CN201400687Y

CN201400687Y - 病毒培养瓶

Info

Publication number: CN201400687Y
Application number: CN200920053528XU
Authority: CN
Inventors: 陈敬贤; 杨子峰; 秦笙; 周荣; 莫自耀; 钟南山
Original assignee: Guangzhou Institute Of Respiratory Disease; STATE KEY LABORATORY OF RESPIRATORY DISEASE; FIRST AFFILIATED HOSPITAL OF GUANGZHOU MEDICAL SCHOOL
Current assignee: Guangzhou Institute Of Respiratory Disease; STATE KEY LABORATORY OF RESPIRATORY DISEASE; FIRST AFFILIATED HOSPITAL OF GUANGZHOU MEDICAL SCHOOL; First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University
Priority date: 2009-03-27
Filing date: 2009-03-27
Publication date: 2010-02-10
Anticipated expiration: 2019-03-27

Abstract

本实用新型涉及一种病毒培养器皿，尤其涉及一种可以直接进行离心操作的病毒培养瓶。包括中空的瓶身、与瓶身活动连接的瓶盖和设置在瓶身中的细胞培养片，所述瓶身的底部为平底，所述细胞培养片可在瓶身中活动，所述瓶盖密封瓶身。使用时，动物细胞接种在瓶中的细胞培养片上，本实用新型的病毒培养瓶可以进行离心操作，促进病毒进入动物细胞，缩短了培养时间。该培养瓶还可以直接放置在显微镜下观察。本实用新型的病毒培养瓶可回收利用，节约成本，每个培养瓶单独使用，避免交叉污染。

Description

病毒培养瓶

技术领域

本实用新型涉及一种病毒培养器皿，尤其涉及一种可以直接进行离心操作和免疫鉴定的病毒培养瓶。

背景技术

病毒性传染病是当今人类感染性疾病中的主要疾病。新近资料显示，近30年新发现的传染病中，已明确病原体的约有60％是由病毒引起的，而呼吸道疾病中约有50％由病毒引起，其中的典例就是SARS冠状病毒和高致病性禽流感病毒。传染病的明确诊断依赖于病原学检查，当前该领域的重点之一是建立快速而敏感的病原学诊断方法。病毒分离培养是唯一能够获得活病毒的方法，这不仅对临床疾病的确定诊断有极为重要的价值，而且对开展病毒学的后续研究如病毒的遗传与变异的研究、致病机理的探索、药物敏感性的检测、相应疫苗的研发等等都是不可缺少的前提条件。在国外，病毒培养也一直是新研发的免疫学方法和分子病毒学方法赖以比较与评价的基础。而病毒的培养又要以哺乳动物细胞的培养为基础。

目前常用的细胞培养器包括：细胞培养皿(方瓶、平皿)，多孔细胞培

养板和细胞培养管。培养皿呈长方形、梯形或圆形，现有玻璃和塑料两种质地，瓶体透明，瓶壁厚薄均匀、平整，培养时平放，可供细胞贴壁生长。此为病毒培养传统的方法，以在显微镜下观察CPE(细胞病变)为主。因为不同的病毒有各自的敏感细胞，所以培养不同的病毒需要不同的细胞和不同的培养基，细胞品种以及数量都十分巨大。加上细胞容易老化，需要不断更新，造成前期准备工作繁多。CPE出现所需的时间较长(4-7天)，判断CPE的主观性很强，不能符合临床诊断需要快速、重复性高的要求。而且CPE的出现仅提示病毒的存在，还需要从培养器皿中取出少量被病毒感染的细胞作进一步分析(如免疫荧光、PCR)，操作繁杂。多孔细胞培养板为病毒培养的改进方法，也是以在显微镜下观察CPE(细胞病变)为主。培养板可放离心机内离心，使CPE出现时间提早2-4天。每一块板可培养96孔细胞，可以一次接种多个标本，减少了细胞培养的工作量。其缺点是：1.由于样品接种量少(通常是100微升)，造成检测敏感性有所下降；2。在操作过程中比较容易发生交叉污染；3。如果一次没有足够的标本，会造成细胞和材料的浪费。另外，国内暂时没有同类产品，现有的都是进口的，而且都是一次性使用，故成本很高。细胞培养管则有效地减少了细胞和培养基的用量，并克服了96孔培养板容易污染和浪费的缺点。但是其结果判断还是依靠CPE，客观性差，故发现CPE后，还是需要取出少量细胞作进一步分析。

