CN1901923A - 消毒组合物及制造和使用该组合物的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及可用于消毒并可应用于国民经济、医药和所有类型试验室的不同方面的抗微生物组合物。该抗微生物组合物包含具有对氢离子有亲和性的单齿、双齿或多齿配体的螯合金属络合物和离子型表面活性剂和溶剂。本发明组合物表现抗菌性质。该抗微生物组合物能有效对抗革兰氏阳性和革兰氏阴性菌、真菌、病毒和孢子，并可应用于宽的温度区间。进一步提供了将本发明组合物用于治疗和预防由多种病原体引起的疾病的方法。

Description

消毒组合物及制造和使用该组合物的方法

                     发明领域

本发明涉及单独使用或与其它化学元素联合使用的杀微生物和杀孢子组合物，以及更特别是抗病毒、抗细菌和抗真菌组合物。这些组合物可用于预防或治疗由病原体引起的感染。

                      发明背景

一种周知的消毒剂是过氧化氢及它们的制剂。这种制剂的代表是含有过氧化氢、月桂基硫酸镁、甘油、油酸钠、EDTA的二钠盐、苯甲酸钠和水的消毒制剂(RU2108810 C1，1998)。这种制剂目的是用于房子内的表面、卫生器具、亚麻制品、医药用品的消毒。它对人或动物无毒性，但它不足够有效。

本领域广泛已知的是含有羊毛硫氨酸和螯合剂的表现出增强活性的杀菌组合物。合适的螯合剂是，例如乙二胺四乙酸(EDTA)，它的盐和柠檬酸盐(见例如，美国专利No.5,260,271和5,334,582)。

含有在酸性介质中具有α-氨基酸的金属络合物的杀菌剂和消毒剂也是已知的(美国专利N0.6,242,009)。

已知螯合的金属络合物仅以可忽略的浓度存在于酸性介质中(Fundamentals of Analytical Chemistra Book 1，Moscow-“Mir”--D.Skoog，D.West，1979)。例如，在高于6.0的pH下螯合剂如EDTA完全结合金属离子而形成螯合络合物。对较弱的螯合剂，天然氨基酸是其中一个实例，介质的pH值不应该太高，以便完全结合所有金属离子形成螯合络合物。发明者开展的研究显示，在美国专利No.6,242,009(-“009 Patent”)中，氨基酸和金属离子转化为不解离的螯合络合物仅在pH＞7.0时发生，并且根据在该专利中引用的实施例，加入无机酸导致螯合络合物的破坏。而且，氨基酸的氨基基团是质子化的，并且金属以离子形式存在。在′009中引用的化合物的抗微生物活性不是归功于螯合络合物而是金属离子的活性，如从该文献已知的，金属离子也表现出某些杀菌活性，特别是列举的银离子。也应该注意，在′009专利中砷和硒化合物列举为金属离子并且它们的抗菌活性可以归功于对所有活体包括人的高的毒性。毫无疑问，强力消毒剂(chlorohexydine、过氧化氢)的存在(其作为添加剂而引入′009中列举的络合物中)，可以增加制剂的活性。

在文献中也描述了包含氯化十六烷基三甲基铵作为活性化合物的杀菌组合物(DE 4326866，1995；美国专利No.5,206,016；美国专利No.5,575,991)。感兴趣的是一种抗菌制剂，其包括作为活性化合物的氯化十六烷基三甲基铵、无机酸或有机酸和溶剂(RU 2118174C1)。该已知的化合物表现出对革兰氏阴性微生物群的杀菌活性，并且它对肠内和其它细菌和病毒感染，包括炭疽没有显著效果。

含有细菌素、螯合剂、稳定剂、表面活性剂、盐和醇的消毒制剂(RU 2163145)也是本领域已知的。该已知的制剂可用于浸渍用于预防动物中的乳腺炎的布巾。

涉及本发明的一种组合物是含有过氧化物、表面活性剂、螯合络合物和溶剂的消毒制剂(RU20614497)。这种组合物仅在18-25℃的正温度下使用时才有活性。细菌失活的时间是在5-30分钟内。

需要降低与致病性接触相关的传染性、发病率和死亡率的抗病原组合物和方法。这种组合物和方法应该优选地不具有非理想的促进微生物抗药性或对接受者有毒性的性质。

                    本发明概述

本发明的目标是提供高度有效的通用消毒、抗菌和杀菌、杀真菌或杀病毒组合物，所述的组合物可用于广泛的正和负温度范围并增加了抗微生物作用和消毒作用的时间长度。本发明另外的目标是增强抗微生物或消毒作用的时间长度。本发明组合物适于长期储存，安全，显示高度杀菌、杀病毒、杀真菌和杀孢子活性，并对动物和人无毒性。本发明抗微生物和杀孢子组合物可用于广泛多种应用中。这种组合物在治疗受试者中的微生物感染中可用作局部用制剂。本组合物可以施用至多种表面，并且当这样施用时，这种组合物作为杀菌剂或卫生消毒剂(sanitizer)。类似地，本组合物可用于应用领域例如，作为游泳池、温泉浴场等中的消毒剂，作为洗衣皂或去垢添加剂，作为涂料或表面涂层添加剂，作为天然的或合成的表面防腐剂如为了预防微生物群在表面(例如，聚合物、塑料或木材)上生长，以及作为硬表面或地毯卫生消毒剂。这些组合物一般可用于在许多工业、医学、农业、兽医学和驯养应用中控制和/或清除微生物群和孢子。而且，可以采用本组合物来灭菌或消毒气体环境包括例如，家庭和工业场所以及飞机等中的空气的净化。

                      附图简述

图1概述了用测试组合物攻击的金黄色葡萄球菌(S.aureus)的时间-杀死分析。

图2概述了用测试组合物攻击的绿脓杆菌(P.aeruginosa)的时间-杀死分析。

图3概述了用测试组合物攻击的大肠杆菌(E.coli)的时间-杀死分析。

图4概述了用测试组合物攻击的深红色发癣菌(T.rubrum)的时间-杀死分析。

图5概述了用测试组合物攻击的白色念珠菌(C.albicans)的时间-杀死分析。

图6概述了用测试组合物攻击的枯草芽孢杆菌(B.subtilis)的时间-杀死分析。

图7概述了用于金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和深红色发癣菌的时间-杀死分析的中和剂效力对照和确认计数结果。

                   发明详述

I.定义

如此处使用，术语“微生物”指在藻类、细菌、真菌(包括地衣)、原生动物、病毒和亚病毒感染因子范畴内的微观生物体和分类学相关的宏观生物体。术语微生物包含那些参与和本身对其它生物体(例如，动物包括人以及植物)致病的生物体和那些产生对其它生物体致病的因子(而该生物体本身不是直接致病的，或对其它生物体是无效的)的生物体。

如此处使用的术语“病原体”和语法上等价的术语，指通过直接感染其它生物体或通过产生在其它生物中引起疾病的因子(例如产生致病毒素的细菌等)而在其它生物体中(例如动物和植物)引起疾病的生物体，包括微生物。

术语“宿主”或“受试者”，如此处使用，指要用本发明组合物处理的生物体。这种生物体包括暴露于或怀疑暴露于一种或多种病原体的生物体。这种生物体也包括接受处理以预防不希望的暴露于病原的生物体。生物体包括，但不限于动物(例如人、家养的动物种类、野生动物)和植物。

如此处使用的，术语“灭活”和语法等价的术语指具有在宿主中杀死、清除或减少病原体感染和/或引起病理学反应的能力。

如此处使用的，术语“接触”和“暴露”指使一种或多种本发明组合物与病原体或样品接触防止病原体，这样本发明的组合物可以使微生物或致病体失活，如果微生物或致病体存在的话。本发明可以使微生物或致病体失活，如果微生物或致病体存在的话。本发明考虑将公开的组合物以足够的体积和/或浓度与病原体或微生物因子接触以使病原体或微生物因子失活。

如此处使用，术语“局部活性剂”指在施用(接触)至宿主的部位引起药理学反应的本发明组合物。

如此处使用，术语“表面”是以其最广泛的意义使用。在一种意义中，该术语指能用本发明组合物接触的生物体或无生命物体(运载工具、建筑和食物加工装置等)的最外面的界面(例如对于动物是：皮肤、毛发和皮毛等，以及对植物是：叶、茎、开花部分和子实体等)。在另一种意义上，该术语也指通过许多经皮递送途径(例如，注射、消化、透皮递送、吸入等)的任何一种能让本发明组合物接触的动物和植物的内部膜和表面(例如，对于动物是：消化道、脉管组织等，以及对于植物是：维管组织等)。

如此处使用的，“致病微生物”意在包括一般不存在于宿主中的或在宿主中数量过多而达到致病程度的致病性细菌、真菌、病毒等。

如此处使用，“杀微生物组合物”是抑制细菌、酵母、真菌或病毒活性和/或繁殖的本发明组合物。

如此处使用，“杀孢子组合物”是抑制细菌、酵母或真菌的孢子的活性和/或繁殖的本发明组合物。

如此处使用，“剂量”或“剂量单位形式”指适合以单元剂量用于接受处理的受试者的物理上不连续的单位，每个单位含有经计算能产生理想疗效的预定量的活性化合物以及与之相关的所需药用载体。本发明的剂量单位形式的规格由活性化合物的独有特性和要获得的特定疗效以及制备领域中用于制备治疗个体的此等活性化合物的内在限制所决定。

如此处使用。“受试者”优选为哺乳动物如人，但也可以是动物如家庭动物(例如，狗、猫等)、家畜(例如奶牛、绵羊、猪、马等)和实验室动物(例如大鼠、小鼠、豚鼠等)。受试者也可以是植物。

杀微生物或杀孢子组合物的“有效量”，如此处使用的，是足够用来获得期望治疗和/或预防效果的量，例如导致与需要处理的疾病或障碍例如与细菌、病毒、酵母或其它真菌感染相关疾病的症状得以预防或降低的量。施用给受试者的化合物的量将依赖疾病的类型和严重性以及依赖个体的特性如总体的健康状态、年龄、性别、体重和对药物的耐受力。它也将取决于疾病的程度、严重性和类型。熟练的技术人员将能够根据这些和其它因素确定合适的剂量。通常，足够获得治疗或预防效果的本发明杀微生物或杀孢子组合物的有效量为约0.000001mg/千克体重/每天-约10,000mg/千克体重/每天。优选地，剂量为约0.0001mg/千克体重/每天-约100mg/千克体重/每天。

备选地，足够获得治疗或预防效果的本发明杀微生物或杀孢子组合物的有效量为约0.000001mg/cm²表面/每天-约10,000mg/cm²表面/每天。优选地，剂量为约0.0001mg/cm²表面/每天-约100mg/cm²表面/每天。

如此处使用，术语“灭活”和语法上的等价术语指具有杀死、清除或减少病原体在宿主中感染和/或引起病理学反应的能力。

本发明杀微生物或杀孢子组合物可以与一种或多种额外的治疗性化合物联合施用。

II.一般说明

将在本申请中列出的所有参考文献在此通过明确引用作为参考。本领域技术人员将理解，可以对如上描述的本发明作不同的修改或置换而不脱离本发明的精神和范围。因此，可以理解本发明是以例证而不是用来限制的方式进行描述的。

本发明涉及用于广泛的产品的抗病毒、抗细菌和抗真菌组合物。组合物具有广谱的抗病毒、细菌、真菌和其它致病物种的生物活性。特定地，本发明组合物杀死病毒、细菌和真菌。本发明生物活性组合物包括含有对氢离子有亲和性的单齿配位体、二齿配位体或多齿配位体的螯合金属络合物(chelating metal complex compound)、离子型表面活性剂和溶剂。

本发明进一步涉及用于降低与多种病原体相关的传染性、发病率和死亡率的组合物和方法，也涉及用于消毒受病原体和微生物寄居或感染的区域、样品、溶液和食品。特定地，本发明提供新颖的具有抗病毒、抗细菌和抗真菌特性以提供对广谱的潜在的病原体进行预防的组合物。而且，本发明组合物可以与其它化学剂，包括亲水化合物和疏水聚合物，如在先前的专利申请案Ser.No 106,513(现在的美国专利No.5,417,968明确阐明的)，联合使用以使这种产品作为抗病毒、抗细菌和抗真菌保护的预防性屏障。

在一些实施方案中，本发明提供适用于治疗暴露于病原体或病原体威胁的动物包括人的组合物和方法。在一些实施方案中，在动物暴露于致病生物体之前将其与有效量的组合物接触。在其它实施方案中，在动物暴露于致病生物体之后将其与有效量的组合物接触。因而，本发明考虑预防和治疗微生物感染。当用于杀菌应用时，本发明方法和组合物可用于治疗广谱的致病微生物感染，优选对正常菌群具有最小的损害。

杀微生物或杀孢子组合物的缓冲在人皮肤的全部pH下提供理想的杀菌效果。该制剂的pH值是弱碱性的，即约7.6±0.5。发现该组合物可用于预防和用于受污染的人和动物皮肤暴露的区域以及不同材料的表面的消毒。根据它的内含物和作用的原理，该制剂对人和动物是安全的，是无毒性的，不刺激皮肤，对所有结构材料和由天然和人造纤维制成的织物是化学中性的，并且不引起金属的腐蚀。该杀微生物或杀孢子组合物杀死99.99％的微生物和孢子。根据急性毒性，该制剂涉及IY类低危害化合物。

如果将本发明组合物在皮肤、毛发、指甲或粘膜上施用，该杀菌或杀孢子效果可保持不少于2小时。皮肤施用该杀微生物或杀孢子组合物的温度范围是约-20℃-约+40℃到约+50℃。

有效量成分的混合物表现出协同效应，并且消毒特性通过联合活性成分而得以增加。

在另外的实施方案中，本发明提供适用于消毒暴露于病原体或怀疑含有病原体的区域、溶液和表面，包括有机和无机样品的组合物和方法。然而在本发明的另外的实施方案中，将该组合物用作添加剂以防止有害的或不希望的微生物在生物样品或环境样品中生长。

如果将本发明组合物在材料、织物或防护罩表面上施用，杀菌或杀孢子效果可保持至少24小时。用于在表面施用杀微生物或杀孢子组合物的温度是约-50℃-约+50℃。

导致宿主致病性感染的微生物是众所周知的。因而，本发明方法和组合物可用于治疗或预防与允许递送本发明组合物至感染位点的条件相关的病原微生物感染，包括但不限于，治疗本发明组合物可以有效地送至其上的表面或外科伤口、烧伤或其它明显的表皮伤害(例如中毒性表皮坏死溶解)、泌尿道感染(例如膀胱炎和尿道炎)、阴道炎(例如外阴阴道炎和宫颈炎)、龈炎、外耳炎、痤疮、外部真菌感染、上呼吸道感染、胃肠道感染、亚急性细菌性心内膜炎和其它细菌或真菌感染。在实践本发明中可以选择性杀死的致病微生物包括，但不限于化脓性链球菌(Streptococcus pyrogenes)、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、肺炎链球菌(S.pneumoniae)、粪肠球菌(E.faecalis)、表皮葡萄球菌(S.epidermidis)、绿脓杆菌(Pseudomonoasaeurginosa)、大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillissubstilis)和其它大肠杆菌类、白色念珠菌(Candida albicans)和深红色发癣菌和其它有传染性的细菌和真菌。

该杀菌组合物可以以任何有效的可药用形式施用给温血动物，包括人和动物受试者，例如以局部剂量形式如局部的、口腔的或经鼻的喷雾或以任何其它对递送本发明组合物至微生物感染部位有效的方式施用。施用途径将优选地设计为能达到将杀菌组合物与传染性微生物直接接触。

本发明也考虑可将这里描述的某些组合物用于食品加工和制造工业以预防和消除食品被食物传播细菌、真菌和毒素污染。因而，可以采用这种组合物来减少或抑制微生物的生长或消除食品被微生物污染的有害作用。对于这些应用，本发明组合物是以食品工业可接受的形式如添加剂、防腐剂或调味品应用。

对于这种施用，可接受的载体可采用液体、乳膏、泡沫或凝胶剂的形式并可以额外包含溶剂、乳化剂、凝胶剂、增湿剂、稳定剂、湿润剂、防腐剂、螯合剂、染料、香料和在食品加工工业中通常采用的其它成分。

在特定的实施方案中，将接触进行足够杀死致病剂或足够抑制致病体的生长的时间。在另外的实施方案中，本发明提供净化含有有害的或不希望的病原体的环境表面、区域或空气的方法。在一个这种方案中，致病体与环境表面相关并且该方法包括将环境表面与足够用来净化表面的量的组合物接触。同时也可能这样期望，净化不一定致使病原体的全部消除。在一些实施方案中，组合物和方法可以进一步包括染料、涂料和其它标记和识别化合物以便确定接受处理的表面已经用本发明组合物充分处理了。

当本发明组合物作为局部药物制剂施用时，考虑该组合物进一步包含可药用助剂、赋形剂、稳定剂、稀释剂等。在更进一步实施方案中，本发明考虑进一步含有额外的可药用生物活性分子的组合物。关于药学活性，有效量涉及在获得理想的最后结果中有用的剂量。这种剂量取决于受试者，即年龄、大小等，并可以由本领域技术人员容易地确定。

在不同表面特别是这种生物体可以保持相对长时期活性的硬表面，清除致病微生物已经长期以来成为清洁和维持家庭中的厨房和卧室以及在商业和公共设施如医院、医疗诊所、旅馆和餐厅的杀菌的一个目标。进一步的目标是预防卧室内表面上的霉菌引起的变应原的形成。

本发明进一步涉及用于非多孔的、硬表面如玻璃(例如镜子和淋浴门)、上釉瓷器、金属的(例如，铬、不锈钢和铝)、瓷砖、珐琅、纤维玻璃、Formica^、Corian^和塑料的清洁、消毒、净化以及抑制霉菌的组合物。

通常，本发明考虑可用于环境净化以及用于处理在军队和恐怖分子袭击中的伤亡人员的组合物和方法。广范围的病原体包括营养型细菌和有包膜的病毒以及细菌孢子的灭活，结合在实验动物中的低毒性，使得本发明适合在确定特定的病原体之前用作一般的净化剂。本发明的优选组合物可以快速地大量生产并在宽的温度范围下保持数月的稳定。这些性质提供了用于广范围的消毒应用的灵活性。

例如，本发明制剂在用于消灭生物战中许多细菌孢子和致病体是有效的。在这方面，本发明的组合物和方法可用于受生物战剂污染的人员和材料的消毒。本发明的溶液可直接从安装在地面上的或空气的喷射系统喷射至受污染的材料或人员。在这些应用的某些中，本发明考虑将有效量的组合物与受污染的材料或人员接触，这样进行消毒。备选地，可提供个人消毒试剂盒给可能成为受生物剂污染的军队或平民。

