CS202568B2 - Process for preparing polypeptides - Google Patents
Process for preparing polypeptides Download PDFInfo
- Publication number
- CS202568B2 CS202568B2 CS772289A CS228977A CS202568B2 CS 202568 B2 CS202568 B2 CS 202568B2 CS 772289 A CS772289 A CS 772289A CS 228977 A CS228977 A CS 228977A CS 202568 B2 CS202568 B2 CS 202568B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- formula
- group
- carbon atoms
- radical
- gly
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 42
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims description 34
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 title claims description 25
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 82
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 76
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 49
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 43
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 claims description 33
- -1 D-Lys amino acids Chemical class 0.000 claims description 30
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 25
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 24
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 claims description 21
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 20
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 19
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 19
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 18
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 17
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 16
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 16
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 14
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 14
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 14
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 12
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 12
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 11
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 11
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 11
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 11
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 10
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 10
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 10
- ROHFNLRQFUQHCH-RXMQYKEDSA-N D-leucine Chemical group CC(C)C[C@@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-RXMQYKEDSA-N 0.000 claims description 9
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 125000004103 aminoalkyl group Chemical group 0.000 claims description 9
- 125000002768 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 claims description 9
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- CIUQDSCDWFSTQR-UHFFFAOYSA-N [C]1=CC=CC=C1 Chemical compound [C]1=CC=CC=C1 CIUQDSCDWFSTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 125000000278 alkyl amino alkyl group Chemical group 0.000 claims description 8
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims description 8
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 8
- FFEARJCKVFRZRR-SCSAIBSYSA-N D-methionine Chemical compound CSCC[C@@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-SCSAIBSYSA-N 0.000 claims description 7
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 7
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Chemical group OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 125000000030 D-alanine group Chemical group [H]N([H])[C@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 claims description 6
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N D-aspartic acid Chemical group OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 claims description 6
- 125000000734 D-serino group Chemical group [H]N([H])[C@@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 claims description 6
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 6
- AYFVYJQAPQTCCC-STHAYSLISA-N D-threonine Chemical group C[C@H](O)[C@@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-STHAYSLISA-N 0.000 claims description 5
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 claims description 5
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims description 5
- 101100516554 Caenorhabditis elegans nhr-5 gene Proteins 0.000 claims description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-RFZPGFLSSA-N D-Isoleucine Chemical compound CC[C@@H](C)[C@@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-RFZPGFLSSA-N 0.000 claims description 4
- 125000002795 guanidino group Chemical group C(N)(=N)N* 0.000 claims description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N D-Serine Chemical compound OC[C@@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N 0.000 claims description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 claims description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 3
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 claims description 3
- 125000001589 carboacyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- TYRGLVWXHJRKMT-QMMMGPOBSA-N n-benzyloxycarbonyl-l-serine-betalactone Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 TYRGLVWXHJRKMT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 2
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims 5
- LSPKYLAFTPBWIL-BYPYZUCNSA-N Glu-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O LSPKYLAFTPBWIL-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims 4
- FRYULLIZUDQONW-IMJSIDKUSA-N Asp-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FRYULLIZUDQONW-IMJSIDKUSA-N 0.000 claims 2
- 108010040443 aspartyl-aspartic acid Proteins 0.000 claims 2
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 claims 2
- NSTPXGARCQOSAU-VIFPVBQESA-N N-formyl-L-phenylalanine Chemical compound O=CN[C@H](C(=O)O)CC1=CC=CC=C1 NSTPXGARCQOSAU-VIFPVBQESA-N 0.000 claims 1
- KLAONOISLHWJEE-QWRGUYRKSA-N Phe-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 KLAONOISLHWJEE-QWRGUYRKSA-N 0.000 claims 1
- 150000001371 alpha-amino acids Chemical class 0.000 claims 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 claims 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 165
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 84
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 69
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 50
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 50
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 43
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 42
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 37
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 36
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 25
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 21
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 21
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 21
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 21
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 20
- 239000000047 product Substances 0.000 description 19
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 18
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 18
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 17
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 17
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 17
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 229960001701 chloroform Drugs 0.000 description 15
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 14
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical class OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 12
- 150000002148 esters Chemical group 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 9
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 9
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 9
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 8
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 7
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 7
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 7
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 7
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 6
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 6
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 6
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical class C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 5
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 5
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 5
- 150000004702 methyl esters Chemical group 0.000 description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 5
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 4
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 4
- 235000015497 potassium bicarbonate Nutrition 0.000 description 4
- 229910000028 potassium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011736 potassium bicarbonate Substances 0.000 description 4
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 4
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- MCRMUCXATQAAMN-HNNXBMFYSA-N (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 MCRMUCXATQAAMN-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 3
- WETWJCDKMRHUPV-UHFFFAOYSA-N acetyl chloride Chemical compound CC(Cl)=O WETWJCDKMRHUPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012346 acetyl chloride Substances 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 3
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 3
- 125000003282 alkyl amino group Chemical group 0.000 description 3
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 3
- KTUQUZJOVNIKNZ-UHFFFAOYSA-N butan-1-ol;hydrate Chemical compound O.CCCCO KTUQUZJOVNIKNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BTANRVKWQNVYAZ-UHFFFAOYSA-N butan-2-ol Chemical compound CCC(C)O BTANRVKWQNVYAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 3
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 3
- 125000003976 glyceryl group Chemical group [H]C([*])([H])C(O[H])([H])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 3
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 125000001841 imino group Chemical group [H]N=* 0.000 description 3
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 3
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 3
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 2
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N Ethylamine Chemical compound CCN QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 2
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 2
- VIROVYVQCGLCII-UHFFFAOYSA-N amobarbital Chemical compound CC(C)CCC1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O VIROVYVQCGLCII-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 2
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- XEKAUTDWPYQNFU-UHFFFAOYSA-N chlorane Chemical compound Cl.Cl.Cl XEKAUTDWPYQNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- OROGSEYTTFOCAN-DNJOTXNNSA-N codeine Chemical compound C([C@H]1[C@H](N(CC[C@@]112)C)C3)=C[C@H](O)[C@@H]1OC1=C2C3=CC=C1OC OROGSEYTTFOCAN-DNJOTXNNSA-N 0.000 description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N ethyl chloroformate Chemical compound CCOC(Cl)=O RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LNEPOXFFQSENCJ-UHFFFAOYSA-N haloperidol Chemical compound C1CC(O)(C=2C=CC(Cl)=CC=2)CCN1CCCC(=O)C1=CC=C(F)C=C1 LNEPOXFFQSENCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007327 hydrogenolysis reaction Methods 0.000 description 2
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N morphine Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4O BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N 0.000 description 2
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 2
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- CPJSUEIXXCENMM-UHFFFAOYSA-N phenacetin Chemical compound CCOC1=CC=C(NC(C)=O)C=C1 CPJSUEIXXCENMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940086066 potassium hydrogencarbonate Drugs 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- WRECIMRULFAWHA-UHFFFAOYSA-N trimethyl borate Chemical compound COB(OC)OC WRECIMRULFAWHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N (2s)-2,6-diaminohexanoic acid;(2s)-2-hydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N 0.000 description 1
- CNBUSIJNWNXLQQ-NSHDSACASA-N (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 CNBUSIJNWNXLQQ-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-5-hydroxy-7-methoxychromen-4-one Chemical compound C=1C(OC)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=C(OC)C(OC)=C1 HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 2-METHOXYETHANOL Chemical compound COCCO XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZNQVEEAIQZEUHB-UHFFFAOYSA-N 2-ethoxyethanol Chemical compound CCOCCO ZNQVEEAIQZEUHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940093475 2-ethoxyethanol Drugs 0.000 description 1
- IIVWHGMLFGNMOW-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropane Chemical group C[C](C)C IIVWHGMLFGNMOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SLRMQYXOBQWXCR-UHFFFAOYSA-N 2154-56-5 Chemical group [CH2]C1=CC=CC=C1 SLRMQYXOBQWXCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KEZRWUUMKVVUPT-UHFFFAOYSA-N 4-azaleucine Chemical compound CN(C)CC(N)C(O)=O KEZRWUUMKVVUPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100334117 Caenorhabditis elegans fah-1 gene Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- STUKIEZGAXBRHI-UHFFFAOYSA-N Cl.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O Chemical compound Cl.CC(O)=O.CC(O)=O.CC(O)=O STUKIEZGAXBRHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NOTFZGFABLVTIG-UHFFFAOYSA-N Cyclohexylethyl acetate Chemical compound CC(=O)OCCC1CCCCC1 NOTFZGFABLVTIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006021 Dakin-West synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- FYPGZTSZOPYIQA-UHFFFAOYSA-N FC(C(=O)O)(F)F.C(C)(=O)O.C(C)(=O)O.C(C)(=O)O Chemical compound FC(C(=O)O)(F)F.C(C)(=O)O.C(C)(=O)O.C(C)(=O)O FYPGZTSZOPYIQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- URLZCHNOLZSCCA-VABKMULXSA-N Leu-enkephalin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=CC=C1 URLZCHNOLZSCCA-VABKMULXSA-N 0.000 description 1
- XADCESSVHJOZHK-UHFFFAOYSA-N Meperidine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1(C(=O)OCC)CCN(C)CC1 XADCESSVHJOZHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YFGBQHOOROIVKG-FKBYEOEOSA-N Met-enkephalin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=CC=C1 YFGBQHOOROIVKG-FKBYEOEOSA-N 0.000 description 1
- MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N N-methylglucamine Chemical class CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N Naproxen Natural products C1=C(C(C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004133 Sodium thiosulphate Substances 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000906446 Theraps Species 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- YKIOKAURTKXMSB-UHFFFAOYSA-N adams's catalyst Chemical compound O=[Pt]=O YKIOKAURTKXMSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005336 allyloxy group Chemical group 0.000 description 1
- ROLZYTOAMYXLMF-UHFFFAOYSA-N amino(benzyl)carbamic acid Chemical compound OC(=O)N(N)CC1=CC=CC=C1 ROLZYTOAMYXLMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229960001301 amobarbital Drugs 0.000 description 1
- 230000036592 analgesia Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 239000012752 auxiliary agent Substances 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000011449 brick Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- ANTSCNMPPGJYLG-UHFFFAOYSA-N chlordiazepoxide Chemical compound O=N=1CC(NC)=NC2=CC=C(Cl)C=C2C=1C1=CC=CC=C1 ANTSCNMPPGJYLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004782 chlordiazepoxide Drugs 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- SIHHLZPXQLFPMC-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol;hydrate Chemical compound O.OC.ClC(Cl)Cl SIHHLZPXQLFPMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 229960004126 codeine Drugs 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 125000004663 dialkyl amino group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000010931 ester hydrolysis Methods 0.000 description 1
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 1
- IIEWJVIFRVWJOD-UHFFFAOYSA-N ethyl cyclohexane Natural products CCC1CCCCC1 IIEWJVIFRVWJOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000031 ethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])N([H])[*] 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- ZFKJVJIDPQDDFY-UHFFFAOYSA-N fluorescamine Chemical compound C12=CC=CC=C2C(=O)OC1(C1=O)OC=C1C1=CC=CC=C1 ZFKJVJIDPQDDFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Natural products NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003878 haloperidol Drugs 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- ARBOVOVUTSQWSS-UHFFFAOYSA-N hexadecanoyl chloride Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(Cl)=O ARBOVOVUTSQWSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YWGHUJQYGPDNKT-UHFFFAOYSA-N hexanoyl chloride Chemical compound CCCCCC(Cl)=O YWGHUJQYGPDNKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N hydrazine monohydrate Substances O.NN IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004678 hydrides Chemical class 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- OROGSEYTTFOCAN-UHFFFAOYSA-N hydrocodone Natural products C1C(N(CCC234)C)C2C=CC(O)C3OC2=C4C1=CC=C2OC OROGSEYTTFOCAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005191 hydroxyalkylamino group Chemical group 0.000 description 1
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZGONRPXUNVTWTA-UHFFFAOYSA-N methyl 2-isocyanatoacetate Chemical compound COC(=O)CN=C=O ZGONRPXUNVTWTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KQSSATDQUYCRGS-UHFFFAOYSA-N methyl glycinate Chemical compound COC(=O)CN KQSSATDQUYCRGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 229960005181 morphine Drugs 0.000 description 1
- PBMIETCUUSQZCG-UHFFFAOYSA-N n'-cyclohexylmethanediimine Chemical compound N=C=NC1CCCCC1 PBMIETCUUSQZCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YKOQQFDCCBKROY-UHFFFAOYSA-N n,n-diethylpropanamide Chemical compound CCN(CC)C(=O)CC YKOQQFDCCBKROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002009 naproxen Drugs 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical compound C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 239000003176 neuroleptic agent Substances 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- CFHIDWOYWUOIHU-UHFFFAOYSA-N oxomethyl Chemical compound O=[CH] CFHIDWOYWUOIHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005489 paracetamol Drugs 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 229960000482 pethidine Drugs 0.000 description 1
- 229960003893 phenacetin Drugs 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229960003975 potassium Drugs 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- WIKYUJGCLQQFNW-UHFFFAOYSA-N prochlorperazine Chemical compound C1CN(C)CCN1CCCN1C2=CC(Cl)=CC=C2SC2=CC=CC=C21 WIKYUJGCLQQFNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003111 prochlorperazine Drugs 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- FNNIAKKPBXJGNJ-UHFFFAOYSA-N pyrazolidine-1-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)N1CCCN1 FNNIAKKPBXJGNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013102 re-test Methods 0.000 description 1
- 238000006894 reductive elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 239000012260 resinous material Substances 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 229940125723 sedative agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000932 sedative agent Substances 0.000 description 1
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 1
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 239000012258 stirred mixture Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/665—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans derived from pro-opiomelanocortin, pro-enkephalin or pro-dynorphin
- C07K14/70—Enkephalins
- C07K14/702—Enkephalins with at least 1 amino acid in D-form
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
(54) Způsob výroby polypeptidů
Vynález se týká polypeptidických derivátů vykazujících analgetické vlastnosti.
V práci, kterou publikovali Kosterlitz a spol. v Nátuře, 1975, 258, 577 — 579, je popsána identifikace dvou příbuzných pentapeptidů nazývaných „enkafaliny“, extrahovaných z vepřového mozku. Tyto· dva peptidy mají struktury
H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-OH a
H-Tyr-G'ly-Gly-Phe-Leu-OH a bylo zjištěno, že mají silné účinky opiátového typu při testech na isolovaných orgánových preparátech. I když tyto dva peptidy mají při injekční aplikaci do mozkových komor kočky přechodný analgetický účinek, jsou neúčinné při podání obvyklejšími cestami, například intravenózně, laboratorním zvířatům při standardních testech analgetického účinku.
Nyní bylo zjištěno, že modifikacemi určitých aminokyselin v molekule enkefalinu se získaljí sloučeniny, které při intravenózní aplikaci při standardních testech analgetické účinnosti vykazují análgeticktou aktivitu.
V souhlase s tím popisuje vynález polypeptidy obecného vzorce I
R1 \
Tyr-B-E-F-G-K /
R2 (I), ve kterém
R1 znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku,
R2 představuje atom vodíku nebo zbytek vybraný ze skupiny zahrnující alkanoylové skupiny s 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxykarbo·nylové skupiny se 2 až ·6 atomy uhlíku a zbytky aminokyselin Arg, Gly, Glu, Asp, Phe, (-Ala nebo· Lys či D-Lys, z nichž oba posledně jmenované mohou být popřípadě substituovány na ε-aminoskupině alkoxykarbonylovým zbytkem se 2 až 6 atomy uhlíku, nebo· R2 představuje dva až šest zbytků «-aminokyselin spojených dohromady normálními peptldickými vazbami, kteréžto zbytky aminokyselin jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny zahrnující · Gly, Lys, D-Lys, Pro, Phe, Gin, Leu, Arg a Asp, přičemž zbytky Lys, D-Lys a Arg mohou být popřípadě alternativně napoieny přes své ε-amino-, resp. -guanidinoskupiny a zbytky Asp a Glu mohou být popřípadě alternativně napojeny přes své β-, resp. y-karboxyskupiny,
B znamená zbytek D-Ser nebo· D-Thr, popřípadě substituované na jS-hydroxylové skupině alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo· B znamená zbytek D-Ala, D-Leu, D-Asp, D-Lys, D-Trp, D-Met, /3-Ala nebo Azala,
E představuje zbytek Gly, /3-Ala nebo Azgly,
F znamená zbytek Phe, hexahydroPhe, Azphe nebo hexahydroAzphe, které mohou být popřípadě substituované na a-aminoskupině alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku,
G představuje zbytek Leu, · D-Leu, Met, D-Met, Nle, D-Nle, Ile nebo D-Ile, které mohou být popřípadě substituované' na a-aminoskupině alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo G znamená · zbytek Pro, Azleu nebo Azpro a
K znamená hydroxyskupinu, aminoskupinu, zbytek obecného vzorce
OR3 kde
R3 představuje alkylovou, alkenylovou nebo' hydroxyalkylovou skupinu s nejvýše 6 atomy uhlíku, aminoalkylovou skupinu s nejvýše 6 · atomy uhlíku nebo alkylaminoalkylovou skupinu s nejvýše 10 atomy uhlíku, přičemž v obou posledně zmíněných skupinách je dusíkový atom' popřípadě substituován benzylo.xykarbonylovou skupinou, nebo R3 představuje fenylový zbytek nebo zbytek obecného vzorce II, III nebo IV
CH2OR4 . —CN
CH2OR4 (Π), — CH2
CHOŘ4 \ CH2OR4 (III) , —CH2CH2OR4 (IV) , kde
R4 znamená alkanoylovou skupinu s 1 až atomy uhlíku, nebo· K představuje zbytek obecného' vzorce
NHR5, kde
R5 znamená alkylovou nebo cyklo-alkylovou Skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, zbytek obecného· vzorce .
