CS196024B1 - Process for preparing antibiotic vermiciline with cytotoxic effect against tumour cells - Google Patents
Process for preparing antibiotic vermiciline with cytotoxic effect against tumour cells Download PDFInfo
- Publication number
- CS196024B1 CS196024B1 CS643277A CS643277A CS196024B1 CS 196024 B1 CS196024 B1 CS 196024B1 CS 643277 A CS643277 A CS 643277A CS 643277 A CS643277 A CS 643277A CS 196024 B1 CS196024 B1 CS 196024B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- extracted
- antibiotic
- vermiciline
- filtrate
- effect against
- Prior art date
Links
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 title claims description 8
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 title claims description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 title claims description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 title claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title 1
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical class N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 241000228343 Talaromyces flavus Species 0.000 claims description 6
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 5
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical class [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052500 inorganic mineral Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000011707 mineral Chemical class 0.000 claims description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000008280 chlorinated hydrocarbons Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000002168 ethanoic acid esters Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 claims description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 2
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 claims 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 3
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 3
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 2
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 2
- DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N (R)-(-)-Propylene glycol Chemical compound C[C@@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 1
- 229910052770 Uranium Inorganic materials 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003397 luteinic effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- JFALSRSLKYAFGM-UHFFFAOYSA-N uranium(0) Chemical compound [U] JFALSRSLKYAFGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CFDVIOQSLRJWSU-NXZHAISVSA-N vermiculine Chemical compound CC(=O)CC1CCC(=O)\C=C\C(=O)OC(CC(C)=O)CCC(=O)\C=C\C(=O)O1 CFDVIOQSLRJWSU-NXZHAISVSA-N 0.000 description 1
- CFDVIOQSLRJWSU-UHFFFAOYSA-N vermiculine Natural products CC(=O)CC1CCC(=O)C=CC(=O)OC(CC(C)=O)CCC(=O)C=CC(=O)O1 CFDVIOQSLRJWSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Description
POPIS VYNÁLEZU
K AUTORSKÉMU OSVEDČENIU ČESKOSLOVENSKÁSOCIALISTICKÁREPUBLIKA( 19 ) 196 024 (Π) (Bl)
(61) (23) Výstavná priorita (22) Přihlášené 05 10 77 (21) PV 6432 - 77 (51) Int. Cl. 3 C 12 P 1/02
ÚŘAD PRO VYNÁLEZY
A OBJEVY (40) Zverejnené 29 06 79(45) Vydané 01 3 82 (75) -
Autor vynálezu . . pujka JAK ing. C3c., PbáKOVÁ ALŽB3TA ing. a ADÁMKOVÁ KILHKA, BRATISLAVA
Spfisob přípravy antibiotika vermicilinu s cytotoxickými účinkami na nádorové buňky 1
Vynález sa týká spoaobu přípravy nového antibiotika účinného in vitro na buňky leu-kémie P388,L-1210 a Ehrlichovho ascitického karcinomu /EAC/, kultiváciou pliesne Penicil-lium vermiculatum bang. a izoláciou z filtrátu kultivačnej pódy. V rámci systematického vyhíadávania látok s potenciálnymi protinádorovými účinkamiboli testované filtráty pliesní izolovaných z Jáchymovských uránových bani. Aktivitafiltrátov bola hodnotená’ k tomuto účelu vypracovanou metodou /Puska, J. a spol., Eeop-lasma 18,631, 1971/, pri ktorej podía protokolu NCI /Proposed flow of drugs through DCT screen, UdA 1973/ bola ako testovací model použitá leukémia P288. Z testovaných kul-túr výrazný inhibičný účinok bol zistený u filtrátu plesne Penicillium vermiculatumDang., uloženej v Čs. -zbierke mikroorganizmov pod číslom CCií P 276.
Vynález sa týká spósobu přípravy nového antibiotika pomenovaného vemicillin,ktoré je jednou z účinných zložiek filtrátu uvedeného kmeňa.
