CN1864682A - 复方抗结核制剂中各药物微丸的体内外释药特性及应用 - Google Patents

Abstract

本发明是建立在专利03101211.6微丸制备的基础上，对利福平、异烟肼微丸按照《中国药典》释放度测定的方法进行微丸在特定条件下的溶液中释放状况测定和以人体为受试对象，测定微丸的人体药代动力学特征。

Description

复方抗结核制剂中各药物微丸的体内外释药特性及应用

                         技术领域

本申请实际上是一种已经获得专利授权的续申请，发明人已经获得授权的发明专利名称是“一种复方利福平制剂的释药系统”其专利申请号是03101211.6，其授权专利证书号是208518，本申请是进一步将该专利中涉及的发明内容中没有公开的内容和从进一步实验中获得的药物微丸的体内外释药特性公布于众。

                         技术背景

发明专利“一种复方利福平制剂的释药系统”实际上是发明了一种复方利福平制剂，这种制剂可以解释为是一种复方利福平制剂的释药系统。因为，这种制剂涉及了由四种一线抗结核药物利福平、异烟肼、吡嗪酰胺、盐酸乙胺丁醇制备成四种药物微丸。该发明还描述了微丸的制备方法，并由这四种微丸分别按照世界卫生组织公布的抗结核固定剂量复合制剂标准处方的药物用量配伍标准，有组合规律地将利福平微丸与另外三种微丸填充到一个胶囊壳中，形成一种特殊的复方利福平制剂的释药系统。这种系统后来被中国国家药典委员会命名为利福平复方制剂的“双释放”制剂，其特点是在制剂中的有些药物微丸是在胃中释放，有些药物微丸是在小肠上部释放。采用这种双释放释药系统，可以有效地保护复方利福平制剂中利福平和异烟肼的稳定性，提高产品的质量和保护利福平的生物利用度不遭受损失。因为，产品的质量和利福平的生物利用度不受损失或少受损失，是确保抗结核化疗中不产生耐药性结核病的重要保障因素，这是当前遏制结核病和耐药性结核病蔓延，保障人类健康的重要研究课题，也是当前公共卫生建设工作的当务之急。

在03101211.6发明专利中，发明人对外公布的是以微丸技术为基础的释药系统的组成方法以及4种药物微丸的制备方法和利福平肠溶微丸的体外释药特性。没有对外公布利福平、异烟肼、吡嗪酰胺和盐酸乙胺丁醇胃溶微丸的体内外释药特性和异烟肼肠溶微丸的体内外释药特性。而这些特性是药物在体内释放和吸收的重要保障。因为，即便是处方完全一样，没有大量的实验探索和在此基础上获得的完善的操作技能以及严格的工艺把关是无法获得有利于体内吸收的具有体内外释药特性的微丸，而释药特性不同，将与药物的体内吸收的优劣有密切的相关性，因此，有必要将03101211.6发明专利中在陆续的实验测定中获得的微丸释药特性公布于众，并冀望获得相应的知识产权保护。

                         发明内容

本发明是建立在专利03101211.6微丸制备的基础上，对微丸按照《中国药典》释放度测定的方法进行微丸在特定条件下的溶液中释放状况测定和以人体为受试对象，测定微丸的人体药代动力学特征。

需要在此处强调一点的是，虽然在制剂学的技术领域中，将药物做成微丸是常识性知识，但是，对于具体的药物，做成微丸的具体技术并不相同，有些药物做成微丸的难度很大，例如一些挥发性药物。所有药物需要在有经验的药剂研究人员经过一定的试验研究过程和处方筛选才能将药物做成微丸。因为，做成微丸的药物并不只是在外型上做成微丸就可以了，所做成的药物微丸必须符合药典微丸尺寸的规定，并具有良好的体内外释药特性才能算得上是有临床使用价值的药物微丸。专利03101211.6公布的利福平、异烟肼、吡嗪酰胺、盐酸乙胺丁醇药物微丸是首创的，在此之前，世界上没有具有临床使用价值的上述药物的微丸出现。

