CN1973910B - 一种组织工程骨 - Google Patents
一种组织工程骨 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1973910B CN1973910B CN2006100953328A CN200610095332A CN1973910B CN 1973910 B CN1973910 B CN 1973910B CN 2006100953328 A CN2006100953328 A CN 2006100953328A CN 200610095332 A CN200610095332 A CN 200610095332A CN 1973910 B CN1973910 B CN 1973910B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bone
- allogene
- tissue engineered
- seed cell
- bioactie agent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 title claims abstract description 109
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 title claims description 46
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 42
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 14
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 12
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 claims description 10
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 claims description 10
- 102000007350 Bone Morphogenetic Proteins Human genes 0.000 claims description 9
- 108010007726 Bone Morphogenetic Proteins Proteins 0.000 claims description 9
- 108090000386 Fibroblast Growth Factor 1 Proteins 0.000 claims description 9
- 102100031706 Fibroblast growth factor 1 Human genes 0.000 claims description 9
- 229940112869 bone morphogenetic protein Drugs 0.000 claims description 9
- 210000004271 bone marrow stromal cell Anatomy 0.000 claims description 8
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 claims description 8
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims description 8
- 229940078499 tricalcium phosphate Drugs 0.000 claims description 8
- 229910000391 tricalcium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 235000019731 tricalcium phosphate Nutrition 0.000 claims description 8
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims description 7
- 208000006735 Periostitis Diseases 0.000 claims description 6
- 210000003460 periosteum Anatomy 0.000 claims description 6
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 5
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 claims description 5
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 claims description 5
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 4
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 241001450685 Corallium japonicum Species 0.000 claims description 3
- NUAQIRUAZSJTAI-YRPZDAAMSA-N O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@H](N)CC(C)C)[C@H]1C[C@](C)(N)[C@H](O)[C@H](C)O1 Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@H](N)CC(C)C)[C@H]1C[C@](C)(N)[C@H](O)[C@H](C)O1 NUAQIRUAZSJTAI-YRPZDAAMSA-N 0.000 claims description 3
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 claims description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 claims description 3
