CN1887355A - 柑橘精华的消毒杀菌新用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种柑橘精华的消毒杀菌新用途,所述柑橘精华包括柑橘精华74.8%、甘油25.2%,所述柑橘精华采用下列制备方法:(1)柑橘水果,用水洗净,去除水分,用压磨机压碎成乳剂;(2)用离心干燥设备把乳剂干燥至原重量的八分之一;(3)在浓缩乳剂中加入30%重量的甘油,混合,静放72小时,随机摇动10分钟;(4)用120目离心过滤浓缩乳剂,除去滤渣;(5)过滤后的清洁溶液中加入足够的乳酸,调节pH值至2.2-3.2。
Description
技术领域
本发明涉及一种柑橘精华的消毒杀菌新用途。
背景技术
随着工业的发展,尤其是化工合成技术的提高,传统农牧渔业走向按工业生产模式动作,有效地提高了生产效率和产量,但同时由于生产规模的扩大,生产过程中大量使用人工合成的抗生素、激素等药品和添加剂,使产品口味、质量退化、药物残留并破坏生态环境,食品安全形势严峻,近年来,疯牛病、禽流感等人畜共患疾病威胁着人类健康,不断有象苏丹红等全球关注的仪器安全事件发生,令人们对食品生产日益重视,绿色食品、生态养殖等概念深入人心,各国都在研究在食品生产和加工的过程中,减少和禁止使用有害于环境和身体健康的物质。
柑橘属植物的果实,其中存在具有抗微生物生理活性的天然物质一柑橘精华(CITRUS EXTRACT)。上世纪六十年代,美国佛罗里达大学仪器微生物研究所(著名的Gainesville实验室)的Jacob Harich.Steven Otwell和WayneMarshall tiji研究从柑橘属植物的果实中提取柑橘精华,其中含有柑橘果子精华、维生素C、柠檬酸、氨基酸、柑橘果胶、甘油脂,上述成分巳全部录入FDA目录为安全无毒性物质,现国际上巳广泛应用于食品、保健器、化妆品和医药工业中。
发明内容
本发明目的是:提供一种柑橘精华的消毒杀菌新用途。
本发明的技术方案是:一种柑橘精华的消毒杀菌新用途。
所述柑橘精华采用下列制备方法:
(1)柑橘水果,用水洗净,去除水份,用压磨机压碎成乳剂;
(2)用离心干燥设备把乳剂干燥至原重量的八分之一;
(3)在浓缩乳剂中加入30%重量的甘油,混合,静放72小时,随机摇动10分钟;
(4)用120目离心过滤浓缩乳剂,除去滤渣;
(5)过滤后的清洁溶液中加入足够的乳酸,调节PH值至2.2-3.2。
本发明的优点是:
1.柑橘精华具有强力杀菌功能,通过接触微生物,改变其细胞膜渗透性,阻止其有氧呼吸来达到杀菌效果,经检测对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单细胞、白色念珠菌有迅速的杀灭作用。
2.柑橘精华安全无毒性,它是纯天然植物提取物,经急性经口毒试验,急性吸入毒性试验,亚急性毒性试验,急性皮肤试验,眼刺激试验确认安全无毒。
3.经济实用,我国是一个柑橘种植大国,随着柑橘精华产品的发展,给柑橘深加工提供了发展机遇,确保了原料的供应,所以柑橘精华消毒杀菌液与现有消毒杀菌剂价格将相差无几,成本非常合理。
下面结合实施例对本发明作进一步描述:
具体实施方式
实施例:一种柑橘精华的消毒杀菌新用途。
所述柑橘精华采用下列制备方法:
(1)柑橘水果,用水洗净,去除水份,用压磨机压碎成乳剂;
(2)用离心干燥设备把乳剂干燥至原重量的八分之一;
(3)在浓缩乳剂中加入30%重量的甘油,混合,静放72小时,随机摇动10分钟;
(4)用120目离心过滤浓缩乳剂,除去滤渣;
(5)过滤后的清洁溶液中加入足够的乳酸,调节PH值至2.2-3.2。
经检测,柑橘精华中含有下列成份:
(1)柑橘果子精华 47.6%
(2)维生素C 5.0%
(3)柠檬酸 7.0%
(4)氨基酸 0.2%
(5)柑橘果胶 5.0%
(6)甘油脂 10%
(7)甘油 25.2%。
用途:
一、空气环境消毒洁净剂
柑橘精华能有效在抑制金黄色葡萄球菌、链球菌、沙门氏菌、大肠杆菌、感冒病毒等各种细菌和病毒,可直接喷洒在所有家居、会议室、客房、餐饮、娱乐、医院、学校、飞机、汽车、轮船等公共场所,具有超强消毒灭菌效果。
二、创伤紧急处理
柑橘精华优越的能力100%抑制金葡萄球菌,能够有效地杀死细菌,能使伤口免受感染,由于有抗氧化剂、维生素C、柑橘精华有助于加速伤口的痊愈。若化脓伤口,清脓后直接喷射,效果非常好。
三、婴儿皮肤护理
柑橘精华是纯天然植物萃取,经检测对皮肤无毒、无刺激、无过敏,适用于婴儿尿布症等皮肤的抑菌护理,是婴儿理想的呵护产品。
四、妇女消毒护理
女性的卫生护理对健康非常重要,由于阴部是湿热地带,是细菌的真菌的温床,柑橘精华将有效抑制有害细菌,其抗氧化和维生素将滋养此区域。
五、口腔与鼻粘膜
细菌容易在口腔中滋生,导致牙齿和口腔发炎产生异味,用柑橘精华直接喷射,排队口腔内的有害细菌,使牙床健康保持口气清新。
六、农副产品消毒灭菌剂
柑橘精华是预防家禽、水产品、蔬菜、瓜果等动植物的天然配方,它具有消灭家禽肠内害虫、寄生生物其它细菌的功能,它巳被证实安全可靠,效能突出而不含毒素,蓄禽、鱼类的饲料里适当加入柑橘精华可防止毒素、细菌、与寄生虫感染,提高免疫力,柑橘精华用于蔬菜、瓜果、防病治虫效果好,是天然高效无毒的防虫灭菌产品,是生产无公害有机农产品的天然卫士,是可以入口的液。
柑橘精华是具有广谱抗菌、强力高效、安全无毒的天然抗菌剂,与现有的常用抗菌剂比较,有许多优点:
1、广谱抗菌:柑橘精华具有令人惊奇的杀灭致病性微生物的能力,不论是细菌繁殖和真菌类,同时对病毒和寄生虫,都具有杀灭和抑制作用。
2、强力高效:经多次重复对病原微生物“最低抑菌浓度试验”(MIC试验)证明,柑橘精华的抗菌效力高出其它同类抗菌化合物10-100倍,即令在很稀释的剂量下,这种高效能也能表现出来。
3、安全无毒、可食用:急性经口毒性试验、急慢性毒理试验、长期呼吸毒理试验结果表明,柑橘精华属实际无毒物质,表皮肿瘤毒理试验、肿瘤毒理试验表明,柑橘精华不会引起肿瘤病变或系统性病变,安全服用,可清除消化系统等的有害菌。
4、无痛、无刺激和无过敏反应:皮肤、粘膜刺激试验结果表明,对皮肤无刺激、无过敏反应,使用无痛楚,即使长期使用柑橘精华,也不会产生刺激和过敏反应。
5、具生物可降解性,无污染:美国华盛顿REDMOND生物学研究实验证实,柑橘精华对厌氧分解有机物产生的二氧化碳有抑制作用,具有生物可降解性,可在自然界自然分解,不会污染和影响环境。