NR8R7, v němž
R6 a R7 buď znamenají alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku nebo jsou R6 a R7 spojeny za vzniku pětičlenného nebo šestičlenného' kruhu, který popřípadě obsahuje heteroatom, zbytek obecného vzorce —NH—CH2CH2OR4, kde
R4 má ' shora uvedený význam, dále hydroxyalkylaminoskupinu s nejvýše '6 atomy uhlíku, (alkylaminojalkylaminoskupinu nebo (dialkylaminojalkylaminoskupinu s nejvýše 10 atomy uhlíku, nebo K představuje zbytek G.ly-OR8- D-Thr-OR8, D-Ala-OR8 nebo· Ala-OR8, v nichž R8 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo zbytek shora uvedeného obecného vzorce II, nebo· III nebo IV, v nichž R4 má shora uvedený význam, nebo K představuje alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo
G a K společně představuje D- nebo L-fo.rmy zbytku obecného vzorce V nebo· VI ~HNJ---^—O ----fe=O (V) (VI) kde n je celé číslo o hodnotě 1 až 4, nebo zbytek vzorce VII
(VII) a farmaceuticky upotřebitelné adiční soli· s kyselinami těch polypeptidů shora uvedeného obecného vzorce I, které obsahují bazické funkce, a farmaceuticky upotřebitelné adiční soli s bázemi těch polypeptidů shora uvedeného· obecného· vzorce I, které · obsahují kyselé funkce.
Ve shora uvedeném obecném vzorci I a v celém textu jsou 'zbytky aminokyselin 0značovány standardními zkratkami (viz Pure and Applied Chemistry, 1974, 40, 317 až 331). Zbytkem α-aza-aminokyseliny je zbytek aminokyseliny, v níž skupina α-CH je nahrazena vodíkem. Zkratka · zbytku a-aza-aminokys^l^.iny je odvozena· od · zkratky odpovídající ' · aminokyseliny · · zavedením · · · prefixu „Az“. Tak Azala znamená . - aza-alanin,· ' Azgly představuje -aza-glycin, · Azphe znamená· azá-fenýlalanin, Azleu · znamená · aza-leucin ' a Azpro znamená aza-prolin. Zkratkami · hexahydroPhe a Phe(6H) se · označuje ' zbytek · fenylalaninu, v němž benzenový kruh je na202568 hrazen kruhem cyklohexanovým. Zkratka hexahydroAzphe a Azphe(6H) označuje odpovídající a-aza-aminokyselinu. Pokud není uvedena konfigurace příslušné aminokyseliny, má tato · aminokyselina (nehledě na glycin a a-aza-aminokyseliny neobsahující střed asymetrie v sousedství karboxylové skupiny) přírodní L-konfiguraci.
Vhodným zbytkem ve významu symbolu R1 je vodík nebo methylová skupina.
Vhodnými zbytky ve významu symbolu R2 jsou vodík nebo acetylová skupina, nebo zbytky Arg, Gly, Glu, Asp, Phe, β-Ala, D-Lys, Lys, popřípadě substituované na ε-aminoskupině terc.butoxykarbonylovou skupinou,
H-Glu-Gly-OH-H-Lys-,
H-Phe-H-Lys-,
I I
H-Gly-Gly-Gly-H-Lys-,
Г~ I
H-Asp-H-Lys-,
H-Lys-H-Lys-,
H-Gly-Gly-,
H-Leu-Leu-Leu-,
H-Arg-Pro-Lys-,
H-Pro-Gln-Gln-,
H-Gly-Gly-Gly-,
H-Lys-Gly-Gly-Gly-,
H-Asp-Gly-Gly-G.ly-,
H-Arg-Pro-Lys-Pro-Gln-Gln- nebo H-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-.
Vhodným zbytkem ve významu symbolu B je zbytek D-Ser, popřípadě substituovaný na β-hydroxylové skupině terc.butylovou skupinou, zbytek D-Ala, D-T.hr, D-Leu, D-Asp, D-Lys, D-Trp, D-Met, /--Ala nebo· Azala.
Vhodným zbytkem ve významu symbolu F je zbytek Phe, hexahydroPhe nebo Azphe.
Vhodným zbytkem ve významu symbolu G je zbytek Leu, D-Leu, Met, Nle, Pro, Azleu nebo Azpro.
Vhodným zbytkem ve významu symbolu· K je hydroxylová skupina, aminoskupina, methoxyslkupina, terc.butoxyskupina, isopentyloxyskupina, allyloxyskupi.na, 2-hydroxyethoxyskupina, 2-aminoethoxyskupina, 2-(methylaminojethoxyskupina, 2-(N-benzyloxykarbonylamino) ethoxy skupina, 2-(N-methyl-N-benzyloxykarbonylaminojethoxyskupina, fenoxyskupina, l,3-diacetoxy-2-propyloxyskupina, 2,3-diacetoxypropoxyskupina, 1,3-dihexanoyloxy-2-propyloxyskupina, 2,3-dipalmitoyloxyskupina, 2-acetoxyethoxyskupina, 2-palmitoyloxyethoxyskupina, ethylaminoskupinaj cyklohexylamnoskupina, diethylaminoskupina, pyrro'lidmoskupina, morfolinoskupina, 2-hydroxyethylamino'skupina,· 2
- (methylamino) ethylaminoskupina, 2-· (dimethylamíno)ethylammoskupina nebo methylová skupina, nebo zbytek Gly-ОСИз, Thr-OH, D-Thr-OH, Ala-ОСИз nebo); D-Ala-OCHs.
Vhodnými zbytky tvořenými symboly G a
K společně jsou D a
VIII nebo IX
-NH-l-----*=O í Viti)
-formy zbytku vzorce wro -NH-J----ь=О (Ιλ) nebo· zbytek shora uvedeného· vzorce VII. Do· definice sloučenin podle vynálezu spadá následujících sedm skupin těchto látek:
skupina 1: látky, v nichž B znamená zbytek D-Ala;
skupina 2: látky, v nichž B znamená zbytek D-Ser;
skupina 3: látky, v nichž B znamená zbytek D-Ser substituovaný na · β-hydroxyskupině alky lov ou skupinou s 1 áž ·6 atomy uhlíku;
skupina 4: látky, v nichž B znamená zbytek Azala;
skupina · 5: látky, v nichž B znamená zbytek D-Thr, popřípadě substituovaný na β-hydroxyskupině alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku;
skupina ·6: látky, v nichž B znamená zbytek D-Leu nebo /--Ala;
skupina 7: látky, v nichž B znamená zbytek D-Asp, D-Lys, D-Trp nebo· D-Met.
Do každé z ·· výše uvedených sedmi skupin sloučenin spadají následující čtyři podskupiny:
podskupina 1: látky, v nichž R1 znamená atom vodíku a R2 představuje 2 až 6, zejména 3 zbytky a-aminokyselin spojených normálními peptidíckými vazbami, přičemž tyto zbytky aminokyselin jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny · zahrnující ’ zbytky · Gly, Lys, D-Lys, Pro, Phe, · ' Gin, Glu, · Leu, Arg a Asp, přičemž zbytky · Lys, D-Lys · a Arg mohou být popřípadě alternativně napojeny přes své ε-amino-, resp. -guanidinoskupiny a zbytky Asp a Gin · mohou být popřípadě al.ternativně napojeny přes své β-, resp. y-karboxyskupiny. Zvlášť vhodnými zbytky · ve· významu symbolu R2 jsou zbytky
H-Glu-G.ly-OH-H-Lys,
H-Phe-H-Lys,
H-Gly-Gly-Gly-H-Lys,
202SB8 π H-Asp-H-Lys,
H-Lys-H-Lys, H-Gly-Gly, H-Leu-Leu-Leu, H-Arg-Pro-Lys, H-Pro-Gln-Gln, H-Gly-Gly-Gly, H-Lys-Gly-Gly-Gly, H-Asp-Gly-Gly-Gly, H-Arg-Pro-LysrPro-Gln-Gln nebo H-Gly-Gly-Glý-Gly-Gly-Gly, s výhodou pak zbytky H-Leu-Leu-Leu nebo H-G.ly-Gly-Gly;
podskupina 2: látky, v nichž R1 znamená atom vodíku a R2 představuje zbytek Arg, Gly, Glu, Asp, Phe, /З-Ala, nebo· zbytek Lys či D-Lys, z nichž oba mohou být popřípadě substituovány na ε-aminoskupině zbytkem HI
-Glu-Gly-0'Н, Η-Phe-, Η-Gly-Gly-Gly-, H-Aspnebo H-Lys-;
podskupina 3: látky, v nichž oba symboly R1 a R2 znamenají atom vodíku;
podskupina 4: látky, v nichž R1 znamená alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku a R2 představuje atom vodíku.
Do rozsahu každé z výše uvedených sedmi skupin a čtyř podskupin sloučenin spadá následujících devět tříd:
třída 1: látky, v nichž G znamená zbytek Pro;
třída 2: látky, v nichž G znamená zbytek Azpro.
U látek z třídy 1 a ,2 je výhodným zbytkem ve významu symbolu К aminoskupina, skupina obecného vzorce OR3, kde R3 znamená alkylovou, alkenylovou, hydroxyalkylovou nebo aminoalkylovou skupinu s nejvýše 6 atomy uhlíku, nebo alkylaminoalkylovou skupinu s nejvýše 10 atomy uhlíku, dále fenylovou skupinu, skupinu obecného vzorce №HR5, kde R5 představuje alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo zbytek obecného vzorce NR6R7, kde buď R6 a R7 jsou alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku nebo R6 a R7 jsou spojeny za vzniku kruhu, popřípadě obsahujícího heteroatom.
třída 3: látky, v nichž G а К společně představují D nebo L formy zbytků shora uvedeného vzorce V nebo VI, kde n má shora uvedený význam, nebo G а К společně představují zbytek shora uvedeného vzorce VII;
třída 4: látky, v nichž G znamená zbytek Met, Leu nebo Nle а К představuje (alkylaminojalkylaminoskupinu nebo1 (dialkylaminojalkyláminoskupinu s nejvýše 10 atomy uhlíku;
třída 5: látky, v nichž G znamená zbytek Met, Leu nebo Nle а К je alkylová skupina s 1 až 8 atomy uhlíku;
třída 6: látky, v nichž G znamená zbytek Met, Leu nebo Nle а К představuje hydroxy skupinu, aminoskupinu nebo zbytek obecného vzorce OR3, kde R3 znamená alkylovou, alkenylovou, hydroxyialkylovou nebo aminoalkylovou skupinu s nejvýše 6 atomy uhlíku, alkylaminoalkylovou skupinu s nejvýše 10 atomy uhlíku nebo fenylovou skupinu;
třída 7: látky, v nichž G znamená zbytek Met, Leu nebo Nle а К představuje zbytek obecného vzorce NHR5, kde R5 představuje alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo zbytek obecného vzorce NR6R7, kde buď R6 a R7 .představují alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku nebo· R6 a R7 jsou spojeny za vzniku 5- nebo Očlenného kruhu obsahujícího popřípadě heteroatom;
třída 8: látky, v nichž G znamená zbytek Met, Leu· nebo Не, а К představuje zbytek Gly-OR8, D-Thr-OR8, Thr-OR8, D-Ala-OR8 nebo Ala-OR8, kde R8 znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku;
třída 9: látky, v nichž G znamená zbytek Met, Leu nebo Не а К představuje zbytek shora uvedeného vzorce II, III nebo IV, kde R4 má shora uvedený význam.
Zvlášt vhodné látky podle vynálezu jsou uvedeny v příkladech 1 až 93 ia z nich pak jsou výhodné následující sloučeniny:
H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Dl-NH .CLo
H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Pro-NHCaHs H-Tyr-D-Ser-Gly-Phe-Azpro-NHCzHs H-Leu-Leu-Leu-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-ОСНз H-Gly-G.ly-Gly-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-OCH3 H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-NH (CHz) 2NHCH3 H-Tyr-D-Alla-Gly-Phe-DL-Leu-СНз H-Tyr-D-Ser-Gly-Phe-
N--NH
H-Tyr-D-Ser-Gly-Phe-Pro-NHCzHs H-Lys-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-DL-NH jX
H-Tyr-D-Ala-Azgly-Phe-Azleu-NHz H-Lys-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Azleu-NHz H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-D-Thr-OH H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-NH (CHz) гМ(СНз) 2 H-Tyr-D-Ser-Gly-Phe-Leu-ОСНз
Zvlášt vhodnými farmaceuticky upotřebitelnými edičními solemi sloučenin podle vynálezu s kyselinami jsou například hydrochloridy, fosfáty, citráty, acetáty nebo trifluoracetáty.
Zvlášť vhodnými farmaceuticky upotřebitelnými adičnímí solemi sloučenin podle vynálezu s bázemi jsou například soli amoniové nebo soli s megluminem.
Polypeptidické deriváty podle vynálezu je možno připravovat metodami známými pro přípravu cihemicky analogických sloučenin. V tomto ohledu je možno uvést následující postupy, spadající do rozsahu vynálezu, v nichž R1, R2, B, E, F, G, K, R3, R4, R5, r6, r7, R8 a n mají shora uvedený význam:
(a) odštěpení jedné nebo několika běžných chránících skupin z chráněného polypeptidu zia vzniku sloučeniny obecného; vzorce I;
(bj k výrobě sloučenin obecného vzorce I, ve kterém K má jiný význam než hydroxylová skupina nebo kde K představuje zbytek Gly-OR8, D-Thr-OR8, Thr-OR8, D-Ala-OR8 nebo Ala-OR8, v nichž R8 má jiný význam než atom vodíku, nebo k přípravě sloučenin, v nichž G a K společně tvoří zbytek shora uvedeného vzorce V, VI nebo VII, reakce karboxylové kyseliny obecného vzorce X nebo XI (X), R1 \
Tyr-B-E-F-G-OH /
R2
R1 \
Tyr-B-E-F-OH
R2 (XI), nebo jejího aktivovaného derivátu s alkoholem nebo'· . 'aminem obecného vzorce NH3, R3OH, RsNH2, R6R7NH, H2N-CH2CH2OR4, H2N-Gly-OR8, HžN-D-Thr-QR8, HzN-Thr-OR8, H21N-D-Ala-OR8 nebo' HžN-Ala-OR8, kde jednotlivé obecné 'symboly mají shora uvedený význam s tím, že R8 neznamená atom vodíku, popřípadě 's aminem obecného vzorce Va, Via nebo Vila w/yJ------!==o (Vá)
--L=o ( Via) (vila) kde n má shora uvedený význam.
Při práci ve smyslu shora uvedené varianty (a) může výchozí materiál obsahovat tolik chránících skupin, 'kolik je v něm přítomno zbytků potřebujících chránění, napříWQh žVyUůj Které se ve výsledném pro duktu vyskytují jako volné hydroxylové skupiny nebo bazické iminosikupiny.
Při práci ve smyslu varianty (a) je možno· ‘ jako chránící skupinu nebo skupiny používat zbytky popsané ve standardních učebnicích chemie peptidů, jako jsou například: M. Bodansky a M. A. Ondetti, „Peptide Synthesis“, Interscence, New York, '1966, kapitola IV; F. M. Finu a K. Kaufmann, „The Proteins“, sv. II, red. H. Neurath a R. L. Híll, Academie Press lne., New York, 1976, str. 106; „Amino-acids, Peptides and Proteins“ (Specialist Perlodical Reports], The Ohemical Society, Londýn, sv. 1 až 8. V těchto publikacích jsou rovněž popsány různé metody odstraňování chránících skupin.
Při práci ve smyslu varianty · (aj je zvlášť vhodnou chránící skupinou iminoskupiny benzyloxykarbonylový zbytek a zvlášť vhodnou chránící skupinou hydroxylové skupiny zbytek benzylový. Obě tyto chránící skupiny je možno snadno odštěpit hydrogenolýzou, například hydrogenolýzou v přítomnosti pialádia na uhlí jako katalyzátoru, například 5 % ('hmoOnost/hmotno.st j paládia na uhlí, v ředidle nebo rozpouštědle, jako ve vodě, methanolu, ethanolu, butanolu, dimethylformamidu, 'kyselině octové, chloroformu nebo ve směsi těchto rozpouštědel. Reakci je možno popřípadě provádět v přítomnosti kyseliny, jako chlorovodíku nebo' p-toluensulfonové kyseliny a účelně za atmosférického tlaku.
Další zvlášť vhodnou chránící skupinu iminoskupiny při práci podle varianty (a) je terc.butoxykarbonylový zbytek a další zvlášť užitečnou chránící skupinou hydroxyskupiny je terc.butylový zbytek. Obě tyto' chránící skupiny lze snadno' odštěpit působením kyseliny, jako chlorovodíku nebo triftu·Oιrtюtové kyseliny. Chlorovodík je možno používat ve formě vodného roztoku o· koncentraci například mezi 1 N a koncentrací 'odpovídající nasycenému roztoku, nebo' je možno' chlorovodík alternativně používat ve formě roztoku v ředidle nebo rozpouštědle, jako v ethylacetátu, methanolu, kyselině octové, etheru, dioxanu nebo jejich směsi. V daném případě je mcžno' pracovat s libovolnými koncentracemi až do nasycení ředidla nebo rozpouštědla, s výhodou koncentracemi v rozmezí od 2 do' 6 N. Reakce se s výhodou provádí při teplotě mezi 0 °C a teplotou místnosti a může se uskutečňovat v přítomnosti pomocného činidla, jako 2-merkaptoethanolu. Trifluoroctoyou kyselinu je možno' používat samotnou bez ředidla nebo' rozpouštědla, nebo^ ji lze ředit 5 až 10 1% vody. Reakce se s výhodou provádí při teplotě místnosti, popřípadě v přítomnosti pomocného' č'nidla, jako· Z-merkaptoethanolu.
Při práci podle varianty (a) jsou dalšími zvlášť vhodnými chránícími ' skupinami iminoskupiny zbytek benzyloxykarbonylový nebo teric.butoxykarbonylový a zvlášť vhodnou chránící skupinou hydroxylové skupiny je
Zbytek terc.butylový. Tyto' chránící skupiny lze snadno odštěpovat působením bromovodíku v kyselině octové. Výhodná koncentrace se pohybuje mezi 1 a 3 N, zvlášť výhodnou koncentrací je pak koncentrace 2 N.
