CN1943587A - 一种防治兔传染性鼻炎病药物缓释剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种防治兔传染性鼻炎病药物缓释剂及其制备方法，属于家畜疫病防治技术领域。该剂以阿奇霉素与β环糊精为原料，按重量份1∶1～2配制而成；方法是先把阿奇霉素与无水乙醇按重量体积比为1克∶7～9毫升混合，搅拌，溶解；把β环糊精与蒸馏水按重量体积比为1克∶0.5～1.5毫升混合，研磨成糊状；再把两者相混、搅拌、包合、干燥、粉碎，即成缓释粉剂产品；应用时配成针剂。该剂具有用量少(按0.5ml/kg体重剂量注射)，成本低，治疗见效快(1～4天)，防治时间长(二个月左右)，低毒，效果好等特点，能同时防治兔波氏杆菌和/或巴氏杆菌，可在兔传染性鼻炎病的防治中推广应用。

Description

一种防治兔传染性鼻炎病药物缓释剂及其制备方法

                            技术领域

本发明涉及家畜疫病防治技术领域，尤其涉及一种由波氏杆菌及巴氏杆菌感染引发的兔传染性鼻炎病的防治药物缓释剂及其制备方法。

                            背景技术

兔传染性鼻炎病由巴氏杆菌、波氏杆菌混合引起，在幼兔期易与球虫病混合感染，而成兔以后，则易与萄葡球菌混合感染。兔传染性鼻炎是家兔经常发生的疾病之一，发病率可达20％～70％。引起应激反应的因素，可能有气候寒冷、妊娠、并发症和实验应激等。该病是规模化养殖场常见，又比较头疼的一种细菌性传染病；一般为散发或地方性流行，一年四季都有发生。该病的潜伏期不定，急性型的为数小时至2天，慢性型的为5～10天。

兔传染性鼻炎病以浆液性、粘液性或粘液脓性鼻液为特征。初期分泌物为浆液性的，较稀薄，随着病情发展，渐变为浆液粘液性或粘液脓性，较浓稠，鼻粘膜充血、潮红。由于患兔鼻腔发炎常出现打喷嚏，咳嗽、鼻塞性杂音等症状，饲喂或运动时加剧。在病兔舍静听，常可听到来自不同方向的喷嚏声，有的病兔连续打几次。由于炎症及分泌物刺激鼻粘膜，引起瘙痒，病兔常用两前爪挠鼻端，渗出物使局部被毛湿润并失去光泽，粘稠的分泌物黏结兔毛使之成团，并在鼻孔周围形成结痂。部分兔呼吸受到影响，渐陷于进行性消瘦而造成死亡。由于病兔常抓擦鼻部，可将病菌带到眼内、耳内或皮下，进而引起化性结膜炎、中耳炎等并发症；当细菌下行到下呼吸道时，可以引起肺炎、脓胸等。迅速致死的急性型以原发性鼻炎为特征，随后很快出现发热症状，部分鼻炎患兔可能转为急性败血症死亡。而粘液脓性分泌物的病兔很少见到自愈，且不易治疗。怀孕后期的母兔常常因呼吸困难而死亡。

兔传染性鼻炎病的传染源主要是病兔的分泌物，排泄物，排出细菌，带菌动物本身也是传染源，若将病兔或带菌兔引入兔群，平时不表现症状，但当饲养管理和卫生条件不好，笼舍过分拥挤，气候骤变，强烈刺激性气体刺激，长途运输及其他疾病等应激因素的作用，机体抵抗力降低而引发本病，发病率在60％以上，渐陷于进行性消瘦而造成死亡。特别是粪便的分解，产生大量的氨气、硫化氢等有害气体，刺激家兔鼻腔粘膜发炎而诱发本病。传染性鼻炎主要发生在春秋两季，这是由于这两个季节气温不稳定、干燥、寒冷容易诱发家兔患病。传染性鼻炎的发病率以冬季最高，秋季和春季次之，夏季最低，但四季的差异不显著。流粘液性或脓性鼻液，鼻炎长期不愈，呼吸加快，食欲不振，逐渐消瘦，病程数周至数月，即开始发生死亡，防治不及时，可造成全群覆灭。