6、长效稳定,不产生耐药性:柑橘精华是纯植物提取的天然杀菌剂,使用后不用清洗,并能形成保护膜,达到长效抑杀细菌、防止细菌侵染的作用,柑橘精华破坏有害菌的细胞膜达到物理杀菌的作用,性能稳定,有害菌不会产生耐药性,因此可放心长期使用。
7、与其它药物良好的兼容性:柑橘精华具有增效功能的优势,且因其具有抗微生物的强效,使得它成为一种极好的防腐剂,还能使药效保持不变。
消毒与杀菌试验:
第一部分:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的杀灭试验
一.器材
1.试验菌:大肠杆菌(8099)第5代(军事医学科学院提供)
金黄色葡萄球菌(ATCC6538)第5代(军事医学科学院提供)
2.样品:许多宝牌柑橘精华消毒液(批号:040701)有效成分:含总酸0.6980g/L
3.中和剂I:含0.3%硫代硫酸钠、0.5%卵磷脂、2%吐温-80的TSB
中和剂II:含0.0375%硫代硫酸钠、0.0625%卵磷脂、0.25%吐温-80的TSB
4.有机干扰物:3%牛血清白蛋白
二.方法
1.检验依据:《消毒技术规范》2002年版 2.1.1.5.5和2.1.1.7.4
2.中和剂I鉴定试验:消毒剂浓度:含总酸0.5584g/L 试验菌:大肠杆菌 作用时间0.5min 试验温度:20℃±1℃ 重复3次
中和剂II鉴定试验:消毒剂浓度:含总酸0.0698g/L(1∶10稀释液)试验菌:大肠杆菌 作用时间0.5min 试验温度:20℃±1℃ 重复3次
3.定量杀菌试验:消毒剂浓度:含总酸0.5584g/L
作用时间:1min、2min、3min 试验温度:20℃±1℃ 试验重复3次
三.结果
1.中和剂I鉴定试验结果表明:第1、2组平均生长菌落数均为0cfu/ml,第3、4、5组三组间误差率分别为1.21%、6.24%、6.29%。
表1 中和剂I鉴定试验结果
组别 | 每次试验生长菌落数(cfu/ml) | 平均生长菌落数(cfu/ml) | ||
1 | 2 | 3 | ||
12345 | 001.97×1071.91×1071.92×107 | 002.70×1073.10×1072.70×107 | 002.85×1072.90×1073.30×107 | 002.51×1072.64×1072.64×107 |
注:阴性对照均无菌生长。
2.中和剂II鉴定试验结果表明:第1、2组平均生长菌落数分别为0cfu/ml、7.23×102cfu/ml,第3、4、5组三组间误差率分别为7.58%、3.46%、2.23%。
表2 中和剂II鉴定试验结果
组别 | 每次试验生长菌落数(cfu/ml) | 平均生长菌落数(cfu/ml) | ||
1 | 2 | 3 | ||
12345 | 02.05×1034.90×1074.00×1074.30×107 | 0702.13×1072.01×1072.22×107 | 0501.94×1072.01×1071.88×107 | 07.23×1022.99×1072.67×1072.80×107 |
注:阴性对照均无菌生长。
3.20℃±1℃试验温度下,含总酸0.5584g/L的许多宝牌消毒液作用1分钟、2分钟、3分钟对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的杀灭对数值均>5.00。
表3 对试验菌的杀灭效果
试验菌 | 有效成分含量(g/L) | 阳性对照组平均菌落数的对数值 | 作用不同时间(min)的平均杀灭对数值及其范围 | ||
1 | 2 | 3 |
金黄色葡萄球菌 | 0.5584 | 7.55 | >5.00 | >5.00 | >5.00 |
大肠杆菌 | 0.5584 | 7.41 | >5.00 | >5.00 | >5.00 |
注:阴性对照均无菌生长。
四.结论
1.含0.3%硫代硫酸钠、0.5%卵磷脂、2%吐温-80的TSB和含0.0375%硫代硫酸钠、0.0625%卵磷脂、0.25%吐温-80的TSB能有效中止含总酸0.5584g/L和含总酸0.0698g/L(1∶10稀释液)消毒液的残留毒性,中和剂及中和产物对试验菌和培养基均无不良影响,故判其为该样品定量杀菌试验的中和剂。
2.20℃±1℃试验温度下,含总酸0.5584g/L的消毒液作用1分钟、2分钟、3分钟对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的杀灭对数值均>5.00。
第二部分:白色念珠菌的杀灭试验
一.器材
1.试验菌:白色念珠菌(ATCC10231)第6代(军事医学科学院提供)
2.样品:许多宝牌柑橘精华消毒液(批号:040701)有效成分:含总酸0.6980g/L
3.中和剂:含0.3%硫代硫酸钠、0.5%卵磷脂、2%吐温-80的TSB
4.有机干扰物:3%牛血清白蛋白
二.方法
1.检验依据:《消毒技术规范》2002年版 2.1.1.5.5和2.1.1.7.4
2.中和剂鉴定试验:消毒剂浓度:含总酸0.5584g/L
作用时间2.5min 试验温度:20℃±1℃ 重复3次
3.定量杀菌试验:消毒剂浓度:含总酸0.5584g/L
作用时间:2.5min、5min、7min 试验温度:20℃±1℃ 试验重复3次
三.结果
1.中和剂鉴定试验结果表明:第1、2组平均生长菌落数分别为0cfu/ml和1.70×104cfu/ml,第3、4、5组三组间误差率分别为4.33%、2.99%、7.45%。
表1 中和剂鉴定试验结果
组别 | 每次试验生长菌落数(cfu/ml) | 平均生长菌落数(cfu/ml) | ||
1 | 2 | 3 | ||
12345 | 01.58×1041.65×1061.81×1061.84×106 | 01.90×1043.20×1063.40×1063.45×106 | 01.62×1043.10×1062.85×1062.50×106 | 01.70×1042.65×1062.69×1062.60×106 |
注:阴性对照均无菌生长。
2.20℃±1℃试验温度下,含总酸0.5584g/L的许多宝牌柑橘精华消毒液作用2.5分钟、5分钟、7.5分钟对白色念珠菌的杀灭对数值分别为2.16(1.99~2.73)、>4.00、>4.00。
表3 对试验菌的杀灭效果
试验菌 | 有效成分浓度(g/L) | 阳性对照组平均菌落数的对数值 | 作用不同时间(min)的平均杀灭对数值及其范围 | ||