Při práci podle varianty (a) je zvlášť vhodnou chránící skupinou karboxylové skupiny esterový zbytek, například zbytek methylesteru či ethylesteru. Tento· zbytek se účelně odštěpí bazickou hydrolýzou, například působením hydroxidu sodného nebo hydroxidu draselného v ředidle nebo rozpouštědle, jako ve vodném methanolu, vodném 2-ethoxyethanolu, vodném dioxanu nebo1 vodném, dimethylformamidu. Reakce se účelně provádí při teplotě místnosti.
Vhodným aktivovaným derivátem výchozí látky při práci postupem podle odstavce (b) je například ester nebo> anhydrid. V případě použití aktivovaného derivátu je možno reake' uskutečni tak, že se aktivovaný derivát uvede do styku · s příslušným. alkoholem nebo aminem v přítomnosti ředidla č rozpouštědla. V těch případech, kdy se ako výchozí materiál používá volná kyselina obecného vzorce X nebo XI, provádí se reakce s příslušným alkoholem nebo anrnem účelně za použití standardního kondenzačního· čin'dla používaného při syntéze pepti- dů, jako N,N‘-d;cyklohexyilkarbodiimidu. Tato . reakce je zvlášť vhodná pro výrobu sloučenin obecného* vzorce I, v němž K znamená aminoskupinu nebo zbytek obecného· vzorce NHR5 nebo · N-R5R6. V takovémto případě se ester, například methylester, sloučeniny obecného vzorce X smísí s nadbytkem amoniaku nebo příslušně substituovaného aminu v rozpouštědle, jako v methanolu či dimethylformamidu, při teplotě pohybující se mezi 0 °C a teplotou místnosti. Reakční doba se pohybuje do· tří dnů.
Výchozí látky pro práci způsobem podle vynálezu je možno připravovat ze známých sloučenin standardními kondenzačními reakcemi za vzniku peptidů, standardním zaváděním chránících skupin do· peptidů a standardním odštěpováním chránících skupin z peptidů. Všechny tyto reakce jsou od12 borníkum dobře známé a jsou popsány , · například v příkladu 94. Zvláštní pozorností si zaslouží příprava meziproduktu č.· 175, · · při ' л níž se methy.lketo-n · připravuje “ z odpovídající kyseliny Dakin-Westovou reakcí s · acétanhydridem v pyridinu.
Jak již bylo uvedeno· výše, vykazují sloučeniny podle vynálezu analgetickou účinnost · u teplokrevných živočichů. Tuto · účinnost · je · · možno prokázat standardním testem · pro důkaz ainalgetické -aktivity, jako je test na my-. · ších na horké desce (Eddy a Ieimbach, · J. Pharmac. Exp. Therap., 1953, 107, 385—393). Tento test se provádí následujícím· způsobem:
Při testování každé ze sloučenin se používá skupiny vždy tří myších samiček o hmotnosti 22 až 25 g. Každá myš se položí na termostaticky kontrolovanou měděnou · desku zahřívanou · na 56 °C a zaznamená se čas, kdy pokusné zvíře reaguje · ina tepelný podnět (například olizováním svých zadních tlapek). Normální reakčni časy se pohybují od 3 do· 5 sekund.
Každé ze tří pokusných myší se pak intravenčzně podá 100 mg/kg roztoku testované sloučeniny. Po· 5, 10 a 30· minutách po aplikaci se každá z myší znovu vloží na horkou desku a zaznamená · se její reakčni čas. Pokud myš nereaguje po 20 sekundách odstraní se z horké desky. Za těchto okolností se testovaná sloučenina považuje za maximálně účinnou v dané dávce.
Sloučenina, při jejíž aplikaci se dosáhne průměrného zvýšení reakčni doby nejméně o· 3 sekundy, se pokládá za účinnou. Účinná látka se . pak znovu testuje v nižších dávkách.
Všechny sloučeniny, jejichž příklady jsou uvedeny v tomto textu, jsou při shora popsaném testu účinné v dávkách rovných nebo nižších než 100· mg/kg, počítáno na volnou kyselinu nebo báži. Dávka LDso při intrave.nčzním podání myším je u sloučenin podle vynálezu značně vyšší než nejnižší dávka vedoucí k maximální analgesii, jak vyplývá z následující tabulky:
TABULKA
Produkt Struktur a z příkladu č.
Analgetická účinnost
Zvýšení reakční Dávka LDso doby oproti mg/kg mg/kg kontrole (s)
H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu
H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Pro-NHC2Hs
H-Tyr-D-Alia-Gly-Phe-Leu-NH(CH2]2NHCH3
H-Tyr-D-Ser-Gly-Phe-Met-OCHs
H-Gly-Gly-Gly-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-OCHз
| +1,5 | 100 | 256 |
| +16 | 20 | 245 |
| +15 | 10 | 90 |
| +15 | 50 | 464 |
| +14 | 100 | 385 |
Do rozsahu vynálezu rovněž spadají far’ maceutické prostředky obsahující jako* účinnou složku polypeptid podle vynálezu v kombinaci s netoxLckým, farmaceuticky upotřebitelným ředidlem nebo nosičem.
'Farmaceutické prostředky mohou být například ve formě vhodné к parenterálnímu podání. К tomuto účelu je možno- zmíněné prostředky o sobě známým způsobem upravovat na sterilní injekční vodné či olejové roztoky nebo suspenze.
Farmaceutické prostředky podle vynálezu mohou kromě polypeptidu podle vynálezu rovněž obsahovat jedno nebo několik známých léčiv vybraných ze skupiny zahrnující jiná analgetická činidla, například aspirin, paracetamol, fenacetin, kodein, pethidin, jakož i morfin, protizánětlivá činidla, například naproxen, indomethacin a ibuprofen, neuroleptická činidla, j-ako chlorprc-miazin, prochlorperazin, trifluorperazin a haloperidol, a další sedativa a trankvilantia, jako chlordiazepo-xid, fenobiarbiton .a amylobarbiton.
Výhodným farmaceutickým prostředkem podle vynálezu je preparát vhodný к intravenóznímu, intramuskulárnímu nebo subkutánnímu injekčnímu podání, například sterilní vodný roztok obsahující mezi 1 a 50 mg/ /ml účinné látky.
Farmaceutické prostředky podle vynálezu se při léčbě nebo prevenci bolesti normálně aplikují lidem v takové dávce, .aby každý pacient cibdržel při intramuskulárním nebo1 subkutánním podání mezi 2 a 150 mg účinné látky, nebo při intravenózním podání mezi 1 a 100 mg účinné látky.
Prostředky podle vynálezu je možno aplikovat způsobem závisejícím na biologickém poločasu polypeptidu, například v intervalech pohybujících se od 0,5 do 4násobku biologického poločasu polypeptidu, například dvakrát až šestkrát denně. Prostředky podle vynálezu se zvlášť účelně používají к zmírnění bolesti, к níž dochází během nebo krátce po chirurgickém zákroku, v kterémžto případě se normální aplikuje během samotné operace nebo těsně po ní.
Injekční preparáty podle vynálezu je možno aplikovat ve formě nárazové dávky bud přímo do injekčního místa nebo do předem zavedené intravenozní infusní soupravy, nebo- je lze aplikovat pomaleji ve zředěném roztoku jako složku intravenozní infusní kapaliny.
Vynález ilustrují následující příklady 1 až 94, jimiž se rozsah vynálezu nijak neomezuje.
V níže uvedených příkladech se symbol Rř vztahuje na cihromatografii na tenké vrstvě silikagelu. Rozpouštědlovými systémy používanými při této chromatografii jsou systémy 1-butanol-ky.selina octová-voda (4:1:5 objem/objem) (RfA), l-butanol-kyselina octová-voda-pyridin (15:3:12:10 objem/objem),
2-butanol — 3% [hmotnost/objem] vodný hydroxid amonný (3:1 objem/objem) (RfC), acetonitril-voda (3:1 objem/objem) (RfD), .aceton-chloro-form (1:1 objem/objem) (RfE), chloroform-eithanol (1:4 objem/objem) (RfF), cyklohexan-ethylacetát (1:1 objem/objem) (RfG), cyiklohexan-ethylacetát-methanol (1:1:1 objem/objem) (RÉH), chloroform-methanol-voda (11:8:2 objem/objem) (RfK), chloroform-methanol (19:1 objem/objem) (RfP) a chloroform-methanol (9:1 objem/oibjeml( (RfQ). (Některá z těchto rozpouštědel se používají rovněž к sloupcové chromatografii na silikagelu a jsou v poznámkách označována jako rozpouštědla G, K, Q a P). Ve všech .případech se chromatografické desky zkoumají v ultrafialovém světle a detekují se fluorescaminem, ninhydrinem a chlor-škrob-jodovým činidlem. Pokud není uvedeno jinak, znamená uvedení symbolu Rf, že při těchto postupech byla detekována pouze jediná skvrna.
Kyselé hydrolyzáty všech produktů připravených v příkladech 1 až 93 se získávají záhřevem peptidu nebo chráněného peptidu ’s 6 N kyselinou chlorovodíkovou obsahující 1 % (hmotnost/objem) fenolu v zatavené evakuoviané ampuli na teplotu 110 °C po dobu 16 hodin. Složení aminokyselin v každém hydrolyzátu se stanovuje za pomoci analyzátoru aminokyselin (LoCarte) a ve všech případech je v souladu s očekávaným složením.
V příkladech se používají následující symboly:
Z = benzyloxykarbonyl
Bzl = benizyl
OCp = 2,4,5-trlchlorfenoxyskupina
Boc = terc.butoxykarbonyl
ONp = p-nitrofenoxyskupina ONSu = sukcinimidoxyskupina
ToisOH = p-tolue.nsulfonová skyselina
Příklady 1 až 42
Chráněný polypeptid se podrobí reduktivnímu štěpení za použití některého, z níže popsaných postupů H1 až H13. Získají se polypeptidioké deriváty podle vynálezu uvedené v tabulce I. Jednotlivé postupy H1 až H13 se provádějí následovně:
H1 Výchozí materiál (uvedený v tabulce I číslem) se rozpustí v ethanolu obsahujícím do 25 % vody, v dusíkové atmosféře se přidá 150 mg/g 5% (hmotnost/hmotncst) paládia na uhlí jako katalyzátoru a do reakční směsi se při .teplotě 20 až 215 °C za míchání uvádí mírný proud vodíku. К dokončení reakce je zapotřebí 5 až 6 hodin. Vodíková atmosféra se nahradí dusíkem a katalyzátor se odfiltruje přes vťstvičku křemeliny. Produkt se izoluje odpařením filtrátu ve vakuu.
H'2 Pracuje se stejně jako při postupu H1 s tím, že se namísto vodného ethanolu použije vodný methanol.
1S
H3 Pracuje se stejně jako při postupu Hl s tím, že se jako reakční prostředí použije methanol.
H4 Pracuje se stejně jako při postupu H1 za použití vodného ethanolu s přídavkem 1 ekvivalentu chlorovodíku.
H5 Pracuje se stejně jako· při postupu H1 za použití vodného methanolu s přídavkem 1 ekvivalentu chlorovodíku.
H6 Pracuje se stejně jako při postupu H.1 za použití dimethylformamidu s přídavkem 1 ekvivalentu p-toluensulfonové kyseliny.
H7 Pracuje se stejně jako při postupu H1 za použití methanolu s přídavkem 1 ekvivalentu chlorovodíku.
H8 Pracuje s|e stejně jako při postupu H1 za použití směsi dimethylformamidu a butanolu jako reakčního prostředí.
H9 Pracuje se stejně jako při postupu Hl za použití 90 nebo 95% (objem/objemj vodné kyseliny octové jako reakčního prostředí.
H10 Pracuje se stejně jako při postupu H9 s tím, že se к reakčnímu prostředí přidají 1 až 2 ekvivalenty chlorovodíku.
Hll Pracuje se stejně jako při postupu Hl za použití vodného dimethylformamidu jako reakčního prostředí.
H1.2 Pracuje se stejně jako při postupu Hl za použití směsi vodného ethanolu a chloroformu jako reakčního prostředí.
H13 Pracuje se stejně jako při postupu Hl zia použití směsi methanolu a dimethylformamidu jako· reakčního prostředí.
já
S 'cd
Cl
Λ — -4—»
PM
N O Λ
O '5 *th >ó > s
r4
X
CD CO _
Η H Я г-I CD X CM oO ~ .. - ~r-< H т-H tH ID CM
МЛ
X Я cn к
CD
X
O CM 00
CM* t-T tH CM cnS<C X .O q H 14 t<
M XI CP CCMM oo* oo* oo* tx” t< t<
t>?
CM CM oo fyt tx· oo „ Ή Η H Η H oo . Φ „Г00 Γ .
„ tH Φ tH “ т~Т tH tx
TABULKA I
CQ
Ξ
4—·
Ph
CD' Ph >> *—1 o 04
TJ co já >CJ
X
X CD ID CD
СТ)
К
CMUDOTID
CDC -. - , -----.-,
Η4 X* ‘ΊΓ1 ЧЧ X* X* X* *Χ qqqqqqqq
CD
CO x lD CM O ts oo X CO b> t> 00O
O CO . . . oo CO oo CO CS CMX T-4 t-H >í_A >5^’ tH tH tH tH Ή tHτ—i
Ph Ph
CO X LD 00 CD oo т-Ч гЧ τ—I t-Ч гЧ tH t—i τ—I t—i r-í q t> X o ri Λ OO O
X X N 00 O0 O0 ts O τΗ r- X — XXXČM
т-H CO 00 X <M tx o
CD
O ID
ID ID
CM co
CD
CO
Q
СО X QIDXQoIDtxODX tx CDCOoooOCĎ000O00
| о | см | оо | ó | CO | O | 8 | |||
| со | ем | X | ID | ID | Φ | X | |||
| CM | CD | oo | O | CD | •Φ | ||||
| uó | ID | ID | ID | Φ | LD |
IDHOHtSCPOaJCbCDP cόcocDζ©ιлαooόαoCэoэIDiD
CD
O
CD
ID
ID tx o ID CM X CO tx UD oo čo tn tx
CD bx tH 00 Φ oo ts CĎ t> oo CD b>
tH tx tx oo b> CD iň CD ID CO to
X u8 < У tx oo
ID oo O ID CM 00 CĎ 00 tx oo CO CÓ ID
CO CO o tH oó ID tx CD 00 X ID CM oo X CD CD CO CD CM tx ID ID ID ID oo CÓ CD ID
LD CO
X ID
CO CO tH ©0 b* CO tx CÓ
H
CO
CM
CO ф p p S ф ф
5ΪΪΦ g a> Z со <o ώ cd cb Φ ώф
Д Д Д íД £i íXi Pl<PU ' ' ' ·Λ
Ф
S O i
P
999 φ 'T?'*? <N S Ж Ж ж
5999
P P P
S >J Ph ώ - _ < Цц p4 pL|
CD i CD r4 CM X ID CO tx 00 OJ О X CM СО X LD CO X X гЧ гЧ гЧ гЧ гЧ o
<
O ,*? oj
Я Д
Й '3 ω O Z ж
Q O O th t. ο >> >>n Еч Е-ч < t I fx гЧ g ф ф
CD O rtí J cu Cd z
CJ oooj о гн см οσ χι iD гЧ гЧ СМСМСМСМСМСМ
202588
| CD | Ю CM co | CM | CM 00 CO СО | СО | 00 | 3«, | со | СО гЧ | СП |
| гЧ | __ v4 ~ r4 CO ^co | гЧ | гЧ гЧ гЧ гЧ | гЧ | гЧ | см* | т-Ч | со | гЧ |
| CM | г-1 „ r4 Ьч | см | СП со гч ГГ | гЧ | СЧ | Н т-Г | см | гЧ См | со т-Ч |
| ю | см со ем сп | О | Ш О СП СП | гЧ | СП | СП СП | СП | СП | си |
| Д | ® Я Ж Я | гЧ Д | Д Д Д Д | гЧ Д | Д | Д Д | Д | Д | Д |
-G;ly-Phe-Leu-OMe
Poznámky:
hydrochlorid dihydrochlorid trihydroohlorid acetát diacetát
Θ triacetát trífluoracetát izolováno odpařením po filtraci přes křemelinu vysráženo přídavkem etheru vysráženo přídavkem methanolu a etheru!
vysráženo přídavkem ethylacetátu a etheru získáno ve formě prášku po 'lyofilizaci iz vody nebo ze směsi vody a terc.butanolu jako u poznámky 12, v přítomnosti chlorovodíku jako u poznámky 12, v přítomnosti kyseliny octové vyčištěno, chromatografií na silikagelu na použití 251% (objem/objem) methanolu v chloroformu
16i jako· u poznámky 15, za. použití rozpouštědlového· systému K vyčištěno· na molekulárním sítu Sephadex G15 v 5% (objem/objem) vodné kyselině octové jako u poznámky 17, za použití molekulárního síta Sephadex G25 pohyblivost 0,78 vztaženo· na histidin jako standard, při elektroforéze při pH 6ť5i · teplota tání 143 OC teplota tání 157 C
2i2 teplota tání 103OC (rozklad) teplota tání 81 až 83 °G teplota tání 87 °C (rozklad) teplota tání 146 až 148 °C teplota tání 98 °C (rozklad) teplota tání 168 °C teplota tání 218 až 219 °C.
P říkl ady 43 až 69
Chráněný polypeptid se podrobí štěpení chlorovodíkem za použití některého z níže popsaných postupů El až E1O. Získají se polypeptidické deriváty podle vynálezu, shrnuté do talbulky II. Jednotlivé postupy El až E10 se provádějí následovně:
Výchozí materiál (označený v tabulce II číslem) se rozpustí v ethylacetátu a přidá se takové množství roztoku chlorovodíku v ethylacetátu, .aby .se dosáhlo celkové koncentrace kyseliny 2 N až 6 N. Reakce se nechá probíhat při teplotě 20 až 25 °C po dobu 1 až 2 hodin. K maximálnímu zabránění průběhu nežádoucích vedlejších reakcí se nemá reakční doba zbytečně prodlužovat. Hydrochlorid žádaného· produktu se čas-to z roztoku vysráží a odfiltruje se. Jinak je možno· .produkt izolovat odpařením reakční směsi ve· vakuu.
E2
Pracuje se stejně jako u postupu El s tím, že se namísto ethylacetátu použije jako reakční prostředí methanol.