兔传染性鼻炎发病率因品种与年龄的不同而不同，其中，品种以肉兔最低，皮兔次之，毛兔最高，这主要是由遗传因素造成的；而年龄，随着月龄的增加发病率逐渐提高。该病主要可分成鼻炎型与支气管肺炎型：鼻炎型表现鼻粘膜潮红，附有浆液性或粘液性分泌物质；支气管肺炎型表现在支气管内粘膜充血、出血，管腔内有粘液性或脓性分泌物，并在肺部有大小不等、数量不一的脓肿，有时在胸腔浆膜及肝、肾、睾丸等处也有脓肿；此外尚可见化脓性胸膜炎、心包炎。

长期以来，生产上治疗兔传染性鼻炎病的主要药物与方法是抗生素或磺胺药进行口服或注射。其中，抗生素类药：卡那霉素每千克体重10～30毫克，每日2次，连用3～4天，肌肉注射；青霉素40万单位与链霉素500毫克联合注射，或每千克体重用青霉素0.5～1万单位，每日1次，连续5天肌肉注射；庆大霉素每次1～2万单位，每日2次，连用3～4天，肌肉注射；氯霉素每千克体重10～25毫克，每日2次，连用3～4天，肌肉注射；链霉素每千克体重0.5～1万单位，每日2次，连用3～4天，肌肉注射；磺胺类药：磺胺嘧啶每千克体重50～200毫克，每日2次，连用5天，肌肉注射；酞酰磺胺噻唑每千克体重200～300毫克，每日2次，连用5天，口服；磺胺甲嘧啶(SM1)片剂每片500毫克，内服，首次量每千克体重200毫克，维持量每千克体重100毫克，每12～24小时1次；磺胺喹噁啉，每吨饲料内加入225克，饲用。但由于抗生素及磺胺类药的长期大量应用，一方面口服药和普通针剂药用量大，代谢快，防治成本高，又费工费时，而且仅有临时治疗作用(一般防治期仅有1～3天)，而无长期持续杀虫效果，故在应用中需反复多次或长期服用方能见效；另一方面，长期服用抗生素及磺胺类药物，必然在兔体内蓄积，加速产生抗药性，使疗效逐步降低，人们食用也极不安全，效果很不理想。因此，养兔业迫切希望有一种长效的防治兔感染性鼻炎病的新型药物。

