CS212078B1 - Method of gaining the air conidines of the entomoganous sponges - Google Patents
Method of gaining the air conidines of the entomoganous sponges Download PDFInfo
- Publication number
- CS212078B1 CS212078B1 CS802587A CS258780A CS212078B1 CS 212078 B1 CS212078 B1 CS 212078B1 CS 802587 A CS802587 A CS 802587A CS 258780 A CS258780 A CS 258780A CS 212078 B1 CS212078 B1 CS 212078B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- cultivation
- source
- conidia
- nutrient medium
- air
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims abstract description 10
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- -1 polyethylene Polymers 0.000 claims abstract description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 7
- 241000751139 Beauveria bassiana Species 0.000 claims abstract description 6
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims abstract description 6
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims abstract description 6
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 claims abstract description 6
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims abstract description 4
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims abstract description 4
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 4
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims description 4
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 3
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 claims description 3
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 claims description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 3
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 claims description 2
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 claims 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 abstract description 5
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 abstract description 5
- 239000011888 foil Substances 0.000 abstract description 3
- 239000004033 plastic Substances 0.000 abstract description 3
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 108010079058 casein hydrolysate Proteins 0.000 abstract 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 7
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 3
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 3
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 241001529716 Entomophaga Species 0.000 description 2
- 241000258916 Leptinotarsa decemlineata Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 1
- 241000219310 Beta vulgaris subsp. vulgaris Species 0.000 description 1
- 241001124134 Chrysomelidae Species 0.000 description 1
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 239000006159 Sabouraud's agar Substances 0.000 description 1
- 235000021536 Sugar beet Nutrition 0.000 description 1
- 241000082085 Verticillium <Phyllachorales> Species 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 238000001720 action spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000012271 agricultural production Methods 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 102000016679 alpha-Glucosidases Human genes 0.000 description 1
- 108010028144 alpha-Glucosidases Proteins 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 229940025131 amylases Drugs 0.000 description 1
- 108010051210 beta-Fructofuranosidase Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000012272 crop production Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 1
- 235000015071 dressings Nutrition 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 230000034659 glycolysis Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 150000002402 hexoses Chemical class 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002917 insecticide Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 239000006225 natural substrate Substances 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000012449 sabouraud dextrose agar Substances 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 230000028070 sporulation Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 238000005496 tempering Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N3/00—Spore forming or isolating processes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/30—Microbial fungi; Substances produced thereby or obtained therefrom
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Virology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Mushroom Cultivation (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Description
(54) Způsob získávání vzdušných konidií entomofágních hub(54) A method of obtaining aerial conidia of entomophagous fungi
ANOTACEANNOTATION
Vynález chrání způsob získávání vzdušných konidií entomofágních hub, například houby ' Beauveria bassiana (Bals.) VUill. v průmyslově realizovatelném měřítku, a to stacionární kultivací na tekutém živném mediu, obsahujícím jako zdroj asimilovatelného uhlíku výhodně sorbit. anebo manit a jako zdroj asimilovatelného dusíku kukuřičný výluh, .pepton, hydrolyzát kaseinu nebo ' jiné přirozené zdroje organického dusíku. Vhodné zařízení pro kultivaci představují sterilní vaky z fólie z plastické hmoty, zejména polyethylenu.The invention protects a method for obtaining aerial conidia of entomophagous fungi, for example Beauveria bassiana (Bals.) Vill. on an industrially feasible scale, by stationary cultivation on a liquid nutrient medium containing preferably sorbitol as a source of assimilable carbon. or mannitol, and as a source of assimilable nitrogen, corn steep liquor, peptone, casein hydrolyzate or other natural sources of organic nitrogen. Sterile plastic foil bags, especially polyethylene, are suitable devices for culture.