2.5 | 5 | 7.5 | |||
白色念珠菌 | 0.5584 | 6.52 | 2.16(1.99~2.73) | >4.00 | >4.00 |
注:阴性对照均无菌生长。
四.结论
1.含0.3%硫代硫酸钠、0.5%卵磷脂、2%吐温-80的TSB能有效中止含总酸0.5584g/L消毒液的残留毒性,中和剂及中和产物对试验菌和培养基均无不良影响,故判其为该样品定量杀菌试验的中和剂。
2.20℃±1℃试验温度下,含总酸0.5584g/L的消毒液作用2.5分钟、5分钟、7.5分钟对白色念珠菌的杀灭对数值分别为2.16(1.99~2.73)、>4.00、>4.00。
第三部分:铜绿假单胞菌的杀灭试验
一.器材
1.试验菌:铜绿假单胞菌(ATCC15442)第5代(中国普通微生物菌种保藏中心提供)
2.样品:许多宝牌柑橘精华消毒液(批号:040701)有效成分:含总酸0.6980g/L
3.中和剂I:含0.3%硫代硫酸钠、0.5%卵磷脂、2%吐温-80的TSB
中和剂II:含0.0375%硫代硫酸钠、0.0625%卵磷脂、0.25%吐温-80的TSB
二.方法
1.检验依据:《消毒技术规范》2002年版 2.1.1.5.5和2.1.1.7.4
2.中和剂I鉴定试验:消毒剂浓度:含总酸0.5584g/L
作用时间0.5min 试验温度:20℃±1℃ 重复3次
中和剂II鉴定试验:消毒剂浓度:含总酸0.0698g/L(1∶10稀释液)作用时间0.5min 试验温度:20℃±1℃ 重复3次
3.定量杀菌试验:消毒剂浓度:含总酸0.5584g/L
作用时间:1min、2min、3min 试验温度:20℃±1℃ 试验重复3次
三.结果
1.中和剂I鉴定试验结果表明:第1、2组平均生长菌落数均为0cfu/ml,第3、4、5组三组间误差率分别为4.65%、8.05%、7.44%。
表1 中和剂I鉴定试验结果
组别 | 每次试验生长菌落数(cfu/ml) | 平均生长菌落数(cfu/ml) | ||
1 | 2 | 3 | ||
12345 | 004.30×1074.00×1074.60×107 | 004.90×1074.50×1073.90×107 | 002.90×1073.30×1073.60×107 | 004.03×1073.93×1074.03×107 |
注:阴性对照均无菌生长。
2.中和剂II鉴定试验结果表明:第1、2组平均生长菌落数分别为5.78×103cfu/ml、1.39×104cfu/ml,第3、4、5组三组间误差率分别为5.13%、6.67%、4.44%。
表2 中和剂II鉴定试验结果
组别 | 每次试验生长菌落数(cfu/ml) | 平均生长菌落数(cfu/ml) | ||
1 | 2 | 3 | ||
12345 | 1.23×1043.10×1044.00×1073.60×1074.10×107 | 1.15×1032.55×1032.90×1072.80×1073.30×107 | 3.90×1038.10×1034.50×1074.20×1074.80×107 | 5.78×1031.39×1043.80×1073.53×1074.07×107 |
注:阴性对照均无菌生长。
3.20℃±1℃试验温度下,含总酸0.5584g/L的许多宝牌柑橘精华消毒液作用1分钟、2分钟、3分钟对铜绿假单胞细菌的杀灭对数值均>5.00。
表3 对试验菌的杀灭效果
试验菌 | 有效成分浓度(g/L) | 阳性对照组平均菌落数的对数值 | 作用不同时间(min)的平均杀灭对数值及其范围 | ||
1 | 2 | 3 | |||
铜绿假单胞细菌 | 0.5584 | 7.60 | >5.00 | >5.00 | >5.00 |
注:阴性对照均无菌生长。
四.结论
1.含0.3%硫代硫酸钠、0.5%卵磷脂、2%吐温-80的TSB和含0.0375%硫代硫酸钠、0.0625%卵磷脂、0.25%吐温-80的TSB能有效中止含总酸0.5584g/L和含总酸0.0698g/L(1∶10稀释液)消毒液的残留毒性,中和剂及中和产物对试验菌和培养基均无不良影响,故判其为该样品定量杀菌试验的中和剂。
2.20℃±1℃试验温度下,含总酸0.5584g/L的消毒液作用1分钟、2分钟、3分钟对铜绿假单胞细菌的杀灭对数值均>5.00。
第四部分:一年稳定性试验(微生物法)
一.器材
1.样品:许多宝牌柑橘精华消毒液(批号:040701)有效成分:含总酸0.6980g/L
2.试验菌:白色念珠菌(ATCC10231)第6代(军事医学科学院提供)
3.电热干燥培养箱(HG303-4A型)(南京实验仪器厂)
4.有机干扰物:3%牛血清白蛋白
5.中和剂:含0.3%硫代硫酸钠、0.5%卵磷脂、2%吐温-80的TSB
二.方法
1.检验依据:卫生部《消毒技术规范》2002年版2.2.3.3
2.保存条件:密闭完好原包装,置54℃存放14天
3.消毒剂浓度:含总酸0.5584g/L
4.检测环境:20℃±1℃ 试验重复3次
三.结果
该样品存放前对白色念珠菌作用5分钟杀灭对数值>4.00,54℃存放14天后对白色念珠菌作用5分钟杀灭对数值>4.00。
对试验菌的杀灭效果
保存温度及时间 | 阳性对照组平均菌落数的对数值 | 作用不同时间(min)的平均杀灭对数值及其范围 | ||
2.5 | 5 | 7.5 | ||
0天54℃14天 | 6.526.4 | 2.16(1.99~2.73)1.90(1.70~2.17) | >4.00>4.00 | >4.00>4.00 |
注:阴性对照均无菌生长。
四.结论
结果表明,该样品54℃存放14天后对白色念珠菌作用5分钟杀灭白色念珠菌仍>4.00,有效期为一年。
第五部分:两年稳定性测定
一.器材
1.样品:许多宝牌柑橘精华消毒液(批号:040701、040702、040703)
2.标准溶液:0.05262mol/L氢氧化钠标准溶液
3.试剂:酚酞(AR)
4.调温调湿箱(302A型)(上海实验仪器厂)
二.方法
1.检验依据:企业标准Q/320500JCKJ02-2004和《消毒技术规范》2002版 2.2.3.2.1
2.保存条件:密闭完好原包装,置37℃存放3个月
3.检验环境温度:21℃ 相对湿度:50%~55%
三结果
存放前,批号为040701、040702、040703样品总酸含量分别为0.6980g/L、0.7016g/L、0.7128g/L;37℃存放3个月总酸含量分别为0.6980g/L、0.7016g/L、0.7128g/L,其总酸下降率为0%。
