CN1887894A - 大黄苷或大黄苷元提取方法及其应用 - Google Patents

Abstract

大黄苷提取方法，(1)大黄药材粉碎，加乙醇水溶液浸泡、回流提取，提取液滤过、回收乙醇得浸膏或者稠膏；(2)浸膏过色谱柱，用乙醇水溶液洗脱去杂，洗脱液回收乙醇，浓缩至干得大黄苷；或者，稠膏过硅胶层析柱，用三氯甲烷与甲醇混合液梯度洗脱，洗脱液回收溶剂至干，得大黄苷。大黄苷元提取方法，(1)同从大黄中提取大黄苷的方法步骤(1)；(2)浸膏溶于无机酸水溶液水解，水解液滤过备用；(3)水解液过聚酰胺层析柱，用乙醇洗脱除去杂，洗脱液减压回收乙醇，浓缩至干，得大黄苷元；或者，水解液浓缩成稠膏，过硅胶层析柱，用三氯甲烷与甲醇混合液梯度洗脱，洗脱液减压回收溶剂至干，得大黄苷元。大黄苷(元)可用于制备抗脑缺血损伤药物。

Description

大黄苷或大黄苷元提取方法及其应用

技术领域

本发明属于中药材大黄应用技术领域，特别涉及一种从大黄中提取大黄苷或大黄苷元的方法及大黄苷或大黄苷元在制备抗脑缺血损伤药物方面的应用。

背景技术

大黄为蓼科植物掌叶大黄、唐古特大黄及药用大黄的干燥根及根茎，是中医学常用、有效的药物之一。大黄异名黄良、火参、肤如、将军、锦文黄、川军、马蹄大黄、君支、南大黄、北大黄；性味苦寒，归脾、胃、大肠、肝、心包经；有泻热通便、凉血解毒、逐瘀通经功效，用于治疗实热便秘、积滞腹痛、湿热黄疸、目赤、咽肿、肠痈腹痛、跌打损伤、瘀血经闭等；其化学成分包括蒽醌类、双蒽酮类、苯丁酮苷类、芪苷类、萘苷类、鞣质及有关化合物，多糖化合物等。对大黄的应用基本上是采用传统的煎煮、炮制方法，影响大黄中有效成分含量的因素主要包括大黄部位、生长发育时期、干燥方法、煎煮方法、炮制工艺。对大黄中提取的有效成分进行定量、定性分析的常用方法为：用比色法和分光光度法测定有效成分含量；用薄层色谱、分离—反应—分离薄层色谱和薄层扫描技术对有效成分进行定性、定量分析；用HPLC方法测定大黄有效成分的含量。

大黄近年来引起医学界的广泛重视，在治疗中医急症方面，人们开展了较为深入的研究工作，其中以大黄药理作用探讨的进展尤为迅速，主要涉及生大黄、从大黄中提取的有效成分主要包括大黄苷(由大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚、芦荟大黄素、大黄二蒽酮、掌叶二蒽酮组成)和大黄苷元(大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚、芦荟大黄素、土大黄素、异大黄素、虫漆酸D组成)在以下方面的药理作用：(1)对中枢神经系统的作用：大黄具有解热镇痛作用；可影响体温调节中枢内cAMP水平，使感染性发热动物的体温下降；对家兔由于内毒素引起的发热具有明显的抑制作用，对发热时家兔血浆cAMP水平升高和cGMP降低均有抑制作用；具有抗炎作用。(2)对心血管系统的作用：大黄水煮酒沉剂静脉给药可使麻醉犬的血压降低、心肌耗氧量增加，提高心肌氧利用率；通过抑制心肌Na⁺-K⁺-ATP酶而实现强心作用；大黄醇提液能提高离体血管条的收缩力，增强部分血管条的自发节律活动；大黄醇提部位有明显降低总胆固醇的作用。(3)对泌尿系统作用：大黄蒽醌衍生物能促进家兔尿素和肌酐排出体外，对氮质血症有治疗作用；大黄水提物腹腔给药于100g左右体重大鼠，4-8h后血清中尿素氨浓度下降46-51％；口服大黄水提取物，可使大鼠和病人慢性肾衰病程进展延缓，对慢性肾衰的发展有预防作用，这可能与减轻残余肾间质—小管的损害有关；炮制大黄水提取物对肾功能不全患者可改善尿毒症症状。(4)对对消化系统作用：大黄对实验性溃疡有预防作用；能降低应激性溃疡大鼠血浆cAMP水平，使cAMP/cGMP比值恢复正常，对应激引起的植物神经功能紊乱有一定的调节作用；具有抑制胃蛋白酶的作用，防治溃疡病及其并发的出血之症。(5)对肝胆系统作用：对四氯化碳引起的肝损伤有预防和治疗作用；在体外对乙型肝炎具有抑制作用；大黄蒽酮衍生物对细胞色素C P-450具有还原作用，可影响肝脏药物的氧化代谢功能；大黄提取物对与急性胰腺炎发病直接相关的5种胰酶有明显抑制作用。

