CN1903015A - 百合组培苗化学药剂处理脱毒的方法 - Google Patents

百合组培苗化学药剂处理脱毒的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN1903015A
CN1903015A CN 200510046954 CN200510046954A CN1903015A CN 1903015 A CN1903015 A CN 1903015A CN 200510046954 CN200510046954 CN 200510046954 CN 200510046954 A CN200510046954 A CN 200510046954A CN 1903015 A CN1903015 A CN 1903015A
Authority
CN
China
Prior art keywords
chemical agent
lily
tissue
detoxification
virus
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN 200510046954
Other languages
English (en)
Inventor
潘利军
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN 200510046954 priority Critical patent/CN1903015A/zh
Publication of CN1903015A publication Critical patent/CN1903015A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明涉及植物组织培养，具体地说是百合组培苗化学药剂处理脱毒的方法，在百合组织培养诱导成芽的过程中，在组培培养基中含有ribavirin200～505μmol/L。本发明的优点为：植株存活率高，对诱导率影响较小；脱毒效果好；本发明化学药剂脱毒处理的百合鳞茎在处理后于大田生产中没有发现变异现象。

Description

百合组培苗化学药剂处理脱毒的方法
技术领域
本发明涉及植物组织培养，具体地说是百合组培苗化学药剂处理脱毒的方法。
背景技术
植物组织培养是指在离体的条件下，将植物体的一部分，如一小段茎、一小块叶、甚至一个细胞，接种在培养基上，使它们重新形成一个完整植株的方法。组织培养的步骤有培养基的制作与接种材料的消毒、接种、植株诱导、生根和移栽。
其中常用的培养基为MS培养基，其配方为：
 成分   使用浓度(mg/L)
  大量元素  硝酸钾KNO3   1900
 硝酸铵NH4NO3   1650
 磷酸二氢钾KH2PO4   170
 硫酸镁MgSO4·7H2O   370
 氯化钙CaCl2·2H2O   440
  微量元素  碘化钾KI   0.83
 硼酸H3BO3   6.2
 硫酸锰MnSO4·4H2O   22.3
 硫酸锌ZnSO4·7H2O   8.6
 钼酸钠Na2MoO4·2H2O   0.25
 硫酸铜CuSO4·5H2O   0.025
 氯化钴CoCl2   0.025
铁盐  乙二胺四乙酸二钠Na2·EDTA   37.3
 硫酸亚铁FeSO2·7H2O   27.8
  有机成分  肌醇   100
 甘氨酸   2
 盐酸硫胺素VB1   0.1
 盐酸吡哆醇VB6   0.5
 烟酸VB5或VPP   0.5
 蔗糖sucrose   30g/L
 琼脂agar   7g/L
一些重要的花卉、园林观赏植物可以用组织培养的方法大量繁殖无病毒苗。菊花、香石竹、唐菖蒲、水仙、郁金香、百合、大丽花、白鹤芋等一大批花卉靠无性繁殖法繁殖，病毒逐代传递积累，危害日趋严重。化学药剂处理是指将一些抗病毒类药剂加入到培养基中，用其抑制植物体内或离体组织内病毒的合成，带毒植株经化学药剂处理后病毒浓度会降低，活性会钝化；对植物进行化学药剂处理过程中主要应注意以下几个问题：1.化学药剂的选取；2.药剂浓度的调配；3.处理时间的确定。现阶段可采用的化学药剂有嘌呤和嘧啶类化合物、氨基酸、抗生素、病毒唑等，由于植物种类不同，关于药剂选取、浓度调配以及处理时间的差别很大，而且不同药剂对不同植物的处理效果也很难确定；有报道利用病毒唑可对石竹植株进行脱毒处理，药剂浓度为5mg/L，CMV(黄瓜花叶病毒)的脱毒率为80％；而对于百合的化学药剂脱毒工艺还没有详细报道，对如何能保证百合的正常发育和较好的脱毒效果是百合化学药剂脱毒处理的关键。
发明内容
本发明的目的在于提供一种存活率高、脱毒效果好的百合组培苗化学药剂处理脱毒的方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