因此，提供一种操作简单、不容易污染、缩短培养时间、提高检测的敏感性、降低成本的细胞培养(病毒培养)器具尤为迫切，这对于病毒性疾病的诊断、预防、研究都具有重大实际意义。

发明内容

本实用新型提供一种操作简单、不容易污染、减少培养时间、又能增加检测敏感性的病毒培养瓶。

本实用新型的病毒培养瓶包括中空的瓶身、与瓶身活动连接的瓶盖和设置在瓶身中的细胞培养片。所述瓶身的底部为平底，所述细胞培养片可在瓶身中活动，所述瓶盖密封瓶身，即所述瓶身与瓶盖共同围成一个密闭空间。其中，所述细胞培养片为聚苯乙烯培养片或玻璃培养片，其形状为圆形或多边形。在本实用新型的一个实施例中，所述瓶身为圆柱形。优选地，所细胞培养片为圆形，由优质透明玻璃制成，所述瓶身由优质透明玻璃制成。

所述瓶盖包括握持部和与握持部相连接的插入部，所述插入部包括插入本体和密封翼，所述密封翼环绕插入本体并与插入本体密封连接。

其中，所述握持部为中空结构。所述插入本体中设置有一个盲孔，其开口端与握持部的中空部位相连通。所述密封翼设置有一片、两片或多片。

优选地，所述瓶盖的握持部设置有防滑纹。

在本实用新型的一个优选实施例中，所述瓶盖的插入部本体为圆柱体，所述盲孔设置在圆柱体的中央，所述瓶盖的握持部和插入部一体成型，所述瓶盖由软塑料制成。

本实用新型的病毒培养瓶，其瓶身高约在4.0-4.8cm，外径为约1.5-1.6cm，内径为约1.3cm，优选地，由优质透明玻璃制成，材料对细胞无毒性，并能抗一定强度的震动，不容易破碎，利于运输；细胞培养片为圆形或多边形，其可平放在瓶身内，可贴在瓶底，细胞培养片可为光学透明的聚苯乙烯培养片或玻璃培养片，其厚度约在0.1-0.16mm，优选地由透明优质玻璃制成，没有自发荧光，抗一定强度的震动，不容易破碎，利于运输，若细胞培养片用光学透明的聚苯乙烯制成，需经等离子微波技术(专利技术U.S.PatentNo.6,617,152)处理，使其表面结合更多的氧离子(O^2-，-OH)，从而使其在加入培养基后，表面携带更多的负电荷和具有更好的亲水性((Hudis，1974；Amstein and Hartman，1975；Ramsey et.al.，1984)，可为细胞生长提供非常好的表面；瓶盖高约1.5-20.cm，瓶盖最大外直径与瓶身的内径相等或略大，中空，由透明软塑料制成，可透光，对细胞无毒性，密封性好，盖上瓶盖后，瓶身内的液体绝对不会漏出。

本实用新型的病毒培养瓶，设计为平底的瓶子，在瓶中加设有细胞培养片，所述细胞培养片表面光滑平整，本实用新型的培养瓶培养病毒时，动物细胞接种在瓶中的细胞培养片表面，用盖子盖紧，在适合的条件下进行培养，为了促进病毒进入细胞，缩短培养时间，可直接把本实用新型的病毒培养瓶进行离心操作。经过培养以后，可以直接把培养瓶放显微镜下观察细胞病变。

本实用新型的病毒培养瓶，设计为平底，又添加有平贴在平底的细胞培养片，该结构的培养瓶可直接进行离心操作，促进病毒进入细胞，减少培养时间，每个瓶中可接种0.5ml样品，保证了检测的敏感性；每个培养瓶独立使用，可以避免交叉污染；本实用新型的培养瓶其瓶盖设计为带有密封翼的插入式，相对现有的螺旋包裹式盖子的细胞管，新型的培养瓶既可以很容易地密封瓶身，又可以省力地操作，减少了对细胞的损伤和其他意外的发生。利用本实用新型的病毒培养瓶进行病毒培养，可以将病毒培养与免疫学鉴定结合在一起进行，简化了操作步骤，进一步缩短检验时间。本产品可回收利用，减低污染，降低了成本。

