CN211751169U - 减脂减重、抗老抗皱功效的芸香科植物发酵液微粒结构 - Google Patents
减脂减重、抗老抗皱功效的芸香科植物发酵液微粒结构 Download PDFInfo
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Abstract
本实用新型提供减脂减重、抗老抗皱功效的芸香科植物发酵液微粒结构，包含保护外层，保护外层包含小分子多糖分子微粒球，该多糖分子微粒球由菇类和藻类经特殊发酵后所含的多糖分子转化、分割形成，成为包覆材料，及含功效成分内层，为含有芸香科植物(如柑橘类)发酵液当中功效物质的实质圆形，外层的直径介于10‑4～10‑3mm之间，内层的粒径介于10‑5～10‑4mm之间，内层被包覆于外层内藉此双层结构可以保有芸香科植物发酵液的减脂减重、抗老抗皱功效，补充在发酵过程中功效物质失去的配糖体，提升人体利用率，有效提升功效性，即便产量并未有所提升，提生有效成分同样能达到相同功效，甚至优于天然物组成结构的功效性。
Description
技术领域
本实用新型涉及一种植物发酵液微粒结构，特别涉及一种芸香科植物发酵液微粒结构。
背景技术
柑橘是芸香科柑橘属水果的统称，主要种类有橘、柑、甜橙、酸橙、柚、葡萄柚、柠檬、莱姆、枸橼、佛手柑和金橘等，柑橘类水果是世界上产量最大的水果，目前的年产量已经超过了1亿吨；柑橘含有丰富的钾、B族维生素、维生素C及抗氧化成分、抗癌成分、抗过敏成分，还含有丰富的类黄酮、多酚、类胡萝卜素等多种化合物群，具有很高的营养价值和食疗保健作用，此外柑橘具有消脂、减重、抗氧化、抗老等功效，但现阶段技术仍以水萃取或有机溶剂萃取为主要提取方式，因功效成分为天然化合物型态，容易受到原料收成季节、天候影响。
目前的研究指出柑橘当中的天然化合物(如类黄酮)在人体中利用率并不高，在萃取过程中容易将配糖体去除，使人体吸收度下降，且萃取柑橘种类也有所限制，只能依循不同柑橘种类得到更高含量的功效物质，为增加柑橘的生物利用率更能提升原有功效性，且利用能不局限于不同柑橘种类，是急待解决的问题。
另依据文献Zhang,Y.et al,(2010)Comparative Analysis of Contents ofFlavonoid Compounds in Various Species of Citrus Peel and Their DynamicChanges in QuzhouPonkan Peel during Postharvest Storage，该研究通过对不同品种的柑橘果皮中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素、橘皮素、橙黄酮进行分析测定，研究不同品种柑橘果皮中主要类黄酮化合物的分布和差异，以及采后椪柑果皮中类黄酮化合物含量的变化，结果表明黄酮类化合物的成分和含量在不同品种柑橘果实中的分布情况有较为显着的差别，在5个柑橘品种中，常山胡柚果皮中6种黄酮类化合物的总含量最高，并主要以柚皮苷和新橙皮苷为主，占6种类黄酮化合物总含量的98.4％；宫川温州蜜柑和哈姆林甜橙果皮中主要以橙皮苷为主，分别占6种黄酮化合物总含量的96.9％和94.2％；而衢州椪柑和蕉柑果皮则主要以橙皮苷和川皮素为主，分别占6种黄酮化合物的86.5％和91.2％。椪柑和蕉柑中6种黄酮化合物含量分布相一致，均为橙皮苷>川皮素>橘皮素>橙黄酮>柚皮苷>新橙皮苷。故不同柑橘种类的黄酮化合物含量不同，且黄酮化合物主要分布在果皮中。
因此发展出适合一般大众使用、提升人体利用率和提高功效成分效能的芸香科植物发酵液组合物，且具有减脂减重、抗老抗皱功效是现阶段最重要急需解决的问题。
发明内容