广范围的病原体包括营养型细菌和有包膜的病毒的灭活，结合低毒性，使得本发明特别适合在确定特定的病原体之前用作一般的消毒剂。

因此，本发明的某些实施方案特定地考虑将本发明组合物用于消毒剂和去污剂以净化可能已经遭受不希望的病原体污染的土壤、机器、运载工具和其它装置，以及水路。这种消毒操作可能涉及液体喷雾剂形式的制剂的简单应用或可能需要更多严格的用法。而且，本组合物可用于代替常规的抗生素或与常规的抗生素联合使用处理农作物的多种植物病毒。本组合物也可以用于净化家畜、动物圈、环境表面和动物尸体以清除例如口蹄疫的无包膜病毒。

除了它们在地面和装置的消毒的用途外，也发现该制剂可用作用于一般消毒目的的家庭去污剂。而且，本发明的一些实施方案可以用于预防食物受细菌或真菌的污染(例如，无毒组合物)。这可以在食物制备过程中完成或通过作为添加剂、消毒剂或防腐剂加入食物完成。

本发明组合物可以以液体或气溶胶形式用于硬表面。因此，将上述的成分与一种或多种合适的含水的或不含水的载体液体混合。载体的选择不是关键的。然而，它应该是安全的，并且它应该是与本发明的组合物化学兼容的。在一些实施方案中，载体液体可以包含通常用于硬表面清洁组合物的溶剂。这种溶剂应该与本发明的组合物兼容并应该在本发明组合物的pH下是化学稳定的。用于硬表面清洁剂的溶剂在例如美国专利No.5,108,660中描述，这里通过将其全文引用作为参考。

本发明进一步涉及通过用本发明抗微生物组合物处理样品而净化样品，这样使得能杀死或抑制表面上的细菌、病毒、真菌或孢子。考虑的表面可以是固体表面，例如家、工业设施或医疗设施中的表面或医疗用具的表面。而且，表面可以是生物体的表面并且可以是生物体内部或外部的表面。表面另外可以是食物产品的表面。

III.本发明组合物

本发明包括含有离子型表面活性剂、金属螯合络合物和溶剂的杀微生物或杀孢子组合物。根据本发明，金属螯合络合物包含金属复合物，其含表现对氢离子有亲和性的单齿、二齿或多齿配体，溶剂与表面活性剂的比例为约1-约(7-9)。金属螯合络合物和离子型表面活性剂是本发明杀微生物或杀孢子组合物的活性成分。该活性成分具有抗选择的微生物的消毒特性。

含有本发明配体的螯合金属络合物是具有金属如铜、锌、汞、铬、锰、镍、镉、砷、钴、铝、铅、硒、铂、金、钛、锡或其组合的螯合络合物。在一个实施方案中，金属是金属氧化物如氧化锌或金属盐。

二齿和多齿配体是，例如，天然氨基酸、亚氨二醋酸、腈三乙酸以及亚氨二醋酸和腈三乙酸用不合氨基羧基基团的氨基酸片段的不同残基进行碳-取代(在相对于羧基的α-位置中)的衍生物、亚烷基二氨基聚乙酸以及聚亚烷基聚氨基聚乙酸用不含氨基羧基基团的氨基乙酸片段的不同残基进行碳-取代(在相对于羧基的α-位置中)的衍生物、其中羧酸基团用膦酸基团取代的ω-膦酸羧酸和亚乙基二膦酸四丙酸的衍生物、亚乙基四(硫代乙酸)和二亚乙基三硫代二乙酸的衍生物、单胺氨羧络合剂或其混合物的阴离子。

含有单齿、二齿或多齿配体的螯合金属络合物可以是具有至少一个氨基酸如异亮氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸、精氨酸、组氨酸或其混合物的螯合络合物。

本发明的一个实施方案包含含有离子型表面活性剂、金属螯合络合物和溶剂的杀微生物或杀孢子组合物，其中螯合络合物包含含有对氢离子表现亲和性的单齿、二齿或多齿配体的螯合金属络合物，并且溶剂含有水和脂族醇(C₁-C₈)的混合物，这些组分具有以下比例(重量％)：

螯合络合金属复合物，含有表现对氢      约1-30

离子亲和性的单齿、二齿或多齿配体

离子型表面活性剂                      约0.1-15

脂族醇(C₁-C₈)                       约0.5-95

蒸馏水                                剩余量

示范性螯合金属络合物包含氯化氨基乙酸铜络合物和亚乙基二氨基四乙酸锌络合物。

合适的含卤素的离子型化合物可选自，例如含有氯离子、氟离子、溴离子和碘离子的化合物。在优选的实施方案中，合适的含卤素阳离子化合物包括，但不限为，十六烷基吡啶卤化物、十六烷基三甲基铵卤化物、十六烷基二甲基乙基铵卤化物、十六烷基二甲基苄铵卤化物、十六烷基三丁基鏻卤化物、十二烷基三甲基铵卤化物或十四烷基三甲基铵卤化物。在一些特定的实施方案中，合适的阳离子含卤素化合物包括，但不限于，氯化十六烷基吡啶(CPC)、氯化十六烷基三甲基铵、氯化十六烷基苄基二甲基铵、溴化十六烷基吡啶(CPB)、溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)、溴化十六烷基二甲基乙基铵、溴化十六烷基三丁基鏻、溴化十二烷基三甲基铵和溴化十四烷基三甲基铵的化合物。在特别优选的实施方案中，含卤素阳离子化合物是CPC，尽管本发明的组合物不限于具有特定含阳离子的化合物的制剂。

范例性离子型表面活性剂包含十六烷基吡啶卤化物和十六烷基三甲基铵卤化物。

金属络合物是有用的消毒和抗菌制剂。它们是表现广范围的抗菌作用，不可逆转地杀死致病微生物的杀菌试剂。金属络合物的作用机制是基于阻断微生物的蛋白质和酶系统的氨基酸基团。在第一个阶段，与螯合络合物形成缔合物并然后蛋白的氨基酸基团取代单齿、二齿或多齿配体，这导致完全阻断微生物中的代谢过程并随后导致它们的死亡。

该提出的化合物涉及IY毒性级别。本发明的杀微生物或杀孢子组合物的剂量不会在皮肤或粘膜上引起明显的毒性或刺激效果。

提出的基于螯合金属络合物的该组合物不会在动物或人生物体上产生影响，因为含氨基酸基团的化合物通过生物体的交换反应而得以复原。杀菌螯合络合物不会影响该生物体最重要的生命功能。

提出的该杀菌剂涉及具有螯合配体的金属络合物，所述的金属络合物是在碱性而不是在酸性pH范围内获得。因此，提出的该组合物相比于其类似物具有更广的应用领域，因为基于其不同的杀菌作用机制它在生态学上是安全的并且具有低的毒性和卫生学性质。而且，提出的该组合物表现出对环境影响有增加的化学稳定性(即，所述络合物的稳定常数比其最接近类似物的稳定常数高几个数量级)。

有用的单齿、二齿或多齿配体包括表现出对氢离子有亲和性的配体，这决定了它们被微生物中的蛋白的氨基取代的能力。

提出的杀菌剂的分子含有金属离子，优选地，例如铜(II)和锌离子以及单齿、二齿或多齿配体，所述的这些离子和配体表现出对氢离子如铵、单、二-和三乙醇胺及其它的亲和性。

获得的杀菌组合物的pH是约≥7.0。

为了合成杀菌剂，使用金属盐。合成是在含水溶液中通过在室温下搅拌成分而进行。使用的单齿配体是表现出对氢离子有亲和性的可水溶物质。

本杀菌组合物的显著特性是成分的相互作用(混合)是在pH≥约7.0下在缺少无机酸的中性和碱性介质中进行。

至于消毒活性的参数，已确定本发明杀微生物和杀孢子组合物是足够有效的并不需要使用任何额外的消毒制剂如氯己定(Chlorohexydine)、过氧化氢等。

用于合成氯化氨基乙酸铜络合物和亚乙基二氨基四乙酸锌络合物的方法从下列来源可知：Ley，Berichte，V.42，S.371；Hofmeister，“Beittage zur Kenntiniss der Amidosurcn”Annalen der Chemie，1877 V.189，S.36；“Synthetic Production and Utilization ofAmino Acids”，Ed.T.Kaneko，Y.Izumi，I.Chibata，Wiley，N.Y.，1974；和Dyatlova N.M.等，Complexones and Metal Complexonates，M.：-《Khimiya》1988)。

氯化氨基乙酸铜络合物、亚乙基二氨基四乙酸锌络合物及其组合物的抗微生物活性在莫斯科的Scientific Research DisinfectologyInstitute得以研究。

将提出的组合物的成分比例作了选择以便提供最优的制备工艺特性以及使得保留理想的稳定性。

组合物中的浓度范围：

螯合金属络合物                         约1％-30％

离子型表面活性剂(例如季铵卤化物-、     约0.1％-15％

C₁₂-C₁₆-烷基三甲铵、二(C₈-C₁₀-烷基)

二甲铵，特别是十六烷基吡啶和十六烷基

三甲基铵卤化物)

脂族醇(C₁-C₈)                        约0.5％-95％

水或其它组分                           约3％-98％

建议的组合物中组分的浓度范围由获得上述杀菌、杀真菌和杀孢子活性的目标确定。通过利用作为离子型表面活性剂的季铵卤化物，特别是C₁₂-C₁₆烷基三甲基铵、二(C₈-C₁₀-烷基)二甲铵、C₁₂-C₁₆-烷基吡啶，特别是十六烷基吡啶和十六烷基三甲基铵卤化物可获得技术结果。

VI.杀微生物/杀孢子组合物的制剂和递送

A药物组合物

可将本发明的杀微生物或杀孢子组合物整合入具有适于施用的可药用载体的药物组合物中。如此处使用的，“可药用载体”意于包括与药物施用兼容的任何和全部溶剂、分散介质涂料、抗菌和抗真菌化合物、等渗化合物和吸收延迟化合物等。合适的载体在最新版本的Remington′s Pharmaceutical Sciences中描述，这是本领域的一本标准的参考书，在这里将其通过引用作为参考。这种载体或稀释剂的优选实例包括，但不限于，水、林格盐溶液和葡萄糖溶液。也可能使用脂质体和不含水的载体如固定油。这种介质和化合物在药学活性物质中的用途是本领域熟知的。除了与活性化合物不兼容的任何传统介质或化合物外，考虑将它们用于本发明组合物中。也可以将补充的活性化合物整合进组合物中。

将本发明的药物组合物制成为与经皮肤(例如，局部的)途径施用、经粘膜(例如阴道粘膜)和直肠施用相兼容。用于经皮肤、经粘膜或直肠施用的溶液或混悬液可以包括下列的组分：无菌稀释剂如用于注射的水、盐水溶液、固定油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成的溶剂；抗菌化合物如苯甲醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合化合物如乙二胺四乙酸(EDTA)；缓冲剂如醋酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐以及用于调节张力的化合物如氯化钠或葡萄糖。pH可用酸或碱如盐酸或氢氧化钠调节。在所有情况下，组合物必须是无菌的并且应该是流体，所述的流体达到容易进行局部施用的需要的程度。适当的流动性可例如通过用包衣如卵磷脂、在分散剂的情况下通过保持所需的粒子大小，以及通过使用表面活化剂来维持。该杀微生物或杀孢子组合物在生产和储存的条件下必须是稳定的。载体可以是含有如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)及其合适的混合物的溶剂或分散介质。

当本发明组合物作为局部药物施用时，考虑组合物进一步包含可药用助剂、赋形剂、稳定剂、稀释剂等。在更进一步实施方案中，本发明考虑进一步含有额外的可药用生物活性分子的组合物。关于药学活性，有效量涉及在获得理想的最后结果中有用的剂量。这种剂量取决于受试者，即年龄、大小等，并可以由本领域技术人员容易地确定。

对于局部施用，可药用载体可以采用液体、乳膏、洗液或凝胶剂的形式并且可以额外地包含有机溶剂、乳化剂、胶凝剂、增湿剂、稳定剂、表面活性剂、湿润剂、防腐剂、缓释剂(time release agent)和小量保湿剂、螯合剂、染料、香料和通常在用于局部施用的药物组合物中采用的其它成分。可以将本发明的组合物整合进吸收材料如缝线、绷带和纱布或涂敷在固相材料如肘钉、拉链和用于递送本组合物至微生物感染部位的导管的表面的材料。这类其它递送系统将对本领域技术人员是十分显然的。

对于局部施用，可药用载体可以采用液体、乳膏、泡沫、洗剂或凝胶剂的形式，并且可以额外地包含有机溶剂、乳化剂、胶凝剂、增湿剂、稳定剂、表面活性剂、湿润剂、防腐剂、缓释剂和小量保湿剂、螯合剂、染料、香料和通常在用于局部施用的药物组合物中采用的其它成分。

在许多情况下，优选在组合物中包括等渗化合物，例如糖、多元醇如甘露醇、山梨醇和氯化钠。通过将延缓吸收的化合物如单硬脂酸铝和明胶包含于该组合物中可以引起本组合物的延长吸收。

对于经粘膜或经皮肤施用，将使屏障穿透的合适的渗透剂用于制剂中。这种渗透剂在本领域中一般是已知的，并且包括，例如对经粘膜施用，去污剂、胆汁盐和梭链孢酸衍生物。经粘膜施用可通过使用鼻喷雾剂或栓剂完成。对于经皮肤施用，将活性化合物制剂为软膏剂、油膏剂、凝胶剂或乳膏，这在本技术领域中一般是已知的。杀微生物或杀孢子组合物可以含有任何一种以下的成分或相似性质的化合物：润滑剂如硬脂酸镁或Sterotes和/或助流剂如胶体二氧化硅。此外，可将本发明组合物与其它化学元素包括亲水化合物和疏水聚合物，如在美国专利No.5,417,968中明确宣布的，联合使用以使这种产品用作为提供抗病毒、抗细菌和抗真菌保护的预防性皮肤屏障。而且，可以将杀微生物或杀孢子组合物与多种抗菌和抗真菌组合物如对羟苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、抗坏血酸、硫柳汞等联合。

也可将本化合物制备为栓剂形式(例如，具有传统的栓剂基质如可可脂和其它甘油酯)或用于直肠递送的保留灌肠剂的药物组合物。在一个实施方案中，将活性化合物与保护化合物不从体内快速清除的载体一起制备，如控释制剂，包括植入物和微囊递送体系。可以使用生物可降解的、生物相容的聚合物，如乙烯醋酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯和聚乳酸。制备这种制剂的方法对本领域技术人员是明显的。脂质体混悬剂(包含针对受感染细胞的脂质体，含有针对病毒抗原的单克隆抗体)也可以用作可药用载体。这可根据本领域技术人员已知的方法，如按在美国专利No 4,522,811中描述的制备。

用于阴道冲洗的灌洗制剂或溶液可以通过将活性成分与可药用液体载体结合制备。如本领域熟知的，灌洗制剂可以使用并可以包装于适合受试者的阴道解剖学的递送装置施用。灌洗制剂可进一步包含多种额外的成分，包括但不限于抗氧化剂和防腐剂。

用于治疗头皮屑的制剂可以通过将活性成分与可药用载体结合而制造。活性成分可以单独使用或与其它成功用于治疗头皮屑的一般局部制剂如酮康唑、吡硫锌、二硫化硒、硫磺和煤焦油联合使用。用于治疗头皮屑的制剂一般是洗发剂，这是本领域所熟知的制剂。吡硫锌降低快速分裂的表皮细胞的更新。煤焦油具有抗菌、止痒(抗搔痒)和使表皮脱落的性质。

B一般制剂

如此处使用的，“可药用载体”意于包括任何的和所有与药物施用兼容的溶剂、分散介质、包被物、抗菌和抗真菌化合物、等渗和吸收延缓化合物等。合适的载体在最近版本的Remington′sPharmaceutical Sciences中描述，这是本领域中的一个标准参考文献，在此将其通过引用作为参考。这种载体或稀释剂的优选实例包括，但不限于，水、盐水、林格溶液、葡萄糖溶液和5％的人血清白蛋白。也可以使用脂质体和不含水载体如固定油。这种介质和化合物用于药学活性物质的用途在本领域中是熟知的。除了与活性化合物不相容的任何常规介质或化合物外，考虑将它们用于本组合物中。也可以将补充的活性化合物整合进该组合物中。

将本发明的药物组合物制成与其预期的施用途径相容的制剂。施用途径的实例包括肠胃外如静脉内、皮内、皮下、经口(例如吸入)、经皮肤(即局部)、经粘膜、眼和直肠施用。用于肠胃外、皮内或皮下应用的溶液或混悬液可以包括以下成分：无菌稀释液如用于注射的水、盐水溶液、固定油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成的溶剂；抗菌化合物如苯甲醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合化合物如乙二胺四乙酸(EDTA)；缓冲剂如醋酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐以及用于调节张力的化合物如氯化钠或葡萄糖。pH可以用酸或碱如盐酸或氢氧化钠调节。肠胃外制剂可以包含于由玻璃或塑料制成的安瓿、一次性使用注射器或多剂量小瓶中。

适于可注射用途的药用组合物包括无菌含水溶液(当水可溶时)或用于即时制备无菌可注射溶剂或分散相的分散剂和无菌粉末。对于静脉内施用，合适的载体包括生理盐水、抑菌水、Cremophor ELTM(BASF，Parsippany，新泽西州)或磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)。在所有情况下，组合物必须是无菌的并且应该是达到容易进行注射程度的流体。其必须在制造和储存的条件下是稳定的并且必须将其防腐以防止微生物如细菌和真菌的污染作用。载体可以是含有例如水、乙醇、多元醇(如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)及其合适的混合物的溶剂或分散介质。适当的流动性可例如通过用包被物如卵磷脂、在分散剂的情况下通过保持所需的粒子大小，以及通过使用表面活化剂来维持。对微生物的作用的预防可以通过多种杀微生物或杀孢子化合物如对羟苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、抗坏血酸、硫柳汞等完成。在许多情况下，优选在组合物中包括等渗化合物，例如糖、多元醇如甘露醇、山梨醇和氯化钠。通过将延缓吸收的化合物如单硬脂酸铝和明胶包含于该组合物中可以引起对该可注射组合物的延长吸收。

无菌可注射溶液可以通过将所需量的杀微生物或杀孢子组合物与上面列举的成分的一种或其组合整合于合适溶剂中而制备，如果需要，随后过滤灭菌。通常，分散剂通过将杀微生物或杀孢子组合物整合进无菌载体中而制备，所述的载体含有基本的分散介质和所需的来自那些上面列举的物质的其它成分。至于用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末，制备的方法是真空干燥和冷冻干燥，所述的方法产生活性物质，加上任何来自前面的其无菌过滤溶液的额外所需的成分的粉末。

