CN1835952A - 作为rtk抑制剂的6－取代的苯胺基嘌呤 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一类新化合物、包括这类化合物的药物组合物和使用这类化合物治疗或预防与cSRC、Lck、FGFR3、Flt3、TrkB、Bmx和/或PFGFRα激酶活性相关的疾病或病症的方法。

Description

作为RTK抑制剂的6-取代的苯胺基嘌呤

                   相关申请的交叉参考

本申请要求如下美国临时专利申请的优先权权益：2003年8月15日提交的60/495,406；2003年11月21日提交的60/524,357；和2004年4月26日提交的60/565,367。将这些申请的全部公开内容整体广泛地引入本文作为参考。

                        发明背景

发明领域

本发明提供了一类新化合物、包含这类化合物的药物组合物和使用这类化合物治疗或预防与cSRC、Lck、FGFR3、Flt3、TrkB、Bmx和/或PFGFRα激酶活性相关的疾病或病症的方法。

背景技术

蛋白激酶代表一大族蛋白质，它们在调节各种细胞过程和维持对细胞功能的控制方面起中心作用。这些激酶的部分非限制性目录包括：受体酪氨酸激酶，如Fms-样酪氨酸激酶3(Fit3)、血小板衍生的生长因子受体激酶(PDGF-R)、c-kit、神经生长因子受体、trkB和成纤维细胞生长因子受体(FGFR3)和干细胞因子的受体激酶；非-受体酪氨酸激酶，如Abl和融合激酶BCR-Abl、Fes、Lck和Syk；和丝氨酸/苏氨酸激酶，如b-RAF、MAP激酶(例如MKK6)和SAPK2β。已经在许多疾病状态中观察到了异常激酶活性，包括良性和恶性增生性病症以及因免疫和神经系统不适当活化导致的疾病。

本发明的新化合物抑制一种或多种蛋白激酶活性，由此预计可用于治疗与激酶相关的疾病。

                       发明概述

一方面，本发明提供了式I化合物及其N-氧化物衍生物、前体药物衍生物、被保护的衍生物、单独的异构体及异构体混合物和这类化合物的药学上可接受的盐和溶剂合物(例如水合物)：

其中：

R₁选自氢、卤素、C_1-6烷基、卤素-取代的-C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤素-取代的-C_1-6烷氧基、-OXOR⁵、-OXR⁶、-OXNR₅R₆、-OXONR₅R₆、-XR₆、-XNR₅R₆和-XNR₇XNR₇R₇；其中X选自键、C_1-6亚烷基、C_2-6亚链烯基和C_2-6亚炔基；其中R₇独立地选自氢或C_1-6烷基；

R₅选自氢、C_1-6烷基和-XOR₇；其中X选自键、C_1-6亚烷基、C_2-6亚链烯基和C_2-6亚炔基；且R₇独立地选自氢或C_1-6烷基；

R₆选自氢、C_1-6烷基、C_3-12环烷基C_0-4烷基、C_3-8杂环烷基C_0-4烷基、C_6-10芳基C_0-4烷基和C_5-10杂芳基C_0-4烷基；或

R₅和R₆与R₅和R₆所连接的氮原子一起形成C_3-8杂环烷基或C_5-8杂芳基；其中R₅和R₆所形成的任意杂环烷基中的亚甲基可以任选被-C(O)-或-S(O)₂-替代；

其中R₆的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基或R₅和R₆的组合可以任选被1-3个基团取代，所述基团独立地选自-XNR₇R₇、-XOR₇、-XNR₇R₇、-XC(O)NR₇R₇、-XNR₇C(O)R₇、-XOR₇、-XC(O)OR₇、-XC(O)R₇、C_1-6烷基、C_3-8杂环烷基、C_5-10杂芳基、C_3-12环烷基和C_6-10芳基C_0-4烷基；其中R₁的任意烷基或亚烷基可以任选带有被二价基团替代的亚甲基，所述二价基团选自-NR₇C(O)-、-C(O)NR₇-、-NR₇-、-C(O)-、-O-、-S-、-S(O)-和-S(O)₂-；且其中R₆的任意烷基或亚烷基可以任选被1-3个基团取代，所述基团独立地选自C_5-8杂芳基、-NR₇R₇、-C(O)NR₇R₇、-NR₇C(O)R₇、卤素和羟基；其中R₇独立地选自氢或C_1-6烷基；

