CS214793B2 - New method of making the dimeric disulphides of indol-dihydroindole derivatives genus vinca connected by the bridge - Google Patents

Description

ČESKOSLOVENSKA SOCIALISTICKÁ

POPIS VYNALEZU

KPATENTU (22) Přihlášeno 14 05 79 (21) (PV 6476-80) (32) (31) (33) Právo přednosti od 15 05 78(905Θ67) Spojené státy americké (40) Zveřejněno 10 09 81(45) Vydáno 15 09 84

ÚŘAD PRO VYNÁLEZYA OBJEVY 214793 (U| (B2|

(El) IJ. DlJ C 07 D 519/04//A 61 K 31/475 (72)

Autor vynálezu CONRAD ROBERT ALLEN a GERZON KOERT, INDIANAPOL-IS, INDIANA(Sp. st. a.) 173)

Majitel patentu ELI LILLY AND COMPANY, INDIANAPOLIS, INDIANA (Sp. st. a.) (54) Nový způsob výroby dimerních dlsulfidů indol-dihydroindolovýcbderivátů z rodu Vinca, spojených můstkem 1

Bylo zjištěno, že některé přírodní alkaloi-dy získávané z rostlin druhu Vinca rosea(Catharanthus roseus don. — alkaloidy zrodu Catharanthus nebo Vinca) jsou účin-né při léčbě experimentálních nádorovýchonemocnění živočichů. Mezi tyto sloučeninynáležejí leurosin (viz americký patentovýspis č. 3 370 057), vinkaleukoblastin (vin-blastin) — dále označovaný jako VLB (vizamerický patentový spis č. 3 097 137), leu-roformin (viz belgický patentový spis čís.811110), leurosidin (vinrosidin) a leuro-kristin dále označovaný jako vinkristin(oba viz americký patentový spis číslo3 205 220), deoxy-VLB „A“ a „B“ [viz Tetra-hedron Letters, 783 (1958)], 4-deacetoxyvin-blastin (viz americký patentový spis číslo3 954 773), 4-deacetoxy-3‘-hydroxyvinblastin(viz americký patentový spis č. 3 944 554),leurokolombin (viz americký patentový spisč. 3 890 325) a vinkadiolin (viz americkýpatentový spis č. 3 887 565). Dva z těchtoalkaloidů, a to VLB a vinkristin, jsou v sou-časné době na trhu jako prostředky k léčběnádorových onemocnění, zejména leukémiía příbuzných chorob člověka. Tyto dva ko-merční alkaloidy se obvykle podávají intra-venózně.

Chemické modifikace alkaloidů z rodu 2 nostmi. V první řadě je třeba vzít v úvahu,že struktura molekuly těchto látek je ne-obyčejně složitá, a že je tedy velmi obtížnévyvinout chemické reakce, kterými by bylamodifikována jedna konkrétní funkční sku-pina v molekule bez ovlivnění jiných sku-pin. V druhé řadě pak přichází v úvahu sku-tečnost, že z frakcí získaných z rostlin dru-hu Vinca rosea nebo z alkaloidů z těchtorostlin byly izolovány nebo vyrobeny dimer-ní alkaloidy, postrádající žádané chemotera-peutické vlastnosti a stanovení jejich struk-tury vedlo k závěru, že tyto sloučeniny jsouúzce příbuzné s aktivními alkaloidy, odnichž se často liší jen stereochemií na je-diném uhlíku. Anti-neoplatická účinnost setedy zdála být omezena jen na velmi speci-fické základní struktury a v souhlase s tímse naděje na získání účinnějších léčiv mo-difikací těchto struktur zdály jen velmi ma-lé. Mezi úspěšné modifikace fyziologicky ú-činných alkaloidů náleží příprava 6,7-dihyd-ro-VLB (viz americký patentový spis číslo3 352 868) a náhrada acetylové skupiny naCi (uhlík v poloze 4 cyklického systémuVLB — viz níže uvedené číslování) vyššíalkanoylovou skupinou nebo nepříbuzhýmiácylovými Skupinami (viz americký paten-tový spis č. 3 392 173). Některé z těchto Ci-

ší inokulovaných leukémii P 1534. Jeden ztěchto Ch-derivátů, v němž je C4-acetylováskupina VLB nahrazena chloracetylovouskupinou, je rovněž užitečným meziproduk-tem pro přípravu strukturně modifikova-ných derivátů VLB, v nichž C4-acetylovouskupinu VLB nahrazuje N,N-dialkylglycylo-vá skupina (viz americký patentový spis č.3 387 001).

