CS219266B2 - Method of preparation of the glucosoizomeraze - Google Patents
Method of preparation of the glucosoizomeraze Download PDFInfo
- Publication number
- CS219266B2 CS219266B2 CS80852A CS85280A CS219266B2 CS 219266 B2 CS219266 B2 CS 219266B2 CS 80852 A CS80852 A CS 80852A CS 85280 A CS85280 A CS 85280A CS 219266 B2 CS219266 B2 CS 219266B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- glucose
- glucose isomerase
- microorganisms
- extracted
- cells
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 21
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 20
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 108700040099 Xylose isomerases Proteins 0.000 claims description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 9
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 claims description 9
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 claims description 9
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 claims description 9
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 241000589158 Agrobacterium Species 0.000 claims description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 4
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 3
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 2
- 235000021433 fructose syrup Nutrition 0.000 claims description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 22
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 8
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 7
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 6
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 6
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000006317 isomerization reaction Methods 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 4
- 108090000769 Isomerases Proteins 0.000 description 4
- 102000004195 Isomerases Human genes 0.000 description 4
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- -1 cellobinose Chemical compound 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 3
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N Aniline Chemical compound NC1=CC=CC=C1 PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 2
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N L-Alanine Natural products C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 241000364057 Peoria Species 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 1
- TYVQUVVGAPQXNB-KPGAZFBQSA-M [N+](=O)([O-])[O-].C([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO)O.P(=O)([O-])(O)OCC(O)CO.[Ca+2] Chemical compound [N+](=O)([O-])[O-].C([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO)O.P(=O)([O-])(O)OCC(O)CO.[Ca+2] TYVQUVVGAPQXNB-KPGAZFBQSA-M 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 1
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N aldehydo-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-KLVWXMOXSA-N beta-L-arabinopyranose Chemical compound O[C@H]1CO[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-KLVWXMOXSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 210000003495 flagella Anatomy 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002826 nitrites Chemical class 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu přípravy enzymu glukózoizomeráza, jehož izomerační působení je vhodné pro výrobu fruktózy a sirupu obsahujícího fruktózu a glukózu.
Pro- enzymatickou izomeraci glukózy na fruktózu se přidává glukózová izomeráza (D-xylóza-ketol-izomeráza EC 5.3.1.5.) do roztoku - glukózy, například do kukuřičného sirupu a reakční podmínky se řídí tak, že se glukózová frakce převádí na fruktózu, přičemž množství glukózy, převedené na fruktózu, je funkcí rovnovážné konstanty, která je při teplotě 60 °C 1,08.
Četné publikované práce popisují enzymatické způsoby převádění glukózy na sirup, který obsahuje glukózu a fruktózu využitím aktivity mikroorganismů rodu Pseudomonas, Lactobacillus, Escherichia, Aerobacter, Arthobacter, Bacillus, Streptomyces a dalších mikroorganismů.
Nyní se zjistilo, že také mikroorganismus rodu Agrobacterium, dosud pro tento účel nepopsaný, je schopen produkovat izomerační enzym, - který . izomeruje glukózu při pěstování na vhodném kultivačním prostředí.
Vynález se tudíž týká způsobu přípravy glukózoizomerázy vhodné zvlášť pro výrobu fruktózy a fruktózového- sirupu z glukózy, který je vyznačený tím, že se mikroorganismy kmene Agrobacterium, označené symboly NRRL B 11291 a NRRL B 11394 kultivují za aerobních podmínek na kultivačním pevném nebo kapalném prostředí, obsahujícím zdroj asimilovatelného uhlíku, zdroj fosforu, zdroj dusíku a minerální soli, při teplotě 20 až 40 °C po· dobu 10 až 48 hodin a při hodnotě pH 5,5 až 8,5.