发明内容

本发明目的在于提供一种从大黄中提取大黄苷或大黄苷元的方法及大黄苷或大黄苷元在制备抗脑缺血损伤药物方面的应用。

为达上述目的，本发明采用如下技术方案：从大黄中提取大黄苷的方法，依次包括如下步骤：(1)取大黄药材粉碎，加乙醇水溶液常温浸泡、加热回流提取，提取液滤过、回收乙醇得浸膏或者稠膏；(2)浸膏通过色谱柱，用低浓度乙醇水溶液洗脱除去杂质，继用高浓度乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干得到大黄苷；或者，稠膏通过硅胶层析柱，用不同比例的三氯甲烷与甲醇混合液梯度洗脱，收集洗脱液，回收溶剂至干，得到大黄苷。

步骤(1)中加药材重量6-16倍的重量百分比浓度40％-80％的乙醇水溶液常温浸泡0.5-4小时，加热回流提取3-6次，每次0.5-3小时。

步骤(2)中，将浸膏通过聚酰胺层析柱，用4-12倍层析柱体积的重量百分比浓度10％-60％的乙醇水溶液冲洗层析柱，弃去洗脱液，层析柱继用重量百分比浓度70％-95％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干得到大黄苷；或者，将浸膏用3-8倍重量蒸馏水分散后通过活化处理后的大孔吸附树脂柱，用5-15倍树脂体积的蒸馏水冲洗树脂柱，弃去冲洗流出水液，继用重量百分比浓度30％-95％的乙醇水溶液洗脱树脂柱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干得到大黄苷；或者，将大黄提取稠膏，与2-10倍稠膏重量的硅胶拌匀后通过硅胶层析柱，用三氯甲烷与甲醇混合液梯度洗脱，三氯甲烷与甲醇体积比为40∶1～1∶10，收集洗脱液，减压回收溶剂，并浓缩至干，得到大黄苷。

从大黄中提取大黄苷元的方法，其特征在于，依次包括如下步骤：(1)取大黄药材粉碎，加乙醇水溶液常温浸泡、加热回流提取，提取液滤过、减压回收乙醇得浸膏；(2)浸膏溶于无机酸水溶液水解，水解液滤过备用；(3)水解液通过聚酰胺层析柱，用低浓度乙醇洗脱除去杂质，继用高浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干，得大黄苷元；或者，水解液浓缩成稠膏，通过硅胶层析柱，用不同比例的三氯甲烷与甲醇混合液梯度洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂至干，得大黄苷元。

步骤(1)中加药材重量6-16倍的重量百分比浓度40％-80％的乙醇水溶液常温浸泡0.5-4小时，加热回流提取3-6次，每次0.5-3小时。

步骤(2)中浸膏溶于5-20倍浸膏重量的重量百分比浓度5％-20％的无机酸水溶液，水浴加热水解0.5-1.5小时。

步骤(3)中，水解液通过聚酰胺层析柱，用4-12倍层析柱体积的重量百分比浓度10％-60％的乙醇水溶液冲洗层析柱，弃去洗脱液，层析柱继用重量百分比浓度70％-95％乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干，得大黄苷元；或者，水解液用3-8倍量蒸馏水分散后通过活化处理后的大孔吸附树脂柱，用5-15倍树脂体积的蒸馏水冲洗树脂柱，弃去冲洗流出水液，继用重量百分比浓度30％-95％的乙醇洗脱树脂柱，使吸附于其上的大黄苷元被完全洗脱为止，收集洗脱液，减压回收乙醇，并浓缩至干得到大黄苷元；或者，将水解液浓缩为稠膏，与2-10倍稠膏重量的硅胶拌匀后通过硅胶层析柱，用三氯甲烷与甲醇混合液梯度洗脱，三氯甲烷与甲醇体积比为40∶1～1∶10，收集洗脱液，减压回收溶剂，浓缩至干，得大黄苷元。