口服组合物一般包括惰性稀释剂或可食用载体。可将它们包封于胶囊中或压缩成片剂。为了口服治疗施用，可将活性化合物与赋形剂整合并以片剂、锭剂或胶囊剂的形式使用。口服组合物也可用流体载体制备以用作漱口剂，其中在流体载体中的化合物经口应用，漱口并吐出或吞下。可包含药学上可兼容的粘合化合物和/或辅助材料作为组合物的一部分。片剂、丸剂、胶囊剂、锭剂等可包含任何下列成分，或类似性质的化合物：粘合剂如微晶纤维素、西黄蓍胶或明胶；赋形剂如淀粉或乳糖、崩解化合物如藻酸、Primogel、玉米淀粉；润滑剂如硬脂酸镁或Sterotes：助流剂如胶体二氧化硅；甜味剂化合物如蔗糖或糖精；或芳香剂化合物如薄荷、水杨酸甲酯或桔味芳香剂；

对于通过吸入施用，化合物是以喷雾剂的形式从含有合适的喷射剂例如气体如二氧化碳的压力容器或分配器递送，或者从喷雾器递送。

全身施用也可通过经粘膜或经皮肤方式进行。对于经粘膜或经皮肤施用，将使屏障穿透的合适的渗透剂用于制剂中。这种渗透剂在本领域中一般是已知的，并且包括(例如对经粘膜施用)去污剂、胆汁盐和梭链孢酸衍生物。经粘膜施用可通过使用鼻喷雾剂或栓剂完成。对于经皮肤施用，将活性化合物制剂为软膏剂、油膏剂、凝胶剂或乳膏，这是本领域通常已知的。

也可将杀微生物和杀孢子组合物制备为栓剂形式(例如，具有传统的栓剂基质如可可脂和其它甘油酯)或用于直肠递送的保留灌肠剂的药物组合物。

在一个实施方案中，将杀微生物和杀孢子组合物与保护化合物不从体内快速清除的载体一起制备，如控释制剂，包括植入物和微囊递送体系。可以使用生物可降解的、生物相容的聚合物，如乙烯醋酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯和聚乳酸。用于制备这种制剂的方法对本领域技术人员是显而易见的。这些物质也可以商业上从Alza公司和Nova制药公司获得。脂质体混悬剂(包括针对受感染的细胞的脂质体，含有针对病毒抗原的单克隆抗体)也可用作可药用载体。这可根据本领域技术人员已知的方法，如按在美国申请No4,522,811中描述的制备。

在另外的实施方案中，本发明杀微生物或杀孢子组合物与一种或多种以下制剂联合或与其同时施用：手术前皮肤洗剂(例如，Trizenol、Triseptin和/或Actiprep)、局部抗真菌制剂(例如Mitrazol)、伤口清洁剂(如Allclenz)、局部抗感染剂(如Panafil和/或Lodosorb)、基于抗生素的局部抗痤疮制剂(例如Akno-mycin)；皮炎脸部洗剂(例如Ovace)、伤口清创剂(如在美国专利No.6,548,556和在美国专利No.20030198631和No.20030198632中公开的)；皮肤保护剂(如在美国专利No.5,482,714和5,558,872中公开的)；其它抗微生物组合物(例如在美国专利申请案No.20020022660中公开的)；和众多的洗发剂和皮肤洗涤剂。

在另外的实施方案中，本发明杀微生物或杀孢子组合物与一种或多种以下制剂联合或与其同时施用以清洁和消毒医疗用具和表面：化学杀菌剂(例如在美国专利No.5,327,542和No.6,005,348中公开的杀菌溶液)；其它杀菌、杀真菌、杀结核菌和杀病毒消毒/杀菌制剂(例如在美国专利No.5,863,547和美国专利申请案No.20030157192中公开的)。

特别有利的是制造单位剂量形式的口服或肠胃外组合物以使得剂量的施用和一致性变得容易。如此处使用的单位剂量形式指物理上分离的单位，其适合作为单一剂量用于受治疗的受试者；每个单位含有与所需药物载体联合的经计算能产生理想的疗效的预定量的活性物质。本发明的剂量单位形式的规格由活性化合物的独有特性和要获得的特定疗效以及制备用于治疗个体的此等活性化合物的领域中内在的限制支配或直接取决于它们。

C.用于其它递送方式和应用的杀微生物/杀孢子组合物的制剂

本发明组合物可单独用作有效的抗病毒、抗细菌和抗真菌物质以提供多种产品，包括但不限于，软膏、消毒洗手肥皂、低变应原护手霜、洗发剂、面部使用的肥皂、灌洗液、洗衣产品、洗碟产品(包括bar glass dip)、浴室清洁产品、牙科产品(例如漱口剂、牙科粘胶、saliva injector filter、水过滤)、急救软膏剂和喷雾剂、手洗净剂、足洗净剂、眼用软膏或洗净剂、用于趾甲真菌治疗的产品、用于皮肤表面感染的局部治疗产品、即药物、手术前皮肤清洗或伤口清洗剂以及消毒和脱臭产品的装置。照这样，考虑本发明组合物可以以许多不同的方式递送，包括液体、喷洒胶(spray paste)、凝胶剂、粉剂、脱水片剂，或将本组合物整合进液体、固体或干肥皂、清洁剂和除垢剂中。本发明提出的糊剂、凝胶剂、粉剂和浓缩脱水片剂是本领域技术人员很容易知道的。也考虑可将糊剂、凝胶剂或固体药物形式以有效量预先提供给抹布、纱布或粘性绷带以使包装、储存、携带和发药变得容易和方便。例如，与HIV相关的小的皮肤损伤可以有效地用局部敷用处理。使用粘性绷带递送形式可以完成局部敷用。而且，可以将本组合物喷射进空气中以灭活空气中有害的微生物。这种喷雾消毒剂由技术人员很容易制备并且载体的选择是本领域的技术范围内。

可将本组合物用于气雾化的、雾化的、汽化的、烟雾化的、潮湿化的或用于产生本组合物微粒化粒子的其它形式，所述的这些形式可以长期悬浮于空气中。微粒化粒子作用很像熏剂，对可能受病原体污染的所有表面提供完全的覆盖。在任何这些形式中，本组合物能阻断空气中的真菌、细菌和病毒、孢子，和/或不活动(休眠)阶段的病原体。该组合物刺激病原体生长和/或另外活化病原体的休眠阶段，并且由其自身确定的制剂或与其它制剂的其它组分联合通过接触和/或将全部制剂作用于病原体上能杀死滋养型阶段和/或孢子和/或休眠孢子和/或病原体的休眠阶段。

D.联合治疗

这里描述的抗微生物化合物可用于治疗感染和对感染的生理学反应如炎症、组织坏死、败血症和其它由描述的感染引起的其它疾病。在一优选的方面，将抗微生物化合物配制成用于皮肤病治疗或预防的药物组合物。而且，当抗微生物剂是通过口服剂量提供时，例如兰美抒，本发明抗微生物化合物可以局部应用以增强经口的治疗。适合局部制剂的抗微生物化合物剂量在上面提供。以下是非限制性的全身和局部皮肤制剂的实例，每种能与本发明抗微生物组合物结合使用，或另外，可将其重新配制以含有这里描述的抗微生物组合物。

Zimycan是开发用于治疗婴儿中与念珠菌属相关的尿布皮炎的制剂。这种在氧化锌和凡士林基质中的基于咪康唑的局部产品将与基于类固醇的处方治疗竞争。可将本发明抗微生物化合物配制成含有Zimycan的局部制剂以提供额外的抗真菌和广谱抗微生物活性。

Seboride是一种局部凝胶剂，它结合了抗真菌剂酮康唑的长期效应和类固醇即地奈德的快速作用、中等效能。该制剂提供更高的抗真菌效能，具有一天一次，仅使用两周的便利。Seboride针对脂溢性皮炎，脂溢性皮炎是每年影响百分之三至百分之五的美国青少年和成人群体的一种疾病。可将本发明抗微生物化合物配制成含有Seboride的局部制剂以提供额外的抗真菌和广谱抗微生物活性。

Sporamelt是口服抗真菌依曲康唑的增强版本。Sporamelt的特色是采用新颖的递送技术，该技术允许每日一次的口服剂量用于皮肤和指甲霉菌病和阴道念珠病菌。Sporamelt意于准许每日一次的剂量用于真菌感染的脉动疗法。该产品是全身性口服制剂，而本发明抗微生物化合物的局部用制剂弥补了口服Sporamelt疗法，提供了额外的抗真菌和额外的广谱抗微生物活性。

Liarozole和Rambazole是一类称作RAMBA类分子的成员(视黄酸代谢阻滞剂)。RAMBA类已经显示比类视黄醇如Accutane、Retin-A和Soriatane更安全并且有更小的刺激性。用Liarozole和Rambazole的口服治疗已经证明在提供对抗疾病如鱼鳞病(也包括先天性形式)、银屑病和痤疮的疗效中有阳性效果。Rambazole和Liarozole利用身体的自身视黄酸储备，是第一种基于这种药理学作用机制的皮肤病学产品，并显著地减少使用传统的口服和局部衍生物通常发生的长期毒副作用。Rambazole^已经证明在口服研究中比Liarozole具有更好的治疗指数。局部治疗已经得到给人深刻印象的结果并得到比口服治疗所得的甚至更安全的治疗指数。当将这些产品用于口服制剂用以全身性治疗时，本发明抗微生物化合物的局部用制剂弥补了口服的Liarozole和Rambazole疗法。也可将本发明抗微生物化合物配制成含有Liarozole和Rambazole的局部用制剂，以提供额外的抗真菌和广谱抗微生物活性治疗。

Azoline是新颖的三唑衍生物，已经显示在治疗动物中的皮肤真菌感染中比依曲康唑多5倍活性。它既具有这种较高的效力，也比先前的吡咯衍生物在与肝脏中的药物代谢酶的相互作用方面潜能低5-10倍。该产品是全身性口服制剂，而本发明抗微生物化合物的局部用制剂弥补了口服Azoline疗法，提供了额外的抗真菌和广谱抗微生物活性。

Hivenyl是高度选择性的抗组胺阻滞剂，其不能穿透血脑屏障并因而消除了任何类型的镇静风险。在自愿者中的一周的试验(一直达到所需日剂量的15倍)中证明其在抑制组胺诱导的风团和潮红反应中是安全和有效的。已经广泛地测试了Hivenyl可能的继发性心血管效果，并且没有发现负效应。Hivenyl治疗皮肤病学变态反应。该产物是全身性口服制剂，但本发明抗微生物化合物的局部用制剂弥补了口服的Hivenyl疗法，提供局部的广谱抗微生物活性，杀死产生在皮肤病学病态反应中可见的炎症和风疹的生物体。

已经评价Atopik是治疗湿疹/皮炎的有效的局部药物。它是磷酸二酯酶4(PDE₄)抑制剂，已经将其特别地配制为局部使用形式以避免与PDE₄的全身抑制相关的副作用。早先的第一个人类试验结果证明在Atopik和一种有效的类固醇戊酸倍他米松在抑制接触性和刺激性皮炎上具有相当的效力。本发明的抗微生物化合物的局部用制剂弥补了使用磷酸二酯酶4抑制剂的疗法，提供了局部广谱抗微生物活性，杀死产生在接触性和刺激性皮炎中可见的炎症和风疹的生物体。

Ketanserin是5-羟色胺II拮抗剂，将其在慢性创伤，特别是那些糖尿病和动脉起源的慢性创伤的治疗中用作局部用药剂。该药物通过刺激肉芽组织作用，导致更快的创伤愈合。本发明抗微生物化合物的局部用制剂弥补了使用5-羟色胺II拮抗剂的疗法，提供了局部的广谱抗微生物活性并给最适的创伤愈合提供无菌条件。

Oxatomide是局部活性的广谱、抗-变态反应化合物，其显示了局部抑制特应性湿疹中的搔痒、烧伤(UV、化学和热烧伤)中的疼痛和炎症以及与搔痒相关的各种皮肤病症。本发明抗微生物化合物的局部用制剂弥补了使用Oxatomide的疗法，提供了额外的局部的广谱抗微生物活性，特别是对抗真核微生物的活性，减少炎症并且给最适的痊愈提供无菌条件。

Ecalcidene是口服的维生素D₃衍生物，其在比引起与高钙血综合征相关的毒性的剂量低10-100倍的剂量具有免疫效应。该药物可用于治疗银屑病、骨质疏松症、器官移植排斥和慢性炎性障碍(例如类风湿性关节炎)。该药物是一种全身性口服药剂，但是本发明抗微生物化合物的局部用制剂弥补了口服Ecalcidene疗法，提供额外的抗真菌和广谱抗微生物活性。

VII.疾病和障碍的治疗

A.本发明组合物的预防和治疗用途

本发明的杀微生物或杀孢子组合物可用于涉及受试者中的多种疾病(见疾病和障碍)的潜在的预防和治疗应用。以增加的(相对于不患有疾病或障碍的受试者)细菌、酵母、真菌或病毒的生物活性水平为特征的疾病和障碍可以用对抗(即减少或抑制)生长并可以以治疗或预防方式施用的基于AMC的治疗性化合物治疗。细菌、酵母、真菌或病毒的水平可以通过获取患者的组织样品(例如，来自活体组织或刮削下的碎屑)并通过适当的培养，随后使用本领域熟知的微生物学技术，如革兰氏染色法通过细胞化学染色和/或检查在体外检测细菌、酵母、真菌或病毒水平。备选地，使用本领域熟知的细胞生物学技术如聚合酶链式反应，可以评估样品中微生物、真菌或病毒核酸的存在。可用于测量细菌、酵母、真菌或病毒水平的本领域熟知的其它方法包括，但不限于，免疫测定法(例如，通过蛋白印迹分析、免疫沉淀后通过十二烷基硫酸钠(SDS)聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫化学等)和/或杂交测定法来检测mRNA的表达(例如RNA印迹测定法、斑点印迹法、原位杂交法等)。

i.预防方法

在一方面，本发明提供通过施用给受试者杀微生物或杀孢子组合物，用于在受试者中预防与微生物相关的疾病或病症的方法。存在由细菌、酵母、真菌或病毒增殖引起的或由其促成的疾病风险的受试者可以通过例如任何于此处描述的诊断或预后测定法或其组合而鉴别。本发明预防性杀微生物或杀孢子组合物的施用可以在反常的症状特征明显之前进行，这样疾病或障碍得以预防或，备选地，疾病或障碍的发展得到延缓。取决于反常的类型，例如，充当细菌、酵母、真菌或病毒增殖拮抗剂的本发明杀微生物或杀孢子组合物可以基于这里描述的筛选试验得以确定。

ii.治疗性方法

本发明的另一方面包括在受试者中抑制细菌、酵母、真菌或病毒活化和/或增殖的用于治疗目的的方法。本发明的调节方法涉及将细胞与抑制细菌、酵母、真菌或病毒活化和/或增殖的本发明化合物接触。这些方法可通过在体外进行(例如，通过将细胞与杀微生物或杀孢子组合物培养)或，备选地，通过施用杀微生物或杀孢子组合物至受试者在体内进行(例如局部施用杀微生物或杀孢子组合物)。照这样，本发明提供治疗患有由细菌、酵母、真菌或病毒的异常活化或增殖引起的疾病或病症的个体的方法

B.杀微生物/杀孢子组合物的生物学效应的测定

在本发明的不同实施方案中，进行合适的体外或体内测定法以测定特定杀微生物或杀孢子组合物的效果以及其施用是否已表明用于在受试者中治疗受影响的组织。用于治疗中的化合物可以在人类受试者中测试之前在合适的动物模型系统中进行测试，所述的动物模型包括，但不限于大鼠、小鼠、鸡、奶牛、猴、兔等。类似地，对于体内测试，可在施用给人受试者之前使用本领域已知的任何动物模型系统。在多种特定的实施方案中，可用涉及患者病症的类型的代表性细胞进行体外测定以确定给定的基于AMC的组合物是否对该特定细胞类型发挥了理想的效果。

C.疾病和病症

微生物活化和/或增殖与许多疾病相关，所有的这些疾病可通过施用杀微生物或杀孢子组合物来影响。本发明提供治疗存在感来疾病风险或易感染疾病或患有疾病的受试者的预防性和治疗性方法，其中所述的疾病与异常的微生物活化和/或增殖，例如，但不限于细菌、酵母、真菌或病毒活化和/或增殖相关。

i.杀微生物/杀孢子组合物预防或治疗细菌感染的用途

本发明的杀细菌或杀孢子组合物当以有效量使用时可用于预防或治疗性处理假单胞菌属(Pseudomonas)感染。一种假单胞菌种是重要的人病原体。绿脓假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是一种条件致病菌，其是医源性(医院内)感染的最主要的原因。

本发明的杀细菌或杀孢子组合物当以有效量使用时可用于预防或治疗性处理肠道细菌感染。肠道细菌是生活在动物肠道中的具有兼性无氧代谢的革兰氏阴性杆菌。这类包括大肠杆菌及其亲缘菌即肠杆菌科(Enterobacteriaceae)家族的成员。少量大肠杆菌菌株是致病的，如大肠杆菌菌株0157:H7。致病性大肠杆菌引起肠道感染和泌尿道感染。

本发明的杀细菌或杀孢子组合物当以有效量使用时可用于预防或治疗性处理球菌感染。化脓性球菌(pyogenic cocci)是在动物中引起多种化脓性(产生脓汁的)感染的球形细菌。包括的细菌是革兰氏阳性球菌金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌(S.pyogenes)和肺炎链球菌(S.pneumoniae)和革兰氏阴性球菌淋病奈瑟氏球菌(Neisseriagonorrhoeae)和脑膜炎奈瑟氏球菌(N.meningitidis)。这些细菌是人最主要的病原体。据估计它们产生人的至少三分之一的总的细菌感染，包括脓毒性咽喉炎、肺炎、食物中毒、各种皮肤疾病和严重类型的感染性休克、淋病和脑膜炎。

而且，两个种的葡萄球菌与人生活在一起：表皮葡萄球菌(S.epidermidis)，它正常地生活在皮肤和粘膜，和金黄色葡萄球菌，其可以正常出现在不同的部位，但特别是在鼻膜(鼻孔)上。表皮葡萄球菌有时是病原体。金黄色葡萄球菌总具有引起疾病的潜能并因而认为是病原体。金黄色葡萄球菌可以引起广泛的感染，并且它常常作为人的正常菌群出现(在皮肤、鼻膜和胃肠道上)，这确保它很容易地从一个个体传播到另一个体。金黄色葡萄球菌的不同菌株在它们能引起的疾病的范围上不同，所述的疾病包括疖和小脓疱(pimple)、创伤感染、肺炎、骨髓炎、败血症、食物中毒和中毒性休克综合征。金黄色葡萄球菌是由革兰氏阳性菌感染引起的医源(医院引起的)感染的首要原因。而且，众所周知它对青霉素和许多其他抗生素有抗性。

