CN1985877A - 一种黄芪提取物及其医药用途 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种黄芪提取物及其医药用途，该提取物能够提高机体免疫力、预防或治疗呼吸道感染、调节血液粘稠度、降低血脂、预防或治疗过敏性鼻炎、预防或治疗肝糖原减少或抗肿瘤药物对肝脏造成损害以及预防或治疗病毒性肝炎。
Description
【技术领域】
本发明涉及医药技术领域，具体来说是涉及一种黄芪提取物及其医药用途。
【背景技术】
黄芪，又名黄耆、绵黄芪等，是豆科多年生草本植物黄芪Astragalusmembranacens(Fisch)Bge.和内蒙黄芪A.mongholicus Bge.的根，是一种常用中药，味甘、性温，具有补气升阳、固表止汗、托毒排脓和生肌等功效。中医上用来治疗气血虚弱、自汗、久泻脱肛、子宫脱垂、糖尿病、慢性溃疡等症。
近年来对黄芪成分的研究较多，已从中分离鉴定出皂苷、黄酮、氨基酸、胡萝卜素等多种化合物，其中某些成分如黄芪甲苷已被证明为黄芪皂苷的主要成分，其含量被作为评价黄芪质量的标准(《中国药典》2000版一部.249)。
但是，与许多传统中药一样，黄芪的功效是多种成分共同作用的结果，并不能和某种单一的成分对应起来。所以，对黄芪的有效部位和适应症，仍需进一步的研究。
【发明内容】
[要解决的技术问题]
本发明的一个目的是提供一种黄芪提取物，本发明的另一目的是提供该提取物的医药用途。
[技术方案]
本发明提供了一种黄芪提取物，它是通过下述步骤得到的：
(1)取1重量份的黄芪，按照1-3ml/g的比例，加入体积含量为70-95％的乙醇、甲醇或者二者任意比例混合的溶剂，在常压下加热回流提取1-3h，然后过滤，重复提取1-3次，合并滤液，药渣保留；
(2)步骤(1)所得滤液浓缩至无醇味后，按照浓缩液体积，加入1-4倍的蒸馏水稀释，再以1-4倍的醋酸乙酯提取2-4次，弃去醋酸乙酯提取液，剩余溶液为提取液1；
(3)步骤(1)所得药渣晾干后，按照1-3ml/g的比例，加入蒸馏水，在常压下加热回流提取1-3h，然后过滤，重复提取1-3次，将滤液合并得到提取液2；
(4)合并提取液1和2，在温度60℃下浓缩至相对浓度为1.05-1.40；或者将提取液1和2分别在温度60℃下浓缩至相对浓度为1.05-1.40后合并。
在上述步骤(1)中，药材与提取溶剂的优选比例为2ml溶剂/1g黄芪；优选的溶剂为85-95％的乙醇，最优选的溶剂为95％的乙醇。
在步骤(2)中，醋酸乙酯的优选用量为浓缩液体积的3-4倍；
在步骤(3)中，药渣与提取溶剂的优选比例为2ml溶剂/1g药渣。
在步骤(4)中，浓缩液优选的相对浓度为1.20-1.30。
在本发明中涉及的提取设备为现有技术中的常用设备，可以根据提取规模的大小以及具体试验条件选择，如工业生产中的提取罐，实验室中的烧瓶等。
对本发明的黄芪提取物进行多项鉴别试验，证明其中主要含有黄芪多糖和黄芪皂苷，并且不含黄酮类化合物。如在多糖的鉴别反应碘-碘化钾反应和班氏反应中，在皂苷的鉴别反应Liebermann反应、浓硫酸反应和Molish反应中均呈阳性，而在典型的黄酮类鉴别反应AlCl3反应和荧光反应中均呈阴性。
本发明的黄芪提取物既不是黄芪的总提取物，也不是黄芪的单一活性部位，而是将黄芪中的活性成分再次组合，相关药理实验也证明了组合后的黄芪提取物具有良好的功效。
本发明还提供了上述黄芪提取物的医药用途，具体来说，提供了：
所述黄芪提取物在制备提高免疫力的药物中的应用；
所述黄芪提取物在制备预防或治疗呼吸道感染的药物中的应用；
所述黄芪提取物在制备调节血液粘稠度和降低血脂的药物中的应用；
所述黄芪提取物在制备预防或治疗过敏性鼻炎的药物中的应用。
所述黄芪提取物在制备预防或治疗肝糖原减少或抗肿瘤药物对肝脏造成损害的药物中的应用。
所述黄芪提取物在制备预防或治疗病毒性肝炎药物中的应用。
本发明的黄芪提取物在使用时，可以将其浓缩液灭菌后按照常规制剂方法制备成口服液，也可以将其干燥后与药学上常用的辅料制备成颗粒剂、胶囊剂、片剂、冲剂等。
所述辅料包含稀释剂如乳糖、木糖醇、甘露醇、甲壳胺等，根据选择剂型的不同，可以按照现有的常规制剂方法(《药物制剂方法》，张劲主编，化学工业出版社，2005年8月出版)选择不同的辅料。