微丸在特定条件下的溶液中释放状况一般被称为药物制剂的体外释放特性。本制剂属于化学药品制剂，在中国大陆境内，药物制剂的体外释放特性的测定，必须依照《中国药典》二部附录“溶出度测定法”和“释放度测定方法”。需要指出的是，本发明研究的过程中，经历了2000年版和2005年版两届《中国药典》的执行期间，因此，本发明药物制剂体外释放特性的测定是建立在两届《中国药典》颁布的“溶出度测定法”和“释放度测定法”的基础上的。对照两届药典的“溶出度测定法”和“释放度测定法”的差异，“释放度测定法”其基本测定方式是完全一样的，不同的是对结果判断的文字描述略有不同。但是，“溶出度测定法”2005版药典的规定略严谨于2000年版的规定。为了方法的统一，研究是首先采用2000年版药典的规定，之后，又按照2005年版药典的规定进行重复试验。本发明所公开的数据，是建立在依照2005年版《中国药典》二部附录“溶出度测定法”和“释放度测定法”规定之基础上的测定数据。

本研究涉及的药物微丸包括利福平的胃溶微丸和肠溶微丸、异烟肼的胃溶微丸和肠溶微丸、吡嗪酰胺的胃溶微丸和盐酸乙胺丁醇的胃溶微丸。其中利福平的肠溶微丸的体外释药特性按照《中国药典》2000年版二部附录“释放度测定法”规定的方法测定的数据已经在专利03101211.6中公开，并获得专利保护。在采用2005年版之规定方法进行复核测定，其基本数据没有显著性差异。

在微丸制作工艺的研究中发现，即便是完全相同的处方(主药和敷料的混合体)，由于操作人员的不同，在润湿剂和撒粉以及设备的转速等操作上的差异，就会造成微丸体外的释药特性不同，进而造成药物制剂在体内的释放特性不同，最终造成药物在体内的吸收不同，导致药物的疗效产生差异。因此，当微丸体外的释药特性较差时，有可能意味着药物的疗效失去作用，对于一线抗结核药物制剂而言，不好的药物制剂将意味着结核病治疗的失败，导致耐药性结核病的发生，耐药性结核病的蔓延将对整个人类的健康构成严重的危险。所以，对于一线抗结核药物制作的微丸的产品质量必须进行严格的控制。

通常情况下，当药物制剂的处方确定以后，对药物制剂质量的控制一般从两个方面着手，一方面对整个操作步骤进行严格的操作控制，但是，影响因素比较多，很难做到万无一失。因此，应该对微丸的释药特性进行控制，本发明就是以此为研究目标。

所有微丸的制作方法都在专利03101211.6中进行了详细描述。需要进一步明确的是利福平和异烟肼的胃溶微丸是指没有进行肠溶包衣材料包裹的微丸，或称素丸，可以在素丸上包胃溶包衣材料，也可以不包胃溶包衣材料。其肠溶微丸是指在素丸的基础上进行了肠溶材料包衣的微丸。肠溶包衣材料和胃溶包衣材料的种类很多，可以根据包衣材料的性质并根据其对微丸释药特性的要求选择合适的方式进行包衣。因此，包衣的材料可以是多种的，包衣的方法也可以是不同变化的，但是，微丸的释药特性是唯一的，迄今为止，还没有关于这方面的报道。

所有胃溶微丸的体外释放特性的测定是采用2005年版《中国药典》“溶出度测定法”规定的条件测定的。测定的方法根据中国药典中收载的利福平、异烟肼、吡嗪酰胺和盐酸乙胺丁醇的相关制剂中的溶出度检查项中的条件而确定的，对于利福平胃溶微丸采用盐酸溶液(9→1000)900ml为溶剂，而其它三种胃溶微丸采用水900ml为溶剂。对于含四种主药的复方制剂中的溶出度测定，仪器的装置采用转篮法，溶剂的温度为37℃，转速对于异烟肼、吡嗪酰胺、盐酸乙胺丁醇组分的微丸采用每分钟50转，利福平组分的微丸采用每分钟100转。利福平、异烟肼、吡嗪酰胺采用高效液相色谱法(HPLC)进行检测，盐酸乙胺丁醇采用提取分光法(提取-UV)进行检测；当上述微丸单独进行体外释药特性试验时，利福平、异烟肼和吡嗪酰胺可以使用UV(紫外分光光度)方法进行检测和一些其他的分析方法，例如常规容量分析方法等。具体的HPLC、UV和提取-UV方法以及一些其他没有列出的分析检测方法有很多种，但是，不管采用何种分析方法，都应该具有良好的专属性、精密度、稳定性和良好的回收率，总之应该达到分析化学的基本要求，只有这样，才能消除由于采用的检测方法不同对检测结果带来的不应该出现的显著性差异。

