CN1907266A - 炎琥宁/穿琥宁脂质体组合药物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种炎琥宁/穿琥宁脂质体组合药物及其制备方法。本发明提供一种炎琥宁/穿琥宁脂质体组合药物,是由如下重量分数的原料药制备而成的:磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰胆碱、蛋黄卵磷脂重量比1∶1∶2-6的混合物1100-3500g;菜油甾醇与胆固醇重量比1∶1-4的混合物1000-3200g;维生素E30-50g;聚乙二醇2000与聚乙二醇6000的任意比例混合物50-80g;甘氨酸和右旋糖酐40重量比1∶1-3的混合物100-160g;炎琥宁与穿琥宁任意比混合物300-1000g。本发明还提供所述炎琥宁/穿琥宁脂质体组合药物的制备方法。本发明提供的炎琥宁/穿琥宁脂质体组合药物不良反应发生率小。
Description
技术领域
本发明涉及一种炎琥宁/穿琥宁脂质体组合药物及其制备方法。
背景技术
炎琥宁与穿琥宁在体内代谢为同一物质,为抗病毒药物,还具有解热、消炎作用。无西药抗生素的耐药性。而且炎琥宁/穿琥宁还是少年儿童可以适用的抗病毒药物。
炎琥宁/穿琥宁在临床应用中发现了不良反应,轻者表现为皮疹,重者呼吸困难、水肿、甚至休克,还发现有消化道、血液系统、致热原样反应等不良反应。
这些不良反应原因在于化学结构上碳—氧双键与碳—碳双键之间的共轭效应。在制备、储运和使用过程中存在易氧化或光氧化的效应引起药品变质而导致不良反应加剧,以及疗效下降。同时,这两种药物本身的不良反应与用药剂量呈距相关,随剂量的增加而增强。
发明内容
为了克服现有炎琥宁/穿琥宁制剂的不良反应及副作用,本发明提供一种炎琥宁/穿琥宁脂质体组合药物,本发明还提供所述炎琥宁/穿琥宁脂质体组合药物的制备方法。
本发明的技术方案如下:
本发明提供一种炎琥宁/穿琥宁脂质体组合药物,是由如下重量分数的原料药制备而成的:
磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰胆碱、
蛋黄卵磷脂重量比1∶1∶2-6的混合物 1100-3500g;
菜油甾醇与胆固醇重量比1∶1-4的混合物 1000-3200g;
维生素E 30-50g;
聚乙二醇2000与聚乙二醇6000的任意比例混合物 50-80g;
甘氨酸和右旋糖酐40重量比1∶1-3的混合物 100-160g;
炎琥宁与穿琥宁任意比混合物 300-1000g。
本发明提供的炎琥宁/穿琥宁脂质体组合药物,是由以下制备方法和制备步骤实现的:
(1)用乙醇或乙酸乙酯将合成磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰胆碱、蛋黄卵磷脂混合物和菜油甾醇、胆固醇混合物以及维生素E溶解完全;
(2)将步骤(1)中制得的溶液转入旋转蒸发仪中以65±5℃的温度下去除乙醇,并在室温下真空干燥5-10小时,制得干燥的磷脂膜;
(3)将步骤(2)制得的磷脂膜用pH6.0-8.5,浓度为0.010M的磷酸盐缓冲液水化,使磷脂的浓度为20-50g/L,水化完全。
(4)在高速搅拌下,加入炎琥宁/穿琥宁溶解完全,25±5℃下超声波处理5-10分钟,并用0.22um膜滤过,收集滤液,制得粒径小于0.22um的单室脂质体药物载体;
(5)用截留分子量700道尔顿的反渗透膜,无菌条件下对步骤(4)制得的溶液进行反渗透分离,游离的炎琥宁/穿琥宁分子透过反渗透膜存在透过膜的溶液中,而分散在磷脂中炎琥宁/穿琥宁分子被包封在磷脂中而存在体积越来越小的浓溶液中,取浓溶液中脂质体药液分析检验,当被包封的炎琥宁/穿琥宁占96%以上时,停止反渗透,浓溶液按无菌操作要求密封待用,并测定药液体积和炎琥宁/穿琥宁在药液中的含量;