稳定性测定结果
样品批次 | 序号 | 保存前有效成分含量(g/L) | 各批含量平均值(g/L) | 保存后有效成分含量(g/L) | 各批次平均值(g/L) | 下降率(%) |
040701040702040703 | 1-11-22-12-23-13-2 | 0.69620.69980.69980.70350.71460.7109 | 0.69800.70160.7128 | 0.69620.69980.69980.70350.71460.7109 | 0.69800.70160.7128 | 000 |
注:样品经37℃存放3个月后颜色稍微加深,无悬浮物产生。
四.结论
结果表明,批号为040701、040702、040703的样品37℃存放3个月后总酸含量下降率为0%,有效期为两年。
第六部分:两年稳定性试验(微生物法)
一.器材
1.样品:许多宝牌柑橘精华消毒液(批号:040701)有效成分:含总酸0.6980g/L
2.试验菌:白色念珠菌(ATCC10231)第6代(中国普通微生物菌种保藏管理中心提供)
3.调温调湿箱(302A型)(上海实验仪器厂)
4.有机干扰物:3%牛血清白蛋白
5.中和剂:含0.3%硫代硫酸钠、0.5%卵磷脂、2%吐温-80的TSB
二.方法
1.检验依据:卫生部《消毒技术规范》2002版2.2.3.3
2.保存条件:密闭完好原包装,置37℃存放3个月
3.消毒剂浓度:含总酸0.5584g/L
4.检测环境:20℃±1℃ 试验重复3次
三.结果
该样品存放前对白色念珠菌作用5分钟杀灭对数值>4.00,37℃存放3个月后对白色念珠菌作用5分钟杀灭对数值>4.00。
对试验菌的杀灭效果
保存温度及时间 | 阳性对照组平 | 作用不同时间(min)的平均杀灭对数值及其范围 |
均菌落数的对数值及范围 | 2.5 | 5 | 7.5 | |
0天37℃3个月 | 6.52(6.49~6.57)6.43(6.40~6.46) | 2.16(1.99~2.73)1.60(1.55~1.66) | >4.00>4.00 | >4.00>4.00 |
注:阴性对照均无菌生长。
四.结论
结果表明,该样品37℃存放3个月后对白色念珠菌作用5分钟杀灭白色念珠菌仍>4.00,有效期为两年。
第七部分:消毒剂对皮肤消毒现场试验
一.器材
1.样品:许多宝牌柑橘精华消毒液(批号:040701)有效成分:含总酸0.6980g/L
2.中和剂采样液:含0.3%硫代硫酸钠、0.5%卵磷脂、2%吐温-80的TSB
3.灭菌棉签
4.规格板:5cm×5cm
二.方法
1.检验依据:参照《消毒技术规范》2002年版 2.1.2.8
2.消毒部位:上臂内侧中段皮肤 消毒方式:涂檫
3.消毒剂浓度:含总酸0.6980g/L 消毒时间:5min
4.检测环境:25℃~28℃ 相对湿度:50%~60%
三.结果
25℃~28℃试验温度,50%~60%相对湿度条件下,样品原液对上臂内侧中段皮肤擦拭消毒5分钟,对皮肤上自然菌的杀灭对数值均>1.00。
皮肤消毒现场试验结果
样本号 | 对照组生长菌落数(cfu/cm2) | 试验组生长菌落数(cfu/cm2) | 杀灭对数值 |
12345 | 15074012601033 | 11301 | >1.00>1.00>1.00>1.00>1.00 |
6789101112131415161718192021222324252627282930 | 27810132142620161190110150344483946941521241502315422201210613114 | 01112434119231131315111311 | >1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00 |
平均 | 200 | 3 | >1.00 |
注:阴性对照均无菌生长。
四.结论
25℃~28℃试验温度,50%~60%相对湿度条件下,样品原液对上臂内侧中段皮肤擦拭消毒5分钟,对皮肤上自然菌的杀灭对数值均>1.00。
第八部分:物体表面消毒现场试验
一.器材
1.样品:许多宝牌柑橘精华消毒液(批号:040701)有效成分:含总酸0.6980g/L
2.中和剂采样液:含0.3%硫代硫酸钠、0.5%卵磷脂、2%吐温-80的TSB
3.灭菌棉签
4.规格板:5cm×5cm
二.方法
1.检验依据:《消毒技术规范》2002年版 2.1.2.10
2.消毒部位:木质油漆表面 消毒方式:涂檫
3.消毒剂浓度:含总酸0.6980g/L 消毒时间:2min
4.检测环境:23℃相对湿度:55%~60%
三.结果
试验温度23℃,55%~60%相对湿度条件下,含总酸0.6980g/L的许多宝牌柑橘精华消毒液对木质油漆表面擦拭消毒2分钟,对其表面自然菌的平均杀灭对数值>1.00。
对物体表面消毒现场试验结果
样本号 | 对照组生长菌落数(cfu/cm2) | 试验组生长菌落数(cfu/cm2) | 杀灭对数值 |
123456789101112131415161718192021222324252627 | 14915161320151311151917141416222213171925202320181315 | 100000000000000000000000000 | >1.000.95>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00>1.00 |
282930 | 172014 | 000 | >1.00>1.00>1.00 |
平均 | 17 | 1 | >1.00 |
注:阴性对照均无菌生长。
四.结论
结果表明,试验温度23℃,55%~60%相对湿度条件下,含总酸0.6980g/L的许多宝牌柑橘精华消毒液对木质油漆表面擦拭消毒2分钟,对其表面自然菌的平均杀灭对数值>1.00。
第九部分:小鼠急性经口毒性试验
一.材料和动物
1.受试样品:
名称:许多宝牌柑橘精华消毒液 批号:040703 剂型:液体
颜色:无色 保存条件:干燥通风
直接取样品原液配置成受试物。
2.动物:健康ICR小鼠20只,雌雄各半,体重18~22g,上海斯莱克实验动物有限责任公司提供,二级,合格证号:SCXK(沪)2003-0003号。