据报道(健康网，公众健康)，阿奇霉素是一种新型的半合成大环内酯类抗生素，该药具有抗菌谱较广，对某些细菌表现为快速杀菌作用，口服后吸收迅速、生物利用度高、体内分布广泛、细胞内游离浓度高(在人体扁桃体、肺、前列腺等组织中浓度可达同期血浓度的10～100倍)，血消除半衰期长(为35～48小时)，不良反应轻、耐受性好等优点。在儿科，可用于治疗多种细菌、支原体、衣原体引起的感染，如化脓性链球菌引起的急性咽炎、急性扁桃体炎；敏感细菌引起的鼻窦炎、中耳炎、急性支气管炎；肺炎链球菌、流感嗜血杆菌以及肺炎支原体所致的肺炎；沙眼衣原体及非多种耐药淋病奈瑟菌所致的尿道炎以及敏感细菌引起的皮肤软组织感染等，效果较好。其不良反应主要是胃肠道反应，如腹痛、腹泻(稀便)、上腹部不适、恶心、呕吐等，但发生率明显较红霉素低，偶可出现轻至中度腹胀、头昏、头痛及发热、皮疹、关节痛等过敏反应，少数患者可出现一时性中性粒细胞减少、血清转氨酶升高。一般用量：治疗中耳炎、肺炎，按每日每千克体重5毫克计算，一日最大量不超过0.25克，顿服，首次剂量加倍；治疗咽炎、扁桃体炎，按每日每千克体重12毫克计算，一日最大量不超过0.5克，顿服。又据报道(中国药品交易网)，治疗社区获得性肺炎：成人用量为每次0.4克，每天1次，至少连续用药2天。继之换用阿奇霉素口服制剂0.5克/天，7～10天为一疗程，但未见有应用阿奇霉素防治兔鼻炎(波氏杆菌及巴氏杆菌)病的资料报道。为此，本发明人首先采用阿奇霉素以40mg/kg体重拌料口服给药方式，饲喂5天，停10天，试验2个月，观察对兔波氏杆菌和巴氏杆菌作了预备性防治效果试验，明确该药对兔波氏杆菌和巴氏杆菌均有较好的治疗效果；但也发现存在以下问题：一是药物拌料口服给药方式对大批量饲养场来说虽然方便，但由于其中因兔患病而采食量减少，尤其病情严重的病兔甚至停止吃饲料，这就达不到进食有效剂量药物的要求，也就难以达到治疗效果；二是阿奇霉素药效虽高，但其毒性也较大，因此，在同一饲养群体中经常出现，健康兔因采食量过大而引起中毒甚至死亡，而发病兔则因采食量过小而治疗效果较差甚至无效；三是阿奇霉素常规剂型虽有较好的短期治疗效果，但无长期持续杀菌效果，一旦停药又易重复感染波氏杆菌及巴氏杆菌，而长期连续服用该药，则又必然产生抗药性的问题；同时，发明人在研制该药物缓释剂的过程中，遇到的难题是药物包合率低，仅71％左右，及在应用试验中效果不稳定等现象。

                            发明内容

本发明的目的是针对上述存在的问题，找到一种新的高效杀波氏杆菌及巴氏杆菌药物，并利用β环糊精能提高药物溶解性、降低毒性、缓慢释放药物，延长药效等优点，进行优化配比，提供一种用量少，成本低，药物释放时间长，低毒，防治效果好，能同时防治兔波氏杆菌及巴氏杆菌或其中任何一种细菌的药物缓释剂产品；本发明的另一目的是提出该缓释剂的制备方法。

