CN1887363A - 用于骨再生的纳米脱钙骨基质材料及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种晶粒尺寸达到纳米级,用于骨再生时抗原性弱、成骨诱导活性好的纳米脱钙骨基质材料及其制备方法。该方法包括下列步骤:1)采用新鲜健康成人骨,去除软组织,获得不同尺寸的骨块,流水冲洗2-6hr,无水乙醇脱水1-3hr,乙醚脱脂0.5-2hr,通风处干燥,置于-10至-100℃冰箱冻干,用磨样机粉碎成0.5-2.5mm颗粒;2)无水乙醇浸泡1-3hr,乙醚浸泡1-3hr,蒸馏水冲洗2-5次,盐酸浸泡2-8hr,乙醚浸泡0.5-2hr,通风处干燥得脱钙骨基质DBM,置于-10至-100℃冰箱冻干;3)研磨机研磨DBM至1-300纳米颗粒,γ射线或环氧乙烷消毒,即得。
Description
技术领域
本发明属于生物工程技术领域,涉及一种纳米骨再生材料及其制备方法,特别是涉及一种用于骨再生的纳米脱钙骨基质材料及其制备方法。
背景技术
自古以来,骨不连,骨缺损和骨坏死一致是骨科医生面临的一大难题。自体骨是工人的理想骨移植材料,但其存在明显的缺点,如:1、来源有限,不能满足大段骨缺损和各类翻修手术的需要,特别对于小儿病人;2、供区并发症带来的额外痛苦,有报道在5%~25%,主要有:血管、神经损伤,骨折,血肿,感染和慢性疼痛等;3、延长了手术时间,相应地增加了出血量。临床上应用骨移植替代物取代自体骨进行植骨手术已成必然趋势。
由同种异体骨经中性酸抽提后制成的脱钙骨基质(Demineralized Bone Matrix,DBM),同时具有骨诱导和骨传导作用,其在脊柱融合术中已得到临床应用,被认为是取代自体骨的重要骨修复材料。
但非纳米化的脱钙骨基质骨传导作用较自体骨弱;经脱钙处理后其生物力学性能下降,在植骨融合时的骨支撑作用降低;同时由于脱钙骨基质来源于异体骨,存在一定程度的排异反应。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种晶粒尺寸达到纳米级,用于骨再生时抗原性弱、成骨诱导活性好的纳米脱钙骨基质材料及其制备方法。
本发明的技术方案是:
一种用于骨再生的纳米脱钙骨基质材料,它是通过先采用健康成人骨制备脱钙骨基质颗粒(DBM),然后采用物理方法研磨至纳米晶颗粒得到的,它是一种纳米粉状颗粒,晶粒尺寸为1-300nm,脱钙后产品的钙残留量为1%-5%(重量比)。
上述纳米脱钙骨基质材料的制备方法具体包括下列步骤:
1)采用新鲜健康成人骨,去除软组织,获得不同尺寸的骨块,流水冲洗2-6hr,无水乙醇脱水1-3hr,乙醚脱脂0.5-2hr,通风处干燥,置于-10℃至-100℃的冰箱冻干后,用磨样机粉碎成0.5-2.5mm颗粒。
2)用无水乙醇浸泡1-3hr,乙醚浸泡1-3hr,蒸馏水冲洗2-5次,再用盐酸浸泡2-8hr,乙醚浸泡0.5-2hr,通风处干燥得脱钙骨基质DBM,再置于-10℃至-100℃的冰箱冻干。
3)用研磨机研磨DBM至1-300nm纳米颗粒,再用γ射线或环氧乙烷消毒,即得纳米骨再生材料。
上述方法中,研磨机的转数为10-1000转/秒,研磨时间为6-10hr。
利用本发明的方法制备出来的纳米DBM在以下三个方面可显著改善DBM的性能:
1)DBM内部颗粒结构运用纳米构建,整块移植物内部孔隙率可以人工调控,可以使DBM的骨传导作用得到合理引导,以符合各类骨移植的需要。
2)DBM纳米处理后,其疏水性增强,在体内植入后,更加稳定,可使DBM的抗原性降低,成骨诱导活性更趋稳定。
3)应用纳米技术构建DBM可尽可能减少因DBM自身脱钙所带来的生物力学下降的后果,以使其更适用于植骨融合时的骨支撑作用。
具体实施方式
实施例1:
本发明通过如下方法制备得到纳米骨再生材料:
1.采用新鲜健康成人骨,去除软组织,获得不同尺寸的骨块,流水冲洗4hr,无水乙醇脱水2hr,乙醚脱脂1.5hr,通风处干燥,置于-80℃冰箱冻干后,用磨样机粉碎成0.5mm颗粒;