Byly rovněž připraveny Cs-karboxamidovéa -karboxhydrazidové deriváty VLB, vinkris-tinu, vinkadiolinu apod., a bylo zjištěno, žejsou účinné proti nádorovým onemocněním(viz belgický patentový spis č. 813 168J. Ty-to sloučeniny jsou neobyčejně zajímavé, pro-tože například 3-karboxamidy VLB jsou ú-činnější proti Ridgewayově osteogennímusarkomu a Gardnerovu lymfosarkomu nežsamotný VLB, tedy než základní alkaloid,z něhož byly odvozeny. Určité z těchto ami-doderivátu se co do účinnosti přibližují ú-činnosti vihkristinu proti stejným nádorům.Jeden z těchto amidů, a to C3-karboxamid 4-deacetyl-VLB (vindesin), je v současné do-bě v klinických zkouškách na lidech a zdáse, že je méně neurotoxický než vinkristin,a že je účinný proti leukémiím, včetně leu-kémií rezistentních na vinkristin. V belgickém patentovém spisu č. 858 451jsou popsány a chráněny bis-deriváty di-merních sloučenin z rodu Vinca, spojenémůstkem, které je možno popsat obecnýmvzorcem R—NH—CH2—(CH2]n—S—

—S—CH2—(CHz)n—NH—R ve kterém R znamená zbytek dimerního al-kaloidu z rodu Vinca, obsahujícího karbo-nylovou skupinu na C3, a n má hodnotu 1až 5. Bylo zjištěno, že sloučeniny této struk-tury jsou hlavními produkty reakce Cs-kar-boxazidu sloučeniny z rodu Vinca (R—N3Ja sloučeniny vzorce NHz—CH2—CHz—SH, apředpokládá se, že vznikají oxidací karbox-amidoethylmerkaptanové skupiny na C3vzduchem, jako je tomu u systému cystein--cystin. Tato oxidace je pochopitelně ome-zena na tvorbu disulfidické vazby z mer-kaptoalkylamidu a není obecně použitelnák syntéze jiných bis-derivátů dimerníchsloučenin z rodu Catharanthus, spojenýchmůstkem.

Vynález popisuje zlepšený způsob výrobyurčitých tetramerů sloučenin z rodu Vinca,popsaných a chráněných v belgickém paten-tovém spisu č. 858 451. Tímto posledně zmíněným zlepšeným způ-sobem je způsob výroby sloučenin obecnéhovzorce II, R6_NH—CH2—(CH2)n—Q— — (CHz)„—CH2—NH—R6 (Π), ve kterém každý ze symbolů R6 znamená zbytek in-dol-dihydroindolového alkaloidu obecnéhovzorce III,

kde R2 znamená methylovou skupinu neboatom vodíku roxylovou skupinu nebo atom vodíku a dru-hý představuje ethylovou skupinu, a R5 zna-mená atom vodíku, nebo R4 a R5 společně τϊ7 214793 6

S tvoří «-epoxidový kruh a R3 znamená ethy-lovou skupinu, a Q představuje skupinu S—S, a jejich far-maceuticky upotřebitelných adičních solí skyselinami, vyznačující se tím, že se azidobecného vzorce R6—N3 nechá reagovat s diaminem obecného vzor-ce NH2—CH2— (CH2]n—Q— — (CH2)„—CH2— NH2 ve kterém Q představuje skupinu S—S, v poměru2 mol azidu obecného vzorce R6—N3 na kaž-dý mol tohoto diaminu, načež se popřípadězískaný produkt převede na svoji farmaceu-ticky upotřebitelnou adiční sůl s kyselinou.