百合组培苗化学药剂处理脱毒的方法，在百合组织培养诱导成芽的过程中，在组培培养基中含有ribavirin 200～505μmol/L；较好为200～300μmol/L。
ribavirin的化学名称为病毒唑(三氮唑核苷)，即1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑。
本发明的优点如下：
1.存活率高。本发明化学药剂处理过程中植株存活率较高，对诱导率影响较小。
2.脱毒效果好。本发明化学药剂处理后百合鳞茎脱毒率89.1％以上，脱毒率较高。
3.应用效果好。本发明化学药剂脱毒处理的百合鳞茎在处理后于大田生产中没有发现变异现象；去病毒后，植株生长势强，花朵变大，色泽鲜艳，抗逆能力提高，产花数量上升。
具体实施方式
实施例1  百合组培苗化学药剂处理脱毒的方法：
1)培养基配制：将ribavirin经过过滤灭菌后在无菌条件下加入到已消毒灭菌但尚未冷凝的MS培养基中(培养基组成参见表2所示)；
2)诱导扩繁百合组培苗：当百合芽长5～10cm时，取其茎尖分生组织，将外植体接种于上述MS培养基中，附加入BA(6-苄基氨基嘌呤)0.5mg/l、NAA(萘乙酸)0.5mg/l和蔗糖30g/l进行诱导培养；在2000～3000LX(本实施例为2000LX)每天12～14小时(本实施例为14小时)的光照条件下，20～26℃的温度条件下，30～40天后(本实施例为30天)，直接诱导出许多致密的不定芽；观察其诱导率和脱毒效果；
表1
  ribavirin浓度(μmol/L)   0   100   200   300   400   500   600   700   800   900   1000
  接种数(个)   200   200   200   200   200   200   200   200   200   200   200
  诱导成苗数(株)   186   184   183   179   174   168   103   79   77   51   48
  诱导率％   93   92   91.5   89.5   87   84   51.5   39.5   38.5   25.5   24
  无病毒苗数(株)   128   135   163   163   161   158   97   75   73   48   46
  脱病毒率％   68.8   73.4   89.1   91.1   92.5   94   94.2   94.9   94.8   94.1   95.8
从上表中可以看出：不同浓度的化学药剂ribavirin对百合的诱导率和脱毒效果有着明显影响；随着药剂浓度的增加，诱导率逐渐降低，当浓度高于600μmol/L时，诱导率降低至50％左右，当浓度达到1000μmol/L时，诱导率仅为24％；而随着药剂浓度的增加，脱病毒率则不断提高，当浓度达到200μmol/L时，脱毒效果有明显的提高，达到89.1％左右，当浓度达到500μmol/L时，脱毒率为94％。
通常，百合组培苗化学药剂处理脱毒的时间与百合组培苗诱导成芽的时间相当，其处理时间通常可为25～40天，较佳为28～32天。
由于常规的MS培养基和WPM培养基均可在百合组织培养过程中应用，并且它们的组成成份中各组份的用量相差较大，而在本发明中起脱病毒作用的为病毒唑类中的ribavirin，而对于改进的MS培养基中各组份用量无需严格限定，本发明组织培养中可采用改进的MS组成如下表2所示，其中还应添加有硝酸钾(KNO3)1000～1900mg/L、磷酸二氢钾(KH2PO4)170-340mg/L、碘化钾(KI)0.75～0.83mg/L和氯化钴(CoCl2)0.025～0.5mg/L，或添加有Ca(NO3)2·4H2O 350-556mg/L和K2SO4990～1450mg/L。
表2
 成分   使用浓度(mg/L)
  大量元素  硝酸铵NH4NO3   400～1650
 硫酸镁MgSO4·7H2O   370
 氯化钙CaCl2·2H2O   96～440
  微量元素  硼酸H3BO3   6.2
 硫酸锰MnSO4·4H2O   22.3～22.5
 硫酸锌ZnSO4·7H2O   8.6
 钼酸钠Na2MoO4·2H2O   0.25
 硫酸铜CuSO4·5H2O   0.025～0.25
铁盐  乙二胺四乙酸二钠Na2·EDTA   37.3
 硫酸亚铁FeSO2·7H2O   37.3～37.5
  有机成分  肌醇   100
 甘氨酸   2
 盐酸硫胺素VB1   0.1～1.0
 盐酸吡哆醇VB6   0.5
 烟酸VB5或VPP   0.5
 蔗糖sucrose   30g/L
 琼脂agar   7g/L

Claims (2)

