CN85108135A - 固体、液体培养基综合培养食用菌类产品。如菌种、菌饮料、菌丝体、蛋白粮等方法 - Google Patents

Abstract

本发明是有关用固体、液体综合培养食用菌类产品即菌种、菌饮料、菌丝体、蛋白粮等的方法。在此固体培养中用的菌种可以是由液体培养法获之菌胶液，而在液体培养中用的菌种则是由固体培养法中获之菌种包体，由此只须经一级初级培养，便可获得大型深层发酵所需菌种量。并且在固体液体综合培养各阶段可获之各种食用菌类产品，如菌种、菌饮料、菌丝体、蛋白粮等。

Description

本发明涉及用固体、液体培养基综合培养食用菌类产品如菌种、菌饮料、菌丝体、蛋白粮等的方法。

改变人类食物结构的主要途径之一是全面拓展农业食用菌类及同时拓展工业化食用菌类。营养学家近二十年来纷纷发现，各种菇体分别具有独特的医疗价值及较完全的营养价值，而各类菌丝体效能比菇体高出十至三十倍，是食用菌一生中最精华生态，而新型五谷蛋白粮是人类今后理想的食品原料。

近年来发展的食用菌深层培养方法，即液体发酵法，正如美国专利申请号US4288555所公开的。如欲扩大菌种生产，至少要经过3-4级逐级繁殖，如一个10吨发酵罐，所需菌种液要700-1000公斤，显然单靠烧并摇床的一级种子是远不能满足要求，这样必须经多级繁殖，时间1～3日/级计，总计8-18天时间，而各级培养罐用不锈钢制造，所需设备造价、材料能源耗费大，费时长。

目前还有一种固体培养基生产食用菌类产品的方法，它是以消过毒的五谷作为培养基，食用菌菌种接种在其上，虽然这样提高五谷之营养成份，但费时长，并且菌种长大极为不均匀。

本发明的目的，简化菌类产品生产方法，获之一种消耗设备材料能源低的高效率生产方法并且在综合培养法不同阶段获得不同种类食用菌产品。

为此目的，本发明解决方案是在液体培养法中使用固体培养基培养出来菌种，而在固体培养法中使用液体培养基培养出菌种，并且这两个过程是同时进行。

在液体培养过程中，只须经过筛洗固体菌种即可获得大型液体深层发酵所需菌种量，并且在固体、液体综合培养各阶段获之各种食用菌类产品。

本发明液体培养中用的菌种是由固体培养法获之的菌种。培养液用热交换器高温灭菌，然后予冷藏，在一定温度下加入配比一定的消毒过的固体菌种，并将之在培养液中打碎，经过筛选。反复进行数次。这样不仅获之深层发酵中所用菌种而且还得到“干菌丝体”。

本发明液体深层发酵中输入净化气体是使用沸石供气法，这样在培养液中连续不断产生无数气泡，成为繁殖初始点即在这些点上菌种开始进行发酵，生化，固氮等一系列生化作用形成悬浮的菌球，继而获之可食用菌类产品如菌胶或菌饮产品。

本发明固体培养食用菌采用一连续生产工艺过程经吹、净、浸、凉、灼过至少其中一种五谷培养基经热交换器螺旋管内灭菌;又进入冷交换器螺旋管内低温冷却至常温按配比10-30%拌入菌胶，该菌胶即是由液体培养法冷藏槽中获之。经自动包装;栽培，生产出新型食品原料五谷蛋白粮。

下面根据附图详细描述本发明。

图1，传统的液体深层发酵生产方法，

图2、图3，固体、液体综合培养法生产流程图。

图1为一般传统液体培养生产方法。用无菌操作挑取斜面菌种1-2块，置入已灭菌盛有液体培养基的圆锥并中，培养液数量占瓶容积1/5或1/3接种后，种子瓶放在25℃下振荡培养3-10天然后将已长浓的一级种子倾入盛有玻璃珠的无菌瓶中，瓶剧烈振荡，打断菌丝体，形成菌种悬浮液，然后以5-10%接种量置入二级培养罐中，三级接种量是10-15%，这样10吨发酵罐以装七吨计所需种子700-1050公斤，这样，一级种子量远远不能满足要求，必须成多级扩大，一般三、四级，必要时五级扩大，一般一级培养费时1-3天，所以获得菌产品总需时6-18天。