除非另有定义，否则本文所使用的所有技术术语具有与本实用新型所属领域中一般技术人员所知相同的含义。除非上下文另有明确指出，否则本说明书及随附权利要求中所使用的单数形式「一个」、「一种」等包括复数提述。除非另有说明，否则本文中对「或」的任何提述旨在涵盖「和/或」。
以下将提供本实用新型一些层面的解说，这些解说是以简化的形式呈现本实用新型选定的概念，作为以下呈现的更加详尽描述的介绍。
本新型提供一种芸香科植物发酵液微粒结构，其由中心至外侧依序包含：一内层，该内层包含一芸香科植物发酵液，以及一保护外层，该保护外层包含一小分子多糖分子微粒球。
其中，所述小分子多糖分子微粒球包含一菇类和一藻类经特殊发酵后所含的多糖分子转化、分割形成小分子多糖分子。其中，该芸香科植物发酵液微粒结构具有减脂减重或抗老抗皱功效。
在本新型之一实施例中，该芸香科植物发酵液微粒结构中的具减脂减重、抗老抗皱功效的保护外层的直径介于10-4～10-3mm之间；该内层的粒径介于10-5～10-4mm之间。
所述内层的芸香科植物发酵液选自芸香科植物柳橙、柠檬、酸橘或金桔中的一种的发酵液。
所述芸香科植物发酵液为本领域市场可以购买得到的产品，本实用新型中的芸香科植物购买自市售，按照下述已知方法制备而成芸香科植物发酵液。
所述保护外层由小分子多糖分子微粒球组成。多糖分子微粒球在外层内紧密接触、结合。
所述保护外层中包含的小分子多糖分子微粒球选自香菇、黑木耳或银耳多糖中的一种。
所述保护外层中包含的小分子多糖分子微粒球选自青丝藻、海木耳或海带多糖中的一种。
所述保护外层是本领域市场可以购买得到的产品，本实用新型中的保护外层中的材料购买自市面，按照下述已知方法制备而成。
所述保护外层中包含的小分子多糖分子微粒球本领域市场可以购买得到的产品，本实用新型中的保护外层中包含的小分子多糖分子微粒球购买自市售，按照下述已知方法制备而成。
在本新型之一实施例中，该保护外层结构可以保有芸香科植物发酵液的减脂减重、抗老抗皱功效物质，并补充在发酵过程中功效物质失去的配糖体，提升人体利用率，并有效提升功效性，即便产量并未有所提升，将有效成分功用提生同样能达到相同功效，甚至优于天然物组成结构的功效性。
在本新型之一实施例中，本新型芸香科植物发酵液微粒结构可制造为粉剂包、饮品、胶囊或锭剂的形式，以供使用者依需求选用。
在本新型之一实施例中，该芸香科植物发酵液微粒结构的制备方法，包括:
(1)乳酸菌发酵步骤：制成时以独立发酵筒，将完整芸香科植株质量至少占50-80％，加入一乳酸菌和一糖类0.2-20％，二氧化碳控制在1000ppm 以下，温度设定为25-28℃，pH值调整至5-7之间，发酵30-60天，取得一芸香科植物的乳酸菌发酵液。
(2)酵母菌发酵步骤：将该芸香科植物的乳酸菌发酵液加入一酵母菌和一糖类0.2-20％，且二氧化碳控制在1000ppm以下，温度设定为25-28℃， pH值调整至5-7之间，发酵30-60天，取得一芸香科植物的酵母菌发酵液。
(3)混合发酵步骤：添加一菇类或一藻类发酵液，该发酵液制程与芸香科植物的发酵液前两步骤相同，额外加入糖类(如:果糖、葡萄糖、乳糖、木糖)0.2-20％，二氧化碳控制在1000ppm以下，温度设定25-28℃，发酵天数 30-60天，该芸香科植物发酵液组合物用于制备减脂减重、抗老抗皱的用途。
本新型芸香科植物发酵液微粒结构所述的制备方法中，该菇类选自香菇、黑木耳、银耳或其混合物中的一种或多种。
本新型芸香科植物发酵液微粒结构所述的制备方法中，该藻类选自青丝藻、海木耳、海带或其混合物中的一种或多种。
本新型芸香科植物发酵液微粒结构所述的制备方法中，该糖类选自果糖、葡萄糖、乳糖或木糖中的一种或多种。