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 claims description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 3
- 108700014375 norvancomycin Proteins 0.000 claims description 3
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 claims description 3
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 claims description 2
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 claims description 2
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 claims description 2
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims description 2
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 claims description 2
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 claims description 2
- 229920002292 Nylon 6 Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000388 Polyphosphate Polymers 0.000 claims description 2
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 claims description 2
- 108010059993 Vancomycin Proteins 0.000 claims description 2
- 229960002227 clindamycin Drugs 0.000 claims description 2
- KDLRVYVGXIQJDK-AWPVFWJPSA-N clindamycin Chemical compound CN1C[C@H](CCC)C[C@H]1C(=O)N[C@H]([C@H](C)Cl)[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O1 KDLRVYVGXIQJDK-AWPVFWJPSA-N 0.000 claims description 2
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 2
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 claims description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims description 2
- 229940014259 gelatin Drugs 0.000 claims description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims description 2
- SYUXAJSOZXEFPP-UHFFFAOYSA-N glutin Natural products COc1c(O)cc2OC(=CC(=O)c2c1O)c3ccccc3OC4OC(CO)C(O)C(O)C4O SYUXAJSOZXEFPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 claims description 2
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 claims description 2
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 claims description 2
- 239000001205 polyphosphate Substances 0.000 claims description 2
- 235000011176 polyphosphates Nutrition 0.000 claims description 2
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 claims description 2
- -1 polysiloxanes Polymers 0.000 claims description 2
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 claims description 2
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 claims description 2
- 238000005507 spraying Methods 0.000 claims description 2
- 229960003165 vancomycin Drugs 0.000 claims description 2
- MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N vancomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC)[C@H]1C[C@](C)(N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N 0.000 claims description 2
- MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N vancomycin Natural products O1C(C(=C2)Cl)=CC=C2C(O)C(C(NC(C2=CC(O)=CC(O)=C2C=2C(O)=CC=C3C=2)C(O)=O)=O)NC(=O)C3NC(=O)C2NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CC(C)C)NC)C(O)C(C=C3Cl)=CC=C3OC3=CC2=CC1=C3OC1OC(CO)C(O)C(O)C1OC1CC(C)(N)C(O)C(C)O1 MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims 3
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 claims 1
- OBNCKNCVKJNDBV-UHFFFAOYSA-N ethyl butyrate Chemical compound CCCC(=O)OCC OBNCKNCVKJNDBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 claims 1
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 39
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 abstract description 15
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 abstract description 14
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 abstract description 8
- 238000004506 ultrasonic cleaning Methods 0.000 abstract description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 abstract 2
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 abstract 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 abstract 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 abstract 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 abstract 1
- 238000013329 compounding Methods 0.000 abstract 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 abstract 1
- 239000000815 hypotonic solution Substances 0.000 abstract 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 abstract 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 27
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 21
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 12
- 230000037182 bone density Effects 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 6
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 6
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 210000002805 bone matrix Anatomy 0.000 description 5
- 230000010072 bone remodeling Effects 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 4
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 4
- 230000002188 osteogenic effect Effects 0.000 description 4
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 4
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010087230 Sincalide Proteins 0.000 description 3
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 3
- 229920000729 poly(L-lysine) polymer Polymers 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 3
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 3
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 3
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 3
- 208000017234 Bone cyst Diseases 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002924 anti-infective effect Effects 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000009583 bone marrow aspiration Methods 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 2
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 2