可以选择的崩解剂如羧甲基淀粉钠CMS-Na、微晶纤维素等；
粘合剂如聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、低取代羟丙基纤维素(L-HPC)、聚乙二醇(PEG)等；
稳定剂山梨酸、对羟基苯甲酸酯、乙醇、枸橼酸等如；
包合剂如α-环糊精(α-CD)、β-环糊精(β-CD)和N-LOK变性淀粉等；
包衣剂如羟丙基甲基纤维素(HPMC)、聚乙二醇(PEG)、丙烯酸树脂等；
矫味剂如蜂蜜、蔗糖等。
在上述各种剂型药物的每日剂量中，黄芪提取物的含量比例因剂型的不同又很大差别，以其中的黄芪多糖作为其有效成分含量标准，要保证成人每日服药量中含有黄芪多糖60-120mg。
在本发明黄芪提取物的药理试验中，所有受试人员无任何不良反应，小鼠对本发明黄芪提取物的耐受剂量为相当于人体日用药量的150倍。
[有益效果]
与黄芪中单一组分或者黄芪总提取物相比，本发明的黄芪提取物对各种病症更有针对性，充分发挥了提取物中各组分的作用，并且安全无毒，疗效明显。该提取物制备简单，易于实现工业生产。
【附图说明】
图1为本发明黄芪提取物对小鼠迟发型变态反应的影响
图2为本发明黄芪提取物对小鼠脾脏抗体生成细胞数的影响
图3为本发明黄芪提取物对小鼠脾脏半数溶血值(HC50)的影响
【具体实施方式】
通过下面给出的本发明具体实施例可以进一步清楚地理解本发明，但这些实施例不是对本发明保护范围的限制。
实施例1 本发明药物的制备
(1)取100g黄芪，加入200ml 95％的乙醇，在常压下回流提取3h，过滤，重复提取2次，合并滤液，保留药渣；
(2)浓缩滤液至无醇味，得浓缩液150ml，加入450ml蒸馏水稀释，再以450ml醋酸乙酯提取3次，弃去醋酸乙酯提取液，剩余溶液为提取液1；
(3)将步骤(1)所得药渣常温晾干，加入300ml蒸馏水，在常压下回流提取3h，过滤，重复提取2次，合并滤液，得提取液2；
(4)合并提取液1和2，在温度60℃下浓缩至相对浓度为1.30。
即得本发明的黄芪提取物，为棕褐色粘稠膏状。
实施例2 本发明药物的制备
(1)取1000g黄芪，加入1000ml 70％乙醇和50ml甲醇，在在常压下下回流提取1h，过滤，重复提取3次，合并滤液，保留药渣；
(2)浓缩滤液至无醇味，得浓缩液1350ml，加2700ml蒸馏水稀释，再以5000ml醋酸乙酯提取2次，弃去醋酸乙酯提取液，剩余溶液为提取液1；
(3)将步骤(1)所得药渣在60℃烘箱内烘干，加入9000ml蒸馏水，在在常压下下回流提取2.5h，过滤，重复提取1次，合并滤液，得提取液2；
(4)将提取液1和2分别在温度60℃下浓缩至相对浓度为1.27，合并。
即得本发明的黄芪提取物，为棕褐色粘稠膏状。
实施例3 本发明药物的制备
(1)取100g黄芪，加入100ml甲醇，常压下回流提取3h，过滤，重复提取1次，合并滤液，保留药渣；
(2)浓缩滤液至无醇味，得浓缩液110ml，加入350ml蒸馏水稀释，再以440ml醋酸乙酯提取4次，弃去醋酸乙酯提取液，剩余溶液为提取液1；
(3)将步骤(1)所得药渣常温下晾干，加入200ml蒸馏水，在常压下回流提取1h，过滤，重复提取3次，合并滤液，得提取液2；
(4)合并提取液1和2，在温度60℃下浓缩至相对浓度为1.20。
即得本发明的黄芪提取物，为棕褐色粘稠膏状。
实施例4 黄芪提取物口服液的制备
取实施例1所得的浓缩液20ml，加入矫味剂蜂蜜5ml和稀释剂水80ml，灭菌后在无菌条件下分装成10ml/瓶的口服液。
实施例5 黄芪提取物颗粒剂的制备
取实施例2所得的黄芪提取物，测定其中黄芪多糖的含量，以适量蒸馏水溶解，加入糊精(根据多糖含量计算糊精加入量，控制100g成品颗粒中黄芪多糖的含量为600mg)，制粒，过筛，烘干，整粒、装袋(5g/袋)、装盒(10袋/盒)、包装、成品、消毒(3kG钴60射线辐射灭菌)、质检(按《中国药典》2005版一部颗粒剂项下规定进行)、入库。
实施例6 对小鼠的免疫调节作用
实验动物：选用河北医科大学实验动物学部提供的清洁级雌性昆明小鼠36只，(批准号医动字第04056号)，体重18-22g，随机分组。
药物剂量及给药方式：将实施例5所得的黄芪提取物颗粒作为供试药物，按照给药剂量高低平均分为三组，其中低剂量组每日给药量为0.5g/kg体重(去除辅料，下同)，中剂量组每日给药量为1.0g/kg体重，高剂量组每日给药量为1.5g/kg体重。对照组给予等体积蒸馏水。各组连续给药30d。