本新型芸香科植物发酵液微粒结构所述的制备方法中，该乳酸菌选自Lactobacillus plantarum、Lactobacillus delbrueckii、Lactococcus lactis、Lactococcus acidophillus或Bifidobacterium bifidum中的一种或多种。
本新型芸香科植物发酵液微粒结构所述的制备方法中，该乳酸菌的混合比例为Lactobacillus plantarum浓度为0.5％～10％、Lactobacillus delbrueckii 浓度为0.5％～10％、Lactococcus lactis浓度为0.5％～10％、Lactococcus acidophillus浓度为0.5％～10％和Bifidobacterium bifidum浓度为0.5％～ 10％。
本新型芸香科植物发酵液微粒结构所述的制备方法中，该酵母菌选自Saccharomycopsis fibufigera、Pichia membrame faciens、 Schizosaccharomyes pombe或Saccharomyces cerevisiae中的一种或多种。
本新型芸香科植物发酵液微粒结构所述的制备方法中，该酵母菌的混合比例为Saccharomycopsis fibufigera浓度为0.5％～10％、Pichia membrame faciens浓度为0.5％～10％、Schizosaccharomyes pombe浓度为0.5％～10％和Saccharomycescerevisiae所浓度为0.5％～10％。本新型芸香科植物发酵液微粒结构所述的较佳制备方法中，该将以一芸香科植物加入乳酸菌 Lactococcus acidophillus发酵30天，再加入酵母菌 Saccharomycopsisfibufigera发酵30天，再与一菇类或一藻类发酵液混合发酵30天，形成香科植物发酵液组合物，亦称为芸香科复合晶体。
附图说明
图1为该芸香科植物发酵液微粒结构的制备方法的示意图。
图2显示芸香科植物发酵液微粒结构(即为芸香科复合晶体)之一实施例解剖示意图。
图3显示芸香科植物发酵液微粒结构(即为芸香科复合晶体)的UCP-1 褐色脂肪组织蛋白转化试验，实验分成六组:(1)0.25％芸香科水萃取液、(2) 0.125％芸香科水萃取液、(3)0.25％芸香科发酵液、(4)0.125％芸香科发酵液、 (5)0.25％芸香科复合晶体和(6)0.125％芸香科复合晶体，数值表示为平均值±标准偏差(n＝3)，3T3-L1前脂肪细胞分别与6组样本共培养后转化为褐色脂肪细胞(其UCP-1含量增加)可增加脂肪的燃烧效果：结果显示芸香科复合晶体展现良好转化效果，与芸香萃取液、芸香发酵液相比，以0.25％芸香科复合晶体使用8小时内转化率可达3倍。且芸香科复合晶体可持续转化长达8小时，芸香水萃取液及芸香发酵液则只能持续6小时，因此经发酵制程后可提升芸香科功效性，提高脂肪细胞褐化能力。
图4显示芸香科植物发酵液微粒结构(即为芸香科复合晶体)的抑制前脂肪细胞能力试验，将NIH-3T3纤维母细胞分别和13组样品作用24小时后的毒性试验，结果显示24小时培养后，芸香水萃取液、芸香发酵液及芸香科复合晶体皆无出现毒杀性。对于纤维母细胞存活率皆超过85％，无不良影响。数值表示为平均值±标准偏差，细胞存活率超过80％表示无细胞毒性。
图5显示芸香科植物发酵液微粒结构(即为芸香科复合晶体)的抑制前脂肪细胞能力试验，将NIH-3T3纤维母细胞分别和13组样品作用48小时后的毒性试验，结果显示48小时培养后，芸香水萃取液、芸香发酵液及芸香科复合晶体皆无出现毒杀性。对于纤维母细胞存活率皆超过85％，无不良影响。数值表示为平均值±标准偏差，细胞存活率超过80％表示无细胞毒性。