本发明目的是通过下述技术方案予以实现：

一种防治兔传染性鼻炎病药物缓释剂，以阿奇霉素与β环糊精为原料，按重量份1∶1～2配制而成。

所述药物缓释剂的优化配方为，阿奇霉素与β环糊精按重量份1∶1.5配制而成。

一种制备防治兔传染性鼻炎病药物缓释剂的方法，按如下步骤进行：

(1)称量后，将杀波氏杆菌及巴氏杆菌药剂阿奇霉素与乙醇，按重量体积比为1克∶7～9毫升混合，搅拌至药物完全溶解，备用；

(2)将β环糊精与蒸馏水，按重量体积比为1克∶0.5～1.5毫升混合，研磨20～40分钟成糊状，备用；

(3)将步骤(1)阿奇霉素溶液倒入步骤(2)糊状β环糊精中，搅拌30～60分钟，在30～40℃温度下自然蒸发或真空干燥，粉碎，80～90目过筛，成粉状缓释剂；

(4)将步骤(3)粉状缓释剂分装，封口即成粉状缓释剂产品；

(5)将步骤(4)粉状缓释剂与生理盐水按重量体积比为1.6～2.4克∶20毫升配制成缓释针剂产品。

本发明的有益效果：

一是通过本方法将杀波氏杆菌及巴氏杆菌药物阿奇霉素按适当比例包合到β环糊精糖苷键环状结构中，形成超微囊状包合物，药物的包合率由以往的71％左右提高到99.7％；使该缓释剂内能精确定量地包含有按设计要求的药物含量指标；二是经试验表明，该缓释剂按0.5ml/kg体重剂量作皮下肌肉注射，在2个月内对波氏杆菌或巴氏杆菌及两者混合感染者均有良好的治疗与预防效果(见试验例表1)，一般1～4天即见治疗效果，其有效防治期长达2个月而无重复感染，节省防治药费开支97.5％(按4个疗程，每个疗程为5天计)；三是该缓释剂用药量少，一次注射量(按其中含阿奇霉素20mg/kg体重计)仅是一天一次口服阿奇霉素(40mg/kg体重)用药量的一半，故可降低阿奇霉素用药成本97.5％(按1～4个疗程，每个疗程为5天计)。且缓释剂安全性高，降低了阿奇霉素原剂型药物的毒副作用，当注射阿奇霉素缓释剂的药量大于原口服药量1倍时，兔仍无任何副反应(见试验例表2)；四是使用方便，生产上易于推广应用；五是促进兔生长，注射用药后体重明显增加，防治效果见试验例表3。

                        具体实施方式

通过以下实施例将对本发明作进一步的详细说明，但这并不是对本发明的任何意义上的具体限止：

阿奇霉素：浙江金华立信医药化工有限公司生产，含量99％；

β环糊精：陕西省礼泉化工有限实业公司生产；

乙醇：杭州大方化学试剂厂生产，含量100％。

实施例1：(防治兔传染性鼻炎病药物缓释剂制备方法1)

(1)将粉状杀波氏杆菌及巴氏杆菌药剂阿奇霉素50克加入无水乙醇400毫升中，搅拌至药物完全溶解成透明液体；

(2)将粉状β环糊精75克加入蒸馏水50毫升中，研磨20分钟呈糊状；

(3)将阿奇霉素溶液倒入糊状β环糊精中，搅拌30分钟后，置30～40℃下直至干燥，粉碎后，80～90目过筛，即成粉状缓释剂124.8克；

(4)将粉状缓释剂按2克/每瓶分装，封口即成粉状缓释剂产品。

(5)将每瓶粉状缓释剂加20ml生理盐水，摇至药物全部湿润成悬浮液，即为缓释剂针剂。

实施例2：(防治兔传染性鼻炎病药物缓释剂制备方法2)

(1)将粉状杀波氏杆菌及巴氏杆菌药剂阿奇霉素50克加入无水乙醇350毫升中，搅拌至药物完全溶解成透明液体；

(2)将粉状β环糊精50克加入蒸馏水25毫升中，研磨30分钟呈糊状；

(3)将阿奇霉素溶液倒入糊状β环糊精中，搅拌40分钟后，置30～40℃下直至干燥，粉碎后，80～90目过筛，即成粉状缓释剂99.8克；

(4)将粉状缓释剂按1.6克/每瓶分装，封口，即成粉状缓释剂产品；

(5)将每瓶粉状缓释剂加20ml生理盐水，摇至药物全部湿润成悬浮液，即为缓释剂针剂。

实施例3：(防治兔传染性鼻炎病药物缓释剂制备方法3)

(1)将粉状杀波氏杆菌及巴氏杆菌药剂阿奇霉素50克加入无水乙醇450毫升中，搅拌至药物完全溶解成透明液体；

(2)将粉状β环糊精100克加入蒸馏水150毫升中，研磨40分钟呈糊状；

(3)将阿奇霉素溶液倒入糊状β环糊精中，搅拌60分钟后，置30～40℃下直至干燥，粉碎后，80～90目过筛，即成粉状缓释剂149.7克；

(4)将粉状缓释剂按2.4克/每瓶分装，封口，即成粉状缓释剂产品；

(5)将每瓶粉状缓释剂加20ml生理盐水，摇至药物全部湿润成悬浮液，即为缓释剂针剂。

试验例：(缓释剂与常规药物防治兔传染性鼻炎病药效对比试验)

