CS215779B1

CS215779B1 - Způsob přípravy antibiotických a jiných biosyntetických preparátů

Info

Publication number: CS215779B1
Application number: CS907380A
Authority: CS
Inventors: Petr Ettler; Otakar Hilbert; Alois Krajicek; Jiri Spacil
Original assignee: Petr Ettler; Otakar Hilbert; Alois Krajicek; Jiri Spacil
Priority date: 1980-12-19
Filing date: 1980-12-19
Publication date: 1982-09-15

Abstract

Vynález se týká přípravy antibiotických a jiných biosyntetických preparátů, zejména antibiotik, kultivací produkčních ( mikroorganismů v tekuté živé půdě obvyklého složení a za obvyklých podmínek, s přísadou tzv. námelového oleje jakožto protipěnidla a/nebo částečného zdroje asimilovatelného uhlíku.

Description

Vynález se týká způsobu přípravy antibiotických a jiných biosyntetických preparátů, zejména antibiotik, kultivací produkčních mikroorganismů v tekuté židé půdě, obsahující zdroje asimilovatelného uhlíku r dusíku a minerální živé soli, případně prekursory, stlmulátory a biofaktory, za aerobních podmínek.

Jak je známo, tvoří se při biosyntetických výrobách v průběhu kultivace produkčního mikroorganismu, v závislosti na složení média a intenzitě míchání a vzdušnění pěna, která se musí odstraňovat, a to bu3 mechanickými, fyzikálně-chemickými nebo chemickými prostředky, zpravidla přísadou tzv. odpěňovadel. Chemická odpěňovadla se dělí na přírodní a syntetická a jejich vlastnosti podrobně popsal G.L. Solomons /Process Biochem. 2,

10, 1967, str. 47/. Z přírodních chemických odpěňovadel jsou nejpoužívanější rostlinné oleje a živočišné tuky, které jsou produkčními mikroorganismy též částečně využívány jako zdroje uhlíku. Z rostlinných olejů jsou běžně užívány olej sojový, kukuřičný, arašídový, bavlníkový, olej z ječných klíčků, kokosový a pod., ze živočišných kuků pak vepřové sádlo, kostní tuk, košelotový olej atd.

Ve snaze nahradit sojový olej; důležitou součást humraání výživy, jiným účinným protipěnidlem, byl hledán a nalezen vhodný zdroj v tzv. námelovém oleji, který je odpadním produktem zpracování námele alkaloidy. Námelový olej není chemické individuum, je to směs triglycerinů vyšších mastných kyselin s ergosterolem a jinými rostlinnými steroly a triterpenickými alkoholy, jejíž složení se může měnit podle podmínek kultivace producenta.

S použitím tohoto nového účinného protipěnidla byl vypracován způsob přípravy antibiotických a jiných biosyntetických preparátů, zejména antibiotik, podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že se kultivace provádí za jednorázové nebo opakované přísady tzv. námelového oleje, směsi triglyceridů vyšších mastných kyselin s ergosterolem, rostlinnými steroly a triterpenickými alkoholy, odpadající při zpracoání námele na alkaloidy, jakožto protipěnidla a/nebo částečného zdroje asimilovatelného uhlíku, v množství 0,1 až 10,0 % obj., vztaženo na objem živé půdy.

Námelový olej se před použitím jako protipěnidlo zbavuje zbytků etheru z extrakce důkladným odpařením, aby manipulace s ním a aplikace do fermentačních či kultivačních médií byla přípustná z bezpečnostního hlediska.

Při kultivaci se námelový olej přidává bu3 na začátku procesu, nebo dodatečně ještě v jeho průběhu, pokud je nutné odpěňovat. Kromě tohoto účinku se námelový olej uplatňuje i jako částečný zdroj asimilovatelného uhlíku, s příznivým vlivem na produkci biosyntetického preparátu, jež je ve srovnání s kontrolou vyšší o 5 až.20 % teorie.

Způsob podle vynálezu umožňuje tedy zhodnocení odpadního produktu a úsporu sojového oleje, využitelného pro humánní výživu.

Bližší podrobnosti způsobu podle vynálezu vyplývají z následujících příkladů provedení.

