CN1947732A - 食用菌活性物质的原态提取方法 - Google Patents

Abstract

本发明所述的食用菌活性物质的原态提取方法，属于食用菌提取物的制备领域。其整个过程均在20℃以下的低温下进行，包括食用菌原料脱水粉碎、脂提、醇提、水提、提取液超滤分离、干燥、混合后冷冻保藏步骤。本发明采用全程低温，基本控制了水解、酶解等化学反应，抑制了微生物的繁殖和有机溶剂的挥发，弥补了低温下溶解率降低的缺陷。根据醚与醇、醇与水之间的相溶性，以及醚、醇对微生物的抑杀作用特点，采用从脂提到醇提再到水提的次序进行连续的提取操作，不仅增加了提取率，缩短了提取时间，排除了外界微生物的干扰和危害，还可进一步保持食用菌中活性物质的原始结构状态，以维持其天然药理作用。

Description

食用菌活性物质的原态提取方法

【技术领域】

本发明属于食用菌提取物的制备领域。

【背景技术】

食用菌中含有多种生物活性成分，常见的包括多糖类、三萜类、甾醇类、甙类、大环内酯类、多肽类、生物碱、黄酮类、油脂类等多种成分。由于这些活性物质多具有抗氧化衰老、提高免疫力、预防心血管疾病等功能作用而日益受大众青睐，因此食用菌中活性物质提取方法的研究也引起人们的广泛关注。传统的提取方法主要有煎煮法和浸渍法，煎煮法是将物料粉碎后根据质地不同加入适量的清水，充分浸润1～2小时，然后煎煮沸腾1～2小时，粗滤后料渣再重复以上步骤2～3次，最后将所有滤液静置和精滤得到提取液；浸渍法是将物料粉碎后根据质地加入适量的溶剂(如：水、乙醇、石油醚等)，在常温或定温(冷浸在常温下；热浸若溶媒是乙醇在40～60℃，若溶媒是水在60～80℃)下密闭浸渍6～24小时，适时搅拌，然后分离、压榨、过滤得提取液。与煎煮法相同，提取液通常采用烘烤和风干的方法浓缩干燥。传统的提取方法存在许多明显的缺陷：1、活性物质有水溶性的(如：生物碱盐、黄酮等)，有醇溶性的(如：油脂、甾醇等)，有脂溶性的(如：萜类、游离生物碱、甙类等)，故单一的提取液只提取部分活性物质，造成其他有效成分的流失；2、各成分间在温度较高时容易发生络合、水解、氧化、还原等化学反应，使原始成分发生改变；3、常温下以水为溶剂提取时，提取液容易发生酶解和因微生物繁殖而变质；4、石油醚和乙醇温度较高时易挥发，甚至有蒸汽发生燃烧的危险。

【发明内容】

本发明旨在提供食用菌活性物质的原态提取方法，该方法能够在提取过程中抑制对生物体组分的水解、酶解等降解作用；并在无须添加防腐剂的情况下，避免了提取过程中微生物繁殖对提取的干扰和危害；同时能够充分地提取出食用菌的活性物质。

本发明所述的提取方法，其工艺方法如下：

1、原料低温脱水

采用冷冻和负压的方法，将新鲜的食用菌原料脱水干燥。

2、冷却粉碎

采用水冷式粉碎机，控制在20℃以下粉碎食用菌原料。

3、低温(＜20℃)脂提

该步骤优选石油醚或甘油或乙醚为溶剂，溶剂体积用量为食用菌体积2～5倍，浸提粉碎食用菌原料中的脂溶性成分，加入超声波震荡，加快细胞内容物析出。浸提1-4小时后用滤纸抽滤。重复浸提滤渣1-2次，合并滤液，将滤渣稍阴干。

4、低温(＜20℃)醇提

该步骤优选乙醇为溶剂，溶剂体积用量为食用菌原料体积2～5倍，浸提粉碎食用菌原料中的醇溶性成分。利用乙醇与脂提溶剂的相溶性，可不必等上述滤渣干透。加入超声波震荡，加快细胞内容物析出。浸提1-4小时后用滤纸抽滤。重复浸提滤渣1-2次，合并滤液，将滤渣稍阴干。

5、低温(0～10℃)水提

采用纯水为溶剂，溶剂体积用量为食用菌体积的2～5倍，浸提粉碎食用菌原料中的水溶性成分。将上述滤渣加入适量纯水浸提，利用醇提溶剂与水的相溶性，可不必等滤渣干透。加入超声波震荡，加快细胞内容物析出。浸提1-4小时后用滤纸抽滤。重复操作1-2次，合并滤液。