化脓性链球菌，更特定地是β-溶血性A族链球菌，像金黄色葡萄球菌，除了一些自身免疫疾病或变应性疾病外，引起一批化脓性疾病和中毒症(即由于细菌毒素产生引起的疾病)。化脓性链球菌绝少以正常菌群存在(＜1％)，但它是人主要的链球菌病原体，最可能引起扁桃体炎和脓毒性咽喉炎。链球菌也侵入皮肤引起局部感染和损伤，并且产生引起猩红热和中毒性休克的毒素。

肺炎链球菌是人中细菌性肺炎的最常见原因。它也是中耳炎(中耳的感染)和脑膜炎的常见原因。细菌寄居在鼻咽部位并从那里获得通往肺部或咽鼓管的途径。如果下行进入肺部中，如果它们具有以某种方式防止吞食过程的荚膜，它们可以阻碍肺泡巨噬细胞吞食。因而，有荚膜的菌株能侵入肺部并是恶性的(引起疾病)，而无荚膜的菌株很容易被吞噬细胞除去，是无害的。

本发明的杀细菌或杀孢子组合物当以0.1-100％的浓度使用时可用于预防或治疗性处理芽孢杆菌感染。至少48个种，包括枯草芽孢杆菌(B.subtilis)，是已知的，但仅炭疽杆菌(B.anthracis)和蜡样芽胞杆菌(B.cereus)在人中引起疾病。炭疽杆菌引起炭疽疾病。该疾病主要是动物的疾病，但人可以通过处理、吸入或摄取受污染的动物产品获得炭疽。

炭疽感染是通过侵入途径分类。在皮肤炭疽中，芽孢杆菌孢子通过切割或动物咬伤进入皮肤并萌芽。1-7天后出现小的红色病灶，最终产生局部坏死(即“黑色焦痂”)。细菌的扩散引起局部的淋巴触痛，这可能伴随着中毒性败血症和死亡。仅约5％的皮肤感染变为脓毒性吸入性炭疽。在吸入性炭疽中，芽孢杆菌孢子被吸入并通过肺泡巨噬细胞摄入。这携带细菌至局部的淋巴结，引起导致死亡的坏死性出血。

蜡样芽胞杆菌主要是对人的食物中毒负责。蜡样芽胞杆菌食物中毒起因于对预形成的肠毒素的摄食，主要产生呕吐和腹泻。呕吐形式常常与来自受污染的米的热稳定性毒素的摄食相关，而腹泻形式常常与来自受污染的肉或蔬菜的不耐热毒素的摄食相关。

本发明的杀细菌或杀孢子组合物当以有效量使用时可用于预防或治疗性处理导致痤疮的感染。痤疮中的细菌包括疮疱丙酸杆菌(Proprionibacterium acnes)(P.aces)、颗粒丙酸杆菌(Proprionibacterium granulosum)和表皮葡萄球菌。在某些类型的痤疮，包括例如非炎性痤疮、炎性痤疮和痤疮聚集体中酵母粃糠状鳞斑霉(Malassezia furfur)的数目也增加。

疮疱丙酸杆菌可以产生促成痤疮活性的活性酶和炎症介质。这些包括：脂酶、蛋白酶、透明质酸裂解酶、磷酸酶和平滑肌收缩物质。

虽然所有小脓包始于相同的途径，但它们可以采取许多形式并对不同的人可以反应不同。所有的痤疮开始于填充有油脂和细菌的基本的病灶、粉刺、扩大的毛囊。粉刺是肉眼看不见的，其潜伏在皮肤表面下等待合适的条件生长为发炎的病灶。当皮肤持续产生更多的油脂，细菌活跃于肿胀的小囊中。当你的白细胞抵抗侵入者时，周围的皮肤变得逐渐发炎。

ii.杀微生物/杀孢子组合物预防或治疗真菌/酵母感染的用途

本发明的杀微生物和杀孢子组合物当以有效量使用时，可用于预防或治疗性处理皮肤真菌感染，例如人源的、动物源的或土壤源的真菌感染。皮肤真菌是由于其利用角蛋白的能力而可以引起皮肤、毛发和指甲感染的真菌。这些生物体寄生在角蛋白组织中并且炎症通过宿主对代谢副产物的反应引起。这些感染称为与受感染的身体部分相关的癣菌病或癣。

偶尔，这些生物体确实可以侵入皮下组织，致使脓癣产生。这些生物体通过直接与受感染的宿主(人或动物)或直接或间接与梳子、毛刷、衣物家具、剧场座位、帽子、被单和枕套、手巾、旅馆地毯和衣帽间地板中受感染的、剥脱的皮肤或毛发直接或间接接触传播。取决于种类，该生物体可以在环境保持活力达15个月。当有预先存在的皮肤损伤如伤疤、烧伤、marching、过度的温度和湿度时，对感染的易感性增加。

根据它们的正常生活环境将皮肤真菌分类为人源的、动物源的或土壤源的真菌。人源皮肤真菌局限于人宿主并产生轻度慢性炎症。动物源生物体主要在动物中发现并在与受感染的猫、狗、牛、马、鸟或其它动物有过接触的人中引起显著的炎性反应。这伴随着快速的感染终止。土壤源种类通常在土壤中获得，但偶尔感染人和动物。这引起显著的炎性反应，限制了感染的扩展并可能导致自愈但也可能留下疤痕。

人源、动物源和土壤源皮肤真菌包括：絮状表皮癣菌(Epidermophyton floccosum)；奥杜盎氏小孢子菌(Microsporumaudouinii)；铁锈色小孢子菌(Microsporum ferrugineum)；同心性毛菌(Trichophyton concentricum)、Trichophyton kanei；麦格尼氏发癣菌(Trichophyton megninii)；须疮癣菌(Trichophytonmentagrophytes)；Trichophyton raubitschekii；深红色发癣菌(Trichophyton rubrum)；许兰氏毛菌(Trichophytonschoenleinii)；苏丹奈斯发癣菌(Trichophyton soudanense)；断发发癣菌(Trichophyton tonsurans)；堇色发癣菌(Trichophytonviolaceum)；杨德氏发癣菌(Trichophyton yaoundei)；犬小芽胞菌(Microsporum canis)(猫、狗等)、马类小孢子菌(Microsporumequinum)(马)；矮小孢子菌(Microsporum nanum)(猪)；桃色小孢子菌(Microsporum persicolor)(啮齿类)；马发癣菌(Trichophyton equinum)(马)；须疮癣菌(Trichophytonmentagrophytes)(颗粒状的；啮齿类、兔类、刺猬等)；猴发癣菌(Trichophyton simii)(猴)；疣发癣菌(Trichophyton verrucosum)(牛)；石膏样小孢子菌(Microsporum gypseum)；艾吉罗氏发癣菌(Trichophyton ajelloi)和土发癣菌(Trichophyton terrestre)。较少分离的(少于1％)是絮状表皮癣菌、奥杜盎氏小孢子菌、犬小芽胞菌、马类小孢子菌、矮小孢子菌、桃色小孢子菌、马发癣菌、T.kanei、T.raubitschekii，和堇色毛癣菌。皮真菌病包括黄癣和由表皮癣菌属(Epidermophyton)、小孢子菌属(Micro-sporum)和发癣菌属(Trichophyton)的种类引起的感染。

包括于术语皮真菌病下的特定病症包括，但不限于，例如胡须癣、脓癣、头癣、真菌性须疮(mycotic sycosis)、皮癣菌性甲床炎、指甲的皮真菌病、甲癣、指甲癣(ringworm of nails)、手的皮真菌病、手癣、足癣、足皮真菌病、足菌、体癣、叠瓦癣、洗衣癣、腹股沟癣、股癣、播散性皮肤真菌病、肉芽肿性皮肤真菌病和未确定的皮癣菌病、癣菌病、和NOS。

深红色发癣菌是最常分离的人源皮肤真菌。其可在足、指甲、身体、腹股沟以及有时在头皮上发现。这种真菌是股癣的最通常的原因。它也引起脚趾和身体的真菌感染。本发明的杀微生物组合物因此可用于预防或治疗股癣和足癣。

当头皮剥落多于正常量的死亡表皮细胞时，产生头皮屑(干性糠疹)。其时常与皮脂产生过度的脂溢性皮炎相关。头皮屑与脂溢性皮炎具有一些共同特征，并且两种病症通常用共同的局部用药治疗。脂溢性皮炎通常还影响除头皮外的身体部位，包括前额、鼻唇褶、睫毛和眉毛区域以及外耳。

头皮屑作为小的白色或灰色鳞屑出现在头皮上。存在脂溢性皮炎时，该鳞屑可能显得油腻的和显黄色。油腻的鳞屑与分泌物混合形成痂，在其下，头皮是红色和潮湿的。洗发剂暂时除去了这些鳞屑，然而它们在数天内恢复。

头皮屑伴随着在表皮的外层大部分只有较少的细胞层，然而这些细胞通常是不规则的并显示快速的更新率。多年来，已经将头皮屑与鳞斑霉属(Malassezia)或瓶形酵母属的酵母/真菌的存在相关联。现在，认为卵瓶形酵母(Pityrosporum ovale)种是主要的病原体，尽管一些研究者认为头皮的改变的菌群是增加的表皮增殖引起的。也已将脂溢性皮炎与瓶形酵母属真菌的活性相关联。对头皮屑和脂溢性皮炎的有效疗法已经与抑制这些生物体的药剂相关联。

本发明的杀微生物或杀孢子组合物当以有效量使用时可用于预防或治疗性处理酵母感染。念珠菌病是由念珠菌属(Candida)即酵母样菌，例如白色念珠菌；光滑念珠菌(C.glabrata)；热带念珠菌(Ctropicalis)；近平滑念珠菌(C.parapsilosis)和克鲁斯氏念珠菌(C.krusei)引起的感染。念珠菌病通常影响皮肤和粘膜(例如，身体开口周围柔软、潮湿的区域，如口和肛门)。这些疾病可以采取不同的形式，每种具有不同的症状。念珠菌病的特定形式取决于许多因素，包括儿童的年龄和一般的健康状态。

在健康的新生儿中，念珠菌病的最普通形式是尿布疹。在尿布区域的皮肤变得红肿和触痛，特别是在皮肤褶和绉纹中。一般而言，任何持续3天或更长的尿布疹可能是念珠菌病。而且，在健康的新生儿，念珠菌病可以表现为鹅口疮。在鹅口疮中，念珠菌属侵入口和咽喉部分，在口角引起裂缝并在嘴唇、舌、上腭和颊内侧上产生发白的或浅黄色斑。当刮掉或擦掉这些斑时，在底下可见出血的突起区域。通常，患有鹅口疮的婴儿可能除了斑外没有其它症状。然而有时候斑是疼痛的，并且儿童在进食上有困难或普遍是挑剔和易怒的。新生儿可以从在分娩时具有阴道“酵母感染”的母亲那儿产生鹅口疮。当这种情况发生时，鹅口疮的症状通常在出生后7-10天开始。

任何年龄的儿童可能产生念珠菌甲沟炎，这是一种指甲周围皮肤的感染。指甲是最常受感染的，特别是在那些用许多时间把手放在水里的小孩。在指甲周围的角质层和皮肤变得肿胀、红肿并有时疼痛。指甲可能生长为异常形状或异常颜色，或者可能实际上从皮肤上剥离。

年长的女孩或妇女可能产生念珠菌外阴阴道炎，这是一种阴道和阴道口周围区域的感染。这也通常称为阴道“酵母感染”。症状包括：阴道痛、搔痒或发红、稠的白色“干酪样的”阴道分泌物、排尿疼痛或不适以及有时在阴道区域的皮肤上有带白色或浅黄色的斑(这些斑看上去与患有鹅口疮的婴儿的口中可见的斑相似)。

而且，在两种性别中，时常潮湿、温暖和黑暗的任何身体部分可以是念珠菌感染的部位。这特别是在阴囊、腋下、大腿内侧区域、手指和脚趾之间的区域中的皮肤褶以及脊柱基底和乳房下(在年长的女孩中)的皮肤上可能发生。在任何一种这些区域，念珠菌病可以表现为潮湿、结痂皮肤发瘁区域，有时具有可能变成有脓汁感染的鲜红色斑。

全身酵母感染通常表现为对抗菌治疗无反应的发热和寒战并且可以自身显示为肾脏或肝脾感染、脑膜炎、眼内炎、心内膜炎、骨髓炎和/或关节炎。

III.杀微生物/杀孢子组合物预防或治疗病毒感染的用途

本发明的杀微生物组合物当以有效量使用时可用于预防或治疗性处理病毒感染。一些病毒杀死它们感染的细胞。许多病毒感染可用本发明杀微生物组合物预防或治疗，所述的病毒感染包括但不限于例如牛痘苗(天花)：流行性感冒；麻疹；腮腺炎：脊髓灰质炎；禽痘(水痘)；狂犬病；德国麻疹(风疹)；甲型肝炎和乙型肝炎；乙型脑炎；单纯疱疹病毒；黄热病：疱疹病毒(herpes virus)；呼吸性病毒感染，例如普通感冒、流行性感冒、咽喉感染(咽炎或喉炎)、小孩哮吼和气管炎症(气管炎)或其它气道炎症(细支气管炎、支气管炎)：汉坦病毒属(hantavirus)、人免疫缺陷病毒：非洲淋巴瘤病毒(Epstein-Barr Virus)；1型人嗜T淋巴细胞病毒(human T-celllymphotropic virus type 1(HTLV-1))、沙粒病毒属和虫媒病毒.

许多不同的病毒引起感冒。小RNA病毒，如鼻病毒属，引起多数春季、夏季、秋季感冒。流感病毒和呼吸道合胞病毒，其有规律地出现在晚秋和冬季，引起一系列疾病包括感冒。流感病毒很容易通过因咳嗽或喷嚏进入空气的感染的飞沫从人扩散到人。鼻病毒属病毒和呼吸道合胞病毒也以这种途径传播，但也许主要是由于与手指上携带的受感染的分泌物直接接触而传播。

流感病毒很少与脑部炎症(脑炎)、心脏炎症(心肌炎)或肌肉炎症(肌炎)相关联。脑炎可能使人思睡、混乱或甚至昏迷。心肌炎可以引起心脏杂音或心衰竭。

雷耶氏综合征是一种严重和可能致死的并发症，其最常在B型流行感冒流行期间在小孩中发生，特别是如果他们接受了阿斯匹林或含阿斯匹林的药物时发生。

引起涉及皮肤上大水疱的感染的疱疹病毒的两种主要类型是单纯疱疹和带状疱疹。另外的疱疹病毒，即非洲淋巴瘤病毒，引起传染性单核细胞增多症。细胞巨化病毒，即另一疱疹病毒，可以产生不能与传染性单核细胞增多症相区分的疾病。另外最近确定的疱疹病毒，即6型疱疹病毒，引起称为幼儿急疹的儿童疾病。7型人疱疹病毒当前还没明确地与任何疾病联系起来。在一些研究中，认为8型疱疹病毒是在有AIDS的人患有卡波西肉瘤的原因。

单纯疱疹感染产生皮肤或粘膜上的小的、疼痛的、充水的水泡的复发发作。单纯疱疹在皮肤或粘膜上产生疹。疹会消退，虽然病毒在提供受感染区域感觉神经的神经节(神经细胞体团)内保持非活性(潜伏)状态。按周期的，该病毒再活化并开始复制，通常在和先前感染同样的位置引起水疱的斑疹。然而，该病毒可能存在于皮肤中而不引起明显的水疱。在这种状态中的病毒可作为感染其它人的起源。过多暴露于阳光、热、身体或精神紧张、免疫系统抑制或某种食物和药物可能触发出疹，但通常刺激的因素是未知的。感染皮肤的两种类型的单纯疱疹病毒是HSV-1和HSV-2。HSV-1是嘴唇上的感冒疮(唇疱疹)和眼角上的疮(单纯疱疹性角膜炎)的通常原因。其通常通过与来自口或口周围分泌物的接触而传播。HSV-2通常引起生殖器疱疹并主要通过直接与疮接触，最常是在性接触时传播。

在婴儿或幼儿中第一次疱疹感染可能在口和牙龈引起疼痛的疮和炎症(龈口炎)或引起疼痛的外阴和阴道炎症(外阴阴道炎)。这些病状也引起易怒、食欲不振和发热。在婴儿以及较少地在年长的儿童中，感染可以通过血液的方式扩散而涉及内部器官，包括脑(可以致命的感染)。

已经患有HSV-2感染的妇女可以将这种感染传播给她的胎儿，特别是如果发作出现在怀孕的最后3个月内时。胎儿中的单纯疱疹病毒可以引起大脑周围的膜的轻度炎症(脑膜炎)或偶尔引起严重的大脑炎症(脑炎)。

如果患有称为特应性湿疹的皮肤病症的婴儿或成人受单纯疱疹病毒感染，它们可以发展为称为疱疹性湿疹的潜在的致命疾病。因此，患有特应性湿疹的人应该避免靠近患有活性疱疹感染的任何人。在患有AIDS的人中，皮肤的疱疹感染可能是特别严重和持久的。食道和肠的炎症、肛门周围的溃疡、肺炎或神经异常也更频繁的出现在患有AIDS的人中。

带状疱疹是一种产生严重疼痛的充水水疱的斑疹的感染。带状疱疹是相同的疱疹病毒即人α疱疹病毒3型引起的，该病毒也引起水痘。最初的人α疱疹病毒3型感染，其可以是以水痘的形式，最后病毒进入脊柱或颅神经的通往神经节(一群神经细胞)的神经并在那里保持潜伏。带状疱疹总是限于涉及的神经根的皮肤分布(皮区)。

由受感染的神经产生的皮肤区域中的疼痛称为带状疱疹后神经痛。这种疼痛可能在带状疱疹发作后持续数月或数年。这并不表明这种病毒持续地活跃复制。带状疱疹后神经痛的疼痛可能是不断的或间歇性的，并且其可能在夜间或对热或冷的反应而恶化。有时这种疼痛是致残的。带状疱疹后神经痛最常发生在老年人中。超过50岁的那些患有带状疱疹的人的百分之25-50具有一些带状疱疹后神经痛。然而，患有带状疱疹的所有人的仅约百分之10产生带状疱疹后神经痛，并且更少的具有严重的疼痛。