大黄苷或大黄苷元在制备抗脑缺血损伤药物方面的应用，其特征在于，以大黄苷或大黄苷元。

本发明以在国内广泛种植的大黄药材为原料，原料价廉易得；以有机溶剂(甲醇、乙醇)水溶液作为提取溶剂进行提取，原料成本低，提取效果好，且生产过程中无三废产生，环保效益好；提取并经无机酸(盐酸或者硫酸)水解后采用层析纯化，所得提取物中大黄苷、大黄苷元含量高，可达90-95％。

下面通过大黄苷、大黄苷元抗脑缺血损伤的动物实验研究证明大黄苷、大黄苷元的抗脑缺血损伤作用：

一般认为缺血后脑损伤主要涉及到自由基损伤、细胞内钙超载、炎性细胞因子参与反应等多个方面。本发明用大黄苷及大黄苷元对脑缺血模型大鼠进行研究，从应用大黄苷及大黄苷元后脑缺血大鼠的病理形态学改变、神经症状评分、脑含水量测定、自由及和细胞因子测定、钙离子含量测定方面对其抗脑缺血损伤的作用及其机制进行研究，发现大黄苷及大黄苷元对脑缺血损伤具有明显的拮抗作用，可以改善缺血后大鼠脑的病理形态学损伤，减轻脑缺血大鼠的神经症状，大黄苷及大黄苷元抗脑缺血损伤的作用与其拮抗自由基损伤、调节细胞因子紊乱、减轻钙超载等诸多途径有关。具体试验如下：

[材料与方法]

(1)实验材料：雄性SD大鼠，3～4月龄，140只，体重300±50g，由河南省实验动物中心提供(编号：2002LA-197，合格证号：410117号)；尼莫地平片剂(山东新华制药股份有限公司生产，20mg/片，批号0012079)；生大黄粉(由河南中医学院中药制剂教研室鉴定)；大黄水提取物、大黄苷、大黄苷元(均由河南中医学院药物分析学学科提供)。

(2)分组与处理：健康雄性SD大鼠140只按随机数字表法分为假手术组、模型组、尼莫地平组、大黄粉组、大黄水提取物组、大黄苷组、大黄苷元组，后3组又分别分为高、中、低3个剂量组。各组大鼠均于造模前5天开始灌胃，每日一次，连续用药5天，造模前2小时加灌1次。所有组大鼠均于术前12h禁食不禁水。造模后4h观察大鼠神经症状体征，参照神经症状8级评分标准记录分值、断头取材。灌胃药物均用生理盐水配制成混悬液，药物用量按照大鼠与成人体表面积等效剂量比计算，灌胃体积为：1ml/100g。具体用量为：尼莫地平片(10.8mg·kg^-1·d^-1)、生大黄粉(540mg·kg^-1·d^-1)、水提取物(43.74mg·kg^-1·d^-1、87.48mg·kg^-1·d^-1、174.96mg·kg^-1·d^-1)、大黄苷(43.74mg·kg^-1·d^-1、87.48mg·kg^-1·d^-1、174.96mg·kg^-1·d^-1)、大黄苷元(6.48mg·kg^-1·d^-1、12.96mg·kg^-1·d^-1、25.92mg·kg^-1·d^-1)，假手术组和模型组分别用同等体积的生理盐水灌胃。

(3)模型制备：采用改良的Longa法制备局灶性脑缺血模型(MCAO)。

(4)取材与样品制备：术后冰盘上迅速取出全脑，用冷生理盐水(4℃)冲洗3遍，除去积血，用滤纸吸去表面水份，去除嗅球、小脑和脑干。分离大脑半球，弃去右侧大脑半球，取左侧半球，从额极向后4mm处冠状切取脑组织3mm待做含水量测定；再向后切取约2mm迅速放入10％福尔马林固定(固定24h后更换福尔马林)，待做光镜标本，进行病理观察。