Podstata spósobu přípravy antibiotika vermicillinu s cytotoxickýrai účinkami na ná- dorové buňky spočívá v tom, že sa Penicillium vermiculatum Dang. CCií P 276 kultivuje na tekutej živnej póde obsahujúcej zdroj uhlíka, dusíka a minerálně soli, extrahuje z 196 824 2 188 024 filtrátu nafermentovanej pSdy chloroformom alebo eatermi kyseliny octovéj s nižšími alko-holmi, extrakt sa odpaří a natibiotikum aa extrahuje do chloridu uhličitého a přečistíohromotagrafioú na stipci silikagelu. Filtrát nafermentovanej pody sa extrahuje'chlori-dom uhličitým, připadne inými chlórovanými uhíovodíkmi a po odpaření do sucha aa extrahu-je za zníženého tlaku petroléterom.a za zníženej teploty krystalizuje.
Vermicilín produkuje kultura pri povrchovej i aubmerz.nej kultiváeii na pédach a ob-sahom uhlíka, duaíka a minerálnych solí. Po skončenéj kultiváeii aa izoluje z filtrátufermentovanej pody pri pH 1 až 7 extrakciou vhodnými rospúšťadlami nemiešataíhými a vodou.Zo zahuštěných extraktov sa získá změa metabolitov, z ktorej aa triturációu vhodnýmirozpúaíadlami a áálším čistěním získá v krystalickej formě ako biele až jemné nažltlékočky. Látka silné inhibuje raat buniek leukémie P388, L-1210 a jSAC, v koncentrácii 10 až40 ug/ml. Haat íáscherichia soli inhibuje látka v koncentrácii 100 ug/ml, nemá vsak v kon-centrácii do 100 ug/ml ingibičný efekt na G+ baktérie, huby a prvoky. Látka hie je totož-ná ani a jednýrn z metabolitov produkovaných roznymi kmeňmi Penicillium verajiculatum Dang.a to: vermikulínom /Puska a apol. J. Ántibiotics 25:208,1972/, talaranom /Mizuno K. aspol. J. Antibio-tics 27,560^1974/ a kyselinou luteinovou /Anderson C.G., Biochem,J.33,272,1939/.
Verraioilin nie je podía doteraz zietených konstant a vlastností totožný so žiadnymz antibiotik uvádzaných v nasledujúcich monografiach: Korzybski,T. a spol. Ántibioticsvol.i a IX, Pergamon Press Oxford, 7967: Úmezawa H. Index of antiotics from Actinorayce-tes, University of Tokyo Press, Tokyo 1967: Ohibata 6. a spol. .List of fungal products,Springfield, USA, 1964: Killer, M.W. The Pfizer hadbook of raikrobial metabolites, McGraw--Hill, New York, 1961: Turner, W.B. Pungal metabolites, Academie Press, London, 1971sLaskin, A.I. a Lechvalier, A.H. Handbook of microbiology, vol. III. CRÁ Press, Cleveland,1973.
Vermiqilin má nasledujúce vlastnosti: bezfarebné alebo slabo nažltlé kryštály, b.t.105 až 110°C,[e<] _ l,0°/c C,5 v chloroforme/, neutrálneho charakteru obsahuje C,H,O.
Je nerozpustný V benzéne, chloroforme, chloride uhličitom, n-hexane, nižších alifatickýchalkoholoch, petrolétere, dimetylaulfoxide, nerozpustný vo vodě. UV spektrum látky vyka-zuje λ max. pri 218,252,310 nm v metanole. IČ spektrum látky má nasledujúce maxima /v/cm/:860,890,905»960,1050,1060,1100,1140,1250,1290,1340,1405»1445>1460,1490,156Ο,1580,1660,1640,1685,1720,2850,2950,3000. Antibiotikum dává pozitivně reakcie s metanolickým KOH,PeCl^, s parami jódu a kyselinou sírovou.