传染性单核细胞增多症是一种特征为发热、咽喉痛和淋巴结肿大的疾病，并由一种疱疹病毒即非洲淋巴瘤病毒引起。第一次侵入鼻和咽喉内层的细胞后，非洲淋巴瘤病毒扩展至B淋巴细胞(负责产生抗体的白细胞)。非洲淋巴瘤病毒感染十分普通，感染小孩、青少年和成年人等。

非洲淋巴瘤病毒与非洲淋巴瘤相关，后者是一种主要在热带非洲发生的癌症。这种病毒也可能在具有受损的免疫系统的人如进行了器官移植或患有AIDS的那些人中的某些B淋巴细胞肿瘤，以及在鼻或咽喉的一些癌中起作用。尽管非洲淋巴瘤病毒在这些癌中所起的确切作用是未知的，据认为该病毒的遗传物质的特异部分改变了受感染细胞的生长周期。

慢性疲乏综合征是一种主要发生在年龄为20-40岁的成年人中的疾病。比妇女多两倍的男人产生慢性疲乏综合征。症状包括促使虚弱疲劳、干扰集中精神的能力并且，在一些情况下，包括低热和淋巴结肿胀。

狂犬病是大脑的病毒感染，该疾病引起恼怒和大脑和脊髓炎症。狂犬病病毒存在于受感染的动物的唾液中。患有狂犬病的动物通过咬以及有时候通过舔将感染传递至其它动物或人。该病毒从初始感染的部位沿神经传播至脊髓和大脑，其在那里繁殖。它随后沿神经传递至唾液腺并进入唾液中。

这种感染是由I型人嗜T淋巴细胞病毒(HTLV-I)引起。这种逆转录病毒也可以引起一种白血病。热带痉挛性瘫痪可以通过性接触或通过受污染的注射针头传播。它也可以通过胎盘或在母乳中从母亲传播给小孩。症状可以在初次感染数年后开始出现。在对HTLV-I感染的应答过程中，免疫免疫系统可以伤害神经组织，引起这些症状。在两脚中的虚弱和肌强直逐渐开始并慢慢恶化。脚中的一些知觉可能丧失。

虫媒病毒是用于通过已经通过受感染的动物，包括家畜和鸟而受感染的昆虫，例如蜱和蚊子叮咬传播给人的病毒的术语。虫媒病毒性脑炎是由数种病毒中的一种引起的大脑的严重感染。在美国最普通类型的通过昆虫叮咬传播的病毒性脑炎是西方马脑炎、东方马脑炎、圣路易斯脑炎和加利福尼亚脑炎。对这些感染负责的病毒是通过在不同地理区域发现的特定蚊子类型传播的。这些疾病是区域中地方性动物传染病，但当受感染的动物群体增加时疾病爆发周期性地发生。

在世界的其它部分，不同但相关的引起脑炎的虫媒病毒周期性地从自然传播给人。这种疾病包括委内瑞拉马脑炎、日本脑炎、俄罗斯春夏型脑炎和其它类型的以其发生的地理区域命名的脑炎。一种最了解的并且历史上重要的虫媒感染是命名为黄热病的虫媒感染。黄热病是一种通过蚊子传播的疾病，导致发热、出血和黄疸并且它是可以致命的。这种疾病在中非和中部和南部美洲最普通。

登革热是一种在热带和亚热带全世界发生的最流行的虫媒病毒感染。由蚊子传播的这种感染导致发热、淋巴结肿胀和出血。它引起严重的关节和肌肉疼痛并常常称为骨热痛(breakbone fever)。它可以是致命的。

沙粒病毒和一些与虫媒病毒相关的病毒是可以通过暴露于啮齿类或源于它们的粪便的悬浮微粒而传播给人的病毒。淋巴细胞性脉络丛脑膜炎是通常产生流行性感冒样病的沙粒病毒疾病。

引起淋巴细胞性脉络丛脑膜炎的沙粒病毒疾病通常是啮齿类，特别是灰色家鼠和仑鼠中常见的。这些动物通常是受该病毒终生感染的并分泌于尿、粪便、精液和鼻分泌物中。人中的感染通常是由暴露于受污染的粉尘或食物引起的。

伊波拉和马尔堡病毒是两种复杂的分类为纤丝病毒的非洲病毒。它们在人中引起严重的出血热。伊波拉病毒可能源于猴。它们通常通过暴露于血或受感染的组织在人中传播。这种感染导致发热、腹泻、出血和意识丧失。它常常是致命的，但是该病毒的较少有毒的菌株可能存在。它主要在东非、南非和中非出现。马尔堡病毒是从暴露于受感染的灵长类组织而获得的。该病毒是高度传染性的，引起影响许多器官的严重疾病。如果不治疗，死亡是不可避免的。

拉沙热是一种从啮齿类传播至人或从人传播至人的沙粒病毒感染，其导致发热、呕吐和出血。它是高度致命的并要求严格隔离病例。它主要出现在西非。

汉坦病毒感染是从啮齿类传播至人的病毒病并引起严重的肺和肾感染。汉坦病毒是远缘地与脑炎病毒的加利福尼亚类型相关的布亚病毒。汉坦病毒出现在整个世界，存在于多种啮齿类，包括田鼠和实验小鼠和大鼠的尿、粪便和唾液中。人通过与啮齿类或它们的粪便进行接触或可能通过吸入空气中的病毒粒子而获得感染。

人免疫缺陷病毒是引起获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的病毒。HIV是一种感染体内数种细胞的逆转录病毒，最重要的一种细胞是一类称为CD4淋巴细胞(或“T细胞”)的白细胞。CD4细胞是帮助人免于受许多感染和一些癌的人免疫系统的一种主要成分。HIV可以有效地使人的免疫系统丧失能力，并摧毁其对抗某些疾病的能力。目前为止已经发现了两种主要类型的HIV。HIV-1是全世界流行病的原因，而且也已发现至少十种不同亚型HIV-1。HIV-2大多数在西非发现。HIV是通过暴露于来自未保护性交(不用避孕套)的精液和阴道液体(包括月经血)或通过暴露于来自经由受污染的针头或注射器的注射药物使用而传播。HIV也可以在分娩或通过人乳喂养时从母体传播给儿童。

iv.杀微生物/杀孢子组合物预防或治疗皮炎的用途

本发明的杀微生物或杀孢子组合物当以有效量使用时可用于预防或治疗性处理皮炎。皮炎不是一种单一疾病，而是涵盖其中炎症是重要特征的那些皮肤病症。作为炎症的结果，症状如搔痒是普遍的。因为出现的小水疱，皮炎也称为湿疹，湿疹来自于希腊语ekzein，其意思是“因沸溢出或爆发”。皮炎的首要征兆是发红(红斑)、疹(具有小水疱的干燥的鳞状皮肤)和疼痛或搔痒。皮炎的类型包括：

特应性皮炎

在特应性皮炎中，涉及的皮肤是对称的，即湿疹同等地分布在身体的每边。在婴儿中，其主要可见于头部、脸，特别是颊，以及手臂的外部表面和腿的前面，特别是肘和膝。

婴儿皮疹通常是干燥的，具有小的隆起的肿块(丘疹)。在年长的儿童中，皮肤变化比起头部更多是位于四肢，而且它们倾向于显示慢性皮炎的症兆(例如，表皮脱落、苔藓样变、裂隙)和感染的迹象。

接触性皮炎(变应性皮炎和刺激性皮炎)

与特应性皮炎不一样，接触性皮炎在致病物质与皮肤直接发生接触的部位发生。取决于接触，发病的分布可能是对称的或可能不是对称。如果该物质是空气传播的，分布将在暴露的皮肤区域出现，例如在脸和手背上出现。该皮疹可以完全覆盖两只手，有时在护士中可见的乳胶手套皮炎就是这种情况，可能在人们戴戒指处有一条正常皮肤。物质在皮肤最薄的地方更易于吸收，所以手背比具有更厚表皮的手掌更易受感染。皮肤对化学物质的吸收随湿度而增加。因而，汗蓄积的身体部分，如腋窝、腹股沟和膝弯曲部分更容易受感染。

v.杀微生物/杀孢子组合物预防或治疗炎性病症和疾病的用途

本发明的杀微生物或杀孢子组合物可用于预防或治疗可以产生作为炎性病症和疾病的基础或促成炎性病症或疾病的炎症应答的细菌、真菌和/或病毒感染。这样，本发明的杀微生物或杀孢子组合物当以有效量使用时可用于预防或治疗性处理炎性病症和疾病。

炎症是针对损伤、感染或被免疫系统认为是外来物的分子的身体反应。临床上，炎症特征为疼痛、发红、发热、肿胀和受感染组织的功能改变。虽然发动炎症应答的能力对生存是必需的，但控制炎症的能力对健康也是必需的。缺少、过度或不受控制的炎症导致一系列疾病，包括高度流行的病症：变态反应，包括例如，变应性鼻炎/鼻窦炎、皮肤变应性(风疹/荨麻疹、血管性水肿、特应性皮炎)、食物变态反应、药物变应性、昆虫变态反应和罕见的变应性紊乱如肥大细胞增生病：哮喘；关节炎，包括例如骨关节炎、类风湿性关节炎和脊椎关节病；自身免疫疾病，包括，例如系统性红斑狼疮、皮肌炎、多发性肌炎、炎症性神经病(格林-巴利病、炎性多发性神经病)、血管炎(韦格纳氏肉芽肿病、结节性多发性动脉炎)和稀有病症如风湿性多肌痛症、颞动脉炎、斯耶格伦氏综合征；Bechet′s疾病、丘-施综合征和高安动脉炎；心血管炎症；胃肠炎症；感染和免疫；神经炎性病症和移植。

D.疗效效果和终点

治疗有效量是赋予用本发明抗微生物组合物治疗的受试者疗效所必需的活性抗微生物组合物的最小量。例如，治疗有效量是这样的量，该量诱导、改善或另外引起与主要特征为微生物感染病症的病理症状、疾病发展、生理条件的改善，或引起对主要特征为微生物感染的病症的抵抗。这包括微生物感染本身，以及起因于微生物感染或由微生物感染恶化的继发疾病如败血症、炎症等。预防有效量是赋予用本发明抗微生物组合物治疗的受试者预防效果所必需的活性抗微生物组合物的最小量。所述的疗效即为预防病理症状或抵抗主要特征是微生物感染的疾病包括起因于微生物感染或由微生物感染恶化的继发疾病。

                  试验实施例

下列实施例意在用作本发明某些实施方案的非限制性说明。因此，引用的所有参考文献在这里通过全文引用作为参考。

如下，提出的制备的工业应用通过实施例1-8证实。

                   实施例1

将2.0g氢氧化钠溶解于烧瓶中的50cm³蒸馏水中并搅拌加入3.75g甘氨酸。将6.8g氯化锌分批搅拌加入至获得的溶液中，随后加入3.75cm³ 25％的铵的含水溶液。在1.2g tryethyleneglycol和15.3cm³水的混合物中独立地制备0.43g十六烷基三乙基氯化铵溶液。混合这两种溶液并用水稀释以获得抗菌处理物体所需的浓度。

                   实施例2

将25ml水和11.85g乙二胺四乙酸加入至烧瓶中6.1cm³的25％氨水溶液中。伴随搅拌，分批加入5.45g氯化铜，随后加入2.4g乙醇胺。形成的溶液变为深蓝色。在7.3cm³异丙醇和10cm³水的混合物中独立地制备8.1g十二烷基苄基三甲基氯化铵溶液。混合这两种溶液并将其稀释以获得抗菌处理物体所需的浓度。

                   实施例3

将0.4g氢氧化钠溶解于烧瓶中的20cm³蒸馏水中，并搅拌加入1.46g L-赖氨酸。随后分批搅拌加入1.36g氯化锌。将获得的溶液与0.75cm³水中的25％铵溶液混合。独立地，56.0cm³异丙醇中的12.0g氯化十六烷基吡啶溶液得以制备。分批缓慢地加入氨基酸锌络合物的含水溶液。搅拌该混合物并用水稀释以获得抗菌处理物体所需的浓度。

                      实施例4

如实施例1中显示，将含有表现对氢离子有亲和性的单齿配体的螯合金属络合物与离子型表面活性剂混合。加入蒸馏水以获得10％或30％的浓度，即与溶剂的比例为1-9或7。

                      实施例5

如实施例2中描述以下列量(重量％)混合成份：

含有表现对氢离子有亲和力的单齿、二齿或多齿配体    30

的螯合金属络合物

离子型表面活性剂                                  15

脂族醇(C₁-C₈)                                   0.5

蒸馏水                                            54.5

                      实施例6

如实施例2中描述以下列量(重量％)混合成份：

含有表现对氢离子有亲和力的单齿、二齿或多齿配体    2

的螯合金属络合物

离子型表面活性剂                                  1

脂族醇(C₁-C₈)                                   95

蒸馏水                                            2

                     实施例7

如实施例3中描述以下列量(重量％)混合成份：

含有表现对氢离子有亲和力的单齿、二齿或多齿配体    1

的螯合金属络合物

离子型表面活性剂                                  5

脂族醇(C₁-C₈)                                   20

蒸馏水                                            74

                       实施例8

如实施例3中描述以下列量(重量％)混合成份：

含有表现对氢离子有亲和力的单齿、二齿或多齿配体    2

的螯合金属络合物

离子型表面活性剂                                  0.1

脂族醇(C₁-C₈)                                  30

蒸馏水                                            67.9

实施例9.使用时间-杀死试验(Time-Kill test)测量该抗微生物组合物(AMC)对抗选取的细菌、酵母和真菌的消毒特性

I.概要

该抗微生物产品(以下称为“AMC”)是本发明的杀微生物和杀孢子组合物，含有下列协同作用的活性成份：异丙醇(“IPA”，CAS No.67-63-0)；与乙二胺四乙酸(EDTA，CAS No.60-00-4)络合的锌(“Zn”)；及氯化十六烷基吡啶(“CPC”，CAS No.123-03-5)。

按如下证明的，这种杀微生物和杀孢子组合物提供了未可见于单独使用乙醇制剂或季胺类化合物的真菌生物体杀死程度，并显示比使用基于锌的产品所通常观察到的杀菌活性更高的效力。

AMC是含有49％IPA和49％水的接近中性pH(大约7.5)的液体浓缩产物。它的组成及化学和物理性质表明其可配制成多种产品形式例如，但不限于，提供用于多种应用的抗微生物工作溶液的含水稀释物；配制成水凝胶药膏；配制成水溶性乳剂；添加至其它液体、凝胶剂或乳剂产品以为这些产品提供防腐功能；预包装为用于特定应用的随时可用的稀释液；预包装为消毒抹布；或预包装成消毒绷带和消毒服。

一组“攻击微生物”，包括选择的细菌、酵母和真菌，用于评估试验化合物如AMC(DPT试验室)的消毒特性。特定地，检验试验化合物抗金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)；表皮葡萄球菌(ATCC 12228)；枯草芽孢杆菌(ATCC 19659)；大肠杆菌(ATCC 11229)；和绿脓假单胞菌(ATCC 15442)细菌、以及酵母白色念珠菌(ATCC 10231)和真菌红色发癣菌(ATCC 28188)的消毒特性。检验方法整合了在“Manualof Clinical Microbiology”，第五版，由A.B.Balows等编辑，ASM，华盛顿，由Federal Register指导，1994年6月中描述的推荐方法。该方法基于标题为“Standard Test Method for the Assessment ofMicrobial Activity of Test Materials Using Time-Kill Procedure”的ASTM方法。

消毒组合物如皮肤杀菌制剂提供迅速而延长的杀菌作用是重要的。时间-杀死试验评估抗微生物作用的迅速程度，而最小抑制浓度评估延长的抑制作用。

II.试验条件

许多单个试验材料以不同的浓度制备，随同一起制备不同浓度和组合的多种化合物。平行两次检验这些试验材料对不同的细菌、酵母和真菌抗性。为了使潜在的缓冲剂干扰最小化并使抗菌活性的减小最小化，加入至试验材料的接种物的体积保持于或低于试验总体积的1％。于不同的接触时间移出样品。进行系列稀释，并以等分样品平行涂布两次。随后孵育该板，并在每一接触时间测定每毫升回收的平均菌落形成单位(CFU)。试验化合物与金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓假单胞菌和白色念珠菌的接触时间是30秒钟、1分钟和5分钟。试验化合物与枯草芽胞杆菌的接触时间是1和10分钟、1小时、2小时、3小时和24小时。试验化合物与深红色发癣菌的接触时间是30秒钟、1分钟和10分钟。接触温度是周围的室温(20-21℃)。

III.试验设计

A.接种物制备

1.细菌和酵母

将来自储备培养物的细菌和白色念珠菌转移至胰酶解大豆培养基(TSB)中并于37℃±2℃孵育18-24小时。将其再次转移至胰酶解大豆琼脂(TSA)上。将板从孵育中移出并用Butterfield′s磷酸盐缓冲的稀释水(PBDW)将琼脂表面的生长物洗出。使用本领域熟知的分光光度计测量技术测量微生物浓度。随后将悬浮液调节至每ml含约10⁸个菌落形成单位(CFU)。

2.真菌

将真菌深红色发癣菌在Emmon’s琼脂(EA)上接种并于25-30℃孵育10-15天。将来自成熟培养基的菌丝毡从至少5个平板的表面移出并在无菌玻璃组织磨碎器中用无菌盐水(SS)将其浸软。将悬浮液通过无菌玻璃棉过滤移除菌丝。

通过在BPDW中系列稀释制备的培养物来测定分生孢子悬浮液的密度。将来自选取的稀释物的等分样品平行双份涂布在EA平板上。将平板于25-30℃孵育3-5天并随后将每一平板检查计数。

在使用之前将该悬浮液于2-10℃存储4周。在试验当天，通过用BPDW稀释调整该悬浮液以产生约5.0×10⁸CFU。

B.试验材料的制备

评估AMC在所示浓度下的消毒活性。单独检验AMC的活性成份，例如氯化十六烷基吡啶(CPC)和ZnEDTA，并将其与其它药剂并用以测定该成份对于消毒作用的增效作用。试验成份的组合如下：

0.2％CPC和其它AMC成份的增效作用：

·ZnEDTA(1％)、CPC(0.2％)和异丙醇(9.8％)

·ZnEDTA(1％)和CPC(0.2％)

·异丙醇(9.8％)和CPC(0.2％)

0.02％CPC和其它AMC成份的增效作用：

·ZnEDTA(1％)、CPC(0.02％)和异丙醇(9.8％)

·ZnEDTA(1％)和CPC(0.02％)

·异丙醇(9.8％)和CPC(0.02％)

