CS158892A3

CS158892A3 - Process for preparing 6-0-alkyl elsamycin a derivatives

Info

Publication number: CS158892A3
Application number: CS921588A
Authority: CS
Inventors: Toda Soichiro; Yamashita Haruhiro; Naito Takayuki; Nishiyama Yuji
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 1991-05-30
Filing date: 1992-05-26
Publication date: 1992-12-16
Also published as: EP0516157A1; FI922443L; OA09753A; FI922443A7; JPH05148292A; IE921764A1; ZA923816B; FI922443A0; HU9201732D0; TW218879B; MX9202571A; CA2069716A1; HUT61774A; IL101998A0; HU210499B; KR920021573A; AU1724192A; AU655024B2

Description

lepší iarmakokinetické vlastnosti, jejicn vyrocy, pros-tředků, které je obsahují jako účinnou složku a léčeoných tod využíva^icicn ryto 'cstreo.ky. jjcsavscn ;av tecnr

Slsamycin λ je antibiotikum s protinádorovým účin-kem, produkované kultivací kmene aktinomycet produkující- ho elsamycin

který je označen jako kmen J907-21 /AiCC 39417/, nebo jeho mutanty. Slsamycin a projevuje antibak- teriální účinek vůči aerobním gram-positivním bakteriími vůči anaerobním bakteriím. Rovněž vykazuje in vitro a v in vivo účinek proti různým buňkám tumoru u myši, zanrnu-jícím leukémii P388, lymfoidní'leukémii L1210 a melanotic-ký melanom 316. Konishi, et al, Slsamicins, new antitumorantibiotics related to chartreusin. 1. Production, isolation,characterization and antitumor activity, J. Antibiotics, 39_: 784 - 791, /1986/; US patent č. 4 518 589 Konishi, etal, zvěř. 21.5.1985.

Struktura elsamycinu A /vzorec I, uveden dále/ bylastanovena a ukázala se být v úzkém vztahu k chartreusinu/vzorec II, uveden dále/. Sugawara, et al, Slsamicins Aand 3, new antitumor antibiotics related to cnartreusin.II. Structures of elsamicins Λ and 3. J. Grg. Gnem., 52996 - 1001, /1987/.

I

II 3

Jak elsamycin A, tak chartreusin mají týž aglykon,chartarin, ale obě antibiotika se liší disacharidovýmzbytkem. Leacn, et al, Chartreusin, a new antioioticproduced by Gtreptomyces chartreusis, a new species, J.nm. Chem. Soc., 75: 4011 - 4014, /1 953/; neisler, J. A.,Chartreusin, a glycosidic antitumor antioiotic for Sxrep-tomyces, In progress in Medicinal Chemistry, Ed., G. P.

Ellis and G. 5. West 19: sir. 247 - 2ó8, Elsevier Siomedical ti

Press Amsterdam, /1982/; Simonitsch, et al: Uber die Gtruk- tur des Chartreusins I, Helv. Chim. Acta, 47: 1459 - 1475, 11 /1954/; Eisenhuth,-et al, Uber die Struktur des Chartreu-sins II, Helv. Chim. ACta, 47, 1475 - 1484, /1964/.

Vzájemná konverze obou sloučenin chemickou cestou dosudnebyla uvedena. Během cnemické modifikace elsamycinu a jsme zjistili,že alkylace na 6-GH skupině elsamycinu a poskytuje novéderiváty mající zvýšený protinádorový účinek, nižší toxi-cixu a/neoo lepší farmakokinetické vlastnosxi. Předložený vynález poskytuje nové deriváty elsamycinua, které vykazují zvýšenou protinádorovou aktivitu, nižšítoxicitu a/nebo lepší farmakokinetické vlastnosti. Zvláště předložený vynález umožňuje alkylaci nydroxyluv poloze 6 elsamycinu a.

Vynález dále poskytuje protinádorový prostředekobsahující jako účinnou složku alespoň jednu sloučeninuvybranou ze skupiny zahrnující deriváty elsamycinu a pod-le vynálezu. Pále vynález poskytuje způsob léčení rakoviny vyu-žívající snora uvedený protinádorový prostředek. Pále je poskytnut způsob výrobyvátu elsamycinu a. snora uvedeného deri-

HO

XII

On 1&

kde R je alkyl s i až 10 atomy uhlíku a s přímým řetězcem.nebo substituovaný neoo nesubstituovaný aminoalkyl. Výrazem "alkyl s 1 až 10 atomy uhlíku", jak je užitzde a v nárocích /pokud není uvedeno jinak/ se rozumí roz-větvený nebo přímý řetězec uhlovodíkové skupiny, mající1 až 1 0 atomu uhlíku, jako je methyl, ethyl, propyl, iso-propyl, outyl, isobutyl, t-butyl apod.

Deriváty elsamycinu podle vynálezu se mohou vyrábětnapříklad syntnetickým pochodem znázorněným ve scnematu 1.Jak je ukázáno ve schématu 1 , oyly 6-O-alkylderiváty /7/a odpovídající ó-O-alkyl-3 ',4 "-O-isopropylidenderiváty /8/připraveny přes N-t-butoxykarbonyl /t-POC/ elsamycin /3/a/nebo jeno 3 ,4'-O-isopropylidenderivat/IP/ /4/. 6-0-Alkylace derivátů 3 a 4 se uskutečnila reakcí s vhodnýmialkylhalogenidy v přítomnosti jodidu draselného /KI/ a uhli-čitanu draselného /^00^/ v dimetnylsulfoxidu /DMSO/ a pos-kytla odpovídající 6-0-alkyIderiváty j? resp. 6. t-hOO skupi-na derivátu 5. se odstranila reakcí s vodným roztokem kyse-liny trifluoroctové, čímž se získal derivát 7. Podobnáreakce derivátu 6 s TFA měla za následek odblokování jak t-BOC tak IP skupin za vzniku sloučeniny 7. 6-0-Elsamycin A/7a/ se rovněž získal přímou G-methylací sloučeniny j_diazometnanem ve směsi dioxan-etner. t-BOC skupina derivátu ó se selektivně odštěpila pů-sobením kyseliny toluensulfonové /TsOH/ v acetonu neDo kyse-liny trifluoroctové /TFa/ při teplotě místnosti za vznikusloučeniny 8. Ftalimidoskupina sloučeniny 8h se odstranilareakcí s hydrazinhydrátem, získala se sloučenina 8i, kte-rá se eliminací IP skupiny převedla na sloučeninu 7i. V tabulce 1 jsou uvedeny sloučeniny podle vynálezua jejich číselné označení. TABULKA 1

Sloučeniny podle vynálezu a jejich číselné označení slouč. č. název ·

Elsamycin A

Chartreusin 3 4 5a /Cl

2 -N-t-butoxykarbonylelsamycin A

2 ' '-N-t-butcxykarbony1-3',4'-O-isopropyliden-elsamycin A

2 ' '-N-t-butoxykarbonyl-6-O-meťnylelsamycin A -K-t-butoxykaroonyl-6-0-n-propyleisamycin a 2 -N-t-outcxykarbonyl-ó-O-isopropylelsamycin a 7

Iadu LKa 1 /pokračování/ 2e 2''-N-1-butoxykarbony1-6-ϋ-n-butyleisamycin j 5f 2"-N-t-butoxykarbonyl-ó-0-n-nexylelsamycin , ca 2' '-N-t-mtoxykarbonyl-3 ,4 -C-isopropylidenc-C-netnyleisánycín a ob 2*z-N-t-butoxykarbonyl-ó-0-ethyl-3 ,4 -C-isop r o ρ y i i o e n e i s a ry cm a &f 2zz-N-t-butoxykarbonyl-6-0-n-ňexyl-3 ,4 -C-isoprcpylidenelsanycin A 6g 2'*-N-t-butoxykarbony1-6-0-n-áecy1-3 ,4 -C-isopropylidenelsanycin A 6h 2 ' *-N-t-butoxykarbonyl-3,4-isoPr°pyliben-°“c/3-ftalimidopropyl/elsamycin A 7a 6-0-methylelsamycin A 7b 6-Q-ethylelsaraycin A 7c 6-0-n-propylelsamycin A 7d 6-0-isopropylelsamycin A 7e 6-0-n-butylelsaaycin A. 7f 6-0-n-hexylelsamycin A 7g 6-0-n-oecylelsanycin a 7n 6-0-/3-ítalinidooroDyl/elsamycin A TABULKA 1 /pokračování/ 7i 8a 8 b