图6显示芸香科植物发酵液微粒结构(即为芸香科复合晶体)的抑制前脂肪细胞能力试验，结果显示3T3-L1前脂肪细胞分别和13组样品作用 24小时后的前脂肪细胞抑制效果，此抑制效果：芸香科复合晶体>芸香水萃取>芸香发酵液，以一般发酵方式并无法提升柑橘当中的功效成分；芸香科复合晶体表现出显着抑制前脂肪细胞能力，24小时的存活率为65％，有效减少脂肪细胞的生成。数值表示为平均值±标准偏差，图中标示a.p＜0.01 表示和控制组相比有显着性差异；标示b.p＜0.01表示和芸香科水萃取液组相比有显着性差异；标示c.p＜0.01表示和芸香科发酵液相比有显着性差异。
图7显示芸香科植物发酵液微粒结构(即为芸香科复合晶体)的抑制前脂肪细胞能力试验，结果显示3T3-L1前脂肪细胞分别和13组样品作用 48小时后的前脂肪细胞抑制效果，此抑制效果：芸香科复合晶体>芸香水萃取>芸香发酵液，以一般发酵方式并无法提升柑橘当中的功效成分；芸香科复合晶体表现出显着抑制前脂肪细胞能力，48小时之存活率为50％，有效减少脂肪细胞的生成。数值表示为平均值±标准偏差，图中标示a.p＜ 0.01表示和控制组相比有显着性差异；标示b.p＜0.01表示和芸香科水萃取液组相比有显着性差异；标示c.p＜0.01表示和芸香科发酵液相比有显着性差异。
图8显示芸香科植物发酵液微粒结构(即为芸香科复合晶体)的抗氧化能力试验，实验分成六组样本，分别为:(1)0.125％芸香科水萃取液、(2) 0.25％芸香科水萃取液、(3)0.125％芸香科发酵液、(4)0.25％芸香科发酵液、 (5)0.125％芸香科复合晶体和(6)0.25％芸香科复合晶体，以常见自由基:DPPH为指标，进行体外试验，分别加入不同浓度的6组样本，检验样本是否具有清除自由基能力，结果显示清除DPPH自由基能力:芸香科复合晶体>芸香水萃取液>芸香发酵液，其中该芸香科复合晶体达到63％清除效果。数值表示为平均值±标准偏差，图中标示a.p＜0.05表示和芸香科水萃取液组相比有显着性差异；标示b.p＜0.05表示和芸香科发酵液相比有显着性差异。
图9显示芸香科植物发酵液微粒结构(即为芸香科复合晶体)的抗氧化能力试验，实验分成六组样本，分别为:(1)0.125％芸香科水萃取液、(2) 0.25％芸香科水萃取液、(3)0.125％芸香科发酵液、(4)0.25％芸香科发酵液、 (5)0.125％芸香科复合晶体和(6)0.25％芸香科复合晶体，以常见自由基: ABTS+为指标，进行体外试验，分别加入不同浓度的6组样本，检验样本是否具有清除自由基能力，结果显示清除ABTS+自由基能力:芸香科复合晶体>芸香水萃取液>芸香发酵液，其中该芸香科复合晶体达到57％清除效果。数值表示为平均值±标准偏差，图中标示a.p＜0.05表示和芸香科水萃取液组相比有显着性差异；标示b.p＜0.05表示和芸香科发酵液相比有显着性差异。
图10显示芸香科植物发酵液微粒结构(即为芸香科复合晶体)的抗氧化能力试验，实验分成六组样本，分别为:(1)0.125％芸香科水萃取液、(2) 0.25％芸香科水萃取液、(3)0.125％芸香科发酵液、(4)0.25％芸香科发酵液、 (5)0.125％芸香科复合晶体和(6)0.25％芸香科复合晶体，以常见自由基: NBT为指标，进行体外试验，分别加入不同浓度的6组样本，检验样本是否具有清除自由基能力，结果显示清除NBT自由基能力:芸香科复合晶体> 芸香水萃取液>芸香发酵液，其中该芸香科复合晶体达到90％清除效果。数值表示为平均值±标准偏差，图中标示a.p＜0.05表示和芸香科水萃取液组相比有显着性差异；标示b.p＜0.05表示和芸香科发酵液相比有显着性差异。