0.002％CPC和其它AMC成份的增效作用：

·ZnEDTA(1％)、CPC(0.002％)和异丙醇(9.8％)

·ZnEDTA(1％)和CPC(0.002％)

·异丙醇(9.8％)和CPC(0.002％)

独立地检测其它对照化合物，所述的对照化合物包括Hibiclens(100％；活性成份：氯己定葡萄糖酸盐，)；Ciprofloxecin；聚维酮碘(100％；活性成份：聚维酮碘)；1％ZnEDTA；0.2％、0.02％和0.002％浓度的氯化十六烷基吡啶(CPC)；9.8％异丙醇；咪康唑(100％)；兰美抒；氟康唑(2mg/ml；仅白色念珠菌)和两性霉素B(2.5mg/L；仅深红色发癣菌)。

C.时间-杀死试验

依照上文引用的ASTM方法，通过将99ml试验材料分配至两个每个装有一搅拌棒的无菌烧瓶将攻击微生物加入至试验材料。将反应烧瓶平衡至试验温度至少10分钟。将烧瓶置于搅拌盘上的水浴器中并将其维持在试验温度同时搅拌。加入1ml制备好的攻击微生物接种物的等分样品至每个烧瓶开始接触阶段。在每一接触时间，移出1ml等分样品并将其加入至含有9ml PBDW+的试管中。随后在PBDW稀释空白中制备每一样品的系列10倍稀释物。将来自选择的稀释物的双份等分样品使用合适的琼脂涂布。

D.孵育和计数

完成所有的接触阶段后，倒置并孵育所有平板一段合适的时间，时间和温度如下：于37℃±2℃将细菌和酵母孵育两夜，并于25-30℃将真菌孵育至少5晚。孵育后，移出所有平板，计算菌落数并计算在每个接触时间的每ml回收的CFU。

E.对照

1.初始计数

对于每种攻击微生物，将99ml PBDW分配至无菌烧瓶中，并将1ml制备好的接种物的等分样品搅拌加入该烧瓶。30秒钟内，移出1ml样品并在PBDW稀释空白中进行系列10倍稀释。使用合适的琼脂将来自选择的稀释物的双份等分样品涂板。倒置平板并将其以如试验平板相同的方式处理(见上述的孵育和技术)。在试验初始对每种攻击微生物实施该步骤。

2.中和剂效果

包含该对照是为了确定中和剂的有用性。该过程使用革兰氏阳性细菌；革兰氏阴性细菌和真菌进行，对于每种微生物，用9ml PBDW+和少于100CFU的微生物制备4个试管。对于每个试管，加入1ml试验材料。立即，使用本领域熟知的微生物过滤技术过滤两个试管中的全部内含物，并保留过滤物。将剩余的试管在室温保持30分钟，并过滤剩余试管中的全部内含物。将所有过滤物置于适合微生物接受分析的琼脂上。使用适当的琼脂将加入至每个试管的CFU平行涂板两份。将该平板以与适合微生物接受分析的试验平板相同的方式处理。在这些研究中使用的中和剂是含有1％甘氨酸、7％多乙氧基醚和1％卵磷脂(用于用AMC试验的革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的评估；也使用真菌、制备好的20％AMC和2.5mg/L的两性霉素B试验试剂)的PBDW；含有7％多乙氧基醚和1％卵磷脂(用于Hibiclens的评估)的PBDW；含有0.3％Na₂S₂O₃(用于聚维酮磺的评估)的PBDW；以及PBDW。

3.无菌对照

将平行两个平板的每一琼脂类型用试验材料孵育。而且，使用用于该试验的其中一种琼脂类型将PBDW和PBDW+的1ml等分样品平行涂布双份。将这些平板与细菌和酵母平板一起孵育。

4.生物体确认

为了确定生长物与攻击微生物相符，将来自所有细菌和酵母的初始计数对照平板上的典型菌落进行革兰氏染色。注意菌落形态学。真菌通过湿涂片观察确定并证明其形态学。如果合适，将来自试验平板的分离的菌落以相同的方式处理并与初始计数对照的染色或湿涂片相比较。

IV.试验结果

A.初始研究

通过使用选择的细菌攻击微生物例如滋养型的如大肠杆菌(菌株1257)、金黄色葡萄球菌(菌株906)和蜡样芽胞杆菌(菌株96)，时间-杀死试验可用于测量试验化合物，如杀微生物或杀孢子组合物的消毒特性。初始研究的结果概述于下表1中。

                        表1.样品的抗微生物活性

№n/n	样品	浓度(％)	测试微生物的死亡时间(min)
						E.coli	S.aures	B.cereus
			1	乙二氨四乙酸锌络合物	0.15.0				＞30＞30	＞30＞30	-
2	氯化单氨基乙酸铜络合物	0.10.20.55.0				＞303015	＞30＞30＞30＞30	---＞360
			3	基于氯化氨基乙酸铜络合物的制剂1	0.0250.052.0				3055	＞3055	--＜60
4	基于乙二氨四乙酸锌络合物的制剂2	0.050.15.0				555	555	--＜60

如表1中显示的，螯合金属络合物制剂如氯化氨基乙酸铜铵对检验的滋养型攻击生物体有杀菌作用。为了增强消毒特性如螯合金属络合物试验制剂的杀微生物和杀孢子活性，加入离子型表面活性剂(氯化十六烷基吡啶、溴化十六烷基三甲铵)。这种组合物(制剂1，表1)显示出对革兰氏阴性和革兰氏阳性攻击微生物两者都有杀菌活性，该活性与该制剂中的氯化氨基乙酸铜铵和溴化十六烷基三甲铵成份之间的增效作用相一致。制剂2含有2-氨基乙醇二氨基四乙酸锌络合物和氯化十六烷基吡啶。这种试验制剂显示对试验的攻击生物体最高水平的杀菌活性。

含有水-醇溶液(70％体积的异丙醇)中的5％乙二胺四乙酸锌络合物溶液的试验制剂显示对滋养型细菌的杀菌活性，甚至是存储制剂经128倍稀释时。而且，存储制剂经16倍稀释时该试验制剂显示对蜡样芽胞杆菌的杀孢子活性。炭疽芽孢杆菌，即一种革兰氏阳性孢子形成性土壤芽孢杆菌，是蜡样芽胞杆菌类种的成员即蜡样芽胞杆菌和苏云金芽孢杆菌。这些物种在生理学和遗传学上非常相似，但它们导致完全不同的疾病。因此，蜡样芽胞杆菌已经用作较少危害的代用模式生物，用于与炭疽芽胞杆菌生物学的相关研究。

如上面指出的，提出的通用的、在生态学上安全的杀菌制剂是为了消毒主要形式和类型的病原性微生物群，包括孢子形式。该制剂显示增强的生态学特性，该特性是通过应用无毒螯合剂和转化金属离子为无毒螯合络合物而获得。该制剂的优势包括：1.减少杀菌剂络合物的成本；2.由于增强了对多种环境因素如温度、湿度和光效应的独立性而使杀菌剂的环境稳定性增强；以及3.长时间保持消毒特性，如一年或更长。

这些初始研究结果显示了该试验制剂对多种细菌菌株的消毒特性。基于这些发现，这些制剂有效地抑制导致肠道感染(革兰氏阴性细菌)如绿脓杆菌感染、痢疾和沙门菌病；呼吸道和医源性感染(革兰氏阳性细菌)，如葡萄球菌病、链球菌病和微生物群感染；厌氧菌感染如伤口感染(破伤风)；以及炭疽(孢子)的病原体。该制剂也是一种杀病毒剂和消毒病毒(如肝炎、疱疹、AIDS感染、轮状病毒感染)。

B.时间-杀死研究509-101

时间-杀死研究509-101的结果在下面的图1-7中描述。每一试验试剂使用不同浓度和组合的试验试剂评估两次。使用下列方程式计算Log₁₀减少。

Log₁₀(初始计数对照)-Log₁₀(试验结果)＝Log₁₀减少

为计算目的，＜5.0菌落形成单位(CFU)/ml的计数计为1.0。

如在图7中显示的，通过0(≤30秒)和30分钟接触时间之间的可比回收，证实了每一种中和剂的效力。无菌对照物则显示无生长。通过革兰氏染色或湿涂片和菌落形态学确认攻击微生物。

如在图1-7中显示的，当如描述的进行试验，并用大肠杆菌、绿脓杆菌和白色念珠菌攻击时，20％AMC和不同浓度的CPC(0.2、0.02和0.002％)展示了快速杀死效果。虽然0.002％CPC在30秒钟时使金黄色葡萄球菌减少了2个log₁₀并且1％ZnEDTA是无效的，但当组合使用时，它们减少了约5个log₁₀数。所有浓度的CPC有效地对抗绿脓杆菌，并且0.2％和0.02％的浓度有效地对抗大肠杆菌和白色念珠菌。当独立试验时，30秒钟内1％ZnEDTA、9.8％异丙醇和0.2％CPC未能有效地抗深红色发癣菌；然而，当组合使用时，在30秒钟内它们减少6个log₁₀的计数。当20％AMC、不同浓度的CPC(如0.2、0.02和0.002％)和1％ZnEDTA及9.8％乙醇个别地和组合地用枯草芽胞杆菌测试时未能获得6个log₁₀的减少。试验试剂和不同浓度的活性成份CPC是有效的抗微生物剂并与1％ZnEDTA和9.8％异丙醇组合时显示出增效作用。所有的对照培养物符合用于有效试验而确立的标准。

B.时间-微生物杀死研究509-102

下面的表2显示每一试验试剂的储备稀释，并且每次进行2倍稀释而获得的浓度的细目在表3中概述。

                                       表2

DS No.	测试材料(只有名称)	活性物质的起始浓度	测试稀释度	储备稀释物浓度
					6303	AMC	1％	20％-0.002％	20ppm
6253	Hibiclens	4％	100％-4％	40.000ppm
					6258	两性霉素B	250μg/ml	2.5mg/ml	2.5ppm
6356	Ciprofloxacin	809μg/ml	1μg/mL	1ppm
					6353	咪康唑	100％	20mg/mL	20ppm

如表3中详细描述的，从储备稀释开始，进行最初的1∶10稀释(在试管1进行)，随后进行2倍稀释(试管2-12)。

                                          表3

试管编号	产生的浓度
						AMC	Hibiclens	两性霉素B	Cipro	咪康唑
	1	2ppm	4,000ppm	0.25ppm	0.1ppm						2ppm
2						1ppm	2,000ppm	0.125ppm	0.05ppm	1ppm
	3	0.5ppm	1,000ppm	0.063ppm	0.025ppm						0.5ppm
4						0.25ppm	500ppm	0.031ppm	0.0125ppm	0.25ppm
	5	0.125ppm	250ppm	0.016ppm	0.006ppm						0.125ppm
6						0.063ppm	125ppm	0.008ppm	0.003ppm	0.083pprn
	7	0.031ppm	62.5ppm	0.004ppm	0.0016ppm						0.031ppm
8						0.016ppm	31.25ppm	0.002ppm	0.0008ppm	0.016ppm
	9	0.008ppm	15.63ppm	0.001ppm	0.0004ppm						0.008ppm
10						0.004ppm	7.81ppm	0.0005ppm	0.0002ppm	0.004ppm
	11	0.002ppm	3.91ppm	0.00025ppm	0.0001ppm						0.002ppm
12						0.001ppm	1.95ppm	0.00013ppm	0.00005ppm	0.001ppm

MIC可认为是抑制攻击微生物生长的试验化合物的浓度(即不能显示出明显生长的最低浓度的试管)。MBC可认为也是抑制攻击微生物生长的试验化合物的浓度，只要达到至少5.0×10⁵的接种物数量，即显示出至少99.9％的减少。

选择的菌株用AMC、Hibiclens和Ciprofloxacin处理的MIC和MBC的测定在表4-8中概述。特定地，观察到的绿脓杆菌的MIC和MBC值在下面表4中概述。

                       表4

绿脓杆菌-接种计数：8.8×105
			测试试剂名称	MIC(ppm)	MBC(ppm)
AMC	2.0	2.0
			Hibiclens	125	125
Ciprofloxacin	＞0.1	＞0.1

观察到的金黄色葡萄球菌的MIC和MBC值在下表5中概述。

                      表5

金黄色葡萄球菌-接种计数：7.5×105
			测试试剂名称	MIC(ppm)	MBC(ppm)
AMC	0.008	0.008
			Hibiclens	＜1.95	＜1.95
Ciprofloxacin	＞0.1	＞0.1

观察到的大肠杆菌的MIC和MBC值在下表6中概述。

                      表6

大肠杆菌-接种计数：9.4×105
			测试试剂名称	MIC(ppm)	MBC(ppm)
AMC	0.25	0.25
			Hibiclens	3.91	3.91
Ciprofloxacin	＞0.1	＞0.1

观察到的表皮葡萄球菌的MIC和MBC值在下表7中概述。

                        表7

表皮葡萄球菌-接种计数：9.0×105
			测试试剂名称	MIC(ppm)	MBC(ppm)
AMC	0.016	0.016
			Hibiclens	3.91	3.91
Ciprofloxacin	＞0.1	＞0.1

观察到的化脓性链球菌的MIC和MBC值在下表8中概述。

                    表8

化脓葡萄球菌-接种计数：9.8×105
			测试试剂名称	MIC(ppm)	MBC(ppm)
AMC	0.016	0.016
			Hibiclens	3.91	3.91
Ciprofloxacin	＞0.1	＞0.1

受AMC、Hibiclens、Ciprofloxacin和咪康唑攻击的选择的酵母和真菌菌株的MIC和MBC的测定分别在表9和表10中概述。特定地，观察到的酵母、白色念珠菌的MIC和MBC值在下表9中概述。

                    表9

白色念珠菌-接种计数：6.6×105
			测试试剂名称	MIC(ppm)	MBC(ppm)
AMC	0.031	0.031
			Hibiclens	7.81	7.81
Ciprofloxacin	＞0.1	＞0.1
			咪康唑	2.0	2.0

观察到的深红色发癣菌的MIC和MBC值在下表10中概述。

                    表10

深红色发癣菌-接种计数：3.6×105
			测试试剂名称	MIC(ppm)	MBC(ppm)
AMC	0.031	0.031
			Hibiclens	31.25	31.25
两性霉素B	＞0.25	＞0.25
			Ciprofloxacin	＞0.1	＞0.1
咪康唑	0.25	0.25

C.时间-杀死研究506-103

时间杀死研究506-103的结果总结于表11-16中。每一试验化合物用不同的浓度和组合评估两次。使用下列方程式计算Log₁₀的减少。

Log₁₀(初始计数对照)-Log₁₀(试验结果)＝Log₁₀减少

每一攻击微生物的初始计数(CFU/ml)在下表11中显示。

表11

攻击的微生物	CFU/ml
		金黄色葡萄球菌	1.7×107
绿脓杆菌	5.5×106
		大肠杆菌	5.8×105
白色念珠菌	3.0×107
		深红色发癣菌	1.0×106
枯草芽孢杆菌	6.2×105

在暴露于选择的试验化合物后每毫升金黄色葡萄球菌培养物回收的CFU数及Log₁₀减少总结于下表12中。

表12

在暴露于选择的试验化合物后每毫升绿脓杆菌培养基回收的CFU数量及Log₁₀减少在下表13中概述。

表13

在暴露于选择的试验试剂后每毫升大肠杆菌培养基回收的CFU数量及Log₁₀减少在下表14中概述。

表14

在暴露于选择的试验化合物后每毫升白色念珠菌培养基回收的CFu数量及Log₁₀减少在下表15中概述。

表15

在暴露于选择的试验化合物后每毫升深红色发癣菌培养基回收的CFU数量及Log₁₀减少在下表16中概述。

表16

在暴露于选择的试验化合物后每毫升枯草芽孢杆菌培养基回收的CFU数量及Log₁₀减少在下表16a和表16b中概述。

表16a

表16b

实施例10.检验AMC对抗选择的细菌、酵母和真菌的消毒特性

I.MIC、MBC和MFC检验的一般方法

A.细菌、酵母和真茵菌株以及培养条件

大肠杆菌(ATCC 11229)、绿脓杆菌(ATCC 15442)、金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)、表皮葡萄球菌(ATCC 12228)、化脓链球菌(ATCC 19615)、白色念珠菌(ATCC 10231)和深红色发癣菌(ATCC28188)的菌株在该研究中作为“攻击微生物”使用。将菌株从冰冻的储备样品移出并在血琼脂上亚培养两次以确保该菌株在试验之前具有理想的生长和代谢状况。

B.培养基微稀释法

通过NCCLS培养基微稀释法(M7-A6，2003[细菌]；M27-A2，2002[真菌])检验菌株并用AMC溶液和其单独成份ZnEDTA、CPC(CPC)以及异丙醇攻击。将Hibiclens(工业比较试剂)和Ciprofloxacin加入至细菌组中。将两性霉素B、氟康唑和Hibiclens作为真菌组中的比较试剂加入。

C.用于培养基微稀释法检验的微量滴定盘

AMC、ZnEDTA、CPC和异丙醇由DPT Laboratories(德克萨斯州，美国)提供。收到后，将AMC成份稀释成与它们在100％AMC中的浓度相等的工作溶液，即5％ZnEDTA；1％CPC和49％异丙醇。为检验目的，将AMC、AMC成份和Hibiclens稀释成50％的工作溶液以涵盖提出的20％AMC使用稀释液。

在MIC检验当天建立微量滴定盘。将Mueller-Hinton培养基(用于细菌菌株)或RPMI 1640(用于真菌菌株)的50μl等分样品递送至每一个孔，微量滴定盘第一列的那些孔除外。将AMC和其每一种成份的工作溶液以及比较试剂递送至第一列的指定孔中。将AMC、其成份和比较试剂在滴定盘上进行系列稀释。随后将细菌或真菌悬浮液的50μl等分样品加入至微量滴定盘上的每一个孔中，对每一等分样品使用一个新的吸管。于35℃将大肠杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌菌株的滴定盘孵育16-20小时，将化脓链球菌菌株孵育20-24小时，将白色念珠菌菌株孵育48小时。在读取MIC之前将深红色发癣菌滴定盘孵育3-4天。用完全抑制细菌生长的最低抗微生物浓度来读取细菌的MIC(％)。用相对于AMC、其成份和氟康唑的生长对照的浊度的生长终末点中80％的减少读取真菌的MIC(％)。对于两性霉素B，将终末点读取为完全抑制生长。

当前研究的AMC、成份和比较试剂的范围在表17中概述。

                  表17

试剂	范围
		AMC	0.05-50.0％
Zn/EDTA	0.0025-2.5％
		氯化十六烷基吡啶	0.007-0.5％
异丙醇	0.025-24.5％
		Hibiclens	0.05-50.0％
Ciprofloxacin	0.03-32μg/ml
		氟康唑	0.25-256μg/ml
两性霉素B	0.008-8.0μg/ml

D.MBC和MFC测定

依照发表的NCCLS方法(M26-A，1999)进行MBC测定以测定杀死≥99.9％初始细菌接种物的浓度。通过将读取MIC时未显示明显细菌生长的每个稀释孔培养10μl来测定每一菌株的MBC。将该10μl样品置于血琼脂上并于35℃孵育24小时(大肠杆菌和绿脓杆菌)或48小时(金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和化脓链球菌)。孵育后，记录每一个涂布的滴定盘孔的菌落数。显示出相对初始接种物的≥99.9％杀死水平的10μl等分样品的最低抗微生物浓度可认为是MBC。

MFC可以类似的方式测定。将超过MIC的每一稀释孔的10μl样品涂布至萨布罗右旋糖琼脂上并将其于35℃孵育24小时(白色念珠菌)或72小时(深红色发癣菌)。将MFC测定为较于最初生物体浓度(1×10³细胞/ml)在CFU/ml方面有99.9％减少的最低浓度。

II.试验结果

该新颖的溶液AMC、其成份和比较试剂对5种细菌ATCC菌株的MIC(最小抑制浓度)和MBC(最小杀菌浓度)(表18)及两种真菌ATCC菌株的MIC和MFC(最小杀真菌浓度)得以检验(表19)。

如表18中显示，最小抑制浓度(MIC)是完全抑制细菌生长的最低浓度。MIC％可表示为g/100ml或ml/100ml。最小杀菌浓度(MBC)是完全抑制细菌生长的最低抗微生物浓度。MBC％可表示为g/100ml或ml/100ml。AMC制剂的成份是按以下比例：ZnEDTA，5％；CPC，1％；异丙醇，49％；水，45％.

