CN210487791U

CN210487791U - 一种量子点免疫层析试纸条

Info

Publication number: CN210487791U
Application number: CN201921411517.4U
Authority: CN
Inventors: 王振亚; 姚丛丛; 谢煜萍; 亓德胜
Original assignee: Jinan Deheng Medical Technology Co ltd
Current assignee: Jinan Deheng Medical Technology Co ltd
Priority date: 2019-08-28
Filing date: 2019-08-28
Publication date: 2020-05-08
Anticipated expiration: 2029-08-28

Abstract

本实用新型公开了一种量子点免疫层析试纸条，由底板、样品垫、结合垫、包被膜和吸水垫组成，所述样品垫、结合垫、包被膜和吸水垫按层析方向顺次搭接粘贴在底板上；所述结合垫上包含有量子点标记的鼠源抗人IgE抗体（Ab）；所述包被膜上设置有一条检测线和一条质控线，检测线包被有一株兔源抗人IgE多克隆抗体（Ab’），质控线包被有羊抗鼠IgG多克隆抗体。所述量子点免疫层析试纸条可以实现指尖血样本中总IgE抗体的快速定量检测，只需10ul指尖血样本即可测试，操作极为简单，无需专业人员，滴加样本即可；整个检测时间只需10‑15分钟，可实现临床即时检测，用荧光免疫分析仪判读结果，可实现准确定量检测，灵敏度可达到0.1IU/mL，线性范围20‑400 IU/mL。

Description

一种量子点免疫层析试纸条

技术领域

本实用新型涉及一种侧向层析法检测总IgE抗体的技术领域，具体是一种量子点免疫层析试纸条。

背景技术

目前，市场上常规的检测血清总IgE水平的方法主要是总IgE抗体检测试剂盒（酶联免疫法）和总IgE检测试剂盒（胶体金法）。用酶联免疫法检测总IgE含量，使用酶联免疫技术原理，操作步骤复杂，检测耗时长，其检测结果为半定量或定量，无法实现快速检测；胶体金法检测总IgE含量，采用侧向层析技术原理，使用胶体金作为标记物，只需滴加一次样本，操作简单，整个反应10分钟即完成，其检测结果仅能定性，无法实现精确检测。随着贸易全球化的发展，不同地域间动物、植物的相互流通以及深加工技术的广泛应用，使得过敏原的种类日益增多，因此开发一种灵敏度高，设备简单可快速检测检测过敏原总IgE抗体的试剂盒，成为我们当前要解决的问题。

实用新型内容

本实用新型的目的在于提供一种量子点免疫层析试纸条，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本实用新型提供如下技术方案：

一种量子点免疫层析试纸条，由底板、样品垫、结合垫、包被膜和吸水垫组成，所述样品垫、结合垫、包被膜和吸水垫按层析方向顺次搭接粘贴在底板上；所述结合垫上包含有量子点标记的鼠源抗人IgE抗体（Ab）；所述包被膜上设置有一条检测线和一条质控线，检测线包被有一株兔源抗人IgE多克隆抗体（Ab’），质控线包被有羊抗鼠IgG多克隆抗体。作为本实用新型进一步的方案：所述结合垫上量子点标记的鼠源抗人IgE抗体（Ab）的摩尔浓度为50～150nM。

作为本实用新型进一步的方案：所述量子点的发射波长为525～655nm。

作为本实用新型进一步的方案：所述检测线上包被的一株兔源抗人IgE多克隆抗体（Ab’）的浓度为0.8～1.8mg/mL，划膜量为1ul/cm；质控线上包被的羊抗鼠IgG多克隆抗体的浓度为0.5～1.5mg/mL，划膜量为1ul/cm。

