) se postupně impregnuje následujícími roztoky a potom se vysuší při teplotě 60 QC.
Roztok 1 tris-(hydr oxymethyl) amin omet han 0,61 g, voda, destilovaná asi 30 ml, roztok se přidáním 0,1N roztoku kyseliny chlorovodíkové upraví na pH 7,0, voda, destilovaná. do 100,0 ml,
Roztok 2 thiazol-2-azo-r-[2‘-(N-benzyloxykarbonyl-L-alany loxy)naf taten] 46,1 mg aceton, do 100,0 ml.
Získá se slabě růžově · zbarvený testovací papír, který se při ponoření do moči, kte rá obsahuje leukocyty, zbarví zřetelně červeně.
Pomocí testovacího papíru se dá · prokázat: 10 000 leukocytů/μΐ močí zz asi 1 mn^i^^ihi
000 leukocytů/μΐ močč za asi 2 minuty
000 leukocytů/μΐ moči za asi 5 minut
Citlivost testu se pohybuje kolem asi 2000 leukocytů/|u1.
Testovací papíry s podobnými •vlastnostmi (citlivost 2000 az 10 000 leukocytů/^1) se zís^jt jestliže se mfeto· thmzol-^azo-r- [ 2‘- (N-benzyloxykaгbo!nyl-L-alanyloxy )naftalenu] použije následujících аиЬя^^, přičemž se dá při ponoření do moči s obsahem leukocytů po.zorovat uvedená změna barvy testovacích papírů:
Hhazobž-azo-2*- (l‘-acetoxy-4‘-methoxybenzen) změna barvy: ze slabě růžové do fialové thiazol-2-azo-2‘-[Γ-(N-benztloxykarbonyl-balanyloxy) -4<-methoxybenzen ] změna barvy: ze slabě růžové do fialové totazoh^azo-lM^^-diacetox^enzen) změna barvy: ze slabě růžové do červeno -fialové thiazol-2-azo-4‘-[.l‘,3‘-di-(N-benztloxykarbonyl-L-alany/oxy):l:tmzen ] změna barvy: ze slabě růžové do červeno -fialové thiazol-2-αζο-Γ- [ 2‘-acetoxynaf taten ] barevná změna: ze slabě růžové do červené th.Íazol-2-azo-r-[2ť-(N-ter.c.butyloxykarbonyl-L-alanyloxy) naftalen ] barev.ná změna: ze stábě růžové do červené thiazol-2-azo-2‘-[r-acetoxynaf talen] změna barvy: ze slaM růžové do červeno-fialové taiazal-^azo-2*- [ ť- (N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) naftalen ] změna barvy: z růžové do červeno-fialové thmzol^-azo-r- [ 2‘- (N-benzy].oxykarbonyl-L-alanyioxy) -7‘-na^r mmsulf onatonaftalen ] dihydrát změna barvy: z růžové do červené 5-brom-thiazol-2-azo-Γ-[ 2‘- (N-benzyloxykar bo nyl-L-ala n yloxy) naftalen ] změna barvy: ze staW růžové do čer.vené benzothiazol-2-azo-l‘-[2‘-(N-benzyloxyk ar bonyl-L-alanyloxy) naftalen] změna barvy: z růžové do červené benzotomzo^-azo-^-ť-^-benz^ox^arbonyl-L-alany loxy) naftalen ] změna barvy: ze slabě růžové do červené
6-methoxybenzQthiazol-2-azo-2‘- [ 1‘- ( N-benzyloxy-karbonyl-L-alanyloxy) naftalen ] změna barvy: z růžové -do červené pyridni-2-azo-4‘-[ l‘,3‘-di-( N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy jbenzen ] změna barvy: z béžové do červeno-fialové pyridin-2-azo-r- (2‘-acotox.ynafalen) změna barvy: z béžové do červené pyridin-2-azo-l‘- (2‘-benzoyl.oxynaf telen) změna barvy: z růžové do- červené pyridin-2-azo-l‘- [ 2‘- (N-benzyloxy^rbonyl-L-alanyloxy) ] naftalen změna barvy z béžové do červené d^-ďmitrobena znazo-2‘- [ r-benzoytoxy-3‘,6‘-di- (natriumsulf ona to) naf teten ] změna barvy: z béžové do modré thiazol-2-a ζο-Γ- [ 2‘- (N-benzyloxykar.bonylglycyloxy) naf talen ] změna barvy: ze 'slabě růžové do červené thiazol^-a ζο-Γ- [ 2‘- (N-benzyloxylkarbonyl-L-fenyl-alanyloxy) .naftalen ] změna barvy: ze -slabě růžové do červené
Příklad 2
Filtrační papír (například výrobek . firmy Schleicher - + Schttll 23 SL] se postupně impregnuje následujícími roztoky a potom se vysuší pn teplotě 60 °C.
Roztok 1 tri-s-(hydroxymetbyl)aminomethan 0,61 g, voda, destilovaná asi 30 ml, roztok se upraví 0,lN roztokem kyseliny chlorovodíkové .na pH 7,0 voda, destilovaná, do 100,0 ml.
Roztok 2 thiazol-2-azo-4<- [ · Γ-(N-benzyloxykarbonyl-L-a lany loxy) nafitalen ] 41 . lmg, aceton, do 100,0 ml.
Získá se růžově zbarvený testovací papír, který se při ponoření do moči s obsahem leukocytů zbarví zřetelně do fialova. Tímto testovacím papírem se dá prokázat:
| 5 000 leukocytů//! | moči | za | asi | 1 | minutu |
| 2 000 leuko^cyitů/u1 | moči | za | asi | 3 | minuty |
| 1 000 leukocytů/μΙ | moči | za | asi | 6 | minut |
| 500 leukocytů/u1 | moči | za | asi | 10 | minut |
| Citlivost -tohoto | testu | je | při asi | 500 leu- |
kocytech/μΐ.