表18  AMC、单独的AMC成份和比较化合物对选择的细菌的MIC和MBC

化合物	MIC.％
											表皮葡萄球菌ATCC 12223		金黄色葡萄球菌ATCC 25923		化脓葡萄球菌ATCC 19515		大肠杆菌ATCC 11229		绿脓杆菌ATCC 15442
	MIC	MCB	MIC	MBC	MIC	MBC	MIC	MBC	MIC	MBC
											AMCZnEDTA(μg/ml)氯化十六烷基吡啶(μg/ml)异丙酵HibiclensCiprofloxacin，μg/ml	＜＝0.051.3(13000)＜＝0.0007(＜＝7)12.3＜＝0.050.25	＜＝0.05＞2.5(＞25000)＜＝0.0007(＜＝7)24.5＜＝0.050.25	＜＝0.051.3(13000)＜＝0.0007(＜＝7)12.3＜＝0.050.5	＜＝0.05＞2.5(＞25000)＜＝0.0007(＜＝7)24.5＜＝0.050.5	＜＝0.051.3(13000)＜＝0.0007(＜＝7)12.3＜＝0.050.5	＜＝0.051.3(13000)＜＝0.0007(＜＝7)12.3＜＝0.050.5	0.22(20000)0.005(50)6.1＜＝0.05＜＝0.03	NDNDNDNDNDND	1.62(20000)0.02(200)3.1＜＝0.050.12	1.68(80000)0.04(400)12.3＜＝0.050.5

AMC在浓度≤0.05％时抑制金黄色葡萄球菌ATCC 25923、化脓链球菌ATCC 19615和表皮葡萄球菌ATCC 12228的生长。在这些菌株中，CPC(≤0.0007％，≤7μg/ml)是AMC的最大活性成份。AMC也显示抗大肠杆菌ATCC 11229(0.2％)和绿脓杆菌ATCC 15442(1.6％)的活性；CPC是用以检验对抗这些菌株的AMC(分别为0.005％，50μg/ml；0.02％，200μg/ml)的最具有活性的成份。比较试剂Hibiclens显示出了抗接受检验的全部五种细菌ATCC菌株的一致的活性(≤0.05％)。对于金黄色葡萄球菌ATCC 25923、表皮葡萄球菌ATCC12228和绿脓杆菌ATCC 15442分离菌株，AMC及其成份CPC和异丙醇，以及比较试剂Hibiclens和ciprofloxacin均显示杀菌活性(即MBC在MIC的二倍稀释内)。AMC及其全部成份以及比较化合物对化脓链球菌ATCC 19615是有杀菌作用的。也观察了AMC、十六烷基吡啶和Hibiclens抗绿脓杆菌ATCC 15442的杀菌活性；ZnEDTA、异丙醇和ciprofloxacin的MBC结果比MIC结果高＞1次二倍稀释，因而不符合杀菌的定义(表18)。

如表19中显示的，将AMC、AMC成份、Hibiclens和氟康唑的MIC读取为相对于生长对照的浊度，生长终点中的80％的减少。将两性霉素B的终点读取为完全抑制生长。MIC％表示为g/100ml或ml/100ml。最小真菌浓度(MFC)是99.9％抑制生长的最低浓度。MFC％可用g/100ml或ml/100ml表示。AMC制剂的成份是按以下比例：ZnEDTA，5％；CPC，1％；异丙醇，49％；水，45％。

表19

化合物	MIC，％
					白色念珠菌ATCC 10231		深红色发癣菌ATCC 28188
	MIC	MFC	MIC	MFC
					AMCZnEDTA(μg/ml)CPC(μg/ml)异丙醇Hibiclens氟康唑，μg/ml两性霉素B，μg/ml	＜＝0.050.15(1500)＜＝0.0007(＜＝7)1.5＜＝0.050.50.12	＜＝0.050.15(1500)＜＝0.0007(＜＝7)1.5＜＝0.0520.12	＜＝0.050.08(800)＜＝0.0007(＜＝7)0.2＜＝0.0520.25	＜＝0.050.3(3000)＜＝0.0007(＜＝7)0.4＜＝0.0580.5

对于白色念珠菌ATCC 10231，AMC具有≤0.05％的MIC；CPC是MIC≤0.0007％(≤7μg/ml)的AMC最大活性的成份。工业比较试剂Hibiclens也表现了好的抗白色念珠菌ATCC 10231的活性(MIC，≤0.05％)。对AMC及其成份ZnEDTA、CPC和异丙醇以及比较试剂Hibiclens和两性霉素B的真菌活性进行了观察，所述的真菌活性是由在MIC的1次二倍稀释内的MFC确定。氟康唑的MFC结果比MIC结果高＞1次二倍稀释，因而认为其不是杀真菌剂(表19)。

对于深红色发癣菌ATCC 28188，AMC具有≤0.05％的MIC；CPC是AMC(MIC，≤0.007％，≤7μg/ml)的最大活性成份。该比较剂Hibiclens也显示≤0.05％的MIC。观察到AMC及其成份氯化十六烷吡啶和异丙醇、Hibiclens和两性霉素B的杀真菌活性，ZnEDTA和氟康唑未显示杀真菌活性(表19)。

AMC表现出抗革兰氏阳性细菌和真菌(MIC，≤0.05％)的三种ATCC菌株比抗革兰氏阴性细菌(MIC，0.2-1.6％)更有效的体外活性。CPC是AMC的最有活性的成份。AMC和CPC表现出抗革兰氏阳性和革兰氏阴性ATCC菌株的杀菌活性并表现出抗白色念珠菌和深红色发癣菌的ATCC菌株的杀真菌活性。AMC与Hibiclens对抗三种革兰氏阳性ATCC菌株、白色念珠菌ATCC 10231和深红色发癣菌ATCC 28188的活性相当，但其对抗大肠杆菌ATCC 11229和绿脓杆菌ATCC 15442的活性比Hibiclens小。

         实施例11检验AMC抗酵母和真菌的消毒特性

I.MIC、MBC和MFC测定的一般方法

A.真菌菌株和培养条件

在本研究中检验白色念珠菌(ATCC 10231)和深红色发癣菌(ATCC28188)菌株。将菌株从冰冻储备物移出并在血琼脂上亚培养两次以确保该菌株在试验之前具有最佳的生长和代谢状况。

B.培养基微稀释法检验

通过NCCLS培养基微稀释法(M27-A2，2002)检验菌株并用AMC溶液和其独立成份ZnEDTA、CPC(CPC)以及异丙醇攻击。将两性霉素B、氟康唑、特比萘芬和Hibiclens作为比较化合物加入。

C.用于培养基和微稀释法检验的微量滴定盘

AMC、ZnEDTA、CPC和异丙醇由DPT Laboratories(德克萨斯州，美国)提供。收到后，将AMC成份稀释成与它们在100％AMC中的浓度相等的工作溶液，即5％ZnEDTA；1％CPC和49％异丙醇。为检验目的，将AMC、AMC成份和Hibiclens稀释成50％的工作溶液以涵盖提出的20％的AMC使用稀释液。

在MIC检验当天建立微量滴定盘。将50μl RPMI 1640等分样品递送至每一个孔，微量滴定盘第一列的那些孔除外。将AMC和其每一种成份的工作溶液，以及比较试剂递送至第一列的指定孔中；将AMC、成份和比较试剂在滴定盘上系列稀释。随后将50μl真菌悬浮液的等分样品加入至微量滴定盘上的每个孔中，每一等分样品使用一个新的吸管。对于白色念珠菌将滴定盘于35℃孵育48小时；在读取MIC之前孵育深红色发癣菌3-4天。使用相对于生长对照的浊度的生长终点的80％减少来读取AMC、其成份和氟康唑的真菌的MIC(％)。对于两性霉素B，将该终点读取为完全抑制生长。使用相对于生长对照浊度的生长终点的50％和90％减少来读取特比萘芬的MIC。

本研究的AMC、其成份和比较试剂的范围在表20中概述。

表20

试剂	范围
		AMC	0.05-50.0％
Zn/EDTA	0.0025-2.5％
		氯化十六烷基吡啶	0.007-0.5％
异丙醇	0.025-24.5％
		Hibiclens	0.05-50.0％
Ciprofloxacin	0.03-32μg/ml
		氟康唑	0.25-255μg/ml
两性霉素B	0.008-8.0μg/ml
		特比萘芬	0.004-8.0μg/ml

D.MFC测定

进行MFC测定以确定杀死≥99％的初始真菌接种物的浓度。通过培养100μl(孔的整个内容物)的超过MIC的每孔稀释物来测定每一菌株的MFC。将该100μl样品涂布于萨布罗右旋糖琼脂上并将其于35℃孵育24小时(白色念珠菌)或72小时(深红色发癣菌)。孵育后，记录涂布了的每个滴定盘孔的菌落数。当孔没有显示生长物(即与1×103细胞/ml的初始生物浓度相比CFU/ml有99.9％的减少)时测定MFC。

II.试验结果

检验AMC溶液、其成份和比较试剂对两种真菌ATCC菌株的MIC和MFC(表21)。

如表21中显示的，当相对于生长对照的浊度，生长终点有80％减少时读取AMC、AMC成份、Hibiclens和氟康唑的MIC。将两性霉素B的终点读取为完全抑制生长。MIC％表示为g/100ml或ml/100ml。最小真菌浓度(MFC)是99.9％抑制生长的最低浓度。MFC％可用g/100ml或ml/100ml表示。AMC制剂的成份是按以下比例：ZnEDTA，5％；CPC，1％；异丙醇，49％；水，45％。在50％和90％抑制生长(50％/90％)时读取特比萘芬的MIC。

表21

化合物	MIC.％
					白色念珠菌ATCC 10231		深红色发癣菌ATCC 28188
	MIC	MFC	MIC	MFC
					AMCZnEDTA(μg/ml)CPC(μg/ml)异丙醇Hibiclens氟康唑(μg/ml)两性霉素B(μg/ml)特比萘芬(μg/ml)	＜＝0.050.08(800)≤0.0007(≤7)0.8≤0.050.50.25＞0.5	＜＝0.051.3(13000)≤0.0007(≤7)1.5≤0.0510.5＞0.5	＜＝0.050.04(400)≤0.0007(≤7)0.2≤0.0520.250.008/0.032	＜＝0.050.6(6000)≤0.0007(≤7)3.1≤0.05640.50.125

对于白色念珠菌ATCC 10231，AMC具有≤0.05％的MIC。CPC是AMC的最有活性的成份，其MIC≤0.0007％(≤7μg/ml)。工业比较试剂Hibiclens也表现出好的抗白色念珠菌ATCC 10231(MIC≤0.05％)的活性。对AMC及其成份CPC和异丙醇、以及比较试剂Hibiclens、氟康唑、两性霉素B和特比萘芬的杀真菌活性进行了观察(表21)，所述的杀真菌活性由在MIC的1次二倍稀释内的MFC确定。

对于深红色发癣菌ATCC 28188，AMC具有≤0.05％的MIC。CPC是AMC最有活性的成份(MIC≤0.007％，≤7μg/ml)。该比较试剂Hibiclens也显示了0.05％的MIC。观测了AMC及其成份CPC、Hibiclens和两性霉素B的杀真菌活性。ZnEDTA、异丙醇、氟康唑和特比萘芬未显示杀真菌活性(表21)。

AMC显示了抗白色念珠菌ATCC 10231和深红色发癣菌ATCC28188的有效的体外活性(MIC≤0.05％)。CPC是AMC的最有活性的成份。AMC和CPC显示了对白色念珠菌和深红色发癣菌菌株的杀真菌活性。AMC与Hibiclens抗这两种真菌ATCC菌株的活性相当。在试验的抗真菌剂中，特比萘芬是进行检验的抗深红色发癣菌ATCC 28188的最有活性的试剂，但其是进行检验的抗白色念珠菌ATCC 10231的最小活性的抗真菌剂(MIC＞0.5μg/ml)。

     实施例12.杀微生物/杀孢子组合物成份之间的增效作用

AMC对进行试验的真菌种类的抗真菌作用是基于-CPC、基于-IPA或基于-Zn的抗微生物产品在相关的CPC、IPA或Zn的浓度下所不具有的特性，而可能是活性成份协同相互作用的结果。这容易从杀死红色发癣菌的数据看出，其中对不同CPC浓度在存在Zn⁺²(作为Zn-EDTA)或IPA或存在两者的情况下进行了检验。这在下表22中概述。

表22：由30-秒杀死深红色发癣菌所证实的AMC组分

之间的协同效应(起始为2,200,000CFU)

组分或混合物	起始CFU数值在30秒时的减少	相对杀伤效力
			0.002％CPC	9.36-fold(0.97-logs)	1.00
0.8％IPA	5.95-fold(0.77-logs)	0.64
			1％Zn-EDTA	4.89-fold(0.66-logs)	0.52
0.002％CPC+9.8％IPA	6.38-fold(0.80-logs)	0.68
			1％Zn-EDTA+0.1％CPC	10.0-fold(1.0-logs)	1.06
0.002％CPC+1％Zn-EDTA+9.8％IPA	53-fold(1.72-logs)	5.66

可从表22中的数据看出，与任何其它组合或独立的活性成份相比只有CPC、IPA和Zn的组合使性能增强。用于表22的数据是用于其中所述微生物的杀死是挑战性(challenging)的条件下，否则增效很难证明。也就是说，在容易产生100％杀死的情况下，成份的不同组合之间的性能不同受一种或多种独立成份也可产生100％杀死的事实掩蔽。对于AMC作用于细菌，这常常可由CPC独自产生。

将AMC与ZnEDTA、CPC、异丙醇、Hibiclens和ciprofloxacin(抗细菌)以及ZnEDTA、CPC、异丙醇、Hibiclens、氟康唑和两性霉素B(抗酵母)相比测定MIC(最小抑制浓度)的研究显示AMC具有极好的对抗接受检验的生物体的效力并与试验的对照抗微生物剂相关。MIC是完全抑制生长的最低抗微生物浓度。这些数据在下表23和下表24中概述。在这些表中，较低MIC对应较高的效力。

表23：AMC和参比产物/材料的MIC值

	针对下列的MIC
								测试材料	表皮葡萄球菌	金黄色葡萄球菌	化脓葡萄球菌	大肠杆菌	绿脓杆菌	白色念色珠菌	深红色发癣菌
AMC(ppm)	0.016	0.008	0.018	0.25	2.0	0.031	0.031
								Hibiclens(ppm)	3.91	＜1.95	3.91	3.91	125	7.81	31.25
Ciprofloxacin(ppm)	＞0.1	＞0.1	＞0.1	＞0.1	＞0.1	＞0.1	＞0.1
								咪康唑(ppm)	n.d.	n.d.	n.d.	n.d.	n.d.	2.0	0.25
两性霉素B(μg/ml)	n.d.	n.d.	n.d.	n.d.	n.d.	n.d.	＞0.25

表24：AMC和参比产物/材料的MIC

实施例13.异丙醇、锌和CPC的药理学、微生物学、毒理学和安全性

I.药理学 & 微生物学

AMC活性成份的有关药理学和微生物学在下面论述。

A.异丙醇

异丙醇(IPA)，如同任何脂族醇一样具有中枢神经系统抑制剂特性并能调节其它化合物的肝脏毒性。其可刺激眼和粘膜。据报道其可诱发肝脏的混合功能氧化酶。

异丙醇是杀菌的并用于许多产品如局部抗菌药、家庭、医院和企业使用的消毒剂、消毒用酒精、药用搽剂、绿肥皂酊剂、羟汞硝酚钠的头皮滋补酊剂和药物制剂(如局部麻醉药、碘酊和用于外科缝线和敷料的浴液)。Kirk-Othmer Encyclopedia of ChemicalTechnology.4th ed.Volumes 1：New York，NY.John Wiley and Sons，1991-Present.，p.V20(1996)236。异丙醇也可作为在用针或其它尖锐器械刺入之前用于减少局部细菌群落的皮肤擦剂使用，并且也可作为外科手术洗液使用。异丙醇由于其较大地降低表面张力而比乙醇具有稍强的杀菌活性。当其未经稀释或以70％含水溶液使用时可迅速杀死许多滋养型细菌。美国医学会，药物局.药物评价.第六版.芝加哥，I11：美国医学会，1986年，1523(American Medical Association，Department of Drugs.Drug Evaluation.6th ed.Chicago，I11：American Medical Association，1986，1523)。其杀病毒活性也已经报导：在动物研究中，于20℃下将人血冻干血浆中的乙型肝炎病毒与70％异丙醇接触10分钟。将一只猩猩由静脉内接受该处理过的病毒物质，接种后9个月期间其未显示受感染征兆。Bond WW等，J ClinMicrobial 18(3)：535(1983)。

异丙醇独立使用的一个传统缺陷是其基本上对真菌无效。该缺陷在AMC制剂中已消除。这在下表25中显示，其将9.8％IPA抗深红色发癣菌和白色念珠菌的效力与20％(1∶5)AMC稀释物(包含9.8％IPA)以及与以在20％AMC稀释物中存在的浓度的其它AMC成份的效力相比较。