3.试验条件:试验动物环境设施合格证号:SYXK(苏)2002-0004号。饲料来源及证号:江浦振兴试验动物饲料厂,苏动(饲)字第95001号。主要仪器:电子秤(TCS-100)、电子天平(L p123)。
二.方法
1.检测依据:卫生部(2002.11)《消毒技术规范》,第二部分,消毒产品检验技术规范,2.3.1急性经口毒性试验。
2.测定方法:一次最大限度试验,设计剂量为5000mg/kg b.wt。称取样品5000mg加双蒸水至20ml配制成受试物。小鼠禁食过夜后,受试物经口一次灌胃给予,灌胃容量为20ml/kg b.wt。灌胃后4h给食,自由摄食。观察期14d。
三.试验结果:
雌雄小鼠灌胃后未见明显中毒表现,观察期内无动物死亡。动物死亡情况见下表。
许多宝牌柑橘精华消毒液小鼠急性经口毒性试验结果
性别 | 剂量(mg/kg) | 动物数(只) | 死亡动物数(只) | 死亡率(%) |
♀♂ | 50005000 | 1010 | 00 | 00 |
四.结论:
许多宝牌柑橘精华消毒液对雌雄小鼠急性经口LD50值均大于5000mg/kgb.wt,属实际无毒级。
第十部分:小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验
一.材料和动物:
1.受试物:样品及批号同小鼠急性经口毒性试验。取样品原液用双蒸水配置成以下表内剂量。
2.阳性对照物:环磷酰胺,上海华联制药有限公司提供,以双蒸水配制成2mg/ml浓度备用。
3.动物:健康ICR小鼠50只,上海斯莱克实验动物有限责任公司提供,二级,体重25~30g,雌雄各半,合格证号:SCXK(沪)2003-0003号。
4.试验条件:饲料来源及证号:江浦振兴试验动物饲料厂,苏动(饲)字第95001号;动物环境设施合格证号:SYXK(苏)2002-0004号;环境温度:22±2℃;相对湿度:40-70%;主要仪器:电子秤(TCS-100)、电子天平(L p123)。
二.方法
1.检验依据:卫生部(2002年版)《消毒技术规范》第二部分2.3.8小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验。
2.试验方法:阳性对照组、阴性对照组(双蒸水)和各剂量组均用30h两次灌胃法(间隔24h),第2次灌胃后6h杀鼠。取股骨骨髓悬于小牛血清中直接涂片、固定、染色,每鼠镜验嗜多染红细胞1000个,计数具有微核的细胞,观察200个嗜多染红细胞并同时计数所见正染红细胞,计算嗜多染红细胞和正染红细胞比率(PCE/NCE)用卡方检验进行统计分析。
三.实验结果:染毒后各组动物未见明显中毒症状。结果见下表。
许多宝牌柑橘精华消毒液对小鼠骨髓细胞微核试验结果
分组 | 剂量(mg/kg) | 动物数雌/雄(只) | 受检PCE数雌/雄 | 含微核PCE数雌/雄 | 微核细胞率(‰)雌/雄 | PCE/NCE雌/雄 |
试验组 | 100025005000 | 5/55/55/5 | 5000/50005000/50005000/5000 | 10/911/109/8 | 2.0±0.7/1.8±0.42.2±0.8/2.0±0.71.8±0.8/1.6±0.5 | 0.86±0.14/0.88±0.150.89±0.14/0.91±0.210.89±0.17/0.88±0.17 |
阴性对照 | 20ml/kg | 5/5 | 5000/5000 | 9/9 | 1.8±0.4/1.8±0.8 | 1.06±0.22/1.08±0.20 |
阳性对照 | 40ml/kg | 5/5 | 5000/5000 | 153/162 | 30.6±9.2**/32.4±8.6** | 0.65±0.14/0.67±0.11 |
注:微核细胞率(‰)和PCE/NCE均以小鼠为单位统计,表示为均值±标准差。
**:与阴性对照组相比,P<0.01
四.结论:
剂量达5000mg/kg b.wt,未检出许多宝牌柑橘精华消毒液对雌雄小鼠骨髓嗜多染红细胞的致微核作用。
第十一部分:大鼠急性吸入毒性试验
一.材料和动物:
1.受试物:样品及批号同小鼠急性经口毒性试验。直接取样品原液配置成受试物。
2.动物:健康SD大鼠20只,雌雄各半,体重180~220g,上海斯莱克实验动物有限责任公司提供,二级,合格证号:SCXK(沪)2003-0003号。
3.试验条件:饲料来源及证号:江浦振兴试验动物饲料厂,苏动(饲)字第95001号;动物环境设施合格证号:SYXK(苏)2002-0004号;环境温度:22±2℃;相对湿度:40-70%;主要仪器:电子秤(TCS-100)、电子天平(L p123)。
二.方法
1.检验依据:卫生部(2002.11)《消毒技术规范》第二部分,消毒产品检验技术规范,2.3.2急性吸入毒性试验。
2.测定方法:静式染毒,按一次最大限度试验法,设计剂量为10000mg/m3。染毒柜空间为30L/h/鼠,称取1000mg样品放入雾化器中,直接喷入染毒柜中染毒,染毒时间2h,2h后取出动物,自由摄食。观察期14d。
三.试验结果:
雌雄大鼠染毒后未见明显中毒表现,观察期内无动物死亡。动物死亡情况见下表。
许多宝牌柑橘精华消毒液大鼠急性吸入毒性试验结果
性别 | 剂量(mg/m3) | 动物数(只) | 死亡动物数(只) | 死亡率(%) |
♀♂ | 1000010000 | 1010 | 00 | 00 |
四.结论:
许多宝牌柑橘精华消毒液对雌雄大鼠急性经呼吸道LC50值均大于10000mg/m3 b.wt,属实际无毒级。
第十二部分:大鼠急性经口毒性试验
一.材料和动物:
1.受试物:样品及批号同小鼠急性经口毒性试验。直接取样品原液配置成受试物。
2.动物:健康SD大鼠20只,雌雄各半,体重180~220g,上海斯莱克实验动物有限责任公司提供,二级,合格证号:SCXK(沪)2003-0003号。
3.试验条件:饲料来源及证号:江浦振兴试验动物饲料厂,苏动(饲)字第95001号;动物环境设施合格证号:SYXK(苏)2002-0004号;环境温度:22±2℃;相对湿度:40-70%;主要仪器:电子秤(TCS-100)、电子天平(L p123)。
二.方法
1.检验依据:卫生部(2002.11)《消毒技术规范》第二部分,消毒产品检验技术规范,2.3.1急性经口毒性试验。
2.测定方法:一次最大限度试验,设计剂量为5000mg/kg b.wt。称取样品15000mg加双蒸水至30ml配制成受试物。大鼠禁食过夜后,受试物经口一次灌胃给予,灌胃容量为10ml/kg b.wt。灌胃后4h给食,自由摄食。观察期14d。