E3
Pracuje se stejně jako· u postupu El za použi-tí chlorovodíku ve směsi methanolu a ethylacetátu.
E4
Pracuje se stejně jako u postupu El s tím, že se výchozí materiál rozpustí v kyselině octové a k roztoku se pak přidává chlorovodík v ethylacetátu.
E5·
Pracuje se stejně jako· u postupu E2, ale v dusíkové atmosféře a v přítomnosti akceptoru, například 2-merkaptoethanolu.
E6
Pracuje se stejně jako u postupu El s tím, že se namísto ethylacetátu použije jako reakční prostředí diethylether.
E7
Pracuje se stejně jako u postupu El s tím, že se namísto ethylacetátu použije jako reakční prostředí dioxian.
ES·
Pracuje se stejně jako u postupu El s tím, že se namísto ethylacetátu použije jako reakční prostředí kyselina octová.
E9
Pracuje se stejně jako u postupu El, ale v dusíkové atmosféře a v přítomnosti akceptoru (2-merkaptoethanol).
E10
Chráněný materiál se 10 minut míchá při teplotě 0 qC s koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou (cca 10 ml/g). Nadbytek kyseliny se oddessiluje ve vakuu při co nejnižší teplotě a produkt se získá lyofilizaci.
El
| ip | CO | b> | ||
| о О т-1 | CM | r4 | гЧ | т-Ч |
| т-Ч гЧ „ | гЧ | |||
| - | IP | 00 | CO | |
| гЧ т—1 | гЧ | |||
| гЧ | t—1 | r4 | т-Ч | |
| СМ СМ 00 | CD | Ьч | CO | т-Ч |
| ИЫЫ | w | Ы | w | W |
| СП © ю | CD | CM | CM | co |
| О О ’ф | co | t> | ||
| т-Ч гЧ гЧ | т-Ч | г—1 | т-Ч | т-Ч |
| © 00 | гЧ | o | CD | |
| см | CM | r4 | © | |
| о | Ьч | Ьч | ||
| 00 | CO | 00 | ||
| Q О | ОЭ | Ю | 5! | |
| •Ф со СО | ||||
| т-Ч | 00 | CM | ||
| Mi | in | CD | ||
| © гЧ © | Ьч | Ьч | Š | |
| Ю СО Ю | Ю | © | © | |
| см СО | oo | |||
| со Ьч со | co | |||
| tsOtt | uo | |||
| Ьч © b* | © | |||
| g^§ | 3 |
ι-Ч ČO H СО 1Λ OO н гЧ
Ы ЫЫЫИЫЫ Ы © гЧ © © ω ы w ы ’Ф Ьч
со
| X$1 | ||
| r4 | ||
| © | ’Ф CO xtf гЧ | © |
| © | © Ьч ιό © | © |
*5 со см о со
В 9
Гх 00 ю СО
| CM | О СО | CD Q in | 3 | o | ||
| © | © © | Ю CD CD | © | LO | ||
| gg | Ю © © © | uo | £ | т-Ч CM | ||
| © см | o © | © | Ю | |||
| Ьч Ьч | © Ьч | © | Ьч | © | ||
| CM ČM © Ю | © © © © | Ю Ю | s | © 1Л | 3 |
TABULKA ΙΓ
| Ph | Ph | Ph ^4 | Ph | Ph >> |
| H | H | H | ||
| X | i | X | X | X |
| © | Ьч | © | © | O |
| -Ф | 1Й |
со
Д ю оо Д ф сч сч
Cu
CM 0O 0О OO 00 co О ’Ф ω w W M W W rt M
Щ
cp rl CM
CM rH CM CO id is ίο Φ ao lo
Id rH id ’Ф M &H O rH
X *Q
| ’ф гЧ | |
| 00 | id O |
| ”φ | f Ld |
o 00
CÓ ’Ф
CO O řH ÓO o CM 00 CM CM Co
Ld ’Ф CM
PQ <
CO cp ’Ф ID
O) CO rH
OD ’ф
Ld
CO o ld t>4 ’ф Ю
CO cO
Ld CO
CO co
CO
CO
CO со
0) o
ω ьР ω
ДР cu >» *7
I
F-ι φ сл ώ f-l
Ή к ω a 2?
Ό Рч
I >> s
I ca <
I Q
I ř-l >ч H >5 H '
CD biro о О Д
I ( 3 >> >> Ф 5 5 H • I Cl) >> >> r-] 3 5 'V
CM СО ’Ф Ю CO Cx oo СП co co co čp cp CO co cp
Poznámky:
hydrochlorid dihydrochlorid izolováno odpařením po filtraci přes křemelinu izolováno' vysrážením vysráženO' přídavkem· etheru vysráženo přídavkem methanolu a etheru krystalováno ze směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60 až 80 °C) získáno· v práškové formě lyofilizací z voidy nebo ze směsi vody a terc.butanolu jako u poznámky 8 v přítomnosti chlorovodíku vyčištěno chromatografií na silikagelu za použití rozpouštědlového systému Q jaké u poznámky 10, za použití rozpouštědlového· systému K vyčištěno· na molekulárním sítu Sephadex G15 v 0,01 M vodné kyselině chlorovodíkové vyčištěno na molekulárním, sítu Sephadex G25 v ·5% (objem/objem) vodné kyseliny octové teplota tání 202 až 205 °C teplota tání 110 °C teplota tání ·179 až 180· cc teplota tání 173 až 174 °C teplota tání 1412 až 144 °C teplota tání 118 až 120 ’°C
20· teplota tání· 138 až 140 °C teplota tání 111 'až 114 cc‘ teplota tání 195 až 200°C Jrozk^ad) teplota tání 120 až 122 C teplota tání 174 až 176 °C teplota tání 120 až 124 °C.
Příklady 70 až 88
Chráněný polypeetidse · · podrobí štěpení kyselinou trffluoroctovou za použití některého· z níže popsaných postupů. Získají se polypeptidícké deriváty podle vynálezu, shrnuté do tabulky III. Jednotlivé ·postupy se provádějí následovně: . .
F1 ; ’ ·.· ·- :
Výchozí materiál (označení v tabulce III Číslem) se rozpustí v trifluoroctové kyselině (10 ml/g) a směs se nechá 1 až 2 hodiny reagovat při teplotě 20 až · 25 °C. Produkt se izoluje ve formě trl^llu^c^r^a^c^etátu odpařením roztoku ve vakuu. Případnou lyofilteací v přítomnosti mírného · nadbytku chlorovodíku se získá hydrochlorid.
F2
Pracuje se stejně jako při postupu F1 za použití 90% nebo 95% (objem/objem) vodné kyseliny trifluoroctové.
F3
Pracuje se stejně jako při postupu Fl, · ale za použití 90% nebo 95% (objem/objem) · vodné trifluoroctové kyseliny pod dusíkem v přítomnosti akceptorů, například 2-mierkaptoethanolu.
&
ώ · o Oj 'n 'cd O ’£ ><J s>, cd > s σ
ta я
n ta O rH
X *Q
Q
PQ <
q гЧ
СмОГ^ОООООООГм^СмОО^СОСПСмСмОГм
CO* CO CO* г-T гЧ г* σ0-φ* 'φΜ* r-* 'q Μ* CM* CO* Λ CO* CO* CO t—{ N N N N N N N N M N CJ Η N Ň Μ Μ N N ia ta ta ta ta ta ta ta ta ta ta ta ta ta ta ta ta ta ta
| ČM | г—I | CO | ΜΪ | id | CD | Ьз | 00 | CD | O | rH | LD O | O | CM | CD | O | r—1 | CM |
| CD | CO | co | CD | CD | Có | CO | co | CD | s. | b· | bs LD | CM | CM | rH | CM | ČM | ČM |
| iH | tH | rH | rH | rH | rrl | rH | rH | rH | rH | rH rH | rH | rH | CM | CM | cm | CM |
| rj IO O | ID H | oo | OD |
| CM CM CM | CM H | H | tH |
| rH | M< CO | rH | O rH | O OD | O ČD | O Mi IS |
| 00 | Ьз CD | CD | ČD b> | CD Ю | 00 Ю | CD CD Ьз |
| OO CO | CO D | Mi CM CM Tb ÍD CO | |
| ID CD | CO | ||
| cd | |||
| co |
| cO | O o | OQ | co O | Mi O | CD | CD | CO | b3 | CO rH Xb |
| ID | CD CO | Гм | co b> | CD rH | CD | co | CD | Co | CO CO CD |
| O | Ьз | rH | CO | Mi |
| CO | Cm | CD | Mi | Mi |
| 00 | co | O | CD |
| Id | 00 | ts | CD |
| id | r4 | Mi |
| Mi | 00 | Mi |
TABULKA III
Ό
К
CD
Он o Cá
X Z
I z
O) Λ PU t >4 s
I f-l
CD CO
I
Q
P-i >3 Е-ч i
CD
S К X
CM CD s £ ы 7?
Я К +->
N <m
N Ф Д
Д 5 § ω
O Z Ž II
CM N CM hjH см cm es ΓΊ Mouu£ £ -o o o o o o lilii rj ...
CD ta i Λ Pl i . . ...............
J>4 >3 >> í>> >» >. >> >3 >3 >1 £>. ^3 ^3 £>»
555555555555553555 cdcúcdcdcdcdcúcdcdcycdás-(4cúcdcti,cd
QQQQQQQQQQQQQQQQQQ
CD £ S □ φ J ŠS?
Cd hP
CD Λ ΡΜ
I p3 Φ
I
Cb
Λ CM i
3 ω φ t-a t-a i Cb ta ta Pl pl I I φ ca
I
O 2 J-ч CD ca tP cd Φ Л Д ca ta
I t рЗ О) h-a
I
Φ Λ PU t pq CD ►a I
CD
РЧ i
K CtMtsbbbbb^OcOcoccoOOOooO
Poznámky:
hydrochlorid acetát trifluonaicetát di-trifluoracetát izolováno vysrážením po filtraci přes křemelinu vysráženo přidáním petroletheru (teplota varu 60 až 80 °O) izolováno v práškové formě vysrážením z vody nebo ze směsi vody a terč.butanolu1 jak oi u poznámky 7, v přítomnosti chlorovodíku vyčištěno· na molekulárním sítu Seiphadex G15 v 5% (objem/objem) vodné kyselině octové teplota tání 150 až 15:5 OC teplota tání 166 až 168 °C.
Příklad 89
К roztoku 235 mg (μΐηοΐ) H-Tyr-D-Ser-Gly-Phe (6 H) -Leu-OMe (výchozí materiál 110) v 5 ml methanolu se přidá 1,0 ml (3 ekvivalenty) vodného- IN hydroxidu sodného a směs se 3 hodiny míchá při teplotě místnosti. Roztok se odpaří -ve vakuu, odparek se zředí vodou a okyselí se zředěnou kyselinou chlorovodíkovou. Po vyčeření filtrací se roztok lyofilizuje, produkt se zbaví solí na sloupci molekulárního síta Sephadex G15 v 5o/o (objem/objem) vodné kyselině octové -a nakonec se lyofilizuje. Zíslká se H-Tyr-D-Ser-Gly-Pihe(6H)-Leu-OH o R/C = 0,38.
Příklad 90
Reakcí H-Me-Tyr-D-Ser-Gly-Phe(6H)-Leu-OMe (výchozí materiál 102) ve vodném roztoku se 2 ekvivalenty hydroxidu sodného a stejným zpracováním jako v příkladu 89 se získá H-MeTyr-D-Ser-Gly-Phe(6H)-Leu-OH o RfC = 0,44.
Příklad 91
140 mg (224 μΐηοΐ) Ac-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-OMe (výchozí materiál 123] se rozpustí v 10 ml teplého dioxanu, roztok se nechá zchladnout na teplotu místnosti, načež se к němu přidají 2 ml vody a 0,75 ml (3,5 ekvivalentu) vodného IN hydroxidu sodného. Směs se energicky míchá 2,5 hodiny při teplotě místnosti, pak se většina dioxanu oddestiluje ve vakuu, zbylý roztok se okyselí přídavkem 1N kyseliny chlorovodíkové a výsledná suspenze se zahustí ve vakuu. К zbytku se přidá vodný amoniak spolu s 0,05 M vodným octanem amonným, čímž vznikne čirý roztok. Nadbytek amoniaku se odpaří a zbytek se vyčistí na sloupci molekulárního síta Sephadex G25 v 0,05 M vodném octanu amonném. Lyofilizací materiálu z .příslušných frakcí se získá Ac-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-OH o RfD = 0,56 a RfD = 0,47.
Příklad 92
Roztok 100 mg (157 μηιοί) H-MeTyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-OMe. HC1 (příklad 1 v 15 ml methanolu se ochladí na 4 °C a nasytí se suchým amoniakem. Výsledný roztok se nechá 2 dny stát při teplotě 4 °C, pak se odpaří ve vakuu a zbytek se vyčistí chromatogra-fií na sloupci silikagelu za použití nejprve rozpouštědlového systému Q a pak rozpouštědlového systému К jako elučních činidel. Odpařením příslušných frakcí a lyofilizací zbytku se získá H-MeTyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-NH? a RfH = 0,22 a R(K = 0,70.
Příklad 93
К roztoku 100 mg H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-OMe (příklad 47) v 1 ml dimethylformamidu se přidá 50 ekvivalentů ethylaminu a směs se 3 dny míchá při teplotě 4°C. Rozpouštědlo se oddestiluje ve vakuu a zbytek se zbaví stopových množství nečistot chromatografií na sloupci silikagelu za použití rozpouštědlového systému К jako elučního činidla. Odpařením příslušných frakcí a lyofilizací Zbytku se získá H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-NHEt o RfD = 0,62 a RfH = 0,50 a RfK = = 0,90.
Příklad 94
V tomto příkladu je popsána příprava (ze známých sloučenin) všech výchozích materiálů značených v příkladech 1 až 93 čísly. Výchozí materiály jsou v tabulkách uvedeny podle počtu zbytků aminokyselin, které obsahují. V každé z tabulek jsou jednotlivé sloučeniny indentifikovány definitivními čísly. Zmíněným číslem je ikaždá sloučenina označována stále, ať už jde o její použití pro přípravu dalšího výchozího materiálu, jak je popsáno v tomto .příkladu, nebo o její použití pro přípravu sloučeniny podle vynálezu, jak je popsáno v libovolném· z příkladů 1 až 93.
Postupy označené v tabulkách symboly Hl až H13, El až ЕЮ a F1 až F3 odpovídají postupům popsaným v příkladech 1 až 42, 43 až 69, resp. 70 až 88. Symboly používané к označení dalších postupů mají následující významy:
Reakce za použití aktivovaných esterů
AI
Roztok 1 mmol příslušné amlnokomponenty a 1,1 mmol příslušného aktivovaného esteru v minimálním objemu dimethylformamídu se při teplotě 20 až 25 °C nechá reagovat tak dlouho, až reakční směs nedává pozitivní reakci s ninhydrinem (15 až 50 hodin). Reakční směs se pak odpaří ve vakuu do té míry, že je možno izolovat surový produkt bud' vysrážením přídavkem vodného organického rozpouštědla, nebo zpracováním vodou nebo směsí vody a vodného or202568 ganického- rozpouštědla, například . etheru. Je-li to nezbytné, provádí se další čištění postupem uvedeným v tabulkách.
A2
Postup stejný jako u AI s tím, že se jako reakční prostředí použije ethylacetát a pracuje se při teplotě 4 °C.
A3'
Postup .stejný jako. u AI s tím, že se přidává 1-hydroxybenzotriazol (cca 0,2 mmol).
A4 .
Postup stejný jako u AI s tím, že se -teplota reakční směsi udržuje na 4 °C.
A5
Postup stejný jako u AI s tím, že se přidá l-ihydroxybenzotriazo-l (cca -0,2 mmol) a reakční směs se udržuje na teplotě 4 °C.
Reakce za použití smíšeného anhydridu
B1
Roztok 1 mmol příslušného- karboxyderivátu v cca 5 ml dimethylformamidu se ochladí na —20 -až —40 — a přidá se k němu nejprve 1,05 mmol N-meehylmorfolinu a pak 1,05 mmol chlormravenčanu isobutylnatého. Směs se 5 minut míchá při teplotě od —20 do —40 °C, načež -se k ní přidá roztok 1 mmol aminosloučeniny v dimethylformamidu. Používá-li se soli aminosloučeniny, přidá se- .rovněž 1 mmol N-methylmorfolinu. K dokončení reakce se směs míchá při teplotě 20 až 25 qC (až do 24 hodin), načež se -odpaří ve vakuu. Zbytek se rozdělí mezi zředěnou vodnou kyselinu citrónovou a vhodné nemísitelné organické rozpouštědlo, obvykle ethylacetát Organická fáze obsahující produkt se promyje vodnou kyselinou citrónovou a pak vodným roztokem kyselého uhličitanu sodpého, roztok -se vysuší a produkt se izoluje odpařením rozpouštědla ve vakuu. Pokud není možno nalézt vhodné rozpouštědlo, postupuje se tak, že se promývá pevný produkt, který se po posledním promytí vodou izoluje filtrací.
B2
Postup -stejný jako u B1 s tím, že se jako terciární báze -použije triethylamin.
B3
Postup stejný jako u B1 - s tím, že k přípravě smíšeného - anhydridu se použije chlormravenčan ethytoatý.
B4 Postup stejný jako u B1 s tím, že se připravuje smíšený anhydrid -s chlormravenčanem -ethylnatým v přítomnosti N-me-thylmortolinu v tetrahydrofuranu.
B5,
Postup stejný jako- u B1 s tím, že se připravuje smíšený an-hydrid s chlormravenčajako terciární báze.