作为本实用新型进一步的方案：所述检测线与质控线之间间隔距离为2mm，检测线在质控线的下方。

作为本实用新型进一步的方案：所述样品垫、结合垫为玻璃纤维材质，包被膜为硝酸纤维素膜材质，底板为PVC胶板材质，吸水垫为吸水纸材质。

与现有技术相比，本实用新型的有益效果是：采用量子点免疫层析法，将层析技术与量子点标记技术相结合，定量检测人血液样本中的总IgE抗体；将量子点与一株高特异性的鼠源抗人IgE抗体相偶联形成Ab-Qds，并将其预包被于玻璃纤维膜上；在硝酸纤维素膜上检测线处包被一株兔源抗人IgE多克隆抗体（Ab’）；NC膜上质控线处包被羊抗鼠IgG多克隆抗体。当样本中含有待检人IgE抗体时，人IgE与量子点标记的Ab结合形成抗体复合物人IgE-Ab-Qds，由于层析作用复合物沿试纸条向前移动，经过检测线区域时与预包被的Ab’进行反应，形成免疫夹心复合物Ab’-人IgE-Ab-Qds而显现荧光条带；未与Ab’结合的样本继续前移，通过质控线区域与羊抗鼠IgG结合形成复合物IgG-Ab-Qds并显现荧光条带。若样本中不含待检人IgE抗体，则仅质控线显现荧光条带。所述量子点免疫层析试纸条可以实现指尖血样本中总IgE抗体的快速定量检测，灵敏、特异、简单、快速、稳定且易于操作，结果直观、可靠，为临床工作者准确判读和分析实验结果提供可行性解决方案。只需10ul指尖血样本即可测试，操作极为简单，无需专业人员，滴加样本即可；整个检测时间只需10-15分钟，可实现临床即时检测，用荧光免疫分析仪判读结果，可实现准确定量检测，灵敏度可达到0.1IU/mL，线性范围20-400 IU/mL。

附图说明

图1为量子点免疫层析试纸条的结构示意图。

图2为量子点免疫层析试纸条配套的塑料外壳的结构示意图。

图中：1-样品垫、2-结合垫、3-包被膜、4-吸水垫、5-底板、6-检测线、7-质控线、8-加样孔、9-观察窗。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。

实施例1

请参阅图1-2，一种量子点免疫层析试纸条，由底板5、样品垫1、结合垫2、包被膜3和吸水垫4组成，所述样品垫1、结合垫2、包被膜3和吸水垫4按层析方向顺次搭接粘贴在底板5上；所述结合垫2上包含有量子点标记的鼠源抗人IgE抗体（Ab），包被膜3上设置有一条检测线6和一条质控线7，检测线6包被有一株兔源抗人IgE多克隆抗体（Ab’），质控线7包被有羊抗鼠IgG多克隆抗体。所述结合垫2上量子点标记的鼠源抗人IgE抗体（Ab）的摩尔浓度不加限定，优选的，本实施例中，所述结合垫2上量子点标记的鼠源抗人IgE抗体（Ab）的摩尔浓度为50～150nM。所述量子点的发射波长不加限定，优选的，本实施例中所述量子点的发射波长为525～655nm。所述检测线6上包被的一株兔源抗人IgE多克隆抗体（Ab’）的浓度不加限定，优选的，本实施例中，所述检测线6上包被的一株兔源抗人IgE多克隆抗体（Ab’）的浓度为0.8～1.8mg/mL，划膜量为1ul/cm；所述质控线7上包被的羊抗鼠IgG多克隆抗体的浓度不加限定，优选的，本实施例中，所述质控线7上包被的羊抗鼠IgG多克隆抗体的浓度为0.5～1.5mg/mL，划膜量为1ul/cm。所述检测线6与质控线7之间间隔距离为2mm，检测线6在质控线7的下方。所述量子点免疫层析试纸条的具体材质不加限定，优选的，本实施例中，所述样品垫1和结合垫2为玻璃纤维材质，包被膜3为硝酸纤维素膜材质，底板5为PVC胶板材质，吸水垫4为吸水纸材质。

本实施例的工作原理是：

所述的量子点免疫层析试纸条，在使用时，组装在配套的塑料外壳中，制作成检测卡。检测卡设有两个开孔，加样孔8和观察窗9，加样孔8对应于所述量子点免疫层析试纸条的样品垫1，观察窗9对应于所述量子点免疫层析试纸条的检测线6和质控线7。