三.试验结果:
雌雄大鼠灌胃后未见明显中毒表现,观察期内无动物死亡。动物死亡情况见下表。
许多宝牌柑橘精华消毒液大鼠急性经口毒性试验结果
性别 | 剂量(mg/kg) | 动物数(只) | 死亡动物数(只) | 死亡率(%) |
♀♂ | 50005000 | 1010 | 00 | 00 |
四.结论:
许多宝牌柑橘精华消毒液对雌雄大鼠急性经口LD50值均大于5000mg/kgb.wt,属实际无毒级。
第十三部分:一次完整皮肤刺激试验
一.材料和动物:
1.受试物:样品及批号同小鼠急性经口毒性试验,取样品原液为受试物。
2.动物:健康无皮疾新西兰白兔4只,一级,金陵种兔场提供,合格证号:SCXK(苏)2002-0025号,雌性2只,雄性2只。
3.试验条件:饲料来源及证号:江浦振兴试验动物饲料厂,苏动(饲)字第95001号;动物环境设施合格证号:SYXK(苏)2002-0004号;环境温度:22±2℃;相对湿度:40-70%。
二.方法
1.检验依据:卫生部(2002年版)《消毒技术规范》第二部分2.3.3皮肤刺激试验。
2.试验方法:动物试验前24h脊柱两侧剪毛备皮各约3cm×3cm,次日将受试物0.5ml滴于2.5em×2.5cm大小的2层纱布上并敷贴在一侧去毛区皮肤上,以无刺激胶布固定,另一侧用双蒸水作对照,敷用4小时后以温水洗去残余受试物,于1h、24h、48h后观察、记录皮肤反应。
三.试验结果:
试验中未见红斑、水肿刺激反应。试验结果见下表。
许多宝牌柑橘精华消毒液对家兔皮肤一次刺激反应评分
动性 | 体重 | 1h | 24h | 48h |
物别编号 | (kg) | 样品 | 对照 | 样品 | 对照 | 样品 | 对照 | ||||||||||||
红斑 | 水肿 | 总分 | 红斑 | 水肿 | 总分 | 红斑 | 水肿 | 总分 | 红斑 | 水肿 | 总分 | 红斑 | 水肿 | 总分 | 红斑 | 水肿 | 总分 | ||
1♀2♂3♀4♂ | 2.32.52.22.5 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 |
总积分均值 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
四.结论:许多宝牌柑橘精华消毒液对家兔一次完整皮肤刺激试验皮肤刺激指数为0,属无刺激性。
第十四部分:急性眼刺激试验
一.材料和动物:
1.受试物:样品及批号同小鼠急性经口毒性试验,取样品原液为受试物。
2.动物:健康无眼疾新西兰白兔3只,一级,金陵种兔场提供,合格证号:SCXK(苏)2002-0025号,体重2.3-2.5kg,雌性1只,雄性2只。
3.试验条件:饲料来源及证号:江浦振兴试验动物饲料厂,苏动(饲)字第95001号;动物环境设施合格证号:SYXK(苏)2002-0004号;环境温度:22±2℃;相对湿度:40-70%。
二.方法
1.检验依据:卫生部(2002年版)《消毒技术规范》第二部分2.3.4急性眼刺激试验。
2.试验方法:取受试物0.1ml直接滴入家兔一侧眼结膜囊内,被动闭合眼睑4s,30s后用生理盐水冲洗,另一眼滴以生理盐水作为对照。于滴眼后1h、24h、48h、72h观察记录眼刺激反应。
三.试验结果:
动物滴眼后,见结膜轻度充血反应,未见其他明显中毒反应。结果见下表。
许多宝牌柑橘精华消毒液对家兔急性眼刺激试验结果
动物编号 | 损害表现 | 眼睛刺激反应积分 | |||||||||
1h | 24h | 48h | 72h | 平均评分 | |||||||
样品 | 对照 | 样品 | 对照 | 样品 | 对照 | 样品 | 对照 | 样品 | 对照 | ||
1 | 结膜充血结膜水肿 | 01 | 00 | 00 | 00 | 00 | 00 | 00 | 00 | 00 | 00 |
角膜损普虹膜损害 | 00 | 00 | 00 | 00 | 00 | 00 | 00 | 00 | 00 | 00 | |
2 | 结膜充血结膜水肿角膜损害虹膜损害 | 0100 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 |
3 | 结膜充血结膜水肿角膜损害虹膜损害 | 0100 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 | 0000 |
#:平均评分即每只动物的24h、48h和72h评分之和除以观察数3。
四.结论:许多宝牌柑橘精华消毒液对家兔急性眼刺激强度属无刺激性。
第十五部分:亚急性经口毒性试验
一.材料和动物:
1.受试物:样品及批号同小鼠急性经口毒性试验,直接取样品原液配置成受试物。
2.动物:6-8周龄健康SD大鼠40只,雌雄各半。上海斯莱克实验动物有限责任公司提供,二级,合格证号:SCXK(沪)2003-0003号。
3.试验条件:试验动物环境设施合格证号:SYXK(苏)2002-0004号。饲料来源及证号:江浦振兴试验动物饲料厂,苏动(饲)字第95001号。雌雄大鼠进室适应4日选取体重为150g-170g的动物分性别按体重随机分入各组,每组10只,雌雄各半,分组分性别盒养,自由进水、进食。
二.方法
1.检验依据:卫生部(2002版)《消毒技术规范》第二部分2.3.7亚急性经口毒性试验
2.剂量组选择与试验方法:大鼠急性经口LD50值大于5000mg/kg b.wt,高剂量采用1000mg/kg b.wt,设0(双蒸水对照)、60、250和1000mg/kg b.wt4个剂量组,分别称取样品0、300、1250、5000mg加入双蒸水至50ml配置成为各剂量组受试物,采用灌胃方式经口染毒,每次灌胃容量为10ml/kg b.wt,连续灌胃28天。
3.观察和测试指标
临床检查:每天观察动物表现,每周称量体重一次。实验结束时,经眼眶静脉丛取血后处死,解剖观察并取脏器。
血液学检查:包括血红蛋白含量(HGB)、红细胞数(RBC)、白细胞数(WBC)及其分类计数:淋巴细胞(L)、中性(N)、嗜酸(E)、嗜碱(B)、中性颗粒细胞和单核细胞(M)。
血液生化检查:天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、尿素氨(BUN)、肌酐(CRE)、血清总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)、总胆固醇(CHO)。
