CN1925857A

CN1925857A - 治疗高血脂症的组合物

Info

Publication number: CN1925857A
Application number: CNA2005800068997A
Authority: CN
Inventors: 赵志全
Original assignee: Lunan Pharmaceutical Group Corp
Current assignee: Lunan Pharmaceutical Group Corp
Priority date: 2004-04-30
Filing date: 2005-04-29
Publication date: 2007-03-07
Also published as: WO2005105095A1; EP1741431A1; US20080207643A1; EP1741431A4; JP4741581B2; KR100829534B1; EP1741431B1; KR20070024521A; CN1692906A; JP2007535508A

Abstract

本发明提供了一种治疗高血脂症的组合物，该组合物包括第一个活性成分阿昔莫司和第二个活性成分阿托伐他汀、或其可药用盐、酯或溶剂化物，第一个活性成分与第二个活性成分的重量比是(10～80)∶1，组合物为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂或滴丸。阿昔莫司与阿托伐他汀的联合使用在降低血清总胆固醇、血清甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇方面不仅存在着明显的协同性作用，而且与阿昔莫司和普伐他汀的联合使用、阿昔莫司和洛伐他汀的联合使用相比较，降脂效果更为明显，在升高高密度脂蛋白胆固醇方面，也有着比较明显的优势。

Description

治疗高血脂症的组合物技术领域

本发明涉及一种新的治疗高血脂症的组合物，其含有第一活性成分阿昔莫司

(Acipimox)和第二活性成分阿托伐他汀 (Atorvastatin)或其可药用盐、酯或溶剂化物。背景技术

随着医药科学的不断发展，人们认识到胆固醇、脂肪等含量过高是发生心血管疾病的基本病因，髙血脂是发生冠心病及高血压的主要危险因素。因此，人们开始把血脂调节药的开发作为防治心血管疾病的重点。自 20世纪 80年代末起，降血脂药物大量推出，其中他汀类药物受到人们好评，其临床疗效之佳是其它各类调节血脂药物所不能相比的。十多年来，几个国际大规模冠心病防治试验的完成，证实他汀类药物可以降低冠心病的发病率和死亡率，而且能使已经形成的动脉粥样硬化斑块发展减缓，甚至减退，从而打破了冠心病不可逆转的传统观念，由"他汀"引发的一场血脂革命正在全球兴起。目前，医药界对调脂药在防治心血管疾病方面的作用充满信心，调脂疗法将成为 21世纪预防心血管疾病的主要方法。

阿托伐他汀（Atorvastatin)是第三代他汀类调脂药，是一种全合成的羟甲戊二酰辅酶 A (HMG- CoA)还原酶抑制剂， 1995年首次在美国以钙盐形式上市。其化学名称为： R- C R' ， R' ) ] -2- (4-氟苯基） - β δ -二羟基- 5- (1-甲基乙基) - 3-苯基 -4- [ (苯胺)羰基] -1-氢-吡咯- 1-庚酸钙三水合物。结构式-

分子式： ( C₃₃H_M FN₂0₅) ₂Ca · 3H₂0

通常所说的阿托伐他汀就是指上述的钙盐三水合物，或称为阿托伐他汀钙，其剂量 /规格一般都是按照阿托伐他汀游离酸计。中国导医网 (www.daoyi.com/drug/html/200009/6000000189670.html)对其药效综述如下：

1、抑制 HMG-CoA还原酶。 HMG-CoA还原酶是胆固醇合成酶系中的限速酶，通过对其的抑制作用，从而使胆固醇合成减少。阿托伐他汀与普伐他汀 (pravastatin)相同，口服吸收后即有生物活性，而洛伐他汀 (lovastatin)和辛伐他汀 (simvastatin)为前药，需在体内代谢后才具有生物活性。因此阿托伐他汀发挥作用比洛伐他汀和辛伐他汀更快。本药对 HMG-CoA还原酶的抑制作用较其他同类药物强。阿托伐他汀对 HMG-CoA还原酶抑制作用的 50%抑制浓度 (IC50)为 73 nmoLU¹,而普伐他汀为 2650

。阿托伐他汀 80 mg/d,普伐他汀 40 mg/d,辛伐他汀 40 mg/d使血浆甲基二羟戊酸 (MVA)浓度分别减少 59%, 32%和 49%。此外，单剂量阿托伐他汀对 HMG-CoA还原酶抑制作用的持续时间较其他同类药物长。

2、增加低密度脂蛋白 (LDL)受体。阿托伐他汀通过对 HMG-CoA还原酶的抑制作用使血浆中和组织细胞内胆固醇浓度均降低，可剌激肝脏内 LDL受体密度增加，从而使血浆低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C)清除增强。肝脏 LDL受体可与极低密度脂蛋白 (VLDL)结合，使 VLDL降解增加，从而使甘油三酯（TG)浓度下降。

3、抑制极低密度脂蛋白胆固醇 (VLDL-C)合成。胆固醇是合成 VLDL必需的，本药通过使血浆胆固醇浓度降低，使 VLDL合成和分泌减少。 VLDL是携带和转运 TG 必需的， VLDL-C又是 LDL-C的前体，故本药可使 TG、 VLDL-C、 LDL-C均降低。

4 抗动脉粥样硬化作用。阿托伐他汀通过降低血脂、减少脂质浸润和泡沬细胞形成，对延迟动脉粥样硬化病变有利。本药尚可防止动脉粥样硬化斑块破裂。此外，体外实验表明阿托伐他汀可抑制血管平滑肌增殖和迁移。动物实验表明，本药 2.5 mg/kg可使兔动脉粥样硬化斑块面积减少 67 % ( P < 0.05),而同样剂量的洛伐他汀、普伐他汀、辛伐他汀无此作用；本药尚有抑制血小板激活、降低血粘度、抑制凝血等作用。临床研究表明 22例高脂血症病人应用本药 80 mg/d后使血漿粘度降低 10%，凝血因子 VII的活性降低 8%，血栓垸 A2(TXA2)诱发的血小板聚集率降低 11%。这些作用均对防止动脉粥样硬化有利。