表25：通过30秒杀死深红色发癣菌和白色念珠菌来证明的20％AMC与等量％IPA和其它AMC^TM组分的抗真菌效果

组分或混合物	深红色发癣菌起始CFU值在30秒后的Log减少	深红色发癣菌起始CFU值在30秒后的Log减少
			AMCTM，1∶5 difution(20％)	6.3Logs(100％杀死)	6.8Logs(100％杀死)
9.6％IPA(＝20％ AMCTM)	0.8Logs	0.3Logs
			0.2％ CPC(＝20％ AMC)	3.4Logs	6.8Logs(100％杀死)
1％ Zn-EDTA(＝20％ AMC)	0.7Logs	0.1Logs

B.锌(作为氧化物、盐或螯合络合物例如与EDTA的螯合络合物)

锌是一种必需的营养矿物质并作为一些酶的辅助因子起作用。饮食缺陷导致严重的健康后果。过度暴露于锌需要非常充分地暴露(接触锌金属烟尘除外，见下一部分的锌毒理学)并且是罕见的。锌不能在体内积聚。在美国成人平均日摄取量是每日12-15mg，大部分来自食物。Goyer，R.A.，“Toxic Effects of Metals，”Chapt.23 inCasarett and Doull’s Toxicology，5th Ed.(1996)，pp.720-721，McGraw-Hill，NY。

作为氧化物、其它锌盐或螯合的锌，锌具有适度的收敛性和杀菌作用并且可用于治疗皮肤疾病和感染如湿疹、脓疱性皮炎、癣、静脉曲张性溃疡、搔痒症和银屑病。十一烯酸锌(C11-脂肪酸的盐)是一种用于脚藓和其它皮肤真菌病(作为乳剂)及治疗睑腺炎(作为软膏剂)的普通OTC产品。具有水杨酸NF的氧化锌糊剂通常用于治疗脚藓和其它皮肤真菌病。氧化锌的存在给予糊剂收敛性和保护特性。收敛作用能用来减少炎症并愈合裂伤。Gilman，A.G.，L.S.Goodman，and A.Gilman(eds.)Goodman and Gilman′s The PharmacologicalBasis of Therapeutics.7th ed.New York：Macmill an PublishingCo.，Inc.，1985.967。

总的来说，锌由于其杀菌特性和收敛性可在药理学上用于皮肤制剂中。在AMC中，为了使产品完全增效，该成份的组合十分需要锌。观察到AMC溶液比锌本身具有更高的杀生物活性和效力广度。

C.氯化十六烷基吡啶

氯化十六烷基吡啶(CPC)是一种阳离子表面活性剂。其药理学似乎涉及CNS和PNS中的毒草碱受体。吸收大量CPC可引起恶心、呕吐、虚脱、痉挛和昏迷，以及在动物研究中，引起运动功能的类似箭毒的暂时麻痹。在AMC浓缩剂中使用的CPC水平，CPC潜在的不利药理学效应有理由不认为会产生。

氯化十六烷基吡啶(CPC)熟知为消毒剂和抗微生物剂并也作为美容剂和药物制剂的防腐剂使用。Ashford，R.D.Ashford′sDictionary of Industrial Chemicals.London，England：WavelengthPublications Ltd.，1994.189。CPC也是Cepacol^产品，包括润喉片和口腔清洗剂中的主要活性成份。Kirk-Othmer Enoyclopedia ofChemical Technology.4th ed.Volumes 1：New York，NY.John Wileyand Sons.1991-Present.，p.V8(1993)259 & 851。它也可用于外部除臭剂产品。

其最普通的医疗用途是作为对敏感的非孢子形成细菌具有表面活性及杀菌特性的局部抗感染药。其通常用于外科手术前的皮肤制剂、小创伤的预防性消毒剂，并用于对粘膜的冲洗或局部应用(例如，通过掺合入漱口剂类)。Osol，A.和J.E.Hoover等(eds.).Remington′sPharmaceutical Scienoes.第15版，Easton，宾夕法尼亚州：Mack出版公司，1975年.1090。

通常，基于CPC(和其它烷基/芳基-季铵)的抗微生物剂的缺点是，虽然这些是抗许多革兰氏阳性和革兰氏阴性生物体非常有效的杀菌剂或抑菌剂并且对特定真菌具有一些活度(特别是白色念珠菌和阴道毛滴虫)，但它们未能有效地对抗细菌芽孢或大多数病毒。美国医院药典服务，I和II卷，华盛顿，DC：American Society of HospitalPharmacists，to 1984.，p.84：4：16。与其它阳离子型表面活性剂相比，在2-10的pH范围CPC的抗菌活性变化很小。

基于CPC的单一产品的另一问题是它们的缓慢的作用时间。例如，将0.1％该溶液用于人皮肤通常需要约7分钟才减少50％的细菌群体(即，2倍)。0.1％的CPC酊剂比70％的乙醇起作用慢。即使存在拮抗组织成份，0.002％CPC溶液也需要9小时来杀死98％的大肠杆菌(即，减少50倍)。Goodman，L.S.和A.Gilman.(eds.)ThePharmacological Basis of Therapeutics.5th ed.New York.Macmillan Publishing Co.，Inc.，1975.1002。

这些传统的CPC缺陷未成为AMC技术的问题。上述表1中的数据确定，甚至达到1∶500的AMC稀释物(相当于0.002％CPC)的细菌杀死试验，在30秒钟内获得100％的杀死大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌。相同的数据也显示该AMC是有效的杀真菌剂和抗真菌剂。

对于医疗应用中的使用，在基于CPC的产品中CPC的典型剂量或强度如下表26。

表26：典型的医学使用CPC强度/剂量

途径/形式	靶标	％CPC溶液	其它形式剂量
				局部，溶液	完整皮肤	0.1％-1％
小裂伤	0.1％
			粘膜		0.01％-0.05％
锭剂，药片	粘膜	0.01％-0.05％					0.33-3mg(0.067％)
			灌洗液	直肠	0.05％
栓剂	阴道(阴道炎)						0.1％

概述包含于表26中的信息来源是Osol，A和J.E.Hoover等(eds.)，Remington′s Pharmaceutical；Scienoes.15th ed.Easton，Pennnsylvania：Mack Publishing Co.，1975.1090，及AmericanHospital Formulary Service.Volumes I and II.Washington.DC：American Society of Hospital Pharmacists，to 1984.，p.84：4：16。

在口腔应用中，据报道每日用2.2毫摩尔CPC(0.075％)冲洗两次季胺类化合物(包括氯化十六烷基吡啶)可适度抑制由蔗糖残渣引起的牙斑并且据报道每日冲洗4次可几乎增强到氯己定的效力。Bonesvoll P，Gjermo P；Arch Oral Biol 23(4)：289-94(1978)。

AMC在低于常规所需的所有CPC(伴随有IPA和Zn)水平时提供对细菌和真菌两者的有效控制并提供基于IPA或CPC产品通常未显示的真菌控制能力揭露了AMC技术许多可能的医疗和牙科应用，其中活性成份的单位成本、抗微生物谱的宽度和对局部组织刺激的较低可能性都成为AMC的竞争性因素。

II.毒理学和安全性

AMC浓缩剂具有认为是非常低急性毒性的急性毒性曲线。已经为AMC测定了下列毒性指数值：

大鼠口服LD₅₀           ＞5,000mg/Kg

兔皮肤LD₅₀             ＞5,000mg/Kg

大鼠4小时吸入LC₅₀      ＞2mg/L

眼部刺激                严重刺激(Cat I-II)

皮肤刺激                中度刺激(Cat III)

皮肤敏化                未敏化

由于该浓缩剂的IPA含量和CPC含量，AMC浓缩剂产生严重的眼部刺激。AMC浓缩剂只产生中度的皮肤刺激。对于其中AMC较于AMC浓缩物其自身全部浓度得以减少的AMC稀释物和AMC制剂或经AMC处理的产品，这些效应将会减少。预计源于AMC浓缩剂的产品由于不同的AMC稀释物(见表26)浓度水平的减少将很少可能产生眼部或皮肤刺激。表27中的信息说明1∶50和更高比例的稀释物应该基本上无眼部或皮肤刺激，而且1∶5的稀释物只会温和地刺激眼并基本对皮肤无刺激。

表27：不同强度AMC中的成份浓度

组分	完全强度	1∶5稀释(20％)	1∶50稀释(2％)	1∶500稀释(0.2％)
					异丙醇(活性)	49.00％	9.80％98,000ppm	0.98％9,800ppm	0.098％960ppm
CPC(活性)	1.00％	0.20％2,000ppm	0.020％200ppm	0.0020％20ppm
					Zn，作为氧化物(活性)	0.12％	0.024％240ppm	0.0024％24ppm	0.00024％2.4ppm
EDTA(惰性：缓冲剂、螯合剂)	0.47％	0.047％470ppm	0.0047％47ppm	0.00047％4.7ppm

AMC的急性毒性曲线与其单独成份的急性毒性一致并且未暗示当组合成AMC时AMC成份的毒性有增效作用。这能在下表28中看出。

表28：与AMC数据相比的成份毒性指数

材料	大鼠口服LD50	兔皮肤LD50	大鼠吸入LC50
				异丙醇(100％)	＞5.000mg/Kg	12,800mg/Kg	72.6mg/L
CPC(100％)	200mg/Kg	＞2,000mg/Kg	0.090mg/L
				Zn，氧化物(100％)	7.950mg/Kg*	＞2,000mg/Kg	＞0.005mg/L
EDTA(100％)	30mg/Kg*	300mg/Kg***	0.4mg/L***
				含有AMC的浓缩物的估计值
异丙醇(49％)	＞5,000mg/Kg**	25,600mg/Kg	145mg/L
				CPC(1％)	20,000mg/Kg	＞20,000mg/Kg**	9mg/L
Zn氧化物(0.12％)	＞＞100,000mg/Kg	＞＞100,000mg/Kg	＞4.2mg/L**
				EDTA(0.47％)	6,300mg/Kg	64,000mg/Kg***	11mg/L***
AMC的实测数据(100％)	＞5,000mg/Kg	＞5,000mg/Kg	＞2mg/L

^*小鼠数据；^**特定途径的毒性的指标组分；^***口服毒性的估计值，基于10％皮肤摄取和350g大鼠的4小时大鼠吸入(0.1L/min分钟-体积)等价物

依据前面本发明特定实施方案的详细描述，显然独特的生物活性成份已经得以描述。虽然特定的实施方案已在这里详细公开，但这是以实例的方式进行仅为了说明目的，而并不意味着限制接下来附带的权利要求的范围。特别地，发明者考虑对本发明可作不同的替换、改变和修饰而不脱离如权利要求确定的本发明的精神和范围。例如，通过理解于此描述的实施方案，相信给药途径的选择对本领域普通技术人员是惯例事件。

Claims (48)

1.一种药物组合物，其包含：

a)离子型表面活性剂；

b)包含金属和表现对氢离子有亲和性的单齿、二齿或多齿配体的金属螯合络合物；

c)溶剂；和

d)可药用载体。

2.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述的组合物包含约0.1-15％重量的离子型表面活性剂、约1-30％重量的金属螯合络合物和约0.5-95％重量的溶剂。

3.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述的金属选自铜、锌、汞、铬、锰、镍、镉、砷、钴、铝、铅、硒、铂、金、钛、锡或其组合。

4.如权利要求1所述的药物组合物，其中单齿、二齿或多齿配体选自天然氨基酸、亚氨二醋酸、腈三乙酸、包含在羧基的α-位置上的碳取代和不含氨基羧基基团的氨基酸残基片段的亚氨二醋酸衍生物、包含在羧基的α-位置上的碳取代和不含氨基羧基基团的氨基酸残基片段的腈三乙酸衍生物、亚烷基二氨聚乙酸、包含在羧基的α-位置上的碳取代和不含氨基羧基基团的氨基酸残基片段的聚亚烷基聚氨基聚乙酸衍生物、其中羧酸基团被膦酸基团取代的ω-膦酸羧酸的衍生物和亚乙基二膦酸四丙酸的衍生物、亚乙基四(硫代乙酸)的衍生物、二亚乙基三硫代二乙酸的衍生物、单胺氨羧配位剂和其混合物的阴离子。

5.如权利要求1所述的药物组合物，其中金属螯合络合物包含至少一种选自异亮氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸、精氨酸和组氨酸的氨基酸。

6.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述的金属螯合络合物包含卤化氨基乙酸铜络合物。

7.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述的金属螯合络合物包含乙二胺四乙酸锌(Zn-EDTA)络合物。

8.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述的离子型表面活性剂选自十六烷基吡啶卤化物、十六烷基三甲基铵卤化物、十六烷基二甲基乙基铵卤化物、十六烷基二甲基苄基铵卤化物、十六烷基三丁基鏻卤化物、十二烷基三甲基铵卤化物和十四烷基三甲基铵卤化物。

9.如权利要求8所述的药物组合物，其中所述的离子型表面活性剂选自十六烷基吡啶卤化物和十六烷基三甲基铵卤化物。

10.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述的离子型表面活性剂选自氯化十六烷基吡啶(CPC)、氯化十六烷基三甲基铵、氯化十六烷基苄基二甲基铵、溴化十六烷基吡啶(CPB)、溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)、溴化十六烷基二甲基乙基铵、溴化十六烷基三丁基鏻、溴化十二烷基三甲基铵和溴化十四烷基三甲基铵。

11.如权利要求10所述的药物组合物，其中所述的离子型表面活性剂是CPC。

12.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述的溶剂是脂族醇。

13.如权利要求12所述的药物组合物，其中所述的脂族醇是异丙醇。

14.一种药物组合物，其中所述的药物组合物包含CPC、Zn-EDTA、异丙醇和可药用载体。

15.如权利要求14所述的药物组合物，其中所述的药物组合物包含约0.2％重量的CPC、约1％重量的Zn-EDTA和约9.8％重量的异丙醇。

16.如权利要求14所述的药物组合物，其中所述的药物组合物包含约0.02％重量的CPC、约1％重量的Zn-EDTA和约9.8％重量的异丙醇。

17.如权利要求14所述的药物组合物，其中所述的药物组合物包含约0.002％重量的CPC、约1％重量的Zn-EDTA和约9.8％重量的异丙醇。

18.如权利要求1所述的药物组合物，所述的药物组合物进一步包含至少一种额外的药物组合物。

19.如权利要求18所述的药物组合物，其中所述的至少一种额外的药物组合物是抗微生物组合物。

20.如权利要求19所述的药物组合物，其中所述的抗微生物组合物是一种抗真菌组合物。

21.如权利要求18所述的药物组合物，其中所述的至少一种额外的药物组合物选自Zimycan^、Seboride^、Liarozole^、Rambazole^、Atopik^、Ketanserin^和Oxatomide^。

22.如权利要求1-21任意一项所述的药物组合物，其中将所述药物组合物配制用于局部施用。

23.如权利要求1-21任意一项所述的药物组合物，其中将所述药物组合物配制用于口服施用。

24.如权利要求1-21任意一项所述的药物组合物，其中将所述药物组合物配制用于静脉内施用。

25.用于在受试者中治疗或预防由病原体引起的感染的方法，其中所述的方法包括施用给所述的受试者有效量的根据权利要求1-24任意一项所述的药物组合物。

26.如权利要求25所述的方法，其中所述的病原体选自细菌、病毒和真菌。

27.如权利要求26中所述的方法，其中所述的病原体是细菌。

28.如权利要求27所述的方法，其中所述的细菌选自大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、酿脓葡萄球菌(Staphylococcuspyogenes)、肺炎葡萄球菌(Staphylococcus pneumoniae)、表皮葡萄球菌、淋病奈瑟氏球菌、脑膜炎奈瑟氏球菌、炭疽杆菌、蜡样芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、颗粒丙酸杆菌和疮疱丙酸杆菌。

29.如权利要求26中所述的方法，其中所述的病原体是病毒。

30.如权利要29所述的方法，其中所述的病毒选自疱疹病毒、小RNA病毒、鼻病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、I型人嗜T淋巴细胞病毒(HTLV-I)、流感病毒、arenovirus、虫媒病毒、人α疱疹病毒3型和类天花病毒。

31.如权利要求29所述的方法，其中所述的感染选自天花、流行性感冒、麻疹、流行性腮腺炎、脊髓灰质炎、水痘、狂犬病、风疹、甲型肝炎、乙型肝炎、疱疹、带状疱疹、非洲淋巴细胞瘤和HIV感染。

32.如权利要求26中所述的方法，其中所述的病原体是真菌。

33.如权利要求32中所述的方法，其中所述的真菌是皮肤真菌。

34.如权利要求33所述的方法，其中所述的感染是皮肤真菌病。

35.如权利要求34所述的方法，其中所述的皮肤真菌病选自癣、脓癣、真菌性须疮、甲癣、足癣、股癣、播散性皮肤真菌病和肉芽肿性皮肤真菌病。

36.如权利要求32所述的方法，其中所述的真菌选自深红色发癣菌、卵瓶形酵母和白色念珠菌。

37.用于在受试者中治疗或预防头皮屑的方法，其中所述的方法包括施用给所述的受试者有效量的根据权利要求1-24任意一项所述的药物组合物。

38.用于在受试者中治疗或预防痤疮的方法，其中所述的方法包括施用给所述的受试者有效量的根据权利要求1-24任意一项所述的药物组合物。

39.用于在受试者中治疗皮炎的方法，其中所述的方法包括施用给所述的受试者有效量的根据权利要求1-24任意一项所述的药物组合物。

40.如权利要求39所述的方法，其中所述的皮炎是特应性皮炎或接触性皮炎。

41.如权利要求25所述的方法，其中所述的方法进一步包括施用至少一种额外的药物组合物。

42.如权利要求41所述的方法，其中所述的至少一种额外的药物组合物是抗微生物组合物。

43.如权利要求42所述的方法，其中所述的抗微生物组合物是一种抗真菌组合物。

44.如权利要求42所述的方法，其中所述的抗微生物组合物选自Lamisil^、Zimycan^、Seboride^、Sporamelt^、Liarozole^、Rambazole^和Azoline^。

45.如权利要求41所述的方法，其中所述的至少一种额外的药物组合物是Hivenyl^、Atopik^、Ketanserin^、Oxatomide^或Ecalcidene^。

46.根据权利要求22-45任意一项所述的方法，其中所述的药物组合物是通过口服施用。

47.根据权利要求22-45任意一项所述的方法，其中所述的药物组合物是通过局部施用。

48.根据权利要求22-45任意一项所述的方法，其中所述的药物组合物是通过静脉内施用。

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