CN201892679U - 甲型h1n1流感免疫荧光检测试剂盒 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种甲型H1N1流感免疫荧光检测试剂盒，属于荧光测试物的使用。本实用新型在盒体一侧长边内形成有插孔的试剂架上，分别容纳抗甲型H1N1流感抗体试剂瓶，甲型H1N1流感生物素化二抗试剂瓶，异硫氰酸荧光素的链霉亲和素试剂瓶，正常兔血清封闭液试剂瓶和封片剂瓶，试剂架一端还形成有容纳盖玻片的盖玻片槽，盒体内的纵向分隔板一侧收容缓冲液瓶，而分隔板另一侧形成存储载玻片的空间，所述载玻片面上按一定间距形成有反应凹槽。应用链霉亲和素-生物素偶联FITC法检测甲型H1N1型流感病毒。本实用新型将所用检测时使用的试剂、盖玻片等均集中在一起，便于检测，操作简单，节省人力和时间，提高了工作效率。

Description

甲型H1N1流感免疫荧光检测试剂盒

技术领域

本实用新型涉及荧光测试物的使用，具体是一种甲型H1N1流感免疫荧光检测试剂盒。

背景技术

甲型H1N1流感为急性呼吸道传染病，其病原体是一种新型的甲型H1N1流感病毒，在人群中传播。甲型H1N1流感病毒属于正粘病毒科(Orthomyxoviridae)，甲型流感病毒属(Influenza virus A)。典型病毒颗粒呈球状，直径为80nm-120nm，有囊膜。囊膜上有许多放射状排列的突起糖蛋白，分别是红细胞血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA)和基质蛋白M2。病毒颗粒内为核衣壳，呈螺旋状对称，直径为10nm。为单股负链RNA病毒，基因组约为13.6kb，由大小不等的8个独立片段组成。与以往或目前的季节性流感病毒不同，该病毒毒株包含有猪流感、禽流感和人流感三种流感病毒的基因片段。人群对甲型H1N1流感病毒普遍易感，并可以人传染人，人感染甲流后的早期症状与普通流感相似，包括发热、咳嗽、喉痛、身体疼痛、头痛、发冷和疲劳等，有些还会出现腹泻或呕吐、肌肉痛或疲倦、眼睛发红等。卫生颁布的《甲型H1N1流感诊疗方案(2010年版)》的诊断标准是以病毒核酸检测：以RT-PCR法检测呼吸道标本(咽拭子、鼻拭子、鼻咽或气管抽取物、痰)中的甲型H1N1流感病毒核酸，结果可呈阳性。但此方法实验条件高、成本高，间接免疫荧光法需培养病毒感染细胞，实验室尚未达到培养条件。

发明内容

本实用新型就是为了解决检测甲型H1N1型流感病毒方法简便、快速，而提供一种甲型H1N1流感免疫荧光检测试剂盒。

所用的检测方法是应用链霉亲和素-生物素偶联FITC法检测甲型H1N1型流感病毒。

本实用新型是按以下技术方案实现的。

一种甲型H1N1流感免疫荧光检测试剂盒，它包括盒体与盒盖，而在盒体一侧长边内形成有插孔的试剂架上，分别容纳抗甲型H1N1流感抗体试剂瓶，甲型H1N1流感生物素化二抗试剂瓶，异硫氰酸荧光素的链霉亲和素试剂瓶，正常兔血清封闭液试剂瓶和封片剂瓶，试剂架一端还形成有容纳盖玻片的盖玻片槽，盒体内的纵向分隔板一侧形成收容缓冲液瓶的空间，而分隔板另一侧形成存储载玻片的空间，所述载玻片面 上按一定间距形成有反应凹槽。

这样设计的本实用新型具有的优点是：所用检测时使用的试剂、盖玻片等均集中在一起，便于检测，操作简单，节省人力和时间，检测时间约为2小时，提供了工作效率。

附图说明

图1本实用新型立体结构示意图；

图2本实用新型中载玻片结构示意图

图中：1.盒体              2.盒盖

3.插孔              4.试剂架

5.一抗试剂瓶        6.二抗试剂瓶

7.链霉亲和素试剂瓶  8.封闭液试剂瓶

9.封片剂瓶          10.盖玻片

11.盖玻片槽         12.分隔板

13.缓冲液瓶         14.载玻片

15a.15b.凹槽

具体实施方式

下面结合附图及实施例对本实用新型进行详细的说明。

一种甲型H1N1流感免疫荧光检测试剂盒，包括盒体1与盒盖2，而在盒体1一侧长边内形成有插孔3的试剂架4上，分别容纳抗甲型H1N1流感抗体(一抗)试剂瓶5，甲型H1N1流感生物素化二抗试剂瓶6，异硫氰酸荧光素的链霉亲和素试剂瓶7，正常兔血清封闭液试剂瓶8和封片剂瓶9试剂架4一端还形成有容纳盖玻片10的盖玻片槽11，盒体1内的纵向分隔板12一侧形成收容缓冲液瓶13的空间，而分隔板12另一侧形成存储载玻片14的空间，所述载玻片14面上按一定间距形成有反应凹槽15a、15b。