阿托伐他汀一般耐受性良好，大部分不良反应轻微，与洛伐他汀相比，病人耐受性更好。

阿昔莫司（Acipimox)是一种人工合成的烟酸衍生物，能抑制脂肪组织的分解，减少游离脂肪酸自脂肪组织释放，从而降低甘油三酯（TG)在肝脏中的合成，并通过抑制极低密度脂蛋白（VLDL)和低密度脂蛋白（LDL)的合成，使血清中甘油三酯（TG) 和总胆固醇（TC) 的浓度下降。本品还可抑制肝脏脂肪酶的活性，减少高密度脂蛋白 (HDD 的分解。该药口服吸收迅速，药后 2小时内血药浓度即达峰值，半衰期为 2 小时。该药不与血浆蛋白结合，不被代谢，主要以原形经尿排出。在临床上，阿昔莫司可有效治疗高甘油三酯症（IV型）、髙胆固醇血症（Ila型）及高甘油三酯合并高胆固醇血症（lib型），是一种安全、有效、耐受性好的调血脂药。

目前，该领域的研究趋势是将两种不同作用机制的调血脂药制成复方制剂，从而使降脂作用更加全面，同时还可发挥协同作用，增强疗效，减少毒副作用。

美国专利 US5260305A公开了 HMG-CoA还原酶抑制剂普伐他汀和烟酸及其衍生物的组合物，具体公开了规格为普伐他汀 5mg、 10 mg、 20 mg、 40 mg和阿昔莫司 750mg 的组合物的制备，但没有公开其有益效果及最佳配比的药理实验数据。

中国专利申请 CN1425374A公开了阿昔莫司和洛伐他汀组合物，公开的比例是阿昔莫司和洛伐他汀的重量比为 25~50:1，优选的比例是 25:1或 37.5:1，但没有涉及阿昔莫司和阿托伐他汀复方的最佳配比及相应药理实验数据。发明内容

本发明的目的在于提供一种新的治疗高脂血症的药物组合物，该组合物含有第一活性成分阿昔莫司（Acipimox)和第二活性成分阿托伐他汀 (Atorvastatin)或其可药用盐、酯或溶剂化物。由于阿昔莫司和阿托伐他汀的作用机制不同，组成组合物后降脂作用更加全面，并且两药合用有协同作用，其降脂作用明显优于相同剂量的单方。此外，通过合理选择组合物中阿托伐他汀的用量，使组合物在有效降低血脂水平的同时又无明显的毒副作用，同时本组合物一日只需用药一次，用药方便，这将大大提高患者的顺应性。此外，通过对本发明的组合物与背景技术中的 US5260305A和 CN1425374A 的组合物进行比较研究，在实验中意外地发现，阿昔莫司与阿托伐他汀的联合使用在降低血清总胆固醇、血清甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇方面不仅存在着明显的协同性作用，而且与阿昔莫司和普伐他汀的联合使用、阿昔莫司和洛伐他汀的联合使用相比较，降脂效果更为明显，在升髙高密度脂蛋白胆固醇方面，也有着比较明显的优势。

本发明的组合物之一是由阿昔莫司和阿托伐他汀钙以及药用辅料组成，其中阿昔莫司和阿托伐他汀钙（以游离酸计，下同）的重量比为 10~80:1 , 优选的比例的是 10-30:1 , 进一步优选的比例的是 30:1。该组合物的药物制剂的剂型，包括片剂、胶囊、颗粒剂、丸剂、滴丸等固体制剂，可以按照本领域公知的一般制剂方法制备，阿昔莫司含量相当于在将组合物给药时约 200~750mg 的日剂量，阿托伐他汀钙含量相当于 5~80 mg的日剂量，其中优选阿托伐他汀钙含量相当于 10~30 mg的日剂量。

本发明的组合物在制成固体制剂，如片剂或胶囊时，为达到持久的治疗效果，优选地将有效量的阿昔莫司制成缓释部分，再与有效量的阿托伐他汀钙共同制成缓释制剂，如缓释片、缓释胶囊等。相应地，可药用的辅料包括稀释剂，如淀粉、乳糖、甘露醇、预胶化淀粉、糊精、微晶纤维素；崩解剂，如羧甲基淀粉钠、羟丙基淀粉、低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠；缓释剂，如乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素 -4M、羟丙基甲基纤维素 -15M; 优特奇 RS-100、 RL100、 RS30D、 RL30D、 NE30D, 以及苏丽丝（Surelease, 乙基纤维素的水分散体）粘合剂，如聚乙烯吡咯烷酮，交联聚乙烯吡咯垸酮，润滑剂，如硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶等。

本发明的组合物通过药理方面的研究工作，表明当采用本发明的组合物，尤其是釆用优选的配比时，与单独应用有效量的阿昔莫司或阿托伐他汀钙相比，显示出令人吃惊的更佳效果，同时毒性没有增加，因而安全剂量范围大，疗效持续时间长，综合效果好，使用方便。本发明的组合物可以每日 1-2次给药，优选为每日 1次。本发明的组合物与阿昔莫司和普伐他汀联合使用、与阿昔莫司和洛伐他汀的联合使用相比，也表现出更好的降脂活性。

另外，我们在筛选实验中发现，本发明组合物中阿托伐他汀的药理活性与其所成的盐、酯或溶剂化物关系很小，其降脂活性的大小仅与阿托伐他汀游历酸的量有关。所以本发明中阿托伐他汀可以为任何一种可以药用的盐，即合适的阿托伐他汀生理可接受的盐，包括衍生自无机的和有机的碱所形成的盐，为钠盐、钙盐、钾盐、镁盐、锌盐、铁盐；也可以为任何一种阿托伐他汀可以药用的酯，即合适的阿托伐他汀生理可接受的酯，包括衍生自脂肪醇、芳香醇、杂环醇所形成的酯，为甲酯、乙酯、烯丙酯、苯酯。

