CN1981826A - 一种治疗牛子宫炎的子宫灌注液 - Google Patents
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Abstract
本发明是一种治疗牛子宫炎的子宫灌注液,它是以山楂为原料经提取加工制成的中药药物,主要含黄酮类化合物和绿原酸。用于治疗牛子宫炎。本发明的子宫灌注液具较好抗炎作用,同时抑菌能力强,对引起牛子宫炎的链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有抑制作用,对治疗牛子宫炎具有良好效果,起效快,治愈率高且刺激小,安全性高。
Description
技术领域
本发明涉及一种治疗牛子宫炎的药物,具体地说是以一种植物中草药为原料制成的治疗牛子宫炎的药物。
背景技术
牛及其它家畜的子宫炎主要是子宫内膜的炎症,故亦称子宫内膜炎。子宫肌炎、子宫浆膜炎,只有在产后急性子宫炎时才可能发生,但很少。牛常见子宫内膜炎,通常是子宫粘膜发生炎症或化脓性炎症,为产后、流产最常见的一种生殖器官疾病。子宫炎在难产、子宫脱出、胎衣不下时感染病原菌后继发或经配种感染,为奶牛常发病,近年来,随着奶牛产量提高,牛群扩大,子宫炎发病率高达25%。由于受子宫黏膜的炎症病程、炎性产物及细菌毒素的影响,一方面牛出现性周期紊乱,另一方面又直接危害精子的活力及胚胎着床,致使配种不孕,是奶牛不孕的重要原因之一。
病原微生物的感染是引起子宫炎的主要原因。发病原因多见于产房卫生差或在粪、尿污染的厩床上分娩,临产母牛外阴、尾根部污染粪便而未彻底清洗消毒,助产或剥离胎衣时术者的手臂、器械消毒不严,胎衣不下腐败分解,恶露停滞,产道损伤、以及人工授精或阴道检查时消毒不严,致使致病菌侵入子宫而引起。引起子宫炎的致病菌通常易见的主要有链球菌、大肠杆菌和葡萄球菌等。通过对患子宫炎的母牛进行了细菌学检验,结果分离到上述三种菌的占75.56%。其中链球菌检出率为48.89%,大肠杆菌检出率为26.7%,葡萄球菌检出率为13.3%,其次是变形杆菌、棒状杆菌和其他菌。
子宫炎是奶牛的常见病之一,重者可与周围组织发生粘连,或者因子宫颈口关闭而继发子宫积脓,使发情周期紊乱,屡配不孕,直接影响到奶牛的受胎率和奶业生产。长期以来,人们习惯用高锰酸钾、雷佛奴尔、碘液、土霉素、青霉素、红霉素等常见药物进行传统治疗,效果不很理想。子宫炎做为奶牛常见的一种生殖器官疾病,使患病奶牛繁殖能力下降,产奶量降低,产仔间隔延长,有的因屡配不孕甚至被迫淘汰,使奶牛养殖业蒙受巨大经济损失,严重影响奶牛繁殖和经济效益。虽然各地均投入大量的人力、物力予以防治,但发病率仍有增无减,尤其是大量抗生素和消毒药的长期使用,致使病原菌抗药性增强,且由于多次过量冲洗影响子宫体积复原,故临床上往往得不到满意的治疗效果。本发明的子宫灌注液系根据中兽医药学理论,经科学提取研制而成的无菌溶液,具有活血化淤、祛腐排脓及净宫功效,不仅对子宫炎常见病原菌具有明显抑制和杀灭作用,而且能促进子宫收缩,排出炎性渗出物,减少分泌,恢复其生殖能力,同时克服了使用抗菌药所产生的细菌抗药性和药物的刺激作用,有效控制感染。
发明内容
本发明所要解决的问题是为了治疗牛子宫炎,提供一种安全、快速、高效的以中药成分组成的子宫灌注液。
本发明的解决方案是根据中兽医药学理论,运用现代药理学手段对引起牛子宫炎发病的致病菌检析,从药食同源植物山楂中提取有效成分,子宫内灌注,发挥其抑菌消炎作用,达到治疗目的。
本发明的子宫灌注液是由山楂制成的。制成本发明的生产方法是:
(1)干燥山楂置微波协助萃取设备内加热至表面温度60℃。
(2)取出后加蒸馏水∶乙醇(4-3∶1)混合液回流,回流液静置24小时以上过滤分离,滤液浓缩至浸膏备用。
(3)将过滤得固相山楂于250℃干馏至无馏出液,干馏液在油浴状态下于80℃~180℃重蒸馏,重蒸馏液静置24小时以上备用。
(4)取(2)中浸膏和(3)中液体以1∶4混合,回流老化1小时。
(5)过滤制得液体,氢氧化钠溶液(0.5mol/l-1mol/l)调节pH值4.5~6.0,24小时后过滤,加2%-3%体积比的吐温-80,灌封,100℃~110℃下流通蒸汽灭菌10~30分钟,即可得到治疗牛子宫炎的药物子宫灌注液。
本发明的一个重要特点是药剂中含有绿原酸和黄酮类化合物各成分含量分别是:
每1ml药液含黄酮类化合物不低于1mg。
每1ml药液含绿原酸不低于0.01mg。
本发明的另一个重要特点是pH值为4.5~6.0,比重1.0~1.1。
本发明的子宫灌注液经药理实验证明有较强抗炎作用,具体如下:
实验阳性对照品为氢化可的松注射液,含量1.25mg/ml。阴性对照品为0.9%生理盐水。实验动物为ICR小鼠(18~22g),雌雄各半。