R₂选自氢、C_6-10芳基和C_5-10杂芳基；其中R₂的任意芳基或杂芳基任选被1-3个基团取代，所述基团独立地选自-XNR₇R₇、-XOR₇、-XOR₈、-XC(O)OR₇、-XC(O)R₇、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、硝基、氰基、羟基、卤素和卤素-取代的-C_1-6烷基；其中X和R₇如上所述；且R₈为C_6-10芳基C_0-4烷基；

R₃选自氢和C_1-6烷基；

R₄选自C_3-12环烷基C_0-4烷基、C_3-8杂环烷基C_0-4烷基、C_6-10芳基C_0-4烷基和C_5-10杂芳基C_0-4烷基；其中R₄的任意亚烷基可以任选带有被二价基团替代的亚甲基，所述二价基团选自-C(O)-、-S-、-S(O)-和-S(O)₂-；其中R₄的所述芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基任选被1-3个基团取代，所述基团选自卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤素-取代的-C_1-6烷基、卤素-取代的-C_1-6烷氧基、-XR₉、-XOR₉、-XS(O)_0-2R₇、-XS(O)_0-2R₉、-XC(O)R₇、-XC(O)OR₇、-XP(O)R₇R₇、-XC(O)R₉、-XC(O)NR₇XNR₇R₇、-XC(O)NR₇R₇、-XC(O)NR₇R₉和-XC(O)NR₇XOR₇；其中X和R₇如上所述；R₉选自C_3-12环烷基C_0-4烷基、C_3-8杂环烷基C_0-4烷基、C_6-10芳基和C_5-10杂芳基；其中R₉的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基任选被1-3个选自C_1-6烷基、-XC(O)R₇和-XC(O)NR₇R₇的基团取代；其中X和R₇如上所述。

第二方面，本发明提供了药物组合物，它含有式I化合物或其N-氧化物衍生物、单独的异构体及异构体混合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种合适的赋形剂。

第三方面，本发明提供了治疗动物疾病的方法，其中抑制cSRC、Lck、FGFR3、Flt3、TrkB、PDGFRα和/或Bmx活性可以预防、抑制或改善所述疾病的病理和/或症状，该方法包括对所述动物给予治疗有效量的式I化合物或其N-氧化物衍生物、单独的异构体及其异构体混合物或其药学上可接受的盐。

第四方面，本发明提供了式I化合物在制备用于治疗动物疾病的药物中的用途，其中cSRC、Lck、FGFR3、Flt3、TrkB、PDGFRα和/或Bmx活性对所述疾病的病理和/或症状起作用。

第五方面，本发明提供了制备式I化合物及其N-氧化物衍生物、前体药物衍生物、单独的异构体及异构体混合物及其药学上可接受的盐的方法。

发明详述

定义

“烷基”作为基团和作为其它基团例如卤素-取代的-烷基和烷氧基的结构单元，可以为直链或支链的。C_1-4烷氧基包括甲氧基、乙氧基等。卤素-取代的烷基包括三氟甲基、五氟乙基等。

“芳基”指的是含有6-10个环碳原子的单环或稠合双环芳族环系统。例如，芳基可以为苯基或萘基，优选苯基。

“亚芳基”指的是衍生自芳基的二价基团。“杂芳基”如对芳基所定义，其中环原子中的一个或多个为杂原子。例如，杂芳基包括吡啶基、吲哚基、吲唑基、喹喔啉基、喹啉基、苯并呋喃基、苯并吡喃基、苯并噻喃基、苯并[1，3]间二氧杂环戊烯、咪唑基、苯并-咪唑基、嘧啶基、呋喃基、噁唑基、异噁唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、噻吩基等。

“环烷基”指的是含有所示环原子数的饱和或部分不饱和的单环、稠合双环或桥接多环系统。例如，C_3-10环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基等。“杂环烷基”指的是如本申请中所定义的环烷基，条件是所示环碳中的一个或多个被选自-O-、-N＝、-NR-、-C(O)-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-的部分替代，其中R为氢、C_1-4烷基或氮保护基。例如，作为本申请中为描述本发明化合物所使用的C_3-8杂环烷基包括吗啉代、吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、哌啶基酮、1，4-二氧杂-8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基等。

“卤素”(或卤代)优选表示氯或氟，但也可以为溴或碘。

“治疗”指的是缓解或减轻疾病和/或其附带症状的方法。在本说明书中，术语“治疗”包括预防性(prophylactic)或防止性(preventative)治疗以及治愈或抑制疾病的治疗，包括治疗处危感染疾病或怀疑已感染疾病的患者以及患病的患者。该术语进一步包括用于延缓疾病发展的治疗。