(6)用体积与步骤(5)制得的药液等体积的pH6.0-8.5,浓度为0.010M的磷酸盐缓冲液溶解甘氨酸和右旋糖酐40的混合物,在搅拌条件下溶解,使两者重量之和占药液体积的10-16%(w/v),再在搅拌下加入乙二醇2000与聚乙二醇6000的任意比混合物,至溶解完全,并用截留分子量为8000道尔顿的超滤膜超滤除去热原,然后在121℃蒸汽灭菌15分钟。冷却至室温后和步骤(5)制得的药液混合,搅拌,再次检验炎琥宁/穿琥宁在药液中的含量,并再次超声波处理5-10分钟,再次用0.22um膜滤过,按药剂学允许的剂量分装,冻干。
(7)制成冻干粉剂后,还可以制成即配型输液或预配型输液。
本发明所实现的技术效果如下:
将炎琥宁/穿琥宁制成脂质体组合药物,炎琥宁/穿琥宁在磷脂的包封下,可以避免氧化和光氧化而导致的变质,从而消除炎琥宁/穿琥宁因为发生氧化变质而导致的不良反应。
研究发现,由合成磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰胆碱、蛋黄磷脂按本发明公开的重量比例的混合物形成的磷脂作为药物炎琥宁/穿琥宁的载体,可以使炎琥宁/穿琥宁疗效指数提高2-4倍,可以减少用药剂量,从而可以消除由于剂量引起的炎琥宁/穿琥宁的不良反应。
由菜油甾醇、胆固醇按本发明公开的重量比例,对脂质体进行“封堵”,可以大大减少炎琥宁/穿琥宁的脂质体泄漏,形成坚实的药物脂质体载体。
由维生素E和乙二醇2000与聚乙二醇6000的任意比混合物按本发明所公开的重量比例混合,对脂质体进行表面修饰,使炎琥宁/穿琥宁脂质体在动物体内成为长循环脂质体,增加炎琥宁/穿琥宁在循环系统中消除半衰期,从而可以减少给药次数。
乙二醇2000与聚乙二醇6000的任意比混合物对脂质体表面修饰(即包封在脂质体中),可以减轻脂质体药物的突释效应。
制成对病毒、致病菌细胞易融合的脂质体药物载体,使药物对病毒、致病菌细胞具有靶向性,药物富集在病毒及致病菌细胞内,提高治疗指数。制成纳米粒径的脂质体药物载体,提高了药物的靶向性和疗效。
甘氨酸和右旋糖酐40作为赋型剂安全可靠。
具体实施方式
实施例1:
本实施例所采用的配方如下:
磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰胆碱、
蛋黄卵磷脂重量比1∶1∶2的混合物 3500g;
菜油甾醇与胆固醇重量比1∶1的混合物 1000g;
维生素E 50g;
聚乙二醇2000与聚乙二醇6000的任意比例混合物 50g;
甘氨酸和右旋糖酐40重量比1∶1的混合物 160g;
炎琥宁与穿琥宁任意比混合物 300g。
制备方法和步骤如下:
1.用乙醇或乙酸乙酯将合成磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰胆碱、蛋黄卵磷脂混合物和菜油甾醇、胆固醇混合物以及维生素E溶解完全;
2.将步骤(1)中制得的溶液转入旋转蒸发仪中以65±5℃的温度下去除乙醇,并在室温下真空干燥5-10小时,制得干燥的磷脂膜;
3.将步骤(2)制得的磷脂膜用pH6.0-8.5,浓度为0.010M的磷酸盐缓冲液水化,使磷脂的浓度为20-50g/L,水化完全。
4.在高速搅拌下,加入炎琥宁/穿琥宁溶解完全,25±5℃下超声波处理5-10分钟,并用0.22um膜滤过,收集滤液,制得粒径小于0.22um的单室脂质体药物载体;
5.用截留分子量700道尔顿的反渗透膜,无菌条件下对步骤(4)制得的溶液进行反渗透分离,游离的炎琥宁/穿琥宁分子透过反渗透膜存在透过膜的溶液中,而分散在磷脂中炎琥宁/穿琥宁分子被包封在磷脂中而存在体积越来越小的浓溶液中,取浓溶液中脂质体药液分析检验,当被包封的炎琥宁/穿琥宁占96%以上时,停止反渗透,浓溶液按无菌操作要求密封待用,并测定药液体积和炎琥宁/穿琥宁在药液中的含量;
6.用体积与步骤(5)制得的药液等体积的pH6.0-8.5,浓度为0.010M的磷酸盐缓冲液溶解甘氨酸和右旋糖酐40的混合物,在搅拌条件下溶解,使两者重量之和占药液体积的10-16%(w/v),再在搅拌下加入乙二醇2000与聚乙二醇6000的任意比混合物,至溶解完全,并用截留分子量为8000道尔顿的超滤膜超滤除去热原,然后在121℃蒸汽灭菌15分钟。冷却至室温后和步骤(5)制得的药液混合,搅拌,再次检验炎琥宁/穿琥宁在药液中的含量,并再次超声波处理5-10分钟,再次用0.22um膜滤过,按药剂学允许的剂量分装,冻干成冻干粉剂,还可以制成即配型输液或预配型输液。