取体重18~22g小鼠18只,随机分为3组,每组6只,皮下注射给药。第一组给予生理盐水0.5ml/20g,第二组给予本发明的子宫灌注液0.5ml/20g,第三组给予氢化可的松注射液0.6mg/20g。
各鼠皮下注射给药后0.5h,于一侧耳壳正、反两面均匀涂抹二甲苯(0.05~0.1ml),1h后处死,沿耳廓基线剪下两耳,于同一部位用打孔器冲下耳片(直径8mm),称重,以两耳片重量之差为肿胀度,按下式计算给药组肿胀抑制率:
实验结果如下
药物名称 | 动物数(只) | 给药剂量 | 平均肿胀度 | 抑制率(%) |
0.9%生理盐水 | 6 | 0.5ml/20g | 6.97±0.342 | - |
子宫灌注液 | 6 | 0.5ml/20g | 1.45±0.604 | 79.2 |
氢化可的松注射液 | 6 | 0.6mg/20g | 4.63±0.325 | 33.5 |
实验结果证实本发明的子宫灌注液有明显抗炎作用。
本发明的子宫灌注液经过药理实验证明对引起牛子宫炎的致病菌链球菌、大肠杆菌和葡萄球菌均有抑制作用,具体分述如下:
1.体外抑菌试验
实验菌种为无乳链球菌c55901、大肠杆菌(44103)、金黄色葡萄球菌(26003)将其制备为菌悬液。对照药品为注射用青霉素钾与注射用硫酸链霉素。采用钢管法进行抑菌试验,平皿内底层均匀铺平琼脂,菌液加入琼脂后均匀摊布于底层琼脂上,上放置钢管,将本发明的子宫灌注液(批号分别为SG040901,SG040902,SG040903),试验浓度为原浓度和对照药品青霉素钾注射液,试验浓度为2u/ml,对照药品硫酸链霉素注射液,试验浓度为1.6u/ml分别注入钢管中,37℃温箱,培养24小时。用游标卡尺测量每个样品的抑菌直径。结果如下。
表1对无乳链球菌c55901的抑菌圈直径结果:
试验药品 | 抑菌圈直径(mm) | ||||
1 | 2 | 3 | 4 | 平均值 | |
SG040901 | 18.00 | 18.30 | 18.30 | 18.25 | 18.21 |
SG040902 | 18.55 | 18.35 | 18.40 | 18.50 | 18.45 |
SG040903 | 17.85 | 18.10 | 18.35 | 18.00 | 18.08 |
注射用青霉素钾 | 21.80 | 22.00 | 21.05 | 21.75 | 21.65 |
表2对大肠杆菌(44103)的抑菌圈直径结果:
试验药品 | 抑菌圈直径(mm) | ||||
1 | 2 | 3 | 4 | 平均值 | |
SG040901 | 18.85 | 18.50 | 18.00 | 18.50 | 18.46 |
SG040902 | 18.55 | 18.85 | 17.95 | 18.05 | 18.35 |
SG040903 | 18.30 | 18.65 | 18.45 | 18.55 | 18.49 |
注射用硫酸链霉素 | 18.30 | 18.00 | 18.35 | 18.55 | 18.30 |
表3对金黄色葡萄球菌(26003)的抑菌圈直径结果:
试验药品 | 抑菌圈直径(mm) | ||||
1 | 2 | 3 | 4 | 平均值 | |
SG040901 | 17.95 | 17.60 | 17.80 | 18.00 | 17.84 |
SG040902 | 17.66 | 17.85 | 17.90 | 18.00 | 17.85 |
SG040903 | 17.90 | 17.75 | 17.90 | 17.95 | 17.88 |
注射用青霉素钾 | 21.20 | 21.35 | 21.00 | 21.20 | 21.19 |
试验结果表明,本发明的子宫灌注液对链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有抑制作用,它的抑菌作用是肯定的。
2.最低抑菌浓度试验
实验菌株为实验菌种为无乳链球菌c55901、大肠杆菌(44103)、金黄色葡萄球菌(26003),并制备为菌悬液。对照药品为注射用青霉素钾与注射用硫酸链霉素。采用液体试管法进行试验。将本发明的子宫灌注液(批号分别为SG040901,SG040902,SG040903)分别用营养肉汤稀释为每1ml营养肉汤含0.5ml、0.25ml、0.125ml、0.0625ml、0.03125ml、0.015625ml、0.0078125ml供试药品,分别置于无菌试管中,每管1ml,备用。取对照药品,用营养肉汤稀释为100u/ml浓度,置于无菌试管中,每管1ml,备用。分别取无乳链球菌c55901菌液、大肠杆菌(44103)、金黄色葡萄球菌(26003)0.1ml分别加入制备备用的供试药品中,无乳链球菌c55901菌液0.1ml、金黄色葡萄球菌(26003)0.1ml加入注射用青霉素钾对照药品溶液中,大肠杆菌(44103)菌液0.1ml加入注射液硫酸链霉素对照药品溶液中,37℃培养18小时。