具体实施方式

现通过如下实施例进一步说明本发明的组合物及其制备方法以及治疗效果，但本发明的保护范围并不限于实施例。实施例 1

a、阿昔莫司 200g

空白丸芯 250g

7%PVP溶液（溶剂为 90%乙醇） 200g

制备工艺：将阿昔莫司过 120目筛，处方量称取，倒入下料斗中。开造粒包衣机，入风压力 0.5bar，入风温度 30°C , 喷枪压力（CYL) 3bar，雾化压力（CAP1 ) 0.8bar, 倒入空白丸芯，造粒，下料速度 4rpm，媢泵 12%，转盘转速 145rpm，喷 7%PVP溶液 (溶剂为 90%乙醇）。造粒结束， 50°C烘干，出料。

b、阿托伐他汀钙 5g (以游离酸计）

空白丸芯 30g

7%PVP溶液（溶剂为 90%乙醇） 30g

制备工艺：将阿托伐他汀钙过 120目筛，处方量称取，倒入下料斗中。开造粒包衣机，入风压力 0.5 bar, 入风温度 30°C， CYL: 3 bar, CAP1 : 0.8 bar, 倒入空白丸芯，造粒，下料速度 4rpm，蠕泵 6%，转盘转速 160 rpm，喷 7%P VP溶液（溶剂为 90% 乙醇）。造粒结束， 45°C烘干，出料。

c、将 a和 b制得的小丸采用硬胶囊药物填充机按照每两粒胶囊中含阿昔莫司与阿托伐他汀钙（以游离酸计）的重量分别为 200mg和 5mg进行填充，即可。实施例 2

阿昔莫司 200g

乳糖 30g

羧甲基淀粉钠 30g

微晶纤维素 18g

6%PVP的无水乙醇溶液 100g

2g

制备工艺：阿昔莫司过 100目筛，乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素过 80目筛，称取处方量的阿昔莫司和乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素混合均匀，加入 6%PVP无水乙醇溶液适量制粒， 6(TC千燥， 16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬 ¾旨酸镁。 b、阿托伐他汀钙 10g (以游离酸计） 15g

预胶化淀粉 10g

6%PVP的无水乙醇溶液 30g

山榆酸甘油酯 lg

制备工艺：阿托伐他汀钙过 100目筛，羟丙基纤维素、预胶化淀粉过 80目筛，称取处方量的阿托伐他汀钙和羟丙基纤维素、预胶化淀粉混合均勾，加入 6%PVP的无水乙醇溶液适量制粒， 60°C干燥， 16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的山榆酸甘油 c、将上述 a,b两种组分釆用双层压片机冲压片即得双层片，每片含阿昔莫司与阿托伐他汀钙（以游离酸计）的重量分别为 200mg和 10mg。

实施例 3

阿昔莫司 200g

乳糖 30g

羧甲基淀粉钠 30g

微晶纤维素 ' 18g

6%PVP的无水乙醇溶液 100g

2g

制备工艺：阿昔莫司过 100目筛，乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素过 80目筛，称取处方量的阿昔莫司和乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素混合均匀，加入 6%PVP无水乙醇溶液适量制粒， 60°C干燥， 16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。 b、阿托伐他汀钙 20g (以游离酸计）

羟丙基纤维素 30g

预胶化淀粉 20g

6%PVP的无水乙醇溶液 50g

山榆酸甘油酯 2g

制备工艺：阿托伐他汀钙过 100目筛，羟丙基纤维素、预胶化淀粉过 80目筛，称取处方量的阿托伐他汀钙和羟丙基纤维素、预胶化淀粉混合均匀，加入 6%PVP的无水乙醇溶液适量制粒， 60°C干燥， 16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的山榆酸甘油酯。 c、将上述 a,b两种组分釆用双层压片机冲压片即得双层片，每片含阿昔莫司与阿托伐他汀钙（以游离酸计）的重量分别为 200mg和 20mg。实施例 4

a、阿」昔苜莫吴司司 300g

羟丙基甲基纤维素 -4M 40g

微晶纤维素 30g

8%PVP的无水乙醇溶液 150g

2g

制备工艺：阿昔莫司过 100目筛，羟丙基纤维素 -4M、微晶纤维素过 80目筛，称取处方量的阿昔莫司和羟丙基纤维素 -4M、微晶纤维素混合均匀，加入 8%PVP无水乙醇溶液适量制粒， 60Ό干燥， 16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。 b、阿托伐他汀钙 20g (以游离酸计）

羧甲基纤维素钠 30g

乳糖 20g

6%PVP的 95%乙醇溶液 50g

2g

制备工艺：阿托伐他汀钙过 100目筛，羧甲基纤维素钠、乳糖过 80目筛，称取处方量的阿托伐他汀钙和羧甲基纤维素钠、乳糖混合均匀，加入 6%PVP的 95%乙醇溶液适量制粒， 60°C干燥， 16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸僕。

c、将上述 a,b两种组分采用双层压片机冲压即得双层片，每片含阿昔莫司与阿托伐他

实施例 5

a、阿昔莫司 300g

空白丸芯 250g

7%PVP溶液（溶剂为 90%乙醇） 200g

制备工艺：将阿昔莫司过 120目筛，处方量称取，倒入下料斗中。开造粒包衣机，入风压力 0.5 bar, 入风温度 30°C， CYL: 3 bar, CAP1 : 0.8 bar, 倒入空白丸芯，造粒，下料速度 4rpm，蠕泵 12%，转盘转速 145 rpm，喷 7%PVP溶液（溶剂为 90%乙醇）。造粒结束， 50 C烘干，出料。

b、 a中制得的含阿昔莫司小丸

Surelease 90g

滑石粉 lg

纯水 50g

制备工艺：将 a中制得的含阿昔莫司小丸倒入转盘，开造粒包衣机，入风压力 l.Obar, 入风温度 30°C， CYL: 3bar， CAP1 : 1.5bar, 蠕泵 5%，转盘转速 180 rpm，喷入 Surelease的纯水溶液。包衣结束， 50°C烘干，出料。

c、按照实例 1中 b的要求制得阿托伐他汀钙小丸，与本例 b中制得的阿昔莫司小丸采用硬胶囊药物填充机按照每两粒胶囊中含阿昔莫司与阿托伐他汀钙（以游离酸计）的重量分别为 300mg和 10mg进行填充，即可。实施例 6