图11显示芸香科植物发酵液微粒结构(即为芸香科复合晶体)的抑制酪氨酸酶活性试验，实验分成八组样本，酪氨酸经酪氨酸酶催化后产生多巴，为黑色素前驱物，结果显示各组样本皆呈现浓度依赖性，抑制酪氨酸酶活性试验结果:曲酸>芸香科复合晶体>芸香科水萃取液>芸香科发酵液；其中该芸香科复合晶体达到76％抑制率，减少黑色素前驱物的产生。数值表示为平均值±标准偏差，图中标示a.p＜0.01表示和芸香科水萃取液组相比有显着性差异；标示b.p＜0.01表示和芸香科发酵液相比有显着性差异。
图12显示芸香科植物发酵液微粒结构(即为芸香科复合晶体)的MMP-2 蛋白表达量(表现量)试验，实验分成九组样本，ProMMPs为MMPs未活化状态，若ProMMPs浓度增加，表示降低了MMPs的活化，达到胶原蛋白的维持，MMP-2蛋白表达量结果显示各组样本皆呈现浓度依赖性；Pro MMP-2蛋白浓度:芸香科复合晶体>维他命C>芸香科水萃取液>芸香科发酵液，其中该芸香科复合晶体提高ProMMP-1浓度，避免MMP-2的活化造成胶原蛋白裂解。数值表示为平均值±标准偏差，图中标示a.p＜0.01表示和芸香科水萃取液组相比有显着性差异；标示b.p＜0.01表示和芸香科发酵液相比有显着性差异。
图13显示芸香科植物发酵液微粒结构(即为芸香科复合晶体40)的肥胖小鼠试验，将实验分为2组样本，分别为：(1)控制组(不给予芸香科复合晶体)和(2)芸香科复合晶体，以高油脂饲料喂食小鼠，诱导小鼠肥胖，同时给予芸香科复合晶体，监测小鼠体重变化率，肥胖小鼠试验结果显示经高油脂饲料喂养的小鼠，体重成长率随着时间上升，第19天时体重增加率达到 39％；有使用芸香科复合晶体的小鼠，能减少体重的变化率，降低体重增加率达到8％。
附图标记说明
芸香科植物 10
芸香科植物乳酸菌发酵步骤 11
芸香科植物酵母菌发酵步骤 12
菇类、藻类 20
菇类、藻类乳酸菌发酵步骤 21
菇类、藻类酵母菌发酵步骤 22
混合发酵步骤 30
芸香科植物发酵液微粒结构 40
(芸香科复合晶体)
保护外层 401
内层 402
小分子多糖分子微粒球 403
破壁提取 50
结构修饰 60
晶体建构 70
具体实施方式
为令本实用新型所运用的技术内容、创作目的及其达成的功效有更完整且清楚的揭露，兹于下详细说明之，并请一并参阅所揭的图式及图号。
实施例1：芸香科植物发酵液微粒结构之制备方法
透过微生物发酵技术，利用生物特性消耗有效成分(如类黄酮)结构上配糖体，再加入小分子菇类或藻类多糖肽，解决因萃取而降低利用率等问题。即为发酵过程中:先提取，后修饰，再建构，三阶段发酵技术，产生具有晶体结构之芸香科植物发酵液，成为具有减脂减重、抗老抗皱功效；该芸香科植物发酵液微粒结构40之发酵制程如第一图所示，包含：
1.乳酸菌发酵步骤11：
利用微生物特性消耗芸香科植物的有效成分(如类黄酮)结构上配糖体，破壁提取50芸香科植物。
制成时以独立发酵筒，将完整芸香科植株10(如：柳橙、柠檬、酸橘、金桔)质量至少占50～80％，加入乳酸菌1～5株(Lactobacillus plantarum、 Lactobacillusdelbrueckii、Lactococcuslactis、Lactococcusacidophillus、 Bifidobacteriumbifidum)，糖类(如:果糖、葡萄糖、乳糖、木糖)0.2～20％，二氧化碳控制在1000ppm以下，温度设定25～28℃，pH值调整至5～7之间，发酵天数30～60天。
2.酵母菌发酵步骤12：
对初步分解的该芸香科植物10(如：柳橙、柠檬、酸橘、金桔)进行小分子化，利用消化酵素或水解酵素，同时对该芸香科植物结构进行结构修饰，酵母菌发酵过程中，分解营养物质结构上多余的单糖分子进行利用，结构修饰后营养物质可具有较高的黏附特性，利于后续进阶修饰(如糖基化)60。