(5)观察指标：①神经症状评分。造模后6h观察大鼠神经症状体征，参照评分标准进行评分，记录分值；②脑组织含水量测定。切取的用于测定含水量的脑组织迅速用电子天平称取湿重(精确度为0.1mg)后放入干燥箱中干燥(100℃±2℃)，24h后称取干重。计算公式：脑组织含水量＝(脑湿重-脑干重)/脑湿重×100；③脑组织病理学观察。左侧脑组织用10％甲醛固定，常规脱水，包埋，切片、HE染色，光镜下观察神经细胞的病理损伤；根据脑缺血损伤的程度不同，每视野下正常神经元细胞存在的数目不同，每组每只大鼠分别观察10个视野，取10个视野的均数，计算每视野下正常神经元细胞个数(每视野参考面积306081，HE×200)。

(6)统计学处理：数据用SPSS 11.0统计分析软件处理。计量资料以( x)±标准差(s)表示，进行单因素方差分析。

[结果]

(1)神经症状评分：脑缺血损伤后大鼠神经症状评分增高(5.86±0.61)；大黄苷高(2.20±0.77)、中(4.43±1.71)、低(2.56±0.70)剂量均可降低神经症状评分；大黄苷元高(1.50±0.53)、中(2.74±1.71)、低(3.00±1.54)剂量均可降低神经症状评分。其中以大黄苷高剂量组(174.96mg·kg^-1·d^-1)和大黄苷元高剂量(25.92mg·kg^-1·d^-1)组降低尤为显著。

(2)脑组织含水量：脑缺血损伤后大鼠脑组织含水量增高(0.86±2.23)；大黄苷高(0.69±1.61)、中(0.74±1.47)、低(0.73±1.07)剂量均可降低脑组织含水量；大黄苷元高(0.65±2.50)、中(0.71±7.75)、低(0.72±6.09)剂量均可降低脑组织含水量。其中以大黄苷高剂量组(174.96mg·kg^-1·d^-1)和大黄苷元高剂量(25.92mg·kg^-1·d^-1)组降低尤为显著。

(3)脑组织病理学观察：脑缺血大鼠脑组织病变区域间质疏松，明显水肿，水肿区域的神经细胞、神经胶质细胞、毛细血管及小血管的周围明显变宽，神经细胞变性明显，胞浆和胞核界限不清，核仁不明显，有的细胞核固缩，体积变小，深染；大黄苷组(中剂量)、大黄苷元(中剂量)组的病理损伤减轻；其中以大黄苷高剂量组和大黄苷元高剂量组病理损伤减轻最为明显。脑缺血损伤后脑组织正常神经元细胞数目显著减少(50.20±6.34)；大黄苷高(92.75±4.89)、中(73.13±7.08)、低(83.75±7.85)三个剂量组脑组织正常神经元细胞数目增加；大黄苷元高(103.88±6.64)、中(91.50±10.07)、低(84.13±7.34)三个剂量组脑组织正常神经元细胞数目增加；其中大黄苷高剂量组(174.96mg·kg^-1·d^-1)、大黄苷元高剂量组(25.92mg·kg^-1·d^-1)和中剂量组(12.96mg·kg^-1·d^-1)增加最为显著。

[结论]通过研究，我们发现从大黄中提取的大黄苷、大黄苷元可以改善脑缺血后的神经症状，减轻脑组织水肿，减轻脑缺血后脑组织病理损伤，对缺血性脑损伤具有明显的保护作用，其中以大黄苷高剂量(174.96mg·kg^-1·d^-1)和大黄苷元高剂量(25.92mg·kg^-1·d^-1)对脑缺血损伤的保护作用尤为明显。

[意义]