Příklad 1

Do kultivačního média pro biosyntézu protihoubového antibiotika produkčním kmenem Oude2

215 779 mansiella mucida se do očkovacích tanků kromě 2 až 10 % hmotn.glukosy, 1 až 2 % hmotn. peptonu, 2 až 3 % hmotn. kukuřičného extraktu, 0,2 až 1,0 % hmotn. krystalického síranu hořečnatého přidává námelový olej v množství 0,05 až 0,2 % obj. Do produkční půdy se námelový olej přidává před sterilizací vedel 12 až 17 % hmotn. glukosy, 1 až 2 % hmotn. peptonu, 2 až 4 % hmotn. melasy, v množství 0,1 až 0,3 % obj. V případě pěnění se médium odpěňuje sterilním námelovým olejem, přidávaným přes plamen nebo ze zásobního kotlíku. Ve srovnání s kontrolou za stejných podmínek, s použitím sojového oleje jako protipěnidla, činí zvýšení produkce protihoubového antibiotika průměrně 5 % teorie.

Příklad 2

Do kultivačního média pro biosyntézu oxytetracyklinu produkčním kmenem Streptomyces rimosus se do očkovacích tanků kromě 0,5 až 2,0 % hmotn. sacharosy, 0,2 až 2,0 % hmotn. močoviny, 4 až 7 % hmotn. kukuřičného extraktu přidává námelový olej v množství 0,05 až 2,0 7. obj. Do produkční půdy se krofnč výše uvedených surovin, kyseliny mléčné a síranu amonného přidává námelový olej v emulzi se silikonovým olejem podle intenzity pěnění bu3 přes plameň, nebo automatickým dávkovacím zařízením po signálu fotobuňky umístěné na výstupu vzduchu. Ve srovnání s kontrolou činí zvýšení produkce oxytetracyklinu 18 až 20 % teorie.

Příklad 3

Do kultivačního média pro submerzní přípravu námelové očkovací látky se ke 3 až 5 » hmotn. sorbitu, 2 až 4 % hmotn. kukuřičného extraktu, 1 až 3 % hmotn. kyseliny citrónové přidává 0,1 až 0,3 % obj. námelového oleje, též podle potřeby v průběhu kultivace. Ve srovnání s kontrolou činí zvýšení produkce průměrně 5 % teorie.

Příklad 4

Do kultivačního média pro biosyntézu fungicidinu produkčním kmenem Streptomyces nourei se k 6 až 10 % hmotn. fruktosového sirupu, 3 až 5 % hmotn. glukosy, 0,5 až 2,0 % hmotn. kukuřičného extraktů, 0,5 až 2,0 % hmotn, dusičnanu amonného přidává 0,1 % obj. námelového oleje.. V průběhu fermentace se podle potřeby činí zvýšení produkce fungicidinu průměrně 10 % teorie.

Přiklad 5

Do kultivačního média pro biosyntézu tylosinu prodikčním'kmenem Streptomyces fradiae se k 3 % hmotn. melasy, 0,2 až 0,8 % hmotn. fosforečnanu amonného, 2-až 5 % hmotn. rybí moučky a 1 až 3 % hmotn. kukuřičného extraktu přidává 1 až 3 % obj. námelového oleje. Ve srovnání s kontrolou činí zvýšení produkce tylosinu průměrně 10 % teorie.

Příklad 6

Do kultivačního média pro biosyntézu penicilinu G produkčním mnemen Penicillinum chrysogenum se 3 % hmot. extraktu bavlníkové mouky, 0,5 % hmot. sacharosy a 2 % hmot. kukuřičného extraktu se přidají 1 až 4 % obj. námelového oleje. Ve srovnání s kontrolou činí zvýšení produkce penicilinu průměrně 4 % teorie.

215 779

Příklad 7

Do kultivačního média pro biosyntézu chlortetracyklinu produkčním kmenem Streptomyces aureofaciens se 3 % hmot. škrobu, 1,5 % hmot. sacharosy, 3 % hmot. sojové mouky a 0,5 % hmot. kukuřičného extraktu se přidají 1 až 10 % obj. námelového oleje. Ve srovnání s kontrolou bylo dosaženo zvýšení produkce chlortetracyklinu průměrně o 3 % teorie.

Claims

Způsob přípravy nntibiotických a jiných biosyntetických preparátů, zejména antibiotik, kultivací produkčních mikroorganismů v tekuté živé .půdě, obsahující zdroje asimilovatelného uhlíku a dusíku a minerální živé soli, popřípadě prekursory, stimulátory a biofsktory, za aerobních podmínek, vyznačující se tím, že se kultivace provádí za jednorázové nebo opakované přísady tzv. námelového oleje, tvořeného směsí triglvcerid.ů vyšších mastných kyselun s ergosterolem, rostlinnými steroly a triterpenickými alkoholy, odpadajícího při zpracování námele na alkaloidy, jakožto protipěnidla &/ nebo částečného zdroje asimilovatelného uhlíku, v množství 0,1 až 10,0 i obj. vztaženo na objem živá půdy.