实验结果显示，当所有微丸在45分钟或者更短的30分钟的时间内，其药物释放量达到标示量的75％时基本可以满足对微丸产品质量的要求，当达到85％以上时更好。

由于异烟肼、吡嗪酰胺、盐酸乙胺丁醇属于基本药物的第1类药物，所以，要求这3种微丸的体外释药量在30分钟时应该达到85％以上为最好。我们进行了动物体的体内药物释放特性试验，试验显示，当微丸在45分钟时释药量在75％以下时，其体内的释药峰值就明显降低，这对于保障药效是十分不利的，因此，应该保障微丸在45分钟时的释药量至少应该达到75％以上。

另外，利福平胃溶微丸的体外溶出度测定时，溶剂还可以选择pH6.8磷酸盐缓冲液，在上述其他条件都不改变的情况下，微丸的释药量可以达到75％，较佳的是达到85％以上。

在试验中，对于胃溶微丸的测定所采用的溶剂还可以选择《中国药典》2005年版规定的pH值为1.2、4.5、6.8的溶液介质和水作为溶剂，其他条件都不改变，药物的释药特性也都达到了上述体外释药特性的要求。当溶剂的pH值较高时，例如以pH6.8的介质和水为溶剂时，释放量会有所降低，但是，最低也可以达到标示量的60％以上，释药特性好的微丸一般可以达到80％以上。

肠溶利福平微丸的体外释药特性已经在专利03101211.6中公开，本发明公开的是肠溶异烟肼微丸的体外释药特性，这里所指的的肠溶可以缩小到比较狭窄的范围内定义：就是在小肠上部快速释放。因为，生物体的肠道比较长，对应的pH范围在5～8之间，从小肠上部的幽门开始，肠道中的pH值逐渐升高。异烟肼肠溶微丸定义在小肠上部快速释放，就是要求微丸在pH5～7之间的范围内快速释放。

异烟肼肠溶微丸的体外释放特性的测定是采用2005年版《中国药典》“释放度测定法”规定的条件测定的。测定的方法选自“释放度测定法”项下第二法的方法2，转速选自每分钟50转，溶剂选择水溶液、pH5.0、pH6.8缓冲溶液和盐酸溶液(9→1000)，于30分钟或45分钟以及在120分钟时取样。当测定时有利福平、吡嗪酰胺和盐酸乙胺丁醇存在时，检测方法选择HPLC方法进行检测，当只有异烟肼存在时，检测方法也可以选择UV(紫外分光光度)方法，检测波长选择263nm。同样，检测方法是可以改变的，但是，所采用的检测方法应该达到分析化学的基本要求。

实验结果显示，当异烟肼肠溶微丸在盐酸溶液(9→1000)中，120分钟时释放量应小于标示量的10％，在水溶液、pH5.0、pH6.8缓冲溶液中，45分钟的时间内或者更短的30分钟时间内，其药物释放量达到标示量的70％时基本可以满足对异烟肼肠溶微丸产品质量的控制要求，当达到85％以上时更好。