选择由波氏杆菌及巴氏杆菌感染引起鼻炎，并伴有明显临床症状的病兔(40～50日龄)30只，随机分成3组，每组10只，分开单个饲养。分设为缓释剂注射组：采用实施例1、2或3所制备缓释剂针剂按0.5ml/kg体重注射，其中所含阿奇霉素药量为20mg/kg体重；口服组：阿奇霉素用药量为40mg/kg体重拌料，每个疗程口服5天，每天饲喂2次，停10天；不用药对照组。在试验前(0天)及试验中(2、6、10、20、30、40、50、60天)比较3组试验兔防治效果，记录试验兔的鼻孔周围被毛的湿润程度；记录试验兔的鼻孔分泌物的性质、数量；记录试验兔的食欲情况和吃料的多少及精神状况；记录呼吸次数，试验中如果有死亡的病兔立即解剖观察病理变化。

细菌染色镜检：将死兔的心血及肝脏、脾脏分别涂片作瑞氏染色后在显微镜下观察可见有两圆和周边着色较深，中央着色较浅的短杆菌革兰氏为阴性。

细菌培养：将死兔的心血及肝脏、脾脏捣碎物分别接种于普通琼脂，血液琼脂，和普通肉汤培养基上在37度恒温下培养，其结果是14～16小时在血液琼脂培养基上生长出灰白色、光滑的圆形菌落，16～18小时后普通琼脂培养基上长出灰白色，光滑湿的细小的菌落，16～18小时在普通肉汤培养基的试管底部有沉淀物，将这几种培养基上的菌落和肉汤培养基的试管浑浊物分别涂片染色，在显微镜观察到细菌形态与前者相同为支气管波氏杆菌和巴氏杆菌。

药效结果的判定：观察鼻孔周围被毛的变化，鼻孔分泌物的性质和数量，食欲和精神状态，呼吸次数和剖解变化为指标。症状全部消除，无鼻液、无喷嚏、无咳嗽，无鼻粘膜炎症消失判为转阴；症状明显减轻，几乎无鼻液、无喷嚏、鼻黏膜炎症比治疗前明显减轻，判为好转。症状减轻不明显，判为疗效不明显或无效。其结果见表1、表2、表3、表4。

由表1可见缓释剂组注射后第2天重症兔部分被毛开始干燥，干燥的范围逐渐增加；轻症兔完全干燥。口服组第2天重症兔鼻孔周围的被毛较湿，第6天部分被毛开始干燥，干燥的范围逐渐增加；轻症兔部分被毛开始干燥。康复的兔只基本干燥或完全干燥，外观已与健康兔相同；不给药的对照组在试验中鼻孔周围的被毛湿度逐渐增加，并且向周围的被毛蔓延，并发生缠结。

        表1    鼻孔周围被毛的变化

组别	用药前	用药后天数
										2	6	10	20	30	40	50	60
		缓释剂组	重症鼻孔周围的被毛非常湿	部分开始干燥	完全干燥	完全干燥	完全干燥	完全干燥	完全干燥									完全干燥	完全干燥
轻症鼻孔周围的被毛比较湿	完全干燥									完全干燥	完全干燥	完全干燥	完全干燥	完全干燥	完全干燥	完全干燥
			口服组	重症鼻孔周围的被毛非常湿	减轻	部分开始干燥	大部分干燥	完全干燥	完全干燥								完全干燥	完全干燥	完全干燥
轻症鼻孔周围的被毛比较湿	部分开始干燥	大部分干燥								大部分干燥	完全干燥	完全干燥	完全干燥	完全干燥	完全干燥
				不用药组	重症鼻孔周围的被毛非常湿	非常湿	非常湿被毛缠结	非常湿被毛缠结	被毛缠结							被毛缠结	被毛缠结	被毛缠结	被毛缠结
轻症鼻孔周围的被毛比较湿	比较湿	非常湿被毛缠结	非常湿被毛缠结							被毛缠结	被毛缠结	被毛缠结	被毛缠结	被毛缠结