ó-C-/3-aminopropyl/elsamycin A

3 ,4 -0-isopropyliden-6-0-methylelsaniycin A

c-O-etnyl-3 ,4 -O-isopropylidenelsanycin A til

6-G-n-hexyl-3 ,4 -O-isopropylidenelsamycin A «í z z o-G-n-cecyl-3 ,4 -O-isopropylidenelsamycin 8h

3 ,4 -0-isopropyliden-6-0-/3-ftalimidopro-py1/e1s amyc in A

Si

6-0-/3-aminopropyl/-3 ,4 -isopropylidenelsa-mycin A

Schéma 1

Synthesa 6-O-alkylderivátů elsamycinu A V 3/ 4/ -? j>/a, c, d, e, f/-? 7/a,b,c,d,e,f,g, h/ 6/ 7a 2/

3/ / 5/ -> 6/a,b,f,g, h/-> S/a, b, f, g, h/ 7/ 8h-> 8 i 4/ -> 7i 1/ /t--A?C/.-0 / KLt , <£ 3

2/ /Cn-OA.C/cH / TsOH J c. 3 é-

(a) ch3 (b) C2H5 (c) n-C3H7 (d) í-c3h7 (e) n-C,H9 (f) n-C6H13 (g) n-c10H21 (h) 0 (CH2)3k^Q 0 (i) (CH2)3NH2

Protinádorový účinek derivátů 6-0-alkylelsaaycinu n

Patnáct derivátů 6-O-alkylelsamycinu λ bylo synthe-tizováno a následně testováno ve srovnání s mateřskou slou-čeninou na protinádorove účinky in vitro a in vivo. -

Pro zkoušku cytotoxicity in vitro se vypěstovalybuňky myšího melanomu 316-F10 a udržovaly se v minimálnímesenciálním mediu podle Paglea /Nissui/, které oosahujekanamycin /60 ^ug/ml^ doplněném tepelně inaktivovaným fe-tálním telecím sérem /10 %/ a neesencialními aminokyseli-nami /0,6 /7 při j7 °c ve zvlhčené atmosféře v 5 /- Ct^inkubátoru. Exponenciálně rostoucí buňky bl6-P10 se snro- máždily, spočítaly a suspendovaly v kultivačním mediu v kon-4 centraci z,0 x 10 buněk/ml. Buněčná suspenze /180 zul/ sepěstovala v jamkách 96 jamkové mikrotitrační destičky a i.nku- bovala se 24 nodin. Testované sloučeniny /20 ul/ se při-daly do jamek a destičky se dále inkubovaly 72 hodin. Cyto- toxicky účinek se stanovil kolorimetricky při piO nm po obarvení životaschopných buněk neutrálním červeným rozto- kem. Jak je ukázáno v tabulce 2, vykazují ó-O-etnyleisamycin 7b, ό-ϋ-n-propylelsamycin λ 7c, 6-0-n-butylelsanycin A 7e aó-G-etnyl-3 ', 4 '-isopropylidenelsamycin A 6b přibližně rovno-cennou cytotoxicitu jako mateřská sloučenina vůči buňkám B1 6-F1 0. Cstatníc:ny on. oenáct alkylcerivátů bylo n- 'IV! uneacrcv. /ů se testoval v sysle a v systému melanomu 31 živo suorlymřocytSamice my ší CDa- / i uvedenycnní leukemi pro samci myši -o. + tnecxi i 88/ /uro 816/ se naočkovali ip injekcí 10 buněk 10 8 suspenze 816 na myš /den 0/. Testovanépodávaly myším intraperitoneélně jedenkrát/u systému P388 nebo jeden-5 a 9 /Q4D x 3/ u systému 316 a zví-řata byla pozorována 50 dní. Percentuální vzrůst střednídoby přežití /MST/ ošetřovaných zvířat ve srovnání s neo-šetřenou kontrolou byla stanovena a označena jako T/G %.Sloučeniny vykazující hodnoty T/C % 125 nebo větší projevu-jí výrazný protinádorový účinek. Podobně jako u cytotoxi-city in vitro byly deriváty 7b, 7c, 7e a 8b stejně účinnéjako elsamycin A v systému P3S8 a jeví se být méně toxic-ké /tabulka 2/. Na druhé straně, ačkoliv 6-0-methylelsamy-cin A 7a a 3 ',4Z-0-isopropyliden-6-0-methylelsamycin A 8a s88 sloučeniny sedenně ve dnechkrát denně ve dnecn az 3 / ni D x ji byly méně cytotoxické než materská sloučenina, vykázalypřibližně stejnou anti-P388 aktivitu z hlediska minimál-ních účinných dávek. Jak je ukázáno v tabulce 3, sedm deri-vátů testovaných v systému 816 vykázalo docela dobrou reak-ci vůči tumoru. Zejména sloučeniny 7a, 7b a 8a projevilyvynikající chemotnerapeutický účinek s vysokými hodnotamiT/C %, protože při dávkách 10-40 mg/kg/čen bylo pozoro-váno několik přežívajících yedinců,50.den. TASCLKrt 2

Cytotoxicita proti aelanomu ni 6 in vitro a protinédorový účinek p slouč. rotí leukenii ?J88 u myúí 4O*2 20 in vivo R Cytoioxicit* IC50 T/C % 10 MST 3 •7 1 0.3 0.1 7a CHj 0.19 184 205 160 140 125 135 120 7b c2h5 0.06 180 170 170 150 130 125 110 7c n'C3H7 0.03 159 155 152 152 133 129 105 7d í-Cjh7 0.49 148 133 124 119 95 • n-C,H7 0.03 164 141 162 152 133 124 110 7f n’C6H73 0.11 140 130 120 105 100 2£ n'Cl(^21 2.5 100 115 105 115 7h ‘CH2>i>bO 0 0.71 140 125 120 105 105 7i (CH2)5NH2 2.3 130 110 110 105 8a ch5 0.08 245 160 135 120 110 8b C,H5 0.06 200 190 140 125 125 110 8f n'C6H73 0.9 120 115 110 110 110 "•CjAj 2.9 100 115 105 115 8h (ch2)3*JX5 0 . 0.4 130 120 110 110 100 8i <CH2)jNH2 1.8 135 120 110 105 Elsamicin A (Γ) 0.05 Tax 206 180 155 138 124 střední doba přežití udané ve dnechdávka v mg/kg/den, Q1D x 3 ip - B -

TadLJ BKa 3

Protinádorový účinek n rotí Bí 6 mel a no mu u my 51 vivo slouč. T/C % MST 1 4O*2 20 10 3 1 0.3 0.1 7a >370 (3/4)*3 >370 (3/4) 262 197 147 121 106 7b >313 (3/4) 178 144 113 103 7e 213 160 127 123 7f 146 132 129 111 107 23 183 153 126 107 8a >370 (3/4) 285 215 141 104 8b 216 153 119 106 97 Elsamicin A (i) >305 (9/24) >216 (2/24) 178 139 120 +1 střední doba přežití udaná ve dnech +2 dávka v mg/kg/den, >241) x 3 ip +3 počet přeživších / testovaných 50.den V rozsahu předloženéno vynálezu je zahrnut způsobvýroby derivátů elsamycinu A podle vynálezu.