Mezi netoxické kyseliny použitelné propřípravu farmaceuticky upotřebitelných a-dičních solí sloučenin obecného vzorce II skyselinami náležejí anorganické kyseliny,jako kyselina chlorovodíková, dusičná, fos-forečná, sírová, bromovodíková, jodovodíko-vá, dusitá a fosforečná, jakož i netoxickéorganické kyseliny, včetně alifatických mo-no- a dikarboxylových kyselin, fenylsubsti-tuovaných alkanových kyselin, hydroxyalka-nových a alkandiových kyselin, aromatic-kých kyselin a alifatických a aromatickýchsulfonových kyselin. Mezi tyto farmaceutic-ky upotřebitelné soli náležejí tedy napříkladsulfáty, pyrosulfáty, bisulfáty, sulfity, bi-sulfity, nitráty, fosfáty, monohydrogenfosfá-ty, dihydrogenfosfáty, metafosfáty, pyrofos-fáty, chloridy, bromidy, jodidy, acetáty, pro-pionáty, dekanoáty, kapryláty, acyláty, for-miáty, isobutyráty, kapronáty, heptanoáty,propioláty, oxaláty, malonáty, sukcináty, su-beráty, sebakáty, fumaráty, maleáty, ben-zoáty, chlorbenzoáty, methylbenzoáty, dini-trobenzoáty, hydroxybenzoáty, methoxyben-zoáty, ftaláty, tereftaláty, benzensulfonáty,toluensulfonáty, chlorbenzensulfonáty, xy-lensulfonáty, fenylacetáty, fenylpropionáty,fenylbutyráty, citráty, laktáty, 2-hydroxybu-turáty, glykoláty, soli s kyselinou jablečnou,tartráty, methansulfonáty, propansulfonáty,1-naftalensulfonáty a 2-naftalensulfonáty.

První reakční stupeň přípravy sloučeninobecného vzorce II se provádí tak, že se azidobecného vzorce R6—N3 ve vhodném inert-ním rozpouštědle, obvykle v methylendi-chloridu, smísí s diaminem obecného vzorce NHz— CHz— (CH2 )„—Q— — (CH2)n—CH2—NHz v němž Q má shora uvedený význam, v po- měru 2 mol azidu na každý mol diaminu.Diamin se před přidáváním rovněž rozpustív inertním rozpouštědle, obvykle v methy-lendichloridu. Jak je uvedeno dále, výchozíazid se obvykle před touto reakcí nečistí,ale používá se v takovém stavu, v jakém bylizolován z reakční směsi, a proto se při re-akci s diaminem účelně používá totéž roz-pouštědlo, jaké bylo použito k izolaci toho-to azidu. Takto vzniklé bis-amidy sloučeninz rodu Vinca se izolují standardním postu-pem a čistí se chromatografií. Tak napří-klad při použití VLB jako základní výchozílátky při této syntéze se postupuje násle-dovně: VLB se nechá reagovat s bezvodým hyd-razidem v inertním rozpouštědle rozpouš-tějícím obě tyto reakční složky, jako v niž-ším alkanolu, v uzavřené reakční nádobě.Reakční směs se obvykle zahřívá na teplotuv rozmezí od 40 do 100 °C po dobu od 12do 48 hodin, během kteréžto doby je reakceprakticky ukončena. Produktem reakce je4-deacetyl-VLB-C3-karboxhydrazid, protožereakce s hydrazinem vede nejen ke konver-zi esterové skupiny na C3 na hydrazidovéseskupení, ale za zásaditých reakčních pod-mínek i k hydrolýze acetylové skupiny naC4 na skupinu hydroxylovou. Jiné esterovéskupiny v molekule nejsou za shora uvede-ných reakčních podmínek napadány, pouzes tím, že obvykle vzniká i určité množství18‘-demethoxykarbonylderivátu. Hlavnímproduktem reakce je nicméně 4-deacetyl--VLB-C3-karboxhydrazid. Analogickým způ-sobem se připraví 4-deacetyl-C3-karboxhyd-razidy deoxy-VLB „A“ a „B“, leurosidinu aleurosinu. Takto vzniklé karboxhydrazidy sepak působením dusitanu sodného v kyseli-ně převádějí na odpovídající azidy. Produkttéto reakce se obvykle používá v tom stavu,v jakém byl izolován z reakční směsi, pro-tože bylo zjištěno, že k dosažení přiměřené-ho výtěžku žádaného bisamidu není nutnoazid čistit.