制成时以独立发酵筒，将完整芸香科植株(如：柳橙、柠檬、酸橘、金桔)质量至少占50～80％，加入酵母菌1～4株(Saccharomycopsisfibufigera、 Pichia membramefaciens、Schizosaccharomyespombe、Saccharomyces cerevisiae)，糖类(如:果糖、葡萄糖、乳糖、木糖、黑糖)0.2～20％，二氧化碳控制在1000ppm以下，温度设定25～28℃，pH值调整至5～7之间，发酵天数30～60天。
3.混合发酵阶段步骤30：
添加菇类20(如香菇、黑木耳、银耳)或藻类20(如青丝藻、海木耳、海带)发酵液，发酵液制程中的乳酸菌发酵步骤21、乳酸菌发酵步骤22与该芸香科植物发酵液前两阶段11、12相同，额外加入糖类(如:果糖、葡萄糖、乳糖、木糖)0.2-20％，二氧化碳控制在1000ppm以下，温度设定25-28℃，发酵天数30-60天。即为发酵过程中:先提取，后修饰，再建构，三阶段发酵技术，产生具有晶体结构的芸香科植物发酵液微粒结构40。
本实用新型的芸香科植物发酵液微粒的内层芸香科植物发酵液为已知材料，可以从市场获得。也可以植物材料购买自第一果菜批发市场，按照上述已知方法制备而成。
实施例2：芸香科植物发酵液微粒结构40
本新型的芸香科植物发酵液微粒结构40，其由中心至外侧依序包含：一内层402，该内层包含一芸香科植物发酵液；以及一保护外层401，其中该保护外层包含一小分子多糖分子微粒球403，该小分子多糖分子微粒球 403包含一菇类和一藻类经特殊发酵后所含的多糖分子转化、分割形成小分子多糖分子，其中，该芸香科植物发酵液微粒结构具有减脂减重或抗老抗皱功效。
本新型的芸香科植物发酵液微粒结构40，该芸香科植物发酵液微粒结构中的具减脂减重、抗老抗皱功效的保护外层401的直径介于10-4～10-3mm 之间；该内层402的粒径介于10-5～10-4mm之间。
本新型的芸香科植物发酵液微粒结构40，该具减脂减重、抗老抗皱功效的芸香科植物发酵液内层402所含的芸香科植物选自柳橙、柠檬、酸橘、金桔及其混合物中的一种或多种。
本新型的芸香科植物发酵液微粒结构40，该具减脂减重、抗老抗皱功效的芸香科植物发酵液保护外层401包含的小分子多糖分子微粒球403中，该菇类选自香菇、黑木耳、银耳及其混合物中的一种或多种。
本新型的芸香科植物发酵液微粒结构40，该保护外层401包含的小分子多糖分子微粒球403中，该藻类选自青丝藻、海木耳、海带及其混合物中的一种或多种。
本新型的芸香科植物发酵液微粒结构40，该保护外层401结构可以保有芸香科植物发酵液的减脂减重、抗老抗皱功效物质，并补充在发酵过程中功效物质失去的配糖体，提升人体利用率，并有效提升功效性，即便产量并未有所提升，将有效成分功用提生同样能达到相同功效，甚至优于天然物组成结构的功效性。
本实用新型的芸香科植物发酵液微粒的保护外层为现有已知材料，可以从市场获得。也可以按照上述已知方法制备而成，购买自第一果菜批发市场。
本新型的芸香科植物发酵液微粒结构40可制造为粉剂包、饮品、胶囊或锭剂的形式，以供使用者依需求选用。
实施例3：芸香科复合晶体40(即为芸香科植物发酵液微粒结构40) 的试验分组
以下实验分为3-4组:
(1)芸香科水萃取液-以芸香科(柳橙、柠檬、酸橘、金桔)进行热水萃取60分钟。
(2)芸香科发酵液-以芸香科(柳橙、柠檬、酸橘、金桔)加入乳酸菌 Lactococcusacidophillus自然发酵60天。
(3)芸香科复合晶体40(即为芸香科植物发酵液微粒结构40)-以芸香科植物10(柳橙、柠檬、酸橘、金桔)加入乳酸菌Lactococcus acidophillus 发酵30天，再加入酵母菌Saccharomycopsisfibufigera发酵30天，最后与菇类20或藻类20(香菇、黑木耳、青丝藻、海木耳)发酵液混合发酵30 天。