评价方法：采用体重、脏器称量计算脏器体重比；足跖增厚法；ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验(MTT法)；脾脏抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)；半数溶血值(HC50)；碳粒廓清试验；腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法)；NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶LDH测定法)。结果显示该药物能够明显提高小鼠的足跖厚度(见图1)、脾脏抗体生成细胞数(见图2)和半数溶血值(见图3)。说明本发明的黄芪提取物能够提高机体的免疫能力。
实施例7 对健康受试者血清生化指标的影响
26名体检合格自愿受试者，年龄为21-68岁，其中男性13人，女性13人。所有受试者每日早晚服用实施例5所得的黄芪提取物颗粒剂5g，共连续服用4周后检测下述各项生化指标，服药前各项目水平作为对照。
实验结果表明受试者服药前后心、肾、肝脏功能的各项生化指标变化无统计学差异(见表1)，说明本发明的黄芪提取物安全无毒。
表1 本发明黄芪提取物对血清生化指标的影响
| 项目 | 0周 | 2周 | 4周 |
| 尿素(mmol/L) | 5.44±1.23 | 5.11±1.23 | 4.71±1.04 |
| 肌酐(μmol/L) | 58.11±11.76 | 56.02±11.84 | 57.6±11.3 |
| 肌酸肌酶(nkat) | 1524.97±525.27 | 1560.64±597.78 | 1628.65±565.11 |
| 乳酸脱氢酶(nkat) | 2636.19±410.08 | 2659.69±460.09 | 2587.18±993.19 |
| 谷-草转氨酶(nkat) | 345.90±129.02 | 296.39±64.51 | 301.89±125.19 |
| 谷-丙转氨酶(nkat) | 358.57±247.54 | 286.55±149.86 | 263.21±152.19 |
| 碱性磷酸酶(nkat) | 1013.53±333.23 | 1015.36±346.74 | 985.19±355.07 |
| 谷氨酰氨基转肽酶(nkat) | 444.08±306.23 | 360.40±211.04 | 370.07±214.21 |
| 总胆红素(μmol/L) | 13.38±5.63 | 13.83±6.17 | 13.58±5.56 |
| 直接胆红素(μmol/L) | 4.29±1.86 | 4.2±2.0 | 4.68±2.16 |
| 总蛋白(g/L) | 73.63±3.63 | 73.68±3.63 | 74.06±4.76 |
| 白蛋白(g/L) | 46.65±2.26 | 46.27±2.06 | 47.05±2.12 |
| 总胆汁酸(μmol/L) | 3.21±2.7 | 3.76±2.57 | 3.53±2.17 |
实施例8 对健康受试者外周血白细胞及其分类的影响
试验方法同实施例7。
结果显示本发明的黄芪提取物对健康受试者外周血白细胞及其分类无影响(见表2)。
表2 本发明黄芪提取物对外周血白细胞及其分类的影响
| 项目 | 0周 | 2周 | 4周 |
| 淋巴细胞(％) | 34.69±7.3 | 32.15±7.86 | 33.25±6.92 |
| 单核细胞(％) | 5.84±1.80 | 5.46±1.30 | 5.87±1.56 |
| 中性粒细胞(％) | 59.3±7.49 | 62.03±7.98 | 60.79±6.63 |
| 白细胞计数(×109/L) | 5.8±1.51 | 5.81±1.43 | 5.8±1.42 |
实施例9 对健康受试者免疫指标的调节作用
试验方法同实施例7。
结果显示本发明的黄芪提取物能够提高健康人体T辅助细胞和NK细胞的活性，降低T抑制细胞的活性，从而提高T辅助细胞/T抑制细胞的比值(见表3)，说明本发明的黄芪提取物具有免疫增强作用。