根据图2、图3，固体、液体综合培养法生产流程图。液体培养和固体培养可同时进行，在一定范围彼此利用其产物进行连续生产。例如可使用至少五谷之中一种为培养基，进行固体深层发酵。方法是将至少五谷之中任一种吹、净、浸、凉、灼后经热交换器螺旋管高温蒸汽搅拌灭菌10-14秒，并进入冷交换器超低温冷却螺旋管，第一根超低温冷却管温度在-20℃左右，第二根螺旋管超低温冷却范围大约在-30℃左右。螺旋管中固体粒流量大约1kg/秒。由超低温冷却螺旋管出来的固体培养基在常温14℃-20℃流程中喷上菌胶。由配比10-30%左右液体深层发酵中获得的菌胶，搅拌均匀。这样，在每粒谷上配有几个菌球，每毫升菌胶大约含3000-4600个菌球，每个菌球延生出菌管深进五谷中，将淀粉变成菌团，延生出菌丝体，包围在五谷空隙中生长。由螺旋管搅拌均匀，装入聚丙烯塑料袋五谷包;袋口保持微量通风条件，经栽培13-20天，生产出五谷菌丝体。该菌体可作为液态深层发酵中的菌种。若该五谷菌体经筛洗、喷雾、干燥法，则可取得速溶菌丝体产品。而五谷（菌团）压扁，干燥处理再加以香

味可制成麦片，高梁片等即食天然食品，或称五谷蛋白粮产品。

用液体培养基制备菌类产品方法：则是在煮水槽中由93℃热水，并按一定碳氮比配制液体培养基，由高温热交换器通过培养液进行高温灭菌，然后灭菌过的培养液通至冷藏槽（温度的2-6℃）贮存备用。筛洗固体菌种罐在使用前经蒸汽吹洗灭菌15-20分钟。同时进行五谷菌种包消毒处理。筛洗菌种罐一方面作为扩大菌种用，即培养出大型深层发酵所需菌种量，另一方面经筛洗可获之干菌丝体产品。将筛洗菌种罐中灌入1/4罐的培养液，放入一定配比量菌种包，根据培养目的，即如欲进行扩大菌种生产用则加入量为5-15%，最好为10%体积比菌种包;如欲获之干菌丝体产品则可加入25-35%，最好为30%（按体积计）菌种包。开动打碎机，引入微量净化过的空气，而注意不使未净化空气进入罐内。打碎机转速200-300转/分，打盘上下深入动作2-3次约20分钟，至完全打碎包状与块状菌体，筛洗出大约每公斤含10¹³-10¹⁶的菌管菌片最小单体繁殖点。再注入培养液至1/2罐中线处，开动打碎机机盘约5分钟;再注入1/3罐培养液，打碎三分钟，稀化之。原1∶10种子N（4）级扩大，在此一级完成。筛洗菌种罐一天能完成五-六次筛洗固体菌丝体。经筛洗菌种，罐底部将经筛洗过五谷（粒）导出，加工压扁，烘干成麦片，高梁片等天然快速食品，剩余可烘干制成饲料。

在大型深层发酵罐中，采用了底部通入净化空气，为使供气气压低，而供气点多而采用沸石供气法。这样在培养液中连续不断会产生无数气泡，这些气泡是菌种繁殖初始点，在浮升气泡中，菌种繁殖点进行发酵、生化、固氮等一系列生化作用。由于空气中含氮气78%，促使培养液中菌管、菌片、悬浮菌球增多，培养液增浓，在32-48小时内，培养液可增浓至3200-4700菌球数/毫升。在大型深层发酵罐中，为改进菌种繁殖条件，糖浓度由2%增至4-6%最好为5-6%，碳氮比范围28∶1-20∶1，最好为25∶1相应提高了培养液粘度。