2.用无水乙醇浸泡2hr,乙醚浸泡2hr,蒸馏水冲洗3次,再用盐酸浸泡6hr,乙醚浸泡1.5hr,通风处干燥得脱钙骨基质DBM(钙残留量重量比为1%),再置于-80℃冰箱冻干;
3.用转数为100转/秒的研磨机研磨DBM 10hr,至50nm的纳米颗粒,再用γ射线或环氧乙烷消毒,即得纳米骨再生材料。
实施例2:
本发明通过如下方法制备得到纳米骨再生材料:
1.采用新鲜健康成人骨,去除软组织,获得不同尺寸的骨块,流水冲洗4hr,无水乙醇脱水1hr,乙醚脱脂2hr,通风处干燥,置于-80℃冰箱冻干,用磨样机粉碎成1.5mm颗粒;
2.无水乙醇浸泡3hr,乙醚浸泡1hr,蒸馏水冲洗2次,用盐酸浸泡4hr,乙醚浸泡1hr,通风处干燥得脱钙骨基质DBM(钙残留量重量比为3%),置于-30℃冰箱冻干;
3.用转数为500转/秒的研磨机研磨DBM 6hr,至100nm的纳米颗粒,再用γ射线或环氧乙烷消毒,即得纳米骨再生材料。
实施例3:
本发明通过如下方法制备得到纳米骨再生材料:
1.采用新鲜健康成人骨,去除软组织,获得不同尺寸的骨块,流水冲洗2hr,无水乙醇脱水3hr,乙醚脱脂1hr,通风处干燥,置于-80℃冰箱冻干,用磨样机粉碎成2.5mm颗粒;
2.无水乙醇浸泡1hr,乙醚浸泡3hr,蒸馏水冲洗5次,用盐酸浸泡2hr,乙醚浸泡2hr,通风处干燥得脱钙骨基质DBM(钙残留量重量比为5%),置于-60℃冰箱冻干;
3.用转数为900转/秒的研磨机研磨DBM 8hr,至10nm的纳米颗粒,再用γ射线或环氧乙烷消毒,即得纳米骨再生材料。
Claims (6)
1、一种用于骨再生的纳米脱钙骨基质材料的制备方法,其特征在于它包括下列步骤:
4)采用新鲜健康成人骨,去除软组织,获得不同尺寸的骨块,流水冲洗2-6hr,无水乙醇脱水1-3hr,乙醚脱脂0.5-2hr,通风处干燥,置于-10℃至-100℃的冰箱冻干后,用磨样机粉碎成0.5-2.5mm颗粒;
5)用无水乙醇浸泡1-3hr,乙醚浸泡1-3hr,蒸馏水冲洗2-5次,再用盐酸浸泡2-8hr,乙醚浸泡0.5-2hr,通风处干燥得脱钙骨基质DBM,再置于-10℃至-100℃的冰箱冻干;
6)用研磨机研磨DBM至1-300nm纳米颗粒,再用γ射线或环氧乙烷消毒,即得纳米骨再生材料。
2、根据权利要求1所述的用于骨再生的纳米脱钙骨基质材料的制备方法,其特征在于,上述方法中研磨机的转数为10-1000转/秒,研磨时间为6-10hr。
3、根据权利要求1或2所述的用于骨再生的纳米脱钙骨基质材料的制备方法,其特征在于,上述方法中脱钙后产品的钙残留量为1%-5%(重量比)。
4、一种根据权利要求1至3所述的方法制备得到的用于骨再生的纳米脱钙骨基质材料,其特征在于,它是一种纳米粉状颗粒,晶粒尺寸为1-300nm。
5、根据权利要求4所述的用于骨再生的纳米脱钙骨基质材料,其特征在于,上述纳米颗粒的晶粒尺寸为10-100nm。
6、根据权利要求4或5所述的用于骨再生的纳米脱钙骨基质材料,其特征在于,所述纳米脱钙骨基质材料的钙残留量为1%-5%(重量比)。
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CN 200510027391 CN1887363A (zh) | 2005-06-30 | 2005-06-30 | 用于骨再生的纳米脱钙骨基质材料及其制备方法 |
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CN102895703A (zh) * | 2012-11-08 | 2013-01-30 | 北京鑫康辰医学科技发展有限公司 | 脱钙骨基质材料及其制备方法 |
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