本文所用的术语“治愈”指的是治疗涉及Flt3受体酪氨酸激酶活性失调的进行性疾病事件中的功效。

术语“预防性”指的是预防或防止涉及Flt3受体酪氨酸激酶活性失调的疾病的发作或复发。

本文所用的术语“延缓发展”指的是对处于所治疗疾病的前置阶段(pre-stage)或早期(early phase)的患者给予活性化合物，所述患者例如被诊断为相应疾病的前置形式，或处于例如医疗过程中的条件下或意外导致的条件下，在此条件下可能会发展相应的疾病。

本文所用的术语“涉及Flt3受体酪氨酸激酶活性失调的疾病”包括但不限于白血病，包括急性髓性白血病(AML)、具有三系脊髓发育不良的AML(AML/TMDS)、急性淋巴细胞白血病(ALL)和骨髓增生异常综合征(MDS)。该术语还特别包括Flt3受体突变导致的疾病。

优选实施方案描述

本发明提供了一类新化合物、包含这类化合物的药物组合物和使用这类化合物治疗或预防与cSRC、Lck、FGFR3、Flt3、TrkB、PFGFRα和/或Bmx激酶活性相关的疾病或病症的方法。特别地，所述化合物表现出对F1t3和FGFR3受体激酶的高度功效。

在一个实施方案中涉及式I化合物：

R₁选自氢、卤素、C_1-6烷氧基、-OXOR⁵、-OXR⁶、-OXNR₅R₆、-OXONR₅R₆、-XR₆、-XNR₇XNR₇R₇和-XNR₅R₆；其中X选自键、C_1-6亚烷基、C_2-6亚链烯基和C_2-6亚炔基；

R₅选自氢、C_1-6烷基和-XOR₇；其中X选自键、C_1-6亚烷基、C_2-6亚链烯基和C_2-6亚炔基；且R₇独立地选自氢或C_1-6烷基；

R₆选自氢、C_1-6烷基、C_3-12环烷基C_0-4烷基、C_3-8杂环烷基C_0-4烷基、C_6-10芳基C_0-4烷基和C_5-10杂芳基C_0-4烷基；R₆为氢或C_1-6烷基；或R₅和R₆与R₅和R₆所连接的氮原子一起形成C_3-8杂环烷基或C_5-8杂芳基；其中R₅和R₆所形成的任意杂环烷基中的亚甲基可以任选被-C(O)-或-S(O)₂-替代；

其中R₆的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基或R₅和R₆的组合可以任选被1-3个基团取代，所述基团独立地选自-XNR₇R₇、-XC(O)NR₇R₇、-XOR₇、-XNR₇R₇、-XNR₇C(O)R₇、-XOR₇、-XC(O)R₇、C_1-6烷基、C_3-8杂环烷基和C_6-10芳基C_0-4烷基；其中R₁的任意烷基或亚烷基可以任选带有被二价基团替代的亚甲基，所述二价基团选自-NR₇C(O)-、-C(O)NR₇-、-NR₇-、-O-；且其中R₁的任意烷基或亚烷基可以任选被1-3个基团取代，所述基团独立地选自C_5-8杂芳基、-NR₇R₇、-C(O)NR₇R₇、-NR₇C(O)R₇、卤素和羟基；其中R₇独立地选自氢或C_1-6烷基；

R₂选自氢、C_6-10芳基和C_5-10杂芳基；其中R₂的任意芳基或杂芳基任选被1-3个基团取代，所述基团独立地选自-XNR₇R₇、-XOR₇、-XOR₈、-XC(O)OR₇、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、硝基、氰基、卤素、卤素-取代的-C_1-6烷氧基和卤素-取代的-C_1-6烷基；其中X和R₇如上所述；且R₈为C_6-10芳基C_0-4烷基；

R₃为氢；且

R₄选自C_6-10芳基C_0-4烷基和C_5-10杂芳基C_0-4烷基；其中R₄的所述芳基或杂芳基被1-3个基团取代，所述基团选自卤素、-XR₉、-XOR₉、-XS(O)₂R₇、-XS(O)₂R₉、-XC(O)R₇、-XC(O)OR₇、-XP(O)R₇R₇、-XC(O)R₉、-XC(O)NR₇XNR₇R₇、-XC(O)NR₇R₇、-XC(O)NR₇R₉和-XC(O)NR₇XOR₇；其中X和R₇如上所述；R₉为C_3-8杂环烷基C_0-4烷基；其中R₉任选被1-3个选自C_1-6烷基、-XC(O)R₇和-XC(O)NR₇R₇的基团取代；其中X和R₇如上所述。