观察试管中有无细菌生长,确定细菌不生长的为最低抑菌浓度。结果如下:
表4子宫灌注液(批号:SG040901)抑菌试验结果(液体试管法)
菌株 | 供试药品浓度(ml/ml) | 对照药品 | 菌株对照 | ||||||
0.5 | 0.25 | 0.125 | 0.0625 | 0.03125 | 0.015625 | 0.0078125 | |||
大肠杆菌(44103) | = | = | = | = | = | +++ | +++ | - | +++ |
金黄色葡萄菌(26003) | = | = | = | = | = | +++ | +++ | - | +++ |
无乳链球菌c55901 | = | = | = | = | = | +++ | +++ | - | +++ |
注:=:无菌生长;-:无菌生长;+++:有菌生长
表5子宫灌注液(批号:SG040902)抑菌试验结果(液体试管法)
菌株 | 供试药品浓度(ml/ml) | 对照药品 | 菌株对照 | ||||||
0.5 | 0.25 | 0.125 | 0.0625 | 0.03125 | 0.015625 | 0.0078125 | |||
大肠杆菌(44103) | = | = | = | = | = | +++ | +++ | - | +++ |
金黄色葡萄球菌(26003) | = | = | = | = | = | +++ | +++ | - | +++ |
无乳链球菌c55901 | = | = | = | = | = | +++ | +++ | - | +++ |
注:=:无菌生长;-:无菌生长;+++:有菌生长
表6子宫灌注液(批号:SG040903)抑菌试验结果(液体试管法)
菌株 | 供试药品浓度(ml/1ml营养肉汤) | 对照药品 | 菌株对照 | ||||||
0.5 | 0.25 | 0.125 | 0.0625 | 0.03125 | 0.015625 | 0.0078125 | |||
大肠杆菌(44103) | = | = | = | = | = | +++ | +++ | - | +++ |
金黄色葡萄球菌(26003) | = | = | = | = | = | +++ | +++ | - | +++ |
无乳链球菌c55901 | = | = | = | = | = | +++ | +++ | - | +++ |
注:=:无菌生长;-:无菌生长;+++:有菌生长
试验结果证实,本发明的子宫灌注液对无乳链球菌c55901、大肠杆菌(44103)、对金黄色葡萄球菌(26003)的最低抑菌浓度均可达0.03125ml/1ml营养肉汤,有较强抑制作用。
本发明经对46例牛子宫炎病例治疗临床观察,以土霉素治疗9例牛子宫炎做为对照,本发明的子宫灌注液具有良好疗效,与土霉素治疗效果比较,见效快,不产生耐受,治愈率高,用药后临床症状很快消失,子宫基本恢复,治愈后跟踪观察15天,未见复发。
具体如下:
黑白花品种奶牛,临床诊断病情分级为隐性子宫炎、卡他性子宫炎、卡他性脓性子宫炎、脓性子宫炎。设本发明的子宫灌注液治疗组和土霉素对照组。本发明的使用方法为取本发明的子宫灌注液子宫内灌注,一次100~250ml,一日一次,隔日使用。土霉素的使用方法为土霉素2g溶于100~200ml生理盐水,子宫内灌注,一日一次,隔日使用。
疗效判定标准为
治愈:临床症状完全消失。
显效:临床症状基本消失。
有效:临床症状减轻,继续治疗无明显变化。
无效:临床症状未减轻或加重。
结果如下:
子宫灌注液使用治疗情况,共治疗牛子宫炎病例46例。其中治疗隐性子宫炎病例9例,卡他性子宫炎11例,治疗卡他性脓性子宫炎病例21例,脓性子宫炎病例5例。治愈率84.8%,治愈平均给药次数4.1次。
治疗组子宫灌注液使用治疗情况:
治疗病例(例) | 治愈病例(例) | 治愈率 | 治愈平均给药次数 | |
隐性子宫炎 | 9 | 9 | 100% | 3.7次 |
卡他性子宫炎 | 11 | 9 | 81.8% | 3.9次 |
卡他性脓性子宫炎 | 21 | 17 | 81% | 4.1次 |
脓性子宫炎 | 5 | 4 | 80% | 5次 |
根据使用方法,取本发明的子宫灌注液100~250ml每日1次,隔日灌注给药。统计治疗数据,共治疗病例46例,平均用药4.1次,治愈率84.8%。
土霉素组使用治疗情况,共治疗牛子宫炎病例9例。其中治疗阴性子宫炎2例,卡他性子宫炎2例,卡他性脓性子宫炎4例,脓性子宫炎1例。治愈率55.6%,治愈平均给药次数5次。
对照组土霉素使用治疗情况:
治疗病例(例) | 治愈病例(例) | 治愈率 | 治愈平均给药次数 | |
隐性子宫炎 | 2 | 2 | 100% | 4次 |
卡他性子宫炎 | 2 | 1 | 50% | 5次 |
卡他性脓性子宫炎 | 4 | 2 | 50% | 6次 |
脓性子宫炎 | 1 | 无效 | - | - |
根据土霉素使用方法,取土霉素2g,溶于100~200ml生理盐水,隔日一次灌注给药。统计治疗数据,共治疗病例9例,平均用药5次,治愈率55.6%。
本发明的子宫灌注液与土霉素治疗比较情况见下表:
次/隔日 | 治疗病例(例) | 治愈病例(例) | 治愈平均给药次数(次) | 治愈率 | |
子宫灌注液 | 1 | 46 | 39 | 4.1 | 84.8% |
土霉素 | 1 | 9 | 5 | 5 | 55.6% |
本发明的子宫灌注液与土霉素治疗情况比较,本发明治疗效果好,使用方便,治愈率高,子宫很快恢复,刺激性小,无毒副作用,安全可靠,对治疗病例跟踪观察15天无不良反应。
本发明的子宫灌注液为中药制剂,使用安全,治愈率高,治疗后细菌很快下降至正常范围,子宫复原快,减少损失,增加经济效益。具体安全性试验如下:
随机选出不同牛龄健康奶牛5例,子宫炎病例5例,500ml本发明的子宫灌注液注入子宫给药(注:药液注入后有自然流出)。具体使用情况见下表:
牛号 | 健康状态 | 用药前子宫分泌物细菌数(cfu/ml) | 剂量ml/次 | 次/隔日 | 用药次数 | 结果 | 停药3天后子宫分泌物细菌数(cfu/ml) |
9115 | 健康 | 4.5×104 | 500 | 1 | 2 | 无不良反应 | 6.2×102 |
9114 | 健康 | 3.9×104 | 500 | 1 | 2 | 无不良反应 | 2.1×102 |
7403 | 卡他性子宫炎 | 5.5×107 | 500 | 1 | 2 | 轻微拱腰努责,无其它不良反应 | 4.3×104 |
7321 | 卡他性子宫炎 | 4.7×107 | 500 | 1 | 2 | 无不良反应 | 2.9×104 |
8306 | 健康 | 4.3×104 | 500 | 1 | 2 | 无不良反应 | 2.8×103 |
6242 | 脓性子宫炎 | 6.2×109 | 500 | 1 | 2 | 轻微拱腰努责,无其它不良反应 | 2.1×105 |
6173 | 健康 | 5.7×104 | 500 | 1 | 2 | 无不良反应 | 5.3×103 |
0043 | 健康 | 5.1×104 | 500 | 1 | 2 | 无不良反应 | 6.6×103 |
0204 | 隐性子宫炎 | 4.3×106 | 500 | 1 | 2 | 无不良反应 | 2.7×104 |
0202 | 卡他性脓性子宫炎 | 3.6×109 | 500 | 1 | 2 | 无不良反应 | 5.5×105 |
试验三批药品,试验奶牛在注入药物后有轻微拱腰、努责现象,几分钟后消失,无其它不良反应。五头健康奶牛无不良反应,食欲正常,无影响,五头子宫病例基本治愈,治愈后子宫恢复正常。跟踪观察15天未见任何不良反应。通过试验说明本发明的子宫灌注液治疗子宫炎是安全的。
具体实施方式
实施例1:
(1)干燥山楂1000g,置微波协助萃取设备内加热至表面温度60℃。
(2)取出后加蒸馏水∶乙醇(4∶1)混合液回流,回流液静置24小时以上过滤分离,滤液浓缩至浸膏备用。
(3)将过滤得固相山楂于250℃干馏至无馏出液,干馏液在油浴状态下于80℃~180℃重蒸馏,重蒸馏液静置24小时以上备用。
(4)取(2)中浸膏和(3)中液体以1∶4混合,回流老化1小时。
(5)过滤制得液体,氢氧化钠溶液(0.5mol/l-1mol/l)调节pH值4.5~6.0,24小时后过滤,加2%-3%体积比的吐温-80,灌封,100℃~110℃下流通蒸汽灭菌10~30分钟,约得500ml本发明的子宫灌注液。
实施例2:
(1)干燥山楂1000g,置微波协助萃取设备内加热至表面温度60℃。
(2)取出后加蒸馏水∶乙醇(3∶1)混合液回流,回流液静置24小时以上过滤分离,滤液浓缩至浸膏备用。
(3)将过滤得固相山楂于250℃干馏至无馏出液,干馏液在油浴状态下于80℃~180℃重蒸馏,重蒸馏液静置24小时以上备用。
(4)取(2)中浸膏和(3)中液体以1∶4混合,回流老化1小时。
(5)过滤制得液体,氢氧化钠溶液(0.5mol/l-1mol/l)调节pH值4.5~6.0,24小时后过滤,加2%-3%体积比的吐温-80,灌封,100℃~110℃下流通蒸汽灭菌10~30分钟,约得500ml本发明的子宫灌注液。
Claims (5)
1、一种治疗牛子宫炎的子宫灌注液,其特征在于其全部或部分组分为黄酮类化合物和绿原酸。
