CS212078B1 - Method of gaining the air conidines of the entomoganous sponges - Google Patents

Method of gaining the air conidines of the entomoganous sponges Download PDF

Info

Publication number
CS212078B1
CS212078B1 CS802587A CS258780A CS212078B1 CS 212078 B1 CS212078 B1 CS 212078B1 CS 802587 A CS802587 A CS 802587A CS 258780 A CS258780 A CS 258780A CS 212078 B1 CS212078 B1 CS 212078B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
cultivation
source
conidia
nutrient medium
air
Prior art date
Application number
CS802587A
Other languages
English (en)
Inventor
Anna Samsinakova
Sylvie Kalalova
Jan Kybal
Jaroslav Weiser
Vladislav Vlcek
Jindrich Chromik
Original Assignee
Anna Samsinakova
Sylvie Kalalova
Jan Kybal
Jaroslav Weiser
Vladislav Vlcek
Jindrich Chromik
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Anna Samsinakova, Sylvie Kalalova, Jan Kybal, Jaroslav Weiser, Vladislav Vlcek, Jindrich Chromik filed Critical Anna Samsinakova
Priority to CS802587A priority Critical patent/CS212078B1/cs
Priority to DE19813112264 priority patent/DE3112264A1/de
Priority to FR8106321A priority patent/FR2480304B1/fr
Priority to CA000374634A priority patent/CA1145279A/en
Publication of CS212078B1 publication Critical patent/CS212078B1/cs

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N3/00Spore forming or isolating processes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/30Microbial fungi; Substances produced thereby or obtained therefrom

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Mushroom Cultivation (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Description