(4)必要的标准品或对照组
成分分析(类黄酮与氨基酸)如下表1
表1.芸香科水萃取液、芸香科发酵液和芸香科复合晶体40的成分比较表
经发酵制程后，芸香科植物的活性复合物类黄酮含量无太大变化，氨基酸则有增加趋势；在制程中成份含量变化无显着差异，主要是以结构改变为主要目标。
实施例4：芸香科复合晶体40(即为芸香科植物发酵液微粒结构40) 的UCP-1褐色脂肪组织蛋白试验
将以下实验分为6组样本:
(1)0.25％芸香科水萃取液
(2)0.125％芸香科水萃取液
(3)0.25％芸香科发酵液
(4)0.125％芸香科发酵液
(5)0.25％芸香科复合晶体
(6)0.125％芸香科复合晶体
以3T3-L1前脂肪细胞作为模型，分别与6组样本共培养后检验褐色脂肪组织特有蛋白UCP-1含量，转化为褐色脂肪细胞可增加脂肪的燃烧效果，提升基础代谢率。
3T3-L1前脂肪细胞分别与6组样本共培养后转化为褐色脂肪细胞(其 UCP-1含量增加)可增加脂肪的燃烧效果：结果(如图3所示)显示芸香科复合晶体40展现良好转化效果，与芸香萃取液、芸香发酵液相比，以0.25％芸香科复合晶体40使用8小时内转化率可达3倍。且芸香科复合晶体可持续转化长达8小时，芸香水萃取液及芸香发酵液则只能持续6小时，因此经发酵制程后可提升芸香科功效性，提高脂肪细胞褐化能力。
实施例5：芸香科复合晶体40(即为芸香科植物发酵液微粒结构40)抑制前脂肪细胞能力试验
将以下实验分为13组样本:
(1)控制组
(2)0.125％芸香科水萃取液
(3)0.25％芸香科水萃取液
(4)0.5％芸香科水萃取液
(5)1％芸香科水萃取液
(6)0.125％芸香科发酵液
(7)0.25％芸香科发酵液
(8)0.5％芸香科发酵液
(9)1％芸香科发酵液
(10)0.125％芸香科复合晶体40
(11)0.25％芸香科复合晶体40
(12)0.5％芸香科复合晶体40(即为芸香科植物发酵液微粒结构40)
(13)1％芸香科复合晶体40(即为芸香科植物发酵液微粒结构40)
以NIH-3T3纤维母细胞作为毒性试验细胞模型，确认样品对细胞不具毒杀性，再以3T3-L1前脂肪细胞作为模型，与样本共培养24或48小时，以MTTassays检验细胞存活率。抑制前脂肪细胞的分化，减少脂肪细胞的生成。
毒性试验细胞结果：结果(如图4和5所示)显示24小时与48小时培养后，芸香科水萃取液、芸香科发酵液及芸香科复合晶体40(即为芸香科植物发酵液微粒结构40)皆无出现毒杀性。对于纤维母细胞存活率皆超过 85％，无不良影响。
抑制前脂肪细胞能力结果：结果(如图6和7所示)显示24小时与48小时培养后，前脂肪细胞抑制效果以:芸香科复合晶体40(即为芸香科植物发酵液微粒结构40)>芸香科水萃取>芸香科发酵液。由图6得知，以一般发酵方式并无法提升柑橘当中的功效成分。芸香科复合晶体40(即为芸香科植物发酵液微粒结构40)表现出显着抑制前脂肪细胞能力，24小时与48小时的存活率为65％及50％，有效减少脂肪细胞的生成。
实施例6：芸香科复合晶体40(即为芸香科植物发酵液微粒结构40) 的抗氧化能力试验
将以下实验分为6组样本:
(1)0.25％芸香科水萃取液
(2)0.125％芸香科水萃取液
(3)0.25％芸香科发酵液
(4)0.125％芸香科发酵液
(5)0.25％芸香科复合晶体40
(6)0.125％芸香科复合晶体40
以常见自由基:DPPH、ABTS+及NBT为指标，进行体外试验，分别加入不同浓度的6组样本，检验样本是否具有清除自由基能力。