Dalším aspektem vynálezu jsou farmaceutické kompozice,které obsahují účinné, tumor inhibující množství sloučeni-ny vzorce III nebo IV v kombinaci s inertním, farmaceutic-ky přijatelným nosičem nebo ředidlem.

Podle dalšího aspektu vynálezu je nalezen způsobtherapeutického ošetřování živočichů, především savců, za- 14 sazených tumorem, který spočívá v podávání účinné, tumorinhibující dávky antibiotika, sloučeniny vzorce III nebo IV. Příklady vhodných kompozic zahrnují pevné prostředkypro orální podávání, jako jsou tablety, tobolky, pastilky,prásky a granule, kapalné prostředky pro orální podávání,jako jsou roztoky, suspenze, sirupy a elixíry a přípravkypro parenterální podávání, jako jsou sterilní roztoky, suspenze nebo emulze. líchou se zpracovat do formy sterilníchpevnýcn prostředků, které se senou rozpustit ve sterilnívodě, fyziologickém roztoku něco některém jiném mediu proinjekce bezprostředně před použitím.

Je třeba si uvědomí' :e aktuální preferované dávko- vání derivátu elsamycinu n podle vynálezu se může měnitpodle konkrétně použité sloučeniny, konkrétní formy pros-tředku, podle způsobu aplikace a konkrétního místa, pacienta a nemoci, která se léčí. Mnohé faktory, které modifiku-jí působení léčiva, například věk, tělesná hmotnost, po-hlaví, strava, doba podávání, rychlost exkrece, kondicepácienta, kombinace léčiv, citlivost a obtížnost onemocně-ní budou jistě odborníkem v oboru brány v úvahu. Podáváníse může provádět bud kontinuálně nebo periodicky v rámcimaximálně tolerované, dávky. Optimální aplikační rychlostipro daný souoor podmínek muže odborník v oboru snadnozjistiť^užitím testů ke stanovení konvenčního dávkování.

Vynález je ilustrován následujícími příklady, kterénemají být chápány jako omezení rozsahu vynálezu. Dále jsou uvedeny příklady specifické synthézy deri-vátů 2 až én, z nichž se synthetizují sloučeniny podlevynálezu 7 a 8 dříve uvedenými způsoby. Příklady provedení vynálezu Příklad 1 Z z

Synthesa 2 x-butoxykarbonylelsamycinu A /3/

Směgi653 .ng /1 mmol/ elsamycinu a, 348 mg /1,6 mmol/di-t-butylkarbcnátu a 0,14 ml /1 mmol/ triethylaainu v 1C mldioxanu se míchala při teplotě místnosti přes noc. fíeakčnísměs se odpařila ve vakua za vzniku polokrystalického odpar-ku, kterv se ořekrystaloval z CH^Cl,.;/etner. Získalo se 768 mg/100 y/ žlutého krystalického prásku. T.t. 183 - 184 °C. IR„ /KBr/ cm-i 3410, 1700, 1 505, 1370, 1255, 1120, 1065,875, 780. UV λ /liíeOH/ nm /6"/ 236 /38300/, 266 /37800/, 333 /6180/, rno χ. * 380 /8770/, 400 /14500/, 423 /15900/. 1H NL2R /CDCl^/ S Q^3 /$Ή, široké s/, 1,31 /3H, d, J = 7 Hz/, 1,36 /3H, s/, 1,39 /3H, d, J = 6 Hz/, 2,68/3H, s/, 3,35 /3H, s/, 5,37 /1H, d, J = 8 Hz/,4,66 /1H, d, J = 4 Hz/, 8,18 /1H, dd, J = 8a 1,5 Hz/, 11,59 /ΊΗ, s/.

Analýza vypočteno pro Ο^θΗ^ΝΟ^ x H2O: C 59,14,nalezeno: C 59,12, H 5,88, N 1,81H 6,06, N 2,27 Příklad 2 Z X _ZZ _

Synthesa 2 -K-t-butoxykaroonyl-o ,4 -O-xsopropyxioenelsa-mycinu A /4/ roztoku 200 mg 2 -N-t-butoxykarbonylelsa: / // 'i 6 a 1,2 ml 2,2-dimethoxypropanu ve 4 ml sucnéno CH^Clg sepřidalo 5 mg TsOH a snes se nechala stát při teplotě míst-nosti přes noc. Přidal se nasycený vodný roztok KaHCO^ areakční směs se energicky mícnala. Organická vrstva se vy-jmula, vysušila pomocí mgSCp a odpařila ve vakuu. Získalose 190 mg /90 // žluté pevné látky. T.t. 166 - 169 °C. IP /KBr/ cm"’ 3420, max ’ o > 0, 1 > u 5 ,

l O 37

K > 5 250, 106p, UVΛ _ / he OH/ max NHP /CDOl.z -i.Lúi /<£/ <£j6 f v O L· v / j 266 / 3 91 00/, J 3 J / 0 3 7 0/ , 380 / £ 650/, 399 /1 4200/, 4 Z- h. £. /15500/, 1 ,34 /orí, 6, J - 6 Hz/ , 1 ,37 /38 , 3 , J - 7 Hz/, • ,37 /3 H, s/, 1 ,42 /3H, s/, 68 /3H, s/, 2,87 /3H, s/ , 3,35 / / 9 S/ , > , — J /1 H, d, J - 8 Hz/, 5,80 /1HJ = δ a 1,5 Hz/ g, ó = 4 Hz/, 8,33 /1H1,63 /1 H, br, /.

Analýza vypočteno pro 041Η4γΝ015 x H\C: C 60,66, H 6,08, N 1,73nalezeno: C 60,92, H 6,03, N 2,00 Příklad 3

Synthesa 2''-N-t-butoxykarbony1-6-0-methylelsamycinu A /5a/

Směs 753 mg 2 -N-t-butoxykarbonylelsamycinu A /3/,186 yul methyljodidu a 276 mg K^CO-j v 1 0 ml suchého KvISOse míchala při teplotě místnosti 24 hodin. Potom se reakč—ní směs zředila vodou a extrahovala pomocí CHCI-,. Extraktse vysušil pomocí IkgSCu a odpařil za sníženého tlaku. Zís-kal se olejovitý odparek, který se vyčistil slouocovou chromatograíií na silikagelu s použitím 1 _ 3 %jako elučníno činidla. Získalo se 672 w- /7a ··./

HeOH v CHCI-, titulníno produktu. T.t. i 63 - 165 °C. IRj9 _ /KBr/ ca'1 1740, 1 61 0, 1495, 1365, 1 250, 1 070, 1 050.uV/1 max /HeCH/ na /£/ 226 /36000/, 266 /40300/, 327 /7070/, 369 /6830/, 390 /12700/, 411 /13700/. 1Η KMH /CDCiy J 0,77 /9H, s/, 1,27 /3H, d, J = 6 Hz/, 1,38 /3H, s/, 1,42 /3H, a, J = 6 Hz/, 2,65 /3H,s/, 3,38 /3H, s/, 4,15 /3H,6 Hz/, 5,63 /1H, d, J = s/, 5,39 /1H, d, J =4 Hz/.

