CN207036860U - 一种用于检测猪流行性腹泻病毒的免疫生物传感器 - Google Patents

一种用于检测猪流行性腹泻病毒的免疫生物传感器 Download PDF

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CN207036860U CN201721007525.3U CN201721007525U CN207036860U CN 207036860 U CN207036860 U CN 207036860U CN 201721007525 U CN201721007525 U CN 201721007525U CN 207036860 U CN207036860 U CN 207036860U
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李智丽
赵云翔
黄淑坚
廖洁丹
黄兴国
覃丽梅
刘佑明
迟仕红
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SHENZHEN EVERSUN BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co.,Ltd.
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Foshan University
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Abstract

本实用新型提供了一种用于检测猪流行性腹泻病毒的免疫生物传感器，其包括位于电极基体表面自下而上依次层叠的石墨烯修饰层、普鲁士蓝沉淀层和猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层。本实用新型通过石墨烯修饰层、普鲁士蓝沉淀层和猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层与电极基体复合，形成免疫生物传感器，从而可适用于非实验室设置中快速测定猪流行性腹泻病毒，便于临床快速检测，如基层养殖场的现场检测。

Description

一种用于检测猪流行性腹泻病毒的免疫生物传感器
技术领域
本实用新型涉及生物传感器领域，特别是涉及一种用于检测猪流性腹泻病毒的免疫生物传感器。
背景技术
猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea，PED)是一种高度接触性肠道传染病，在临床上引起仔猪腹泻、呕吐、脱水和哺乳仔猪高致死率，是目前世界很多养猪国家仔猪早期死亡的重要疫病之一，给全世界的养猪业带来了巨大的经济损失。该病在临床症状上很难与猪传染性胃肠炎、轮状病毒病和大肠杆菌病等疫病鉴别，容易导致误诊而防治不当。目前，该病诊断方法主要有：病毒分离鉴定、免疫荧光法(IF)、免疫组织化学技术(IHT)、免疫电镜法(IEM)、血清中和试验、ELISA和RT-PCR方法等。目前应用较多的为ELISA法和PCR法，这两种方法以其实用性强、高效、快速、准确而被广泛应用。然而，虽然两种方法能够对猪流行腹泻病毒进行定性定量分析，但由于受到仪器设备的限制，耗时过长，同时检测设备不方便携带，在基层养殖场及现场检测仍存在不方便之处。如何令猪流行性腹泻病毒的现场检测具有可行性，是目前行业的一个难题。
实用新型内容
本实用新型要解决的技术问题是：针对上述现有技术的不足，提供一种用于检测猪流行性腹泻病毒的免疫生物传感器，其使得猪流行性腹泻的现场检测具有可行性。
本实用新型解决其技术问题的解决方案是：一种用于检测猪流行性腹泻病毒的免疫生物传感器，其包括位于电极基体表面自下而上依次层叠的石墨烯修饰层、普鲁士蓝沉淀层和猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层。
作为上述技术方案的进一步改进，所述猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层由浓度为50μg/mL的猪流行性腹泻病毒单克隆抗体溶液干燥而成。
作为上述技术方案的进一步改进，该免疫生物传感器还包括位于所述猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层表面上的牛血清蛋白封闭层。进一步地，所述牛血清蛋白封闭层由浓度为1～2％的牛血清蛋白溶液干燥而成。
作为上述技术方案的进一步改进，所述电极基体为玻碳电极。
本实用新型的有益效果是：本实用新型通过石墨烯修饰层、普鲁士蓝沉淀层和猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层与电极基体复合，形成免疫生物传感器，从而可适用于非实验室设置中快速测定猪流行性腹泻病毒，便于临床快速检测，如基层养殖场的现场检测。
附图说明
为了更清楚地说明本实用新型实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单说明。显然，所描述的附图只是本实用新型的一部分实施例，而不是全部实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他设计方案和附图。
图1是本实用新型的层结构示意图。
具体实施方式
以下将结合实施例和附图对本实用新型的构思、具体结构及产生的技术效果进行清楚、完整的描述，以充分地理解本实用新型的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本实用新型的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本实用新型的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本实用新型保护的范围。另外，文中所提到的所有联接/连接关系，并非单指构件直接相接，而是指可根据具体实施情况，通过添加或减少联接辅件，来组成更优的联接结构。本发明创造中的各个技术特征，在不互相矛盾冲突的前提下可以交互组合。
参照图1，一种用于检测猪流行性腹泻病毒的免疫生物传感器，其包括位于电极基体1表面自下而上依次层叠的石墨烯修饰层2、普鲁士蓝沉淀层3和猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层4。
进一步作为优选的实施方式，所述猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层4由浓度为50μg/mL的猪流行性腹泻病毒单克隆抗体病毒溶液干燥而成。具体地，该浓度条件下的猪流行腹泻病毒单克隆抗体溶液具有良好的稳定性，其可使形成的猪流行腹泻病毒单克隆抗体层4具有优异的表面理化性能。
进一步作为优选的实施方式，该免疫生物传感器还包括位于所述猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层4表面上的牛血清蛋白封闭层5，该牛血清蛋白封闭层5可起到信号放大的作用，使得该免疫生物传感器具有良好的灵敏性和准确度。进一步地，所述牛血清蛋白封闭层5由浓度为1～2％的牛血清蛋白溶液干燥而成。具体地，该浓度条件下的牛血清蛋白溶液具有良好的稳定性，其可使形成的牛血清蛋白封闭层5具有优异的表面理化性能。
进一步作为优选的实施方式，所述电极基体1为玻碳电极。
本实用新型适用于猪流行性腹泻病毒的现场检测。在实际操作过程中，先将本实用新型的免疫生物传感器浸入100μL猪流行性腹泻病毒(15μg/mL)中30min，取出用重蒸馏水淋洗，然后浸入50μg/mL猪流行性腹泻病毒多克隆抗体(50μg/mL)中30min，取出用重蒸馏水淋洗，以此经处理的免疫生物传感器作为工作电极，将工作电极浸泡到50～200μL待测样品中免疫反应30min～120min，捕获病毒后取出该免疫生物传感器用PBS缓冲液洗净，以Ag/AgCl电极为参比电极，铂电极作为对电极，用循环伏安法检测样品中的猪流行性腹泻病毒，以完成猪流行性腹泻病毒的现场检测。
以上对本实用新型的较佳实施方式进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本实用新型精神的前提下还可作出种种的等同变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。

