CS206294B1 - Method of isolation of the albumine from the waste fraction of the humen fraction - Google Patents
Method of isolation of the albumine from the waste fraction of the humen fraction Download PDFInfo
- Publication number
- CS206294B1 CS206294B1 CS516979A CS516979A CS206294B1 CS 206294 B1 CS206294 B1 CS 206294B1 CS 516979 A CS516979 A CS 516979A CS 516979 A CS516979 A CS 516979A CS 206294 B1 CS206294 B1 CS 206294B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- albumin
- ethanol
- proteins
- fraction
- paste
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 15
- 239000002699 waste material Substances 0.000 title claims description 12
- 238000002955 isolation Methods 0.000 title claims description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 59
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims description 34
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 34
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 32
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 32
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 11
- DZTHIGRZJZPRDV-UHFFFAOYSA-N N-acetyltryptophan Chemical compound C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C)C(O)=O)=CNC2=C1 DZTHIGRZJZPRDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000002574 poison Substances 0.000 claims description 6
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 claims description 6
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 6
- 229960005480 sodium caprylate Drugs 0.000 claims description 5
- BYKRNSHANADUFY-UHFFFAOYSA-M sodium octanoate Chemical compound [Na+].CCCCCCCC([O-])=O BYKRNSHANADUFY-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 4
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 2
- 238000012869 ethanol precipitation Methods 0.000 claims description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 2
- 230000036512 infertility Effects 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- -1 sodium carboxylate Chemical class 0.000 claims description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims 2
- 102000002572 Alpha-Globulins Human genes 0.000 claims 1
- 108010068307 Alpha-Globulins Proteins 0.000 claims 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 claims 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 claims 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 claims 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 claims 1
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 claims 1
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 claims 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 claims 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 claims 1
- 102000001621 Mucoproteins Human genes 0.000 claims 1
- 108010093825 Mucoproteins Proteins 0.000 claims 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 claims 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 claims 1
- 235000020097 white wine Nutrition 0.000 claims 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 3
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- IYLLULUTZPKQBW-UHFFFAOYSA-N Acrinol Chemical compound CC(O)C(O)=O.C1=C(N)C=CC2=C(N)C3=CC(OCC)=CC=C3N=C21 IYLLULUTZPKQBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000006424 Flood reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 239000010425 asbestos Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-M octanoate Chemical compound CCCCCCCC([O-])=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052895 riebeckite Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
ČESKOSLOVENSKASOCIALISTICKÁREPUBLIKA( 19 ) POPIS VYNALEZU K AUTORSKÉMU OSVEDČENIU 206 294 ζ(11) (M) (51) Int. Cl.3 A 61 K 37/02// A 61 K 35/16 (22) Přihlášené 25 07 79(21) (PV 5169-79) ÚŘAD PRO VYNÁLEZY (40) Zverejnené 30 06 80 A OBJEVY (45) Vydané 15 03 83 (75)
Autor vynálezu BULÍK JOZEF ing. CSc., PREŠOV (54) Spósob izolácie albuminu z odpadnej frakcie řudskej plazmy
Vynález sa týká spósobu izolácie albuminuz odpadnej frakcie fudskej plazmy, ktorý sav roztoku stabilizuje a ostatně bielkoviny satepelne denaturujú a potom precipitujú eta-nolom.
Podlá literárnych údajov najznámejšie izo-lačně postupy albuminu z fudskej plazmy sú:Etanolová frakcionácia [E. J. Cohn, L. E.Strong, W. L. Hughes, D. J. Mulford, J. Ash-worth, M. Melin, H. L. Taylor: J. Amer.Chem. Soc., 68, 459, (1946)] a jej modifiká-cia (Nitschmann H., Kistler P., Lergie W.:Helv. Chim. Acta, 37, 866, [1954]).
Rivanolová metoda· [Rejnek J., Bednářik T.,Mašek J.: Cs. farm., 10, 407, (1961)].
Izolácia pomocou iontomeničov [Rybák M.,Rejnek J.: Cs. farm., 7, 80, (1958)].