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 2
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 2
- 208000028528 solitary bone cyst Diseases 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DWHJJLTXBKSHJG-HWKANZROSA-N (e)-5-hydroxy-2-methylpent-2-enoic acid Chemical compound OC(=O)C(/C)=C/CCO DWHJJLTXBKSHJG-HWKANZROSA-N 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 206010016825 Flushing Diseases 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000012659 Joint disease Diseases 0.000 description 1
- 150000008065 acid anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 238000002316 cosmetic surgery Methods 0.000 description 1
- 238000000315 cryotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000012447 hatching Effects 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 210000003692 ilium Anatomy 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 208000008084 monostotic fibrous dysplasia Diseases 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000001582 osteoblastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000003236 psychic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229960000707 tobramycin Drugs 0.000 description 1
- NLVFBUXFDBBNBW-PBSUHMDJSA-N tobramycin Chemical compound N[C@@H]1C[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N NLVFBUXFDBBNBW-PBSUHMDJSA-N 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 229940071288 vancomycin 50 mg/ml Drugs 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
本发明涉及利用高孔隙的组织工程骨支架材料，复合异基因种子细胞(间充质干细胞或成骨细胞)和/或生物活性因子(含骨形态形成蛋白、血管内皮细胞生长因子和抗菌药物)构建成组织工程骨。其构成的特征在于：利用低渗液及超声清洗技术处理异基因松质骨，并经过部分或完全脱钙、脱脂、去抗原等处理获得高孔隙率支架材料；复合异基因的间充质干细胞或成骨细胞等种子细胞和/或骨形态形成蛋白、血管内皮细胞生长因子、抗菌药物等生物活性因子；采用人血清或无血清培养基在牛血清后的续贯应用以降低组织工程医疗产品异种血清残留，最终构建出组织工程骨产品，使本产品具有更强的成骨活性和/或抗感染等其它特殊性能，用作临床上的骨修复材料。
Description
技术领域
本发明属于生物医学组织工程技术领域，具体涉及用作临床修骨复材料的一种组织工程骨。
技术背景
严重创伤、肿瘤切除、骨关节结核及感染、先天性骨关节疾病和骨性关节炎等原因所致的各种骨缺损以十分常见，而脊柱融合、人工假体固定等手术对骨移植材料的需求量也十分巨大。
自体骨移植是目前临床治疗骨缺损较有效的方法，但来源有限且会造成供区新的骨缺损，对病人造成新的生理和心理创伤，是一种创伤性修复模式；大段异体骨移植体内爬行替代所需时间长、骨不愈合发生率高；人工替代材料如金属、陶瓷或高分子材料等虽也在临床应用，但这些材料在生物相容性、生物活性、生物降解性以及与宿主骨的力学匹配性等方面均有不足。
组织工程学的兴起为骨缺损修复带来了全新的方向，通过种子细胞体外扩增并复合于具有特定三维形态的支架材料构建有生命活性的骨与软骨移植物，有希望实现缺损骨组织结构的理想修复和加速肢体功能的重建。
但是目前的组织工程骨均采用患者自体来源的细胞作为种子细胞，自体来源的种子细胞决定了这些组织工程骨的个体化制备模式，要求各应用单位必须配备专用净化场所、专业设备和人员，患者需要等待20余天时间用以自体种子细胞的增殖和组织工程产品的制备，无法实现规模化制备和市场推广。
发明的内容
本发明的目的是提供一种以异基因种子细胞和/或生物活性因子构建的组织工程骨，该组织工程骨可实现规模化生产，并具有更高的成骨活性或/及抗感染能力。
本发明另一个目的是提供一种能够规模化生产上述组织工程骨的方法。
实现本发明的目的之一而采用的技术方案是这样的，即所述异基因的组织工程骨由多孔隙的组织工程骨支架材料复合异基因种子细胞和/或生物活性因子构建而成。
上述异基因种子细胞为骨髓间充质干细胞或成骨细胞。组织工程骨每克成品中含有效异基因种子细胞数为：1×10E6～1×10E7个，它们分别分离白骨髓或骨膜，并体外培养扩增获得。
上述生物活性因子可用下列成分中的至少一种，包括：骨形态形成蛋白(BMPs)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和抗菌药物。其中：组织工程骨每克成品中，骨形态形成蛋白(BMPs)为0.1-10mg，血管内皮细胞生长因子(VEGF)为1-100ng抗菌药物为0.01-10mg，它们分别在增强成骨活性、促进组织血管化和赋予组织工程骨抗感染活性方面发挥作用。
上述抗菌药物可以选自万古霉素、去甲万古霉素、克林霉素、妥布霉素或庆大霉素中的一种。