1.百合组培苗化学药剂处理脱毒的方法，其特征在于：在百合组织培养诱导成芽的过程中，在组培培养基中含有ribavirin 200～505μmol/L。
2.按照权利要求1所述百合组培苗化学药剂处理脱毒的方法，其特征在于：组培培养基中含有ribavirin 200～300μmol/L。
CN 200510046954 2005-07-29 2005-07-29 百合组培苗化学药剂处理脱毒的方法 Pending CN1903015A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 200510046954 CN1903015A (zh) 2005-07-29 2005-07-29 百合组培苗化学药剂处理脱毒的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 200510046954 CN1903015A (zh) 2005-07-29 2005-07-29 百合组培苗化学药剂处理脱毒的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN1903015A true CN1903015A (zh) 2007-01-31

Family

ID=37672500

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN 200510046954 Pending CN1903015A (zh) 2005-07-29 2005-07-29 百合组培苗化学药剂处理脱毒的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN1903015A (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100587064C (zh) * 2007-12-04 2010-02-03 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 快速脱除百合三种病毒的方法
CN102030575A (zh) * 2010-11-15 2011-04-27 青海大学 一种东方百合杂种系种球繁育及切花栽培营养肥
CN102440183A (zh) * 2010-10-14 2012-05-09 安利清 使用盐酸金刚乙胺药剂对百合脱毒培养的方法
CN102440189A (zh) * 2010-10-14 2012-05-09 杨凯 使用病毒灵药剂对百合脱毒培养的方法
CN102440186A (zh) * 2010-10-14 2012-05-09 杨凯 使用脱氧无环鸟苷地昔洛伟药剂对百合脱毒培养的方法

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100587064C (zh) * 2007-12-04 2010-02-03 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 快速脱除百合三种病毒的方法
CN102440183A (zh) * 2010-10-14 2012-05-09 安利清 使用盐酸金刚乙胺药剂对百合脱毒培养的方法
CN102440189A (zh) * 2010-10-14 2012-05-09 杨凯 使用病毒灵药剂对百合脱毒培养的方法
CN102440186A (zh) * 2010-10-14 2012-05-09 杨凯 使用脱氧无环鸟苷地昔洛伟药剂对百合脱毒培养的方法
CN102030575A (zh) * 2010-11-15 2011-04-27 青海大学 一种东方百合杂种系种球繁育及切花栽培营养肥

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101933455B (zh) 一种普陀樟的离体繁殖方法
CN102870682A (zh) 一种用于马铃薯双单倍体茎段离体诱导再生植株的培养基
CN1903015A (zh) 百合组培苗化学药剂处理脱毒的方法
CN103053420B (zh) 一种“妃子笑”荔枝品种离体再生的方法
CN105284620A (zh) 一种特早熟桃杂交胚挽救成苗的方法
KR102200064B1 (ko) 생장점 배양을 이용한 사과 왜성대목 m.9 및 m.26의 바이러스 무병주 생산방법
CN100367846C (zh) 一种半夏离体块茎的诱导方法
CN108401902B (zh) 一种大麻茎尖组织培养快速繁殖方法
CN104115750B (zh) 一种空心李组培快繁脱毒的方法
Fernández et al. Gemmation in cultured gametophytes of Osmunda regalis
CN102939900B (zh) 诱导ot型百合花药获得（双）单倍体植株的方法及其培养基
Galal et al. Effect of algae extract foliar application and inter-row planting distances on the yield and quality of sugar beet
KR101211915B1 (ko) 고구마 조직배양묘의 증식을 위한 액체 배지 조성물 및 이를 이용한 증식방법
CN1167327C (zh) 一年多代的植物快速育种技术
CN102668987A (zh) 草莓增殖培养基
CN109804926B (zh) 一种翅果油树组织培养基及其制备方法
CN1844370A (zh) 一种促进洋桔梗芽诱导和芽伸长的培养基
CN115623987A (zh) 一种桫椤孢子诱导绿色球状体途径植物组织培养的方法
CN101861833B (zh) 凤尾兰花药组织培养的方法及专用培养基
CN113711870A (zh) 一种提高组培苗炼苗成活率的方法
CN1884487A (zh) 一种促进洋桔梗不定芽生根的培养基
KR101911071B1 (ko) 호두의 대량 증식을 위한 조직배양 방법
CN108184671B (zh) 一种番茄快速繁殖并提高炼苗成活率的方法
CN1903017A (zh) 百合组织培养球分球的方法
CN102138533B (zh) 通过组织培养获得黄花苜蓿再生植株的方法及其培养基

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Open date: 20070131