Sposoby přípravy antibiotika vermicilinu sú uvedené v následujících príkladoch. Přikladl
Do 500 ml varnéj banky sa připraví 100 ml pSdy nasledujúceho ‘zloženia /g/100ml/:
Claims (2)
- 3 198 824 glukóza 9,0, kukuřičný výluh /50% sušiny/ 1,0, KaNO^ 0,2, KHgPO^ 0,1, ICL 0,05 MgSO^ .7HgO 0,05, PeSO^ . THgO 0,001. Po doplnění vodovodúou vodou upraví se pH na 6,0 až 6,7a p6da sa sterilizuje 20 minut pri 120°C. Po ochladení sa očkuje 10 ml vegetatívneho ino-kula. Penicillium vermiculatum CCM P 276. připraveného na půdě Czapak-Doc. Kultivuje sana rotačněj trepačke /220 ot/min/ pri teplote 28 až 32°C po dobu 96 až 120 liodín. Poskončení fermentácie sa spojí obsah 80 baničiek a raycélium sa oddělí filtráciou. Síryfiltrát 7 500 ml /pH 3,5/ sa za neustálého miešania extrahuje 3 500 ml chloroformu.Chloroformová fáza sa oddělí a filtráciou cez vrstvu bezvodého síranu sodného vysuší.Rozpúštadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku při teplote do 40°C. Suchý odparok 3atrituruje 3x100 ml chloridu uhličitého. Získané podiely extraktov sa spoja a za znížené-ho tlaku úplné odparia. Suchý zbytok 300 mg sa nanesie na kolonu naplněnú 20 g silikagé-lu /1/. Kolona sa eluuje zmesou metanol:chloroform /1:1/. Prakcie obsahujúce vermicilin/kontrola na TLC/ sa spoje a zahustia na objem 5 ml a ponechájú cez noc pri teplote +4°C.Získá sa 80 mg vermicilínu. Příklad 2 P8da nasledujúceho zloženia g/100 ml/: glukóza 9,0, NaKO^ 0,2, KHpPC^ 0,1, KCL0,05, MgSO^ . 7HgO 0,05, PeSO^ · 7^0 0,001, vodovodná voda do 100 ml, pH 6,0-6,7 sa na-plní po 100 ml do 500 ml varných baniek a sterilizuje 20 minút pri teplote 120°C. Po ochladení sa naočkuje 10 ml 42 hodinového vegetatívneho inokula kmeňa Penicilliumvermiculatum Deng. CCM P 276 a kultivuje sa trepačke po dobu 96 až 120 hodin za neustá-lého miešania pri teplote 28 až 32°C. Po skončenej kultivácii sa obsah 45 baničiek spojía filtráciou oddělí mycélium. Získá sa 3 600 ml filtrátu /pH 3,3/, ktorý sa za neustálé-ho miešania pri laboratorněj teplote extrahuje 1 800 ml chloridu uhličitého. Extrakt sapo oddělení od vodnej fázy vysuší filtráciou cez vrstvu bezvodého síranu sodného a zazníženého tlaku pri teplote do 40θ0 zbaví sa rozpúšťadla. Suchý odparok obsahujúci hlav-ně vermicilin sa za neustálého miešania pri teplote laboratória extrahuje dvakrát 100 mlpetroléteru /b.v. 35 až 50°C/, ktorý sa za zvýšeného tlaku pri teplote do 30°C odpařína objem 10 ml a ponechá cez noc pri +4°C. Získá sa 32 mg vermicilínu. PSEDMET V Y H X.L E Z U1. Spžsob přípravy antibiotika vermicilínu s cytotoxickými účinkami na nádorovébuňky, vyznačujúci sa tým, že sa Penicillium vermiculatum Dang. CCM P 276 kultivuje natekutej živnej pode obsahujúcej zdroj uhlíka, dusíka a minerálně soli, extrahuje z fil-trátu nafermentovanej půdy chloroformem, alebo estermi kyseliny octovéj s nižšími alko-holmi, extrakt sa odpaří a antibiotikum sa extrahuje do chloridu uhličitého a p.ečistíchromatografiou na stipci silikagélu.