所述多孔隙的组织工程骨支架材料为利用低渗液及超声清洗技术处理并经过部分或完全脱钙、脱脂、去抗原处理获得的高孔隙率异基因松质骨，其孔径为20-300um；所述异基因松质骨可以是异体或异种松质骨。
所述组织工程骨支架也可以选自市售的磷酸三钙(TCP)、珊瑚、聚乳酸(PLA)中的一种。
所述多孔隙的组织工程骨支架材料复合异基因种子细胞和/或生物活性因子，可以是通过异基因种子细胞和/或生物活性因子覆盖于支架表面(孔隙表面)；或是在制作支架过程中加入生物活性因子，使支架内部本身含有生物活性因子。
上述异基因种子细胞和/或生物活性因子覆盖于支架表面可通过直接浸渍、喷涂、多聚物载体介导、蛋白质载体介导或通过微球作载体附着完成。
在多聚物载体介导异基因种子细胞和/或生物活性因子覆盖于支架表面中，所述的多聚物可为：天然高聚物明胶、海藻酸盐、纤维蛋白、明胶蛋白、生物相容性好的人工合成的高聚物多聚乳酸、多聚赖氨酸(多聚L-赖氨酸)、聚乙二醇、聚硅氧烷、聚氧化乙烯、聚丙烯酰胺、聚丙烯酸(酯)、聚氨酯、聚磷酸酯、聚羟基乙酸(酯)、聚羟基丁酸(酯)、聚(酸)酐、聚己内酰胺、聚氨基酸、聚羟乙基甲基丙烯酸(酯)及上述多聚物间的共聚物。
上述多聚物或蛋白质载体介导异基因种子细胞和/或生物活性因子覆盖于支架表面的方法可以是应用多聚物或蛋白质与异基因种子细胞和/或生物活性因子结合后，直接应用浸渍使异基因种子细胞和/或生物活性因子覆盖于支架表面。
也可以微球作异基因种子细胞和/或生物活性因子的载体直接附着在支架表面。
实现本发明上述目的之二而采用的技术方案如下：
即一种组织工程骨的制备方法，包括步骤如下：
1、获取异体红骨髓：健康供者骨髓穿刺取红骨髓，肝素抗凝；
或获取异体骨膜：健康供者的新鲜骨膜。
2、骨髓间充质干细胞(MSCs)原代分离和培养；
或成骨细胞的培养。
3、支架材料的制备及预处理。
4、异基因种子细胞和/或生物活性因子(含骨形态形成蛋白(BMPs)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和抗菌药物)与支架材料复合。
5、产品成熟及去除牛血清成分的过程。
6、验证：采用CCK-8或MTT的方法检测组织块中的活细胞数量，应满足不低于1×10E6个/克；组织工程骨成品牛血清残留量≤50ug/g。
上述步骤1、2、6均可采用成熟的现有技术完成。步骤3支架材料的准备及处理中，包括对支架材料不完全培养基浸泡8～12小时，更换不完全培养基继续浸泡8～12小时，吸弃培养基后甩干，加入患者自体血清或异体血清，4℃冰箱中浸泡12h后干燥备用。
附图说明
附图1：A为脱钙骨基质(DBM)的大体观察图，B为25倍扫描电镜图；
附图2为组织工程骨产品体外检测，图中反映骨髓间充质干细胞MSCs在DBM支架上附着生长情况；种子细胞在支架材料的网孔中附着、生长并分泌基质。倒置相差显微镜图100倍。
附图3：对修复羊股骨术后X线及大体观察图；图中：A为骨缺损模型，B为空白组，C为采用本发明组织工程骨修复羊股骨缺损术后24周后；各组均采用3厘米股骨干缺损模型，空白组未植入任何材料，为骨不连表现：组织工程骨组已经修复骨缺损并基本完成骨改建。
附图4为组织工程骨修复股骨缺损术后组织学观察图，图中A为12周后的观察，可见骨缺损区域已由原始的编织骨修复；B为24周组织学检查，可见骨缺损区域编织骨已改建成较成熟的皮质骨成分。
附图5～7分别为本发明异基因组织工程骨在临床上三位病人使用术后X线图。
具体实施方式
实施例1异基因MSCs构建的组织工程骨制备过程
1、获取异体红骨髓：健康供者骨髓穿刺取红骨髓，等量1.0U/ml浓度的肝素生理盐水抗凝。
2、骨髓间充质干细胞(MSCs)原代分离和培养：密度为1.073g/mL的Percoll分离液加入稀释的骨髓样本，400g离心20min，吸取中间乳白色云雾状有核细胞层，加入D-Hanks液20ml轻柔吹打漂洗以2×105/cm2的细胞密度接种到塑料培养瓶，每瓶加含15％胎牛血清的完全培养基5ml，置37℃，5％CO2、饱和湿度孵箱内孵育。48小时后全量换液，以后隔日换液。待细胞集落大部分融合后(通常需要10-12天)，随即进行传代培养。收集3-5代的细胞备用。
3、脱钙骨基质(DBM)支架材料的制作：筛选供者，取松质骨切割成小块，40℃蒸馏水反复冲洗，1∶1等体积比的氯仿/甲醛脱脂，超声清洗，0.6M盐酸脱钙，大量蒸馏水冲洗，套封，γ射线灭菌。置-80℃超低温冷冻箱内冷冻3-60个月备用。
4、支架材料预处理：根据患者缺损区域大小，取适量的DBM支架材料，不完全培养基浸泡(不含任何血清成分的培养基)12小时。更换不完全培养基继续浸泡12小时，吸弃培养基后甩干，加入患者自体血清或异体血清，4℃冰箱中浸泡12h后干燥备用。
5、异基因种子细胞与支架材料复合：将上述备用细胞制成4×10E6/ml密度的细胞悬液，滴入上述备用的DBM支架材料中，在37℃、5％CO2、饱和湿度条件下静置4h后再加入成骨诱导培养基继续培养，隔日更换成骨诱导培养基。
上述支架材料也可选用复合了生物活性因子(含骨形态形成蛋白(BMPs)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和抗菌药物)的支架材料或者缓释微球，分别浸润冻干法和滴入法制备，具体见实施例4、5。
6、产品成熟及去除牛血清成分的过程：更换无血清培养基或10％患者自体血清的条件培养基继续培养4-6天，形成产品，可以植入体内。
7、验证：采用CCK-8或MTT的方法检测组织块中的活细胞改量，应满足不低于1×10E6个/毫升。
实施例2异基因成骨细胞构建的组织工程骨制备过程
1、获取异体骨膜：无菌手术取出健康供者新鲜骨膜组织。
2、异基因成骨细胞原代分离和培养：将新鲜骨膜剪成边长约1mm的小块，在37℃环境下用0.1％胶原酶消化40分钟左右，等量含血清培养基中止反应，反复吹打后以2×105/cm2的细胞密度接种到塑料培养瓶，每瓶加含15％胎牛血清的完全培养基5ml，置37℃，5％CO2、饱和湿度孵箱内孵育。48小时后全量换液，以后隔日换液。待细胞集落大部分融合后(通常需要8-10天)，随即进行传代培养。收集3-5代的细胞备用。
3、支架材料选用市售的磷酸三钙(TCP)，根据患者缺损区域大小，取适量的磷酸三钙支架材料，不完全培养基浸泡(不含任何血清成分的培养基)12小时。更换不完全培养基继续浸泡12小时，吸弃培养基后甩干，加入患者自体血清或异体血清，4℃冰箱中浸泡12h后干燥备用。
