CN216106925U - 一种犬脂肪干细胞分离装置 - Google Patents

Abstract

本实用新型涉及一种犬脂肪干细胞分离装置，包括：细胞培养皿、培养皿盖和不锈钢网。本实用新型提供的犬脂肪干细胞分离装置，不锈钢网对脂肪组织有压迫作用，使其不易漂浮，有利于促进脂肪干细胞的贴壁生长；进液、出液阀，便于干细胞培养基的更换；可以有效避免培养基更换过程中的细胞污染，整体结构简单，组件易得，易于批量化生产。

Description

一种犬脂肪干细胞分离装置

技术领域

本实用新型涉及一种犬脂肪干细胞分离装置，属于生物技术领域。

背景技术

脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells, ADSCs)是存在于脂肪组织中的、具有多向分化潜能的间充质干细胞，由Zuk等在2001年从吸脂术抽出的脂肪中首次发现。脂肪干细胞具有来源丰富、取材方便、容易获取、易于培养和免疫排斥低等优点，且具有分化为脂肪细胞、肌肉细胞、成骨细胞、神经细胞、心肌细胞和胰岛细胞等多种细胞的潜能，因此，脂肪干细胞已成为近年来医学领域乃至整个生命科学领域的研究热点。

目前，关于人、鼠脂肪干细胞的研究报道较多，而对犬脂肪干细胞的研究相对较少。

常见的脂肪干细胞的分离方法是酶消化法和组织块贴壁法。

酶消化法是目前主要的脂肪干细胞的分离方法，其原理是将已剪成碎块的脂肪组织，通过消化酶消化，以去除细胞间质，再经过滤、洗涤和离心等步骤去除其它细胞，从而最终获得脂肪干细胞。酶消化法是一种费时、昂贵的方法，且在使用酶的类型、浓度、消化时间等方面缺乏统一的标准。由于各种因素的影响，分离的脂肪干细胞表型、增殖和分化能力有一定差异。

组织块贴壁法是在无菌采集脂肪组织后，将脂肪组织转运至实验室，先用生理盐水冲洗，再通过双抗PBS冲洗、基础培养基冲洗等步骤后，将脂肪组织剪成适宜大小的组织块，然后贴放到培养皿中进行培养，为了使组织块贴壁更紧凑、不漂浮于培养液中，也可将组织块贴放到细胞培养皿中，于二氧化碳培养箱中培养30min，然后再滴加细胞培养液，于37℃、5%CO₂饱和湿度下培养16 h后补加培养液，继续培养，24 h后换液，之后隔天换液，于倒置相差显微镜下，每天观察细胞生长形态和特征。在组织块贴壁法中，如何使组织块贴壁更紧凑、不漂浮于培养液中、培养液不受污染是该实验成败的关键。

发明内容

本实用新型要解决的技术问题是，针对现有技术不足，提出一种能够解决现有脂肪干细胞分离试验时脂肪组织易漂浮、更换培养基时易使组织块移动和污染等技术难点的犬脂肪干细胞的分离装置。

本实用新型为解决上述技术问题提出的技术方案是：一种犬脂肪干细胞分离装置，包括：细胞培养皿、培养皿盖和不锈钢网；所述不锈钢网由若干不锈钢管横纵交错排列并相互固定而成；且相交的不锈钢管之间相互连通；所述不锈钢网的底部均匀的布置有若干滴漏孔；所述不锈钢网上具有进液管；所述细胞培养皿的底部装有排液阀；所述培养皿盖上具有进液阀；所述进液阀能够与所述进液管连接。

上述技术方案的改进是：所述不锈钢管的内径0.5mm；不锈钢管的排列间隙为2mm；所述滴漏孔的孔径为0.3mm；且滴漏孔布置在不锈钢管的交错处。

上述技术方案的改进是：所述培养皿盖上开设有容纳所述进液阀的孔；孔中可拆的布置有密封圈。

本实用新型提供的犬脂肪干细胞分离装置，不锈钢网对脂肪组织有压迫作用，使其不易漂浮，有利于促进脂肪干细胞的贴壁生长；不锈钢网、进液阀、出液阀的设置，便于干细胞培养基的更换，可以有效避免培养基更换过程中的细胞污染，整体结构简单，组件易得，易于批量化生产。