Mikroorganismy, používané pro přípravu glukózoizomerázy, izolované ze zemědělské půdy a označované symboly shora uvedenými mají číslo kmene 1302 — 1303 — 1304 a mají následující morfologické a biochemické charakteristiky:
Mikroskopická morfologie:
Jednotlivé, někdy párové tyčinky, gram-negativní, rozměru 0,8 na 1,5 až 2,0 mikrometrů, prosté kapsulí a spor, mobilní se 4 až 6 penetrichozními bičíky.
Makroskopická morfologie:
Kdonie na agarové živné půdě (Difco): zvednuté, s nepopraskaným okrajem, krémově zabarvené, transparentní, vnější průměr 0,5 až 1 mm, hladké. Hojný růst na kalciumglycerolfosfátmannitolnitrátovém agaru, s hnědým zabarvením a vytvářením pozadí.
Biochemické vlastnosti:
Růst při teplotě 4 až 39 °C na všech jednoduchých laboratorních médiích i v nepřítomnosti růstového faktoru a v nepřítom nosti aminokyselin, za použití amoniových iontů NH<+, dusičněnových iontů NO5- nebo aminokyselin jakožto jediného· zdroje dusíku.
Oxidáza: pozitivní (N. Kovacs, 1956, Nátuře, Londýn, 178, 703).
Kataláza: pozitivní (M. Levine, D. Q. Andersen, 1932, J. Bact. 23, 337 až 347).
Nitrity produkované z nitrátů (C. E. ZoBell, 1932, J. Bact. 24, 273).
Nehydrolyzovaný Tween 80 (G. Sierra, 1957, Antonie van Leeuwenhoek 23, 15 až 22).
Kasem, želatina, celulóza, škrob, agar: nehydrolyzovaný (V. B. D. Skermann, A Guide to the Identification of the Genera of Bacteria, 2. vydání, The Williams and Wilkins Book Co.„ Baltimore, 1967).
Produkované 3-ketoglykosidy (M. J. Bernaerts, J. DeLey, 1963, Nátuře 197, 406).
Anilinová modř-mannitolový agar: růst s absorpcí barviva (A. A. Hendrickson, J. L. Baldwin, A. J. Riker, 1934, J. Bact. 28, 597 až 618).
Lakmusové mléko: šedo-hnědé
Využití uhlohydrátů: · - oxidační (R. Hugh, E. Leifson, 1953, J. Bact. 66, 24 - až 26.
Jakožto jediného zdroje - - uhlíku v kultivačním prostředí, popsaném ke konci R. Y. Stanierem (R. Y. Stanier a kol,, 1966, J. Gen. Microbiol. 43, 159- až 271) . - se používá těchto sloučenin D(-|-) glukóza, L( + )arabinóza, D(-J-)xylóza, D( + )rhamnóza, laktóza, cellobinóza, maltóza, citrát, - acetát, laktát, propionát, L-aspartová kyselina, L-asparagin, L-histidin, L-alanln, L-arginin, D (-j-) trealóza, D( — )ribóza.
Inaktivita na kolečkách- mrkvového kořene (J. A. Lippincott, Β. - -B. - Lippincott, 1969, J. Gen. Microbiol. 59, /1/ 57 až 75).
hlízky kořeny
1302 ——
1303- ——
1304 +—
Při porovnání těchto- charakteristik s- popisem v publikaci Bergey’ - s Manual of Determinative Bakteriology, VIII. vydání, patří mikroorganismy podle vynálezu do čeledi Rhizobiaoeae, rod Agrobacterium, druh hlízkotvorné (1304).
Kmeny označené 1302 a 1304 jsou uloženy v Northern Regíonal Research Center of Peoria III (Sp. st. a.), kde jsou označeny symboly NRRL B 11291 a NRRL B 11394.
.Kultury mikroorganismů, kterých se vynález také týká, se mohou připravit za aerobních podmínek jakýmkoliv běžným způsobem, například v povrchových kulturách nebo s výhodou v ponořených kulturách, za použití míchaných fermentorů.