(54) Způsob získávání vzdušných konidií entomofágních hub
ANOTACE
Vynález chrání způsob získávání vzdušných konidií entomofágních hub, například houby ' Beauveria bassiana (Bals.) VUill. v průmyslově realizovatelném měřítku, a to stacionární kultivací na tekutém živném mediu, obsahujícím jako zdroj asimilovatelného uhlíku výhodně sorbit. anebo manit a jako zdroj asimilovatelného dusíku kukuřičný výluh, .pepton, hydrolyzát kaseinu nebo ' jiné přirozené zdroje organického dusíku. Vhodné zařízení pro kultivaci představují sterilní vaky z fólie z plastické hmoty, zejména polyethylenu.
Vynález se týká způsobu získávání- - vzdušných konidií entomofágních hub povrchovou kultivací na živném médiu, obsahujícím zdroje · asimilovatelného - uhlíku a 'dusíku a přísadu minerálních - živhých-solí.
Jak je známo, jsou konidie entomofágních hub významně insekticidně účinné na - zemědělské škůdce. Zájem m entomofágní houby jako o potenciální náhradu chemických insekticidů stále stoupá (C. M. ' ' Ignoffo, . E'nvíronm.. Lett. 8, 23, 1975; N. V. Lappa se sp., Zaščita - rastěnij 24, 1977) v souvislosti se snahami o ozdravění životního- prostředí, trvale- znečisťovaného rezidui chemických pesticidů, se- vznikem rezistence proti nim a jejich relativně širokým akčním spektrem. Úspěšné aplikace hub prokázaly přednosti některých druhů, zejména ze skupiny Deuteromycetes, pro praktické užití v ochraně zemědělských plodin. Jedním z. těchto druhů je např. houba Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (J. Král, Š. Neubauer, Zool. ent. - listy 1953, 241; V. M. Goral, N. V. Lappa, Zachist roslin 20, 51, 1974; P. Ferron, Entomophaga 19, 103, 1974; A. - Samšiňáková, A. Čermáková, Sborník čs. akad. - zem. věd, Rostlinná výroba 6, 163, - 1960). Realizaci ve větším měřítku bránily dosud obtíže, spojené s technologicky schůdným způsobem výroby ' velkého množství spor, potřebných k přípravě účinného preparátu _ za ekonomicky výhodných podmínek (McCoy se sp., J. Invert. Pathol. 19, 370, 1972; Entomophaga 20, 229, 1975; O. A. Aljošina se sp. Mikrobiol. promyšlennosť 5,18, 1976; J. Leopold se sp. Zbl. Bakt. Abt. II., 128, 31,1973). Průmyslově byla sice zvládnuta submersní příprava spor v syntetické půdě, ukázalo se však, že za těchto podmínek vznikají blastoartrospory, které ztrácejí ' při finalizaci a konzervaci preparátu (zahušťování, sušení) na virulenci. Proto -se od této metody ustoupilo -a submersních spor se používá ' v případě -potřeby, především ' pro úsporu času, již jen k inokulaci půd pro stacionární kultivaci vzdušných konidií. Vzdušné konidie, odškrcované z konců konidiogenních buněk, zachovávají si i po usušení dlouhodobě nesníženou účinnost (A. Samšiňáková, J. Invert. Pathol. 8, 395, 1966; N.- A. Tělenga, V. M. Goral, Biol. met. borby 1967, 171).
K produkci vzdušných 'konidií jmenované houby se dosud užívalo různých přírodních substrátů, jako jsou brambory, řepa, oblíky apod., a výsledek kultivace byl často hodnocen jen podle hmotnosti narostlého mycelia bez údajů o počtu spor či bez bližší specifikace - rezultujícího biologického preparátu. Podle prvních kvantitativních údajů se podařilo.připravit. na bramborové pastě, plněné do Petriho misek, infekční materiál s obsahem l,5X109 čistých vzdušných konidií v 1 g suché biomasy. Z kultivační' plochy o velikosti 100 cm2 bylo získáno 14X109 konidií ' a na ošetření 1 ha bramborového pole zamořeného mandelinkou bramborovou bylo. zapotřebí 4 kg tohoto preparátu, tj. - 15X1012 konidií (J.- Král, Š. Neubauer, Zool. listy ' V, ' 178, 1956). Řádově stejné - ' výtěžnosti na - 1 g - suchého preparátu bylo dosaženo na melasové půdě,- na odvaru z cukrové řepy či na agarových půdách - (N. A. Tělenga', V. M. Goral, již citováno; A. A.
Jevlachova, -L. G. Tarasov, Biol. - Method of Plant pěst Control; Riga 1968, 131; Ε. ' V. Kononova, Proč. First Jolnt US/USSR Conference, Kijev, 1979, 173). Na základě těchto poznatků byla zavedena výroba komerčního preparátu se standardním titrem 6X109/l g. (C. M. Ignoffo se sp., - Journ. Econ. ' Ent. 72, 562, 1979). Pro účinnou a ekonomickou aplikaci v podmínkách zemědělské velkovýroby jsou však dosavadní možnosti přípravy vhodného houbového preparátu značně omezené, přičemž takto získaný preparát - je drahý.
Uvedený nedostatek se podařilo odstranit vypracováním způsobu získávání vzdušných konidií entomofágních hub, např. houby Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. povrchovou kultivací na živném- médiu obsahujícím zdroje asimilovatelného uhlíku a dusíku a přísadu minerálních živných solí. Podstata tohoto způsobu spočívá v tom, že -se povrchová kultivace provádí na tekutém živném médiu s hodnotou pH 4,0 až 6,0, s výhodou 5,0, obsahujícím jako zdroj asimllovatelného uhlíku zdroj, jehož asimilace probíhá pomaleji než' asimilace glukózy nebo sacharózy, jako jsou ' alkoholické ' cukry, s výhodou 'sorblť anebo manit, v koncentraci 0,5 až 3,0 % hmotn., s výhodou 1,0 % hm., a jako zdroj asimilovatelného dusíku přirozené zdroje organického dusíku, například kukuřičný - výluh, hydrolyzát kaseinu nebo pepton, v - koncentraci 0,8 až 2,0 % hmotn.
Zvláště- výhodně se kultivace provádí v zařízení ke kulti.va’ci mikroorganismů podle čs. AO č. 172 557; tímto zařízením je uzavíratelný sterilní vak z průhledné - nebo - průsvitné plastické hmoty, s ' výhodou polyethylenu, obsahující živné médium, - opatřený alespoň ' jedním ústrojím pro případ kapalných, plynných nebo pevných ingrediencií, potřebných pro -kultivaci, jako živných látek anebo inokula anebo vzduchu. Zmíněný Uzavíratelný sterilní vak je možno účelně umístit na podložku, s výhodou ve tvaru plošiny, -opatřené - temperovacím ústrojím.
Opatřením zásadního významu je při způsobu podle ' vynálezu použití tekutého média, na kterém se ve srovnání s dosud běžnými, pevnými, kašovitými či sypanými substráty podařilo dosáhnout v přepočtu na plošnou jednotku povrchu kultivační - půdy zvýšené konidiace až- o dva řádky a z kultivační plochy o velikosti 100 cm2 - získat 1X1011 čistých vzdušných konidií.
212 0 7 8
Velmi významným faktorem, který má vliv na intenzitu konidiace, je volba vhodného ' zdroje uhlíku. . Nejméně vhodné jsou snadno asimilovatelné hexosy (glukosa a fruktosa), ale i sacharosa, maltosa a rozpustný škrob. - Svědčí to o - vysoké . aktivitě beta-D-fruktofuranosidázy, resp. amylázy - a maltázy, umožňující nelimitovaný průběh glykolýzy a podporující tak růst na úkor konidiace. - Maximální konidiace bylo dosaženo na pomaleji asimilovatelném zdroji, především sorbitolu.
Z průmyslově dostupných zdrojů dusíku se nejlépe osvědčily přirozené organické směsi, jako pepton, hydrolyzát . kaseinu či kukuřičný výluh.
Zcela podobně je možno připravovat -spóry z dalších entomofágních hub, jako například Páecilomyces, Verticillium a Culicinomyceš. .
Předností způsobu podle vynálezu kromě ' kultivace v tekutém médiu - je také možnost využití snadno ve velkém měřítku realizovatelné a na provozní náklady nenáročnétechnologie ' v kultivačních - vacích z polyethylenu, zaručující bezpečně - sterilitu celého procesu, a to i při kultivacích na plochách velikosti několika m2 (čs. autorské osvědčení č. 172 552). Způsob podle vynálezu umožňuje nadto snadnou separaci konldiemi bohaté biomasy, spočívající v prostém odpuštění kultivační půdy po skončené inkubaci. Zbývající biomasa se zbaví přebytečné půdy vylisováním, rozdrobí a usuší v proudu vzduchu.
Bližší podrobnosti způsobu podle vynálezu vyplývají z následujícího příkladu.
Příklad
Ke kultivaci bylo použito kmene Beauveria - bassiana č. 30 z mykologické sbírky oddělení patologie hmyzu Entomologického ústavu - ČSAV, který byl izolován z imaga čeledi Chrysomelidae, s maximální účinností na mandelinku bramborovou. Po 14 - dnech kultivace ná Sabouraudově agaru při 27 °C byly s povrchu - agaru seškrábány konidiospory a smíchány, se sterilním aktivním uhlím. Takto připravená konzerva, uchovávaná při teplotě 7 až - 10 °C, si udržuje . klíčivost a virulenci po'dobu několika let.
Konzervou - byla zaočkována inokulační půda obsahující 2,5 % hmotn. glukózy, - 2,5 % hmotn. rozpustného škrobu, 2 % hmotn. kukuřičného výluhu, 0',2 % - hmotn. uhličitanu vápenatého a 0,5 % hmotn. chloridu sodného, s hodnotou pH 5,0. Inokulum bylo kultivováno na reciprokém třepacím stroji 72 hodin při teplotě 27 °C. Po sterilizaci a ochlazení bylo 2000 ml sporulační půdy zaočkováno 25 ml připraveného inokula. Potom byla půda přepuštěna do polyethylénového kultivačního vaku - (vytvořeného podle čs. AO č. 172 552) o kultivační ploše 0,1 m2. Sporulační půda obsahovala 1 % hmotn. sorbitu, 2,5 % hmotn. peptonu (Bactopepton SPOFA), pH 5,0. Po naplnění vaku byla kultura inkubována v klidu na vodorovné podložce při 27 °C. Od 3. dne bylo přiváděno kontinuálně nad rostoucí - a ' - sporulující mycelium 400 ml vzduchu za minutu. - Inkubace byla - ukončena - po 12 dnech. Bylo získáno - 1,0X1013 vzdušných konidií. z