Reakcí 2 molů 4-deacetyl-C3-karboxami-dů VLB, leurosidinu, deoxy-VLB „A“ a „B“,leurosinu a jiných alkaloidů obecného vzor-ce R6—OCH3, kde R6 představuje zbytek sho-ra uvedeného obecného vzorce II Js tou vý-jimkou, že R2 znamená pouze methylovouskupinu nebo atom vodíku), s diaminemobecného vzorce NH2—CH2—(CHz)n—Q— — (CHžJn—CHz—NHz kde Q má shora definovaný význam, zastandardních reakčních podmínek reakceazidu a aminu, popsaných v belgickém pa-tentovém spisu č. 858 451 pro přípravu mo-noamidů těchže alkaloidů z rodu Vinca, sezískají žádané produkty obecného vzorce R6—NH—CH2—(CHžJn—Q—(CH2)n—CH2-—NH—R6 , 214793 Výchozí látky používané při shora popsa-ných syntézách se připravují následujícímzpůsobem. Příprava výchozích látek 4-deacetyl-VLB-C3-karboxhydrazid VLB se v bezvodém ethanolu zahřívá snadbytkem bezvodého hydrazlnu cca 18 ho-din v uzavřené reakční nádobě na teplotuzhruba 60 °C. Reakční nádoba se ochladí,otevře se, její obsah se vyjme a těkavé po-díly se odpaří ve vakuu. Zbytek obsahující4-deacetyl-VLB-C3-karboxhydrazid se vyjmemethylendichloridem, methylendichlorido-vý roztok se promyje vodou, oddělí se a povysušení se methylendichlorid odpaří ve va-kuu. Zbytek se rozpustí ve směsi stejnýchdílů chloroformu a benzenu a chromatogra-fuje se na silikagelu. Jako eluční činidlo sepoužívá směs benzenu, chloroformu a tri-ethylaminu. Počáteční chromatografickéfrakce obsahují nezreagované výchozí ma-teriály spolu s 4-deacetyl-VLB vzniklým přireakci jako vedlejší produkt. Další frakceobsahují 4-deacetyl-18‘-demethoxykarbonyl--VLB-C3-karboxhydrazid, který již dříve po-psali Neuss a spol. v Tetrahedron Letters,1968, 783. Následující frakce, které podlechromatografie na tenké vrstvě obsahují 4--deacetyl-VLB-C3-karboxhydrazid, se spojía ve vakuu se z nich odpaří rozpouštědlo.Pevný zbytek taje za rozkladu zhruba při219 až 220 °C.

Shora popsaným postupem je rovněž mož-no podrobit 4-deacetyl-VLB reakci s hyd-razinem za vzniku 4-deacetyl-VLB-C3-kar-boxhydrazidu a leurokristin nebo 4-deacetyl-leurokristin [který je možno připravit po-stupem podle amerického patentového spisuč. 3 392 173] je možno podrobit reakci s bez-vodým hydrazinem v bezvodém ethanolu zavzniku 4-deacetyl-l-deformylleurokristin--C3-karboxhydrazidu izolovaného Ve forměamorfního prášku. Analogickým způsobemse připraví rovněž 4-deacetyl-C3-karboxhyd-razidy deoxy-VLB, leurosidlnu a leurosinu.4-deacetyl-VLB-C3-karboxazid V 15 ml bezvodého methanolu se rozpustí678 mg 4-deacetyl-VLB-C3-karboxhydrazidu,k roztoku se přidá cca 50 ml 1 N vodné ky-seliny chlorovodíkové, výsledný roztok seochladí zhruba na 0 CC, přidá se k němucca 140 mg dusitanu sodného a reakční směsse 10 minut míchá za udržování teplotyzhruba na 0 °C. Po přidání dusitanu sodnéhose roztok tmavě červenohnědě zbarví. Vý-sledná směs se zalkalizuje přídavkem nad-bytku studeného 5°/o vodného roztoku kyse-lého uhličitanu sodného a vodný roztok setřikrát extrahuje methylendichloridem. 4--deacetyl-VLB-C3-karboxazid, vzniklý přishora popsané reakci, přejde do methylen-dichloridu a tato organická vrstva se oddě-

B lí. Takto získaný methylendichloridový roz-tok 4-deacetylvinblast-C3-ikarboxazidu seobvykle používá bez dalšího čištění.