本发明表明，大黄苷及大黄苷元对缺血性脑损伤具有明显的保护作用，可用于临床治疗缺血性脑血管疾病及血栓形成的相关性疾病。

具体实施方式

实施例1、从大黄中提取大黄苷的方法，取大黄药材，粉碎为粗粉，加药材重量6倍的重量百分比浓度60％的乙醇的水溶液常温浸泡3小时，加热回流提取4次，每次1.5小时，滤过，减压回收乙醇得浸膏或者稠膏。(2)浸膏通过聚酰胺层析柱，用20％乙醇水溶液洗脱除去杂质，继用80％乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干得到大黄苷。

实施例2、从大黄中提取大黄苷的方法，取大黄药材，粉碎为粗粉，加药材重量10倍的重量百分比浓度70％的乙醇的水溶液常温浸泡2小时，加热回流提取3次，每次2小时，滤过，减压回收乙醇得浸膏或者稠膏。(2)浸膏通过聚酰胺层析柱，用30％乙醇水溶液洗脱除去杂质，继用80％乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干得到大黄苷。

实施例3、从大黄中提取大黄苷的方法，(1)取大黄药材，粉碎为粗粉，加药材重量16倍的重量百分比浓度55％的乙醇的水溶液常温浸泡1小时，加热回流提取5次，每次1小时，滤过，减压回收乙醇得浸膏或者稠膏。(2)将浸膏用8倍量蒸馏水分散后通过处理后的大孔吸附树脂柱，用5倍树脂体积的蒸馏水冲洗树脂柱，弃去冲洗流出水液，继用重量百分比浓度80％的乙醇水溶液洗脱树脂柱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干得到大黄苷。

实施例4、从大黄中提取大黄苷元的方法，(1)取大黄药材，粉碎为粗粉，加药材重量12倍的重量百分比浓度65％的乙醇水溶液常温浸泡1.5小时，加热回流提取5次，每次1.5小时，滤过，减压回收乙醇得浸膏。(2)浸膏溶于5倍浸膏重量的重量百分比浓度20％的盐酸水溶液，水浴加热水解30分种，水解液滤过备用。(3)水解液通过聚酰胺层析柱，用40％乙醇洗脱除去杂质，继用95％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干，得大黄苷元。

实施例5、从大黄中提取大黄苷的方法，取大黄药材，粉碎为粗粉，加药材重量6倍的重量百分比浓度40％的乙醇的水溶液常温浸泡2小时，加热回流提取3次，每次2小时，滤过，减压回收乙醇得浸膏或者稠膏。(2)浸膏通过聚酰胺层析柱，用30％乙醇水溶液洗脱除去杂质，继用80％乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干得到大黄苷。

实施例6、从大黄中提取大黄苷的方法，(1)取大黄药材，粉碎为粗粉，加药材重量8倍的重量百分比浓度80％的乙醇的水溶液常温浸泡1小时，加热回流提取5次，每次1小时，滤过，减压回收乙醇得浸膏或者稠膏。(2)将浸膏用8倍量蒸馏水分散后通过处理后的大孔吸附树脂柱，用5倍树脂体积的蒸馏水冲洗树脂柱，弃去冲洗流出水液，继用重量百分比浓度80％的乙醇水溶液洗脱树脂柱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干得到大黄苷。

实施例7、大黄苷胶囊，制法：大黄苷提取物粉碎成细粉，加淀粉、滑石粉混合均匀，制成颗粒，干燥，装入胶囊壳，即得。规格：0.3g，组成：大黄苷0.15g、淀粉0.15g、滑石粉适量。每日服用量：一日3次、每次2粒。

实施例8、大黄苷元胶囊，制法：大黄苷元提取物粉碎成细粉，加淀粉、滑石粉混合均匀，制成颗粒，干燥，装入胶囊壳，即得。规格：0.18g，组成：大黄苷0.03g、淀粉0.17g、滑石粉适量。每日服用量：一日3次，每次1粒。

实施例9、大黄苷片，制法：大黄苷提取物粉碎成细粉，加淀粉、硬脂酸镁、滑石粉混合均匀，制成颗粒，压制成片，包薄膜衣即得。规格：0.3g，组成：大黄苷0.15g、淀粉0.12g、硬脂酸镁0.02g、滑石粉适量。每日服用量：一日3次，每次2片。

Claims (8)