需要明确的是，在满足本发明描述的释药特性的前提下，对于异烟肼、吡嗪酰胺、盐酸乙胺丁醇组分的微丸，如果转速选择超过每分钟50转，对于利福平组分的微丸如果选择每分钟超过100转等，则微丸的释药特性也仍然可以达到上述特性，但是，提高转速是无意义的，同时也不超出本发明的技术范围。然而，如果微丸因处方中辅料的选择不佳以及制作工艺不良造成微丸的释药特性达不到上述条件下所描述的释药特性，在这种情况下，如果转速在上述基础上提高，则微丸的释药特性将有可能达到上述标准，然而，这样做的目的实际上是为了掩盖释药特性拙劣的微丸的真实面目。释药特性拙劣的微丸必然造成体内释药的不良，最终导致药品吸收的不足，需要注意，当这种微丸与释药特性优良的微丸在其体外释药特性的差别不是很悬殊时，有可能在有限的生物样本中无法明显地显示出体内吸收的差异，但是，这并不意味着可以掩盖这种释药特性的拙劣，坚持对微丸体外释药特性的控制是保障微丸产品质量的有效保障，进而也是制造优良抗结核固定剂量复合制剂的必要手段和必须坚持的原则。

本发明的一个具体的应用就是将肠溶异烟肼微丸联合肠溶利福平微丸装入同一个胶囊中的应用以及他们在生物体中的释药特性。以及专利03101211.6没有公开的将异烟肼肠溶微丸与利福平胃溶微丸装入同一个胶囊中，以及利福平胃溶微丸的生物体内的释药特性。需要强调的是，在上述两种形式下，还可以将吡嗪酰胺胃溶微丸和盐酸乙胺丁醇胃溶微丸加入组合后装入同一个胶囊中，形成抗结核的固定剂量复合制剂。在这种制剂中药物间的配比关系应该符合世界卫生组织公布的固定剂量复合制剂的标准处方规定的配比关系，其中包括2药、3药和4药的处方，这些在专利03101211.6中已经有了详细描述，此处不再赘述。

目前的利福平、异烟肼都是胃溶型制剂，在胃溶型的制剂中，利福平达到血药浓度高峰的平均时间在2～2.5小时之间，异烟肼达到血药浓度高峰的平均时间在0.67～1小时之间。在专利03101211.6中，发明人以微丸技术为基础，提出了利福平肠溶微丸与异烟肼胃溶微丸组合，并将其装入同一个胶囊中的组合制剂形式。在这种形式下，异烟肼达到血药浓度高峰的时间与普通的胃溶型制剂的时间没有显著性的变化，但是，利福平的平均血药浓度达到高峰的时间在4～5小时左右，明显的比胃溶型利福平延迟2小时左右。

将异烟肼肠溶微丸与利福平肠溶微丸组合在同一个胶囊中，则异烟肼在生物体内血药浓度的达峰时间与胃溶异烟肼制剂比较也将延迟2小时左右。

上述两种组合的方式使得利福平与异烟肼的体内释药特性将更加吻合，从预防抗菌素耐药性理论分析，当两种以上的抗菌药联合服用时，药物的体内释药特性吻合的越接近，其预防产生耐药性和提高药效将更加有利。虽然这种理论的正确性需要长期的临床实践去验证，但是，将肠溶型利福平微丸与肠溶型异烟肼微丸进行组合装入胶囊中，或者将胃溶型利福平微丸与肠溶型异烟肼微丸进行组合装入胶囊中，将使得两种组分的药物的体内释药特性的吻合程度达到或者超过了两药都在胃中释药情况下药物释放特性的吻合效果。

虽然小肠上部释药使得血药达峰时间比在胃中释药平均向后延迟了2小时左右，但是，这种技术的实现将对在抗结核的临床实践中，研究利福平和异烟肼的联合用药、预防其耐药性现象的发生奠定了药剂学基础。因为，在酸性环境下，当利福平与异烟肼接触后，利福平和异烟肼都将产生降解，使得两者的生物利用度遭受损失，降低了治疗效果。而在小肠上部的近中性环境中，利福平与异烟肼就相对稳定了许多，这样就保障了两者的生物利用度不或少遭受损失。