Analýza

vypočteno pro C^H^NO,^ x H^O: Cnalezeno: C 59,61,59,54, H 6,03, N 1,78H 5,76, N 1,64

Deriváty 5c - se připravily z meziproduktu 3. metodoupodobnou té, která byla popsána pro přípravu meziproduktu 5a.Alkylační činidla, výtěžky a fysikálně-chemické údaje produk-tů jsou uvedeny. Příklad 4

Synthesa 2'z-N-t-butoxykarbonyl-6-0-n-propylelsamycinu A /5c/

Alkylační činidlo: n-propyljodid. Výtěžek: 77 % T.t. 167 - 169 °C. IRíz>max /KBr/ cm~1 3420 ’ 1735’ 1360’ 1 255’ 1070· UV^max /Me0H/ 11111 237 /35400/, 266 /39400/, 328 /71 90/, 371 /6920/, 391 /12900/, 411 /13900/. 1H NMH /CDC13/ ^0,77 /9H, s/, 1 ,C5 - 1,50 /12K, m/, 2,08 /3H, s/, 3,38 /3H, s/, 5,40 /1H, d, J = 8 Hz/5,68 /1H, d, J = 4 Hz/. 18

Analýza vyoočteno pro ϋ^.Η.,ΚΌ^ x Η.Ό

*+ I ·+7 I > Z nalezeno: C 60,51 , H 6,32, N 1,72C 60,62, H 6,23, N 1,66 Příklad 5 iyntnesa 2 -N-t-butoxykarbonyl-6-C-isopropylelsaaycinu n /pd/

Alkylační činidlo: isopropyljoúid. Výtěžek: 81 % 'i. t. 169 - 171 0 0.W __-i •nax /KSr/ ca 34z0, 1730, 1370, 1250, 1075. υνΛ max /;*eOH/ /^/ 236 /35700/, 266 /39200/, 329 /7040/, 372 /6760/, 393 /12800/, 414 /13800/. *H NKR /01)01·,/ cT 0,80 /9H, s/, 1,15 - 2,00 /15H, a/, 2,85/3H, s/, 3,88 /3H, s/, 4,22 /ΊΗ, a/, 5,38/1H, d, J = 8 Hz/', 5,60 /1H, d, J = 4 Hz/. analýza vypočteno pro C^H^NO·^ x 1/3nalezeno: 0: N 1 ,740 6Ί,06, H 6,15, N 1,70 61,19, H 6,26, Příklad 6

Synthesa 2 -N-t-bntoxykaroonyl-ó-G-n-Outylelsanycinu. ií /pe/ 3V/KeOK/ na /^/ 237371 *H AKR /0301-/cf 0,78 /'9K, .tilky lační činidlo: n-outyljodid. Výtěžek: 81 % Ϊ. t. 164 - 166 °C. IRp,max /KBr/ cm_1 3420, 1725, 1360, 1255, 1070. /36600/, 265 /40400/, 327 /7460/,/9230/, 391 /13300/, 411 /14300/.s/', 1 ,05 /3H, t, J = 7 Hz/, 1 ,32= 6 Hz/, 1,38 /3H, s/, 1,42 /3H, - 19 - d, J = 6 Hz/, 1,61 /2H, &/, 1,98 /2H, m/, 2,84 /3H, s/, 3,38 /3H, s/, 5,40 /1H, d, ď = 6 Hz/, 5,83 /1H, d, J - 4 Hz/. u:</.

Analýza vypočteno oro C, „H.-. NO, x Ho0 > I i j i. nalezeno: C 60,93, H 6,45,C 61,03, H 6,37, 1 ,6^1 ,76 Příklad 7 ;vntňesa 2

t - du t o xy ka r o o ny 1- 6 - C - η- n e xy 1 e 1 s amy c i nu A /5-

Alkylační činidlo: n-hexylbromid /alkyláce se provádě-la v přítomnosti KI/. Výtěžek: 84 % I.t. i 4 5 — 147 b.

Ixil/ „ /K3r/ cm-"* 1740, 1360, 1 250, 1165, 1 1 05, 1 070, 780. msx . υνλ _ /MeOH/ nm /ť=/ 237 /37700/, 266 /41000/, 327 /7690/,370 /9260/, 391 /13300/, 412 /14300/. 'H NmR /CDC13/ 5 0,75 /9H, s/, 0,94 /3H, t, J = 6 Hz/, 1,27 /3H, d, J = 6 Hz/, 1,34 /3H, s/, 1,42 /3H, d, J = 6 Hz/, 2,83 /3H, s/, 3,37 /3K, s/, 5,38 /«H, d, J = S Hz/, 5,61 /1H, d, J = 4

Hz/, 8,20 /1H, d, J - 8 Hz/.

Analýza vypočteno pro C^H^-NO^ x HgO: C 61,74, H 6,71, N 1,64nalezeno: C 61,88, H 6,58, N 1,57 Příklad 8

Synthesa 2 -N-t-outoxykarbonyl-3 ,4 -O-isopropyliden-6-O- me thy1e1s amy o i nu A /6a/ 20 bmes 95^ ng 2 -I\i-t-butoxykar bony 1-3 ,4 -O-isopropylidenelsamycinu A /4/, 995 mg K2C0^ a 1 ,02 g Mel ve 20 mlDMSO se míchala při teplotě místnosti 18 hodin a 2 hodinypři 60 °C, zředila se vodou a extrahovala se EtOAc. Ex-trakt se promyl vodou, vysušil nad Na^O^ a odpařil se vevakuu. Olejovitý odparek se přečistil sloupcovou chromato-grafií na silikagelu, s použitím CH-,ΟΗ v CH^Gl^ /0 - 2 %/jako elučního činidla. Získalo se 831 mg /86 // titulnísloučeniny. IR \) mQX /KBr/ cm ’ 3450, 2980, 2860, 1745, 17l5sh. UV^max /Me0H/ /e/ 2^6 /35400/, 266 /39600/, 327 /6960/,366 /8630/. 390 /12100/, 410 /12800/. ‘ H. NMP. /CDCl^/0,65 /9H, s/,1,70 /3H, s/,4,15 /3H, s/,/1H, d, J = 4 1 ,38 /9H, m/, 1,65 /3H, s/, 2,82 /3H, s/, 3,38 /3H, s/, 5,24 /1H, d, J = 8 Hz/, 5,8 Hz/ , 8,21 /ΊΗ, d, J = 8 Hz/ analýza vypočteno pro x 1,5 H2G: C 60,42, H 6,28, N 1,68 nalezeno: C 60,16, H 5,96, xN 1,61

Meziprodukty 6b, 6f, _6g a _6h byly připraveny z mezi-produktu 4 metodou podobnou té, která byla popsána pro pří-pravu meziproduktu 6a. Alkylační činidla, výtěžky a fysi-kálně-chemické údaje produktů jsou uvedeny. Příklad 9 -- · - Z z z

Eynthesa 2 -n-t-outoxykarbonyl-6-G-etny1-3 ,4 -C-isopropy-lidenelsamyčinu A /6b/ činidlo: ethvlbr ό v a o. t1 a v přítomnosti ΚΙ/. Výtěžek: % T.t. i o i - i c.3 . IR /iUr/ cm-1 3420, 2 970, ·· r\ . c; -*'· c > , 60 , 1735. max ’ υνλ /ίΰθύϋ/ Γ1ΠΪ / / n/6 / z 5 2 03/ -f 0 * G V j | 3 G G /736e/, max 13200/. 7} £ Gs G y /656 0/, 390 /1 2700/, *+ ! 1 / Γΐ i v AR /CDC1·,/0,69 /9-1, o / , 1 -i 1 > ‘ 5 /18H/ ) G -j *- ) .> 0 /3H, s/, τ , a > / , Q j - 7 Hz/ > 5,25 /1 -1 , d, <j = s Hz/, 5,80 /1H, G, J = •f Hz/, 8, 23 /1 H, dá, J = 8 a 1 Hz/.