Testovací papíry -s podobnými vlastnostmi (citlivost: 500—5000 leu^cytů/u1) se ztekají, jcsthže -se mfeto thiazol-^-azo-^-r- (N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) naftalenu] použije následujte^ substrátu, při čemž se dá pozorovat uvedená změna - bar vy testovacích papírků při ponoření do -močg která obsafruje leukocýty:
toiazOl^-azo-L- (l ‘-ace toxy nalH: al en) změna barvy: ze stebě růžové do fialové tteazol^-azo-S'-[ 8‘- (N-benzyloxykar bonyl-L-alanyloxy) chinolin ] změna barvy: z růžové do červené thiazol-2-azo-4‘- [ F- (N-'benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) -5‘-methoxynaf telen ] změna barvy: z růžové do červené tteazol-^-azo-4'-[!‘-( N-benzyIoxykar bonyl-L-alanyloxy )-5‘- (^‘^“-dtoxalieptyloxy) nafitalen] změna barvy: z růžové do červené
5- bromtaiazol-Z-azo-4*- [l‘-( N-benzyloxykar bonyl-L-alanyloxy) naftalen] změna barvy: ze slabě růžové do fialové ^nzotteazok^azo-^-fr-^-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) nafitalen ] změna barvy: z růžové - do fialové 6- methoxybenz'othiazol-2-azo-4‘- [ 1‘-
- (N-b e nzy 1оху к arb o ny l-L-a-lany loxy) naftalen] změna barvy: z růžové do thiazol-2-azo-4‘--l‘-[N-banzyloxykarlbonyl-L-alanyl-L-alanyloxy) naftalen ] změna barvy, z růžové - do fialové totezol^-azo-4*- [r-(N-benzyloxykarbonyl-L-alanyl-L-ate nyl-L-alanyloxy) naftalen ] změna barvy: z růžové do fialové
5- metlrylttoazok^azo-L-[ L- (N-benzyloxykarbony l-L-alanyloxy) naftalen ] změna barvy: z růžové do fialové 6- metoylbenzotliiazol-^-azo-L- [ 1‘- (N-benzyloxykarbonyLL-alanyloxy) nafitalen] změna barvy: z - růžové do fialové
Příklad 3 nitracrn papír (napnkted Schleicher + + Schull 23 SL] se postupně impregnuje následujtetai -roztoty a potom se -vysusí při 60 °Ci
Roztok 1 dekahydrát- dvoj6odné - soli -kyseliny tetrabonte 1,91 g voda, destilovaná asi 30 ml, tento roztok se přidáním 0,1N roztoku kyseliny chlorovodíkové upraví na hodnotu pH 8,0, voda, destilovaná, do 100,0 ml.
Roztok 2
2-methoxy-4-nitr abenzenazo-44- [ Г- (N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) -naftalen] 52,9 mg, aceton, do 100,0 ml.
Získá se světle oranžově zbarvený testovací papír, který se při ponoření do moči obsahující leukocyty zbarví zřetelně do červena. Pomocí tohoto testovacího papíru se dá prokázat: 5000 leukocytů/μΐ moči za asi 1 minutu
2000 leukocytů/μΐ moči za asi 3 minuty
1000 leukocytů/μΐ moči za asi 5 minut
Citlivos-t tohoto testu se pohybuje kolem asi 1000 leukocytů/μΐ.
Testovací papíry s podobnými vlastnostmi (citlivostmi: 1000 až 5000 leukocytů/μΐ) se získají, když se místo 2-methoxy-4-niitrobenzenazo-4‘- [ Г- (N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxyjnaftalenu] použije následujících substrátu, přičemž se dají pozorovat uvedené změny barvy testovacích papírků při ponoření do moči s obsahem leukocytů:
4-natriumsulf onátobenzenazo-44- [ Г- (Nbenzyloxykarbony 1-L-alanyloxy) naftalen ] změna barvy: ze žluté do- červené
4-nitrobenzena,zo-4‘- (l‘-acetoxynaf talen) změna barvy: ze žluté do červené
4-nitrobenzenazo-4‘-[lí-(N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) naftalen ] změna barvy: ze žluté do červené
2.4- dinitrobenzenazo-44- (Γ-acetoxybenzen) změna barvy: ze žluté do červeno-fialové
2.4- dmitrobenzenazo-44-[l4-(N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) benzen ] změna barvy: ze žluté do červeno-fialové
2.4- dinitrobenizenazo-4‘- (Γ-acetoxynaf talen) změna barvy: ze žluté do fialové
2.4- dimtrobenzenazo-44- [ l4- (N-benzyloxykarbony 1-L-alanyloxy) naftalen ] změna barvy: ze žluté do fialové 2-methoxy-4-nítrobenzenazo-4‘- (l4-acetoxybenzen) změna barvy: ze světle oranžové do červené
2-methoxy-4-nitrobenzenazo-44-(l4-acetoxynaf talen) změna barvy: ze světle oranžové do červené
2-methoxy-4-nitrobenzenazo-5‘-[ 8‘-( N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy)chinolin] změna barvy: ze světle oranžové do červeno-fialové
2-me;thoxy-4-nitrobenzenazo-4ť-[l<-(N-benzyloxykanbonyl-L-alanyloxy)-5‘-methoxynaf talen] změna barvy: ze světle oranžové na červenou
2-methoxy-4-nitrobenzenazo-4í-[ Г- (N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) -5‘- (3“,6“-dioxaheptyloxy) naftalen ] změna barvy: ze světle oranžové na červenou