而以前的研究中，仅仅是将利福平微丸在小肠上部释放，而异烟肼微丸仍在胃中释放，这样，虽然避免了两者的降解和生物利用度不遭受损失，但是，两者的生物体内的释药特性(曲线)吻合的不是十分理想。因此，当通过对微丸在生物体中的释药特性研究以后，实验结果才明显地告诉我们，将异烟肼肠溶微丸与利福平肠溶微丸进行组合装入胶囊或者将异烟肼肠溶微丸与利福平胃溶微丸进行组合装入胶囊，将有可能具有更好的临床效果，虽然这一效果需要进一步的临床实践进行验证，但是，微丸体内释药特性的研究结果向我们展示了一个有价值的前景。

                       具体实施方式

上面已详述本发明，再结合实施例公开微丸的体外释药特性进一步详述本发明，显然，实施例仅供说明绝非限制。

实施例1 利福平肠溶微丸的体外释药特性：

1、实验目的：测定肠溶利福平微丸在盐酸溶液(9→1000)、水、pH5.0、pH5.6、pH6.8磷酸盐缓冲液中的溶出曲线。

2、实验依据：中国药典2005年版二部附录“释放度测定法”项下第二法的方法2。取本品(相当于利福平50mg)分别按照溶出度测定法第一法装置，分别以水、盐酸溶液(9→1000)、pH5.0磷酸盐缓冲液、pH5.0磷酸盐缓冲液、pH6.8磷酸盐缓冲液900ml为溶剂，转速50转/分，依法操作，分别于5分钟、10分钟、20分钟、30分钟、45分钟、60分钟取溶液10ml，滤过，同时补充同体积的溶剂，取续滤液4ml置于10ml量瓶中用相应的溶剂稀释至刻度，摇匀，做为样品溶液；另取利福平对照品适量配制成25ug/ml的对照溶液。照分光光度法在360～700nm波长间扫描其最大吸收波长并于最大吸收波长处测其吸收度，计算溶出量。

3、实验结果如下表数据所示：

实施例2 异烟肼肠溶微丸的体外释药特性：

1、实验目的：测定肠溶异烟肼微丸在盐酸溶液(9→1000)、水、pH6.8磷酸盐缓冲液、pH5.0磷酸盐缓冲液中的溶出曲线。

2、实验依据：中国药典2005年版二部附录“释放度测定法”项下第二法的方法2。取本品(相当于异烟肼150mg)分别按照溶出度测定法第一法装置，分别以盐酸溶液(9→1000)、水、pH5.0磷酸盐缓冲液、pH6.8磷酸盐缓冲液900ml为溶剂，转速50转/分，依法操作，分别于10分钟、20分钟、30分钟、45分钟、60分钟取溶液5ml，滤过，同时补充同体积的溶剂，取续滤液1ml置于10ml量瓶中用相应的溶剂稀释至刻度，摇匀，做为样品溶液；另取异烟肼对照品适量配制成16ug/ml的对照溶液。照分光光度法在200～350nm波长间扫描其最大吸收波长并于最大吸收波长处测其吸收度，计算溶出量。

3、实验结果如下表数据所示：

实施例3 利福平胃溶微丸的体外释药特性

1、实验目的：测定利福平胃溶微丸在盐酸溶液(9→1000)中的溶出曲线。

2、实验依据：中国药典2005年版二部附录“溶出度测定法”，取本品(相当于利福平75mg)按照溶出度测定法第一法，以盐酸溶液(9→1000)900ml为溶剂，采用50转/分的转速，依法操作；分别于5、10、15、20、30、45分钟取溶液10ml，滤过，同时补充同体积的溶剂。精密量取续滤液3ml，置10ml量瓶中，用盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度，做为供试品溶液；另取利福平对照品，用盐酸溶液(9→1000)稀释成每1ml中约含25ug的溶液，做为对照品溶液。照分光光度法在360～700nm波长间扫描其最大吸收波长并于最大吸收波长处测其吸收度，计算溶出量。

3、实验结果如下表数据所示：

时间	释放量(相当于标示量％)
								杯1	杯2	杯3	杯4	杯5	杯6	均值
	5分钟	11.6	10.9	10.3	11.5	12.3	10.6								11.2
10分钟								50.2	52.5	49.4	50.5	53.6	49.2	50.9
	20分钟	87.8	88.9	88.5	90.7	89.3	86.2								88.6
30分钟								99.3	98.7	100.2	97.9	99.8	100.5	99.4
	45分钟	100.5	100.2	98.8	99.6	100.1	99.9								99.8
60分钟								99.8	98.8	99.6	100.2	99.3	99.1	99.5