脏器重量:称量肝、肾重量,并计算其脏器重量系数(脏器重/体重×100%)。
大体解剖和组织病理学检查:处死所有动物后进行全面的肉眼尸检,并将肝、肾、胃、肠、脾、胸腺、睾丸、卵巢固定保存。进行高剂量组和阴性对照组动物的以上组织病理学检查。如发现病变,对中、低剂量组动物相应的器官进行组织病理学检查。
4.统计方法:
各项测定指标的测定数据均以单因素方差分析进行统计,使用SPSS软件。
三.试验结果:
1.一般观察:各剂量组动物未见异常。
2.许多宝牌柑橘精华消毒液对大鼠生长发育的影响见表1:
-表1许多宝牌柑橘精华消毒液亚急性毒性试验大鼠体重变化(g,
x±s)
性别 | 组别 | 动物数(只) | 染毒前 | 染毒后 | |||
1周 | 2周 | 3周 | 4周 | ||||
雌性 | 高剂量组 | 5 | 168±7 | 199±5 | 223±5 | 252±4 | 261±6 |
中剂量组 | 5 | 164±8 | 202±5 | 224±12 | 244±12 | 253±12 | |
低剂量组 | 5 | 166±6 | 203±9 | 225±10 | 247±14 | 256±12 | |
对照组 | 5 | 164±8 | 195±4 | 224±2 | 244±6 | 257±4 | |
雄性 | 高剂量组 | 5 | 165±5 | 239±10 | 298±15 | 360±21 | 382±23 |
中剂量组 | 5 | 163±7 | 237±17 | 296±19 | 360±22 | 378±22 | |
低剂量组 | 5 | 168±5 | 239±8 | 301±12 | 357±12 | 383±20 | |
对照组 | 5 | 161±8 | 252±14 | 297±12 | 367±11 | 387±11 |
由表1,各剂量组雌雄大鼠多个观察点的体重与对照组值相比,均无显著性差异(p>0.05)。
3.许多宝牌柑橘精华消毒液对大鼠血液学指标的影响见表2:
表2 许多宝牌柑橘精华消毒液亚急性毒性试验大鼠血液学变化(
x±s)
性别 | 组别 | 动物(只) | WBC(109/L) | RBC(1012/L) | HGB(109/L) | L(%) | N(%) | E(%) | B(%) | M(%) |
雌性 | 高剂量组 | 5 | 9.9±0.6 | 6.8±0.2 | 14±0 | 71±6 | 27±6 | 2±0 | 0.1±0.2 | 0±0 |
中剂量组 | 5 | 9.8±1.9 | 7.2±0.4 | 14±1 | 76±6 | 22±6 | 1±1 | 0.1±0.2 | 0±0 | |
低剂量组 | 5 | 7.9±2.2 | 7.0±0.4 | 15±1 | 73±4 | 25±4 | 2±0 | 0.2±0.1 | 0±0 | |
对照组 | 5 | 8.9±1.2 | 7.1±0.5 | 15±1 | 69±7 | 29±7 | 2±0 | 0.1±0.1 | 0±0 | |
雄性 | 高剂量组 | 5 | 10.5±1.7 | 6.7±0.4 | 14±1 | 71±5 | 27±5 | 1±0 | 0.1±0.1 | 0±0 |
中剂量组 | 5 | 10.4±0.8 | 7.2±0.3 | 15±0 | 73±4 | 25±4 | 1±0 | 0.1±0.1 | 0±0 | |
低剂量组 | 5 | 10.9±0.9 | 7.2±0.2 | 14±1 | 72±3 | 27±3 | 1±0 | 0.2±0.1 | 0±0 | |
对照组 | 5 | 10.8±2.6 | 6.9±0.2 | 15±1 | 68±6 | 30±5 | 2±0 | 0.1±0.1 | 0±0 |
由表2,各剂量组雌雄大鼠的红细胞计数、白细胞计数及分类、血红蛋白含量均在正常波动范围内。
4.许多宝牌柑橘精华消毒液亚急性毒性试验大鼠血液生化学指标的影响见表3:
表3 许多宝牌柑橘精华消毒液亚急性毒性试验大鼠血液生化学指标
性别 | 组别 | 动物(只) | ALTU/L | ASTU/L | TPmg/dl | ALBmg/dl | BUNmmol/L | CHOmmol/L | CREmmol/L |
雌性 | 高剂量组 | 5 | 35±4 | 171±12 | 69±1 | 40±1 | 5.5±0.5 | 2.4±0.3 | 64±4 |
中剂量组 | 5 | 41±14 | 159±24 | 71±4 | 42±2 | 5.4±0.2 | 2.3±0.4 | 61±3 | |
低剂量组 | 5 | 34±2 | 149±6 | 69±2 | 41±1 | 4.6±0.6 | 1.4±0.2* | 60±1* | |
对照组 | 5 | 31±5 | 170±13 | 70±3 | 41±1 | 5.5±1.2 | 2.3±0.3 | 67±4 | |
雄性 | 高剂量组 | 5 | 39±3* | 169±13* | 62±2 | 37±1 | 4.3±0.3* | 1.1±0.1* | 54±1 |
中剂量组 | 5 | 43±5 | 167±16* | 64±2 | 38±1 | 5.0±0.8 | 1.1±0.1* | 56±3 | |
低剂量组 | 5 | 36±5* | 153±15 | 63±1 | 38±0 | 4.4±0.3* | 1.1±0.2* | 54±1 | |
对照组 | 5 | 49±2 | 131±10 | 65±2 | 38±1 | 6.1±1.0 | 2.1±0.3 | 55±1 |
由表3,各剂量组雌雄大鼠的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素氮、肌酐、总蛋白、白蛋白及总胆固醇值虽有一些与对照组值相比有差异,但均在正常波动范围内。
5.许多宝牌柑橘精华消毒液亚急性毒性试验大鼠脏器重量及脏器重量系数见表4:
表4许多宝牌柑橘精华消毒液亚急性毒性试验大鼠脏器重量及脏器重量
系数
性别 | 组别 | 动物(只) | 体重(g) | 肝重(g) | 肝体比(%) | 肾重(g) | 肾体比(%) |
雌性 | 高剂量组 | 5 | 261±6 | 7.6±0.6 | 2.9±0.2 | 1.9±0.1 | 0.71±0.05 |