Vynález se týká způsobu získávání- - vzdušných konidií entomofágních hub povrchovou kultivací na živném médiu, obsahujícím zdroje · asimilovatelného - uhlíku a 'dusíku a přísadu minerálních - živhých-solí.The invention relates to a method for obtaining airborne conidia of entomophagous fungi by surface culture on a nutrient medium comprising sources of assimilable carbon and nitrogen and the addition of mineral living salts.
Jak je známo, jsou konidie entomofágních hub významně insekticidně účinné na - zemědělské škůdce. Zájem m entomofágní houby jako o potenciální náhradu chemických insekticidů stále stoupá (C. M. ' ' Ignoffo, . E'nvíronm.. Lett. 8, 23, 1975; N. V. Lappa se sp., Zaščita - rastěnij 24, 1977) v souvislosti se snahami o ozdravění životního- prostředí, trvale- znečisťovaného rezidui chemických pesticidů, se- vznikem rezistence proti nim a jejich relativně širokým akčním spektrem. Úspěšné aplikace hub prokázaly přednosti některých druhů, zejména ze skupiny Deuteromycetes, pro praktické užití v ochraně zemědělských plodin. Jedním z. těchto druhů je např. houba Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (J. Král, Š. Neubauer, Zool. ent. - listy 1953, 241; V. M. Goral, N. V. Lappa, Zachist roslin 20, 51, 1974; P. Ferron, Entomophaga 19, 103, 1974; A. - Samšiňáková, A. Čermáková, Sborník čs. akad. - zem. věd, Rostlinná výroba 6, 163, - 1960). Realizaci ve větším měřítku bránily dosud obtíže, spojené s technologicky schůdným způsobem výroby ' velkého množství spor, potřebných k přípravě účinného preparátu _ za ekonomicky výhodných podmínek (McCoy se sp., J. Invert. Pathol. 19, 370, 1972; Entomophaga 20, 229, 1975; O. A. Aljošina se sp. Mikrobiol. promyšlennosť 5,18, 1976; J. Leopold se sp. Zbl. Bakt. Abt. II., 128, 31,1973). Průmyslově byla sice zvládnuta submersní příprava spor v syntetické půdě, ukázalo se však, že za těchto podmínek vznikají blastoartrospory, které ztrácejí ' při finalizaci a konzervaci preparátu (zahušťování, sušení) na virulenci. Proto -se od této metody ustoupilo -a submersních spor se používá ' v případě -potřeby, především ' pro úsporu času, již jen k inokulaci půd pro stacionární kultivaci vzdušných konidií. Vzdušné konidie, odškrcované z konců konidiogenních buněk, zachovávají si i po usušení dlouhodobě nesníženou účinnost (A. Samšiňáková, J. Invert. Pathol. 8, 395, 1966; N.- A. Tělenga, V. M. Goral, Biol. met. borby 1967, 171).As is known, conidia of entomophagous fungi are significantly insecticidally effective on agricultural pests. The interest of entomophagous fungi as a potential substitute for chemical insecticides is steadily increasing (CM 'Ignoffo, Einvronm. Lett. 8, 23, 1975; NV Lappa et al., Zashchita-rasteni 24, 1977) in connection with efforts to the recovery of the environment, permanently polluted residues of chemical pesticides, with the emergence of resistance to them and their relatively wide action spectrum. The successful application of fungi has shown the advantages of some species, especially of the Deuteromycetes group, for practical use in crop protection. One of these species is, for example, the fungus Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (J. Kral, S. Neubauer, Zool. Ent. - listy 1953, 241; VM Goral, NV Lappa, Zachist roslin 20, 51, 1974; P. Ferron, Entomophaga 19, 103, 1974; A. - Samsinakova, A (Čermáková, Proceedings of the Czechoslovak Academy of Sciences, Crop Production 6, 163, - 1960). To a large extent, the difficulties associated with the technologically feasible method of producing the large number of spores needed to prepare the active preparation under economically advantageous conditions (McCoy et al., J. Invert. Pathol. 19, 370, 1972; Entomophaga 20, 229, 1975, OA Alyosina et al., Microbiol., S. 5,18, 1976; J. Leopold et al., Zbl. Bakt. Abt. II., 128, 31, 1973). Although submersible spores preparation in synthetic soil has been industrially managed, it has been shown that under these conditions blastoarthrophores are formed which lose in the finalization and preservation of the preparation (concentration, drying) to virulence. Therefore, this method has been abandoned and submersive disputes are used 'in case of need, in particular' to save time, only to inoculate soils for stationary cultivation of air conidia. Air conidia, constricted from the ends of conidiogenic cells, retain long-term unimpaired efficacy even after drying (A. Samsiňáková, J. Invert. Pathol. 8, 395, 1966; N.-Tělenga, VM Goral, Biol. , 171).