6、超滤分离

采用可耐受有机溶剂的超滤装置，将提取的滤液中分子量小于6000和大于200万道尔顿的成分去除，得浓缩液。

7、冷冻干燥

用冷冻干燥机将分离出的浓缩液干燥后，暂存于干燥皿。

8、低温混合

将三种浸提方法的产物在20℃以下用绞碎机搅拌混合。

9、冷冻保藏

将成品装于玻璃或塑料容器内充氮密封，-15℃以下保藏。

本发明是在浸渍法的基础上，进行从结构到程序、从条件到目标的全面创新。采用全程低温的条件，基本控制了水解、酶解等化学反应，抑制了微生物的繁殖和有机溶剂的挥发，同时为弥补低温下溶解率降低的缺陷，浸渍时应用超声谐振法加大溶出率。根据醚与醇、醇与水之间的相溶性，以及醚、醇对微生物的抑杀作用特点，采用从脂提到醇提再到水提的次序进行连续的提取操作，不仅增加了提取率，缩短了总的提取时间，排除了外界微生物的干扰和危害，还可进一步保持食用菌中活性物质的原始结构状态，以维持其天然药理作用。

本发明所述的提取方法主要有以下优点：

1、把食用菌中活性物质提取的整个过程，包括物料的脱水、粉碎、浸提、分离、干制和保藏工序，控制在低温状态下进行。与采用高温或常温条件的传统提取方法相比，抑制了对生物体组分的水解、酶解等降解作用。同时，在无须添加防腐剂的情况下，避免了提取过程中微生物繁殖对提取的干扰和危害，还可降低有机溶剂的挥发。

2、文献指出，经过水提、醇提和脂提后，食用菌中的绝大部分可溶性成分可释出。所以，我们直接将这三种提取方法结合成三联提取法，根据溶剂间两两的相溶性进行连续操作，调整浸提次序(脂提→醇提→水提)，缩短浸提时间，减少微生物侵染浸提液的机会。

3、将提取物按分子量大小进行分离，去除水、无机盐、单糖等主要起营养作用的小分子，以及纤维类物质等人体难以消化吸收的大分子，提高活性物质的纯度。

4、通过低温提取和三联提取，使生物活性提取物较大程度上保持原始的结构和组合状态。为研究、生产提供符合生物体平衡、多元配合等传统中医药理论的原料。

【附图说明】

图1是表示本发明所述的从食用菌中提取活性物质方法的流程图。

【具体实施方式】

实施例1：

1、全灵芝活性成分的提取

在18℃的空调车间内将全灵芝(灵芝加工品，粉状)(广东粤微食用菌技术有限公司生产)1kg加入3L石油醚在超声波洗涤槽内浸渍1小时，过滤，滤渣加1L石油醚浸洗后再过滤，重复操作一次，合并滤液用超滤设备浓缩得浓缩液，浓缩液用冷冻干燥机干燥后的产物(A)暂存于干燥皿。滤渣阴干1小时后加入3L 95％乙醇在超声波洗涤槽内浸渍2小时，过滤，滤渣分两次各加1L乙醇浸洗后再过滤，合并滤液用超滤设备浓缩得浓缩液，浓缩液用冷冻干燥机干燥后的产物(B)暂存于干燥皿。滤渣阴干1小时后加入3L经冰箱降温至4℃的纯水在移入4℃冰箱的超声波洗涤槽内浸渍2小时，过滤，滤渣分两次各加1L低温纯水浸洗后再过滤，合并滤液用超滤设备浓缩得浓缩液，浓缩液用冷冻干燥机干燥得产物(C)。用绞碎机混合浓缩液冷冻干燥后的产物(A)、(B)、(C)，得216g提取物，装于玻璃瓶内充氮密封，-20℃冰箱保藏。