Analýza vypočteno pro x i H„0: · C 61,49, H 6,76, N 1,67 nalezeno: C 61,67, H 6,19, N 1,66 Příklad 10

Synthesa 2'*-K-t-butoxykarbonyl-6-0-n-hexyl~3 ,4 -O-iso-propylidenelsamycinu. A /6f/

Alkylační činidlo: n-hexylbromid /v přítomnosti KI/. Výtěžek: 98 % T.t. 143 - 145 °C. IRv,max/KBr/ cm”14440, 2970, 2930, 2855, 1740. UVA max /MeOH/ nm /£/ 236 /37900/, 266 /40800/, 327 /7450/,368/8960/, 391 /12600/, 411 /13400/. 1H NMR /CDC13/ cT 0,65 /9H, s/, 0,93 /3H, t, J = 7 Hz/, 1,38/15H, m/, 1,63 /3H, s/, 1,70 /3H, s/, 2,05/2H, m/, 2,90 /3H, s/, 3,38 /3H, s/, 4,17/2H, q, J = 7 Hz/, 5,24 /1H, d, J = 8 Hz/, 5,79 /1H, d, J = 4 Hz/. 22

Analýza vypočteno pro x ^O: C 63,00, H 6,86, N 1,56 nalezeno: C 63,12, H 7,01, N 1,52 Příklad 11

Synthesa 2 **-N-t-butoxykarbonyl-6-0-n-decyl-3*,4 -O-iso-propylidenelsamycinu A /6q/

Alkylační činidlo: n-decylbromid /v přítomnosti KI/.Výtěžek: 50 % T.t. 113 - 115 °C. IS /KBr/ cm'1 3440, 2970, 2920, 2840, 1740.

LU Cl X UVAmov /MeOH/ nm /<£/ 236 /38100/, 266 /41600/, 327 /8200/,367 /9530/, 390 /13300/, 411 /14000/. ]H NMR /CDC13/ tT 0,65 /9H, s/, 0,89 /3H, m/, 1,05 - 1,80 /29H, m/, 2,05 /2H, m/, 2,90 /3H, s/, 3,39/3H, s/, 4,16 /2H, t, J = 7 Hz/, 5,25 /1H, d, J = 8 Hz/, 5,80 /1H, d, J = 4 Hz/.

Analýza vypočteno pro C^H^NO^ x 1/2 H2O: C 64,95, H 7,27, N 1,49 nalezeno: C 64,98, H 7,24, N 1,46 Příklad 12

Synthesa 2 * *-N-t-butoxykarbonyl-3 *,4*-0-isopropyliden-6-0-/3-ftalimidopropyl/elsamycinu A /6h/

Alkylační činidlo: 3-ftalimidopropylchlorid /v pří- tomnosti KI/. Výtěžek: 100 % T.t. 157 - 159 °C. - 23 - IR / /KBr/cm“1 3340, 1740, 1710, 1495, 1395, 1365, 1250,1070, 785. UV/ v /MeOH/ nm /čV 220 /55900/, 234 /49000/, 267 /40100/,326 /7560/, 368 /8930/, 391 /12500/,411 /13100/. NMK /CBCl^/ óT 0,70 /9H, s/, 1,25 - 1,5 /12H, m/, 1,70 /3H, s/, 2,43 /2H, kvint, J = 7 Hz/, 2,90/3H, s/, 3,38 /3H, s/, 5,25 /1H, d, J = 8Hz/, 5,82 /1H, d, J = 4 Hz/.

Analýza vypočteno pro ^52^56^2^17 x H^O: G 63,33, H 5,55, N 2,69nalezeno: C 63,32, H 5,68, N 2,77 Příklad 13

Synťnesa 6-O-methylelsamyeinu A /7a/

Metoda A

Etherický roztok diazomethanu /připravený z 500 mgN-nitrosomethylmočoviny/ se přidal k suspenzi 130 mg elsa-mycinu A ve 20 ml dioxanu. Reakční směs se míchala při te-plotě místnosti 3 hodiny, přidal se etherický diazomethan.v témže množství a směs se znovu míchala při teplotě míst-nosti další hodinu, potom se odpařila ve vakuu, čímž sezískala amorfní žlutá látka, která se vyčistila následnoupreparativní chromatografií na tenké vrstvě s použitímCHCl3-MeOH-28 % NH^OH /8 : 3 : 1/ a CHCl-j-MeOH /4:1/ ja-ko vyvolávacího rozpouštědla. Získalo se 73 mg /55 %/ ti-tulní sloučeniny. T.t. 176 - 179 °C. IR i/max /KBr/ cm”1 3400> 1735> 1365> 125°> 11°5» 1075> 78θ· UVAmax /Me0H/ 31111 /e/ 237 /37600/, 265 /41600/, 327 /7680/, 24 - 368 /9140/, 390 /13100/, 410 /13900/. 1H NMR /CDCly+ D20/ 1,30 /3H, d, J = 6,0 Hz/, 1,38 /3H, s/, 1,40 /3H, d, J = 6 Hz/, 2,82 /3H, s/,3,39 /3H, s/, 4,14 /3H, s/, 5,35 /1H, d,J = 8 Hz/, 5,54 /1H, d, J = 4 Hz/, 8,12/1Ή, d, J = 8 Hz/, -analýza vypočteno pro C35H37HO13 x 1/2H20: C 60,35, H 5,66, N 2,07nalezeno: C 60,05, H 5,68, N 2,57 SIMS M/Z. 668 /M + H/+, 348, 320, 160.

Metoda B 321 mg 2 -N-t-butoxykarbonyl-6-0-methylelsamyeinu/£a/ se rozpustilo v 1 ml 90 %ní kyselině trifluoroctové.Reakční směs se udržovala na teplotě místnosti 5 minut azahustila se za sníženého tlaku. Ke zbytku se přidala směs10 ml nasyceného vodného roztoku NaHCO3 a CHC13. VrstvaCHC13 se vyjmula, vysušila pomocí Na2S0^ a odpařila. Zís-kal se žlutý odparek, který se vyčistil sloupcovou chromato-grafií na silikagelu a získalo se 217 mg /78 %/ žádanéhoproduktu. T.t. 176 - 178 °C.

Hodnoty spekter tohoto produktu byly zcela identické s hod-notami produktu reakce elsamycinu A a diazomethanu.

Metoda G 242 mg 2 -N-t-butoxykarbonyl-3 ,4 -O-isopropyli-den-6-0-methylelsamycinu A /6a/.se rozpustilo v 0,5 mlkyseliny trifluoroctové při teplotě místnosti. Po 5 minu-tách. se kyselina trifluoroctová odpařila za sníženého tla-ku a odparek se rozpustil ve směsi 10 ml nasyceného rozto- 25 - ku. NaHCO-j a 10 ml CHClj. Organická vrstva se vydmula, vysu-šila pomocí Na2SO^ a odpařila. Získala se žlutá hmota, kte-ré se vyčistila sloupcovou chromatografií na silikagelu azískalo se 154 mg /77 %/ žádaného produktu. T.t. 176 - 178 °Gl.

Hodnoty spekter tohoto produktu byly zcela identické s hod-notami produktu získaného metodou A.

Sloučeniny 7c - se připravily z derivátů 5c -postupem podobným tomu, který byl popsán při přípravě slou-čeniny 7a z derivátu 5a /metoda B/. Výtěžky a fysikálně-che-mické údaje produktů jsou uvedeny. Příklad 14

Synthesa 6-0-n-propylelsamycinu A /]c/ Výtěžek z £α: 72 % T.t. 159 - 161 °e. IRUmax /KBr/ g*”1 3420, 1735’ 1360’ 125θ5> 111θ· UVJt /MeOH/ nm /<£/ 237 /34900/, 266 /38600/, 327 /7310/,max * 368 /8560/, 396 /12300/, 411 /13000/.1H NMR /CDC13/ C? 1,15 /3H, t, J = 7,5 Hz/, 1,30 /3H, d, J = 7 Hz/, 1,38 /3H, s/, 1,39 /3H, d, J = 7 Hz/,2,06 /2H, a/, 2,85 /3H, s/, 3,40 /3H, s/,4,14 /2H, t, J = 7,5 Hz/, 5,37 /1H, d, J = 8 Hz/, 5,55 /1H·, d, J = 4 Hz/.