5、异基因种子细胞和/或生物活性因子(含骨形态形成蛋白(BMPs)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和抗菌药物)与支架材料复合：将上述备用细胞制成4×10E6/ml密度的细胞悬液，滴入上述备用的DBM支架材料中，在37℃、5％CO2、饱和湿度条件下静置4h后再加入成骨诱导培养基继续培养，隔日更换成骨诱导培养基。上述支架材料也可选用复合了生物活性因子(含骨形态形成蛋白(BMPs)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和抗菌药物)的支架材料或者缓释微球，分别浸润冻干法和滴入法制备，具体见实施例4、5。
6、产品成熟及去除牛血清成分的过程：更换无血清培养基或10％患者自体血清的条件培养基继续培养4-6天，形成产品，可以植入体内。
7、验证：采用CCK-8或MTT的方法检测组织块中的活细胞数量，应满足不低于1×10E6个/毫升。
实施例3上述脱钙骨基质(DBM)原料体外检测：
参见附图1、2，脱钙骨基质组织工程支架材料为不规则多孔固体颗粒，呈白色或淡黄色，无肉眼可见杂质，粒径约为8mm；其余的支架材料，如磷酸三钙(TCP)、珊瑚、聚乳酸(PLA)均符合各自规格的三维外形和外部尺寸。组织学观察：显微镜下观察各材料松质骨部分为网孔样结构，孔隙内清洁，孔壁光滑，无明显内容物，孔径20-300um。
实施例4生物活性因子与支架材料复合方法之一
将骨形态形成蛋白BMPs：1mg/ml、血管内皮细胞生长因子VEGF10ng/ml、万古霉素50mg/ml及0.05％的多聚L-赖氨酸制成溶液，将支架材料浸泡于该溶液并负压抽滤24小时，取出支架材料冷冻干燥，制成含上述生物活性因子的支架材料，用于组织工程骨制备。
实施例5生物活性因子与支架材料复合方法之二
将去甲万古霉素50mg/ml与16％的海藻酸钠制成溶液缓慢滴加入1mmol/L的氯化钙溶液中凝固成微球，捞起微球后加入到0.05％的多聚L-赖氨酸溶液中，缓慢搅拌30分钟，捞起微球后冷冻干燥，制成含上述生物活性因子的缓释微球，微球滴入支架中，保证组织工程骨每克成品中药物0.01-10mg的含量；经37℃孵育固化后即得复合了藻酸盐微球的脱钙骨基质支架。
实施例6本发明组织工程骨的体内检测实验
参见附图3、4。附图3：对修复羊股骨术后X线及大体观察图；图中：A为骨缺损模型，B为空白组，C为采用本发明实施例1方法制备的组织工程骨修复羊股骨缺损术后24周后；各组均采用3厘米股骨干缺损模型，空白组未植入任何材料，为骨不连表现；组织工程骨组已经修复骨缺损并基本完成骨改建。
附图4为组织工程骨修复股骨缺损术后组织学观察图，图中A为12周后的观察，可见骨缺损区域已由原始的编织骨修复；B为24周组织学检查，可见骨缺损区域编织骨已改建成较成熟的皮质骨成分。
实施例7典型病例1
白某，女，8岁，贵州遵义人，左胫骨上段动脉瘤样骨囊肿，曾两次手术分别用自体和其母亲的异体髂骨移植均失败，2003年9月用采用本发明实施例1制备的组织工程骨成功修复了骨缺损，随访18个月未复发术后观察参见图5，图中A为术前，B为术后1周，C为术后6月，D为术后12月。A术前可见胫骨近端为范围较大的多个皂泡样骨缺损，B为术后1周清除肿瘤值入透X光的组织工程骨产品，C为术后6月骨缺损区域骨密度增加，D为术后12月骨缺损区域骨密度继续增加，皂泡样结构消失，骨缺损有效修复。
实施例8典型病例2
蒲某，女，12岁，四川渠县人，左股骨上段纤维结构不良，清除病灶后造成的巨大骨缺损无法获得足量自体骨，采用组织工程骨3个月成功修复骨缺损，6个月后骨改建良好，参见附图6：图中A为术前，B为术后1周，C为术后3月D为术后6月。A术前可见胫骨近端为范围巨大的骨缺损，B为术后1周清除肿瘤值植入透X光的组织工程骨产品，可见手术开窗所致皮质骨缺损；C为术后3月骨缺损区域骨密度增加，D为术后6月骨缺损区域骨密度继续增加，原有骨缺损及手术开窗所致皮质骨缺损有效修复。
实施例9典型病例3
何某，男，4岁，重庆合川人，左股骨骨囊肿，因年龄太小无法获得足量的自体骨，采用组织工程骨3个月形成明显的皮质骨，12个月后完成骨改建，图7中A为术前，B为术后3天，C为术后3月，D为术后6月，E为术后12月，影象学表现12个月后与健肢无差异。A术前可见胫骨近端为范围巨大的骨缺损，B为术后3天清除肿瘤植入透X光的组织工程骨产品，可见手术开窗所致皮质骨缺损；C为术后3月骨缺损区域骨密度增加，D为术后6月骨缺损区域骨密度增加，基本修复；E为术后12月骨缺损区域骨密度继续增加，原有骨缺损完全修复，骨改建完成。
本发明的组织工程骨可以用于修复各种原因导致的骨缺损，并可以用于脊柱融合、人工假体固定、整形外科等需要促进骨生长的手术中，动物实验和临床观察均证实能取得比传统材料(异体骨、人工合成替代材料等)更好的修复效果和修复速度，且与一定生物活性因子复合后能赋予该产品更多的功能(促骨成长、促血管生成、抗感染)。该产品作为新型医疗器械将具有广阔的应用前景。
Claims (6)
1.一种异基因的组织工程骨，其特征是：采用多孔隙的组织工程骨支架材料，复合异基因种子细胞和生物活性因子构建而成；其中，所述异基因种子细胞为骨髓间充质干细胞或成骨细胞；组织工程骨每克成品中含有效异基因种子细胞数为：1×10E6～1×10E7个，它们分别分离自骨髓或骨膜，并体外培养扩增获得；所述生物活性因子采用骨形态形成蛋白(BMPs)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和抗菌素中的至少一种；所述多孔隙的组织工程骨支架材料选自市售磷酸三钙、珊瑚、聚乳酸中的一种。
2.根据权利要求1所述的异基因的组织工程骨，其特征是：组织工程骨每克成品中，骨形态形成蛋白为0.1-10mg、血管内皮细胞生长因子为0.1-100ng、抗菌素为0.01-10mg。
3.根据权利要求1或2所述的异基因的组织工程骨，其特征是：所述抗菌素选自万古霉素、去甲万古霉素、克林霉素或庆大霉素中的一种。
4.根据权利要求1所述的异基因的组织工程骨，其特征是：所述多孔隙的组织工程骨支架材料复合异基因种子细胞和生物活性因子，是通过异基因种子细胞和生物活性因子覆盖于支架表面，或是在制作支架过程中加入生物活性因子，使支架内部本身含有生物活性因子。
5.根据权利要求5所述的异基因的组织工程骨，其特征是：所述异基因种子细胞和生物活性因子覆盖于支架表面通过直接浸渍、喷涂、多聚物载体介导、蛋白质载体介导或通过微球做载体附着完成。