4-methoxy-2-nitrobenzenazo-4‘- [ 1*- [N-benzyloxykarbonyil-L-alanyloxy)naftalen] změna barvy: ze světle oranžové do fialové
2.5- dime;thoxy-4-nitrobenzenazo-4í-[ 1‘-(N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) naftalen ] změna barvy: ze světle oranžové do fialové
2.5- dimethoxybenzenazo-4‘-[l‘-(N-benzyloxykarbony 1-L-alanyloxy) naftalen ] změna barvy: ze světle oranžové do červené
2-methoxy-4-benzoylamino-5-methylbenzenazo-4‘-[l‘-(N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy)naftalen] změna barvy: z růžové do červené
2.5- dimethoxy-4-benzoylaminobenzenazo-4‘- [ l4- (N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) naftalen] změna barvy: z oranžové do červené
2.5- diethoxy-4-benzoylaminobenzenazo-44-[l‘-(N-benzyloxykarbony 1-L-alanyloxy )naftalen] změna barvy: z růžové do červené
2-methoxy-4-nitrobenzenazo-44-[l4-(N-benzy loxykarbonylglycyloxy Jnaf talen ] změna barvy: ze světle oranžové do červené
2-methoxy-4-nitrobenzenazo-4‘- [ Г- (N-benzyloxykarbonyl-L-f enylalanyloxy) naftalen ] změna barvy: ze světle oranžové do červené
2-methoxy-4-ni.tr obenzenazo-44- [ l4- (N-p-toluensulf ony 1-L-alanyloxy Jnaf talen ] změna barvy, z oranžové do červené
2-methoxy-4-nitrobenzenazo-44- [ Г- (N-p-toluensulfonyl-L-alanyloxy)-54-(3“,6“-dioxaheptyloxy) naftalen ] změna barvy: ze světle oranžové do červené
Příklad4
Filtrační papír (například Schleicher + + Schull 23 SL) se postupně impregnuje následujícími roztoky a potom se vysuší při teplotě 60 °C.
Roztok 1 tris- (hydroxymethyl) aminomethan 0,61 g, voda, destilovaná asi 30 ml, lauryl-pyridiniumchlorid 0,2 g, roztok se upraví přidáním O,1N roztoku kyseliny chlorovodíkové na pH 7,0 voda, destilovaná, do 100 ml.
Roztok 2 thiazol-2-azo-4‘-[l‘-(N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy )naftalen] 46,1 mg, aceton, do 100 ml.
Získá se růžově zbarvený testovací papír, který se při ponoření do moči obsahující leukocyty zbarví zřetelné fialově. Přitom se dosáhne oproti receptuře z přikladli 2 asi na jednu polovinu zkrácených reakčních dob.
Také s jinými substráty, uvedenými v příkladech 1, 2 a 3 se za použití smáčedel, jako například shora zmíněného laurylpyridiniumchloridu, nebo také například benzyltrimethylamomumchloridu nebo N-palmltyl-N-methyl-benzimidazoliumchloridu, získají testovací papíry, které umožňují ve srovnání s analogickými testovacími papíry bez smáčedla zkrátit reakční dobu asi na jednu polovinu.
Příklad 5
Filtrační papír (například Schleicher +
4- Schull 23 SL) se postupně impregnuje následujícími roztoky a potom se vysuší při 60 °C.
Roztok 1 tris- (hydroxymethyl) aminomethan 0,61 g, voda, destilovaná asi 30 ml, roztok se přidáním 0,lN roztoku kyseliny chlorovodíkové upraví na pH 7,0, voda, destilovaná, do 100 ml.
Roztok 2 thmzol-2-azo-l‘- [ 2‘- (N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxv Jnaftalen] 46,1mg, dihydrát octanu zinečnatého 21,9mg, aceton, do 100ml.
Získá se slabě růžově zbarvený testovací papír, který se při ponoření do moči s obsahem leukocytů zbarví zřetelně do modro-fialova. Ve srovnání s recepturou uvedenou v příkladu 3 se reakční doby zkrátí asi na jednu polovinu, dále se zlepší citlivost testu na asi 1000 leukocytů/μΐ.
Také s jinými substráty z příkladu 1 se za použití solí kovů, jako například shora zmíněného octanu zinečnatého nebo také například za použití chloridu měďnatého nebo chloridu železitého, získají testovací papíry, které ve srovnání s analogickými testovacími papíry bez solí kovů, skýtají možnost značně zkrácených reakčních dob a dále mají zlepšené meze důkazu asi o faktor 2—3.
Příklad β
Thiazol-2-azo-4‘-(l‘-acotoxynaf talen)
2,55 g (0,01 mol] 4-(2‘-thiazolylazo)-l-naftolu se zahřívá se 100 ml acetanhydridu, ke kterému byl přidán 1 ml pyridinu, 1 hodinu na teplotu 80 QC. Potom se oddestiluje nadbytečný acetanhydrid a vzniklá kyselina octová ve vakuu co možná nejvíce, ke zbytku po destilaci se přidá 50 ml methanolu a zahustí se co nejvíce к suchu. Zbytek s>e překrystaluje z 15 ml toluenu a skýtá 2,0 g (67 % teorie) thlazol-2-azo-4‘'•(.ť-acetoxynaítalenu), ve formě světlehnědých krystalů, t. t. 137 °C.