2、对比实验

用传统的水提粗多糖的方法提取上述全灵芝的活性成分，并将其与上述本发明所得到全灵芝活性成分进行对比，其结果如下：

由上表可知，全灵芝的提取物得率和功能试验阳性率均比对应的常规提取方法高，成分分析的活性物质种类明显增加。

实施例2：

1、云芝活性成分的提取

用装40目筛的水冷式低温粉碎机在18℃条件下将云芝干燥子实体(菇体)粉碎。在18℃的空调车间内将云芝子实体粉1kg加入1.5L石油醚在超声波洗涤槽内浸渍1小时，过滤，滤渣加1L石油醚浸洗后再过滤，重复操作一次，合并滤液用超滤设备浓缩得浓缩液，浓缩液用冷冻干燥机干燥后的产物(A)暂存于干燥皿。滤渣阴干1小时后加入1.5L 95％乙醇在超声波洗涤槽内浸渍2小时，过滤，滤渣分两次各加1L乙醇浸洗后再过滤，合并滤液用超滤设备浓缩得浓缩液，浓缩液用冷冻干燥机干燥后的产物(B)暂存于干燥皿。滤渣阴干1小时后加入1.5L经冰箱降温至4℃的纯水在移入4℃冰箱的超声波洗涤槽内浸渍2小时，过滤，滤渣分两次各加1L低温纯水浸洗后再过滤，合并滤液用超滤设备浓缩得浓缩液，浓缩液用冷冻干燥机干燥后得产物(C)，用绞碎机混合冷冻干燥后的产物(A)、(B)、(C)，得48g提取物，装于玻璃瓶内充氮密封，-20℃冰箱保藏。

2、对比实验

用传统的水提粗多糖的方法提取上述云芝的活性成分，并将其与上述本发明所得到云芝活性成分进行对比，其结果如下：

由上表可知，云芝的提取物得率和功能试验阳性率均比对应的常规提取方法高，成分分析的活性物质种类明显增加。

实施例3：

1、香菇活性成分的提取

将新鲜香菇在速冻设备中脱水6小时，用装20目筛的水冷式低温粉碎机在18℃条件下将香菇子实体(菇体)粉碎。在18℃的空调车间内将香菇子实体粉1kg加入2L石油醚在超声波洗涤槽内浸渍1小时，过滤，滤渣分两次各加1L石油醚浸洗后再过滤，合并滤液用超滤设备浓缩得浓缩液，浓缩液用冷冻干燥机干燥后的产物(A)暂存于干燥皿。滤渣阴干1小时后加入2L 95％乙醇在超声波洗涤槽内浸渍2小时，过滤，滤渣分两次各加1L乙醇浸洗后再过滤，合并滤液用超滤设备浓缩得浓缩液，浓缩液用冷冻干燥机干燥后的产物(B)暂存于干燥皿。滤渣阴干1小时后加入2L经冰箱降温至4℃的纯水在移入4℃冰箱的超声波洗涤槽内浸渍2小时，过滤，滤渣分两次各加1L低温纯水浸洗后再过滤，合并滤液用超滤设备浓缩得浓缩液，浓缩液用冷冻干燥机干燥得产物(C)。用绞碎机混合冷冻干燥后的产物(A)、(B)、(C)，得133g提取物，装于玻璃瓶内充氮密封，-20℃冰箱保藏。

2、对比实验

用传统的水提粗多糖的方法提取上述香菇的活性成分，并将其与上述本发明所得到香菇活性成分进行对比，其结果如下：

由上表可知，香菇的提取物得率和功能试验阳性率均比对应的常规提取方法高，成分分析的活性物质种类明显增加。

Claims (10)

1、食用菌活性物质的原态提取方法，包括食用菌脱水粉碎、提取、提取液过滤浓缩并保藏的过程，其特征在于整个过程均在20℃以下的低温中进行，并依次进行醇提、酯提、水提，再分别将所得的醇提液、酯提液、水提液过滤浓缩和冷冻干燥后搅拌混合。

2、如权利要求1所述的提取方法，其特征在于脂提的溶剂为石油醚、甘油或乙醚中的一种。

3、如权利要求1所述的提取方法，其特征在于醇提的溶剂为乙醇。

4、如权利要求1所述的提取方法，其特征在于整个过程除水提步骤外均在18℃中进行。

5、如权利要求1所述的提取方法，其特征在于水提是在0～10℃中进行的。

6、如权利要求5所述的提取方法，其特征在于水提是在4℃中进行的。

7、如权利要求1所述的提取方法，其特征在于脂提、醇提及水提的提取溶剂的体积用量各为物料体积的2～5倍。

8、如权利要求1所述的提取方法，其特征在于脂提、醇提及水提的提取过程中均加入超声波震荡。

9、如权利要求1所述的提取方法，其特征在于提取液的过滤步骤采用可耐受有机溶剂的超滤装置分别超滤脂提液、醇提液及水提液，去除提取液中分子量小于6000和大于200万道尔顿的成分。

10、如权利要求1所述的提取方法，其特征在于混合后的提取产物置于-15℃以下、充氮气保藏。