a、阿昔莫司 300g

空白丸芯 300g

7%PVP溶液（溶剂为 90%乙醇） 200g

制备工艺：将阿昔莫司过 120目筛，处方量称取，倒入下料斗中。开造粒包衣机，入风压力 0.5bar，入风温度 30°C， CYL: 3bar， CAP1 : 0.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度 4rpm，蠕泵 12%，转盘转速 145 rpm，喷入 7%PVP溶液（溶剂为 90%乙醇）。造粒结束， 5CTC烘干，出料。

b、 a中制得的含阿昔莫司小丸

乙基纤维素 40g

硬脂酸 70g

聚乙二醇 -6000 6g

滑石粉 12g

95%乙醇 lOOOg

制备工艺：将 a中制得的含阿昔莫司小丸倒入下料斗中。开造粒包衣机，入风温度 30°C，入风压力 0.5bar，入风温度 30°C， CYL: 3bar, CAP1 : l.Obar, 蠕泵 6%，转盘转速 175 rpm，喷入乙基纤维素、硬脂酸和聚乙二醇 -6000的 95%乙醇溶液。包衣结束， 50°C烘干，出料。

c、阿托伐他汀钙 5g (以游离酸计）

' 空白丸芯 30g

7%PVP溶液（溶剂为 90%乙醇） 30g

制备工艺：将阿托伐他汀钙过 120 目筛，处方量称取，倒入下料斗中，开造粒包衣机，入风压力 0.5 bar, 入风温度 30°C， CYL: 3 bar, CAP1 : 0.8 bar, 倒入空白丸芯，造粒。下料速度 4rpm，蠕泵 12%，转盘转速 120rpm，喷入 7%PVP溶液（溶剂为 90%乙醇）。造粒结束， 45°C烘干，出料。

d、将 b与 c制得的小丸采用硬胶囊药物填充机按照每两粒胶囊中含阿昔莫司与阿托伐他汀钙（以游离酸计）的重量分别为 300mg和 5mg进行填充，即可。实施例 7

a、阿昔莫司 400g

甘露醇 10g

乳糖 40g

微晶纤维素 20g

6%PVP的 95%乙醇溶液 120g

硬酯酸镁 2g

制备工艺：阿昔莫司过 100目筛，甘露醇、乳糖、微晶纤维素过 80目筛，称取处方量的阿昔莫司和甘露醇、乳糖、微晶纤维素混合均匀，加入 6%PVP的 95%乙醇溶液适量制粒， 60Ό干燥， 16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。

阿托伐他汀钙 5g (以游离酸计)

预胶化淀粉 50g

甘露醇 50g

乳糖 40g

6%PVP的 95%乙醇溶液 100g

5g

制备工艺：阿托伐他汀钙过 100目筛，预胶化淀粉、甘露醇、乳糖过 80目筛，称取处方量的阿托伐他汀钙和预胶化淀粉、甘露醇、乳糖混合均匀，加入 6%PVP的 95% 乙醇溶液适量制粒， 60°C干燥， 16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁。 c、将上述 a，b两种组分采用双层压片机冲压即得双层片，每片含阿昔莫司与阿托伐他汀钙（以游离酸计）的重量分别为 400mg和 5mg。实施例 8

a、阿昔莫司 400g

乳糖 30g

羟丙基甲基纤维素 -15M 20g

8%PVP的 95%乙醇溶液 150g

山榆酸甘油酯 2g

制备工艺：阿昔莫司过 100目筛，乳糖、羟丙基甲基纤维素 -15M过 80目筛，称取处方量的阿昔莫司和乳糖、羟丙基甲基纤维素 -15M混合均勾，加入 8%PVP的 95% 乙醇溶液适量制粒， 60°C干燥， 16目筛整干颗粒，干颗粒中加入处方量的山榆酸甘油酯。

b、阿托伐他汀钙 10g (以游离酸计）

羟丙基纤维素 25g

糊精 20g

6%PVP的 95%乙醇溶液 50g

滑石粉 2g

制备工艺：阿托伐他汀钙过 100目筛，羟丙基纤维素、糊精过 80 ·目筛，称取处方量的阿托伐他汀钙和羟丙基纤维素、糊精混合均匀，加入 6%PVP的 95%乙醇溶液适量制粒， 60Ό干燥， 16目筛整千颗粒，干颗粒中加入处方量的滑石粉。

c、将上述 a,b两种组分采用双层压片机冲压即得双层片，每片含阿昔莫司与阿托伐他汀钙（以游离酸计）的重量分别为 400mg和 10mg。

实施例 9 阿昔莫司和阿托伐他汀钙复方治疗大鼠髙血脂症的复方筛选

本试验的目的在于通过筛选确定毒性低、作用强、使用方便的阿昔莫司和阿托伐他汀钙复方制剂的组成。采用高脂饲料诱发大鼠高脂血症模型，给模型大鼠连续灌服阿昔莫司（100~400mg/kg)和（或）阿托伐他汀钙（2.5~30mg/kg，以游离酸计，下述剂量均以阿托伐他汀游离酸计） 14天。结果发现，阿昔莫司和阿托伐他汀钙伍用对高脂词料所致的大鼠高脂血症有明显的治疗作用，降脂效果与两种药物的剂量相关，阿昔莫司 200mg/kg和阿托伐他汀钙 10mg/kg、阿昔莫司 200mg/kg和阿托伐他汀钙 20mg/kg及阿昔莫司 300mg/kg和阿托伐他汀钙 lOmg/kg联合用药组效果显著，可显著降低大鼠血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平，显著升高髙密度脂蛋白胆固醇水平，并对上述指标均表现出协同作用。其中阿昔莫司 300mg/kg和阿托伐他汀钙 10mg/kg联合用药组效果最显著，优选阿昔莫司 300mg/kg和阿托伐他汀钙 10mg/kg 组成的复方。在本实验剂量范围内，联合用药组对与肝脏和肌肉毒性相关的血清酶活性无明显影响。