6.根据权利要求6所述的异基因的组织工程骨，其特征是：由多聚物载体介导异基因种子细胞和生物活性因子覆盖于支架表面，所述的多聚物为天然高聚物明胶、海藻酸盐、纤维蛋白、明胶蛋白、生物相容性好的高聚物多聚乳酸、多聚赖氨酸、聚乙二醇、聚硅氧烷、聚氧化乙烯、聚丙烯酰胺、聚丙烯酸、聚丙烯酸酯、聚氨酯、聚磷酸酯、聚羟基乙酸、聚羟基乙酸酯、聚羟基丁酸、聚羟基丁酸酯、聚酸酐，聚己内酰胺、聚氨基酸及上述多聚物间的共聚物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2006100953328A CN1973910B (zh) | 2006-12-22 | 2006-12-22 | 一种组织工程骨 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2006100953328A CN1973910B (zh) | 2006-12-22 | 2006-12-22 | 一种组织工程骨 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1973910A CN1973910A (zh) | 2007-06-06 |
| CN1973910B true CN1973910B (zh) | 2010-04-21 |
Family
ID=38124443
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2006100953328A Expired - Fee Related CN1973910B (zh) | 2006-12-22 | 2006-12-22 | 一种组织工程骨 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1973910B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103768657A (zh) * | 2012-10-24 | 2014-05-07 | 上海交通大学医学院附属第九人民医院 | 冻干海藻糖磷酸钙bmp-2缓释材料及其制备方法 |
| CN110101914A (zh) * | 2019-05-04 | 2019-08-09 | 西北工业大学 | 一种预血管化的双相人工骨支架及其制备方法 |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20100023129A1 (en) * | 2008-07-22 | 2010-01-28 | Guo-Feng Xu | Jawbone prosthesis and method of manufacture |
| CN101332314B (zh) * | 2008-07-22 | 2012-11-14 | 广东冠昊生物科技股份有限公司 | 生物型关节软骨修补件 |
| CN101934090B (zh) * | 2010-08-25 | 2013-11-13 | 深圳清华大学研究院 | 一种可注射型骨修复材料及其制备方法 |
| CN104174067B (zh) * | 2013-05-22 | 2015-10-14 | 烟台正海生物科技股份有限公司 | 一种天然无机骨基质及其制备方法 |
| CN103480040B (zh) * | 2013-09-27 | 2014-12-17 | 中国人民解放军第三军医大学第一附属医院 | 含有脐带间充质干细胞分泌的多种蛋白的骨基质材料及制备方法 |
| PL3697459T3 (pl) * | 2017-10-19 | 2023-03-06 | Genera Istrazivanja D.O.O. | Autologiczny substytut przeszczepu kości |
| CN110559483A (zh) * | 2018-06-06 | 2019-12-13 | 广州溯原生物科技有限公司 | 一种3d打印技术制备的松质骨仿生支架的设计与应用 |
| CN110684710A (zh) * | 2019-11-23 | 2020-01-14 | 吉林省蔚来生物科技有限公司 | 一种骨膜生物支架与异体种子细胞复合的培养方法 |
| CN112472869B (zh) * | 2020-11-23 | 2022-11-08 | 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院 | 一种用于治疗感染性大段骨缺损组织工程骨支架及其制备方法和应用 |
| CN112587731B (zh) * | 2020-12-03 | 2022-06-24 | 广东省医疗器械研究所 | 一种复合支架及其制备方法和应用 |
| CN115702951B (zh) * | 2021-08-10 | 2024-05-31 | 上海交通大学医学院附属第九人民医院 | 基于多孔水凝胶材料构建的血管化组织工程骨及其应用 |
| CN114569539A (zh) * | 2022-01-24 | 2022-06-03 | 赵振群 | 一种新型抗菌素释缓系统、制备方法及其应用 |
| CN114712567A (zh) * | 2022-03-11 | 2022-07-08 | 中国人民解放军联勤保障部队第九二七医院 | 一种可降解的引导骨再生生物膜及其制备方法和应用 |
| CN117618654A (zh) * | 2023-12-08 | 2024-03-01 | 中维化纤股份有限公司 | 一种抗菌促血管生成尼龙6材料及其制备方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1304711A (zh) * | 2000-12-15 | 2001-07-25 | 华西医科大学附属第一医院 | 生物衍生组织工程骨及其制备方法 |
| CN1386478A (zh) * | 2001-05-23 | 2002-12-25 | 中国科学院化学研究所 | 组织工程用复合结构细胞支架及其制法和用途 |
-
2006
- 2006-12-22 CN CN2006100953328A patent/CN1973910B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1304711A (zh) * | 2000-12-15 | 2001-07-25 | 华西医科大学附属第一医院 | 生物衍生组织工程骨及其制备方法 |