中剂量组 | 5 | 253±12 | 8.2±0.6 | 3.2±0.2 | 2.0±0.2 | 0.78±0.05 | |
低剂量组 | 5 | 256±12 | 8.0±0.6 | 3.1±0.2 | 1.9±0.1 | 0.75±0.03 | |
对照组 | 5 | 257±4 | 7.8±0.5 | 3.0±0.2 | 1.8±0.1 | 0.71±0.04 | |
雄性 | 高剂量组 | 5 | 382±23 | 11.5±0.7 | 3.0±0.1 | 2.8±0.1 | 0.73±0.05 |
中剂量组 | 5 | 378±22 | 11.3±1.2 | 3.0±0.3 | 3.1±0.3 | 0.82±0.07 | |
低剂量组 | 5 | 383±20 | 11.1±1.2 | 2.9±0.2 | 2.9±0.1 | 0.75±0.02 | |
对照组 | 5 | 387±11 | 12.0±0.6 | 3.1±0.1 | 2.9±0.4 | 0.75±0.10 |
由表4可见,各剂量组肝体比、肾体比与对照组相比均无显著性差异。
6.大体解剖和组织病理学检查:大体解剖未见异常。
表5 许多宝牌柑橘精华消毒液对大鼠组织病理学影响 单位:只
组织 | 形态改变 | 对照组 | 许多宝牌柑橘精华消毒液 | ||
雌6 | 雄6 | 雌6 | 雄6 | ||
肝 | 肝细胞水样变性炎细胞轻度充血 | 001 | 210 | 022 | 000 |
肾 | 少量炎细胞少量钙盐沉积间质轻度充血小管水样变性 | 0011 | 1000 | 1100 | 0000 |
胃 | 炎细胞轻度充血 | 00 | 01 | 00 | 00 |
肠 | 肠腺轻度增生 | 1 | 0 | 1 | 0 |
脾 | 轻度淤血 | 0 | 0 | 1 | 1 |
卵巢 | 轻度充血颗粒细胞空泡变性 | 00 | 11 | ||
睾丸 | 精子减少 | 0 | 0 |
由表5可见,肝、肾、脾、胃、肠、卵巢、睾丸组织切片未见与样品明显有关的不可逆的组织病理改变。
四.结论
许多宝牌柑橘精华消毒液以60mg/kg b.wt、250mg/kg b.wt和1000mg/kg b.wt的剂量灌胃给予大鼠28天,结果显示:动物活动、生长正常;各剂量组体重、脏体比与对照组比较无显著性差异(p>0.05);雌雄各剂量组的血液学检测值、生化指标检测值均在正常波动范围内;未显示不良的组织病理学改变。试验结果表明,未见许多宝牌柑橘精华消毒液明显毒性。最大未观察到有害作用剂量(NOAEL)值为1000mg/kg b.wt。
检验依据:卫生部《消毒技术规范》(2002版)
检验结论:
1.小鼠急性经口毒性试验:样品对雌雄小鼠急性经口LD50值均大于5000mg/kg b.wt,属实际无毒级。
2.小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验:剂量达5000mg/kg b.wt,未检出样品对雌雄小鼠骨髓嗜多染红细胞的致微核作用。
3.大鼠急性吸入毒性试验:样品对雌雄大鼠急性经呼吸道LC50值均大于10000mg/kg b.wt,属实际无毒级。
4.大鼠急性经口毒性试验:样品对雌雄大鼠急性经口LD50值均大于5000mg/kg b.wt,属实际无毒级。
5.一次完整皮肤刺激试验:样品原液对家兔一次完整皮肤刺激试验皮肤刺激指数为0,属无刺激性。
6.急性眼刺激试验:家兔一次眼刺激强度属无刺激性。
7.亚急性经口毒性试验:样品以60mg/kg b.wt、250mg/kg b.wt和1000mg/kg b.wt的剂量灌胃给予大鼠28天,试验结果表明未见明显毒性。许多宝牌柑橘精华消毒液最大未观察到有害作用剂量(NOAEL)值为1000mg/kgb.wt。
第十六部分:阴道粘膜刺激试验
一.材料和动物:
1.受试物:样品为液体,直接取原液为受试物。
2.动物:健康雌性家兔6只,一级,金陵种兔场提供,合格证号:SCXK(苏)2002-0025号,体重2.0-2.5kg。
3.试验条件:饲料来源及证号:江浦振兴试验动物饲料厂,苏动(饲)字第95001号;实验动物环境设施合格证号:SYXK(苏)2002-0004号;环境温度:22±2℃;相对湿度:50-70%。
二.方法
1.检验依据:卫生部(2002.11)《消毒技术规范》,第二部分,消毒产品检验技术规范,2.3.5阴道粘膜刺激试验。
2.试验方法:动物分入染毒组、对照组,每组3只。仰面固定动物,暴露会阴和阴道口,将2ml的注射器与导尿管相连并注满受试物,导尿管以受试物湿润后轻柔地插入阴道4-5cm,缓慢注入受试液2ml。抽出导尿管,完成染毒。对照组以生理盐水代替受试物同样处理。24h后处死动物,取出局部阴道组织,观察有无充血、水肿等现象。进行病理组织学检查。
三.实验结果
实验组和对照组均有个别动物出现轻度充血、水肿现象。
受试物对动物阴道粘膜刺激反应评分
组别 | 动物编号 | 刺激反应评分 | ||||||
上皮组织 | 白细胞浸润 | 血管充血 | 水肿 | 反应评分 | 平均积分 | 刺激指数 | ||
染毒组对照组 | 1(内)1(中)1(外)2(内)2(中)2(外)3(内)3(中)3(外) | 003000000 | 000000000 | 100000003 | 200000002 | 300000005 | 1.22 | |
1(内)1(中)1(外)2(内)2(中)2(外)3(内)3(中)3(外) | 000000330 | 000000000 | 000000000 | 000000111 | 000000441 | 1 | 0.22 |
四.结论
受试物对家兔阴道粘膜刺激指数为0.22,属无刺激性。
毒理学检验结论:
阴道粘膜刺激试验:受试物对家兔的阴道粘膜刺激指数为0.22,属无刺激性。
Claims (2)
1.一种柑橘精华的消毒杀菌新用途。
2.根据权利要求1所述的柑橘精华,其特征在于采用下列制备方法:
(1)柑橘水果,用水洗净,去除水份,用压磨机压碎成乳剂;
(2)用离心干燥设备把乳剂干燥至原重量的八分之一;
(3)在浓缩乳剂中加入30%重量的甘油,混合,静放72小时,随机摇动10分钟;
(4)用120目离心过滤浓缩乳剂,除去滤渣;
(5)在过滤后的清洁溶液中加入足够的乳酸,调节PH值至2.2-3.2。
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