Izolácia etylenglykolom [Curling J. M., Borg-lóf J., Lindouist L. O., Briksson S.: Vox sang.,33, 97, (1977), Vilioen M.: Vox sang., 35, 268,(1978) (Garcia L. A., Ordotnez G. A.: Pat.USA No 4025500)].
Tepelno-etanolová metoda [Hoch H., Chanu-tin A.: Arch. of biochem. and biophysic, 51,27, (1954), Lundblad J. I.: Vox sang., 5, 122,(1960), Gabr Y., Soliman H. R.: Acta biolog,et med. ger., 27, 341, (1971), Schneider W.,Lefewre H., Friedler H., Mc Carty L. I.: Blut,30j 121) (1875), Schneider W,, Wolter D., McCarty L. J.: Folia haematol., 104, 116, (1977)].
Pri izolácii albuminu etanolovou frakcio-náciou krvnej plazmy vzniká bielkovinovýodpad vo formě frakcie IV. Táto sa izolujepri pH 5,8, iónovej sile 0,1, 40 objemových %etanolu a teplote —6 °C. Uvedená frakciaobsahuje niekolko druhov plazmatickýchbielkovin, včítane albuminu, kvantitativnézískanie kterého bežne používanými metoda-mi sa nedaří realizovat.
Jedným z možných spósobov kvantitativ-ného získania albuminu z odpadnej frakcie IVje modifikácia tepelno-etanolovej metody,ktorá povodně ako východzí materiál využívá1’udskú plazmu, v ktorej zastúpenie jednotli-vých bielkovin je podstatné iné ako v odpad-nej frakcií IV. Nevýhodou týchto metod je,že sa pracuje pri nízkom percente bielkovinvýchodzieho materiálu, čo zvyšuje nároky napracovně objemy, nízkej koncentrácii stabili-zátora (0,004 M Na kaprylát) a vysokom per-cente etanolu, čo pri hraničných teplotách(70 °C) móže dochádzať k inreverzibilnýmzměnám v molekule albuminu. Podstatnýmproblémom pri tepelno-etanolovej metódepřípravy albuminu je separácia denaturova-ných balastných bielkovin, ktorá sa spravidlaprevádza na špeciálnych filtroch, alebo sa vy-zráža polyetylénglykolom.
Originálnost navrhovanej izolácie albumi-nu z odpadnej frakcie IV je v tom, že pri de- 206294
Claims (3)
- 2 naturácii balastných bielkovín sa používáoptimálna koncentrácia kombinovaných sta-bilizátorov za přítomnosti nízkého· percen-ta etanolu a vysokého percenta bielkovín, čomá priaznivý vplyv na kvalitu výrobku a vý-robnú kapacitu. Jeden z najnáročnějších technologickýchstupňov, a to izolácia denaturovaných bielko-vín sa prevádza účinným, jednoduchým a za-tial’ pri tomto spósobe izolácie albuminu ne-opísaným postupom, precipitáciou etanolom. Podstata izolácie albuminu z odpadnejfrakcie IV spočívá v tom, že albumin přítom-ný vo frakcii IV sa v roztoku stabilizuje ka-prylátom sodným a acetyl-DL-tryptofanomza podmienok 4—5 obj. % etanolu, pH 6,5—6,7 a 4,5—5,5 hmot. % bielkovín sa ostat-ně bielkoviny tepelne denaturujú pri teplote68 až 69 °C po dobu 30 až 40 minút. Denatu-rované bielkoviny sa potom precipitujú eta-nolom za podmienok 12 obj. % etanolu, pH5,1 až 5,3, iónovej sile 0,09 a separujú centri-fugáciou. Supernatant obsahujúci albumin salyofilizuje, resp. albumin zo supernatantu savyzráža etanolom, popřípadě koncentrujeiným vhodným spósobom. Příklad prevedenia 1000 g pasty frakcie IV sa suspendujev 5000 ml apyrogénnej vody. K roztoku sapřidá 19 g kaprylátu sodného a 21 g acetyl-DL-tryptofanu a pri pH 6,5—6,7 a teplote 68—69 °C sa roztok zohrieva po dobu 30—40minút. Denaturované bielkoviny sa vypreci-pitujú přidáním 650 ml 96 % etanolu pri pH 5,1—5,3, iónovej sile 0,09, teplote —2°C podobu 12 hodin. Vyprecipitované bielkoviny saseparujú na vysokootáčkových prietokovýchcentrifugách rýchlosťou 25 1/hod. pri teplote—3 °C a supernatant, obsahujúci albumin sačíří cez azbestocelulózové vložky, filtrát sarozplňuje do NTS fliaš, rotačně namrazuje pri—45 °C a lyofilizuje za nízkého vákua našpeciálnych sušiacich aparátoch KS 30, aleboLZ45. 