表3 本发明黄芪提取物对淋巴细胞亚群分型的影响
| 淋巴细胞亚群分型 | 0周 | 2周 | 4周 |
| T淋巴细胞 | 69.76±10.83 | 72.15±9.79 | 69±12.9 |
| 总淋巴细胞 | 96.34±8.46 | 98.38±7.67a | 98.92±10.75a |
| T辅助细胞/T抑制细胞的比值 | 1.24±0.47 | 1.52±0.62a | 1.67±0.94a |
| B淋巴细胞 | 9.84±3.84 | 10.53±4.4 | 10.73±4.5 |
| T辅助/诱导细胞亚群 | 36.77±6.39 | 38.88±7.16 | 38.76±8.47 |
| T抑制/毒性细胞亚群 | 32.57±15.23 | 29.46±8.86a | 27.5±10.1b |
| NK细胞 | 14.73±6.95 | 15.69±5.25 | 15.64±8.25 |
与服药前相比，aP＜0.05，bP＜0.01。
实施例10 对健康受试者血脂的影响
试验方法同实施例7。
结果显示服用本发明的黄芪提取物2周后，甘油三脂水平有降低趋势，总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平与服药前相比，差异有显著性(P＜0.01)，载脂蛋白A、载脂蛋白B、高密度脂蛋白胆固醇无变化；服药4周后，甘油三脂水平有降低趋势，总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白B水平与服药前相比，差异有显著性(P＜0.01)，载脂蛋白A、高密度脂蛋白胆固醇无变化(见表4)。
表4 受试者服药前后血脂变化(x±s，n＝26)
| 检测指标 | 0周 | 2周 | 4周 |
| 甘油三脂(mmol/L) | 1.46±2.20 | 1.36±1.32 | 1.29±1.49 |
| 总胆固醇(mmol/L) | 4.86±1.13 | 4.65±0.94a | 4.62±1.01a |
| 载脂蛋白A(g/L) | 1.41±0.18 | 1.42±0.17 | 1.39±0.18 |
| 载脂蛋白B(g/L) | 0.97±0.35 | 0.94±0.34 | 0.81±0.97a |
| 高密度脂蛋白胆固醇(mmol/L) | 1.40±0.17 | 1.39±0.19 | 1.38±0.17 |
| 低密度脂蛋白胆固醇(mmol/L) | 2.88±0.86 | 2.79±0.87a | 2.53±0.77a |
与服药前比较，aP＜0.01
实施例11 对50岁以上受试者血脂的影响
试验方法同实施例7。观察其中年龄在50岁以上者下述各项指标。
结果显示服用本发明的黄芪提取物2周后，总胆固醇水平有降低趋势，甘油三脂降低较明显，甘油三脂、低密度脂蛋白胆固醇水平与服药前相比，差异有显著性(P＜0.05)；载脂蛋白B比服药前降低明显，差异有显著性(P＜0.01)，载脂蛋白A、高密度脂蛋白胆固醇无变化；4周后结果与2周后结果相同(见表6)。
表6 50岁以上受试者服药前后血脂变化(x±s，n＝18)
| 检测指标 | 0周 | 2周 | 4周 |
| 甘油三脂(mmol/L) | 3.14±4.20 | 2.24±2.20a | 2.19±2.72a |
| 总胆固醇(mmol/L) | 6.0±0.73 | 5.63±0.59 | 5.48±0.88a |
| 载脂蛋白A(g/L) | 1.36±0.17 | 1.42±0.17 | 1.38±0.22 |
| 载脂蛋白B(g/L) | 1.30±0.27 | 1.11±0.21b | 1.06±0.12b |
| 高密度脂蛋白胆固醇(mmol/L) | 1.34±0.15 | 1.39±0.18 | 1.40±0.19 |
| 低密度脂蛋白胆固醇(mmol/L) | 3.30±0.48 | 2.81±0.63a | 2.65±0.20a |
与服药前比较，aP＜0.05，bP＜0.01
实施例12 对过敏性鼻炎的治疗作用