药效验证试验,小鼠体内流感病毒肺炎试验。
小鼠:昆明或NIH种,18-20克体重,雌雄分别分组,每组50只。
阴性对照药:病毒唑。
抗病毒试验:小鼠滴鼻感染,10LD50病毒量,2小时后注射给药,尾静脉注射,炎琥宁/穿琥宁30mg/kg剂量,病毒唑50mg/kg剂量,给药6天,观察2周,记录死亡数及不良反应发生率,并设定不给药对照组。
试验结果如下:
实施例2:
本实施例所采用的配方如下:
磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰胆碱、
蛋黄卵磷脂重量比1∶1∶6的混合物 2000g;
菜油甾醇与胆固醇重量比1∶4的混合物 1800g;
维生素E 40g;
聚乙二醇2000与聚乙二醇6000的任意比例混合物 60g;
甘氨酸和右旋糖酐40重量比1∶3的混合物 130g;
炎琥宁与穿琥宁任意比混合物 700g。
制备方法和步骤如下:
1.用乙醇或乙酸乙酯将合成磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰胆碱、蛋黄卵磷脂混合物和菜油甾醇、胆固醇混合物以及维生素E溶解完全;
2.将步骤(1)中制得的溶液转入旋转蒸发仪中以65±5℃的温度下去除乙醇,并在室温下真空干燥5-10小时,制得干燥的磷脂膜;
3.将步骤(2)制得的磷脂膜用pH6.0-8.5,浓度为0.010M的磷酸盐缓冲液水化,使磷脂的浓度为20-50g/L,水化完全。
4.在高速搅拌下,加入炎琥宁/穿琥宁溶解完全,25±5℃下超声波处理5-10分钟,并用0.22um膜滤过,收集滤液,制得粒径小于0.22um的单室脂质体药物载体;
5.用截留分子量700道尔顿的反渗透膜,无菌条件下对步骤(4)制得的溶液进行反渗透分离,游离的炎琥宁/穿琥宁分子透过反渗透膜存在透过膜的溶液中,而分散在磷脂中炎琥宁/穿琥宁分子被包封在磷脂中而存在体积越来越小的浓溶液中,取浓溶液中脂质体药液分析检验,当被包封的炎琥宁/穿琥宁占96%以上时,停止反渗透,浓溶液按无菌操作要求密封待用,并测定药液体积和炎琥宁/穿琥宁在药液中的含量;
6.用体积与步骤(5)制得的药液等体积的pH6.0-8.5,浓度为0.010M的磷酸盐缓冲液溶解甘氨酸和右旋糖酐40的混合物,在搅拌条件下溶解,使两者重量之和占药液体积的10-16%(w/v),再在搅拌下加入乙二醇2000与聚乙二醇6000的任意比混合物,至溶解完全,并用截留分子量为8000道尔顿的超滤膜超滤除去热原,然后在121℃蒸汽灭菌15分钟。冷却至室温后和步骤(5)制得的药液混合,搅拌,再次检验炎琥宁/穿琥宁在药液中的含量,并再次超声波处理5-10分钟,再次用0.22um膜滤过,按药剂学允许的剂量分装,冻干。
7.制成冻干粉剂后,还可以制成即配型输液或预配型输液。
药效验证试验,小鼠体内流感病毒肺炎试验。
小鼠:昆明或NIH种,18-20克体重,雌雄分别分组,每组50只。
阴性对照药:病毒唑。
抗病毒试验:小鼠滴鼻感染,10LD50病毒量,2小时后注射给药,尾静脉注射,炎琥宁/穿琥宁30mg/kg剂量,病毒唑50mg/kg剂量,给药6天,观察2周,记录死亡数及不良反应发生率,并设定不给药对照组。
药效验证试验结果如下:
现有注射用穿琥宁 | 23 | 27 | 27 |
现有利巴韦林注射液 | 22 | 14 | 13 |
本发明药物冻干针剂(炎琥宁/穿琥宁) | 8 | 3 | 3.6 |
本发明药物冻干针剂(穿琥宁) | 9 | 4 | 4.2 |
本发明药物冻干针剂(炎琥宁/穿琥宁) | 6 | 4.5 | 4 |
不给药对照组 | 100 | - | - |
实施例3:
本实施例所采用的配方如下:
磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰胆碱、
蛋黄卵磷脂重量比1∶1∶4的混合物 3500g;
菜油甾醇与胆固醇重量比1∶2.5的混合物 3200g;
维生素E 50g;
聚乙二醇2000与聚乙二醇6000的任意比例混合物 80g;