1000 g pasty frakcie IV sa suspendujev 5000 ml apyrogénnej vody. K roztoku sapřidá 19 g kapry látu sodného a 21 g acetyl-DL-tryptofanu a pri pH 6,5—6,7 a teplote68—69 °C sa roztok zohrieva po dobu 30—40minút. Denaturované bielkoviny sa vypreci-pitujú přidáním 650 ml 96 % etanolu pri pH 5,1—5,3, iónovej sile 0,09, teplote —2 °C podobu 12 hodin. Vyprecipitované bielkovinysa separujú na vysokootáčkových prietoko-vých centrifugách rýchlosťou 25 1/hod. pri teplote —3 °C a albumin obsiahnutý v su-pernatante sa vyzráža etanolom za podmienokpH 4,80, iónovej sile 0,1, 40 obj. % etanolua teplote —8 °C. 1000 g pasty frakcie IV sa suspendujev 5000 ml apyrogénnej vody. K roztoku sapřidá 19 g kaprylátu sodného a 21 g acetyl-DL-tryptofanu a pri pH 6,5—6,7 a teplote 68—69 °C sa roztok zohrieva po dobu 30—40minút. Denaturované bielkoviny sa vypreci-pitujú přidáním 650 ml 96 % etanolu pri pH 5,1—5,3, iónovej sile 0,09, teplote —2 °C podobu 12 hodin. Vyprecipitované bielkoviny saseparujú na vysokootáčkových prietokovýchcentrifugách rýchlosťou 25 1/hod. pri teplote—3 °C a albumin přítomný v supernatantesa koncentruje na špeciálnom zariadení typuCentriterm, alebo DC 30. Výťažnosť Výťažnosť albuminu sa pohybuje od 120 do140 g lyofilizovaného produktu na 1 kg pastyodpadnej frakcie IV. Dosahovaná výťažnosťje závislá na obsahu albuminu v odpadnejfrakcii. Analytické hodnotenie V následuj úcej tabulke sú uvedené analy-tické hodnoty zistené u komerčného příprav-ku a přípravku vyrobeného podl’a vynálezua tieto porovnané s požadovanými kritériaminormy na albumin. Požadované sfcúáky Kritériá normy Dosliahnuté výsledky komerč. príp. ,príp. podlávynálezu Sterilita sterilně sterilně sterilně NeškodnostSkúška na neškodné vyhovuje vyhovuje pyr. látkyObsah apyrogénne vyhovuje vyhovuje bielkovín 4,5-5,5 g/100 ml 4^94 g/lOOml 4,72 g/100 ml Alkohol kvalrtaitíviny negativna negativna negativna PH Tepelná 6,2-7,4 6,95 6,75 stabilita max. ©0 ine- 16 nefel. 16 nefel. jed. íel. jed. jed. Obsah Na max, 87mmol/1 61 mm'ol/1 46 mmol/1 Elektrofo- retloká čistota min, 96 % 96,0 % 96,4 % Uvedené výsledky ukazujú, že kvalitativněkritériá přípravku vyrobeného podl’a vyná-lezu sa nelíšia od komerčného přípravkua vyhovujú normě na albumin. PREDMET VYNÁLEZU1. Spósob izolácie albuminu z odpadnej frak-cie 1’udskej plazmy obsahujúcej alfa globu-líny, beta globulíny viažúce kovy, velkýpodiel lipoproteínov, alfaj lipoproteín,alfa2 mukoproteín, alfa2 glykoproteín aalbumin vyznačujúci sa tým, že pasta z od-padnej frakcie IV sa suspenduje vo vodě, albumin sa stabilizuje a ostatně bielkovinypřítomné vo frakcii IV sa tepelne denatu-rujú pri teplote 68 až 69 °C po dobu 30 až40 minút, precipitujú sa etanolom, separu-jú centrifugáciou a supernatant obsahujúcialbumin sa filtruje, lyofilizuje, připadnekoncentruje. 3
- 2. Spósob přípravy podl’a bodu 1 vyznačujúcisa tým, že albumin sa stabilizuje 0,02 Mkaprylátom sodným a 0,02 M acetyl-DL-tryptofanom a ostatně bielkoviny sa dena-turujú za přítomnosti 4 až 5 obj. % etanolua 4,5 až 5,5 hmotnostných % bielkovín.