通过给10例过敏性鼻炎患者服用本发明的实施例5所得额药物，每日早晚各2次，每次5g，观察患者症状，结果表明，服用该提取物2周开始，鼻炎症状明显改善，4周后症状基本消失，而且长期服用时鼻炎不再复发。用蛋白芯片仪检测黄芪提取物对过敏性鼻炎患者细胞因子的影响，发现可使患者的白介素-8升高，说明该提取物可以调节机体的免疫功能同时改变了临床症状和体征，对过敏性鼻炎有治疗作用。
Claims (8)
1、一种黄芪提取物，其特征在于该提取物是通过下述步骤得到的：
(1)取1重量份的黄芪，按照1-3ml/g的比例，加入体积含量为70-95％的乙醇、甲醇或者二者任意比例混合的溶剂，在常压下加热回流提取1-3h，然后过滤，重复提取1-3次，合并滤液，药渣保留；
(2)步骤(1)所得滤液浓缩至无醇味后，按照浓缩液体积，加入1-4倍的蒸馏水稀释，再以1-4倍的醋酸乙酯提取2-4次，弃去醋酸乙酯提取液，剩余溶液为提取液1；
(3)步骤(1)所得药渣晾干后，按照1-3ml/g的比例，加入蒸馏水，在常压下加热回流提取1-3h，然后过滤，重复提取1-3次，将滤液合并得到提取液2；
(4)合并提取液1和2，在温度60℃下浓缩至相对浓度为1.05-1.40；或者在温度60℃下将提取液1和2分别浓缩至相对浓度为1.05-1.40后合并。
2、根据权利要求1所述的黄芪提取物，其特征在于它是通过下述步骤得到的：
(1)取1重量份的黄芪，按照2ml/g的比例，加入体积含量为85-95％的乙醇、甲醇或者二者任意比例混合的溶剂，在常压下加热回流提取2-3h，然后过滤，重复提取2-3次，合并滤液，药渣保留；
(2)所述滤液浓缩至无醇味后，按照浓缩液体积，加入3-4倍的蒸馏水稀释，再以3-4倍的醋酸乙酯提取3-4次，弃去醋酸乙酯提取液，剩余溶液为提取液1；
(3)步骤(1)所得药渣晾干后，按照2ml/g的比例，加入蒸馏水，在常压下加热回流提取2-3h，然后过滤，重复提取2-3次，将滤液合并得到提取液2；
(4)合并提取液1和2，在温度60℃下浓缩至相对浓度为1.20-1.30；或者在温度60℃下将提取液1和2分别浓缩至相对浓度为1.20-1.30后合并。
3、根据权利要求1或2所述的黄芪提取物在制备提高免疫力的药物中的应用。
4、根据权利要求1或2所述的黄芪提取物在制备预防或治疗呼吸道感染的药物中的应用。
5、根据权利要求1或2所述的黄芪提取物在制备调节血液粘稠度和降低血脂的药物中的应用。
6、根据权利要求1或2所述的黄芪提取物在制备预防或治疗过敏性鼻炎的药物中的应用。
7、根据权利要求1或2所述的黄芪提取物在制备预防或治疗肝糖原减少或抗肿瘤药物对肝脏造成损害的药物中的应用。
8、根据权利要求1或2所述的黄芪提取物在制备预防或治疗病毒性肝炎药物中的应用。
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| CN 200610172273 CN1985877A (zh) | 2006-12-30 | 2006-12-30 | 一种黄芪提取物及其医药用途 |
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Cited By (3)
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| US9005676B2 (en) | 2012-09-21 | 2015-04-14 | Hong Kong Baptist University | Pharmaceutical composition and methods for modulating immune system, preventing, pretreating and/or treating cancers |
| CN105641026A (zh) * | 2014-11-11 | 2016-06-08 | 天津中敖生物科技有限公司 | 增强雏鸡机体免疫功能的黄芪提取物的制备方法 |
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2006
- 2006-12-30 CN CN 200610172273 patent/CN1985877A/zh active Pending
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Open date: 20070627 |