甘氨酸和右旋糖酐40重量比1∶2的混合物 160g;
炎琥宁与穿琥宁任意比混合物 1000g。
制备方法和步骤如下:
1.用乙酸乙酯将合成磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰胆碱、蛋黄卵磷脂混合物和菜油甾醇、胆固醇混合物以及维生素E溶解完全;
2.将步骤(1)中制得的溶液转入旋转蒸发仪中以65±5℃的温度下去除乙醇,并在室温下真空干燥5-10小时,制得干燥的磷脂膜;
3.将步骤(2)制得的磷脂膜用pH6.0-8.5,浓度为0.010M的磷酸盐缓冲液水化,使磷脂的浓度为20-50g/L,水化完全。
4.在高速搅拌下,加入炎琥宁/穿琥宁溶解完全,25±5℃下超声波处理5-10分钟,并用0.22um膜滤过,收集滤液,制得粒径小于0.22um的单室脂质体药物载体;
5.用截留分子量700道尔顿的反渗透膜,无菌条件下对步骤(4)制得的溶液进行反渗透分离,游离的炎琥宁/穿琥宁分子透过反渗透膜存在透过膜的溶液中,而分散在磷脂中炎琥宁/穿琥宁分子被包封在磷脂中而存在体积越来越小的浓溶液中,取浓溶液中脂质体药液分析检验,当被包封的炎琥宁/穿琥宁占96%以上时,停止反渗透,浓溶液按无菌操作要求密封待用,并测定药液体积和炎琥宁/穿琥宁在药液中的含量;
6.用体积与步骤(5)制得的药液等体积的pH6.0-8.5,浓度为0.010M的磷酸盐缓冲液溶解甘氨酸和右旋糖酐40的混合物,在搅拌条件下溶解,使两者重量之和占药液体积的10-16%(w/v),再在搅拌下加入乙二醇2000与聚乙二醇6000的任意比混合物,至溶解完全,并用截留分子量为8000道尔顿的超滤膜超滤除去热原,然后在121℃蒸汽灭菌15分钟。冷却至室温后和步骤(5)制得的药液混合,搅拌,再次检验炎琥宁/穿琥宁在药液中的含量,并再次超声波处理5-10分钟,再次用0.22um膜滤过,按药剂学允许的剂量分装,冻干。
7.制成冻干粉剂后,还可以制成即配型输液或预配型输液。
药效验证试验:
小鼠体内流感病毒肺炎试验。
小鼠:昆明或NIH种,18-20克体重,雌雄分别分组,每组50只。
阴性对照药:病毒唑。
抗病毒试验:小鼠滴鼻感染,10LD50病毒量,2小时后注射给药,尾静脉注射,炎琥宁/穿琥宁30mg/kg剂量,病毒唑50mg/kg剂量,给药6天,观察2周,记录死亡数及不良反应发生率,并设定不给药对照组。
药效验证试验结果如下:
本发明药物冻干针剂(炎琥宁) | 6 | 4.5 | 4.5 |
本发明药物冻干针剂(炎琥宁/穿琥宁) | 6 | 4 | 4 |
不给药对照组 | 100 | - | - |
实施例4:
本实施例所采用的配方如下:
磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰胆碱、
蛋黄卵磷脂重量比1∶1∶4的混合物 1100g;
菜油甾醇与胆固醇重量比1∶3的混合物 3200g;
维生素E 30g;
聚乙二醇2000与聚乙二醇6000的任意比例混合物 80g;
甘氨酸和右旋糖酐40重量比1∶2的混合物 100g;
炎琥宁与穿琥宁任意比混合物 1000g。
制备方法和步骤如下:
1.用乙醇将合成磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰胆碱、蛋黄卵磷脂混合物和菜油甾醇、胆固醇混合物以及维生素E溶解完全。
2.将步骤(1)中制得的溶液转入旋转蒸发仪中以65±5℃的温度下去除乙醇,并在室温下真空干燥5-10小时,制得干燥的磷脂膜。
3.将步骤(2)制得的磷脂膜用pH6.0-8.5,浓度为0.015M的磷酸盐缓冲液溶解,使磷脂的浓度为20-50g/L,在高速搅拌(160转/分)下溶解完全。
4.在高速搅拌(160转/分)下,加入炎琥宁/穿琥宁溶解完全,25±5℃下超声波处理5-10分钟,并用0.22um膜滤过,收集滤液,制得粒径小于0.22um的单室脂质体药物载体。