实施例4 异烟肼胃溶微丸的体外释药特性

1、实验目的：测定胃溶异烟肼微丸在水中的溶出曲线。

2、实验依据：中国药典2005年版二部附录“溶出度测定法”项下第一法的方法。取本品(相当于异烟肼150mg)，以水900ml为溶剂，转速50转/分，依法操作；分别于5分钟、10分钟、20分钟、30分钟、45分钟、60分钟取溶液5ml，滤过，同时补充同体积的溶剂，取续滤液1ml置于10ml量瓶中用相应的溶剂稀释至刻度，摇匀，做为样品溶液；另取异烟肼对照品(原料药)适量配制成16ug/ml的对照溶液。照分光光度法在200～350nm波长间扫描其最大吸收波长并于最大吸收波长处测其吸收度，计算溶出量。

3、实验结果如下表数据所示：

时间	溶出量(相当于标示量％)
								杯1	杯2	杯3	杯4	杯5	杯6	均值
	5分钟	52.9	49.4	51.6	55.6	56.5	55.3								53.6
10分钟								82.8	81.4	78.9	80.1	86.6	84.6	82.4
	20分钟	96.6	94.6	92.0	96.1	95.6	94.2								94.8
30分钟								100.3	101.3	98.3	99.4	101.0	102.0	100.4
	45分钟	100.6	101.6	98.8	99.4	100.6	100.3								100.2
60分钟								100.1	101.3	98.4	99.1	100.0	101.0	100.0

实施例4 吡嗪酰胺胃溶微丸的体外释药特性

1、实验目的：测定胃溶吡嗪酰胺微丸在水中的溶出曲线。

2、实验依据：中国药典2005年版二部附录“溶出度测定法”项下第一法的方法。取本品(相当于吡嗪酰胺250mg)，以水900ml为溶剂，转速50转/分，依法操作；经5、10、15、20、30、45分钟时，取溶液5ml(同时补充同体积的溶剂)滤过，取续滤液1ml置25ml量瓶中，用水稀释至刻度，做为供试品溶液；另取吡嗪酰胺对照品，用水稀释成每1ml中约含10ug的溶液，做为对照品溶液。

3、照分光光度法在200～350nm波长间扫描其最大吸收波长并于最大吸收波长处测其吸收度，计算溶出量。

时间	溶出量(相当于标示量％)
								杯1	杯2	杯3	杯4	杯5	杯6	均值
	5分钟	42.9	38.6	41.9	37.5	34.9	42.2								39.7

10分钟	82.1	75.7	79.5	74.7	72.0	82.7	77.8
								20分钟	101.0	95.1	99.6	97.3	92.8	101.5	97.9
30分钟	102.3	100.5	100.1	99.5	100.8	101.2	100.7
								45分钟	101.6	100.1	99.8	99.3	101.2	101.6	100.6
60分钟	101.0	99.2	98.5	98.2	100.2	100.5	99.6

实施例5 盐酸乙胺丁醇胃溶微丸的体外释药特性

1、实验目的：测定胃溶盐酸乙胺丁醇微丸在水中的溶出曲线。

2、实验依据：中国药典2005年版二部附录“溶出度测定法”项下第一法的方法。取本品(相当于盐酸乙胺丁醇92mg)，以水900ml为溶剂，转速50转/分，依法操作。分别于5、10、20、30、45、60分钟时，取溶液5ml(同时补充所耗溶剂5ml)，滤过，取续滤液1ml，加溴甲酚绿溶液(取溴甲酚绿0.2g，加水30ml与0.1mol/L氢氧化钠溶液6.5ml使溶解，加磷酸二氢钠19.0g与磷酸氢二钠2.5g，加水稀释至500ml，摇匀，加0.1mol/L盐酸溶液调节pH值为4.6±0.1)10ml，摇匀，精密加氯仿20ml，振摇提取后，静置使分层，分取氯仿液，照分光光度法在360～700nm波长间扫描其最大吸收波长。照分光光度法最大吸收波长处测其吸收度。另精密量取盐酸乙胺丁醇对照品溶液(每1ml中含盐酸乙胺丁醇对照品100ug)，按上述方法自“溴甲酚绿溶液”起，同法测定吸收度，计算溶出量。

