CN1963510A - 一种鼠疫菌f1抗体胶体金检测试纸条 - Google Patents

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刘明
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Abstract

本发明提供了一种能检测鼠疫菌F1抗体的快速检测试纸条。它是在硝酸纤维膜(NC膜)上，包被鼠疫菌F1抗原及抗鼠疫菌F1多克隆抗体，结合胶体金标记的鼠疫菌F1抗原，应用膜层析双抗原夹心法，检测人和易感动物血清标本中鼠疫菌F1抗体水平。应用本发明试纸条检测，操作简单，特异准确，且方便快捷，10－15分钟判读结果，不需特殊仪器设备，也不需专业培训，适合医院等基层单位，适合大规模的流行病学调查，适合生物反恐的需要。

Description

一种鼠疫菌F1抗体胶体金检测试纸条
技术领域
本发明属于生物检测领域，具体涉及一种鼠疫菌F1抗体检测试纸条及其应用。
背景技术
对于鼠疫菌F1抗体的检测，目前常用的方法有间接血凝法(PHA)和酶联免疫吸附法(ELISA)。但以上方法均存在着操作复杂，时间长，需要仪器设备、需要专业人员在有条件的实验室进行等，不适于基层单位和边远地区，不适合流调和反恐的需要。
发明内容
(一)、要解决的技术问题
本发明的目的是提供一种方便、快捷地，用于检测鼠疫菌F1抗体的试纸条，以克服现有技术操作复杂、繁琐、时间长、需要仪器、设备、标本需要冷藏等不足。
(二)、技术方案
本发明提供了一种检测试纸条，它包含：
(1)包被鼠疫菌F1抗原和抗鼠疫菌F1多克隆抗体二条带的硝酸纤维膜；
(2)含有胶体金标记的鼠疫菌＝F1抗原的玻璃纤维膜。
优选的本发明所述试纸条，它还包含：
(1)反应支持物；
(2)吸水垫；
(3)金标抗原保护膜。
其中反应支持物优选PVC板；吸水垫优选滤油纸；金标抗原保护膜同时具有吸水功能，优选用聚脂膜、玻璃纤维或滤纸纤维。
本发明还公开了所述试纸条在检测鼠疫菌F1抗体中的应用。
本发明的技术方案是：采用纯化的鼠疫菌F1抗原和抗鼠疫菌F1多克隆抗体分别固相于硝酸纤维膜上(NC膜)，结合胶体金标记的鼠疫菌F1抗原，应用膜层析双抗原夹心法的原理检测血清中的鼠疫菌F1抗体。
(三)、有益效果
用本发明的试纸条检测鼠疫菌F1抗体方便、快速、简捷，不需特殊仪器设备，不需专业培训，结果清晰易辨，操作简单，易于推广，适合基层，适合于大批量检测，适合流行病学调查，适合生物反恐的需要，对血清中的鼠疫菌F1抗体检测提供了一个好的方法。
附图说明
图1：A本发明试纸条的正面示意图；
B本发明试纸条的侧面示意图；其中，
1：吸水垫；
2：硝酸纤维膜(T：包被鼠疫菌F1抗原的条带；C：包被抗鼠疫菌F1的多克隆抗体的质控条带)；
3：含有胶体金标记鼠疫菌F1抗原的玻璃纤维膜；
4：金标抗原保护膜；
5：反应支持物。
图2：检测结果示意图；其中，
从左至右依次为：T、C两条线显色为阳性；C一条线显色为阴性；T、C两条线均未显色为无效。
具体实施方式
通过下面给出的本发明的具体实施例和实验例可以进一步清楚地理解本发明，但不是对本发明的限定。
实施例1  鼠疫菌F1抗体检测试纸条(参见图1)
反应支持物为6.5cm×0.4cm PCV板；吸水垫为2cm×0.4cm的滤油纸；1.8cm×0.4cm的硝酸纤维膜依次包被抗鼠疫菌F1抗原的多克隆抗体、鼠疫菌F1抗原；含有0.4cm×0.4cm胶体金标记的鼠疫菌F1抗原的玻璃纤维膜；金标抗原保护膜为2.7cm×0.4cm的聚脂膜；即形成了鼠疫菌F1抗体检测试纸条。
实施例2  鼠疫菌F1抗体检测试纸条(参见图1)
反应支持物为6.5cm×0.4cm PCV板；吸水垫为2cm×0.4cm的滤油纸；1.8cm×0.4cm的硝酸纤维膜依次包被抗鼠疫菌F1抗原的多克隆抗体、鼠疫菌F1抗原；含有0.4cm×0.4cm胶体金标记的鼠疫菌F1抗原的玻璃纤维膜；金标抗原保护膜为2.7cm×0.4cm的玻璃纤维；即形成了鼠疫菌F1抗体检测试纸条。
实施例3  鼠疫菌F1抗体检测试纸条(参见图1)
反应支持物为6.5cm×0.4cm PCV板；吸水垫为2cm×0.4cm的滤油纸；1.8cm×0.4cm的硝酸纤维膜依次包被抗鼠疫菌F1抗原的多克隆抗体、鼠疫菌F1抗原；含有0.4cm×0.4cm胶体金标记的鼠疫菌F1抗原的玻璃纤维膜；金标抗原保护膜为2.7cm×0.4cm的滤纸纤维；即形成了鼠疫菌F1抗体检测试纸条。
实施例4  检测方法(参见图2)
1∶20稀释的血清样本150μl，用滴管加入实施例1试纸条“4”处，样品中的液体吸起上行，10-15分钟判读结果：
如含有鼠疫菌F1抗体，则与试纸条上胶体金标记的鼠疫菌F1抗原形成相应的复合物，上行与包被在硝酸纤维膜上的鼠疫菌F1抗原结合，形成红色线条，即在“T”处形成红色条带。
无论是否含有相对应的抗体，胶体金标记鼠疫菌F1抗原，继续向上爬行与包被在膜上的抗鼠疫菌F1多克隆抗体形成红色沉淀线，即在“C”处形成红色条带。此线是质控线，如胶体金失效，此线就不会出现，说明试纸条失效。
阳性结果会出现2条红色沉淀线，阴性结果出现1条红色沉淀线，如不出现线条说明试纸条失效。
实验例1  临床检测结果
经检测254例人和鼠血清标本，与目前常用的间接血凝法(PHA，T1a)和酶联免疫吸附法(ELISA，T1b)比较，试纸条法(T2)灵敏度分别为93％、96％，特异度100％。结果见下表。
间接血凝法(T1a)和ELISA法(T1b)与试纸条法(T2)对比实验统计表
  阳性     阴性
  T1a   113     141
  T1b   109     141
  T2   105     141
  灵敏度T2/T1a 93％T2/T1b 96％     特异度100％100％

Claims (6)

1、一种检测试纸条，其特征在于，它包含：
(1)包被鼠疫菌F1抗原和抗鼠疫菌F1多克隆抗体二条带的硝酸纤维膜；
(2)含有胶体金标记鼠疫菌F1抗原的玻璃纤维膜。
2、根据权利要求1所述试纸条，它还包含：
(1)反应支持物；
(2)吸水垫；
(3)金标抗原保护膜。
3、根据权利要求2所述试纸条，其中反应支持物选用PVC板。
4、根据权利要求2所述试纸条，其中吸水垫选用滤油纸。
5、根据权利要求2所述试纸条，其中金标抗原保护膜选用聚脂膜、玻璃纤维或滤纸纤维。
6、权利要求1-5之任一所述试纸条在检测鼠疫菌F1抗体中的应用。
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