K produkci vzdušných 'konidií jmenované houby se dosud užívalo různých přírodních substrátů, jako jsou brambory, řepa, oblíky apod., a výsledek kultivace byl často hodnocen jen podle hmotnosti narostlého mycelia bez údajů o počtu spor či bez bližší specifikace - rezultujícího biologického preparátu. Podle prvních kvantitativních údajů se podařilo.připravit. na bramborové pastě, plněné do Petriho misek, infekční materiál s obsahem l,5X109 čistých vzdušných konidií v 1 g suché biomasy. Z kultivační' plochy o velikosti 100 cm2 bylo získáno 14X109 konidií ' a na ošetření 1 ha bramborového pole zamořeného mandelinkou bramborovou bylo. zapotřebí 4 kg tohoto preparátu, tj. - 15X1012 konidií (J.- Král, Š. Neubauer, Zool. listy ' V, ' 178, 1956). Řádově stejné - ' výtěžnosti na - 1 g - suchého preparátu bylo dosaženo na melasové půdě,- na odvaru z cukrové řepy či na agarových půdách - (N. A. Tělenga', V. M. Goral, již citováno; A. A.To date, various natural substrates such as potatoes, beets, dressings, etc. have been used to produce airborne conidia, and the result of cultivation has often been evaluated only by the weight of the grown mycelium without spore counts or without a more specific specification - the resulting biological preparation. According to the first quantitative data, we managed to prepare. on potato paste, filled into petri dishes, infectious material containing 1,5X10 9 pure air conidia in 1 g dry biomass. 14X10 9 conidia were obtained from a 100 cm 2 culture area and were treated for 1 ha of potato field infested with Colorado potato beetle. 4 kg of this preparation is needed, i.e. - 15X10 12 conidia (J.-Kral, S. Neubauer, Zool. listy 'V,' 178, 1956). Ordinary yields per g of dry preparation were obtained on molasses soil, on sugar beet decoction or on agar soils - (NA Tělenga ', VM Goral, cited above; AA)
Jevlachova, -L. G. Tarasov, Biol. - Method of Plant pěst Control; Riga 1968, 131; Ε. ' V. Kononova, Proč. First Jolnt US/USSR Conference, Kijev, 1979, 173). Na základě těchto poznatků byla zavedena výroba komerčního preparátu se standardním titrem 6X109/l g. (C. M. Ignoffo se sp., - Journ. Econ. ' Ent. 72, 562, 1979). Pro účinnou a ekonomickou aplikaci v podmínkách zemědělské velkovýroby jsou však dosavadní možnosti přípravy vhodného houbového preparátu značně omezené, přičemž takto získaný preparát - je drahý.Jevlachova, -LG Tarasov, Biol. - Method of Plant Fist Control; Riga 1968, 131; Ε. 'V. Kononova, Proc. First Jolnt US / USSR Conference, Kiev, 1979, 173). Based on these findings, the production of a commercial preparation with a standard titer of 6X10 9 / lg was introduced (CM Ignoffo et al., Journ. Econ. Ent. 72, 562, 1979). However, for efficient and economical application under the conditions of large-scale agricultural production, the existing possibilities for preparing a suitable mushroom preparation are considerably limited, and the preparation thus obtained is expensive.