Reakcí příslušně substituovaných azobarviv s acetanhydridem se získají analogickým způsobem následující sloučeniny:
thiazol-2-azo-2‘- (l‘-ace<toxy-4‘-methoxybenzen) oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 111 až 113 °C thiazol-2-azo-l4- (2<,4'-di.acetoxy benzen ] okrově zbarvené krystaly, teplota tání 101 °C thiazol-2-azo-r- (2‘-acetoxynaf talen) tmavý, amorfní prášek chromatografie na tenké vrstvě: hotové desky ze silikagelu rozpouštědlový systém: směs n-butanolu, ledové kyseliny octové a vody 2:1:1 detekce: UV, vlastní zbarvení hodnota Rf = 0,50 thiazol-2-azo-2‘- (l‘-acetoxynaf talen) hnědé krystaly, teplota tání 122 °C pyridin-2-azo-l‘- (2‘-acetoxynaftalen) tmavý, amorfní prášek chromatografie na tenké vrstvě: hotové silikagelové desky rozpouštědlový syistém: směs n-butanolu, ledové kyseliny octové a vody 2:1:1 detekce: UV, vlastní zbarvení hodnota Rf: 0,72
4-nitrobenzenazo-4‘-(l‘-aceto<xynaf· talen) nahnědlé krystaly, teplota tání 160 až 162 °C
2,4~diniitx obenzenazo-4*-(U-acetoxybenzen) červenohnědé krystaly, teplota tání 132 °C
2,4-dini'tr{jbenzenazo-4‘-( Γ-acetoxynaftalen) okrově zbarvené krystaly, teplota tání 173 °C
2-теИ1оху-4-пЦгоЬепгепаго-4‘- (Γ-acetoxybenzenj oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 135 QC
220733
2-methoxy-4-ni'trobenzenazo-4‘- (Γ-acetoxynaftalen) oranžově zbarvené krystaly, teplota .tání 174 až 178 °C
Příklad 7
Pyridin-2-azo-l‘- (2‘-benzoyloxynaftalen ] й,50 g (0>01 mol) l-(2‘-ppridylazo)-2-naftolu se rozpustí v 50 ml absolutního pyridinu, přidá se 5,5 ml (0,05 ml) benzoylchloridu a směs se míchá 1 hodinu při 70 °C za vyloučeni vody. Potom se reakční směs ochladí na teplotu místnosti, přidají se 3 ml methanolu a směs se defiluje ve vakuu k suchu. Zbytek se překrystaluje ze 100 ml methanolu. Získá se 2,54 .g (72 % teorie) pyridín-2-azo-l‘- (2‘-benzoytoxynaftalenu červené krystaly, teplota tání 153 °C.
Analogickým způsobem vzniká reakcí 2,4-dini‘trobenzenazo-ž‘-[ l‘-hydroxr-3‘,6‘-di (natriumsulíonatojnaftalenu] s benzoylcliloridem
2,4-dmierobenaenazo-2‘- [ l‘-benzoyloxy-3‘,6‘-di (natr iumsulf onato) naftalen ], světle hnědé krystaly, teplota tání nad 250 stupňů Celsia chromatografie na 'tento vrstvě hotové silikagelové desky rozpouštědlový systém: směs isopropanolu, butylesteru kyseliny octové a vody 5:3:2, detekce: UV, vlastní zbarvení hodnota Rf: 0,43
Příklad 8
Thiazol-2-azo-[ 2‘- (N-benzyloxrkarbo4yl-L-alanyloxy) naftalen ]
Roztok 1
Za. účelem výroby chloridu kyseliny jednostupňovou metodou se 6,70 g (0,03 mol) N-benzyoloxykarbonyl-L-alanmu, rozpustí v 50 ml absolutního dimethylformamldu a roztok se ochladí na —30 °C. Potom se za míchání a chlazení pomocí .pipety přidá 2,4 ml (0,033 mol) thionylchloridu ' a reakční směs se ponechá za v^oumn vody v chlaffld lázni při teplotě —30 °C.
Roztok 2
3,83 g (0,015 mol) l-(2‘-thiazolylaeo)-2-naftolu se roz^stí v 75 п1 absolutrnho dimethrlíormami2u a roztok se ochladí na —30 °C.
Reakce
Roztok 2 se vylije do roztoku 1, přidá se 4,8 ml (0,034 mol) tr^ethyl^aminu jako činidla, které váže kyselinu, a směs se bez chlazení míchá 6 hodin, přičemž se teplota nechá 'během 1,5 hodiny vystoupit na 20 stupňů Celsia.
Potom se reakční roztok opět ochladí na —30 °C a přidá se 'stejné množství čerstvě v^oben^o chloridu ky<seliny (roztok 1^ jakož i 4,8 ml triethylaminu. Teplota se nechá během 1,5 hodiny vystoupit opět na 20 stupňů Celsia a potom reakční směs reaguje 18 hodin při .teplotě místnosti až do konce. Reakce se účelně 'sleduje chromatograficky a provádí se přidávání nadbytečného chloridu kyseliny 'a odpovídajícím způsobem triethylaminu.
Za účelem zpracování .se reakční směs odpan ve vakuu k .suchu (pn nejvyšší teplotě tážně 50 °C). Zbytek se vyjme 100 ml ethylacetátu a postupně se tento extrakt promývá 30 ml 1N roztoto citrónové kyseliny, 20 ml vody, 50 ml 5 až 10% roztoto kysetého uhličitanu sodného a dvatoát 25 ml vody. Ethylacetátová fáze se po vysušení síranem sodným zahustí ve vakuu. Zbytek se chromatografuje na sloupci sllkagelu za použití směsi 'toluenu a 'dioxanu (9 : 1) a tím se čistí.
po oddestilová4i směsi rozpouěětol ve vakuu .a . po rozmíchání zbytku s ethylacetátem se záská 4,9 g (70,5 %) thiazol^-azo-1‘- [ 2‘- (К-Ьепг^охукагЬопуЬЬ-а^п^оху) - , naftalenu], žluté krystaly, 'teplota tání 162 stupňů Celsia.