        表2    鼻孔分泌物的性质和变化情况

组别	用药前	用药后天数
										2	6	10	20	30	40	50	60
		缓释剂组	重症大量浆液性分泌物	减少	减少	消失	消失	消失	消失									消失	消失
轻症少量浆液性分泌物	减少									消失	消失	消失	消失	消失	消失	消失
			口服组	重症大量浆液性分泌物	减少	减少	减少	减少	消失								消失	消失	消失
轻症少量浆液性分泌物	减少	减少								减少	消失	消失	消失	消失	消失
				不用药组	重症大量浆液性分泌物	大量浆液性分泌物	大量黏液性分泌物	大量黏液性分泌物	脓性							脓性	脓性	脓性	脓性
轻症少量浆液性分泌物	少量浆液性分泌物	大量浆液性分泌物	大量浆液性分泌物							大量浆液性分泌物	大量浆液性分泌物	大量浆液性分泌物	大量浆液性分泌物	大量浆液性分泌物

从表2看出，给药组则由大量浆液性分泌物逐渐减少并完全消失；缓释剂组分泌物减少较明显，并且很快消失；口服组分泌物出现减少，但效果较慢，实验结束，只有少数实验兔的分泌物完全消失，仍有部分病兔有少量分泌物；不给药组分泌物由浆液性变为黏液性严重者变为脓性。

        表3    治疗效果观察

组别	试验兔数(只)	转阴(只)	好转(只)	疗效不明显(只)	死亡(只)	康复率(％)
							缓释剂组	10	10	10	0	0	100
口服组	10	9	9	1	0	90
							不用药组	10	0	0	10	3	0

由表3可知缓释剂组全部转阴，康复率达100％，其效果最好；口服组有9只兔转阴，康复率达90％；不用药组未见兔好转，康复率为0。

        表4    食欲和精神状态变化情况

组别	试验前兔食欲不佳，精神沉郁(只)	试验后兔食欲和精神状态正常(只)	占百分数(％)
				缓释剂组	10	10	100
口服组	10	10	100
				不用药组	10	0	0

从表4看，没有给药前缓释剂组、口服组及不用药组的兔均食欲不佳，精神沉郁。用缓释剂注射后第2天，兔食欲精神逐渐变好，并变为正常，占100％。口服组用药第6天，兔食欲精神逐渐变好，并变为正常，占100％。而不用药组的兔一直食欲不佳，精神沉郁，于第30～50天陆续死亡3只兔。

剖解结果：不用药组有3只兔死亡，剖解病变主要在呼吸系统，鼻腔内积有大量鼻滴，为浆液性，粘膜充血，气管内有分泌物。肺有大片出血斑，部分出现坏死。肝有许多灰白色坏死小点。心、肾、膀胱等处均有充血或小点出血。

试验结果表明缓释剂防治兔鼻炎有良好的疗效，可以使病兔康复，从而阻止疾病的传播。

Claims (3)

1、一种防治兔传染性鼻炎病药物缓释剂，其特征在于以阿奇霉素与β环糊精为原料，按重量份1∶1～2配制而成。

2、按权利要求1所述的药物缓释剂，其特征在于阿奇霉素与β环糊精按重量份1∶1.5配制而成。

3、一种制备权利要求1所述药物缓释剂的方法，其特征在于按以下步骤进行：

(1)称量后，将阿奇霉素与无水乙醇，按重量体积比为1克∶7～9毫升混合，搅拌至药物完全溶解，备用；

(2)将β环糊精与蒸馏水，按重量体积比为1克∶0.5～1.5毫升混合，研磨20～40分钟成糊状，备用；

(3)将步骤(1)阿奇霉素溶液倒入步骤(2)糊状β环糊精中，搅拌30～60分钟，在30～40℃温度下自然蒸发或真空干燥，粉碎，80～90目过筛，成粉状缓释剂；

(4)将步骤(3)粉状缓释剂分装，封口即成粉状缓释剂产品；

(5)将步骤(4)粉状缓释剂与生理盐水按重量体积比为1.6～2.4克∶20毫升配制成缓释针剂产品。