Uvedený nedostatek se podařilo odstranit vypracováním způsobu získávání vzdušných konidií entomofágních hub, např. houby Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. povrchovou kultivací na živném- médiu obsahujícím zdroje asimilovatelného uhlíku a dusíku a přísadu minerálních živných solí. Podstata tohoto způsobu spočívá v tom, že -se povrchová kultivace provádí na tekutém živném médiu s hodnotou pH 4,0 až 6,0, s výhodou 5,0, obsahujícím jako zdroj asimllovatelného uhlíku zdroj, jehož asimilace probíhá pomaleji než' asimilace glukózy nebo sacharózy, jako jsou ' alkoholické ' cukry, s výhodou 'sorblť anebo manit, v koncentraci 0,5 až 3,0 % hmotn., s výhodou 1,0 % hm., a jako zdroj asimilovatelného dusíku přirozené zdroje organického dusíku, například kukuřičný - výluh, hydrolyzát kaseinu nebo pepton, v - koncentraci 0,8 až 2,0 % hmotn.This deficiency has been overcome by developing a method for obtaining aerial conidia of entomophagous fungi, such as Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. by surface culture on a nutrient medium containing sources of assimilable carbon and nitrogen and the addition of mineral nutrient salts. The principle of the method is that the surface cultivation is carried out on a liquid nutrient medium having a pH of 4.0 to 6.0, preferably 5.0, containing as a source of assimilable carbon a source whose assimilation proceeds more slowly than the assimilation of glucose, or sucrose such as 'alcoholic' sugars, preferably sorbitol or mannitol, at a concentration of 0.5 to 3.0 wt%, preferably 1.0 wt%, and as a source of assimilable nitrogen a natural source of organic nitrogen, such as corn - leach, casein hydrolyzate or peptone, at a concentration of 0.8 to 2.0% by weight;
Zvláště- výhodně se kultivace provádí v zařízení ke kulti.va’ci mikroorganismů podle čs. AO č. 172 557; tímto zařízením je uzavíratelný sterilní vak z průhledné - nebo - průsvitné plastické hmoty, s ' výhodou polyethylenu, obsahující živné médium, - opatřený alespoň ' jedním ústrojím pro případ kapalných, plynných nebo pevných ingrediencií, potřebných pro -kultivaci, jako živných látek anebo inokula anebo vzduchu. Zmíněný Uzavíratelný sterilní vak je možno účelně umístit na podložku, s výhodou ve tvaru plošiny, -opatřené - temperovacím ústrojím.Particularly preferably, the cultivation is carried out in a plant for culturing microorganisms according to U.S. Pat. AO No. 172,557; the device is a resealable sterile bag of transparent - or - translucent plastic material, preferably polyethylene, containing a nutrient medium, - provided with at least one device in the case of liquid, gaseous or solid ingredients required for cultivation as nutrients or inoculum; air. Said sealable sterile bag may conveniently be placed on a support, preferably in the form of a platform, provided with a tempering device.
Opatřením zásadního významu je při způsobu podle ' vynálezu použití tekutého média, na kterém se ve srovnání s dosud běžnými, pevnými, kašovitými či sypanými substráty podařilo dosáhnout v přepočtu na plošnou jednotku povrchu kultivační - půdy zvýšené konidiace až- o dva řádky a z kultivační plochy o velikosti 100 cm2 - získat 1X1011 čistých vzdušných konidií.An important measure of the invention is the use of a liquid medium which, compared to conventional, solid, slurry or loose substrates, has been able to achieve an increased conidiation of up to two lines per unit area of the cultivation-soil surface and size 100 cm 2 - get 1X10 11 pure air conidia.