5.用截留分子量700道尔顿的反渗透膜。无菌条件下对步骤(4)制得的溶液进行反渗透分离,游离的炎琥宁/穿琥宁分子透过反渗透膜存在透过膜的溶液中,而分散在磷脂中炎琥宁/穿琥宁分子被包封在磷脂中而存在体积越来越小的浓溶液中,取溶液中脂质体药液分析检验,当被包封的炎琥宁/穿琥宁占96%以上时,停止反渗透,浓溶液按无菌操作要求密封待用,并测定药液体积和炎琥宁/穿琥宁在药液中的含量。
6.用体积与步骤(5)制得的药液等体积的pH6.0-8.5,浓度为0.015M的磷酸盐缓冲液溶解甘氨酸和右旋糖酐40的混合物,在搅拌条件下溶解,使两者重量之和占药液体积的10-16%(w/v),再在搅拌下加入乙二醇2000与聚乙二醇6000的任意比混合物,至溶解完全。并用截留分子量为8000道尔顿的超滤膜超滤除去热原。然后在121℃蒸汽灭菌15分钟。冷却至室温后和步骤(5)制得的药液混合,搅拌,再次检验炎琥宁/穿琥宁在药液中的含量,并再次超声波处理5-10分钟,按药剂学允许的剂量分装,冻干。
7.制成冻干粉剂后,还可以制成即配型输液或预配型输液。
药效验证试验(小鼠体内流感病毒肺炎试验):
小鼠:昆明或NIH种,18-20克体重,雌雄分别分组,每组50只。
阴性对照药:病毒唑。
抗病毒试验:小鼠滴鼻感染,10LD50病毒量,2小时后注射给药,尾静脉注射,炎琥宁/穿琥宁30mg/kg剂量,病毒唑50mg/kg剂量,给药6天,观察2周,记录死亡数及不良反应发生率,并设定不给药对照组。
药效验证试验结果如下:
Claims (2)
1.一种炎琥宁/穿琥宁脂质体组合药物,其特征在于,是由如下重量分数的原料制备而成的:
磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰胆碱、
蛋黄卵磷脂重量比1∶1∶2-6的混合物 1100-3500g;
菜油甾醇与胆固醇重量比1∶1-4的混合物 1000-3200g;
维生素E 30-50g;
聚乙二醇2000与聚乙二醇6000的任意比例混合物 50-80g;
甘氨酸和右旋糖酐40重量比1∶1-3的混合物 100-160g;
炎琥宁与穿琥宁任意比混合物 300-1000g。
2.权利要求1所述炎琥宁/穿琥宁脂质体组合药物的制备方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)用乙醇或乙酸乙酯将合成磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰胆碱、蛋黄卵磷脂混合物和菜油甾醇、胆固醇混合物以及维生素E溶解完全;
(2)将步骤(1)中制得的溶液转入旋转蒸发仪中以65±5℃的温度下去除乙醇,并在室温下真空干燥5-10小时,制得干燥的磷脂膜;
(3)将步骤(2)制得的磷脂膜用pH6.0-8.5,浓度为0.010M的磷酸盐缓冲液水化,使磷脂的浓度为20-50g/L,水化完全;
(4)在高速搅拌下,加入炎琥宁/穿琥宁溶解完全,25±5℃下超声波处理5-10分钟,并用0.22um膜滤过,收集滤液,制得粒径小于0.22um的单室脂质体药物载体;
(5)用截留分子量700道尔顿的反渗透膜,无菌条件下对步骤(4)制得的溶液进行反渗透分离,游离的炎琥宁/穿琥宁分子透过反渗透膜存在透过膜的溶液中,而分散在磷脂中炎琥宁/穿琥宁分子被包封在磷脂中而存在体积越来越小的浓溶液中,取浓溶液中脂质体药液分析检验,当被包封的炎琥宁/穿琥宁占96%以上时,停止反渗透,浓溶液按无菌操作要求密封待用,并测定药液体积和炎琥宁/穿琥宁在药液中的含量;
(6)用体积与步骤(5)制得的药液等体积的pH6.0-8.5,浓度为0.010M的磷酸盐缓冲液溶解甘氨酸和右旋糖酐40的混合物,在搅拌条件下溶解,使两者重量之和占药液体积的10-16%(w/v),再在搅拌下加入乙二醇2000与聚乙二醇6000的任意比混合物,至溶解完全,并用截留分子量为8000道尔顿的超滤膜超滤除去热原,然后在121℃蒸汽灭菌15分钟。冷却至室温后和步骤(5)制得的药液混合,搅拌,再次检验炎琥宁/穿琥宁在药液中的含量,并再次超声波处理5-10分钟,再次用0.22um膜滤过,按药剂学允许的剂量分装,冻干。
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