| CN1386478A (zh) * | 2001-05-23 | 2002-12-25 | 中国科学院化学研究所 | 组织工程用复合结构细胞支架及其制法和用途 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 席庆,马春敏,曹罡,毛天球.成骨细胞接种于珊瑚体外培养的扫描电镜观察.现代康复5 10.2001,5(10),62-63. * |
| 栗向东,胡蕴玉,徐修礼.庆大霉素重组合异种骨复合体的制备及其药物的体内释放特性.第四军医大学学报20 1.1999,20(1),59-61. |
| 栗向东,胡蕴玉,徐修礼.庆大霉素重组合异种骨复合体的制备及其药物的体内释放特性.第四军医大学学报20 1.1999,20(1),59-61. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103768657A (zh) * | 2012-10-24 | 2014-05-07 | 上海交通大学医学院附属第九人民医院 | 冻干海藻糖磷酸钙bmp-2缓释材料及其制备方法 |
| CN110101914A (zh) * | 2019-05-04 | 2019-08-09 | 西北工业大学 | 一种预血管化的双相人工骨支架及其制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN1973910A (zh) | 2007-06-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1973910B (zh) | 一种组织工程骨 | |
| US11878090B2 (en) | Solid substrates for promoting cell and tissue growth | |
| Yin et al. | Induction of mesenchymal stem cell chondrogenic differentiation and functional cartilage microtissue formation for in vivo cartilage regeneration by cartilage extracellular matrix-derived particles | |
| DeBruijn et al. | Bone induction by implants coated with cultured osteogenic bone marrow cells | |
| Kneser et al. | Tissue engineering of bone | |
| US6884621B2 (en) | Method and carrier for culturing multi-layer tissue in vitro | |
| EP2442749B1 (en) | Solid forms for tissue repair | |
| JP4406283B2 (ja) | 組織再生用基材、移植用材料及びその製法 | |
| US20110293584A1 (en) | Tissue Regeneration | |
| JP2005524426A (ja) | 血管新生が促進された移植片構成物 | |
| WO2005011765A1 (ja) | 人工関節の作製方法 | |
| WO2011064724A1 (en) | Biomimetic composite materials, preparation process thereof and use thereof to produce mono-, bi- or multi -layer structures for the regeneration of bone, cartilaginous and osteocartilaginous tissue | |
| Francois et al. | Biomaterials and scaffolds for musculoskeletal tissue engineering | |
| Gleeson et al. | Composite scaffolds for orthopaedic regenerative medicine | |
| Song et al. | Fabrication and development of artificial osteochondral constructs based on cancellous bone/hydrogel hybrid scaffold | |
| Zhao et al. | Irregular bone defect repair using tissue-engineered periosteum in a rabbit model | |
| WO2003070290A1 (fr) | Biomateriau composite contenant de la phospholine | |
| Moran et al. | Biofunctional materials for bone and cartilage tissue engineering | |
| CN115845138A (zh) | 一种促进血管再生的高成骨活性骨修复材料制备方法和应用 | |
| JP2006116212A (ja) | 間葉系組織再生誘導用シート及びその製造方法 | |
| RU86455U1 (ru) | Биоинженерная конструкция | |
| Feng et al. | Bone regeneration combining platelet rich plasma with engineered bone tissue | |
| Pathak et al. | Bone tissue engineering: latest trends and future perspectives | |
| Xi et al. | Reconstruction of caprine mandibular segmental defect by tissue engineered bone reinforced by titanium reticulum | |
| Goswami et al. | Recent Advances in Tissue Engineering Scaffolds and Commercial Applications |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20100421 |