Analogickým způsobem se .z příslušně substituovaných .azobarviv a aminokyselin, popřípadě peptidů chráněných na atomu dusíku, získají následující sloučeniny: thiazol-2-azo-2‘- [ l‘-( N-benzyloxykar.bonyl -L-alanyloxy) -4‘-methoxyb^enzen ] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 148 až 150 °C thiazol-2-aeo-4‘-[Γ,3‘-2i-(N-be4erloxykarbonyl-L-alanyloxy) benzen ] žluto-oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 133 až 135 °C thiaeol-2-azo-2‘-[Γ-(N-benerloxrkarιbo4yl-L-alanyloxy) naftalen ] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 174 až 175 °C thiazol-2-aeo-4‘- [l‘-(N-benzrloxrkarbonrl-L-alanyloxy) naftalen ] oranžově zbarvené krystaly. teplot:a torá I32 stupňů Celsia thiazol-íi-azo^1- [ 8‘- (N-benzyloxytorbony1-L-alanyloxy) chinolin ] žluté krystaly, teplota tání 134 °C thiazol^-azo-r- [ 2‘- (N-benzyloxrkarbo4rl-L-ala-nyloxy) ^‘-natriumsulf onatonaf talen ]-dihydrát oranžově zbarvený prášek chromatografie na tenké vrstvě: hotově destičky silikagelu
220733 rozpouštědlový systém: směs isopropanolu, butylesteru octové kyseliny a vody 5:3:2 detekce: UV, vlastní zbarvení hodnota Rf: 0,49 thiazol-2-azo-4‘-[l‘-iN-benzyloxykarbonyl-L-alany loxy] -5‘-methoxynaf talen J or-anížově zbarvené krystaly, teplota tání 127 stupňů Celsia thiazol-2-azo-4‘- [ 1‘- (N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy )-5l-(3“,6“-dioxaheptyloxy ]naftal-en] červenohnědý, amorfní prášek chromatografie na tenké -vrstvě: hotové silikagel o-vé desky rozpouštědlový systém: směs chloroformu a methanolu 50 : 1 detekce: UV, vlastní zbarvení hodnota Rř: 0,41
5-bromthiazol-2~azo-l‘-[2‘-(N-benzyloxykarbonyl-L -alanyloxy) naf talen ] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 192 stupňů Celsia
5- bromthiazol-2-azo-4‘-[l‘-[N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) naf talen ] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 162 stupňů Celsia benzothiazol-2-azo-lí-[2‘-(N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) naftalen ] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 190 stupňů Celsia benzothiazol-2-azo-2‘- [ Г- (N-benzyloxykarbony 1-L-alany loxy) naftalen ] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 148 až 150 °C benzothiazol-2-azo-4‘- [ 1‘- (N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy] naftalen ] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 180 až 182 °C
6- methoxybenzothiazol-2-azo-2‘- [ Г- (N-benzyloxykarbonyl-L-alany loxy] naftalen ] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 148 až 150 °C
6-me.thoxybenzothiazol-2-azo-4‘-[ Г-(N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) naftalen ] žluto-orahžově zbarvené krystaly, teplota tání 194 až 196 °C pyridin-2-azo-4‘-[ r,3‘-di-(N-benzyloxykarbonyl-L-alany loxy] benzen ] nahnědlý, amorfní prášek chromatografie na tenké vrstvě: hotové silikagelové desky rozpouštedlový «systém: směs toluenu a dioxanu 5 : 1 v atmosféře ledové kyseliny octové detekce: UV, směs octanu měďnatého a amoniaku hodnota Rf: 0,34 pyridin-2-azo-.ť- [ 2‘- (N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) naftalen ] nahnědlé krystaly, teplota tání 117 °C
4-natriumsulf onatobenzenazo-4‘-[ Г-(N-benzyloxykarbony 1-L-alanyloxy) naftalen ] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 264 stupňů Celsia
4-nitrobenzenazo-4‘- [ 1‘- (N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy] naftalen ] červeno-hnědé krystaly, teplota tání 145 °C
2.4- dimtrobenzenazo-4‘-[l‘-(N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) benzen ] okrově zbarvené krystaly, teplota tání 110 «stupňů Celsia
2.4- dimtrobenzenazo-4‘- [ Г- jNbenzyloxykarbony 1-L-alanyloxy) naftalen ] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 154 stupňů Celsia
2-methoxy-4-nitrobenzenazo-4í-[lí-[N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy)naftalen] červenohnědé krystaly, teplota tání 186 až 187 °C
2-methoxy-4-nitrobenzenazo-5‘- [ 8‘- (N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy] chinolin ] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 225 až 230 °C
2-methoxy-4-nitrobenzenazo-4‘-[l‘-[N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) -5‘-methoxynaftalen ] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 165 až 167 °C
2-methoxy-4-nitrobenzenazo-4‘- [ Г- [ N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) -5‘- (3“,6“-dioxaheptyloxy) naftalen] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 118 až 120 °C
4-methoxy-2-nitrobenzenazo-4‘-[i‘-(]\[-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) naftalen ] červenohnědé krystaly, teplota tání 140 °C
2.5- dimethoxy-4-nitr obenzenazo-4‘- [ Г- (N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) naftalen] oražově zbarvené krystaly, teplota tání 145' až 201 °C
2.5- dimethoxybenzenazo-4‘- [ Г- (N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) naftalen ] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 145 stupňů Celsia