Reakce za použití azidů
Cl mmol hydrazidu příslušného karboxyderivátu se rozpustí v cca 5 ml dimethylformamidu, roztok se -ochladí na —20- °C a hydrazid se převede na odpovídající azid přidáním nejprve 6 M roztoku chlorovodíku (5 až 6- mmol) -v dioxanu a -pak 1,2 mmol terc.bi^tt^yl^i^itrit^u.. Vymizení hydrazidu z roztoku se -sleduje nakápnutím roztoku na filtrační papír a postřikem chloridem železitým a -ferrikyanídem draselným. Během 10- minut se -směs- za míchání při teplotě —10 °C neutralizuje přidáním ekvivalentního množství triethylaminu (,tj. -5 až 6 mmol) a přidá se 1 mmol příslušné aminokomponenty rozpuštěné ve 3 ml dimethylformamidu. P^i^u^ž-vá-li se -soli aminokomponenty, přidává se v tomto stupni rovněž potřebné množství triethylamíjnu (1 mmol). Reakční směs se pak 18 až 24 hodiny míchá při teplotě 0 až 4 °C, zfiltruje se, filtrát se -odpaří ve vakuu ,a - zbytek, je-li to možné, se rozpustí v rozpouštědle nemísitelném s vodou, roztok se postupně promyje vodnou kyselinou - citrónovou, vodným kyselým- uhličitanem sodným a vodou, načež se produkt izoluje -odpařením nebo filtrací.
Reakce za použití N,N‘-dicyklohexylkarbodiimidú
DL mmol příslušného karboxyderivátu se rozpustí v 5 ml dimethylformamidu a k roztoku se za míchání při teplotě 4 °C přidá 1,1 mmo 1 N,N--di.cyktoheyylkarOddiimidu ,a 1 mmol. příslušné aminokomponenty. Směs se pak míchá při teplotě 4 °C (nebo v některých případech při teplotě -20- až 25 °C) tak dlouho, až vzorek směsi nedává positivní reakci -s ninhydrinem (až do 18 hodin). Pokud je aminokomponenta ve formě své soli, přidá se na začátku reakce rovněž - 1 mmol triethylaminu. Po -zfiltrování se produkt izoluje odpařením filtrátu ve vakuu, rozpuštěním -zbytku ve vhodném organickém rozpouštědle, například v et.hylacetátu, postupným promytím roztoku vodnou kyselinou .citrónovou, vodným hydr.ogenuhličitanem sodným- a vodou, -a následujícím -odpařením vysušeného extraktu, nebo vyzrázením přídavkem vhodného činidla, například petroletheru (teplota varu 60 -až 8O°C).
D2
Postup stejný jako u Dl, s tím, že se k reakční směsi přidají 2 mmol 1-hýdroxybeinzotriazolu.
D3 .
mmol -příslušného karboxyderivátu se rozpustí ve 2 ml suchého, -tetrahydrofuranu a k roztoku tse přidá nejprve 1 mmol N-hyld-roxysulkcinimidu a pak 1 mmol N,N‘-dicýklohexylkarbodiimidu v 1 ml tetrahydrofuranu. Po 15 minutách -se přidá 1 mmol aminokomponenty a směs -se 15 -až 25 hodin míchá -při teplotě 20 -až 25 °C. Po· zfiltrování se produkt izoluje odpařením filtrátu ve vakuu, rozpuštěním odparku ve vhodném rozpouštědle, například v ethylacetátu, postupným promytím roztoku vodnou kyselinou citrónovou, vodným hydrogenuhliči-tanem sod202568 ným a vodou, a nakonec odpařením vysušeného extraktu ve vakuu.
Redukce
G1
Pro přípravu liexahydr-ofenylalaninových derivátů se 1 mmol příslušného meziproduktu obsahujícího· fenylalanin (jak je uvedeno· v tabulkách) rozpustí v 80% vodné kyselině octové obsahující popřípadě malé množství kyseliny chlorovodíkové, s obvyklými bezpečnostními opatřeními se přidá 50 až 150 mg Adamsova katalyzátoru (kysličník platičitý) a redukce se provádí uváděním proudu vodíku do míchané směsi při teplotě 20 až 25 CC až do. ukončení reakce (15 až 50 hodin). Katalyzátor se od.straní filtrací přes vrstvičku křemehiny a surový produkt se izoluje odpařením filtrátu ve vakuu.
Hydrolýzy esterů
JI mmol esteru sis rozpustí v 10 až 15 ml 75% (objem./objem) vodného acetonu obsahujícího 1,1 až 1,2 mmol hydroxidu sodného a roztok se- míchá při teplotě 20 až 25 °C tak dlouho, až podle chromatografie- na tenké vrstvě . již - - . neprobíhá další reakce (2 až 3 hodiny). . Většina . acetonu - se oddestiluje ve vakuu, -zbylý vodný roztok se promyje ethylacetátem, - pak -se okyselí, například přídavkem kyseliny - citrónové a - produkt se buď extrahuje vhodným rozpouštědlem, například ethylacetátem. nebo v případě, že extrakce není možná, - izoluje se odpařením. Extrakty se - promyjí -nasyceným roztokem chloridu sodného, - vysuší se a odpařením ve vakuu se z nich získá žádaný -karboxydeirivát.
J2
Postup- stejný jako u JI, ale -za použití směsi - vody, methanolu a acetonu.
J3 . '
Postup - stejný jako u JI s tím, že se jako reakční- - prostředí použije vodný methanol.
J4
Hydrolýza se provádí působením 1 ekvivalentu hydroxidu -sodného ve vodě a produkt se izoluje odpařením ve vakuu ,ve formě sodné-soli.
J5
Postup stejný jako u JI s tím, že se jako reakční prostředí použije vodný dioxian.
Acýlace
K1
K ledově chladnému -roztoku 1 mmol příslušného- glyceryl-monoesteru v 1 ml chloroformu, obsahujícímu 3 - mmol pyridinu, se přidají 3 mmol acetylchloridu a směs se 18 hodin míchá při teplotě 20 až 25 °C. Rozpouštědlo· -se oddestiluje ve vakuu, zbytek se znovu rozpustí v ethylacetátu, roztok pe postupně promyje vodou, nasyceným vod ným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou, vysuší se a odpaří se ve - vakuu. Získá se surový produkt, který se trituruje s mialým množstvím methanolu a nakonec se odfiltruje.
Glyceryl-monoester potřebný pro tuto acylaci se připraví následujícím postupem;
mmol příslušného chráněného isopropylideneisteru ve 300 ml ž-methoxyethanolu se 5 hodin zahřívá na parní lázni -s 500 mmol kyseliny borité, načež se rozpouštědlo -odpaří ve vakuu a nahradí se ethylacetátem. Po promytí -vodou se roztok vysuší a odpařením ve vaku-u poskytne olejovitý ester, který se dále čistí chromatografií na sloupci silikagelu.
K2
Postup stejný jako v K1 s tím, že se namísto acetylchloridu použije palmitoylchlorid.
K3 mmol glyceryl-monoesteru chráněného· benzylidenovou skupinou a 4 mmol kyseliny borité v 5. ml trimethylborátu se 20 minut Zahřívá na parní lázni. Trimethylborát se oddestiluje, zbytek se dalších 20- minut zahřívá na parní lázni, pak se rozpustí ve 30 m:l ethylacetátu, roztok se promyje vodou · a odpařením se z něj izoluje volný glycerylmonoester. Aceiiylace se -provádí za použití acetylchloridu stejně jako u Kl.
K4
Postup stejný jako u K3 s tím, že se k finální acylací použije hexanoylchlorid.
Esterifikace
LI mmol bezvodé chráněné aminokyseliny se při teplotě 0°C rozpustí v 10 ml suchého pyridinu -a k roztoku se přidá 10 mmol benzeiin>ulfonylchloridu. Směs se 15 minut míchá -při teplotě 0 °C, načež se - k ní přidá 10 mmol příslušného alkoholu (jak - je Uvedeno- v tabulce). Výsledná směs se 18 hodin míchá při teplotě 4 - °C, načež se - - pyridin oddestiluje ve vakuu. Zbytek - - .se - rozpustí ve 150 ml ethylacetátu, roztok se postupně promyje vodou, 1 N kyselinou chlorovodíkovou, vodou, 2 N vodným hydrogenuhličitanem draselným a nakonec znovu vodou, vysuší se a ethylacetát -se odpaří, čímž se získá surový produkt.
L2i .
K roztoku 5 mmol příslušné chráněné -aminokyseliny v -5 - ml pyridinu se při teplotě 0 °C za míchání -přidá 10 mmol fenolu a 10 mfmol N,N‘-dicyklohexylkarbodiimidu. Směs se 18 hodin míchá při teplotě 4°C, pak - se zfiltruje, pyridin -se odpaří ve vakuu, -zbytek se rozpustí ve 100- ml ethylacetátu a roztok se postupně promyje vodou, 2 N vodným roztokem hydrogenuhličitanu draselného- a znovu -vodou. Odpařením vysušeného- extraktu se získá surový ester.
L3 mmol příslušné chráněné aminokyseli202568 w
ny se ·při teplotě 0°C rozpustí v ace.toínitrilu a přidá se · 10 ml příslušného alkoholu spolu s 20 mimo! pyridinu a 11 mmol N,N‘-dicyklohexylk|arbodiimidu. Směs se 18 hodin míchá při teplotě 4 °C, pak se zfiltruje · a odpaří ise ve vakuu. Zbytek se vyjme ethylacetátem a roztok se postupně promyje vodnou kyselinou citrónovou, vodným roztokem hydrogenuhličitanu draselného· a vodou. Odpařením vysušeného ethylacetátového extraktu se získá surový ester.
L4
Postup stejný · jako · u L3 s · tím, že se namísto· acetoínitrilu použije jako reiaikčiní prostředí -aceton.
Reakce s amoniakem
Ml
Příslušný methylester pep-tidu se rozpustí v minimálním množství dimethylformamidu a po· 3 dny se uvádí do styku s nadbytkem koncentrovaného ethanolického roztoku amoniaku při teplotě 20 až 25 °C. Produkt se izoluje vysrážeiním vodou.
Reakce s hydrazinem'
N1
10· mmol methylesteru peptidu se rozpustí ve 25 ml dimethylformamidu a přidá se 50 mmol 60.% vodného· hydrazinhydrátu. Směs se 18 hodin míchá při teplotě 20 až 25 °C, načež se popřípadě zahustí ve vakuu zhruba na poloviční · objem a produkt se vysráží přidáním vody.
Další reakce
PÍ
729 mg [1 mmol) Boo-Tyr-fBdJ-D-Ala-Gly-Phe-Leu-OH (výchozí materiál č. · 161), 0,55 íml (7 mmol) čistého suchého· pyridinu a 0,9 ml (6,7 mmol) čerstvě destíloyaného acetanhydridu se smísí a směs se 10 minut míchá · při teplotě 20 až 22 °C. Výsledný roztok · se 6 hodin zahřívá na teplotu 90 až 92 °C, pak se ochlaldí. a přidá se k němu 15 ml vody. Vyloučený pryskyřičnatý materiál se zbaví horní vrstvy kapaliny dekanltací, dekantací se promyje pětkrát vždy 15 ml vody a rozlpustí se v 50 ml ethylacetátu. Roztok se postupně promyje 4x vždy 10 ml 10% (hmotnost/objem) vodné kyseliny citrónové, jednou 5 ml vody, třikrát vždy 10 ml 10% (hmotnost/objem) vodného hydrogenuhllčitanu draselného a třikrát vždy 10 ml vody, vysuší se bezvodým síranem horečnatým a odpaří se. Podle NMR je výsledný pevný zbytek [530 mg) směsí L, D, L, L a L, D, L, D forem sloučeniny vzorce
Ac CH2—CHMe2
I i
Boc—Tyr (Bu‘) -D-Ala-Gly-P'he-NH-C'H-COOCH3 ;
RfD = 0,73, RfH = 0,64, RfP = 0,21 a
RfQ = 0,47.
Q1
Z-Ty.r(Bul)—OH [izolovaný z 55,2· g (100 mmol) své dicykl^ot^exyl^^amoniové soli] se rozpustí ve 300 ml suchého teltrahydrofuranu a k roztoku se přidá 50 · ml (800· mmol) methyljodidu. Po· přidání 8,6 g 80'% (hmotnost/hmotnost) disperze nat’riumhrd,ridu v oleji (tj. 300 mimol) se směs 18 hodin zahřívá pod zpětným chladičem v lázni o teplotě 75 °C. Nadbytek natriuηhrdridu se pak rozloží přidáním ethylacetátu k ochlazené suspenzi a pak přidáváním vody až do vzniku téměř čivého roztoku. Tento roztok se zahustí ve vakuu, zbylý vodný roztok se dále zředí 150 ml vody a k odstranění všech zbytků přítomného (methylesteru se dvakrát promyje etherem. Vodný roztok se přidáním kyseliny citrónové okyselí na pH 3 a extrahuje se nejprve 400 ml a pak dvakrát vždy 200 ml ethylacetátu. Extrakty se postupně promyjí 100 ml vody, 100 ml 10% (hmotnost/objem) vodného roztoku thiolsíranu sodného a pak se promývají vodou až do neutrální reakce promývací kapaliny. Odpařením extraktu vysušeného síranem horečnatým se získá olejovitý zi^i^tek, který se suspenduje ve 200 ml teplého petroletheru (teplota varu 60 až 80 °C). Přidáním ethyl acetátu se suspenze převede na čirý roztok, z něhož se po ochlazení na 4 °C vyloučí pevný Z-MeTyy(JBl)-OH o· teplotě tání 96 až 99 °C.
Tento způsob je založen na methylačnfm postupu, který popsali J. R. McDermot-t a N. L. Benoiton, Can. J. Chem., 1973, 51, 1915.
RT
K roztoku 5,33 g (17 mmol) Phe-Azleu-NH2.HCI a 2,45 ml (17 mmol) triethylaminu v 50 ml chloroformu se přidá 3,87 g (17 mmol) Z—NHNH—CO—Cl. Směs se nechá 16 holdin reagovat při teplotě místnosti, načež se k ní přidá 400 ml ethylacetátu. Výsledný roiztoik se postupně promyje vodou a 20% (hmotnost/objem) vodnou kyselinou citrónovou, vysuší se síranem sodným· a odpaří se ve vakuu. Zbytek se vyčistí chromatografií na sloupci silikagelu za použití chloroformu, 2% (objem/objem) methanolu v chloroformu· a rozpouštědl-ových systémů P a Q jako elučních činidel. Získá se pevný Z^g^^^-Azmu-NEh o (teplotě tání 116 až 120^0 (rozklad).
S1
Roztok 17,5 g (30 mmol) Z-Tyr(Bzl)<^Cp a 4,38 g (30 m^c^l) Boc-NMeNH2 v 50 ml diηethylforηamidu se nechá 18 hodin· reagovat při teplotě místnosti. Po zředění 500 ml ethylacetátu se výsledný roztok postupně promyje vodou, 20% (hmotnost/objem) vod202568 nou kyselinou citrónovou a znovu vodou. Odpařením vysušeného extraktu ve vakuu se získá pevný zbytek, na který se přímo působí roztokem 100 mmol chlorovodíku v ethylacetátu po dobu 2 hodin, při teplotě místnosti. Odpařením rozpouštědla ve vakuu se získá Z-Tyr (Bzl)-NHNHMe . H'C1 o teplotě tání 223 .až 224 °C; R(D = 0,82, RfF = 0,64 a RfQ = 0,63.
9,4 g ('20 mmol] shora uvedeného hydrochloridu .se rozpustí ve 200 ml chloroformu a k roztoku se přidá nejprve 2,8 ml (20 mmol) triethylaminu a pak 2,3 g (20' mmol) methyl-isokyanatoacetátu. Směs se 18 hodin míchá při teplotě místnosti, načež se rozpouštědlo odpaří ve vakuu. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a roztok se postupně promyje vodou, 20% (hmotnost/objem) vodnou kyselinou citrónovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a znovu vodou. Odpařením vysušeného extraktu ve vakuu se získá Z-Ty.r (Bzl)-Azala
-Gly-OMe, který po krystalizaci ze směsi methanolu a etheru má teplotu tání 107 až 108 °C.
V tabulkách IV až XIX je v prvním sloupci vždy uvedeno číslo příslušného výchozího materiálu, který je v následujícím sloupci nebo, ' v následujících dvou sloupcích popsán svou strukturou. V sloupci označeném „postup“ je. u.vedeln postup, který se v daném případě používá, la pak přehled čísel nebo struktur výchozích materiálů, s .nimiž se tento· postup provádí. V následujících sloupcích jsou uvedeny údaje o hodnotách Rf · a v posledním sloupci jsou uvedeny poznámky vysvětlené za tabulkou· XIX. Tak například výchozí materiál č. 13 v tabulce IV, jehož struktura je uvedena ve druhém a třetím Sloupci, se připravuje z,a použití postupu Hl, aplikovaného na výchozí materiál č. 24. Produkt po překrystalování ze směsi isopropanolu a etheru má teplotu tání ·181 až 183° Celsia.
202588 ¢4 тН гЧ т-Ч гЧ гЧ СО Нт-1
Рч
Q гЧ гЧ гЧ Ш
Q Л 1D to
СО Q) СП гЧ
Ю СО ÚD ts со ь, оо ню со to t> to l· ř-=~.