Analogickým způsobem se připraví 4-de-acetyl-C3-karboxazidoderiváty 1-deformyl-vinkristinu, leurosidinu, 4‘-deoxy-VLB „A“ a„B“ a leurosinu.

Vynález ilustrují následující příklady pro-vedení, jimiž se však rozsah vynálezu v žád-ném směru neomezuje. Příklad 1 Příprava bis [β- (4-deacetyl-VLB-C3--karboxamido ] ethyl ] disulf Idu 8 g 4-deacetyl-VLB-C3-karboxhydraziduve vodné kyselině chlorovodíkové se necháreagovat s dusitanem sodným za vzniku 4--deacetyl-VLB-C3-karboxazidu. Azid vzniklýpři této reakci se izoluje ve formě roztokuve 400 ml methylendichloridu.

Do 500 ml methanolu, v němž je rozpuš-těno 10,8 g methoxidu sodného, se vnese 22,5 g cystamindihydrochloridu, reakčnísměs se cca 4 hodiny míchá, načež se z níodpaří rozpouštědlo. Zbytek se asi 1 hodinumíchá s etherem a pak se směs zfiltruje.Odpařením etherového filtrátu ve vakuu ksuchu se získá cca 10 g olejovitého zbytkutvořeného cystaminem ve formě volné báze.

Do roztoku 4-deacetyl-VLB-C3-karboxaziduv methylendichloridu se přidá 760 mg volnébáze cystaminu v methylendichloridu. Popřidání 75 ml tetrahydrofuranu se reakčnísměs za vyloučení přístupu světla zhruba16 hodin míchá při teplotě místnosti, pakse zfiltruje a filtrát se odpaří ve vakuu ksuchu. Zbytek obsahující bis[/3-(4-deacetyl--VLB-C3-karboxamido) ethyl] disulf id se roz-pustí v methylendichloridu, roztok se pro-myje vodou a vysuší se. Zbytek po odpařenímethylendichloridu obsahuje podle chroma-tografie na tenké vrstvě v rozpouštědlovémsystému methylendichlorid-methanol-ethyl-acetát (1:1:1) dva hlavní produkty. Zby-tek se podrobí chromatografii na silikageluza použití shora zmíněného systému roz-pouštědel jako elučního činidla. Frakce, kte-ré podle chromatografie na tenké vrstvě ob-sahují bis-[ β- (4-deacetyl-VLB-C3-karboxami-do) ethyl] disulf id, se spojí a odpaří se z nichrozpouštědlo. Získá se 2,6 g žádaného pro-duktu. Další hlavní reakční produkt se rov-něž izoluje a vyčistí. Tímto produktem jereakční produkt 1 mol 4-deacetyl-VLB-C3--karboxazidu a cystaminu, tedy 4-deacetyl--VLB-C3-N-2- (2-aminoethyldithio) ethyl-karboxamid. Vyšších výtěžků tohoto pro-duktu se dosáhne v případě, že se 1 molazidu nechá reagovat s 1 molem cystaminu.

Takto připravený bis[/3-(4-deacetyl-VLB--C3-karboxamido) ethyl] disulf id je identickýs produktem získaným postupem popsanýmv belgickém patentovém spisu č. 813 168.

Disulfát bis [ β- (4-déacetyl-VLB-C3-karbox- amido)ethyl]disulfidu se připraví v ethanolu 214793 10 přídavkem stechiometrického množství 2%(objem/objem) ethanolické kyseliny sírové.Disulfát se rovněž připraví titrací roztokubáze 2% ethanolickou kyselinou sírovou aždo bodu, kdy alikvotní část roztoku, zředěná5 objemy vody, má hodnotu pH v rozmezíod 3,0 do 3,5. Kterýmkoli z těchto postupůse po odpaření ethanolu získá špinavě bíláamorfní sůl.

Část A

Shora popsaným postupem se reakcí 4--deacetyl-VLB-C3-karboxidu s bis (y-amino) -propyldisulfidem získá bis[y-(4-deacetyl--VLB-C3-karboxamldo)propyl] disulfid s ná-sledujícími fyzikálními charakteristikami:

Elementární analýza:vypočteno: 3,72 % S,nalezeno: 3,87 % S.

