CS219654B1 - Sposob stanoveniia dl-a-tokoferylacetátu a dl-a-tokoferolu kvapalinovou chromatografiou - Google Patents

Description

3 219654

Vynález sa týká spósobu stanovenia dl-a-toko- koferolu [-6-hydroxy-2,5,7,8-tetrametyl-2- ferylacetátu el-6-acetoxy-2,5, 7,8-tetrametyl-2- (4’,8’,12’-trimetyltridecyl)chromanu] obecnéhq

(4’,8’,12’-trimetyltridecyl)chromanu a dl-a-to- vzorca I

CH3 CH2 / 3

(CH2)-CH-(CH2)3-CH-(CH2)3-CÍL ti) v ktorom R značí skupinu-COCH3 alebo vodík,v technických alebo přečištěných produktoch ichvýroby alebo vo farmaceutických prípravkoch me-todou kvapalinovej chromatografie. DL-a-tokoferylacetát možno stanovit’ po pred-chádzajúcej niekorkohodinovej hydrolýze titrá-ciou síranom ceričitým (ČsL 3, str. 1183; Deuts-ches Arzneibuch 7, str. 953; Pharmacopoea Helve-tica 6, str. 1451) alebo priamo fotometrickymeraním intenzity sfarbenia komplexu vytvořené-ho z dl-a-tokoferylacetátu, hdydroxylamínua chloridu železitého (Drjanowska a sp. Pharmazie29, 59, 1974). DL-a-tokoferol možno stanovit’kolorimetricky reakciou s iónmi železitými (Em-merie, Engel, Rec.Trav.Chim. 57, 1351, 1938) alebo spektrofotometricky meraním extinkciev maximě absorpčného pásu pri 285 nm (Machek,Sci.Pharm. 34, 122, 1966). Spoločnou nevýhodouvšetkých týchto stanovení je malá selektivita,stanovenie rušia vedfajšie a rozkladné produkty,stanovovaných látok. Selektívne a dostatočne pře-sné sú stanovenia založené na chromatografických , metodách. Opísané je stanovenie pomocou kvapa-linovej chromatografie na náplniach so zakotvenouobrátenou fázou typu oktade.cylsilánu izokratickouelúciou vyhodnotením metodou externého štan-dardu (Eriksson, Sórensen Acta Pharm. Suec. 14, |475, 1977), alebo komplikovanou gradientovou i ' elúciou s použitím cholesterylbqnzoátu ako vnú-torného standardu (Barnett a sp. Anal.Chem. 52,610, 1980). Pre stanovenie izomérov tokoferolua tokoferylacetátu vo vzorkách biologického póvo- idu je používaná adsorpčná chromatografia na ;kysličníku kremičitom (Matsuo, Tahara, Chem.P- íharm.Bull. 25, 3381, 1977). Tieto postupy sú izamerané na sledovanie obsahu dl-a-tokoferylace-tátu vo farmaceutických prípravkoch a vo vzorkách f biologického póvodu, neriešia však stanoveniev technických vzorkách z výroby vitamínu E, kdeokrem dl-a-tokoferolu resp. dl-a-tokoferylacetátu ,sa nachádzajú rozkladné a vedfajšie produkty ichsyntézy. Dalšou nevýhodou známých postupov je,že sú vypracované na nákladných separačnýchkolonách. ;

Uvedené nedostatky sa podařilo odstrániť vypra- jcovaním spósobu stanovenia dl-a-tokoferylacetátua dl-a-tokoferolu kvapalinovou chromatografioutým spósobom, že vzorka rozpuštěná v organickomrozpúšťadle, s výhodou v metanole sa zriedi rozto- íkom vnútorného štandardu naftalénu v metanole, ' připravený roztok sa dávkuje do kolony naplněněj silikagelom pokrytým oktadecylsilánovými skupi-nami pričom časť povodně přítomných silanolo-vých skupin je blokovaná metylovými skupinami,alebo makroporéznym nepolárným organickýmsorbentom připraveným kopolymeráciou 2-hydro-xymetylmetakrylátu s etyléndimetakrylátom mo-difikovaným stearoyláciou, jednotlivé látky saeluujú zmesou metanolu s octanom etylnatýmv objemovom pomere 95 : 5 až 100 : 0.