抗氧化能力结果：结果(如图8所示)显示清除DPPH自由基能力:芸香科复合晶体40>芸香科水萃取液>芸香科发酵液，其中该芸香科复合晶体达到63％清除效果；结果(如图9所示)清除ABTS+自由基能力:芸香科复合晶体40>芸香科水萃取液>芸香科发酵液，其中该芸香科复合晶体达到57％清除效果；结果(如图10所示)清除NBT自由基能力:芸香科复合晶体40> 芸香科水萃取液>芸香科发酵液，其中该芸香科复合晶体40达到90％清除效果。
实施例7：芸香科复合晶体40(即为芸香科植物发酵液微粒结构40) 的抑制酪氨酸酶活性试验
将以下实验分为8组样本:
(1)0.125％曲酸(Kojicacid)
(2)0.25％曲酸(Kojicacid)
(3)0.125％芸香科水萃取液
(4)0.25％芸香科水萃取液
(5)0.125％芸香科发酵液
(6)0.25％芸香科发酵液
(7)0.125％芸香科复合晶体
(8)0.25％芸香科复合晶体
酪氨酸经酪氨酸酶催化后产生多巴，为黑色素前驱物。检验8组样本是否可抑制酪氨酸酶活性，减少黑色素前驱物产生。
抑制酪氨酸酶活性结果：结果(如图11所示)显示各个样本皆呈现浓度依赖性；抑制酪氨酸酶活性试验:曲酸>芸香科复合晶体40>芸香科水萃取液> 芸香科发酵液；其中该芸香科复合晶体40达到76％抑制率，减少黑色素前驱物的产生。
实施例8：芸香科复合晶体40(即为芸香科植物发酵液微粒结构40) 的MMP-2蛋白表达量试验
将以下实验分为9组样本:
(1)控制组
(2)0.125％维他命(Vitamin)
(3)0.25％维他命(Vitamin)
(4)0.125％芸香科水萃取液
(5)0.25％芸香科水萃取液
(6)0.125％芸香科发酵液
(7)0.25％芸香科发酵液
(8)0.125％芸香科复合晶体40
(9)0.25％芸香科复合晶体40
MMPs为金属蛋白酶，存在于真皮层细胞基质中，主要作用微裂解胶原蛋白。ProMMPs为MMPs未活化状态，若Pro MMPs浓度增加，表示降低了MMPs的活化，达到胶原蛋白的维持。
MMP-2蛋白表达量结果：结果(如图12所示)显示各个样本皆呈现浓度依赖性；ProMMP-2蛋白浓度:芸香科复合晶体40>维他命C>芸香科水萃取液>芸香科发酵液，其中该芸香科复合晶体40提高Pro MMP-1浓度，避免MMP-2的活化造成胶原蛋白裂解。
实施例9：芸香科复合晶体40(即为芸香科植物发酵液微粒结构)的肥胖小鼠试验
将以下实验分为2组样本:
(1)控制组(不给予芸香科复合晶体)
(2)芸香科复合晶体40
以高油脂饲料喂食小鼠，诱导小鼠肥胖，同时给予芸香科复合晶体，监测小鼠体重变化率。
肥胖小鼠试验结果：结果(如图13所示)显示经高油脂饲料喂养的小鼠，体重成长率随着时间上升，第19天时体重增加率达到39％；有使用芸香科复合晶体的小鼠，能减少体重的变化率，降低体重增加率达到8。
Claims (5)
1.一种芸香科植物发酵液微粒结构，其特征是，由中心至外依次序包含：
一内层；以及
一保护外层，其中所述保护外层包覆所述内层；
其中所述内层包含芸香科植物发酵液；所述保护外层包含一小分子多糖分子微粒球。
2.如权利要求1所述的芸香科植物发酵液微粒结构，其特征是，所述芸香科植物发酵液微粒结构具有减脂减重或抗老抗皱功效。
3.如权利要求1所述的芸香科植物发酵液微粒结构，其特征是，所述内层的直径介于10-5～10-4mm之间。
4.如权利要求1所述的芸香科植物发酵液微粒结构，其特征是，所述保护外层的粒径介于10-4～10-3mm之间。
5.如权利要求1所述的芸香科植物发酵液微粒结构，其特征是，所述芸香科植物发酵液微粒结构包含粉剂包、饮品、胶囊或锭剂的形式，以供使用者依需求选用。
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