2、根据权利要求1所述的治疗牛子宫炎子宫灌注液,其特征在于其可制成灌注液。
3、一种治疗牛子宫炎的子宫灌注液,其特征在于是以山楂为原料按照下述方法制成的子宫灌注液:
干燥山楂置微波协助萃取设备内加热至表面温度60℃,取出后加蒸馏水∶乙醇(4-3∶1)混合液回流,回流液静置24小时以上过滤分离,滤液浓缩至浸膏备用,将过滤得固相山楂于250℃干馏至无馏出液,干馏液在油浴状态下于80℃~180℃重蒸馏,重蒸馏液静置24小时以上备用,取上述浸膏和干馏液以1∶4混合,回流老化1小时,过滤制得液体,氢氧化钠溶液(0.5mol/l-1mol/l)调节pH值4.5~6.0,24小时后过滤,加2%-3%体积比的吐温-80,灌封,100℃~110℃下流通蒸汽灭菌10~30分钟,即得。
4、根据权利要求3所述的治疗牛子宫炎子宫灌注液,其特征在于其黄酮类化合物含量每1ml药液不低于1mg,绿原酸含量每1ml药液不低于0.01mg。
5、根据权利要求3所述的治疗牛子宫炎子宫灌注液,其特征在于其比重为1.0-1.1。
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---|---|---|---|
CN 200510130564 CN1981826A (zh) | 2005-12-15 | 2005-12-15 | 一种治疗牛子宫炎的子宫灌注液 |
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CN 200510130564 CN1981826A (zh) | 2005-12-15 | 2005-12-15 | 一种治疗牛子宫炎的子宫灌注液 |
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105853960A (zh) * | 2016-04-12 | 2016-08-17 | 董雅娟 | 一种提高母牛受胎率的制剂及提高母牛受胎率的方法 |
CN105878987A (zh) * | 2016-04-12 | 2016-08-24 | 董雅娟 | 一种蚯蚓提取液及其制备方法 |
-
2005
- 2005-12-15 CN CN 200510130564 patent/CN1981826A/zh active Pending
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
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C57 | Notification of unclear or unknown address | ||
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Addressee: Zhi Mingyuan Document name: Written notice of preliminary examination of application for patent for invention |
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C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C57 | Notification of unclear or unknown address | ||
DD01 | Delivery of document by public notice |
Addressee: Zhi Mingyuan Document name: Notice of publication of application for patent for invention |
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C57 | Notification of unclear or unknown address | ||
DD01 | Delivery of document by public notice |
Addressee: Zhi Mingyuan Document name: Notification before expiration of term |
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C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Open date: 20070620 |