2-methoxy-4-benzoylamino-5-methylbenzenazo-4‘-[iL(N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy) naftalen] červenohnědé krystaly, teplota tání 128 až 130 °C
2,5- dimethoxy-4-benzoylaminobenzenazo-4‘-
- [ 1‘- (N-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy )naftalen] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 141 až 143 °C 2,5- (hetooxyM-tjenzo^aminobenzenazo-4*-
- [ Г- (N-benzytoxykarbonyhL-alanyloxy) naftalen] červenohnědé krystaly, teplota tání 173 až 174 °C toiazo^-azo-r- [ 2‘- (N-benzyloxykarbonyl-L-f enylalanyloxy) naftalen ] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 169 stupňů Celsia 2-methoxy-4-mtrobenzenazo-4‘-[Γ-(Ν-1)βιιzyloxykarbonyl-L-f enylalanyloxy ] naftalen ] červenohnědé krystaly, teplota tání 205 až 207 °C thiazcl-2-azo-4‘-[r-(N-benzyloxykarbonyl-L-aiany 1-L-al anyloxy) naftalen ] oranžově zbarvené krystaly t. t, 175 °C thí.azol-2-az.o-4‘- [ Γ- (N-bcnzyloxykarbonyl-L-alanyl-L-alanyl-L-alanyloxy) naftalen] světle oranžově zbarvené krystaly, t. t. 201 stupňů Celsia
5- methylthiazol-2-azo-4‘- [ ^(N-tenzytexykarbonyl-L-alanyloxy ] naftalen ]
6- methylbenzoth'azol-2-azo-4‘-[Γ-(Ν-benzyloxykarbonyl-L-alanyloxy ] naftalen ]
2-methoxy-4-nitrobenzenazo-4‘- [ Г- (N-p-toluensulfonyl-L-alanyloxy ] naftalen ] ; načervenalý, amorfní prášek chromatografie na .tenké vrstvě: hotové silikagelové desky: rozpouštědlový systém: směs toluenu a dioxanu 6 : 1 detekce: UV, vlastní zbarvení hodnota Rf-: 0,38 2-methoxy-4-mtrobenzenazo-4‘- [ 1‘- (N-p-toluensul.fonyl-L-alanyloxy)-5‘-(3“,6“-dioxaheptyloxy ] naftalen ] oranžově zbarvené krystaly, teplota tání 61 až 63 °C.
Příklad 9
Thiazol-2-azo-r- [ 2‘- (N-ter c.butyloxykarbonyl-L-alanyloxy ] naftalen]
1,89 g (0,01 .mol) N-terc.butyloxykarbonyl-L-alaninu a l2,55 g (0,°1 mol] l-(2‘-thiazolylazo)-2-naftolu se při teplotě místnosti rozpustí v 50 ml absolutního pyridinu a k tomuto roztoku se přidá roztok 2,2 g (0,0107 mol) dicyklohexylkarbodiimidu ve 20 ml pyridinu. Za .vyloučení vody se reakční směs míchá asi 24 hodin pn teplotě místnost^ potom se přidá ještě jednou 1,89 g (0,01 mol) N-terc.butyloxykarbonyl-L-alaninu a 2,2 . g (0,0107 mol) dicyklohexylkarbodiimidu k reakčnímu roztoku a reakční směs se míchá dalších 24 hodrn ph teplotě mtetoosh.
Po krátké době .se v^učujmí N,N‘-dicyklohexylmočovina odfiltruje, rozpouštědlo se oddestiluje ve vakuu a zbytek se vyjme 100 ml ethy^ce-tátá. Dále se v^ueujM N,N‘dicykliohexylrnočovlna odfiltruje a čirý ethylacetátový roztok se postupně promyje vždy dvakrát 30 ml 1N roztoku citrónové ^sehny 20 ml vody, 50 ml 5 až roztoku kyselého. uhličitanu sodného a 25 ml vody. Po. vysušení síranem sodným se éthylacetátová fáze odpaří ve vakuu. Lepivý zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na sloupci silikagelu za použití směsi toluenu a dioxanu (9:1) jako elučního činidla. Takto se získá 2,65 g (62 % teorie) thiazol-2-azo--1-[2‘-(N-terc,butyloxykarbony--L-alanyloxy)naftalenu] ve formě oranžově zbarvených. krystalů teplotě tárn 142 až 144 stupňů Celsia.
Analogickým způsobem se z odpovídajících aminokytelin, phslusně substituovaných azobarviv .a dicyklohexylkarbodiimidu získají náslectejfcí sloučeniny:
thiazol-2-azo-l‘- [ 2‘- (N-benzyloxykarbonylglycyloxy) naftalen ] '
Oranžově zbarvené krystaly, t. t. 166 °C 2-me thoxy-4-rii.tr obenzenazo-4‘- [ Г- (Něenzyloxykarbony lglycyloxy) naftalen ]
Claims (2)
1. Diagnostický prostředek k důkazu leukocytů v tělních tekutinách při akutní leukocyturii sestávající ze savého nosiče impregnovaného chromogenem, pufrem s rozsahem pH do 6 do 10, a popřípadě smáčedlem a/nebo komplexotvorným činidlem, vyznačuji se .tím, že jako chromogen obsahuje ester azobarviva obecného vzorce 1
A—b--N-B(OR):; (1), v němž
A znamená pětičlenný nebo šestičlenný, popřípadě s benzenovým jádrem aneloivaný zbytek s jedním .až dvěma heteroatomy ze skupiny tvořené dusíkem, sírou a kyslíkem, který je popřípadě substituován halogenem, azylovou skupinou s 1 až 5 atomy uhhku a/nebo alkoxytkupinou s 1 až 5 atomy uhlíku, nebo. znamená jednou až třikrát alkyobecného vzorce I, v němž A, B, R a n mají významy uvedené shora podle bodu 1, vyznačující se tím, že ise nechají reagovat sloučeniny obecného vzorce II
A—N=N—B(OH)n (II), v němž
А, В a n mají význam uvedený shora, s kyselinami obecného vzorce III
HO-R (ΙΓΙ), lovou skupinou s 1 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupinou s 1 až 5 atomy uhlíku, nitroskupinou, sulfonatolskupinou a/nebo benzoylaminoskupinou substituovanou fenylovou skupinu,
В znamená popřípadě jednou až dvakrát sulfonatolskupinou, alkoxyskupinou s 1 až 5 atomy uhlíku a/nebo alkoxypolyethylenoxyskupinou s 1 až 5 atomy uhlíku v alkoxylové části substituovaný zbytek -benzenu, naftalenu nebo chinolinu,
R znamená zbytek alifatické karboxylové kyseliny s 1 až 5 atomy uhlíku, zbytek benzoové kyseliny nebo naftoové kyseliny nebo zbytek aminokyseliny nebo peptidu chráněný na terminálním' atomu dusíku a n znamená číslo 1 nebo 2.