附图说明

下面结合附图对本实用新型作进一步说明：

图1是本实用新型一个优选的实施例结构示意图。

图2是图1中的俯视结构示意图。

具体实施方式

实施例

本实施例的犬脂肪干细胞分离装置，如图1和图2所示，包括：细胞培养皿6、培养皿盖4和不锈钢网5。其中，不锈钢网5由若干不锈钢管横纵交错排列并相互固定而成；相交的不锈钢管之间相互连通。不锈钢网的底部均匀的布置有若干滴漏孔；不锈钢网的顶部中心具有进液管2。细胞培养皿6的底部装有排液阀3；培养皿盖4上具有进液阀1；进液阀1能够与进液管2连接。

不锈钢管的内径0.5mm；不锈钢管的排列间隙为2mm；滴漏孔的孔径为0.3mm；且滴漏孔布置在不锈钢管的交错处。

培养皿盖4上开设有容纳进液阀1的孔；孔中可拆的布置有密封圈。

本实施例的犬脂肪干细胞分离装置的具体使用过程如下：

（1）无菌采集犬脂肪组织，无菌PBS溶液冲洗3次，以清除脂肪组织表面的血迹等污物；将清洗后的脂肪组织在4℃下，转运至实验室。

（2）脂肪组织PBS冲洗2次，无血清DMEM冲洗2次，用组织剪将脂肪组织剪碎。

（3）用组织镊将剪碎的组织块转移至细胞培养皿6中，并使其在培养皿底点状均匀分布。

（4）将不锈钢网5覆盖于组织块7表面。

（5）将不锈钢网5的进液管2与进液阀1连接，盖好培养皿盖4，将进液阀消毒后，经其注入10%血清培养基，依靠不锈钢网5的滴漏作用慢慢渗透于脂肪组织周围，使所有组织块周围均有培养基浸润为宜，注入完毕，再次消毒进液阀后封闭。

（6）将培养皿转移至37℃、5%CO₂饱和湿度下培养。

（7）12h后，消毒并打开出液阀，使培养基废液流出或用仪器吸出，再次消毒出液阀后封闭；按照步骤（5）重新注入10%血清培养基，继续培养并观察细胞生长情况。

本实施例中，不锈钢网5本身作为重物，能够将组织块压住，避免被培养基浮起；同时，不锈钢网5本身作为注入培养基组件，可以有效、均匀且避免对组织细胞产生冲击的注入培养基；进液阀、出液阀的设置，可以有效避免开盖，能够有效降低污染风险。

本实用新型不局限于上述实施例。凡采用等同替换形成的技术方案，均落在本实用新型要求的保护范围。

Claims (3)

1.一种犬脂肪干细胞分离装置，其特征在于，包括：细胞培养皿、培养皿盖和不锈钢网；所述不锈钢网由若干不锈钢管横纵交错排列并相互固定而成；且相交的不锈钢管之间相互连通；所述不锈钢网的底部均匀的布置有若干滴漏孔；所述不锈钢网上具有进液管；所述细胞培养皿的底部装有排液阀；所述培养皿盖上具有进液阀；所述进液阀能够与所述进液管连接。

2.根据权利要求1所述的犬脂肪干细胞分离装置，其特征在于：所述不锈钢管的内径0.5mm；不锈钢管的排列间隙为2mm；所述滴漏孔的孔径为0.3mm；且滴漏孔布置在不锈钢管的交错处。

3.根据权利要求1所述的犬脂肪干细胞分离装置，其特征在于：所述培养皿盖上开设有容纳所述进液阀的孔；孔中可拆的布置有密封圈。

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