212 0 7 8212 0 7 7
Velmi významným faktorem, který má vliv na intenzitu konidiace, je volba vhodného ' zdroje uhlíku. . Nejméně vhodné jsou snadno asimilovatelné hexosy (glukosa a fruktosa), ale i sacharosa, maltosa a rozpustný škrob. - Svědčí to o - vysoké . aktivitě beta-D-fruktofuranosidázy, resp. amylázy - a maltázy, umožňující nelimitovaný průběh glykolýzy a podporující tak růst na úkor konidiace. - Maximální konidiace bylo dosaženo na pomaleji asimilovatelném zdroji, především sorbitolu.A very important factor affecting the intensity of conidiation is the choice of a suitable carbon source. . The least suitable are easily assimilable hexoses (glucose and fructose), but also sucrose, maltose and soluble starch. - It shows - high. beta-D-fructofuranosidase activity, respectively. amylases - and maltases, enabling the unconstrained course of glycolysis and thus supporting growth at the expense of conidation. - Maximum conidiation was achieved on a slower assimilable source, especially sorbitol.
Z průmyslově dostupných zdrojů dusíku se nejlépe osvědčily přirozené organické směsi, jako pepton, hydrolyzát . kaseinu či kukuřičný výluh.Of the commercially available nitrogen sources, natural organic mixtures such as peptone, hydrolyzate have proven to be the best. casein or corn steep liquor.
Zcela podobně je možno připravovat -spóry z dalších entomofágních hub, jako například Páecilomyces, Verticillium a Culicinomyceš. .Similarly, spores can be prepared from other entomophagous fungi, such as, for example, Páecilomyces, Verticillium and Culicinomycete. .
Předností způsobu podle vynálezu kromě ' kultivace v tekutém médiu - je také možnost využití snadno ve velkém měřítku realizovatelné a na provozní náklady nenáročnétechnologie ' v kultivačních - vacích z polyethylenu, zaručující bezpečně - sterilitu celého procesu, a to i při kultivacích na plochách velikosti několika m2 (čs. autorské osvědčení č. 172 552). Způsob podle vynálezu umožňuje nadto snadnou separaci konldiemi bohaté biomasy, spočívající v prostém odpuštění kultivační půdy po skončené inkubaci. Zbývající biomasa se zbaví přebytečné půdy vylisováním, rozdrobí a usuší v proudu vzduchu.The advantage of the process according to the invention in addition to the cultivation in liquid medium - is also the possibility of using large-scale, easy-to-use and cost-effective technology in polyethylene cultivation bags, guaranteeing the sterility of the whole process safely, even for cultivations over several m 2 (Czech author's certificate no. 172 552). In addition, the method according to the invention makes it possible to easily separate the conjugate-rich biomass by simply draining the culture medium after the incubation has ended. The remaining biomass is freed from excess soil by pressing, crumbling and drying in an air stream.
Bližší podrobnosti způsobu podle vynálezu vyplývají z následujícího příkladu.Further details of the process according to the invention can be seen from the following example.
PříkladExample
Ke kultivaci bylo použito kmene Beauveria - bassiana č. 30 z mykologické sbírky oddělení patologie hmyzu Entomologického ústavu - ČSAV, který byl izolován z imaga čeledi Chrysomelidae, s maximální účinností na mandelinku bramborovou. Po 14 - dnech kultivace ná Sabouraudově agaru při 27 °C byly s povrchu - agaru seškrábány konidiospory a smíchány, se sterilním aktivním uhlím. Takto připravená konzerva, uchovávaná při teplotě 7 až - 10 °C, si udržuje . klíčivost a virulenci po'dobu několika let.The cultivation was carried out using the strain Beauveria - bassiana No. 30 from the mycological collection of the Department of Insect Pathology of the Institute of Entomology - ČSAV, which was isolated from an image of the family Chrysomelidae, with maximum efficiency on Colorado potato beetle. After 14 days of cultivation on Sabouraud agar at 27 ° C, conidiospores were scraped from the agar surface and mixed with sterile activated carbon. The can thus prepared, stored at a temperature of 7 to -10 ° C, retains. germination and virulence for several years.