2. Způsob výroby účinné složky diagnostického prostředku, tvořené estery azobarviv v němž
R má význam uvedený shora, popřípadě s jejich reaktivními deriváty.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19782836644 DE2836644A1 (de) | 1978-08-22 | 1978-08-22 | Diagnostisches mittel zum nachweis von leukozyten in koerperfluessigkeiten und dafuer geeignete chromogene |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS220793B2 true CS220793B2 (en) | 1983-04-29 |
Family
ID=6047622
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS795702A CS220793B2 (en) | 1978-08-22 | 1979-08-21 | Diagnostic means for evidence of leucosytes in the body liquids by acte leucosytury and method of making the active agent |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4296202A (cs) |
| EP (1) | EP0008428B1 (cs) |
| JP (1) | JPS5529590A (cs) |
| AT (1) | ATE10139T1 (cs) |
| CA (1) | CA1134351A (cs) |
| CS (1) | CS220793B2 (cs) |
| DE (2) | DE2836644A1 (cs) |
| HU (1) | HU179936B (cs) |
| YU (1) | YU206279A (cs) |
| ZA (1) | ZA794383B (cs) |
Families Citing this family (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2836644A1 (de) * | 1978-08-22 | 1980-03-06 | Boehringer Mannheim Gmbh | Diagnostisches mittel zum nachweis von leukozyten in koerperfluessigkeiten und dafuer geeignete chromogene |
| DE3017721A1 (de) * | 1980-05-09 | 1981-11-26 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Mittel zum nachweis esterolytischer und/oder proteolytischer enzyme und dafuer geeignete substrate |
| JPS6035117B2 (ja) * | 1980-10-28 | 1985-08-13 | 富士写真フイルム株式会社 | リパ−ゼ活性測定用試薬 |
| US4610961A (en) * | 1982-12-27 | 1986-09-09 | Eastman Kodak Company | Inhibition of reduction activities of leukocytes |
| DE3413118A1 (de) * | 1984-04-06 | 1985-10-24 | Miles Laboratories, Inc., Elkhart, Ind. | Analysenverfahren und mittel zum nachweis esterolytischer und/oder proteolytischer enzyme |
| DE3413078A1 (de) * | 1984-04-06 | 1985-10-24 | Miles Laboratories, Inc., Elkhart, Ind. | Chromogene aminosaeure- und peptidester, verfahren zu deren herstellung, verwendung dieser verbindungen in analysenverfahren sowie mittel zum nachweis esterolytischer und/oder proteolytischer enzyme |
| US4637979A (en) * | 1984-04-06 | 1987-01-20 | Miles Laboratories, Inc. | Composition and test device for determining the presence of leukocytes containing a zwitterion coupling agent |
| DE3413120A1 (de) * | 1984-04-06 | 1985-10-24 | Miles Laboratories, Inc., Elkhart, Ind. | Analysenverfahren und mittel zum nachweis esterolytischer und/oder proteolytischer enzyme |
| US5051358A (en) * | 1987-05-07 | 1991-09-24 | The Procter & Gamble Company | Diagnostic methods for detecting periodontal diseases |
| DE3732871A1 (de) * | 1987-09-30 | 1989-04-20 | Behringwerke Ag | Chromogene substrate |
| DE3814811A1 (de) * | 1988-05-02 | 1989-11-16 | Merck Patent Gmbh | Verfahren und mittel zur differenzierung und bestimmung von leukozyten |
| DE4406665A1 (de) * | 1994-03-01 | 1995-09-07 | Biosynth Ag | Enzymsubstrate mit 2-(2-Thiazolylazo)-p-kresol als chromogener Gruppe |
| US5464739A (en) * | 1994-08-22 | 1995-11-07 | Bayer Corporation | Composition method for determining the presence of leukocyte cells, esterase or protease in a test sample |
| US6348324B1 (en) | 1999-01-21 | 2002-02-19 | Hypoguard America Limited | Composition and device for detecting leukocytes in urine |
| US6528652B1 (en) * | 1999-01-21 | 2003-03-04 | Chronimed | Composition and device for detecting leukocytes in urine |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2170262A (en) * | 1935-08-17 | 1939-08-22 | Soc Of Chemical Ind | Derivatives of dyestuffs containing hydroxyl groups and process of making same |
| US2332666A (en) * | 1942-01-07 | 1943-10-26 | Pfizer Charles & Co | Acetylated sugar compound |
| US2870137A (en) * | 1956-04-27 | 1959-01-20 | Sandoz Ag | Water-insoluble monoazo dyestuffs |
| US3068072A (en) * | 1960-04-08 | 1962-12-11 | Mary M Demek | Hydroxamic acid catalyzed hydrolysis |