- 2. Spósob podía bodu 1, vyznačujíc! sa tým, že sa filtrát nafermentovanej půdyextrahuje chloridom uhličitým připadne ihými chlorovanými uhlovodíkmi a po odpaření v · ·+. '? > ϊ· ζ.i 'v -’ > · </.·ίί\ ' - 188 024 do sucha sa extrahuje za žníženého tlaku petrolétercia a za zníženc teploty krystalizuje. Vytiskly Moravské tiskařské závody,provoz 12, Leninova 15, Olomouc 2,40 Kčs
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS643277A CS196024B1 (en) | 1977-10-05 | 1977-10-05 | Process for preparing antibiotic vermiciline with cytotoxic effect against tumour cells |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS643277A CS196024B1 (en) | 1977-10-05 | 1977-10-05 | Process for preparing antibiotic vermiciline with cytotoxic effect against tumour cells |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS196024B1 true CS196024B1 (en) | 1980-02-29 |
Family
ID=5411331
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS643277A CS196024B1 (en) | 1977-10-05 | 1977-10-05 | Process for preparing antibiotic vermiciline with cytotoxic effect against tumour cells |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS196024B1 (cs) |
-
1977
- 1977-10-05 CS CS643277A patent/CS196024B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1328632C (en) | Herbicide, its preparation and use | |
| JP2802097B2 (ja) | 新規な制癌抗生物質ｍｉ４３―３７ｆ１１及びその製造法 | |
| EP0371509B1 (en) | Antibiotics and process for producing them | |
| US3917820A (en) | Antibiotic cochliodinol and production by chaetomium, cochliodes and chaetomium globsum | |
| US3992551A (en) | Antisiotic substances B-41, their production and their use as insecticides acaricides | |
| CS196024B1 (en) | Process for preparing antibiotic vermiciline with cytotoxic effect against tumour cells | |
| CN107298669A (zh) | 源于草酸青霉的黑麦酮酸i及抗人口腔表皮样癌药物应用 | |
| US4771070A (en) | CL-1957A antibiotic compound | |
| JP2746372B2 (ja) | Ｆ−０３６８物質 | |
| JP3902530B2 (ja) | 新規抗生物質キガマイシン類とその用途 | |
| JPH1045738A (ja) | 抗生物質エポキシキノマイシンｃおよびｄとその製造法ならびに抗リウマチ剤 | |
| EP0346831B1 (en) | Antibiotics and process for producing them | |
| US4178213A (en) | Fermentation process for the production of (+)-2-(5β-n-butyl-4β-hydroxy-2-oxo-tetrahydrofuran-3β-yl)-2α-methylacetic acid | |
| JPS6212789A (ja) | 新規化合物Ｎｏ．５１２６２物質、その製法並びにそれを有効成分とする除草剤及び植物調節剤 | |
| US5168100A (en) | Hp530 compounds and process for preparing the same | |
| EP0472186A2 (en) | Antibiotics AB-023 and process for preparing them | |
| JPH06211615A (ja) | Ｂｕ−４８０３ｔ抗生物質 | |
| US4902781A (en) | Novel tripetide derivatives | |
| US4918100A (en) | CL-1957B antibiotic compound and its production | |
| JP3273965B2 (ja) | 生理活性物質ｍｊ２８６−ａ物質、その製造法及び除草剤の薬害軽減剤 | |
| JP3902283B2 (ja) | 抗生物質ホルママイシンとその製造法 | |
| JPH0515385A (ja) | 新規な抗生物質アリサマイシンおよびその製法 | |
| JPH04633B2 (cs) | ||
| CS196741B1 (cs) | Sposob přípravy antibiotika verinistatinu s cytotoxickými účinkami na nádorové buňky | |
| JP2989674B2 (ja) | 制癌性物質サイトブラスチンおよびその製造法 |