О
4-» Ф t> 00 Ст) Ю t4 со гЧ
CM CM c\j гЧ гЧ СМ
Ьч rH £** гЧ ыыыы
Ml М< Тр тГ ssa»
СМ О СО to см со см см см
СО Ьч тН гЧ гЧ
Д ы йхж
к ъ
о оооосойо ggaxBKiSS Sxxxxxxxx ПГ i t i i i i i i
КНффФфФффф
Здддддххд й
I к
ω ω о ои
Д Я Ж ДД >< ><><><>< i i ά ii φ ω α> φΦ »J L_3 >j>j i д i ii
НМЮ^ЮЮЬООСГ)
тН cm co xr гЧ гЧ гЧ гЧ
O
CD
CD ¢4
CO rH OJ
O ts b>
| b* | Ю | O | 0П rH CD |
| CD | 1^ | ts | b> bs 1Ό |
co
TABULKA V
CD cd Ό o
CD s x
I
Д
CD X h-H
Ň
| <N X o | O. | X | ω ® X O | |
| O | <J—o— O | o | 8я ó o |
| CD o | Q | |
| rH CM | CM | |
| X | . r. | |
| o | rH rH | CM |
| o |
| CO | CD | O rH | CM | CO ’Ф Ю | |
| rH | t—1 | rH | CM CM | CM | см см CM |
fa о тй
X ř£
Ctí ТО О 4-J Ф S
о r>
Ťtl оо
TABULKA VI
ω Ó PQ
Л Рч О
СО Ьч 00 о о СМ СМ СМ СМ СО tx СЧ р 10 00
СЧ Гч сч со о»
О Ь N OOQO СЧСЛ гН
СО Гч СЧ 10 СО СМ гЧ Сч
202588 >ч е 'СО Д § ад
а гЧ х
См гЧ ад
СЧ ’Ф О ел ел ел
CD гЧ гЧ
Q гЧ гЧ гЧ гЧ тН СЧ СЧ
СЛ СЛ О 10 О О) Сч СО СЧ ОМ ’Ф 10 СМ гЧ Ф СО 10
Ф Γχ о> ел
| со | о ел | СЛ Сх |
| TJ1 | Ю ’Ф | 10 Сх |
| о | о оо ад со со | СП СО | ř< ад см | Сх СО Q Щ |
| со | СО СЧ Сх СЧ Сх СО | tx Гх | 10 СО со | СО 00 ’Ф |
| сч | ад сч | ад | TJ1 | СЧ СЧ гЧ |
| со | ад tx | ад | ’Ф | СО Гч 10 |
СО тН Гч О) 10 О 00 S ср ’Ф со tx 00 10 00 Сх СО СО СО СО СО 10 СО tx tx СО ф
S о
I
Ф
TABULKA VII сб
4-1 СП
U φ
Φ ρ ο ϊ
О д
J3 Ζ
Ο + ад φ οο д S10 + ж Τ о
X
I t ф ад ад z
I . ~ X · X ~ ЬО · * · rh · *
^)ГЧцо N СО 'р О СЧ о X ф Š О
N
Лб
X ем
X z <
ф §
Р- i + Ф Ф р, ж£ ”9 «
8* д д см со + +1< ς?< д 9 ь ж д ж η N q о ф Š ад * Ňg Ю И ад со
Сх со сч Q о
X •771 о ф ФД Д
СЭ о ад ад
Ф
Я ** о Ж Ж ф -° 3ZZt5 й й<5 i 3 о 2 о 5 я i*”
СЧ СО ’Ф 10
СО 00 СО СО ел со +
сн
СО +
ее сч со +
X со со + ел X О ^9 >
ел сч + ж+ё Я а ó Š 14 я <¥ <
Q ад * ад
-Д<ИДО6Х Гч . L ΧΊ Р <
I
N ад
I Ά
N 3 ад ад см р ад дХ гН ' С О Ю Д X о · -+ + Ч ° s2 X s 9
O§2N.
гД ф ф N
PQ
Сх ад
СП ф
§
I д °δ £
СО Ф 'ω’δ з — ем ф X ж ο §<, *Σ φ 9 Σ.2 9* φ φ _ ад φ J · -- —’ — 77 ад н Ф U - К S X
S ф ф 9 о · »S SŠ щ399^7§
О Е—z ад ад ад ф 7g^ ωi99^£ώ
О X ф
S О д
I ф ад φ δ Σ
Φ л Ж !7 S S ω°?9
ΙΖΙ““Γ=ξ-41Ι
S”?£9SgS--9cb ο ο ϋ —1
Μώο9 9ω<JXS9 ο “ ο ό
CM X z д φ <ž t
Φ ад ад
Ί >4
CM
X z í
Ф _ N δ S gQQ ?C мт!
« 'ť Й 4· N-l 5 ~~ ί ΞΝ·Μ^9 *N,£ ж ж ф ад ад ώ
·. Л JX<J о ад ад
ООО ад ад ад > As Α< _ 2β“·3ζτ я 9 «- cq u/cq N ад g СП ř4 СП £н i—* nSqňn^ я N бОСПОгЧСЧСО’ФШСОСхбОО^ад
0ΟΟΟ^<Φφ’Φφ'φΦΦΦ’Φ10 < ад тНтНечео’Фшеосхооа)
10 10 10 10 10 10 10 10 10 £55
тЧННСЧНЮН гй ν-ι со гй о гй чк СМ гЧ см <3
М1 Ю СО М1 о СО Ьч о
Ьч со Ьч СМ СР СМ Ср
Ьч оо ср тй
Ьч СП см db со со Ьч Ьч
Ьч 1Л со О 1Л О 1Л Ьч СО Ьч ю Ьч
| Ь) гЧ | 00 | со | гЧ СП 00 | тй СП |
| Ьч ю | Ьч | Ьч | СО Ьч 1Л | СО Ьч |
со cd тз о
4-<
0)
S
TABULKA VIII
>4 δ < X
.
ÍX® > а
Огчмео^1лсо1>оост)©гйем ср ср. срсососрсосрсрсогхЬчЬ» ю
Ьч Ьч Ьч
| rH | rH rH LQ CD ČM CM | M< CM | |
| rH CD | ООО | 00 | |
| СО Ю | M1 LQ t> | Ml |
OJ b> OJ IS tx гЧ co ts co co ÍS OJ x
cd Td o
M< oo
M< s co co LD IS
СО O OJ 00 CO CM O t> CD CD CD t> ČD CO
+
Z O i +-»
Д CQ
C-4 Ф CO < Q
I N
Ód Q
TABULKA IX cd ř-<
-η ° о и χΛ z §z · CZ/CD Φ íj • ·« >>i.5 A o Z 0 “ÍÁ · zg s-;^
M) >0 <«цТ!ДАдЗ
9 i 2 < ώ J~2¾ 5
C < д Q N <0.0 SiřQ Ы ω Q?i-Ň
K® £hqN NŇ o z z o uLj «О 4 φ .
SH1 a?*? z o g “ ώ Z^gg Φ £ rk Λ
Z 2
I д φ
N <
Φ ϋ Z φ
s
Φ o
t φ
dj s « 9> RCDřSaÓOjQHCMCÓMlLOCD btxbbČOOOCOoOCOODOO
| Č< гЧ | t—1 | co ω он | in | гЧ т-Ч гЧ ID | |
| CM | CM CM co cp | CM | см |
| CD 00 | гЧ | О гЧ СО | О | tx řx tx |
| гЧ r4 | tx гЧ tx | СО | ID CM |
CM ID гЧ СО
LO 00 bx tx (M CO tx CD
| CM | ID Ю | CM CQ 00 ID | co | tx | tx |
| CD | ID ID | CO tx to CO | ’Ф | CO | tx |
fa o to to to
| O | O b- | O) | iň |
| in | co co | to |
| CO Č0 | ČM čo | o | co | гЧ tx | О oo oo | ||
| 1—i | to co | CD cp | CD | ID | cp tx | co | r4 tx CP tx |
TABULKA X
202588
§
X р?
К
СП гЧ
СП
С5 ю гЧ Ьч см ιη LO ср Οό Гч
Líb гЧ тй СМ СП чг ιη Ь* 00 оь оь cd оь
СП СП NOSh СТ) ’Ф СО СО ь* Ьч Ьч м<
TABULKA XI
| (ϋ | ΙΓ) Ó bs 00 < |
| ιη iň ιή íň ιη ι | |
| ο | Η Η Η Η τ-Η |
| +-» | |
| ω | cxj όό гН тИ < |
| 2 | Ь ta ta ta pL| 1 |
гЧ rd ’Ф 1Л Т-Ч г-4 Xt< гл co rd ¢9 co со со
HHH .1ЛЮ xj< rd rd rH ОТ b <*> СМ СМ со со
OO o oo xh oo co oo □ oo от oo от o ©cdin o oo b tS CN t> b CD b> ь co in cm LQ t> b tx tx
CD b CP CD íň oo co CD ОТ ОТ oo CO od oo o rd
X c2f
К oo LTC
oo CM in rd O IřC S t\ S b OO S b> LQ b
CO b © b OO CO CM ΪΗ CO LQ co CO b op rH 65 от σ> oo OO CO b
Ó Hin oo o co co oo b b oo b oo b b
OJ OO b cp bs
PQ O
I o o 63 X CD CD .
6i + + 5 d A.aK có 6
CO tS co T3 o
4-»
0) s
CM *Φ co xr C?rtUOK ^2+99* &ЛЛ « rd rd i rj —i < ьЗ •T-ZOíSíS ώ rd cq i · ZlCLtí x d VtT* ж < xL sí .i.
b>
b + + & r& _ _ o cr oooo©oo
P< a a & o o U O C Z Σ Ξ _ ÁÁÁÁN oo b
+
Λ o α z—' со
TABULKA ΧΙΙΪ čd
Ph
4-J d
Ph +-» CO
>b cú > a
iň — , + + + o z z ®
X?9 + § N N c§
ŇN.N. др 4η čí <C J ’
N N N N N N гЧ 'N N
МЙЙРОнЙ®<Й(дЙ
N N < <
!h § b b »b ЕчЕчНН b b b ba
CO . ~H H ж . - ь . _ . w . чж I I I · t i i éq < N N + N N N N Q “ .-от .r4 rd 1Л CM СМ xfl rH < <3 .< < <
О
a cm
C^COo^inCDD.«ooDCCidCČDOincDb(K<Djčrr4M ČNCNMNNNCOCO CO(CCCCOCDODO><ODO'ΦŤ г4гЧтЧг1тЧНтЧННг1 rH rt rl rH rí rH rd γΗ H rd · tH
rd
О r4 CM rH CO m Tt< xť
т-H СОЮЮСОСОШСО \fl СОЮгЧСОЮСОщ
O)
N o yH
X
CO H O rH xji cp ts b oo 00 CD Ю
cú
4-»
Д1 a &4
4-» co
frt ±ť
PQ čh
O rH СЧ co r CD < p>> ' f< co — _ . . ., -. тф^юююю rH rH rH rH rH rH rH л Л Рч ca ч
I ω O CQ
202508
υιηιη НН N NN
ÓO S гЧ CM ’Ф in CO CO tx tx CD rH CO co on со cm co co tx tx tx tx tS tx
b r-1
X £
co in CD tx
CD δθ tx 03 M 00 tx tx CD. CO tx
m гч rH □5 . . ..
<n M И tx čo 03 + + + iň in in 03 03 03 éí cM cm QQQ o rH +
Ю
CM-
TABULKA XIV
o
CD
CD СО Ф гЧ rH <Ф ¢0 см см
Q СО СО 0О СО СО LO CD Φ
Οίηιη ю оо со ίο m
со со гЧ
X Я с?
СО СО OD Ф
CO CD CD
LO 00 СО ’Ф Ю b. Й s o
CD
í> О СП ΙΟ 1ГЗ
CO CO CO b b
CO CM O CH CD co Ib* тЧ CM CO
OrlH CO I> bs
CM CM tb b*
TABULKA XV
Л
CL!
>>
ca o gx ~»-q a ·
CQ
Fh >4 H
I ω O CQ
CM CQ
Я O
CQ
CM 00 ф rl Η H
4—l· 4~
CO 00 00
03 03 см* см Cm* Q Q Q
тЧС^СОФйЗСОЬСООЭО^ЧСМС’О’Ф
СОСРСОСОСОСОСОСОСО|ь|>Г>[>|>
ΗτΗΗΗΗΗγΗΗΗΗΗΗΗτΗ
TABULKA XVI
тй см
тй хд
| Ш CD 00 | CO тй | 00 тй | тй Lň | ЧМ Ьч гй | СП | Ф | О | ю |
| со со см | CM см | со со | СО тй | CQ .CO Ьч | СО | со | со | Ьч |
oo ÓĎ Ьч 03
CO 00 o co
Ьч CO 03 03
Ьч ΙΩΝ CO
CD O) CO
CO
CD 03
| тй О 00 ОЗ | О Ш СО тй СО | со |
| тМ Ьч СО Ьч | СО Щ ТЙ СО Ьч | ю |
| О О 03 | тй | 00 | со | о |
| 00 00 о | Ьч | со | со | 03 |
Ю Ьч Ьч Ьч ID
CO CO ΙΩ см оо
Ьч Ьч CD
Ьч
СМ
TABULKA XVII
о ČD гй +
г—· N
CQ О
I >4 гЗ ( N
см +
К О
I сл >4 кй
N ώ
Л ω о PQ с\Г
О
| __ μ-q | сл ,___ >ч ей | сл >> | сл |
| N | ьз | — ей 1 | >ч |
| N | 1 1 | ||
| N | >4 | __ | N |
| CQ | [_______ | ||
| о | 3 | аз | |
| >ч 3 | F—1 и I | N сл >ч | Л CU ω |
| i | >ч | ЕЙ | О |
| ~5 | 3 | N | PQ |
| N | ЬЗ |
| 00 | СТ) | о | тй | СМ | СО | Ю | СО | Сх | 00 | 03 О | тй | СМ | СО | Mi | ю | |
| ts | о | со | СО | оо | оо | СО | СО | 00 | оо | 00 | 00 СП | ОЗ | ОЗ | ОЗ | СП | 03 |
| тй | тй | тй | тй | тй | тй | тй | тй | тй | тй | тй | тй гй | тй | тй | тй | тй | тй |
со СП
CD
202588
a
X řX ta
Q cú ta o
oo +
co xf<
| 00 rd ХЛ | CO rl Η H rd | |
| xr | cm | ”Φ |
r mor in in co
SJ r v* Й tn rH CM 9
CD
CD
CM
CD ’Φ
CD Ю xr oo oo ю CM
CM rd CO rd CO xf· LQ cú
CM
CO CD
ID rd N b.
cb m x< in b, Ю
CD
CD o
CD in CD
CD co tx
CD
CO oo ao O — г-ч -- —
CO
CD
CO
D)
CM co CD
O ts
CO o
CO
CO (S
CD CO in
O ts in CD
CD iň co
CD ID
CD tx
Mi IS
CO co
CM in +
oo . - CM CM Q Q + a СЛ Z O /-—i *b óo q co
4СЧ к Z Д Z
O
CM c\T ta r-Γ Д ta C N Cm
ČD
CD
X ta _ _ + <ŤÍ7Í __rd ta oo CD >,ir) « ас ж s£á'
CO o
i + <x
O
Ib CD rd CM tH CM X ta
_. .. Φ ”Ф in h X X * _
W Μ Μ Μ W oo Ю
X X
I N rd o
CQ
TABULKA XVIII
CD s o
I
CD ta i Φ 43 φ >?2 0 O i i < ta Q ώ • ta
H >4 <d
5-4 •M Λ 5 5н to ta ta
Й 0 CD O ώ § 2 < 9 O Q ® ói·? tn >1 Φ
Φ 1 ω -O 9 2
5-i Φ QO ta 3 1 ω ta ta >
tt9 ' ? i3s £iQ ta ta Λ >,Д é £<^^Х0 0Л> ta fU Q 0>>O ад ta ta O >40 0 ta 'ω 5-4 Jd (Л ω ·~^ I ·· <<<< 9 O g g Q A) ’ i I I . I . i UJ LJ . I .·
N N---- -----I I I UJ LJ I » nKnců» E Д co o on C5 rd tH rd 04 00 ta in oo b*. o Ooocoa CM CM 04 04 CM 04 04
S Д K KKK o o O o O O «•'<1 ё 8 ё 8 88 + m M CQ M ИCQ йф tn ω oq oo oo10 j J ta J jta* £
N 8 8 8ύ n ύ ύ о оо
Ň* S CO CQ ήη OJ CM* CM č* CJ QQQQQ
' , Φ co ta
Q °9 >4 &4
E~< Я A ω СЛ i _>0 ta i
_ta
Φ ta ta t
CJ o ĚQ •^4 ta
CD s i ω řb ta
I N
Z i ta Q t
CD 43 ta t
I s < Q f-i ta i
N Ϊ ta
I N
ÍO o 04
CD o CM
O rd 04
CO 04 04
ÓxT N < ta Eh £ íS ω φ S CD φ ^zsszss £:зОО s OO O 2 4 á 2 4 s A N 2 φ N 2 ® d < S q <0 s J P < i i i i · ДфффффФ — ta 43 43 43 43 £ yta tatatataU e φ I t I I I ’ 5-4 co 2? дЬ2? —'—1 ·£ ώ5ί5ί^ζ^ί5ΰΕ7' t _!L 2 · « « S S
2 54 SS S *□ ta .—< < φ 0)^0 4;
< <C N«o«o< t —Q o < q Q q Jg ti 1111 ó£ ΗηηηηηηΛ' S ΑΛΛΑΛ£ O ’τωω.οωω^Λ *—0000002 0 SSSss g *? ' “šit !°α?4 on J J J JJ O t bs · i « i tu >* ta o ω ' - ' ' Ь P- i N t4 « O
I ř-X-H t; ta o 0 8 8 О н ta CQ CQ CC P-ŇK
CM
CM 00 in CD b* 60 rl H rl »< rl rl řl
CM CM 04 64 CM CM
202588
TABULKA XIX
Výchozí materiál Boc-TyrfBuJ-D-Ala-Gly-Phe- Metoda Rf x 102 Poznámky
č. -Leu-X D H Q in h UDUOW cm cm ba Tf
ID HŤ rH Cd •f m in co rf co
Tť OO ID CD tx tx CD
S2
Poznámky (tabulky IV až XIX) vyčištěno vysrážením 'teplota tání 160 až 161 °C (rozklad) překrystalováno z petroletheru (teplota varu 60 až 80 °C) překrystalováno ze směsi isopropanolu a etheru; teplota tání 181 až 183'°C překrystalováno z isopropanolu; teplota tání 193 až 194 °C chromatografováno na sloupci silikagelu za použití chloroformu a 2% (oibje|m/ /objem) methanolu v chloroformu jako elučních činidel chromatografováno na sloupci silikagelu za použití chloroformu jako elučního činidla chromatografováno na sloupci silikagelu za použití chloroformu ia rozpouštědlového systému P jako· elučních Činidel překrystalováno z ethylacetátu; teplota tání 128 až 130 C'C chromatografováno na sloupci silikagelu za použití 25% (objem/objem) ethylacetátu v cyklohexanu chromatografováno na sloupci silikagelu za použití rozpouštědlového· systému G jako elučního činidla překrystalováno ze směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60 až 80° Celsia); teplota tání 96 až 99°C překrystalováno ze Směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60 až 80° Celsia); teplota tání 202 až 203°C' překrystalováno z ethylacetátu; teplota tání 122 až 123 °C chromatografováno na sloupci silikagelu za použití rozpouštědlových systémů P a Q jako elučních činidel překrystalováno z ethylacetátu; teplota tání 177 až 179 °C překrystalováno ze směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60 až 80° Celsia); teplota tání 122 až 123 °C překrystalováno ze směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60 až 80° Celsia); teplota tání 108,5 až 110 °C překrystalováno z methanolu; teiplota tání 219 až 2,20 °C překrystalováno ze směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60' až 80° Celsia); teplota tání 121 až 122°C překrystalováno ze směsi toluenu a benzenu překrystalováno ze směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60 až 80° Celsia); teplota tání 133 až 135 chromatografováno na sloupci silikagelu za použití rozpouštědlového systému P jako elučního činidla chromatografováno na sloupci silikagelu za použití 3% (objem/ohjeim) methainolu v chloroformu jako elučního činidla chromatografováno na sloupci silikagelu za použití rozpouštědlového systému Q jako elučního činidla překrystalováno ze směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60 až 80° Celsia); teplota tání 122 až 1,24°C / překrystalováno ze směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60 až 80° Ceisia); teplota tání 115 až 118 °C překrystalováno z vodného methanolu; teplota tání 162 až 163 °C překrystalováno ze směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60 až 80° Celsia); teplota tání 130 až 132°C překrystalováno ze směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60 až 80° Celsia); teplota tání 156 až 157 °C lyofilizováno· v přítomnosti chlorovodíku lyofilizováno, chromatografováno na sloupci silikagelu za použití rozpouštědlových systémů P, Q а К jako elučních činidel překrystalováno ze směsi ethylacetátu a cyklohexanu; teplota tání 163 až 164° Celsia.
