JPS6265A - 新規なアクリジン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、ヒト染色体の分集用染色剤等として有用な新
規なアクリジン誘導体に関する。

〔発明の背景〕

近年、ヒトの染色体研究に、染色体分乗法という手法が
広くとり入れられてきている。この方法は、様々な前処
理の後に特殊な染料や蛍光色素を用いて染色体上ｌ；縞
（バンド）を染め出し、その分布と濃淡の関係が染色体
ごとに一定している事実を用いて、染色体の同定や染色
体の異常の検出を行なうもので、先天異常、遺伝病、悪
性腫瘍などに関する基礎及び応用の両面の研究の発展に
大いに寄与している・ 染色体の分乗法は、１８４８年５ｃｈｕｌｆｚ　＆　Ｌ
ａｕｒｅｎｃｅによるヒト成熟分裂前期の大系期染色体
の横縞ようの構造に始まるが、１９７０年Ｃａｇｐｅｒ
ｓｓｏｎ等がヒトの末梢血液培養中のリンパ球の有糸分
裂中期染色体標品をキナタリンマスタードで染色し、蛍
光顕微鏡下に観察すると、Ｙ染色体長腕の先端が特に強
い蛍光を発し、分裂間期の核でもよく光る小体として認
められることを見出し、この小体がＹクロマチン或はＹ
　ｂｏｄｙと呼ばれ、従来の不活性化Ｘ染色体に由来す
る性染色質（Ｂａｒｒ　ｂｏｄｙ）と共に性識別に利用
できることを示したことにより新たな展開を迎えた。即
ち、この方法は何の前処理も必要とせず、普通の方法で
作製した標本で、確実に、明瞭な横縞を染め分ける画期
的な技術で、後日Ｑ染色法と名づけられ、１９ｎ年以降
急速に発達したギムザ分染法（Ｇ染色法）と並び染色体
の精密な分析法に革命的な進歩をもたらした。その後、
更に研究が進み、最近では上記Ｑ染色法やＧ染色法など
の一般的な分乗法のほかに、更に新しい、いわば第２１
１！！：代の分乗法である高精度分染法も普及しつつあ
り、特異性のある、新しい、より効果的な染色剤が求め
られている現状にある。

〔発明の目的〕

本発明は、上記した如きヒト染色体分集用の染色剤等と
しての用途が期待できる。新規なアクリジン誘導体を提
供することを目的とする。

〔発明の構成〕

本発明は、 で示される、ビス（９°−アクリジル）−１，４−フェ
ニルジヒドラゾンの発明である。

本発明のアクリジン誘導体は、文献未知の新規化合物で
ある。

本発明のアクリジン誘導体は、例えば下記の如くして容
易に合成し得み。

即ち、例えば、９−ヒドラジノアクリジンと、これに対
して０．５〜０．７５倍モルのパラフタルアルデヒドと
を、例えばメタノール、エタノール、アセトン、ジオキ
サン、ジメチルホルムアミド　（ＤＭＦ）等の親水性溶
媒中で１通常５０〜８０℃で数十分乃至数時間撹拌反応
させれば目的物の結晶が析出沈澱するので、常法により
、これをか取、洗浄、乾燥し、要すれば適当な溶媒で再
結晶することにより、本発明の新規化合物ビス（９°−
７クリジル）−１，４−フェニルジヒドラゾンの赤橙色
結晶が容易に得られる０本発明新規化合物の再結晶溶媒
としては、通常、メタノール、エタノール、ジオキサン
、ＤＭＦ等の有機溶媒又はこれらの任意の割合の混合溶
媒、又はこれらに更に水を加えた混合溶媒等が用いられ
るが、また、氷酢酸等も再結溶媒として用い得る。

また、原料として用いられる９−ヒドラジノアクリジン
は、例えばＯｒｇ、　Ｓｙｎ、　Ｃａ１１．、　Ｖｏｌ
、ｍｐ、５３　（１９５５）に記載の方法に従って、先
ずＮ−フェニルアントラニル酸とオキシ塩化リンとを加
熱反応させることにより９−クロルアクリジンを得、次
いでこれを例えばＪ、　Ｃｈｅｗ、　Ｓｏｃ、、　１９
８５゜４６５６に記載の方法に従って、アルコール溶媒
中。

抱水ヒドラジンと加熱反応させることにより容易に得る
ことができるので、そのようにして得られたものを使用
することで足りる。

本発明の新規化合物は、大気中に於て極めて安定であり
、水には不溶であるが、メタノール、エタノール、ジオ
キサン、ＤＭＦ、クロロホルム、四塩化炭素等の有機溶
媒や氷酢酸には可溶で、酢酸中では黄色に、また、その
他の有機溶媒中では赤橙色に呈色する。

本発明の新規化合物は、ｐＨの違いにより２つの化学種
が存在する。即ち、ＰＨ３，５以下ではアクリジン環の
窒素にプロトンが付加した式［Ａ］　で示される構造の
化合物として存在し、その極大吸収波長は５０８．４７
５．２７４　ｎｍであり、また、ｐＨ８，５以上では式
［Ｂ１で示される構造の化合物として存在し、その極大
吸収波長は４８０　ｎｍである。