Molekulární spektrum:m/e 841, 855.

Titrace (66% dimethylformamid):pKa‘ 5,20, 721. IČ (v, CHCb): 1730 a 1670 cm'*. 13CNMR: spektrum je stejné jako pro vindesin stím, že obsahuje signál pro sekundárníamid při 173,7 ppm a další signály při42,0, 36,00 a 39,2 ppm. Výtěžek činí 10 až 20 %.

Část B

Shora popsaným postupem se reakcí 4-deacetylleurosin-C3-karboxazidu s cystami-nem v molárním poměru 2 : 1 získá bis[/3-(4--deacetylleur osin-C3-karboxámido) ethyl ] -disulfid s následujícími fyzikálními cha-rakteristikami:

Hmotnostní spektrum:m/e 825. IČ (v, CHCb): 1730 a 1670 cm-1.

Titrace (66% dimethylformamid):pKa‘ 5,3 a 7,0.

Molekulová hmotnost (osmometricky): 1479 (vypočteno 1620). 13CNMR: spektrum je analogické spektru vindesinu s tím, že obsahuje signál pro sekundárníamid při 173,7 ppm a další signály při39,2 a 37,5 ppm. Výtěžek činí 10 až 20 %. Příklad 2 Příprava solí

Sulfáty shora uvedených amidů se připra-vují tak, že se příslušný amid rozpustí vabsolutním ethanolu a pH vzniklého rozto-ku se 2% ethanolickou kyselinou sírovounastaví na hodnotu zhruba od 3,0 do 3,5.Analogickým způsobem se připravují i dalšísoli, včetně solí s anorganickými ionty, jakochloridů, bromidů, fosfátů, nitrátů apod.,jakož i solí s organickými ionty, jako benzo-átů, methansulfonátů, maleátů, tartrátů apodobně.

Sloučeniny obecného vzorce II jsou účinnéproti transplantovaným nádorům u myší invivo. K průkazu této účinnosti sloučenin po-dle vynálezu se používá postup, při němž setestovaná látka aplikuje, obvykle intraperi-toneálně, v různých předem určených dáv-kách každý den po dobu 9 až 10 dnů nebokaždý čtvrtý den, po inokulaci nádorem. V následující tabulce I jsou uvedeny vý-sledky pokusů, při nichž byly myši s trans-plantovaným Gardnerovým lymfosarkomem(GLS), nádorem mléčné žlázy C3H, melano-mem B16, leukémií P 1534 (J), leukémiíP 388 nebo adenokarcinomem 755 ošetřová-ny sloučeninami obecného vzorce II. V prv-ním sloupci této tabulky je uveden názevtestované sloučeniny, v druhém sloupci po-kusný nádor, v třetím sloupci dávkování ave čtvrtém sloupci procentní hodnota inhi-bice růstu nádoru nebo prodloužení dobypřežití. Při používání nových sloučenin obecnéhovzorce II jako prostředků proti nádorovýmonemocněním savců se účelně používá pa-renterálního způsobu podání, přičemž vý-hodná je intravenózní aplikace, i když umenších savců, jako u myší, je možno použí-vat rovněž aplikaci intraperitoneální. K in-travenózní aplikaci se používají isotonickéroztoky obsahující 1 až 10 mg soli alkaloi-dové báze podle vynálezu v 1 ml. Účinnélátky se aplikují v dávce od 0,01 do 1 mg/kgtělesné hmotnosti savce, s výhodou od 0,1do 1 mg/kg, a to jednou nebo dvakrát týdněnebo každé dva týdny, v závislosti jak naúčinnosti, tak na toxicitě účinné látky. Al-ternativní způsob, jak dospět k terapeutickédávce, je založen na ploše povrchu těla, při-čemž se podává dávka od 0,1 do 10 mg/m2plochy povrchu těla savce, a to každých 7nebo 17 dnů.