překrystalováno ze směsi methanolu a etheru; teplota tání 130 až 131 °C během zpracování dojde к hydrolýze esteru; viz výchozí materiál č. 1'37 chromatografováno na sloupci silikagelu za použití rozpouštědlového systému К jako elučního činidla překrystalováno ze směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60 až 80° Celsia); teplota tání 172 až 174°C překrystalováno ze směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60 až 80° Celsia); teplota tání 140 až 141 °C chromatografováno na sloupci silikagelu za použití směsi ethylacetátu a methanolu jako elučního Činidla překrystalováno ze. směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60 až 80° Celsia); teplota tání 162 až 165 °C (rozklad) překrystalováno ze směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60 až 80° Celsia); teplota tání 111 až 113°C chromatografováno na sloupci silikagelu za použití 1% (objem/objem) methanolu v chloroformu jako elučního činidla teplota tání 121 až 122 °C chroimatografováno na sloupci silikagelu za použití rozpouštědlových systémů Q а К jako elučních činidel překrystalováno z ethylacetátu; teplota tání 248 až 250 °C vyčištěno· na molekulárním sítu Sephadex LH20 v dimethylformamidu překrystalováno· ze směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60 až 80° Celsia); teplota tání 152 až 155°C překrystalováno ze směsi ethylacetátu a petroletheru (teplota varu 60 až 80° Celsia); teplota tání 164 až 168°C chromatografováno na sloupci silikagelu za použití 5% (objeim/objem) methanolu v ethylacetátu.
Claims (7)
- PŘEDMĚT VYNALEZUi. Způsob výroby polypeptidů obeeného vzoree IRi \Tyr-B-E-F-G-K , /R2 (I) ve .kterém!Ri znamená atolm vodíku nebo alkylovou skupinu s i až 6 atomy uhlíku,R2 představuje atom vodíku nebo zbytek vybraný ze skupiny .zahrnující. alkanoylové skupiny s i až . M atomy uhlíku, alkoxykaTbonylové skupiny ' se 2 až 6 atomy uhlíku a Zbytky aminokyselin Arg, Gly, G.lu, Asp, Phe, β-Ala nebo1 Lys či D-Lys, z niohž oba posledně jmenované mohou být popřípadě ' substituovány na ε-aminoskupině alkoxykarbonylovým zbytkem se 2 až 6 atomy uhlíku, nebo R2 představuje dva až šest zbytků a-aminokyíselín. spojenýoh : dohromady normálními peptiidiokými vazbami, kteréžto zbytky aminokyselin jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny zahrnujím Gly, Lys, D-Lys, . Pro, PheGln, Glu, Leu, Arg a Asp, přičemž zbytky Lys, D-Lys a Arg .mohou být . popřípadě alternativně napojeny přes .své ε-amino-, res.p. guanidinoskupiny a zbytky Asp a Glu . mohou být : popřípadě alternativně napojeny přes své .β-, relsp. y-kaTboxyskupiny,B: znamená zbytek D-Sér nebo D-Thir, oba popřípadě substituované na (Mhydroxyl-ové skupině alkylovou skupinou s i až 6 atomy uhlíku, nebo B znamená zbytek D-Ala, D-Leu, D-Asp, ’. D-Lys, ” D-Trp, D-Met, β-Ala nebo Azala,E představuje zbytek Gly, . β-Ala nebo. Azgiy,F Znamená zbytek Phe, . hexahydroPhe, Azphe : : nebo hexahydroAzphe, které mohou být : popřípadě substituované na a-aminoskupině alkylovou skupinou s i až 6 atofmy uhlíku,G představuje zbytek Leu, D-Leu, Met, D-Met, Nle, D-Nle, Ile nebo D-Ile, které mohou být popřípadě substituované na a-aminoskupině alkylovou skupinou s i až 6 atomy uhlíku, nebo G znamená zbytek Pro, Azleu nebo· Azpro aK znamená hydroxyskupinu, ammoskupinu, zbytek : obeoného vzoroe · ORM , kdeRM představuje alkylovou, alkenylovou nebo: hydroxyalkylovo-u skupinu s nejvýše 6 atomy uhlíku, aminoalkylovou skupinu s nejvýše 6 atomy uhlíku nebo alkylaminoalkylOVĎU s nejvýše 10 atomy uhlíku, přičemž v obou posledně zmírněných skupináoh je : dusíkový atom popřípadě substituován benzyloxykarbonylovou skupinou, nebo RM představuje fenylový zbytek nebo: zbytek obecného· vzoroe II, III nebo IVCH2OR4 —OH .CH2OR4 .(II) —CH?ICHOŘ4ICH2OR4 (III) —OH20H2OR4 (IV) .kdeR4 znamená' alkanoylovou skupinu s i až 20 atomy uhlíku, nebo K představuje zbytek obeoného: vzoroeNHR5 , kdeR5 znamená alkylovou nebo Gykloarkylovou skupinu s i až 6 atomy uhlíku, zbytek obeoného vzoroeNR6R7 , v němžR6 a R7 buď znamenají alkylové skupiny s i až 6 atomy uhlíku, nebo jsou R6 a R7 spojeny za vzniku pětičlenného nebo šestičlenného kruhu, který popřípadě obsahuje heteroatom, zbytek obeoného vzoroe —^—C^H^R4 , kdeR4 má shora uvedelný význam, dále •hydToxyalkylaminoškupinu s nejvýše 6 atomy uhlíku, (clkylαmino)clkylcminotkupinu nebo (dialkylaminojalkylaminoskupínu s : nejvýše i0 atomy uhlíku, nebo K představuje zbytek Gly-OR-, D-Thr-OR8, Thr-OR-, D-Ala-OR8 nebo Ala-OR-, : v niohž R8 znamená atoim vodíku, alkylovou skupinu s: i až 6 atomy uhlíku nebo· zbytek shora uvedeného oibeoného· vzoroe II, III nebo IV, v niGhž R4 má shora Uvedený význam, nebo: k představuje alkylovou skupinu s : i až 6 atomy uhlíku, neboG : a K společně představují D- nebo L-formy zbytku oibeoného vzoroe V neo VI202888 (CHJ-NH (Щ-0 _J—~ ~~ о -WH I *~о (V) (VI) kde in je celé číslo o- hodnotě 1 až - 4, nebo zbytek vzorce VII (VID a farmaceuticky upotřebitelných adičních solí s kyselinami těch -polypeptidů shora uvedeného obecného- vzorce I, které obsahují bazické funkce, a farmaceuticky upotřebitelných adičních solí s bázemi těch polypeptidů shora uvedeného obecného- vzorce I, 'které obsahují kyselé funkce, vyznačující se tím, že se z chráněného polypeptidů odštěpí jedna nebo· několik chránících skupin peptidů za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, popřípadě se k výrobě sloučenin obecného vzorce I, ve -.kterém K 'má jiný význam než hydroxylová skupina nebo kde- K představuje zbytek Gly-OR8, D-Thr-OR8, Thr-OR8, D-Ala-OR8 nebo- Ala-OR8, v nichž R8 má jiný význam než -atom vodíku, nebo kde G a K společně tvoří zbytek shora uvedeného vzorce V, VI nebo VII, karboxylové kyselina obecného vzorce X nebo XIR1 \Tyr-B-E-F-G-OH , ZR2 (X)R1 \ Tyr-B-E-F-OH - ,ZR2 (XI) kde jednotlivé -obecné -symboly mají shora uvedený význam, nebo její -aktivovaný derivát, nechá -reagovat -s -alkoholem nebo- aminem obecného vzorceNH3, R3OH, R5NH2, R8R7NH, H2N—C.H2OH2OR4,HřN-Gly-OR8, HzN-D-Thr-OR8, HžN-Thr-OR8, HaN-D-Ala-OR8 nebo H2N-Ala-OR8, kde jednotlivé obecné symboly mají shora uvedený význam s tím, že R8 neznamená atom, vodíku, -popřípadě s -aminem obecného vzorce Va, Via nebo VilaH-Ň—NH (Vi(a) kde n má shora uvedený význam.
- 2. Způsob podle bodu 1, k výrobě sloučenin Shora uvedeného obecného vzorce I, ve kterémR1 znamená -atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku,R2 představuje atom vodíku nebo v případě, že R1 znamená atom vodíku, představuje R2 alkanoylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo zbytek -aminokyseliny - Arg, Gly, Glu, Asp, Phe, j-Ala nebo Lys či D-Lys, nebo- R2 -představuje dva až šest -zbytků «-aminokyselin spojených dohromady normálními peptidickými vazbami, kteréžto zbytky aminokyselin- jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny -zahrnující Gly, Lys, D-Lys, Pro, Phe, Gin, Glu, Leu, Arg a Asp, přičemž zbytky Lys, D-Lys -a. Arg - mohou být popřípadě alternativně napojeny přes své ε-amino-, resp. guanidinoskupinv a -zbytky Asp -a Gl-u ' mohou být - popřípadě alternativně napojeny přes své β-, resp. v-ka.rboxvskuplιny,B znamená zbytek D-Ser nebo D-Thr, oba popřípadě substituované na β-hydroxylové skupině alkylovou skupinou ,s 1 až 6 - atomy uhlíku, nebo B znamená zbytek D-Ala, D-Asp, D-Lys, D-Trp, D-Met nebo Azala,E představuje zbytek Gly nebo Azgly,F znamená zbytek Phe, popřípadě substituovaný na α-aminoskupině -alkylovou - skupinou- is 1 - -až 6 atomy uhlíku, nebo- znamená zbytek hexahydroPhe, Azphe - -nebo hexahydroAzphe,G ipředssaVuje zbytek Leu, D-Leu, Met,- D-Met, Nle, D-Nle, Ile nebo D-Ile, které mohou být popřípadě substituované na a-aminoskupině- a-lkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo G znamená zbytek Pro, Azleu nebo- Azpro aK znamená- hvdroxyskupinu, aminoskupinu, zbytek obecného vzorceOR3 , kdeR3 představuje alkylovou, alkenylovou nebo hyidroxyalkylovou skupinu s nejvýše 6 atomy uhlíku, aminoalkylovou Skupinu s nejvýše 6 atomy uhlíku, alkylaminoalkylovou skupinu s nejvýše 10 atomy uhlíku, fenylový zbytek nebo zbytek shora uvedeného obecného vzorce II, III nébo IV, kde R4 znamená alkanoylovou skupinu s 1 až 20 atomy uhlíku, nebo К představuje zbytek obecného vzorceNHR5 , kdeR5 znamená alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, zbytek obecného vzorceNR®R7 , v němžR6 a R7 buď znamenají alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo jsou Re a R7 spojeny za vzniku pětičlenného nebo šestičlenného kruhu, který popřípadě obsahuje heteroatom, zbytek obecného vzorce —NH—CH2CH2OR4 , kdeR4 má shora uvedený význam, nelbo G а К společně představují D- nebo L-formy zbytku shora uvedeného obecného vzorce V nebo VI, ikde n je celé číslo o hodnotě 1 až 4, nebo představují zbytek shora uvedeného vzorce VII, is tím, že alespoň jeden ze symbolů В, E, F a G představuje zbytek a-aza-aminokyseliny, vyznačující se tím, že se z odpovídajícího chráněného polypeptidu odštěpí jedna nebo několik chránících skupin peptidů za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém jednotlivé obecné symboly mají v tomto bodu uvedený význam, popřípadě se к výrobě sloučenin obecného vzorce I, ve kterém К imá jiný význam než hydroxylová skupina nebo kde G а К společně tvoří zbytek shora uvedeného obecného vzorce V, VI nebo VII, karboxylová kyselina shora uvedeného obecného vzorce X nebo XI, kde jednotlivé obecné symboly mají v tomto bodu uvedený význam, nebo její aktivovaný derivát, nechá reagovat s alkoholem nebo aminem vzorce МНз, R30H, R5NH2, R®R7NH, nebo HzN—CH2CH2OR4, kde jednotlivé obecné symboly mají v tomto bodu uvedený význam, popřípadě s aminem shora uvedeného obecného vzorce Va, Via nebo Vila, v nichž n má v tomto bodu uvedený význam.
- 3. Způsob podle bodu 1, к výrobě sloučenin shora uvedeného obecného vzorce I, ve kterémR1 znamerjá atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku,R2 představuje atom vodíku nebo v případě, že R1 znamená atom vodíku, představu je R2 alkanoylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo zibytek aminokyseliny Arg, Gly, GÍu, Asp, Phe, /З-Ala nebo Lys či D-Lys, nebo R2 představuje dva až šest zbytků a-aminokýselin spojených dohromady normálními peptidickými vazbami, kteréžto Zbytky aminokyselin jsou nezávisle na sobě vý,brány ze skupiny zahrnující Gly, Lys, D-Lys, Pro, Phe, Gin, Glu, Leu, Arg a Asp, přičemž zbytky Lys, D-Lys a Arg imohou být popřípadě alternativně napojeny přeis své ε-amino-, resp. guanidinoskupiny a zbytky Asp a Glu mohou být popřípadě alternativně napojeny přes své β-, resp. y-karboxyskupiny,В znamená zbytek D-Ser nebo D-Thr, oba popřípadě substituované na j8-,Jiydroxylové skupině alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo В znamená zbytek D-Ala, D-Asp, D-Lys, D-Trp nebo D-Met,E představuje zbytek Gly,F znamená zbytek Phe, popřípadě substituovaný na α-aminoskupině alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo znamená Zbytek hexahydroPhe,G představuje zbytek Leu, D-Leu, Met, D-Met, Nle, D-Nle, Ile nebo D-Ile, které mohou být popřípadě substituované na a-aminoskupině alkylovou skupinou -s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo G znamená zbytek Pro aК znamená hydroxyskupinu, aminoskupinu, Zbytelk obecného vzorceOR3 , kdeR3 představuje alkylovou, alkenylovou nebo hydroxyalkylovou skupinu s nejvýše 6 atolmy uhlíku, aminoalkylovou skupinu s nejvýše 6 atomy uhlíku, alkylaminoalkylovou skupinu ís nejvýše 10 atomy uhlíku, fenylový zbytek nebo· zbytek shora uvedeného Obecného vzorce II, III nebo IV, kde R4 znamená alkanoylovou skupinu s 1 až 20 atomy uhlíku, nebo К představuje zbytek obecného vzorceNHR5 , kdeR5 znamená alkylovou skupinu s 1 až 6 átomy uhlíku, zbytek obecného vzorceNR®R7 , v němžR® a R7 buď znamenají alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo jsou R® a R7 spojeny za vzniku pětičlenného nebo šestičlenného ikruhu, který popřípadě obsahuje heteroatoim, zbytek obecného vzorce —NH—CH2CH2OR4 , kdeR4 má shora uvedený význam, ;nebo· G a K společně představují D- nebo L-formy zbytku shora · uvedeného obecného vzorce V nebo· VI, kde n je celé číslo · o hodnotě · 1 · až 4, nebo představují zbytek shora uvedeného · · vzorce VII, ^vyznačující se tím, že . se z odpovídajícího· chráněného polyp-eptidu odštěpí jedna nebo několik, chránících skupin peptidU za vzniku sloučeniny obecného· vzorce· I, ve kterém jednotlivé obecné symboly mají v tomto bodu uvedený význam, popřípadě se k výrobě sloučenin obecného vzorce I, ve kterém K má · jiný význam než hydroxylová skupina nebo· kde G a K společně tvoří zbytek shora · uvedeného obecného· vzorce V, · VI nebo VII, karboxylová kyselina · shora uvedeného · obecného · vzorce X nebo XI, kde jednotlivé obecné symboly mají v tomto· bodu uvedený význam, nebo· její aktivovaný deirivát, nechá reagovat s alkoholem nebo aminem vzorce NHs, R-OH, R5NHž, R6R7NH nebo HzN—CH2CH2OR4, kde jednotlivé obecné symboly : · · mají v tomto bodu uvedený význam, popřípadě s aminem shora uvedeného· obecného· vzorce Va, Via nelbo Vila, v nichž n má v tomto· bodu uvedený význam.