由大型深层发酵罐培养出菌液或菌胶输入微振冷藏槽中，其菌胶一方面可用于固体发酵中菌种，另一方面可送入菌饮加工厂制成菌饮料。本发明应用固体、液体综合培养法，由筛洗固体菌种罐，例如1000升培养罐直接跳级进入大型深层发酵罐，例如达250000升培养罐，一次完成菌种筛洗，而单纯采用液体深层发酵法，为完成菌种扩大繁殖经由若干级，逐级扩大培养繁殖，如图1示，经试管母种→烧瓶摇床→小型发酵罐→种子罐→繁殖罐→液体深层发酵罐→大型深层发酵罐。由于本发明工序大大简化并且采用低压汽吹洗;高温快速灭菌程序，改革原有设备，管路系统，大大简化设备，如由高压式而变成低压式;双层式改变成单层式;节约材料，并且能源消耗降低;而生产周期得以缩短，并提高大型深层发酵罐使用效率。在应用本发明进行固体、液体综合培养过程中的不同阶段可获至各种食用菌类产品如菌种，菌丝体，菌饮料，蛋白粮等。

参见附表，由此对比可知应用本发明所获菌丝体PLⅡ，PLⅠ，L₁₆各氨基酸量，及总量数据与用纯液体深层发酵培养菌丝体氨基酸总量，如金顶蘑，平菇，香菇等均可高出四成。

附图中符号的说明：

图1中    符号    代表函意

151    小型发酵瓶

501    种子罐

5001    繁殖罐

50001    液体深层发酵罐

10^T大型深层发酵罐

图2中    ①    煮水槽

②    级配    碳∶氮

③    培养液超高温灭菌

④    培养液冷芷槽

⑤    筛洗菌种罐

⑥    大型深层发酵罐

⑦    菌醪微振冷芷槽

（六）    栽培五谷菌丝体

图3中    ①    煮水槽

②    级配    碳∶氮

③    培养液超高温灭菌

④    培养液冷芷槽

⑤    筛洗菌种罐

⑥    大型深层发酵罐

⑦    菌醪微振冷芷槽

（一）    五谷（其一）净、浸、凉、灼

（二）    超高温灭菌罗旋管

（三）    超低温冷却罗旋管

（四）    常温拌菌醪

（五）    自动包装

（六）    栽培五谷菌丝体

（a）    菌丝体加工厂

（b）    菌饮加工厂

（c）    蛋白粮、菌种加工

Claims (6)

1、工业化培养食用菌类产品方法包括至少把一种已消毒处理过的五谷为培养基，将食用菌种接种在其上而培养出新的菌体，或在已消毒过，以一定碳氮比相配比液体培养基中接种食用菌种，经通以净化空气，生化培养出新的菌体，其特征在于：

在固体培养基中接种的食用菌菌种可以是由液体深层培养法获之菌液，而在液体培养基中接种的食用菌菌种可以是固体培养法获之菌体，只须经一次筛洗菌种罐便可获得大型深层发酵中所需菌种量，并在固体、液体综合培养各阶段分获各种食用菌类产品。

2、根据权利要求1工业化培养食用菌类产品方法，其特征在液体初级培养过程是如此进行，经高温蒸汽消毒并冷却至大约12-14℃之培养液输入筛洗菌种罐，培养液占罐内一定容积后，加按体积比25-35%消毒过的菌种包，以一定旋转速度上下深入碎菌种包，并筛洗出菌丝体，如此反复进行多次，经喷雾干燥获之食用“干菌丝体”。

3、根据权利要求2，工业化生产菌类产品方法，其特征在于入菌种包量按体积比最好为30%。

4、根据权利要求1工业化培养食用菌类产品方法，其特征在用于扩大菌种初级培养过程是将经高温蒸汽消毒过培养液，经低温冷却至大约12℃-14℃输入初级培养罐中，以配比量为-15%消毒处理过固体菌种包放入罐内，以一定旋转速度上下深若干次打碎菌种包，然后筛洗出菌种体，重新注入培养液及筛洗出菌丝体重复上述过程，该过程产物即是深层发酵中菌种。

5、根据权利要求1工业化培养食用菌类产品方法，其特征在于：固体培养基培养过程是将经高温蒸汽消毒过的至少一种五谷培养基经超低温冷却，并在常温下拌入由液体深层发酵获之菌胶液，并装入塑料袋栽培13-20天，获之蛋白粮产品。

6、根据权利要求1工业化生产食用菌类产品方法，其特征在于，在液体深层发酵罐中用沸石供气法，由罐底部输入净化空气，以增加培养液中繁殖点。

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