Kultivační prostředí, které může být buď pevné, nebo kapalné, obsahuje zdroj asimilovatelného uhlíku, zdroj fosforu, zdroj dusíku a minerální soli. Kultury mohou růst
219 2 6 S při teplotě 20 až 40 °C, s výhodou při teplotě 25 až 35 °C po dobu 10 až 48 hodin, s výhodou 20 až 30 hodin, při hodnotě pH 5,5 až 8,5, s výhodou 6,5 až 7,5. Jakožto zdroje uhlíku se může používat glukóza, xylóza, laktóza, laktát, acetát, corn steep liquor, glycerol. Jakožto zdroje dusíku se může používat hydrolyzátů masa a kaseinu, hydrolyzátů sójových bobů, amoniových solí, dusičnanů a močoviny.
Vhodné kultivační prostředí má například toto složení:
| glukóza | 1° g/1 (gramy na litr |
| xylóza | 5 g/1 |
| KH2PO4 | 1 g/1 |
| MgSO4.7 H2O | 1 g/1 |
| NH4CI | 2 g/1 |
| hodnota pH | 7,0 až 7,2 |
Extrakce glykózové izomerázy z bakteriální pasty se provádí o sobě známými způsoby používanými v enzymologii.
К tomuto účelu se buňky desintegrují speciálně upraveným zařízením, jako je francouzský tlakový lis na buňky, homogenizátor Manton Gaulin Homogeniser, rotační desintegrátor atd. a také ultrazvukovými přístroji.
Enzym se rovněž uspokojivě může extrahovat z acetonovaných prášků a z přípravků sušených vymrazováním.
Glukózová izomeráza, získaná z mikrobiálních kmenů, kterých se vynález týká, je charakteristická dobrou stálostí za tepla.
Izomerace glukózy se může provádět o sobě známým způsobem. Glukózový roztok se může přímo přidávat do kultury mikroorganismů, to znamená do* čerstvých buněk nebo do kultur ze zmrazených buněk, nebo z acetonovaného prášku nebo z buněk sušených vymrazováním.
Podobně je možné použít přípravků, které obsahují izomerázu jakožto extrakty a koncentráty izomerázy, přípravků surových nebo čištěných izomeráz a přípravků získaných ze shora uvedených mikroorganismů.
Konečně je možno dosáhnout technického a ekonomického zlepšení immobilizací enzymu jeho kombinací s makromolekulárníml sloučeninami za vytvoření chemických vazeb se substrátem nebo vazeb ionického typu nebo fyzikální immobilizací.
Způsob podle vynálezu objasňují následující příklady, které však vynález nijak neomezují.
Příklad 1
Připraví se kultivační prostředí tohoto složení:
| glukóza | 5 | g/1 |
| xylóza | 5 | g/1 |
| KH2PO4 | 13 | g/1 |
| (NH4)2SO4 | 2 | g/1 |
| MgSOd . 7 H2O | 0,4 g/1 | |
| FeSO4.7 H2O | 10 | mg/1 (miligramy na litr ) |
| CaC12.6 H2O | 40 | mg/1 |
| MHSO4.5 H2O | 5 | mg/1 |
| ZnSO4.7 H2O | 5 | mg/1 |
| CuSO4.5 H2O | 1 | mg/1 |
| C0CI2.6 H2O | 1 | mg/1 |
Hodnota pH se upravuje na 7,2 hydroxidem sodným a kultivační prostředí se rozdělí na lOOml podíly do 500ml Erlenmayerových baněk. Sterilizuje se po dobu 30 minut při teplotě 110 °C a pak se baňky očkují kulturou kmene číslo 1304 ze šikmého agaru obsahujícího stejné kultivační prostředí s 2 % agaru (Difco) a inkubované po dobu 24 hodin při teplotě 30 °C, obvodově míchané za otáček 220/min. Buňky se pak shromáždí odstředěním a promytím pufremfNazSO3 0,1 molární, hodnota pH 7, obsahující 1.10~4 mol Co++ a 5.10-3 mol Mg++). Ze 100 ml takového kultivačního bujónu se získá 2 g vlhkých buněk. Tyto buňky se opět suspendují ve 20 ml pufru shora uvedeného a suspenze buněk se zavede do francouzského tlakového lisu buněk, takže se buňky rozdrtí. V takto získaném extraktu se stanoví enzymatická aktivita: 1 g vlhkých buněk obsahuje 560 enzymových jednotek. Enzymatická aktivita se stanoví tímto způsobem:
Do reakční směsi obsahující:
4.5 ml roztoku substrátu (D-glukóza 3,67 molových dílů, Mg++ 5.10-3 molů, CO+ + 10~4 molů a NažSO3 0,1 mol v demineralizované vodě, hodnota pH 7,0) se pak přidá 0,5 ml surového extraktu. Inkubace se provádí po dobu dvou hodin na parní lázni při teplotě 60 °C. Reakce se přeruší ochlazením směsi na teplotu 0 °C. Optická rotace vzorku (a 2 hod) a původního vzorku (a 0) se měří při teplotě místnosti polarimetrem Perkins-Elmerovým 141, Na-čára (549 nanometrů) optická dráha kyvety: 0,1 decimetru.
Jestliže se jednotka SNAMPROGETTI definuje jakožto podíl enzymu, který produkuje 1 miligram fruktózy za hodinu za shora uvedených zkušebních podmínek, pak se enzymatické jednotky v gramu vlhkých buněk mohou vypočítat z této rovnice enzymatické jednotky v gramu (αοα2 hod) X mg stanovené glukózy X 10 vlhkých buněk - ( agluk.)-(«fl.ukt.) X 0,1 X С X 0,5 X 2 kde (ofgiuk.) = + 54,16° (offrukt.) = — 98,35°
O = koncentrace glukózy v gramech na ml roztoku
0,1 = optická dráha v decimetrech
Příklad 2
Připraví se bujónové kultury kmene číslo 1304 způsobem popsaným v příkladu 1.
Z 500 ml bujónové kultury se získá 10,2 g vlhkých buněk, které se suspendují v 40 ml pufru (NaaSO3 0„1 molární) (hodnota pH7) a za míchání se přidá při teplotě —10 °O do 200 ml acetonu. Po 15minutovém zpracování se buňky oddělí filtrací a na filtračním papíru se promyjí acetonem, shromáždí se a usuší se ve vakuu při teplotě místnosti. Tak se získá 1,9 g suchých buněk.
Aktivita takto získaného acetonovaného prášku je 2200 jednotek.
Příklad 3
Připraví se buňky kmene číslo 1304 způsobem popsaným v příkladu 1, a zpracují se acetonem způsobem popsaným v příkladu 2.
Buněk, zpracovaných acetonem, se použije pro stanovení procenta izomerace glukózy jakožto funkce času v reakční směsi.
Zkušební podmínky jsou tyto:
a) Buňky zpracované acetonem: 10 g
b) Objem substrátu: 1 litr
c) Reakční teplota: 60 °O
Substrát má toto složení:
glukóza 60 % (hmotnost) objem, Mg++ : 5 milimolů, CO+ + : 0,1 milimolu, Na2SO3: 100 milimolů, hodnota pH 7,0.
Zjištěna tato procenta izomerace:
| Cas, h | Konverze, % |
| 3 | 12.5 |
| 6 | 20,8 |
| 9 | 27,8 |
| 12 | 32,3 |
| 15 | 37,7 |
| 18 | 40.6 |
| 23 | 44.8 |
Příklad 4
Bujónové kultury kmenů číslo 1302 a 1303 a odpovídající extrakty buněk se připraví shora popsaným způsobem v příkladu 1. Ze 100 ml těchto bujónových kultur se získá 1,72 a popřípadě 1,85 g vlhkých buněk.
Aktivita na gram vlhkých buněk je 412 jednotek pro kmen číslo 1302 a 476 jednotek pro kmen číslo 1303.