- 4. ZpUsob podle bodu 1, k výrobě sloučenin shora uvedeného obecného· vzorce I, ve kterémR1 znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku,R2 představuje atom vodíku nebo v případě, že R1 znamená atom vodíku, představuje R2 alkanoylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, nebo zbytek aminokyseliny Arg, Gly, Glu, Asp, · Phe, β-Ala nebo· Lys či D-Lys, z · nichž oba posledně jmenované mohou být popřípadě substituovány na ε-aminoskupině zbytkem H-Glu-Gly-OH, Η-Phe-, · H-Gly-Gly-Gly-, Η-Asp- nebo H-Lys-,B znamená zbytek D-Ser nebo· D-Thr, oba popřípadě substituované · na (-hydroxylové skupině · alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo B znamená zbytek D-Ala nebo Azala, „E představuje zbytek Gly nebo Azgly,F znamená zbytek Phe, popřípadě substituovaný na a-aminoskupině alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo· znamená zbytek Azphe,G představuje zbytek Leu, Met, Nle · nebo Ile, které mohou · být popřípadě substituované na a-aminoskupině alkylovou skupinou s 1 .až ·6 atomy uhlíku, nebo- G znamená zbytek Azleu nebo Azp.ro aK znamená hydroxyskupinu, aminoskupinu, zbytek obecného1 vzorceOR-, kdeR- představuje alkylovou, alkenylovou nebo· hydroxyalkylovou skupinu s nejvýše ·6 atomy uhlíku, amiinoalkyloivou skupinu s nejvýše ·6 atomy uhlíku, alkylaminoalkylovou skupinu s nejvýše 10 atomy uhlíku nebo· fenylový zbytek, zbytek obecného vzorceNHR5 , kdeR5 znamená alkylovou skupinu s 1 · až 6 atomy uhlíku, nebo· zbytek obecného vzorceNR6R7 , v němžR6 a R7 buď znamenají alkylové skupiny s · 1 až 6 atomy uhlíku nebo jsou R6 a R7 spojeny za vzniku pětidenného nebo še^sí^ičle.nného kruhu, který popřípadě obsahuje heteroatoim, s tím, že alespoň jedeln ze symbolU B, E, F a G představuje zbytek a-aza-aminokyseliny, vyznačující se tím, že se z odpovídajícího · chráněného· polypeptidu odštěpí jedna nebo několik chránících skupin peptidU za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém jednotlivé obecné symboly mají v 'tomto· bodu uvedený význam, popřípadě se, k výrobě sloučenin obecného· vzorce I, ve kterém K · má jiný význam než hydroxylová · skupina, karboxylová kyselina shora uvedeného obecného vzorce X nebo· XI, kde jednotlivé obecné symboly mají v tomto· bodu uvedený význam, nebo· její aktivovaný derivát, nechá reagovat s· alkoholem nebo aminem vzorce NH3, R-OH, R5NHz · nebo· R6R7NH, kde jednotlivé obecné symboly mají v tomto bodu uvedený význam.
- 5. ZpUsob pocHe bodu · 1, k výrobě sloučenin shora uvedeného· obecného· vzorce · I, ve kterémR1 znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku,R2 představuje atom vodíku nebo· v případě, že· R1 znamená atom vodíku, představuje R2 alkanoylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo zbytek aminokyseliný Arg, Gly, Glu, Asp, Phe, (-Ala nebo· Lys či D-Lys, z nichž oba posledně · jmenované mohou být popřípadě substituovány na e-amlnoskupině· I zbytkem · H-Glu-Gly-OH, · Η-Phe-, H-Gly-Gly-Gly-, Η-Asp- nebo H-Lys,B znamená zbytek D-Ser nebo D-Thr, oba popřípadě substituované na β-hydroxylové skupině alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo B znamená zbytek D-Ala,E představuje zbytek Gly, 'F znamená zbytek Phe, popřípadě substituovaný na a-aminoskupině alkylovou skupinou s 1 až ·6 atomy uhlíku,G představuje zbytek Leu, Met, Nle nebo· Ile,· které mohou být popřípadě substituované na· a-aminoskupině alkylovou skupinou s 1 až ·6 atomy · uhlíku . aK · znamená hydroxysku.pinu, aminoskupinu, zbytek obecného vzorceOR- , kdeR- představuje alkylovou, alkenylovou nebo hydroxyalkylovou skupinu s nejvýše 6 atomy uhlíku, aminoalkylovou skupinu s nej202568 výše 6 .atomy uhlíku, alkylaminoalkylovou skupinu· s nejvýše 10 .atomy uhlíku inebo· fenylový Zbytek, zbytek obecného vzorceNHR5 , kdeR5 znamená alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo zbytek obecného vzorceNR6R7 , v němžR6 a R7 bud znamenají alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku nebo jsou RS a R7 spojeny za vzniku pětičlenného nebo šestičlenného kruhu, který popřípadě obsahuje heteroatom, vyznačující se tím, že se z odpovídajícího chráněného polypeptidů odštěpí jedna nebo několik chránících skupin peptidů za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém jednotlivé obecné symboly mají v tomto· bodu uvedený význam, popřípadě se k výrobě sloučenin obecného· vzorce I, ve kterém· K má jiný význam než hydroxylová skupina, karboxylová kyselina shora uvedeného· obecného vzorce X nebo XI, kde jednotlivé obecné symboly mají v tomto bodu uvedený význam, nebo její aktivovaný derivát, nechá reagovat s alkoholem nebo aminem· vzorce NH3, R-OH, R5NH2 nebo R6R7NH, kde jednotlivé obecné symboly mají v tomto bodu uvedený význam.
- 6. Způsob podle bodu 1, k výrobě sloučenin shora uvedeného obecného vzorce I, ve kterémR1 znamená atom vodíku,R2 představuje atom vodíku nebo zbytek aminokyseliny Arg, Gly, Glu, Asp, Phe, β-AIa nebo Lys či D-Lys, z nichž oba posledně jmenované mohou být popřípadě substituovány n,a ε-amínoskupíně zbytkem H-GIu-Gly-OH, H-Phe-, Η-Gly-Gly-Gly-, Η-Asp .nebo· H-Lys,B znamená zbytek D-Ser nebo D-Thr, oba popřípadě substituované na (-hydroxylové skupině alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo B znamená zbytek D-Ala nebo Azala,E představuje zbytek Gly nebo· Azgly.F znamená zbytek Phe, popřípadě .substituovaný na a-aminoskupině alkylovou skupinou s 1 .až 6 atomy uhlíku, nebo· znamená zbytek Azphe,G představuje zbytek Leu, Met, Nla, nebo Ile, které mohou být popřípadě substituované na a-amiinoskupině alkylovou skupinou s 1 .až 6 atomy uhlíku, nebo G znamená zbytek Azleu nebo Azpro· aK znamená hydroxyskupinu, aminoskupinu, zbytek obecného vzorce ORkdeR- .predlstavuje alkylovou, alkenylovou nebo· hydroxyalkylovou skupinu s nejvýše 6 atomy uhlíku, · aminoalkylovou . skupinu s nejvýše 6 atomy uhlíku, alkylamiinoalkylovou skupinu s nejvýše 10 atomy uhlíku nebo fenylový zbytek, zbytek obecného vzorceNHR5 , kdeR5 znamená alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo zbytek obecného· vzorceNR6R7 , v němžR6 a R7 buď znamenají alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku nebo jsou R6 a R7 spojeny za vzniku pětičlenného nebo šestičlenného kruhu, který popřípadě obsahuje heteroatom, s tím, · že alespoň jeden ze symbolů Β, E, F a G představuje zbytek a-aza-ami.no·kyseliny, vyznačující se tím, že se z odpovídajícího· -chráněného polypeptidu odštěpí jedna nebo několik chránících skupin peptidů za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém- jednotlivé obecné symboly mají v tom-to- bodu uvedený význam, popřípadě se k výrobě sloučenin obecného vzorce I, ve kterém K má jiný význam než hydroxylová skupina, karboxylová 'kyselina shora uvedeného obecného· vzorce X nebo XI, kde jednotlivé obecné symboly m.ají v tomto· ' bodu uvedený význam, nebo její aktivovaný derivát, nechá reagovat s alkoholem nebo aminem vzorce NH3, R-OH, R5NH2 nebo· R6R7NH, kde jednotlivé obecné symboly mají v tomto bodu uvedený význam.
- 7. Způsob podle bodu 1, k výrobě sloučenin shora uvedeného -obecného vzorce I, ve kterémR1 znamená atom vodíku,R2 představuje atom vodíku nebo· zbytek aminokyseliny Arg, Gly, Glu, Asp, Phe, 0-Ala nébo Lys či D-Lys, z nichž oba posledně jmenované mohou být popřípadě substituovány na ε-amínoskupině zbytkem H-Glu-Gly-OH, H-Phe-, Η-Gly-Gly-Gly-, Η-Asp nebo H-Lys,B znamená zbytek D-Se.r nebo D-Thr, oba popřípadě substituované na /3-hydroxylové skupině alkylovou skupinou s 1 -až 6 atomy uhlíku, nebo B znamená zbytek D-Ala,E představuje zbytek Gly,F zhamená zbytek Phe,G představuje zbytek Leu, Met, Nle nebo Ile· aK znamená hydroxyskupinu, aminoskupinu, zbytek obecného vzorceOR- , kdeR- představuje alkylovou, alkenylovou nebo hydroxyalkylovou skupinu s nejvýše 6 atomy uhlíku, aminoalkylovou skupinu s nejvýše 6 atomy uhlíku, alkylaminoa-lkylo-vou skupinu s nejvýše 10 atomy uhlíku nebo fenylový zbytek,
Applications Claiming Priority (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB14362/76A GB1523812A (en) | 1976-04-08 | 1976-04-08 | Polypeptide |
| GB2106376 | 1976-05-21 | ||
| GB2205576 | 1976-05-27 | ||
| GB2929876 | 1976-07-14 | ||
| GB4483776 | 1976-10-28 | ||
| GB4483876 | 1976-10-28 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS202568B2 true CS202568B2 (en) | 1981-01-30 |
Family
ID=27546664
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS772289A CS202568B2 (en) | 1976-04-08 | 1977-04-06 | Process for preparing polypeptides |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS52139039A (cs) |
| AU (1) | AU510760B2 (cs) |
| CS (1) | CS202568B2 (cs) |
| DD (1) | DD130348A5 (cs) |
| DE (1) | DE2715803A1 (cs) |
| DK (1) | DK158077A (cs) |
| FI (1) | FI771049A7 (cs) |
| FR (1) | FR2347336A1 (cs) |
| HU (1) | HU176260B (cs) |
| NZ (1) | NZ183712A (cs) |
| PL (1) | PL106210B1 (cs) |
| SE (1) | SE7704043L (cs) |
| SU (1) | SU904518A3 (cs) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ303858B6 (cs) * | 2012-05-11 | 2013-05-29 | Zetor Tractors A.S. | Usporádání reverzacní dvoutoké prevodovky, zejména pro motorová vozidla a stavební stroje, s dvema vetvemi toku výkonu |
Families Citing this family (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2730851A1 (de) * | 1976-07-19 | 1978-01-26 | Sandoz Ag | Neu polypeptidderivate, ihre herstellung und verwendung |
| FR2359817A1 (fr) * | 1976-07-27 | 1978-02-24 | Reckitt & Colmann Prod Ltd | Nouveaux peptides, leur procede de preparation et composition therapeutique les contenant |
| NO773013L (no) * | 1976-09-01 | 1978-03-02 | David Howard Coy | Fremgangsmaate ved fremstilling av methionin-enkefalin-derivater |
| HU178001B (en) * | 1976-09-16 | 1982-02-28 | Gyogyszekutato Intezet | Process for preparing new pentapeptides with morphine-like activity and derivatives thereof |
| US4259234A (en) * | 1976-09-27 | 1981-03-31 | Eli Lilly And Company | Analgesic compounds |
| CH637626A5 (en) * | 1976-11-23 | 1983-08-15 | Wellcome Found | Process for the preparation of peptides |
| DE2862327D1 (en) * | 1977-07-22 | 1983-11-10 | Wellcome Found | Pentapeptide-n-alkylamides and their acid addition salts, methods for preparation of these compounds and pharmaceutical formulations containing them |
| GB1604850A (en) * | 1977-11-24 | 1981-12-16 | Wellcome Found | Biologically active peptides |
| US4178371A (en) * | 1977-12-15 | 1979-12-11 | Reckitt & Colman Products Limited | Tetrapeptide derivatives |
| FR2424253A1 (fr) * | 1978-04-27 | 1979-11-23 | Brun Lab Sa Le | Nouveaux derives de peptides analogues des enkephalines, leur procede de preparation et leur application therapeutique |
| US4278596A (en) * | 1978-08-08 | 1981-07-14 | American Home Products Corporation | Analgesic pentapeptides |
| CA1175810A (en) * | 1979-03-30 | 1984-10-09 | Frank A. Momany | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| DE2933947A1 (de) * | 1979-08-22 | 1981-03-12 | Hoechst Ag, 6000 Frankfurt | Neue peptidamide und verfahren zu ihrer herstellung. |
| JPS5692846A (en) * | 1979-12-27 | 1981-07-27 | Takeda Chem Ind Ltd | Tetrapeptide derivative and its preparation |
| FR2488253A1 (fr) * | 1980-08-08 | 1982-02-12 | Roques Bernard | Nouveaux peptides et leur application en therapeutique |
| US4495178A (en) * | 1983-10-06 | 1985-01-22 | G. D. Searle & Co. | Enkephalin analogs |
| JP2604268B2 (ja) * | 1990-04-09 | 1997-04-30 | 富士写真フイルム株式会社 | ペプチド誘導体両親媒性化合物、その中間体、ペプチド誘導体両親媒性化合物を用いたリポソームおよび薄膜 |
| US20070155803A1 (en) * | 2003-05-30 | 2007-07-05 | Prozymex A/S | Protease inhibitors |
| KR102016961B1 (ko) * | 2011-02-09 | 2019-09-02 | 노보자임스 에이/에스 | 피부질환 치료용 펩티드 |
| JP2013043885A (ja) * | 2011-08-26 | 2013-03-04 | Kansai Bunri Sogo Gakuen | デヒドロアミノ酸含有グリセロール誘導体 |
| EP3710467A4 (en) * | 2017-11-17 | 2021-08-04 | Cytogel Pharma, LLC | MU-OPIOID RECEPTOR POLYMERIC AGONISTS |
-
1977
- 1977-03-28 NZ NZ183712A patent/NZ183712A/xx unknown
- 1977-03-31 AU AU23819/77A patent/AU510760B2/en not_active Expired
- 1977-04-04 FI FI771049A patent/FI771049A7/fi not_active Application Discontinuation
- 1977-04-06 SE SE7704043A patent/SE7704043L/ not_active Application Discontinuation
- 1977-04-06 CS CS772289A patent/CS202568B2/cs unknown
- 1977-04-06 HU HU77IE774A patent/HU176260B/hu unknown
- 1977-04-06 DK DK158077A patent/DK158077A/da not_active IP Right Cessation
- 1977-04-07 FR FR7710668A patent/FR2347336A1/fr active Granted
- 1977-04-07 DD DD7700198316A patent/DD130348A5/xx unknown
- 1977-04-07 DE DE19772715803 patent/DE2715803A1/de not_active Withdrawn
- 1977-04-08 JP JP4023077A patent/JPS52139039A/ja active Pending
- 1977-04-08 PL PL1977197302A patent/PL106210B1/pl unknown
- 1977-04-08 SU SU772470259A patent/SU904518A3/ru active
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ303858B6 (cs) * | 2012-05-11 | 2013-05-29 | Zetor Tractors A.S. | Usporádání reverzacní dvoutoké prevodovky, zejména pro motorová vozidla a stavební stroje, s dvema vetvemi toku výkonu |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR2347336A1 (fr) | 1977-11-04 |
| SU904518A3 (ru) | 1982-02-07 |
| JPS52139039A (en) | 1977-11-19 |
| SE7704043L (sv) | 1977-10-09 |
| FI771049A7 (cs) | 1977-10-09 |
| DD130348A5 (de) | 1978-03-22 |
| HU176260B (en) | 1981-01-28 |
| DK158077A (da) | 1977-10-09 |
| PL106210B1 (pl) | 1979-12-31 |
| NZ183712A (en) | 1979-10-25 |
| PL197302A1 (pl) | 1978-02-13 |
| DE2715803A1 (de) | 1977-10-27 |
| AU2381977A (en) | 1978-10-05 |
| AU510760B2 (en) | 1980-07-10 |
| FR2347336B1 (cs) | 1980-07-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CS202568B2 (en) | Process for preparing polypeptides | |
| US4024248A (en) | Peptides having LH-RH/FSH-RH activity | |
| FI60553C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av ovulationsframkallande nonapeptidamidderivat | |
| JPS602318B2 (ja) | アレルギー反応遮断ポリペプチド剤 | |
| US4386073A (en) | Tripeptides acting on the central nervous system and a process for the preparation thereof | |
| DK147851B (da) | Nonapeptidamidderivater til brug ved diagnosticering af hypofysefunktionog gonadotropindeficiens samt regulering af formeringen hos normale dyr | |
| GB1592552A (en) | Pseudopeptides used as medicaments | |
| JPH0364514B2 (cs) | ||
| EP0127154B1 (en) | Pharmaceutical peptides, preparation, use and intermediates | |
| US5212158A (en) | Derivatives of l-proline, their preparation and their biological uses | |
| US5079231A (en) | Immunostimulating peptides, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them | |
| US4299821A (en) | Tripeptides acting on the central nervous system and a process for the preparation thereof | |
| IE47105B1 (en) | Peptides,pharmaceutical compositions containing the peptides and a process for the preparation of the peptides | |
| JPS58109460A (ja) | エンケフアリン誘導体 | |
| CH615904A5 (en) | Process for the preparation of L-leucine-13-motilin | |
| AU721261B2 (en) | Peptide inhibitors of hematopoietic cell proliferation | |
| EP0354820B1 (en) | Novel peptide derivatives and anti-dementia agents | |
| FI82837C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av gonadoliberinderivat, som inverkar pao de reproduktiva processerna hos djur. | |
| GB1587427A (en) | Polypeptide derivatives | |
| IE44485B1 (en) | Dipeptide derivatives | |
| US5180712A (en) | Petide antidementia and nootropic agents | |
| RU2144038C1 (ru) | Пептиды для ингибирования высвобождения пепсина, фармацевтическая композиция | |
| US4187295A (en) | Organic compounds | |
| JP2654673B2 (ja) | ペプチド及び抗痴呆剤 | |
| JPH047360B2 (cs) |