1 试验目的

通过筛选确定阿昔莫司和阿托伐他汀钙复方制剂的组成，以达到复方制剂毒副作用低、作用全面和增强、使用方便之目的。

2 受试药物

2.1 烟酸衍生物

药品名称：阿昔莫司（Acipimox)

批号： 0207002

纯度：大于 99.7%

生产单位：鲁南制药股份有限公司配制方法：临用前用 1%羧甲基纤维素钠（CMC)混匀，配成试验所需浓度。

2.2他汀类药物

药品名称：阿托伐他汀钙（Atorvastatin)

批号： 031002

纯度：大于 99.0%

生产单位：山东新时代药业有限公司自制

配制方法：临用前用 1% CMC混匀，配成试验所需浓度。

3 动物 3.1 品系和来源

Wistar大鼠，军事医学科学院医学实验动物中心繁殖,实验动物质量许可证号为医动字 D01-3039。

3.2体重和性别

年龄 9周〜 10周，体重 180-220g，雄性。

3.3饲养条件

动物实验室空气定时排风、光照良好，常温。每笼饲养 5只动物，饲以本院实验动物中心专门为大鼠配制的膨化饲料,自由饮水。动物实验条件合格证号为医动字 D01-2051。试验开始前，观察动物进食、活动及粪便等 1周，选择健康动物进入试验。 4 大鼠高脂血症模型制备 ^[1]

大鼠高脂血症模型采用高脂饲料致高脂血症法。高脂饲料配方如下：基础饲料 86.3%、胆固醇 3%、猪油 10%、甲基硫氧嘧啶 0.2%、猪胆盐 0.5%，保证各成分混合均勾。连续 2周。给药期间隔天给予高脂饲料。

5 阿昔莫司和阿托伐他汀钙对正常大鼠血脂水平的影响

5.1 剂量设置依据

临床上阿昔莫司的剂量为 250mg/次（按人体重 60 kg计算，上述剂量为 4.2mg/kg)， 2~3次 /日，每日量最大不超过 1200mg ^ra。按体表面积为单位的剂量等效原则推算，上述人常用剂量换算成大鼠剂量约为 50mg/kg/day。结合文献报道 ^m，将本试验中阿昔莫司的剂量设定为 100、 200、 300、 400mg/kgo

临床上阿托伐他汀钙的剂量为 10mg/次（按人体重 60 kg计算，上述剂量为 0.17mg/kg), 1次 /日，每日量最大不超过 80mg ^[4]。按体表面积为单位的剂量等效原则推算，上述人常用剂量换算成大鼠剂量约为 0.85mg/kg。结合文献报道 ^[5·^8]，将本试验中阿托伐他汀钙的剂量设定为 2.5、 5、 10、 20 、 30mg/kg。

5.2组别设置

依据上述剂量设置，按血清总胆固醇水平均衡原则，将正常动物随机分为：（1 ) 正常对照组；（2) 阿昔莫司 lOOmg/kg组；（3 ) 阿昔莫司 200mg/kg组；（4) 阿昔莫司 300mg/kg组；（5 ) 阿昔莫司 400mg/kg组；（6) 阿托伐他汀钙 2.5mg/kg组；（7) 阿托伐他汀钙 5mg/kg组；（8) 阿托伐他汀钙 10mg/kg组；（9) 阿托伐他汀钙 20mg/kg组； ( 10)阿托伐他汀钙 30mg/kg组；（11 )阿昔莫司 200mg/kg和阿托伐他汀钙 5mg/kg组； ( 12) 阿昔莫司 200mg/kg和阿托伐他汀钙 lOmg/kg组；（13 ) 阿昔莫司 200 mg/kg和阿托伐他汀钙 20 mg/kg组；（14)阿昔莫司 300 mg/kg和阿托伐他汀钙 5 mg/kg组；（15 ) 阿昔莫司 300 mg/kg和阿托伐他汀钙 10 mg/kg组；（16)阿昔莫司 300 mg/kg和阿托伐他汀钙 20 mg/kg组；（17) 阿昔莫司 400 mg/kg和阿托伐他汀钙 5 mg kg组；（18) 阿昔莫司 400 mg/kg和阿托伐他汀钙 10 mg/kg组。每组 10只。

5.3 给药

临床拟用的给药途径为口服，故本试验采用灌胃法给药，连续灌胃 4天。灌胃均在动物进食后进行。每天 1次。给药体积为 0.3ml/100g体重。

5.4检测指标

血清化学指标包括总胆固醇 (TC)、丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、肌酸激酶（CK)、甘油三酯 (TG：)、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-L)。其中丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、肌酸激酶（CK) 检测试剂采用北京中生生物工程高技术公司产品，用 SABA/18全自动生化分析仪测定；其余试剂釆用日本罗氏试剂公司产品，用日立 7020自动生化分析仪测定。测定方法参照试剂说明书取血样前禁食 16小时。 6 阿昔莫司和阿托伐他汀钙对高脂血症大鼠血脂水平的影响

6.1 剂量设置依据

同 5.1正常大鼠实验。

6.2组别设置

依据上述剂量设置，按血清总胆固醇水平均衡原则，将模型大鼠随机分为：（1 ) 正常对照组；（2)模型对照组；（3 ) 阿昔莫司 100mg/kg组；（4) 阿昔莫司 200mg/kg 组；（5)阿昔莫司 300mg/kg组；（6)阿昔莫司 400mg/kg组；（7)阿托伐他汀钙 2.5mg/kg 组；（8) 阿托伐他汀钙 5mg/kg组；（9) 阿托伐他汀钙 10mg/kg组；（10) 阿托伐他汀钙 20mg/kg组；（ 11 )阿托伐他汀钙 30mg/kg组；（12)阿昔莫司 200mg/kg和阿托伐他汀钙 5mg/kg组；（13 ) 阿昔莫司 200mg/kg和阿托伐他汀钙 10mg/kg组；（14) 阿昔莫司 200 mg/kg和阿托伐他汀钙 20 mg/kg组；（ 15 )阿昔莫司 300 mg/kg和阿托伐他汀钙 5 mg/kg组；（16) 阿昔莫司 300 mg/kg和阿托伐他汀钙 10 mg/kg组；（17) 阿昔莫司 300 mg/kg和阿托伐他汀钙 20 mg/kg组；（18) 阿昔莫司 400 mg/kg和阿托伐他汀钙 5 mg/kg组；（ 19)阿昔莫司 400 mg/kg和阿托伐他汀钙 10 mg/kg组。每组 10只。