Claims (5)
- PŘEDMĚT VYNALEZU1. Způsob přípravy glukózoizomerázy vhodné zvláště pro výrobu fruktózy a fruktózového sirupu z glukózy vyznačený tím, že se mikroorganismy kmene Agrobacterium označené symboly NRRL B 11291 a NRRL B 11394 kultivují za aerobních podmínek na kultivačním pevném nebo kapalném prostředí, obsahujícím zdroj asimilovatelného uhlíku, zdroj fosforu, zdroj dusíku a minerální soli, při teplotě 20 až 40 °O po dobu 10 až 48 hodin a při hodnotě pH 5,5 až 8,5 a vytvořený enzym se izoluje.
- 2. Způsob podle bodu 1 vyznačený tím, že se mikroorganismy kultivují při teplotě 25 až 35 °O po dobu 20 až 30 hodin a při hodnotě pH 6,5 až 7,5.
- 3. Způsob podle bodů 1 a 2 vyznačený tím, že se glukózoizomeráza z bakteriální pasty extrahuje, přičemž se popřípadě buňky před extrakcí drtí.
- 4. Způsob podle bodů 1 a 2 vyznačený tím, že se glukózoizomeráza extrahuje z acetonovaných prášků.
- 5. Způsob podle bodů . 1 a 2 vyznačený tím, že se glukózoizomeráza extrahuje - z přípravků sušených vymrazováním.Severografia, n. p., závod 7 Most
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT20212/79A IT1113437B (it) | 1979-02-15 | 1979-02-15 | Procedimento per la produzione di fruttosio e sciroppi contenenti fruttosio e glucosio e mezzi adatti per la realizzazione del procedimento stesso |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS219266B2 true CS219266B2 (en) | 1983-03-25 |
Family
ID=11164796
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS80852A CS219266B2 (en) | 1979-02-15 | 1980-02-08 | Method of preparation of the glucosoizomeraze |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS55111795A (cs) |
| AR (1) | AR226838A1 (cs) |
| AU (1) | AU531577B2 (cs) |
| BG (1) | BG40658A3 (cs) |
| CS (1) | CS219266B2 (cs) |
| DD (1) | DD155431A5 (cs) |
| GR (1) | GR68719B (cs) |
| HU (1) | HU178837B (cs) |
| IT (1) | IT1113437B (cs) |
| PH (1) | PH15553A (cs) |
| PL (1) | PL222023A1 (cs) |
| RO (1) | RO79046A (cs) |
| SU (2) | SU955865A3 (cs) |
| YU (1) | YU40865B (cs) |
| ZA (1) | ZA80645B (cs) |
| ZM (1) | ZM2080A1 (cs) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000316572A (ja) * | 1999-04-30 | 2000-11-21 | Japan Science & Technology Corp | 耐熱性マンノースイソメラーゼとその製造法、並びにこれを用いるマンノースの製造法 |
-
1979
- 1979-02-15 IT IT20212/79A patent/IT1113437B/it active
-
1980
- 1980-01-25 GR GR61037A patent/GR68719B/el unknown
- 1980-01-29 YU YU233/80A patent/YU40865B/xx unknown
- 1980-02-01 AU AU55136/80A patent/AU531577B2/en not_active Ceased
- 1980-02-04 ZA ZA00800645A patent/ZA80645B/xx unknown
- 1980-02-07 ZM ZM20/80A patent/ZM2080A1/xx unknown
- 1980-02-08 CS CS80852A patent/CS219266B2/cs unknown
- 1980-02-11 PH PH23630A patent/PH15553A/en unknown
- 1980-02-13 BG BG046605A patent/BG40658A3/xx unknown
- 1980-02-13 AR AR279962A patent/AR226838A1/es active