检测样本时，先将检测卡置于干净平坦的台面上，然后垂直缓慢滴加100ul人血液样本于检测卡的加样孔8处，等待15分钟后，插入配套仪器进行判读，根据检测线6和质控线7的荧光情况判读结果。

实施例2

本实施例提供一种实施例1所述的量子点免疫层析试纸条的制备方法，包括以下步骤：采用EDC偶联法标记抗体，将量子点溶液（1uM）和EDC溶液（10mg/ml）按照按1:5比例混合；然后加入过量待标记抗体，调整反应pH为6.8，避光反应1h；将反应结束的液体进行超滤，在10000rpm下离心20min，吸出超滤后的标记抗体，用含20mM Tris、15%蔗糖、1%BSA，pH8.0的溶液复溶至原体积，即为制备好的量子点标记抗体。将复溶后的量子点标记抗体用专用设备按5μl/cm喷涂在玻璃纤维上，置于烘箱中37℃鼓风干燥1.5小时，制作结合垫2完成。将兔源抗人IgE多克隆抗体（Ab’）用20mM PBS（pH7.2~7.4）调节至浓度为1.0mg/mL，1ul/cm划线在NC膜的检测线6处；将羊抗鼠IgG抗体用20mM PBS（pH7.2~7.4）调节至浓度为1.0mg/mL，1ul/cm划线在NC膜的质控线7处；检测线6与质控线7之间间隔距离为2mm，检测线6在质控线7的下方；划线完毕后置于烘箱中37℃鼓风干燥1小时，制作包被膜3完成。将含有10mM Tris、1.5%PEG、0.5%NaCl、1%Brij35，pH8.5的处理液均匀涂布在玻璃纤维素上，置于空气湿度低于40%的条件下，室温自然晾干，制作样品垫1。在底板5(尺寸为60×300mm)上按顺序依次相互搭接地粘贴样品垫1(尺寸为18.5×300mm)、结合垫2(尺寸为6×300mm)、包被膜3(尺寸为25×300mm)和吸水垫4(尺寸为17.5×300mm)，进行大板组装，并用专用切条机切割成4mm宽度的试纸条。

上面对本专利的较佳实施方式作了详细说明，但是本专利并不限于上述实施方式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本专利宗旨的前提下做出各种变化。

Claims

1.一种量子点免疫层析试纸条，其特征在于，由底板(5)、样品垫(1)、结合垫(2)、包被膜(3)和吸水垫(4)组成，所述样品垫(1)、结合垫(2)、包被膜(3)和吸水垫(4)按层析方向顺次搭接粘贴在底板(5)上；所述结合垫(2)上包含有量子点标记的鼠源抗人IgE抗体；所述包被膜(3)上设置有一条检测线(6)和一条质控线(7)，检测线(6)包被有一株兔源抗人IgE多克隆抗体，质控线(7)包被有羊抗鼠IgG多克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的量子点免疫层析试纸条，其特征在于，所述结合垫(2)上量子点标记的鼠源抗人IgE抗体的摩尔浓度为50～150nM。

3.根据权利要求2所述的量子点免疫层析试纸条，其特征在于，所述量子点的发射波长为525～655nm。

4.根据权利要求2所述的量子点免疫层析试纸条，其特征在于，所述检测线(6)上包被的一株兔源抗人IgE多克隆抗体的浓度为0.8～1.8mg/mL，划膜量为1ul/cm；质控线(7)上包被的羊抗鼠IgG多克隆抗体的浓度为0.5～1.5mg/mL，划膜量为1ul/cm。

5.根据权利要求4所述的量子点免疫层析试纸条，其特征在于，所述检测线(6)与质控线(7)之间间隔距离为2mm，检测线(6)在质控线(7)的下方。

6.根据权利要求1所述的量子点免疫层析试纸条，其特征在于，所述样品垫(1)、结合垫(2)为玻璃纤维材质，包被膜(3)为硝酸纤维素膜材质，底板(5)为PVC胶板材质，吸水垫(4)为吸水纸材质。