6.3 给药临床拟用的给药途径为口服，故本试验釆用灌胃法给药，连续灌胃 14天。灌胃均在动物进食后进行。每天 1次。给药体积为 0.3ml/100g体重。

6.4检测指标

同 5.4正常大鼠实验。

7 阿昔莫司和阿托伐他汀钙复方不同组分相互影响试验

7.1 组别设置

从疗效较显著的阿昔莫司和阿托伐他汀钙剂量组中，确定阿昔莫司和阿托伐他汀钙复方的剂量：（1 ) 正常对照组；（2)模型对照组；（3 ) 阿昔莫司 200mg/kg_; (4) 阿昔莫司 300mg/kg; (5 ) 阿托伐他汀钙 10mg/kg_; (6) 阿托伐他汀钙 20mg/kg; (7) 阿昔莫司 200mg/kg和阿托伐他汀钙 10mg/kg组复方组；（8) 阿昔莫司 200mg/kg和阿托伐他汀钙 20mg/kg组复方组；（9)阿昔莫司 300mg/kg和阿托伐他汀钙 10mg/k_g组复方组。每组 10只。分组前测定血清总胆固醇水平，按均衡原则随机分组。每组 10只。 7.2给药和检测指标

同前述 6.3和 5.4。

8 试验结果 ,

8.1 阿昔莫司和阿托伐他汀钙对正常大鼠血脂水平的影响

正常大鼠给药 4天后，阿昔莫司、阿托伐他汀钙和联合用药组的总胆固醇、血清甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇均有所降低，高密度脂蛋白胆固醇水平升高，见表 1。

表 1 阿昔莫司和阿托伐他汀钙及复方对正常大鼠血脂的影响

血清总胆固醇血清甘油三酯低密度脂蛋白胆固高密度脂蛋白胆组别

(mmol/L) (mmol/L) 醇（mmol/L) 固醇（mmol/L) 正常对照组 1.74±0.19 0.73±0.25 0.34±0.10 0.95±0.19 阿昔莫司 100mg/kg 1.60±0.35 0.71±0.27 0.32±0.12 0.97±0.16 阿昔莫司 200mg/kg 1.55±0.28 0.69±0.33 0.26±0.11 0.98±0.23 阿昔莫司 300mg/kg 1.51±0.26* 0.63±0.28 0.29±0.11 1.15±0.26 阿昔莫司 400mg kg 1.49±0.28* 0.57±0.36 0.24±0.14 1.18±0.13** 阿托伐他汀钙 2.5mg/kg 1.69±0.33 0.69±0.33 0.30±0.14 0.99±0.11 阿托伐他汀钙 5mg/kg 1.64±0.30 0.67±0.28 0.25±0.16 0.96±0.11 阿托伐他汀钙 IOmg kg 1.52±0.31 0.65±0.33 0.23±0.09* 1.03±0.24 阿托伐他汀钙 20mg kg 1.46±0.24* 0.55±0.16 0.21±0.09* 1.05±0.13 阿托伐他汀钙 30mg kg 1.41±0.29* 0.51±0.18* 0.19±0.12* 1.08±0.18 阿昔 200+阿托 5mg kg 1.53±0.24 0.61±0.33 0.23±0.09* 1.08±0.20 阿昔 200+阿托 10mg/kg 1.47±0.24* 0.49±0.11* 0,19±0.10** 1.15±0.16* 阿昔 200+阿托 20mg/kg 1.38±0.32** 0.46±0.13** 0.17±0.06*** 1.19±0.16** 阿昔 300+阿托 5mg kg 1.46±0.25* 0.63±0.22 0.27±0.06 0.99±0.22 阿昔 300+阿托 IOmg/kg 1.44±0.26* . 0.50±0.06* 0.18±0.12** 1.20±0.15** 阿昔 300+阿托 20mg/kg 1.45±0.27* 0.50±0.17* 0.20±0.09** 1.09±0.24 阿昔 400+阿托 5mg/kg 1.44±0.31* 0.52±0.12* 0.25±0.10 1.03±0.17 阿昔 400+阿托 10mg kg 1.41±0.36* 0.51±0.14* 0.24±0.08* 1.11±0.21 注：与正常对照组比较， *P<0.05,**P<0.01 8.2阿昔莫司和阿托伐他汀钙对模型大鼠血脂水平的影响

大鼠饲以高脂饲料 14天后分组给药。阿昔莫司的剂量范围为 100~400mg/kg，阿托伐他汀钙的剂量范围为 2.5 30mg/kg，组成联合用药组。给药 14天后，与模型对照组比较，阿昔莫司和阿托伐他汀钙各剂量组血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇均有不同程度的下降，高密度脂蛋白胆固醇水平均有所升高，见表 2

与模型对照组相比，阿昔莫司 200mg/kg和阿托伐他汀钙 10mg/kg、阿昔莫司 200mg/kg和阿托伐他汀钙 20mg/kg及阿昔莫司 300mg/kg和阿托伐他汀钙 10mg/kg三个联合用药组大鼠的血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平均显著降低，高密度脂蛋白胆固醇水平均显著升高。与相同剂量的阿昔莫司或阿托伐他汀钙单方组比较，上述三个联合用药组血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平均显著降低，高密度脂蛋白胆固醇水平均显著升高，并对上述指标均表现出协同作用。其中以阿昔莫司 300mg/kg和阿托伐他汀钙 10mg/kg联合用药组效果最为显著。表 2 阿昔莫司和阿托伐他汀钙及复方对模型大鼠血脂的影响