Konzervou - byla zaočkována inokulační půda obsahující 2,5 % hmotn. glukózy, - 2,5 % hmotn. rozpustného škrobu, 2 % hmotn. kukuřičného výluhu, 0',2 % - hmotn. uhličitanu vápenatého a 0,5 % hmotn. chloridu sodného, s hodnotou pH 5,0. Inokulum bylo kultivováno na reciprokém třepacím stroji 72 hodin při teplotě 27 °C. Po sterilizaci a ochlazení bylo 2000 ml sporulační půdy zaočkováno 25 ml připraveného inokula. Potom byla půda přepuštěna do polyethylénového kultivačního vaku - (vytvořeného podle čs. AO č. 172 552) o kultivační ploše 0,1 m2. Sporulační půda obsahovala 1 % hmotn. sorbitu, 2,5 % hmotn. peptonu (Bactopepton SPOFA), pH 5,0. Po naplnění vaku byla kultura inkubována v klidu na vodorovné podložce při 27 °C. Od 3. dne bylo přiváděno kontinuálně nad rostoucí - a ' - sporulující mycelium 400 ml vzduchu za minutu. - Inkubace byla - ukončena - po 12 dnech. Bylo získáno - 1,0X1013 vzdušných konidií. z Preservative - seed medium containing 2.5 wt. % glucose, - 2.5 wt. % soluble starch, 2 wt. % corn extract, 0 ', 2 wt. % calcium carbonate and 0.5 wt. sodium chloride, pH 5.0. The inoculum was cultured on a reciprocating shaker for 72 hours at 27 ° C. After sterilization and cooling, 2000 ml of sporula broth was inoculated with 25 ml of prepared inoculum. Then, the soil was transferred to a polyethylene culture bag - (constructed according to No. AO No. 172 552) with a cultivation area of 0.1 m 2. Sporulation broth contained 1 wt. % sorbitol, 2.5 wt. peptone (Bactopepton SPOFA), pH 5.0. After the bag was filled, the culture was incubated at rest on a horizontal pad at 27 ° C. From day 3, 400 ml of air per minute was continuously fed over the growing - and 'sporulating mycelium. - Incubation was terminated after 12 days. Obtained - 1.0X10 13 air conidia. of
Claims (1)
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS802587A CS212078B1 (en) | 1981-01-29 | 1981-01-29 | Method of gaining the air conidines of the entomoganous sponges |
| DE19813112264 DE3112264A1 (en) | 1981-01-29 | 1981-03-27 | Conidia of entomophagous fungi and process for obtaining them |
| FR8106321A FR2480304B1 (en) | 1981-01-29 | 1981-03-30 | |
| CA000374634A CA1145279A (en) | 1980-04-14 | 1981-04-03 | Process for the production of conidia of entomophagic fungi |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS802587A CS212078B1 (en) | 1981-01-29 | 1981-01-29 | Method of gaining the air conidines of the entomoganous sponges |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS212078B1 true CS212078B1 (en) | 1982-02-26 |
Family
ID=5363420
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS802587A CS212078B1 (en) | 1980-04-14 | 1981-01-29 | Method of gaining the air conidines of the entomoganous sponges |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| CA (1) | CA1145279A (en) |
| CS (1) | CS212078B1 (en) |
| DE (1) | DE3112264A1 (en) |
| FR (1) | FR2480304B1 (en) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU664888B2 (en) * | 1992-05-13 | 1995-12-07 | W.R. Grace & Co.-Conn. | Novel toxin producing fungal pathogen and uses |
| BR9306616A (en) * | 1992-05-27 | 1998-12-08 | Ecoscience Corp | Method for storing fungal cultures and conidia |
| DE10308170A1 (en) * | 2002-03-21 | 2003-11-20 | Hartmut Bindara | Non-toxic and eco-friendly breakdown of polycyclic, cyclic, aromatic or aliphatic hydrocarbons in e.g. waste water or contaminated soil is effected using Fusarium fungus |
-
1981
- 1981-01-29 CS CS802587A patent/CS212078B1/en unknown
- 1981-03-27 DE DE19813112264 patent/DE3112264A1/en active Granted