Claims (1)

  1. PŘEDMĚT VYNALEZU
    Způsob získávání vzdušných konidií entomofágních hub, např. houby Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. povrchovou kultivací na živném médiu obsahujícím zdroje asimilovatelného uhlíku a dusíku a přísadu minerálních živných solí, vyznačující se tím, že - se povrchová kultivace - provádí na tekutém živném médiu, s hodnotou pH 4,0 až 6,0, s výhodou 5,0, obsahujícím jako zdroj asimilovatelného uhlíku, zdroj, jehož asimila ce probíhá pomaleji - než asimilace glukózy nebo sacharózy, jako jsou alkoholické cukry, s výhodou sorbit a nebo manit, v koncentraci 0,5 až 3,0- % hmotn., s výhodou 1,0 % hmotn., á - jako zdroj asimilovatelného dusíku přirozené zdroje organického dusíku, .například kukuřičný výluh, hydrolyzát kaseinu nebo pepton, v koncentraci - 0,8 až 2,0 % hmotnosti.
CS802587A 1980-04-14 1981-01-29 Method of gaining the air conidines of the entomoganous sponges CS212078B1 (en)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS802587A CS212078B1 (en) 1981-01-29 1981-01-29 Method of gaining the air conidines of the entomoganous sponges
DE19813112264 DE3112264A1 (de) 1981-01-29 1981-03-27 Konidien entomophager pilze und verfahren zu ihrer gewinnung
FR8106321A FR2480304B1 (cs) 1981-01-29 1981-03-30
CA000374634A CA1145279A (en) 1980-04-14 1981-04-03 Process for the production of conidia of entomophagic fungi