注：与正常对照组比较，髓 PO.Q01 ; 与模型对照组比较， *P<0.05,**P<0.01 ***P<0.001

8.3 阿昔莫司和阿托伐他汀钙对模型大鼠血清酶活性的影响

本实验通过测定用药 14天后高血脂模型大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶和肌酸激酶的水平，来评价阿昔莫司和阿托伐他汀钙及复方对模型大鼠肝脏功能和骨骼肌组织的影响。结果表明，与模型对照组相比，阿昔莫司各剂量（100~400mg/kg)组模型大鼠血清丙氨酸氨基转移酶和肌酸激酶水平均无显著差异（P>0.05 )_; 阿托伐他汀钙各剂量 (2.5~30mg/kg)组模型大鼠血清中上述指标亦未见显著差异（P>0.05)，阿托伐他汀钙和阿昔莫司各联合用药组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶和血清肌酸激酶均无明显变化

(P>0.05 ), 见表 3。

表 3阿昔莫司和阿托伐他汀钙及复方对模型大鼠血清丙氨酸氨基转移酶和肌酸激酶的影响

丙氨酸氨基转移酶

组别肌酸激酶（U L)

(nmol.s^_1/L)

正常对照组 639.5±111.3 351.4±144.2 模型对照组 667.9±109.9 373.6±112.4 阿昔莫司 100mg/kg 640.3±117.6 361.4±106.4 阿昔莫司 200mg/kg 645.4±124.9 354.4±110.9 阿昔莫司 300mg/kg 655.5±110.5 380.33±120.1 阿昔莫司 400mg kg 642.8±114.2 377.3±103.4 阿托伐他汀钙 2.5mg/kg 635.0±115.2 364.6±105.9 阿托伐他汀钙 5mg/kg 674.5±132.9 367.7±132.6 阿托伐他汀钙 10mg/kg 650.0±101.8 389.0±119.1 阿托伐他汀钙 20mg/kg 640.6±95.6 378.8±109.3 阿托伐他汀钙 30mg/kg 66.4±117.7 384.2±120.8 阿昔 200+阿托 5mg/kg 653.4±110.5 374.1±101.5 阿昔 200+阿托 10mg/kg 669.7±123.0 353.3±124.6 阿昔 200+阿托 20mg kg 641.6±125.1 367.4±111.4 阿昔 300+阿托 5mg/kg 604.9±132.6 361.9±115.2 阿昔 300+阿托 10mg/kg 647.7±128.2 370.6±130.0 阿昔 300+阿托 20mg/kg 646.6±124.0 372.1±117.3 阿昔 400+阿托 5mg/kg 651.9±136.1 369.4±103.2 阿昔 400+阿托 10mg/kg 647.3±140.6 375.8±119.9

8.4 阿昔莫司和阿托伐他汀钙复方中不同组分相互影响试验

高血脂模型大鼠连续给药 14天后，与相同剂量的单方相比，阿昔莫司和阿托伐他汀钙联合用药组均能明显降低模型大鼠血清中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平以及明显升高高密度脂蛋白胆固醇水平，见表 4。

综合分析，与模型对照组相比，阿昔莫司 200mg/kg和阿托伐他汀钙 10mg/kg、阿昔莫司 200mg/kg和阿托伐他汀钙 20mg/kg及阿昔莫司 300mg/kg和阿托伐他汀钙 lOmg/kg联合用药组效果显著，可显著降低大鼠血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平，显著升高高密度脂蛋白胆固醇水平。与相同剂量的阿昔莫司或阿托伐他汀钙单方组比较，上述三个联合用药组血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平均显著降低，高密度脂蛋白胆固醇水平均显著升高，三个联合用药组对上述指标均表现出协同.作用。其中阿昔莫司 300mg/kg和阿托伐他汀钙 lOmg kg联合用药组效果最显著，因此优选阿昔莫司 300mg/kg和阿托伐他汀钙 10mg/kg组成的复方。表 4 阿昔莫司和阿托伐他汀钙复方中不同组分治疗大鼠高脂血症的效果血清总胆固醇血清甘油三酯低密度脂蛋白胆固醇高密度脂蛋白胆固组别

(mmol/L) (mmol/L) (mmol/L) 醇 (mmol/L) 正常对照组 2.09±0.96 0.78±0.18 0.30±0.14 1.26±0.50 模型对照组 12.14i2.24** 2.14±0.50 8.93±1.36 3.18±1.27*** 阿昔莫司 200mg/kg 10.31±1.67 1.79±0.63 7.27±1.83* 4.20±1.10 阿昔莫司 300mg/kg 8.69±1.88** 1.68±0.56 6.96±1.23" 4.54±0.52* 阿托伐他汀钙 10mg/kg 10.20±1.62* 1.56±0.62* 7.30±1.88* 4.46±1.3* 阿托伐他汀钙 20mg/kg 9.65±2.22* 1.47±0.56* 6.80±1.66** 4.51±1.09* 阿昔 200+阿托 lOmg/kg 7.43±1.67***'^!|' @@ 0.99±0.22***'^{!| @} 4.91±1.26***'^|!' @@ 5.95±1.07*** ^π· @ 阿昔 200+阿托 20mg/kg 6.34±1.81*** ^ι|!·^&&& 0.82±0.26***'"' ^&& 4.25±1.63***·^Μ· ^&&

阿昔 300+阿托 10mg/kg 4.82±1.03**— @@@ 0.73±0.23*** ^>@@ 3.95±1.28**— @@@ 6.45±1.07**— @@ 注：与正常对照组比较， ###Ρ<0. 01 #Ρ<0. 05