- 1981-03-30 FR FR8106321A patent/FR2480304B1/fr not_active Expired
- 1981-04-03 CA CA000374634A patent/CA1145279A/en not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR2480304B1 (en) | 1986-03-21 |
| DE3112264A1 (en) | 1982-08-12 |
| CA1145279A (en) | 1983-04-26 |
| DE3112264C2 (en) | 1987-06-11 |
| FR2480304A1 (en) | 1981-10-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5360607A (en) | Method for production and use of pathogenic fungal preparation for pest control | |
| Feng et al. | Production, formulation and application of the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana for insect control: current status | |
| Kerry et al. | Observations on the introduction of Verticillium chlamydosporium and other parasitic fungi into soil for control of the cereal cyst‐nematode Heterodera avenue | |
| Devi et al. | Cost-effective production of Bacillus thuringiensis by solid-state fermentation | |
| BRPI0815990A2 (en) | microsclerotia isolated from an entomopathogenic background, composition containing microsclerotia from an entomopathogenic fungus, method for controlling insects, method of producing from an entomopathogenic fungus a concentration of desiccation-tolerant fungal microsclerotia | |
| WO2016111480A1 (en) | Entomopathogenic beauveria bassiana, and agricultural pest control liquid preparation using same | |
| Lumsden et al. | Selection, production, formulation and commercial use of plant disease biocontrol fungi: problems and | |
| Warrior et al. | Formulation of biological control agents for pest and disease management | |
| JPH078769B2 (en) | Method for controlling soil nematode and nematode control composition used therefor | |
| Wicklow et al. | Sporogenic germination of sclerotia in Aspergillus flavus and A. parasiticus | |
| RU2751916C1 (en) | Strain of entomopathogenic fungus beauveria bassiana for protection of agricultural plants from insects and mites, plant pests | |
| US7033586B2 (en) | Insecticidal Paecilomyces tenuipes strain FERM BP-7861 | |
| CS212078B1 (en) | Method of gaining the air conidines of the entomoganous sponges | |
| Powell | The commercial exploitation of microorganisms in agriculture | |
| Zemek et al. | Inoculation of sphagnum-based soil substrate with entomopathogenic fungus Isaria fumosorosea (Hypocreales: Cordycipitaceae) | |
| Moslim et al. | Pathogenicity of granule formulations of Metarhizium anisopliae against the larvae of the oil palm rhinoceros beetle, Oryctes rhinoceros (L.) | |
| US4246258A (en) | Biological control system | |
| JPH0515364A (en) | Novel Bacillus strain and pest control agent | |
| US6511821B2 (en) | Process for the preparation of novel growth media from distillation and other plant wastes for mass multiplication of bio-control fungi | |
| CN109749970B (en) | Application of Endobacillus plantarum in resistance to plant parasitic nematodes | |
| Mircetich et al. | Existence of Phytophthora cinnamomi as chlamydospores and oospores in roots and soil | |
| Mazodze et al. | Efficacy of Metarhizium anisopliae against Heteronychus licas (Scarabaedae: Dynastinae) in sugarcane in Zimbabwe | |
| Nyam et al. | Control of subterranean termite Coptotermes curvignathus (Isoptera: Rhinotermitidae) by entomopathogen Metarhizium anisopliae Var. Anisopliae cultured in liquid state fermentation | |
| JP4448731B2 (en) | New microorganisms and their use | |
| Stanghellini et al. | Efficacy of Beauveria bassiana on colonized millet seed as a biopesticide for the control of shore flies |