Claims (5)

1.一种用于检测猪流行性腹泻病毒的免疫生物传感器，其特征在于：包括位于电极基体(1)表面自下而上依次层叠的石墨烯修饰层(2)、普鲁士蓝沉淀层(3)和猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层(4)。
2.根据权利要求1所述的一种用于检测猪流行性腹泻病毒的免疫生物传感器，其特征在于：所述猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层(4)由浓度为50μg/mL的猪流行性腹泻病毒单克隆抗体溶液干燥而成。
3.根据权利要求1所述的一种用于检测猪流行性腹泻病毒的免疫生物传感器，其特征在于：还包括位于所述猪流行性腹泻病毒单克隆抗体层(4)表面上的牛血清蛋白封闭层(5)。
4.根据权利要求3所述的一种用于检测猪流行性腹泻病毒的免疫生物传感器，其特征在于：所述牛血清蛋白封闭层(5)由浓度为1～2％的牛血清蛋白溶液干燥而成。
5.根据权利要求1所述的一种用于检测猪流行性腹泻病毒的免疫生物传感器，其特征在于：所述电极基体(1)为玻碳电极。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN107271677A (zh) * 2017-08-11 2017-10-20 佛山科学技术学院 一种用于检测猪流行性腹泻病毒的免疫生物传感器

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