下面将结合附图，详细介绍本实用新型的病毒培养瓶。

附图说明

图1为本实用新型一个实施例中，病毒培养瓶的结构示意图；

图2为本实用新型病毒培养瓶的瓶身的正面视图；

图3为图2所示瓶身的立体图；

图4为本实用新型病毒培养瓶的细胞培养片的结构示意图；

图5为本实用新型的一个实施例中，病毒培养瓶瓶盖的正面视图；

图6为图5所示瓶盖的立体图；

图7为图5所示意瓶盖的俯视图。

具体实施方式

如图1所示，为本实用新型的一个实施例中，所述病毒培养瓶的正面视图。本实用用新型的病毒培养瓶包括中空的瓶身010、与瓶身活动连接的瓶盖030和设置在瓶身中的细胞培养片020。如图2和图3所示，所述瓶身010的底部为平底011，与底部011相对的另一端为瓶身010的开口013，所述细胞培养片020可在瓶身中活动，所述瓶盖密封瓶身。在本优选实施例中，所述瓶身010为圆柱形，瓶身内也为圆柱形腔体；在其他实施例中，所述瓶身可为棱柱体，其内空腔可为圆柱体或棱柱体。

如图4所示，在本优选实施例中，所述瓶身中的细胞培养片020为薄的玻璃质圆片，表面光滑平整，细胞可贴在所述细胞培养片020表面生长。在本实用新型的其他实施例中，所述细胞培养片020可设置为除了圆形以外的多边形其材质还可以用聚苯乙烯。

图5、图6和图7所示，所示为本实用新型的一个优选实施例中，瓶盖030的结构示意图。所述瓶盖030包括握持部031和插入部035，所述插入部035包括插入部本体033和环绕所述插入部本体033的密封翼034。所述握持部031为圆柱形，其内部为中空结构035。所述插入部本体033为圆柱形结构，其内部有一个盲孔036，所述盲孔036的开口端与握持部031相连通，即握持部031的中空部位与插入部本体中的盲孔相通，光线通过握持部031的中间可直接到达插入部本体033中盲孔的底部，所述盲孔底部为平底结构。所述瓶盖030由透明软塑料制成，可一体成型，该种设计的瓶盖，不用打开瓶盖，就可以直接看到培养瓶瓶底。为了进一步完善本实用新型的培养瓶，在所述瓶盖的握持部外表面还设置有防滑纹032。在本实用新型的其他实施例中，所述握持部031和插入部035可独立地设置为棱柱形或圆柱形，其内部的空腔也可独立地设置为圆柱形或棱柱形状。在本优选实施例中，所述密封翼设置有2片。在其他实施例中，所述密封翼可设置为一片，或多片。

以上所述仅为本实用新型的较佳实施例而已，并不用以限制本实用新型，凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。

Claims

1、一种病毒培养瓶，其特征在于，包括中空的瓶身、与瓶身活动连接的瓶盖和设置在瓶身中的细胞培养片，所述瓶身的底部为平底，所述细胞培养片可在瓶身中活动，所述瓶盖密封瓶身。

2、如权利要求1所述的培养瓶，其特征在于，所述瓶身为圆柱形或棱柱形。

3、如权利要求2所述的培养瓶，其特征在于，所述细胞培养片为光学透明的聚苯乙烯培养片或玻璃培养片，所述培养片的形状为圆形或多边形。

4、如权利要求2所述的培养瓶，其特征在于，所述细胞培养片为圆形，所述瓶身由透明玻璃制成。

5、如权利要求1或4所述的培养瓶，其特征在于，所述瓶盖包括握持部和与握持部相连接的插入部，所述插入部包括插入本体和密封翼，所述密封翼环绕插入本体并与插入本体密封连接。

6、如权利要求5所述的培养瓶，其特征在于，所述握持部为中空结构。

7、如权利要求6所述的培养瓶，其特征在于，所述插入本体中设置有一个盲孔，其开口端与握持部的中空部位相连通。

8、如权利要求7所述的培养瓶，其特征在于，所述密封翼设置有一片、两片或多片。

9、如权利要求8所述的培养瓶，其特征在于，所述瓶盖的握持部设置有防滑纹。

10、如权利要求9所述的培养瓶，其特征在于，所述瓶盖的插入部本体为圆柱体，所述盲孔设置在圆柱体的中央，所述瓶盖的握持部和插入部一体成型，所述瓶盖由透明软塑料制成。