Bližšie podrobnosti spósobu stanovenia pódiavynálezu sú zřejmé z uvedených príkladov. Přikladl:

Stanovenie dl-a-tokoferylacetátu v destilova-nom produkte 0,150 g vzorky sa rozpustí v 5 ml etylacetátu, přidása 1 ml roztoku vnútorného štandardu obsahujúce-ho 0,0085 g naftalénu v metanole a objem sadoplní do 25 ml metanolom. Z tohoto roztoku sadávkuje 10 μΐ do chromatografu.

Podmienky stanovenia: kolona dlžky 250 mm,prierezu 4 mm, naplněná sférickým sorbentomtvořeným silikagelom pokrytým oktadecylovýmiskupinami pričom časť povodně přítomných silano-lových skupin je blokovaná metylovými skupinami(Separon Si C—18) s priemernou vefkosťou častíc 10 μηι; mobilná fáza zloženia metanol — etylacetát97 : 3, prietok 1 cm3.min-1, teplota 35 °C. Nadetekciu sa použije detektor s měnitelnou vlnovoudížkou, nastavený na 285 nm. Koncentrácia stano-vované j látky sa vypočítá podlá vžťahu: o/ . Nš. RF. Pn . 100 : % stanovovanej látky =-—— - kde Νς značí navážku vnútorného štandarduNn značí navážku vzorky RF značí responzný faktor stanovovanej látkyPn značí plošný ekvivalent stanovovanej látkyi P- značí plošný ekvivalent vnútorného štan- dardu Příklad 2:

Stanovenie DL-a-tokoferolu v surovom pro-: dukte / i 0,200 g vzorky sa rozpustí v 5 ml etylacetátu, přidá ;isal ml roztoku vnútorného štandardu obsahujúce-jho 0,0085 g naftalénu v metanole a objem sadoplní do 25 ml metanolom. Z tohoto roztoku sa idávkuje 10 μΐ do chromatografu.

Claims (2)

1. 4 Podmienky stanovenia: kolona dížky 250 mm,prierezu 8 mm, naplněná sorbentom připravenýmkopolymeráciou 2-hydroxymetylmetakrylátu etyl-éndimetakrylátom modifikovaným stearoyláciou(Separon 40 S) s priemernou velkostou častíc10 μιη; elúcia metanollm, prietok 3 cm .min“1,teplota 30 °C. Koncentrácia stanovovanej látky savypočítá podlá vztahu uvedeného v příklade 1. Příklad 3: Stanovenie dl-a-tokoferylacetátu nanesenéhona Siloxide 21965- 1,000 g vzorky sa pretrepáva 4-krát po 5 mzmesou etanol-cyklohexán (1 : 1 objemové), odstředí sa, supernatant sa prenesie do odmernebanky objemu 25 ml, přidá sa 1 ml vnútornéh<standardu obsahujúceho 0,0085 g naftalénu v metanole a objem sa doplní metylalkoholom p<značku. Z tohoto roztoku sa dávkuje 10 μΐ d<chromatografu. Podmienky stanovenia sú róvnakako v příklade 1. · PREDMET i » · ' .......

   1. Spósob stanovenia dl-a-tokoferylacetátua dl-a-tokoferolu kvapalinovou chromatografiouobecného vzorca I VYNÁLEZU

   v ktorom R značí skupinu -COCH3 alebo vodík,v technických alebo přečištěných produktoch ichvýroby alebo vo farmaceutických prípravkoch kva-palinovou chromatografiou vyznačujúci sa tým, ževzorka rozpuštěná v organickom rozpúšťadle, s vý-hodou v metanole, sa zriedi roztokom vnútornéhoStandardu naftalénu v metanole, připravený roztoksa dávkuje do kolony naplněněj silikagelom pokry-tým oktadecylsilánovými skupinami pričom časťpovodně přítomných silanolových skupin je bloko- vaná metylovými skupinami a jednotlivé látky síeluujú zmesou metanolu s octanom etylnatýni v objemovom pomere 95 : 5 až 100 : 0.
2. 2. Spósob podía bodu 1 vyznačujúci sa tým, ž<připravený roztok sa dávkuje do kolony naplněněmakroporéznym nepolárným organickým sorbentom připraveným kopolymeráciou 2-hydroxyetyl; metakrylátu s etyléndimetakrylátom modifikovaným stearoyláciou. Cena: 2,40 Kčs Vytiskly Moravské tiskařské závody, provoz 12, Leninova 21, Olomouc