| US3190876A (en) * | 1962-04-19 | 1965-06-22 | Nat Starch Chem Corp | Ethylenically unsaturated azobenzene derivatives |
| DE1619408A1 (de) * | 1965-11-12 | 1972-03-16 | Sandoz Ag | Verfahren zum Faerben und Bedrucken von Gebilden aus metallmodifizierten Polymeren ungesaettigter Kohlenwasserstoffe |
| CH505877A (de) * | 1966-12-27 | 1971-04-15 | Ciba Geigy Ag | Verfahren zur Herstellung von neuen wasserunlöslichen Azofarbstoffen |
| US3840517A (en) * | 1968-12-16 | 1974-10-08 | Eastman Kodak Co | Phenylazo-n-heterothioalkylaniline compounds |
| BE758449A (fr) * | 1970-03-28 | 1971-04-16 | Merck Patent Gmbh | Substances nematiques |
| BE786306A (fr) * | 1971-07-15 | 1973-01-15 | Ciba Geigy | Procede de teinture et d'impression de matieres en polyester |
| US3822246A (en) * | 1972-05-15 | 1974-07-02 | Eastman Kodak Co | Azo compounds containing an imidoalkanoylamino group |
| DE2836644A1 (de) * | 1978-08-22 | 1980-03-06 | Boehringer Mannheim Gmbh | Diagnostisches mittel zum nachweis von leukozyten in koerperfluessigkeiten und dafuer geeignete chromogene |
| US4225669A (en) * | 1979-04-27 | 1980-09-30 | Melnick Joseph L | Staining and analysis of bacteria |
-
1978
- 1978-08-22 DE DE19782836644 patent/DE2836644A1/de not_active Withdrawn
-
1979
- 1979-08-02 US US06/063,211 patent/US4296202A/en not_active Expired - Lifetime
- 1979-08-11 AT AT79102920T patent/ATE10139T1/de not_active IP Right Cessation
- 1979-08-11 DE DE7979102920T patent/DE2967283D1/de not_active Expired
- 1979-08-11 EP EP79102920A patent/EP0008428B1/de not_active Expired
- 1979-08-15 CA CA000333810A patent/CA1134351A/en not_active Expired
- 1979-08-20 JP JP10510579A patent/JPS5529590A/ja active Granted
- 1979-08-20 ZA ZA00794383A patent/ZA794383B/xx unknown
- 1979-08-21 HU HU79BO1801A patent/HU179936B/hu unknown
- 1979-08-21 CS CS795702A patent/CS220793B2/cs unknown
- 1979-08-22 YU YU02062/79A patent/YU206279A/xx unknown
-
1981
- 1981-06-08 US US06/271,342 patent/US4442033A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ZA794383B (en) | 1980-09-24 |
| EP0008428A3 (en) | 1981-04-15 |
| JPS5529590A (en) | 1980-03-01 |
| US4296202A (en) | 1981-10-20 |
| US4442033A (en) | 1984-04-10 |
| ATE10139T1 (de) | 1984-11-15 |
| YU206279A (en) | 1983-04-30 |
| DE2967283D1 (en) | 1984-12-06 |
| EP0008428A2 (de) | 1980-03-05 |
| DE2836644A1 (de) | 1980-03-06 |
| HU179936B (en) | 1983-01-28 |
| EP0008428B1 (de) | 1984-10-31 |
| CA1134351A (en) | 1982-10-26 |
| JPS6142749B2 (cs) | 1986-09-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CS220793B2 (en) | Diagnostic means for evidence of leucosytes in the body liquids by acte leucosytury and method of making the active agent | |
| CA1154781A (en) | Aminoantipyrine compounds and the use thereof | |
| US7875261B2 (en) | Fluorinated resorufin compounds and their application | |
| FI77692B (fi) | Medel foer paovisning av esterolytiska och/eller proteolytiska enzymer och anvaendningen av detta. | |
| US7972789B2 (en) | Dye compounds | |
| CS273617B2 (en) | Method of resorufine's derivatives production | |
| DD147845A5 (de) | Diagnostisches mittel zum nachweis proteolytischer enzyme und dafuer geeignete chromogene | |
| WO2007055364A1 (ja) | パーオキシナイトライト蛍光プローブ | |
| JPS58134097A (ja) | カリウム試薬およびカリウムイオンの分析方法 | |
| US6828159B1 (en) | Carbopyronine fluorescent dyes | |
| JPS62215400A (ja) | 色原体アミノ酸エステル及びペプチドエステルを用いたエステル分解及び／又は蛋白分解酵素の検出試薬 | |
| US4331760A (en) | Diagnostic agent for the detection of leukocytes and chromogens useful therein | |
| CN114315783B (zh) | 生色过氧化物酶底物 | |
| EP0158225A2 (de) | Analysenverfahren und Mittel zum Nachweis esterolytischer und/oder proteolytischer Enzyme | |
| EP0152274B1 (en) | Method for the determination of leucine aminopeptidase (lap) | |
| JPH04305593A (ja) | Ｎ−およびｏ−置換アミノフェノール誘導体、その製造用中間体およびその使用 | |
| KR890004092B1 (ko) | 과산화수소, 과산화염-작용화합물 및 과산화효소의 결정을 위한 방법 및 시약조성물 | |
| KR101877003B1 (ko) | 마그네슘 이온 검출용 bapta 유도체 및 이의 용도 | |
| SI8311124A8 (sl) | Sredstvo in postopek za dokaz ekterolitskih in/ali proteolitskih encimov | |
| JPS6281371A (ja) | 新規アクリジン誘導体 | |
| JPS6265A (ja) | 新規なアクリジン誘導体 |