在另一个实施方案中，R₁选自氢、卤素、C_1-6烷氧基、-OXOR⁵、-OXR⁶、-OXNR₅R₆、-OXONR₅R₆、-XR₆和-XNR₅R₆；其中X选自键、C_1-6亚烷基、C_2-6亚链烯基和C_2-6亚炔基；R₅选自氢、甲基、羟基-乙基和甲氧基-乙基；R₆选自氢、苯基、苄基、环戊基、环丁基、二甲氨基-丙烯基、环己基、2，3-二羟基-丙基、哌啶基、氨基-羰基-乙基、甲基-羰基-氨基-乙基、甲基-氨基-乙基、氨基-丙基、甲基-氨基-丙基、1-羟基甲基-丁基、戊基、丁基、丙基、甲氧基-乙炔基、甲氧基-乙烯基、二甲基-氨基-丁基、二甲基-氨基-乙基、二甲基-氨基-丙基、四氢吡喃基、四氢呋喃基-甲基、吡啶基-甲基、氮杂庚环-1-基、[1，4]氧氮杂庚环-4-基、哌啶基-乙基、二乙基-氨基-乙基、氨基-丁基、氨基-异丙基、氨基-乙基、羟基-乙基、2-乙酰基氨基-乙基、氨基甲酰基-乙基、4-甲基-[1，4]二氮杂庚环-1-基、2-羟基-丙基、羟基-丙基、2-羟基-2-甲基-丙基、甲氧基-乙基、氨基-丙基、甲基-氨基-丙基、2-羟基-2-苯基-乙基、吡啶基-乙基、吗啉代-丙基、吗啉代-乙基、吡咯烷基、吡咯烷基-甲基、吡咯烷基-乙基、吡咯烷基-丙基、吡嗪基、喹啉-3-基、喹啉-5-基、咪唑基-乙基、吡啶基-甲基、苯乙基、四氢-吡喃-4-基、嘧啶基、呋喃基、异噁唑基-甲基、吡啶基、苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基、噻唑基-乙基和噻唑基-甲基；或R₅和R₆与R₅和R₆所连接的氮原子一起形成吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、咪唑基、3-氧代-哌嗪-1-基、[1，4]二氮杂庚环-1-基、吗啉代、3-氧代-哌嗪-1-基、1，1-二氧代-1λ⁶-硫代吗啉-4-基或吡唑基；

其中R₆的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基或R₅和R₆的组合可以任选被1-3个基团取代，所述基团独立地选自甲基-羰基、氨基-甲基、氨基-羰基、甲基-磺酰基、甲氧基、甲氧基-甲基、甲酰基、氟-乙基、羟基-乙基、氨基、二甲基氨基、羟基、甲基、乙基、乙酰基、异丙基、吡咯烷基、嘧啶基、吗啉代、吡啶基和苄基；其中R₆的任意烷基或亚烷基可以任选带有被选自-NHC(O)-或-C(O)NH-的二价基团替代的亚甲基；且其中R₆的任意烷基或亚烷基可以任选被1至2个独立地选自氨基、卤素、哌啶基和羟基的基团取代。

在另一个实施方案中，R₂选自氢、苯基、噻吩基、吡啶基、吡唑基、噻唑基、吡嗪基、萘基、呋喃基、苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基、异噻唑基、咪唑基和嘧啶基；其中R₂的任意芳基或杂芳基任选被1-3个基团取代，所述基团独立地选自甲基、异丙基、卤素、乙酰基、三氟甲基、硝基、1-羟基-乙基、1-羟基-1-甲基-乙基、羟基-乙基、羟基-甲基、氨基甲酰基、甲氧基、苄氧基、羧基、氨基、氰基、氨基-羰基、氨基-甲基和乙氧基。

在另一个实施方案中，R₄选自苯基、苄基、吡啶基和1-氧代-茚满-5-基；其中所述苯基、苄基、茚满基或吡啶基任选被以下取代：卤素、乙酰基、三氟甲基、环丙基-氨基-羰基、氮杂环丁烷-1-羰基、哌啶基-羰基、吗啉代、甲基-羰基、哌嗪基、甲基-磺酰基、哌啶基-磺酰基、4-甲基-哌嗪基-羰基、二甲基-氨基-乙基-氨基-羰基、吗啉代-羰基、吗啉代-甲基、氨基-羰基、丙基-氨基-羰基、羟基-乙基-氨基-羰基、吗啉代-乙基-氨基-羰基、4-乙酰基-哌嗪-1-羰基、4-氨基-羰基-哌嗪-1-羰基、苯基-羰基、吡咯烷基-1-羰基、丙基-羰基、丁基、异丙基-氧基-羰基、环己基-羰基、环丙基-羰基、甲基-磺酰基、二甲基-次膦酰基(phosphinoyl)、4-甲基-哌嗪基-磺酰基、1-氧代-茚满-5-基、氧杂环丁烷-3-磺酰基、氨基-磺酰基和四氢-吡喃-4-磺酰基。