本発明の新規化合物は、例えばヒト染色体の分集用染色
剤として用いた場合＜Ｒ−ｍ色決による）には、特定部
位例えば従来の染色方法では識別が困難な０群Ｎ００９
の染色体の動原体に親和性を有し、その付近に強い蛍光
を発する。従って、本発明化合物の使用により、特定染
色体の識別即ち、位置の確認及び判定が可能となり、各
種の疾病や異常症の発見、解明に寄与するところが大き
い。

以下に実施例及び参考例を挙げて本発明を更に詳細に説
明するが、本発明はこれら参考例、実施例により何ら限
定されるものではない。

〔実施例〕

参考例６９−ヒドラジノアクリジンの合成（１）９−ク
ロルアクリジンの合成 Ｎ−７，ニルアントラニル醜１０．７ｇ　（０，０５ｓ
ｏｌ）とオキシ塩化リン５８．３ｇ　（０，３８塵ｏ１
）とを混合し、撹拌下、徐々に加熱して内温８５〜９０
℃とした０反応開始を確認後直ちに加熱を止め、反応が
穏かになるまで空冷下で反応させた０次いで、再度加熱
し、　１３５〜１４０°Ｃで２時間反応させた後、過剰
のオキシ塩化リンを減圧下留去し、残渣を４０１のアン
モニア水を含む氷水２５０１中に注入した。クロロホル
ムで抽出、クロロホルム層を水洗、脱水乾燥後濃縮して
、粗９−クロルアクリジンの灰緑色結晶１０．５　ｇを
得た（収率９８．３％）。ｍ、ｐ、　１１８〜１１７℃
。

（２）９−ヒドラジノアクリジンの合成（１）で得た９
−クロルアクリジン　ＩＱｇ　（０，０４７ｍａｌ）の
エタノール溶液　１００１を、抱水ヒドラジン　５０ｍ
１とエタノール１００１からなる溶液中に還流下請下し
、滴下後１時間還流反応させた０反応後、水２文中に反
応液を注入し、クロロホルムで抽出した。クロロホルム
層を水洗、脱水乾燥後、溶媒を留去し、赤橙色の粗品　
９ｇを得た。これをベンゼンで再結晶し、９−ヒドラジ
ノアクリジンの微黄色針状晶　７．８ｇを得た（収率７
９．３％）。

ｍ、ｐ、　１７０〜１７２℃。

実施例、ビス（９′−アクリジル）−１，４−フェニル
ジヒドラゾンの合成 ９−ヒドラジノアクリジン　２．１ｇ　（０，０１ｓｏ
ｌ）をメタノール　１００腸ｌに溶解し、撹拌下これに
パラフタルアルデヒド　０．８ｇ　（０，００８ｍｏｌ
）を溶解したメタノール溶液　５０１を５０〜６０℃で
滴下し、滴下後、同温度で２時間撹拌反応を行なった。

析出した結晶を枦取し、少量のメタノールで洗浄後、氷
酢酸で再結晶して、赤橙色のビス（９′−アクリジル）
−１，４−フェニルジヒドラゾンの粉末品　１．８ｇを
得た（収率８９．７％）　、　ｍ、ｐ、　２８８〜２８
７℃。

元素分析値　Ｃ３４Ｈ２４ＮＢとして 計算値（＄）　　：　　Ｈ４，８８，Ｃ７９，０５，Ｎ
　　ｉｏ、２ｉ実測値（＄）　：　　Ｈ４，７１，０７
Ｂ、９５．　Ｎ　　１Ｂ、２２Ｉ　Ｒ（ＫＢｒ）：　　
３４００　　（Ｃ−ＮＨ）、１Ｂ’＋０．１８２０゜１
８００　ｃｍ−１゜ 酸解離定数［５０Ｖ／Ｖ％ジオキサン、イオン強度０．
１　（ＮａＣ１０４）、液温　２５±０．１　”Ｃ］　
：　ｐＫａ１＝４．８５±０．０２゜ 極大吸収波長及び分子吸光係数（ε）：ｐＨ３，５以下
では　５０６　ｎｍ　（ε＝　　１．ＯＸＩＯ”）４７
５　ｎｍ　（ε＝　７．４８　ＸＩＯ’）２７４　ｎｍ
　（ε＝　　１．０３　ＸＩＯ”’）ｐＨ８，５以上で
は　４８０　ｎｍ　（ε＝　５．８７　ｘｔｏ’）蛍光
極大波長： ｐＨ３，５以下では　５８２．３　ｎｍｐＨ８，５以上
では　５４７　ｎｍ 〔発明の効果〕 以上述べた如く１本発明は、ヒト染色体の分集用染色剤
等として有用な新規なアクリジン誘導体を提供するもの
であり、例えば本発明のアクリジン誘導体を用いた分集
法に於ては、従来の染色方法では識別が困難な特定部位
即ち、０群Ｎ０８９の染色体の識別及び位置判定が可能
となる等の点に顕著な効果を奏するものであって、斯業
に貢献するところ甚だ大なる発明である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 式▲数式、化学式、表等があります▼ で示される、ビス（９′−アクリジル）−１，４−フェ
   ニルジヒドラゾン。