3、实验结果如下表数据所示：

时间	溶出量(相当于标示量％)
								1	2	3	4	5	6	均值
	5分钟	48.09	51.40	54.79	53.18	49.79	56.29								52.26
10分钟								82.32	86.56	89.11	85.15	84.02	87.69	85.81
	20分钟	96.74	99.29	101.38	98.72	97.59	102.40								99.35
30分钟								97.02	99.85	102.11	99.28	97.30	102.68	99.71
	45分钟	96.74	99.29	101.80	98.23	96.74	102.11								99.15
60分钟								96.46	99.57	102.40	99.01	97.31	102.68	99.58

实施例6 肠溶异烟肼微丸联合胃溶利福平微丸、胃溶吡嗪酰胺微丸、胃溶盐酸乙胺丁醇微丸4药的生物体的释药特性：

实验是在5名志愿受试者之间进行，受试者来自河南省康利医药技术开发有限公司的研究人员，年龄在22岁～39岁之间，男性。研究的目的是观察肠溶异烟肼微丸联合胃溶利福平微丸、胃溶吡嗪酰胺微丸、胃溶盐酸乙胺丁醇微丸4药在人体的释药特性。生物样品采集自愿受试者的血和尿，其中利福平、异烟肼和吡嗪酰胺采用各自的HPLC系统进行检测，测定各药物在受试者服药后的血药浓度；盐酸乙胺丁醇采用提取-UV法进行检测，测定药物的尿总排泄量。试验设计按照国家食品药品监督管理局关于“药代动力学试验的指导原则”的具体要求进行，由于本研究处于探索研究阶段，所以除了受试者人数采用5人之外，其他方面都完全按照“指导原则”的要求进行，为节省篇幅，此处不再赘述。本实验与下面的实施例7的试验是在同一组受试者中进行的。首先进行的本实施例试验，在采样结束2周以后，在同一组受试者中进行实施例7的试验，中间间隔2周时间是为了消除两个试验之间的相互影响，采用同一受试者的目的是尽量消除由于生物个体的差异给试验带来的影响。

5名受试者实验结果如下表所示：

表：利福平、异烟肼和吡嗪酰胺的平均血药浓度

表：各受试者服药后利福平、异烟肼和吡嗪酰胺的达峰时间

附图1为肠溶异烟肼微丸联合胃溶利福平微丸、胃溶吡嗪酰胺微丸、胃溶盐酸乙胺丁醇微丸4药的生物体的释药特性

图1中1为胃溶利福平微丸在体内的释药曲线；

图1中2为肠溶异烟肼微丸在体内的释药曲线；

图1中3为胃溶吡嗪酰胺微丸在体内的释药曲线；

由上述试验数据可见，异烟肼的血药浓度达峰时间在服药后3.1小时左右，而利福平的血药浓度达峰时间在2.3小时左右，其曲线基本被利福平的血药浓度曲线覆盖，吡嗪酰胺由于是在胃中释放，并且代谢比较缓慢，它的曲线完全覆盖了异烟肼和利福平的曲线。

实施例7 肠溶异烟肼微丸、肠溶利福平微丸联合胃溶吡嗪酰胺微丸、胃溶盐酸乙胺丁醇微丸4药的生物体的释药特性：

试验情况如实施例6中所描述，实验结果如下表所示。

表：利福平、异烟肼和吡嗪酰胺的平均血药浓度

4.5	9.664	2.072	27.220
				5	8.565	1.718	25.348
6	6.498	1.489	25.258
				8	5.705	1.150	22.494
12	2.526	1.039	15.237
				15	1.575	0.358	12.673
24	0.125	0.070	6.392
				48	0.119	0	0.817