1、从大黄中提取大黄苷的方法，其特征在于，依次包括如下步骤：(1)取大黄药材粉碎，加乙醇水溶液常温浸泡、加热回流提取，提取液滤过、回收乙醇得浸膏或者稠膏；(2)浸膏通过色谱柱，用低浓度乙醇水溶液洗脱除去杂质，继用高浓度乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干得到大黄苷；或者，稠膏通过硅胶层析柱，用不同比例的三氯甲烷与甲醇混合液梯度洗脱，收集洗脱液，回收溶剂至干，得到大黄苷。

2、如权利要求1所述的从大黄中提取大黄苷的方法，其特征在于，步骤(1)中加药材重量6-16倍的重量百分比浓度40％-80％的乙醇水溶液常温浸泡0.5-4小时，加热回流提取3-6次，每次0.5-3小时。

3、如权利要求1或2所述的从大黄中提取大黄苷的方法，其特征在于，步骤(2)中，将浸膏通过聚酰胺层析柱，用4-12倍层析柱体积的重量百分比浓度10％-60％的乙醇水溶液冲洗层析柱，弃去洗脱液，层析柱继用重量百分比浓度70％-95％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干得到大黄苷；或者，将浸膏用3-8倍重量蒸馏水分散后通过活化处理后的大孔吸附树脂柱，用5-15倍树脂体积的蒸馏水冲洗树脂柱，弃去冲洗流出水液，继用重量百分比浓度30％-95％的乙醇水溶液洗脱树脂柱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干得到大黄苷；或者，将大黄提取稠膏，与2-10倍稠膏重量的硅胶拌匀后通过硅胶层析柱，用三氯甲烷与甲醇混合液梯度洗脱，三氯甲烷与甲醇体积比为40∶1～1∶10，收集洗脱液，减压回收溶剂，并浓缩至干，得到大黄苷。

4、从大黄中提取大黄苷元的方法，其特征在于，依次包括如下步骤：(1)取大黄药材粉碎，加乙醇水溶液常温浸泡、加热回流提取，提取液滤过、减压回收乙醇得浸膏；(2)浸膏溶于无机酸水溶液水解，水解液滤过备用；(3)水解液通过聚酰胺层析柱，用低浓度乙醇洗脱除去杂质，继用高浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干，得大黄苷元；或者，水解液浓缩成稠膏，通过硅胶层析柱，用不同比例的三氯甲烷与甲醇混合液梯度洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂至干，得大黄苷元。

5、如权利要求4所述的从大黄中提取大黄苷元的方法，其特征在于，步骤(1)中加药材重量6-16倍的重量百分比浓度40％-80％的乙醇水溶液常温浸泡0.5-4小时，加热回流提取3-6次，每次0.5-3小时。

6、如权利要求4或5所述的从大黄中提取大黄苷元的方法，其特征在于，步骤(2)中浸膏溶于5-20倍浸膏重量的重量百分比浓度5％-20％的无机酸水溶液，水浴加热水解0.5-1.5小时。

7、如权利要求6所述的从大黄中提取大黄苷元的方法，其特征在于，步骤(3)中，水解液通过聚酰胺层析柱，用4-12倍层析柱体积的重量百分比浓度10％-60％的乙醇水溶液冲洗层析柱，弃去洗脱液，层析柱继用重量百分比浓度70％-95％乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干，得大黄苷元；或者，水解液用3-8倍量蒸馏水分散后通过活化处理后的大孔吸附树脂柱，用5-15倍树脂体积的蒸馏水冲洗树脂柱，弃去冲洗流出水液，继用重量百分比浓度30％-95％的乙醇洗脱树脂柱，使吸附于其上的大黄苷元被完全洗脱为止，收集洗脱液，减压回收乙醇，并浓缩至干得到大黄苷元；或者，将水解液浓缩为稠膏，与2-10倍稠膏重量的硅胶拌匀后通过硅胶层析柱，用三氯甲烷∶甲醇梯度洗脱，三氯甲烷与甲醇体积比为40∶1～1∶10，收集洗脱液，减压回收溶剂，浓缩至干，得大黄苷元。

8、大黄苷或大黄苷元在制备抗脑缺血损伤药物方面的应用，其特征在于，以大黄苷或大黄苷元。