与模型对照组比较， *Ρ<0. 05 **Ρ<0. 01, ***Ρ<0. 001

与阿昔莫司 200mg/kg组比较，！！！ P<0. 001,！！ P<0. 01

与阿托伐他汀钙 10mg/kg组比较， @P<0. 05 i@P<0. 01 » SiiP<0. 001

与阿昔莫司 300mg/kg组比较， ' ' "Ρ<0. 001

与阿托伐他汀钙 20mg/kg组比较， &&&P<0. 001, &P<0. 05

9 结论

阿昔莫司和阿托伐他汀钙伍用对高脂伺料所致的大鼠高脂血症有明显的治疗作用，降脂效果与两种药物的剂量相关，阿昔莫司 200mg kg和阿托伐他汀钙 10mg/kg 阿昔莫司 200mg/kg和阿托伐他汀钙 20mg/kg及阿昔莫司 300mg/kg和阿托伐他汀钙 10mg/kg联合用药组效果显著，可显著降低大鼠血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平，显著升髙高密度脂蛋白胆固醇水平，并对上述指标均表现出协同作用。其中阿昔莫司 300mg/kg和阿托伐他汀钙钙 10mg/kg联合用药组效果最显著，优选阿昔莫司 300mg/kg和阿托伐他汀钙 10mg/kg组成的复方。在本实验剂量范围内，联合用药组对血清酶活性无明显影响，初步表明对肝和横紋肌无明显的毒性作用。此外，目前阿昔莫司单方的临床用法为 3次 /日，本实验证明，阿昔莫司 1次 /日仍有显著的降血脂作用，且毒性小，这为阿昔莫司和阿托伐他汀钙组成复方后一日仅用药 1次提供了可靠的实验依据，这必将大大方便患者服用，提高患者的顺应性。实施例 10

阿昔莫司和阿托伐他汀钙联合使用与阿昔莫司和普伐他汀、阿昔莫司和洛伐他汀联合使用的降脂效果比较

我们根据实施例 9所筛选到的阿昔莫司阿托伐他汀的配比与上述专利所公开的组合物进行了比较研究，在实验中意外发现，并通过大量的动物实验验证了阿昔莫司阿托伐他汀钙联合使用在降低血清总胆固醇、血清甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇方面不仅存在着明显的协同性作用，而且与阿昔莫司普伐他汀联合使用、阿昔莫司洛伐他汀联合使用相比较，有着显著的差异，降脂效果更为明显，在升高高密度脂蛋白胆固醇方面，也有着比较明显的优势。

10.1 受试药物、动物、大鼠高脂血症模型制备同实施例 9。

10.2组别设置

按血清总胆固醇水平均衡原则，将模型大鼠随机分为：

正常对照组；

模型对照组；

阿昔莫司 300mg/kg普伐他汀 20mg/kg组；

阿昔莫司 300mg/kg洛伐他汀 10m_g/k_g组；

阿昔莫司 200mg/kg阿托伐他汀钙 5mg/kg组；

阿昔莫司 200mg/kg阿托伐他汀钙 10mg/kg组；

阿昔莫司 200mg/kg阿托伐他汀钙 20mg kg组；

阿昔莫司 300mg/kg阿托伐他汀钙 5mg/kg组；

阿昔莫司 300mg/kg阿托伐他汀钙 10mg/kg组；

阿昔莫司 300mg/kg阿托伐他汀钙 20mg/kg组；

阿昔莫司 400mg kg阿托伐他汀钙 5mg/kg组；

阿昔莫司 400mg/kg阿托伐他汀钙 10mg/kg组。

10.3给药

同实施例 9中的 6.3。

10.4捡测指标

血清总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-L)。

10.5实验结果

大鼠饲以高脂饲料 14天后分组给药。给药 14天后，阿昔莫司阿托伐他汀钙各剂量组在降低血清总胆固醇、血清甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇方面与阿昔莫司 300mg/kg普伐他汀 20mg/kg组、阿昔莫司 300mg/kg洛伐他汀 10mg/kg组相比较，有着显著的差异；在升高高密度脂蛋白胆固醇方面，也有着比较明显的优势。我们的试验结果充分证明阿昔莫司和阿托伐他汀联合使用在降低血脂方面具有意想不到的效果，阿昔莫司和阿托伐他汀不仅取得了显著的协同性作用，而且和现有技术公开的阿昔莫司与洛伐他汀，阿昔莫司与普伐他汀的联合使用更具有优势。具体结果见表 5。

表 5 阿昔莫司阿托伐他汀钙联合使用与阿昔莫司普伐他汀、

阿昔莫司洛伐他汀联合使用降脂效果比较

注：与正常对照组比较， ###P<0.001 ; 与模型对照组比较， **P<0.01， ***P<0.001 ;

与阿昔 300+普伐 20mg/kg组和阿昔 300+洛伐 10mg/kg组相比较， *P<0.05， **P<0.01 参考文献

[1] 徐叔云，卞如濂，陈修主编，药理学实验方法学（第三版），人民卫生出版社出版，

2002年 1月， 1201-1202

[2] OLBETAM (acipimox) 说明书（Pharmacia, New Zealand)

[3] Scand J Clin Lab Invest, 1990, 50(2):203-208

[4] 阿托伐他汀钙片使用说明书， http://www.sda.gov.cn，国家食品药品管理局网站

[5] Clin. Chim. Acta. 2004， 339 ( 1-2)： 189-194

[6] Int. J. Cardiol. 2003,91 ( 1 )： 59-69

[7] Metabolism 2003, 52 (5)： 609-615

[8] Biochim. Biophys. Acta. 2002, 1580 (2-3)： 161-170

Claims

权利要求

1. 一种治疗高血脂症的组合物，其特征在于，所述的组合物包括- a) 第一个活性成分：阿昔莫司；

b) 第二个活性成分：阿托伐他汀、或其可药用盐、酯或溶剂化物。

2. 按照权利要求 1所述的组合物，其特征在于，所述的阿托伐他汀的可药用盐选自钠盐、钙盐、钾盐、镁盐、锌盐或铁盐。

3. 按照权利要求 1所述的组合物，其特征在于，所述的阿托伐他汀的可药用酯选自脂肪醇、芳香醇、杂环醇所形成的酯。

4. 按照权利要求 1或 2所述的组合物，其特征在于，所述的第二个活性成分优选为阿托伐他汀的钙盐。

5. 按照权利要求 1-4之一所述的组合物，其特征在于，所述第一个活性成分与第二个活性成分的重量比是（10〜80)： 1。

6. 按照权利要求 5所述的组合物，其特征在于，第一个活性成分与第二个活性成分的重量比是： ( 10〜30)： 1。

7. 按照权利要求 6所述的组合物，其特征在于，第一个活性成分与第二个活性成分的重量比是 30: 1。

8. 按照权利要求 1〜7之一所述的组合物，其特征在于，所述组合物为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂或滴丸。