所述的甲型H1N1流感检测试剂盒，其按一定间距形成的凹槽15a、15b，分别是2个方形凹槽15a和1个圆形凹槽15b，方形凹槽15a的规格是3×3×1mm，其圆形凹槽的规格为ф3×1mm。并对应标示有阳性细胞、阴性细胞和待检细胞的文字标记。

所述的甲型H1N1流感检测试剂盒，其盒体1、盒盖2的材料为纸质或硬质塑料。

为了减振保护瓶体，盒体1底部内衬瓦楞纸或泡沫塑料(未图示)。

按照上述结构设计的本实用新型，试剂瓶5内分别预装1000μl 抗甲型H1N1型流感抗体一抗1gM，试剂瓶6内预装1000μl甲型H1N1流感生物素化二抗IgM，试剂瓶7内预装1000μl标记异硫氰酸荧光素的链霉亲和素(SABC-FITC)，试剂瓶8内预装1000μl正常兔血清封闭液，试剂瓶9内预装封片剂；

缓冲液瓶13内预装50ml含0.5％(V/V)TritonX-100，0.01mol/LPBS缓冲液。

应用本实用新型进行甲型H1N1流感免疫荧光检测步骤如下，

1.生物玻片的制作：应用咽拭子擦拭疑似甲型H1N1型流感患者咽部上皮细胞，应用生理盐水洗涤，留取上皮细胞，然后放入10ml pH 7.4磷酸盐缓冲液(PBS)中，挤出海绵吸附的细胞，悬液800g离心5min，弃去上清液，再洗一次，继续用10ml PBS-T缓冲液0.5％(V/V)TritonX-100PBS混悬，静置10min，800g离心5min，用PBS调整细胞数至100个/μl。点片到含有多聚赖氨酸载玻片10上，56℃烘干杀死病毒并固定，密封，-70℃低温保存。

2.免疫荧光检测法：生物玻片放置室温后，滴加0.01mol/L PBS1∶10稀释的正常兔血清封闭液，室温20min。甩去多余的液体不洗。滴加0.01mol/L PBS适当稀释的抗甲型H1N1型流感抗体(IgM，一抗)，20～37℃1～2h或4℃过夜，0.01mol/L PBS洗2min 3次；滴加0.01mol/LPBS1∶100稀释的甲型H1N1流感生物素化二抗(IgM)，20～37℃1～2h，0.01mol/L PBS洗2min 3次；滴加0.01mol/L PBS1∶100稀释的SABC-FITC，2～037℃1～2h，0.01mol/L PBS洗2min 4次；磷酸甘油封片剂封片，荧光显微镜10x40倍视野下观察；FITC在490～495nm激发，在520～530nm发射荧光，呈黄绿色。当阳性对照为阳性，阴性对照为阴性时，待测细胞通过与阳性对照和阴性对照比较即可判断患者是否感染甲型H1N1型流感病毒。

Claims (3)

1.一种甲型H1N1流感免疫荧光检测试剂盒，它包括盒体(1)与盒盖(2)，其特征在于：盒体(1)一侧长边内形成有插孔(3)的试剂架(4)上，分别容纳抗甲型H1N1流感抗体试剂瓶(5)，甲型H1N1流感生物素化二抗瓶试剂(6)，异硫氰酸荧光素的链霉亲和素试剂瓶(7)，正常兔血清封闭液试剂瓶(8)和封片剂瓶(9)试剂架(4)一端还形成有容纳盖玻片(10)的盖玻片槽(11)，盒体(1)内的纵向分隔板(12)一侧形成收容缓冲液瓶(13)的空间，而分隔板(12)另一侧形成存储载玻片(14)的空间，所述载玻片(14)面上按一定间距形成有反应凹槽(15a)、(15b)。

2.根据权利要求1所述的甲型H1N1流感检测试剂盒，其特征在于：按一定间距形成的凹槽(15a)、(15b)分别是2个方形凹槽(15a)和1个圆形凹槽(15b)，并对应标示有阳性细胞、阴性细胞和待检细胞的文字标记。

3.根据权利要求1所述的甲型H1N1流感检测试剂盒，其特征在于：所述的盒体(1)、盒盖(2)的材料为纸质或硬质塑料。 

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