Analýza vypočteno pro C-,,Η..ΝΟ., x 3/2Ho0: C 59,83, H 6,14, N 1,94nalezeno: 36 4’ 2 C59,99, H 5,92, N ,,88 Příklad 15 26 -

Synthesa 6-0-isopropylelsaaycinn. A /7d/ Výtěžek z 5d: 81 % T.t. 167 - 169 °C. IR^max /KBr/ ca“1 3400, 1735, 1370, 1250, 1080. UVX /ffieOH/ nm /<£/ 236 /36400/, 266 /40000/, 328 /7450/,371 /8910/, 392 /12900/, 414 /13600/. ]H NMR /CDC13/ δ 1,35 /15H, m/, 2,85 /3H, s/, 3,39 /3H, s/,5,35 /1H, d, J = 8 Hz/, 5,55 /1H, d, J = 4 Hz/.

Analýza vypočteno pro C^H^NO^ x 1,5^0: G 59,83, H 6,14, N 1,94nalezeno: C 59,90, H 5,90, N 1,81 Příklad 16

Synthesa 6-0-n-butylelsamycinu A /7e/ Výtěžek z 5e: 84 % T.t. 153 - 155 °G. IRv,max /KBr/ cm~1 338θ, 1735’ 1355’ 125θ> 111θ» 1075·UVZmax /MeOH/ na /£/ 237 /37300/, 266 /41300/, 327 /7880/, 369 /9160/, 390 /13200/, 411 /14100/.NMfi /CDC13/ <5~ 1,04 /3H, t, J = 7 Hz/, 1,30 /3H, d, J = 7

Hz/, 1,38 /3H, d, J = 7 Hz/, 1,38 /3H, s/, 1,8 /4H, a/, 2,85 /3H, s/, 3,38 /3H, s/,5,35 /1H, d, J = 8 Hz/, 5,55 /1H, d, J = 4Hz/.

Analýza vypočteno pro Ο^γΗ^ΝΟ^ x 1,5H2O: C 60,32, H 6,29, N 1,90nalezeno: C 60,43, H 6,06, N 1,88 27 - Příklad 17

Synthesa 6-0-n-hexylelsamycinu A /7f/ Výtěžek z 5f: 89 % T.t. 133 - 135 °C. IRUmax/KBr/ cm"1 1735, 1355, 1 25°’ Ί105’ 1070’ 78°‘ UVJl /MeOH/ na /«^ / 237 /38600/, 266 /42300/, 326 /8140/, EQ.aX . 369 /9380/, 390 /13400/, 410 /14100/. 1H NMR /ČDC13/ c? o,93 /3H, t, J = 6 Hz/, 1,28 /3H, d, J = 6

Hz/, 1,38 /3H, s/, 1,39 /3H, d, J = 7 Hz/,

2,83 /3H, s/, 3,39 /3H, s/, 5,34 /1H, d, J = 7 Hz/, 5,54 /1H, d, J = 4 Hz/, 8,16 /1H, dd, J = 8 a 1 Hz/.

Analýza vypočteno pro C^H^NO^ x 1/2H20: C 62,72, H 6,48, N 1,88nalezeno: G 62,54, H 6,35, N 1 ,79 SIMS M/Z: 738 /M + H/+, 654, 419, 320, 160.

Sloučeniny 7b, 7g a 7h se rovněž připravily z derivá-tů 6b, _6g a 6h metodou podobnou té, která byla popsána připřípravě sloučeniny 7a z derivátu 6a /metoda C/. Výtěžkya fysikálně-chemické údaje produktu jsou uvedeny. Příklad 18

Synthesa 6-0-ethylelsamycinu A /7b/ Výtěžek z 6b: 88 % T.t. 164 - 166 °C. IRl>max /KBr/ cm~1 3420, 2970, 2920, 2860, 1740, υΥλΜΧ /Me0H/ /£/ 237 /36200/, 265 /40200/, 327 /7500/, 368 /8870/, 390 /12800/, 411 /13500/. 28 1H. NMR- /CDC13/ cT 1 ,30 /3H, d, J = 7,5 Hz/, 1 ,38 /3H, s/, 1 ,38/3H, d, J = 7,5 Hz/, 1,62 /3H, t, J = 7 Hz/,2,85 /3H, s/, 3,40 /3H, s/, 4,26 /2H, q, J =7 Hz/, 5,35 /1H, d, J = 8 Hz/, 5,55 /1H, d, J = 4 Hz/, 8,16 /1H, dd, J = 8 a 1,5 Hz/.

Analýza vypočteno pro C^H^NO^ x H20: C 60,48, H 5,91, N 2,00nalezeno: C 59,85, H 5,78, N 1,85 Příklad 19

Synthesa 6-O-n-deeylelsamycinu A /7g/ Výtěžek z 6g: 66 % T.t. 116 - 118 °C. /KBr/ cm*·1 3420, 2920, 2840, 1740. UV^max /Me0H/ nm /é;/ 237 /36300/, 266 /40100/, 327 /7690/,369 /8970/, 390 /12800/, 411 /13600/. 1H NMS /CDC13/ £ 0,89 /3H, a/, 1,35 /23H, m/, 2,0 /2H, m/, 2,87 /3H, s/, 3,40 /3H, s/, 4,17 /2H, t, J =7 Hz/, 5,35 /1H, d, J = 8 Hz/, 5,55 /1H, d, J = 4 Hz/.

Analýza vypočteno pro x 1/2H20: C 64,32, H 7,03, N 1,74 nalezeno: C 64,47, H 7,09, N 1,69 Příklad 20

Synthesa 6-0-/3-ftalimidopropyl/elsamycinu A /7h/ Výtěžek z 6h: 78 % T.t. 165 - 168 °C. - 29 -

IRV' /KBr/ cm-1 3400, 1740, 1715, 1400, 1360, 1255, 1 1.10,BL3X 1075, 1050, 785. UVJL /SSeOH/ nm /<£/ 220 /54800/, 233 /46700/, 266 /38500/,max 326 /7590/, 368 /8600/, 390 /12200/,411 /12800/. 1H NMB /CDC13 + L20/ 1,27 /3H, d, J = 6 Hz/, 1,36 /3H, s/, 1,37 /3H, d, J = 6 Hz/, 2,4 /2H, m/, 2,80 /3H, sz, 3,38 /3H, s/, 5,33 /1H, d, J = 8 Hz/, 5,52 /1H, d, J = 4 Hz/. Příklad 21

Synthesa 6-0-/3-aminopropyl/elsamycinu A /7i/ 53 mg 6-0-/3-Aminopropyl/-3*,4*-0-isopropylidenelsa-mycinu A /8i/ se rozpustilo v 0,5 ml 90 %níno vodného roz-toku T‘FA pomocí ultrazvukových vibrací. Roztok se. odpařil za sníženého tlaku. Odparek se rozpustil ve vod-ném NaHCO^ roztoku /ca 5 ml/ a roztok se podrobil sloupco-vé chromatografii na HP-20 /10 x 140 mm/. Frakce obsahují-cí žádaný produkt se spojily a odpařily. Získalo se 39 mg/78 %/ sloučeniny 7i. T.t. 197 - 206 °C /rozkl./. JEV /KBr/ cm"1 1735, 1680, 1360, 1255, 1110, 1075, 1045,max 780. uVAmax /MeOH/ nm /<ÉZ/ 236 /32200/, 267 /33700/, 312 /5590/,326 /6490/, 369 /7400/, 391 /10100/,412 /10400/. 1H NMB /CCC13 + CD3OD/č5' 1,2 - 1,5 /9H, m/, 2,22 /2H, m/,2,88 /3H, s/, 3,34 /3H, s/, 5,40/1H, d, J = 8 Hz/, 5,58 /1H, d, J = ' 4 Hz/. SIMS M/Z: 711 /M + H/+, 392, 334, 160. - 30 - Příklad 22

Synthesa 3*,4*-0-isopropyliden-6-0-methylelsamyeinu A /8a/

Roztok 100 mg 2 **-N-t-butoxykarbonyl-3*,4*-0-isopro-pyliden-6-0-methylelsamycinu A /6a/ a 118 mg monohydrátukyseliny p-toluensulfonové ve 2 ml acetonu se míchal přiteplotě místnosti 2 hodiny a odpařil se za sníženého tla-ku. Olejovitý odparek se rozpustil ve směsi MeOH a CHCl^v poměru 1:9a roztok se promyl vodným 10 % NaHCO^, vo-dou a solankou v uvedeném pořadí, vysušil nad NagSO^ a od-pařil ve vakuu. Získala se žlutavá lepkavá pevná látka.