表：各受试者服药后利福平、异烟肼和吡嗪酰胺的达峰时间

附图2为肠溶异烟肼微丸联合肠溶利福平微丸、胃溶吡嗪酰胺微丸、胃溶盐酸乙胺丁醇微丸4药的生物体的释药特性

图2中1为肠溶利福平微丸在体内的释药曲线；

图2中2为肠溶异烟肼微丸在体内的释药曲线；

图2中3为胃溶吡嗪酰胺微丸在体内的释药曲线；

由上述试验数据可见，异烟肼的血药浓度达峰时间在服药后3小时左右，利福平的血药浓度达峰时间在4.6小时左右，其曲线基本完全被利福平的血药浓度曲线覆盖，吡嗪酰胺由于是在胃中释放，并且代谢比较缓慢，它的曲线完全覆盖了异烟肼和利福平的曲线。由实施例7的试验可见，如果从血药浓度尽可能以包含覆盖的形式进行吻合将有利于联合抗菌药药效提高，则肠溶异烟肼微丸、肠溶利福平微丸联合是比较适宜的方案。

Claims (6)

1、一种复方利福平制剂的释药系统中异烟肼肠溶微丸、利福平胃溶微丸、利福平肠溶微丸、异烟肼胃溶微丸、吡嗪酰胺胃溶微丸、盐酸乙胺丁醇胃溶微丸的体外释药特性，其特征在于：

其异烟肼肠溶微丸在水溶液、pH5.0、pH6.8缓冲溶液中45分钟的释放量不少于75％、最佳不少于85％，在盐酸溶液(9→1000)中120分钟的释放量不得超过10％；

其利福平胃溶微丸在pH6.8的缓冲溶液、在水溶液、在盐酸溶液(9→1000)中的释放量45分钟都不少于75％，最佳都不少于85％；

其利福平肠溶微丸在水溶液、pH5.0、pH5.6缓冲溶液中45分钟的释放量不少于75％、最佳不少于85％，

其异烟肼胃溶微丸在水溶液、在盐酸溶液(9→1000)、pH1.2、pH4.0、pH4.5、pH5.0、pH6.8、pH7.2、pH7.6的缓冲溶液中45分钟的释放量都不少于75％，最佳都不少于85％；

其吡嗪酰胺胃溶微丸在水溶液中45分钟的释放量不少于75％，最佳不少于85％；

其盐酸乙胺丁醇胃溶微丸在水溶液中45分钟的释放量不少于75％，最佳不少于85％。

2、根据WHO推荐的抗结核固定剂量复合制剂的标准处方的药物配比关系和权利要求1的应用，其特征在于将异烟肼肠溶微丸与胃溶利福平微丸、以及联合胃溶吡嗪酰胺微丸、胃溶盐酸乙胺丁醇微丸装在同一个胶囊中形成异烟肼组分在肠道释放的抗结核治疗的固定剂量复合制剂。

3、根据WHO推荐的抗结核固定剂量复合制剂的标准处方的药物配比关系和权利要求1的应用，其特征在于将异烟肼肠溶微丸与肠溶利福平微丸配伍、进一步可以联合胃溶吡嗪酰胺微丸配伍，进一步还可以联合胃溶盐酸乙胺丁醇微丸配伍，并装填于同一个胶囊中，形成异烟肼组分在肠道开始释放、利福平组分在胃中开始释放的抗结核治疗的固定剂量复合制剂。

4、根据权利要求3，异烟肼肠溶微丸在肠道释放，其特征在于异烟肼的血药浓度的达峰时间在空腹口服给药后3±0.5小时以上。

5、根据权利要求3，利福平胃溶微丸在胃中开始释放，其特征在于空腹口服后，利福平胃溶微丸的血药浓度的达峰时间与异烟肼肠溶微丸的血药浓度的达峰时间相差小于1±0.6小时，且利福平组分的血药浓度峰在前，异烟肼组分的血药浓度峰在后。

6、根据权利要求4，其特征在于利福平与异烟肼都以肠溶微丸的形式在肠道中释药，两者血药浓度的达峰时间都在口服给药后2.5±0.5小时以上，但不晚于5.0±0.5小时。

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