Claims (1)

1. 21/4'7f9^ 11 12 TABULKA I Název sloučeniny 'Nádor Dávka 'Procentní doba lilhibtoe v mg/kg x po- nebo prodloužení doby přežití -čet dnů bis [ β- (4-deacety lleur osin-C3- P 388 30 -x 3 -35 -karboxamido j ethyl ] disulf id- 15 x 3 46 disulfát bis [ β- (4-deacetyl-VLB-C3- GLS 0,4 x 9 43 až 100 -karboxamido) ethyl ] disulf id- 1,2 x 3 62 až 93 -disulfát 0,9 x 3 34 až 46 C3H 1,2 x 3 toxická dávka bis[;(3-(4-deacetyl-VLB-C3- P 388 0,9 X 3 1,2 x 3 :31;až 36 53 až 61 -karboxamido) ethyl] disulf id- i0>9 x 3 39 až 47 disulfát 0,6 x 3 33 až 44 755 Q.}6 x 3 60 P 1S34(!J) 1,2 x 3 0,9 x 3 0,6 x 3 67 až 68 34 až 54 29 až 34 big[|S-i(4-deacetyl-VLB-C3- B16 1,6 x 3 1,2 x 3 0,9 x 3 0,6 x 3 0,6 x 3 90.až 99 62 nebo toxická dávka50-až 53 20 až 39 118 (7j*j -karboxa mido J ethyl ] disulf id- 0,9 x 3 86 (.7) disulfát 1,2 x 3 24 (3.) bisj.y-(4-deacety 1-VLB-C3- B16 0,6 x 3 99 (8) ikarboxainicio jpropyl] (li- 0,9 x 3 61 :(!5.) su Ifidd i sulfát 1,2 x 3 68 (8:] Legenda: * pV závorkách uveden počet neurčitých přežívajících exemplářů. Při klinickém použití sloučeniny obecnéhovzorce II 'bude ošetřující lékař podávat účin-nou látku podle vynálezu zpočátku stejnoucestou, ve stejných nosných látkách a prav-děpodobně i proti stejným typům nádorů,jako se používají vinkristin nebo VLB. 'Přiodchylkách v dávkování by měl být bránzřetel na rozdíl ve. výši dávek, zjištěný připokusech na experimentálních nádorech umyší, přičemž hladina dávek sloučenin obec-ného vzorce II je obecně srovnatelná s dáv- -kováním používaným při aplikaci viiibflistinua VLB proti nádorům citlivým na jednu neboobě tyto sloučeniny. .Při klinických testech,stejně jako v případě jiných prostředků pů-sobících proti nádorům, je třeba -věnovatzvláštní pozornost účinku onkolytickýchsloučenin obecného vzorce II proti -deseti„'Signálním“ nádorům uvedeným .na -straně266 v publikaci „The Design nď CMnáoalTrials in Cancer Therapy“ (ed. 'Statuet, flřu-tura Publishing Company, 1S73J. pRedmEt Nový způsob výroby di měrní Cli disulfidůindol-dihydroindolových derivátů z rodu VYNALEZU Vinca, spojených můstkem, obecného vzorce II, -R6—NH—CHž— (CHzjn-Q— (CHajn—CHa-NH-R6 , (Mj, ve kterém indol-dihydroindolového alkaloidu obecného každý ze symbolů R6 představuje zbytek vzorce lil, 214793 13 14

   kde R2 znamená methylovou skupinu neboatom vodíku, jeden ze symbolů R3 a R4 znamená hyd-roxylovou skupinu nebo atom vodíku adruhý představuje ethylovou skupinu, aR5 znamená atom vodíku, nebo R4 a R5společně tvoří α-epoxidový kruh a R3 zna-mená ethylovou skupinu, a Q je skupina S—S, a jejich farmaceuticky upotřebitelných adič-ních solí s kyselinami, vyznačující se tím,že se azid obecného vzorce R6—N3 nechá reagovat s diaminem obecného vzorceNHz—CH2- (CHz)n—Q- (CH2)n-CHz—NHžve kterém Q představuje skupinu S—S,v poměru 2 moly sloučeniny obecného vzor-ce R6—N3 na každý mol diaminu shora uve-deného vzorce, načež se získaný produktpopřípadě převede na svoji farmaceutickyupotřebitelnou adiční sůl s kyselinou. Severografia, n. p., závod 7, Most