Ta se vyčistila preparativní TLC a získalo se 61 mg /69 %/titulní sloučeniny. T.t. 168 - 170 °C. /KBr/ ca” 3420, 2980, 2925, 2860, 1740, UV^max /Me0H/ na /<£/ 237 /36000/, 266 /40600/, 325 /7360/, 367 /8780/, 389 /12200/, 409 /12600/.1H NMR /CLCl3/ď 1,39 /12H, a/, 1,70 /3H, s/, 2,88 /3H, s/, 3,38 /3H, s/, 4,14 /3H, s/, 5,24 /1H, d, J= 8 Hz/, 5,80 /1H, d, J = 4 Hz/, 8,16 /1H,dd, J = 8 a 1,5 Hz/. ’

Analýza vypočteno pro G37H41NO13 x 5/2H2O: C 59,04, H 6,16, N 1,86nalezeno: C 58,87, H 5,64, N 2,01

Sloučeniny 8b, 8f, 8g a 8h se připravily z derivátů6b, 6f, 6g a 6h metodou podobnou té, která byla popsánapři přípravě sloučeniny 8a z derivátu 6a. Výtěžky a fysikál-ně-chemické údaje produktů jsou uvedeny. Příklad 23 - 31

Synthesa 6-O-etnyl-3*,4*-0-isopropylidenelsamycinu A /8b/ Výtěžek z 6b: 76 % T.t. 156 - 158 °C. IR ™ /KBr/ cm“1 3375, 2980, 2930, 2860, 1740.má x UV max /MeOH/ nm / /236 /35600/, 266 /39700/, 326 /7440/, 368 /8660/, 389 /12100/, 409 /12600/. ]H NMR /CDC13/ 1,1 - 1,8 /18H, m/, 2,88 /3H, s/, 3,38 /3H, s/, 4,25 /2H, q, J = 7 Hz/, 5,23 /1H, d, J= 8 Hz/, 5,80 /1H, d, J = 4 Hz/, 8,17 /1H,d, J = 8 Hz/'.

Analýza vypočteno pro ΰ38Η43Νθ13 x 3/2H20: C 60,95, H 6,19, N 1,87nalezeno: G 61,14, H 6,01, N 1,96 Příklad 24

Synthesa 6-O-n-hexyl-3*,4*-0-isopropylidenelsamycinu A /8f/ Výtěžek;z 6f: 76 %

T.t. 132 - 134 °C IR max /KBr/ cm"1 3420, 2970, 2920, 2850, 1740. UV mQx /MeOH/ nm / /236 /35900/, 266 /40100/, 326 /7640/, 367 /8870/, 389 /12400/, 410 /12800/. 1H NMS /CDC13/ 0,95 /3H, m/, 1,15 - 1,80 /21H, m/, 2,04 /2H, m/, 2,83 /3H, s/, 3,38 /3H, s/, 4,17/2H, t, J = 7 Hz/, 5,22 /1H, d, J = 8 Hz/, 5,73 /1H, d, J = 4 Hz/.

Analýza vypočteno pro C^H^NO^ x 1/2H2O: C 64,11, H 6,66, N 1,78nalezeno: C 63,89, H 6,61, N 1,72 - 32 - Příklad 25

Synthesa 6-O-n-decyl-3 *,4 *-0-isopropylidenelsamycinu. A /8g/ Výtěžek z 6g: 84 % T.t. 101 -. 102 °C. IRl/niax /K3r/ cm~1 336°, 2920, 2840, 1740. UVi /MeOH/ nm /<£/ 236 /36300/, 266 /40400/, 326 /7750/,max * ’ 368 /9010/, 390 /12500/, 411 /13000/.]H NMR /CDCiy cT 0,88 /3H, m/, 1,1 - 1,8 /29H, m/, 2,03 /2H, m/, 2,87 /3H, s/, 3,37 /3H, s/, 4,15 /2H, t,J = 7 Hz/, 5,21 /1H, d, J = 8 Hz/, 5,78 /1H,d, J = 4 Hz/.

Analýza vypočteno pro C^H^NO^ x 1/2H20: C 65,54, H 7,17, N 1,66nalezeno: C 65,30, H 7,29, N 1,71 Příklad 26

Synthesa 3 *,4 *-0-isopropyliden-6-0-/3-ftalimidopropyl/elsa-mycinu A /8h/ Výtěžek z 6h: 72 % T.t. 157 - 160 °C. ISvmax /KBr/ cm”1 3400, 1730, 1700, 1385, 1350, 1240, 1065, 770, 715. υνΛ^χ /MeOH/ nm /<£/ 220 /60100/, 233 /50800/, 266 /41500/, 325 /8210/, 367 /9270/, 390 /1290/, 410 /13300/. jH NMR /CPC13 + D20/<T 1,38 /3H, d, J = 6 Hz/, 1,39 /3H, d, J = 6 Hz/, 1,43 /3H, s/, 1,45 /3H, s/, 1,72 /3H, s/, 2,83 /3H, s/, 3,37 /3H,s/, 2,42 /2H, kvint, J = 7 Hz/, 5,22/1H, d, J = 8 Hz/, 5,80 /1H, d, J = 4 Hz/. - 33 -

Analýza vypočteno pro 5 x ^2θ’ 62,80, H 5,61, N 3,12 nalezeno: C 62,83, H 5,50, N 3,36 Příklad 27

Synthesa 6-0-/3~aminopropyl/-3 ,4 -isopropylidenelsamycinu A/81/ K roztoku 142 mg 3 *,4*-0-isopropyliden-6-0-/3-ftal-imidopropyl/elsamycinu A /8h/ v 1 ml EtOH se přidalo 25 cil80 %ního hydrazinhydrátu a reakční směs se nechala stát.při teplotě místnosti 2 hodiny, zředila se 20 ml AeOH a od-pařila se dosucha. Odparek se vyčistil sloupcovou chromato-grafií na silikagelu a získalo se 87 mg /72 %/ žádanéhoproduktu. T.t. 190 - 199 °C /rozkl./ IRv,max /KBr/ cm’1 1740, 1360, 1255, 1110, 1070, 1050, 780.UVA. v /MeOH/ nm /čÉ/ 236 /31200/, 267 /34500/, 31 1 /5410/, 326/6510/,366/7580/,391/10200/,411 /10400/. 1H NME /CDC13 + CD^OD/ cT 1,2-1,6 /12H, m/, 1,72 /3H, s/,2,22 /2H, m/, 2,84 /3H, s/, 3,40/3H, s/, 5,34 /1H, d, J = 8 Hz/,5,73 /1Ή, d, J = 4 Hz/. SIMS M/Z: 751 /M + H/+, 392, 334, 200, 160