- 1980-02-14 SU SU802883201A patent/SU955865A3/ru active
- 1980-02-14 HU HU8080334A patent/HU178837B/hu not_active IP Right Cessation
- 1980-02-14 PL PL22202380A patent/PL222023A1/xx unknown
- 1980-02-15 DD DD80219084A patent/DD155431A5/de not_active IP Right Cessation
- 1980-02-15 RO RO80100197A patent/RO79046A/ro unknown
- 1980-02-15 JP JP1676180A patent/JPS55111795A/ja active Granted
-
1981
- 1981-02-26 SU SU813298898A patent/SU1071225A3/ru active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AR226838A1 (es) | 1982-08-31 |
| SU1071225A3 (ru) | 1984-01-30 |
| JPS6363200B2 (cs) | 1988-12-06 |
| RO79046A (ro) | 1982-06-25 |
| AU531577B2 (en) | 1983-09-01 |
| PL222023A1 (cs) | 1980-10-20 |
| SU955865A3 (ru) | 1982-08-30 |
| PH15553A (en) | 1983-02-11 |
| ZM2080A1 (en) | 1981-05-21 |
| HU178837B (en) | 1982-07-28 |
| ZA80645B (en) | 1981-02-25 |
| IT7920212A0 (it) | 1979-02-15 |
| YU40865B (en) | 1986-06-30 |
| GR68719B (cs) | 1982-02-04 |
| AU5513680A (en) | 1980-08-21 |
| YU23380A (en) | 1983-02-28 |
| BG40658A3 (en) | 1987-01-15 |
| JPS55111795A (en) | 1980-08-28 |
| DD155431A5 (de) | 1982-06-09 |
| IT1113437B (it) | 1986-01-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4312948A (en) | Enzymic microbiological process for producing optically active aminoacids starting from hydantoins and/or racemic carbamoyl derivatives | |
| Yoshida et al. | Isolation and identification of a pyrogallol producing bacterium from soil | |
| SU611596A3 (ru) | Способ получени фермента -1,6 глюкозидазы | |
| Eller et al. | STUDIES ON BACTERIAL UTILIZATION OF URONIC ACIDS IV: Alginolytic and Mannuronic Acid Oxidizing Isolates | |
| US4391910A (en) | Processes for producing thermophilic aspartase | |
| JP3026857B2 (ja) | 新規プルラナーゼおよびその製造法 | |
| CS219266B2 (en) | Method of preparation of the glucosoizomeraze | |
| JP2763551B2 (ja) | ピラノースオキシダーゼおよびその製造法 | |
| JP3235904B2 (ja) | 耐熱性マンノースイソメラーゼ及びその製造法並びにこれを用いたマンノースの製造法 | |
| JP3635133B2 (ja) | トレハロースホスホリラーゼおよびその調製法 | |
| WO1990010010A1 (fr) | Nouvelle substance, trehalostatine, et sa production | |
| US3737383A (en) | Process for production of enzyme alkaline dextranase | |
| Fitzgerald et al. | Sulphur utilization during growth of pseudomonas fluorescens on potassium D-glucose 6-O-sulphate | |
| JP3003009B2 (ja) | マンノースイソメラーゼ及びそれを用いたマンノースの製造法 | |
| JP2785323B2 (ja) | β―グルコシダーゼ及びその製造法 | |
| US4389485A (en) | Uricase production method | |
| JPH0412951B2 (cs) | ||
| JPS59156281A (ja) | Ｎ−アセチルヘキソサミン酸化酵素及びその製造法 | |
| JP4439153B2 (ja) | 耐熱性マンノースイソメラーゼ及び該酵素を用いたマンノースの製造法 | |
| JPH04237496A (ja) | 環状イヌロオリゴ糖の製造方法 | |
| JPS6098982A (ja) | ポリアミン測定用酵素の製造法 | |
| KR800000807B1 (ko) | 세균 아포 용해 효소의 제조법 | |
| JPS584551B2 (ja) | コリン酸化酵素の製造法 | |
| JPS6178384A (ja) | セルラ−ゼの製造方法 | |
| JPH0127714B2 (cs) |