SU467536A1 - Способ получени сывороточного альбумина - Google Patents

Claims (2)

1. Осадка II + III. В центрифугате, полученном после отделепи  осадка фракции П + П и содержащем 25 об. % спирта, довод т концентрадию «априлата натри  до 0,3%, рН снижают до 4,5. Раствор выдерживают при 20°С в течение 20 мин. Образовавплийс  осадок отдел ют центрифугированием, который служит дл  дополнительного извлечени  альфа- и бета-глобулинов и альбумина. Осадок раствор ют в дистиллированной воде , осветл ют фильтрацией, рН довод т до нейтральных значений. Полученный раствор содержит 15% альфа-глобулинов, 25% бетаглобулинов и 60% альбумина. В центрифугате снижают концентрацию водородных ионов до 3,3. После перемешивани  в течение 30 мин рП довод т до 4,5, затем отдел ют образовавшийс  осадок. Процесс провод т нри положительной температуре. Осадок содержит альбумин , бета-глобулины и денатурированные белки . Центрифугат охлаждают до -8°С, оставл ют дл  созревани  осадка на 24 ч. Осадок, содержащий нистый альбумин, отдел ют центрифугированием . Осадок чистого альбумина раствор ют в аиирогенной дистиллированной воде в соотношении 1 :4, лиофильно высушивают . Порошок альбумина раствор ют в апирогенной дистиллированной воде до концентрации 20%, рН раствора снижают до 3,3 и выдерживают 30 мин. Затем раствор осветл ют фильтрацией при рН 4,5 и среду нейтрализуют до рП 7,0. Полученный раствор содержит им;мунофоретически чистый альбумин, устойчивый « шротреву при 60°С в течение 10 ч с целью инактивации вируса гепатита, причем дл  стабилизации раствора не требуетс  дополнительного добавлени  стабилизирующих веществ. Пример 3. Сырьем служит экстракт плаценты , содержащий 2,5% белка, тканевые белки, гемоглобин до 50% от общего белка, пирогенные субстанции. Процесс ведетс  аналог,ично примеру 1, за исключением количества (каприловокислого натри , используемого дл  фракционировани . Каприлат натри  добавл ют до концентрации в растворе 0,2%, что св зано с пониженным содержанием белка в исходном материале . Пример 4. Исходное сырье -плазма или сыворотка бычьей крови. К 50 л такой сыворотки добавл ют 96%-ный опнрт до его конечной концентрации в растворе 25 об. %. Перед добавлением спирта в сыворотку ввод т каприловокислый натрий до концентрации его в растворе 0,3%. После растворени  каприлата натри  рП раствора довод т до 3,3. В этих услови х белковую смесь выдерживают при 20°С в течение 40 мин, после чего рН защелачивают до 4,5. Образовавшийс  осадок отдел ют центрифугированием . После отделени  осадка темшературу центрифугата снижают до -8°С и раствор выдерживают в течение 4в ч дл  образовани  осадка. Отделенный осадок содержит альбумин и следы глобулинов. Осадок разво1д т аиирогенной дистиллированной водой в соотношении 1 : 4 и подвергают лиофилизации . Сухой порошок альбумина раствор ют апирогенной дистиллированной водой до требуемой концентрации. В полученном растворе рН довод т до нейтральных значений, затем смещают концентрацию водородных ионов до 3,3. После 20 мин выдержки рП среды довод т до нейтральных значений. Обработанный таким образом раствор фильтруют дл  осветлени  и отделени  следов глобулинов, стерилизуют фильтрацией и стерильно разливают по флаконам. Формула изобретени  1.Способ получени  сывороточного альбумина из белковых растворов, содержащих альбумин, путем разделени  смеси белков этиловььм спиртом, отличающийс  тем, что, с целью повышени  степени очистки препарата , этиловый спирт добавл ют к белковому раствору до концентрации 18-35 об. %, одновременно добавл ют соль жирной кислоты , например каприлат натри , в количестве 0,1-0,6% прн О-30°СирП 2,0-5,0, выпавший осадок отдел ют центрифугированием, извлекают альбумин из осадка и центрифугата, концентрируют и отдел ют от спирта известными приемами.
2. 2.Способ 1ПО п. 1, отличающийс  тем, что, с целью стабилизации целевого продукта , после удалени  спирта снижают рН до 3,3 и вновь повышают до 7,0.