- 3. Spósob přípravy podlá bodu 1 a 2 vyznaču-júci sa tým, že denaturované bielkoviny saprecipitujú pri 12 obj. % etanolu a pH 5,1až 5,3.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS516979A CS206294B1 (en) | 1979-07-25 | 1979-07-25 | Method of isolation of the albumine from the waste fraction of the humen fraction |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS516979A CS206294B1 (en) | 1979-07-25 | 1979-07-25 | Method of isolation of the albumine from the waste fraction of the humen fraction |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS206294B1 true CS206294B1 (en) | 1981-06-30 |
Family
ID=5396067
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS516979A CS206294B1 (en) | 1979-07-25 | 1979-07-25 | Method of isolation of the albumine from the waste fraction of the humen fraction |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS206294B1 (cs) |
-
1979
- 1979-07-25 CS CS516979A patent/CS206294B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE69019074T2 (de) | Verfahren zur Fraktionierung von Plasmaproteinen. | |
| DE69513751T2 (de) | Reinigung von Alpha-l-proteinaseinhibitor mittels neuen chromatographischen Trennungsbedingungen | |
| US6835379B2 (en) | Method of producing IgG | |
| DE3752165T2 (de) | Entfernung von fettlöslichen Reagenzien aus biologischen Materialien durch Extrahierung mit natürlichen Ölen oder synthetischen Ersätzen davon | |
| US20080242844A1 (en) | Ultra-high Yield Intravenous Immune Globulin Preparation | |
| CN106459140B (zh) | 用于纯化免疫球蛋白的方法 | |
| HU182554B (en) | Process for producing preparation of serum protein for intravenous application | |
| US4670544A (en) | Process for the manufacture of the cold insoluble globulin and pharmaceutical preparation containing it | |
| EP0127603B1 (de) | Verfahren zur Herstellung einer Faktor VIII(AHF)-hältigen Präparation | |
| US4348315A (en) | Process in purification and concentration of the factor VIII-complex | |
| US4476109A (en) | Method of preparing gamma globulin suitable for intravenous administration | |
| DE69329371T2 (de) | Verfahren zur Reinigung von Faktor VIII-von willebrand Faktor (FVIII:C-FVW) Komplex aus menschlichem Plasma | |
| JPH0381290A (ja) | 精製されたアルブミン溶液の製造方法 | |
| US2958628A (en) | Heat treatable plasma protein product and method of preparation | |
| US3904751A (en) | Process for isolating a fibrin stabilizing factor from human placenta | |
| US7879332B2 (en) | Ultra-high yield intravenous immune globulin preparation | |
| US8293242B2 (en) | Ultra-high yield of alpha-1-anti-trypsin | |
| DE60121196T2 (de) | Verfahren zur monomerisierung von humanen serumalbumin-polymeren | |
| CS206294B1 (en) | Method of isolation of the albumine from the waste fraction of the humen fraction | |
| DE1189674B (de) | Verfahren zur Isolierung von alpha-Antitrypsin | |
| US3475402A (en) | Process of extracting proteins from mistle press juice by carrier-free electrophoresis | |
| CH629819A5 (en) | Process for the isolation of albumin from human blood plasma | |
| AT391482B (de) | Verfahren zur industriellen herstellung von hochreinem menschlichem leukozyteninterferon | |
| DK159164B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af humant leukocytinterferon i krystallinsk form | |
| SU467536A1 (ru) | Способ получени сывороточного альбумина |