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS802587A CS212078B1 (en) 1981-01-29 1981-01-29 Method of gaining the air conidines of the entomoganous sponges

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS212078B1 true CS212078B1 (en) 1982-02-26

Family

ID=5363420

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS802587A CS212078B1 (en) 1980-04-14 1981-01-29 Method of gaining the air conidines of the entomoganous sponges

Country Status (4)

Country Link
CA (1) CA1145279A (cs)
CS (1) CS212078B1 (cs)
DE (1) DE3112264A1 (cs)
FR (1) FR2480304B1 (cs)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU664888B2 (en) * 1992-05-13 1995-12-07 W.R. Grace & Co.-Conn. Novel toxin producing fungal pathogen and uses
WO1993024013A2 (en) * 1992-05-27 1993-12-09 Ecoscience Corporation Method for storing fungal cultures and conidia
DE10308170A1 (de) * 2002-03-21 2003-11-20 Hartmut Bindara Abbau von zyklischen, aromatischen und aliphatischen Kohlenwasserstoffen durch einen Pilz aus der Gattung Fusarium

Also Published As

Publication number Publication date
CA1145279A (en) 1983-04-26
FR2480304A1 (cs) 1981-10-16
DE3112264C2 (cs) 1987-06-11
FR2480304B1 (cs) 1986-03-21
DE3112264A1 (de) 1982-08-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5360607A (en) Method for production and use of pathogenic fungal preparation for pest control
Feng et al. Production, formulation and application of the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana for insect control: current status
Devi et al. Cost-effective production of Bacillus thuringiensis by solid-state fermentation
BRPI0815990A2 (pt) microescleródios isolados de um fundo entomopatogênico, composição contendo microescleródios de um fungo entomopatogênico, método para controle de insetos, método de produção a partir de um fungo entomopatogênico de uma concentração de microescleródios fúngicos tolerantes á dessecação
WO2016111480A1 (ko) 곤충병원성 보베리아 바시아나 및 이를 이용한 농업해충 방제용 액상제제
Lumsden et al. Selection, production, formulation and commercial use of plant disease biocontrol fungi: problems and
Warrior et al. Formulation of biological control agents for pest and disease management
RU2751916C1 (ru) Штамм энтомопатогенного гриба Beauveria bassiana для защиты сельскохозяйственных растений от насекомых и клещей- вредителей растений.
Wicklow et al. Sporogenic germination of sclerotia in Aspergillus flavus and A. parasiticus
JPH078769B2 (ja) 土壌線虫駆除方法およびそれに用いる線虫駆除組成物
US7033586B2 (en) Insecticidal Paecilomyces tenuipes strain FERM BP-7861
Zemek et al. Inoculation of sphagnum-based soil substrate with entomopathogenic fungus Isaria fumosorosea (Hypocreales: Cordycipitaceae)
CS212078B1 (en) Method of gaining the air conidines of the entomoganous sponges
Shukla et al. Entomopathogenic fungi
Moslim et al. Pathogenicity of granule formulations of Metarhizium anisopliae against the larvae of the oil palm rhinoceros beetle, Oryctes rhinoceros (L.)
US4246258A (en) Biological control system
CN109749970B (zh) 植物内芽孢杆菌在抗植物寄生线虫中的应用
US6511821B2 (en) Process for the preparation of novel growth media from distillation and other plant wastes for mass multiplication of bio-control fungi
Mazodze et al. Efficacy of Metarhizium anisopliae against Heteronychus licas (Scarabaedae: Dynastinae) in sugarcane in Zimbabwe
Mircetich et al. Existence of Phytophthora cinnamomi as chlamydospores and oospores in roots and soil
Nyam et al. Control of subterranean termite Coptotermes curvignathus (Isoptera: Rhinotermitidae) by entomopathogen Metarhizium anisopliae Var. Anisopliae cultured in liquid state fermentation
Stanghellini et al. Efficacy of Beauveria bassiana on colonized millet seed as a biopesticide for the control of shore flies
JP4448731B2 (ja) 新規微生物及びその利用
CN103704074A (zh) 绿僵菌喷施堆肥场地地面防治白星花金龟幼虫的方法
Burges et al. Bacteria and fungi as insecticides