Claims

- j4 - PATENTOVÉ N λ R O K Ϊ

1 . Způsob přípravy sloučeniny ooecného vzorce

kde R znamená alkyl s 1 až 10 atomy uhlíku nebo substituo-vaný nebo nesubstituovaný aminoalkyl, vyznačující se tím, že se nechá reagovatά '"-N-t-butoxykarbonylelsamycin A s alkylhalogenidem v pří-tomnosti jodidu draselného a/nebo uhličitanu draselnéhov. dimethylsulfoxidu, za vzniku odpovídajícího 6-O-alkyl-derivátu, který se nechá reagovat s kyselinou trifluor-octovou. - 35 -
2. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce Μ '71

kde R znamená alkyl s 1 až 10 atomy uhlíku nebo substituo-vaný nebo nesubstituovaný aminoalkyl, vyznačující se tím, že se nechá reagovat2''-N-t-butoxykarbonyl-3 ,4 -O-isopropylidenelsamycin As alkylhalogenidem, je-li třeba, v přítomnosti jodidudraselného a/nebo uhličitanu draselného, za vzniku odpoví-dajícího 6-0-alkylderivátu, který se nechá reagovat s kyse-linou trifluoroctovou. - 36 -
3. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce

kde R znamená alkyl s 1 až 10 atomy uhlíku nebo substituo-vaný nebo nesubstituovaný aminoalkyl, vyznačující se tím, že se nechá reagovat2 -N-t-butoxykarbonyl-3 ,4 -O-isopropylidenelsamycin As alkylhalogenidem v přítomnosti jodidu draselného a/nebouhličitanu draselného v dimethylsulfoxidu, za vzniku odpo-vídajícího 6-0-alkylderivátu, který se potom nechá reago-vat s kyselinou toluensulfonovou v acetonu při teplotěmístnosti.
4. Sloučenina připravená postupem podle kterého-koliv z nároků 1 a 2, kterou je 6-O-methylelsamycin A, 6-0-n-propylelsamycin A, 6-0-isopropylelsamycin A, 6-0-n-butylelsamycin A, - 37 - 6-0-n-nexylelsamycin a, 6-0-ethylelsamycin A, 6-O-n-decylelsamycin A, ó-0-/3-ftalimidopropyl/elsamycin a,6-0-/3-aminopropyl/elsaiaycin A.
5. Sloučenina připravená postupem definovanýmv nároku 2, kterou je 3 *,4 *-0-isopropyliden-6-0-methylelsamycin A, 6-O-ethyl-3*,4*-0-isopropylidenelsamycin A, 6-O-n-hexyl-3 *,4 *-0-isopropylidenelsamycin A, 6-O-n-decyl-3 *,4 *-0-isopropylidenelsamycin A, 3*,4*-0-isopropyliden-6-Q-/3-ftalimidopropyl/elsamycin A nebo6-0-/3-aminopropyl/-3 *,4 *-isopropylidenelsamycin A.
6. Způsob přípravy meziproduktu, 2**-N-t-butoxy-karbonyl-6-O-methylelsamycinu A, r * vyznačující se t í m, ze se smísí 2 -N-t- butoxykarbonylelsamycin A a příslušný alkylhalogenid v pří-tomnosti jodidu draselného a uhličitanu draselného v di-methylsulfoxidu a následuje čištění.
7. Způsob přípravy meziproduktu, 2**-N-t-butoxy-karbonyl-6-0-n-propylelsamycinu A, vyznačující se tím, že se smísí 2**-N-t-butoxykarbonylelsamycin A a příslušný alkylhalogenid v pří-tomnosti jodidu draselného a uhličitanu draselného v di-methylsulfoxidu a následuje čištění.
8. Způsob přípravy meziproduktu, 2 **-N-t-butoxy- karbonyl-6-O-isopropylelsamycinu A, vyznačující se tím, že se smísí 2**-N-t- - 38 - butoxykarbonylelsamycin A a příslušný alkylhalogenid v pří-tomnosti jodidu draselného a uhličitanu draselného v dimet-hylsulfoxidu a následuje čištění.
9. Způsob přípravy meziproduktu, 2 **-N-t-butoxy-karbonyl-6-0-n-butylelsamycinu A, v y z n ač u j í c í se tím, že se smísí 2**-N-t-butoxykarbonylelsamycin A a příslušný alkylhalogenid v pří-tomnosti jodidu draselného a uhličitanu draselného v dimet-hylsulfoxidu a následuje čištění.
10. Způsob přípravy meziproduktu, 2 **-N-t-butoxy-karbonyl-6-0-n-hexylelsamycinu A, vyznačující se tím, že se smísí 2**-K-t-butoxykarbonylelsamycin A a příslušný alkylhalogenid v pří-tomnosti jodidu draselného a uhličitanu draselného v dimet-hylsulfoxidu a následuje čištění.
11. Způsob přípravy meziproduktu, 2*z-N-t-butoxy-karbonyl-3 ,4 -O-isopropyliden-6-O-methylelsamycinu A,vyznačující se t i m, že se smísí 2**-N-t-butoxykarbonyl-3 ,4 -O-isopropylidenelsamycin A a přísluš-ný alkylhalogenid v přítomnosti jodidu draselného a uhli-čitanu draselného v dimethylsulfoxidu a následuje čištění.
12. Způsob přípravy meziproduktu, 2**-N-t-butoxy-karbonyl-6-0-ethyl-3 *,4 *-0-isopropylidenelsamycinu A,vyznačující se tím, že se smísí 2**-N-t-butoxykarbonyl-3 ,4 -O-isopropylidenelsamycin A a přísluš-ný alkylhalogenid v přítomnosti jodidu draselného a uhli-čitanu draselného v dimethylsulfoxidu a následuje čištění. - 39 -
13. Způsob přípravy meziproduktu, 2 -N-t-butoxy-karbonyl-6-0-n-hexyl-3 *,4 *-Q-isopropylidenelsamycinu A, b vyznačující se tí m, že se smísí 2 —N—t— . butoxykarbonyl-3 ,4 -O-isopropylidenelsamycin A a přísluš- * ný alkylhalogenid v přítomnosti jodidu draselného a uhli- čitanu draselného v dimethylsulfoxidu a následuje čištění. /z
14. Způsob přípravy meziproduktu, 2 -N-t-butoxy- karbonyl-6-0-n-decyl-3 *,4 *-0-isopropylidenelsamycinu A,vyznačující se tím, že se smísí 2 -N-t- butoxykarbonyl-3 *,4^-O-isopropylidenelsamycin A a přísluš-ný alkylhalogenid v přítomnosti jodidu draselného a uhli-čitanu draselného v dimethylsulfoxidu a následuje Čištění.
15. Způsob přípravy meziproduktu, 2**-N-t-butoxy~karbony1-3 *,4 *-isopropyliden-6-0-/3-ftalimidopropyl/elsa-mycinu A, vyznačující se tím, že se smísí 2 -N-t- butoxykarbonyl-3*,4'-O-isopropylidenelsamycin A a přísluš-ný alkylhalogenid v přítomnosti jodidu draselného a uhli-čitanu draselného v dimethylsulfoxidu a následuje čištění.
16. Způsob přípravy 6-0-methylelsamycinu A,vyznačující se tím, že se elsamycin AO-methyluje diazomethanem. » r v 17· Způsob přípravy 6-0-/3-aminopropyl/-3*,4*-isopropylidenelsamycinu A, vyznačující se tím, že se nechá reagovat2 -N-t-butoxykarbonyl-3 ,4 -O-isopropylidenelsamycin As alkylhalogenidem v přítomnosti jodidu draselného a uhli-čitanu draselného v dimethylsulfoxidu za vzniku odpovídají- - 40 - čího 6-0-alkylderivátu, který se nechá reagovat s kyselinoutoluensulfonovou v acetonu při teplotě místnosti a potoms hydrazinhydrátem.
18. Způsob přípravy 6-0-/3-aminopropyl/elsamycinu A,vyznačující se tím, že se nechá reagovat 2**-N-t-butoxykarbonyl-3*,4*-0-isopropylidenelsamycin A s al-ky lhalogenidem, je-li třeba, v přítomnosti jodidu draselné-ho a/nebo uhličitanu draselného v dimethylsulfoxidu, zavzniku odpovídajícího 6-0-alkylderivátu, který se nechá rea-govat s kyselinou toluensulfonovou v acetonu při teplotěmístnosti a potom s hydrazinhydrátem, načež následuje reak-ce s kyselinou trifluoroctovou.
19. Způsob přípravy farmaceutické kompozice,vyznačující se tím, že se smísí sloučeni-na podle kteréhokoliv z nároků 1 až 15 s jedním nebo vícefarmaceutickými nosiči nebo ředidly.
20. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 15pro použití při léčení nebo prevenci tumorů.