下文中的实施例和表1、2和3中详细描述了优选的式I化合物。其它优选实例选自：N⁶-(4-甲亚磺酰基-苯基)-N²-甲基-N²-(四氢-吡喃-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；(4-甲磺酰基-苯基)-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；1-{4-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮；[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；氮杂环丁烷-1-基-{4-[2-(4-吗啉-4-基-哌啶-1-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-甲酮；1-(4-{2-[甲基-(1-甲基-哌啶-4-基)-氨基]-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基}-苯基)-乙酮；1-{4-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮；(4-甲磺酰基-苯基)-[2-(4-吗啉-4-基-哌啶-1-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；N⁶-(4-甲磺酰基-苯基)-N²-甲基-N²-(1-甲基-哌啶-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺；N²-甲基-N²-(1-甲基-哌啶-4-基)-N⁶-(4-吗啉-4-基-苯基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N²-甲基-N²-(1-甲基-哌啶-4-基)-N⁶-(4-吗啉-4-基-苯基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；[2-(2，2-二甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-(4-甲磺酰基-苯基)-胺；[2-(2，6-二甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-(4-甲磺酰基-苯基)-胺；[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-[2-(2-乙基-吗啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-[2-(2-氟甲基-吗啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；[2-(2，6-二甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-胺；[2-(2，6-二甲基-吗啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基]-[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-胺；[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-2-(3-甲基-哌啶-1-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；N⁶-(4-甲磺酰基-苯基)-N²-甲基-N²-吡啶-2-基甲基-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N²-甲基-N⁶-(4-吗啉-4-基-苯基)-N²-吡啶-2-基甲基-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；(2-氮杂庚环-1-基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基)-[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-胺；N²-环己基-N⁶-[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-N²-甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N⁶-(4-甲磺酰基-苯基)-N²-甲基-N²-(四氢-吡喃-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N⁶-(4-甲磺酰基-苯基)-N²-吡啶-2-基甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N²-环己基-N⁶-(4-甲亚磺酰基-苯基)-N²-甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；R-(4-甲亚磺酰基-苯基)-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；N⁶-(4-甲磺酰基-苯基)-N²-甲基-N²-吡啶-2-基甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；{4-[6-(4-甲磺酰基-苯基氨基)-2-(甲基-吡啶-2-基甲基-氨基)-嘌呤-9-基]-苯基}-甲醇；R-(4-甲磺酰基-苯基)-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；R-4-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯磺酰胺；和{4-[6-(4-甲磺酰基-苯基氨基)-2-(2-甲基-吗啉-4-基)-嘌呤-9-基]-苯基}-甲醇。

药理学与应用

本发明的化合物抑制Flt3受体酪氨酸激酶的活性并就此可用于治疗其中FLT3活性对疾病的病理和/或症状起作用的疾病或病症。

Flt3为III型受体酪氨酸激酶(RTK)家族的成员。Flt3(fms-样酪氨酸激酶)也称作FLk-2(胎儿肝激酶2)。已记载在成年人和儿童白血病中Flt3基因的表达异常，包括急性髓性白血病(AML)、具有三系脊髓发育不良的AML(AML/TMDS)、急性淋巴细胞白血病(ALL)和骨髓增生异常综合征(MDS)。已经在约35％的患有急性粒细胞白血病(AML)的患者中观察到Flt3受体活化突变，并与不良预后相关。最常见的突变包括近膜结构域内的框内复制，还有5-10％的患者在835位天冬酰胺上具有点突变。这些突变均与FIt3的酪氨酸激酶活性的组成型活化相关，且在没有配体存在下产生增殖和存活力信号。已经证实，表达突变型受体的患者的治愈机会减少。因此，存在过度活化的(突变的)Flt3激酶活性在人白血病和骨髓增生异常综合征中作用的累积证据。这促使本申请人寻找新的Flt3受体抑制剂，作为对这些目前药物疗法几乎无法提供可用性的患者和先前对目前可利用药物疗法和/或干细胞移植疗法失败的患者的可能的治疗手段。

白血病一般由骨髓、淋巴结、脾或其它血液和免疫系统器官中未成熟造血细胞DNA的获得性(非遗传性)基因损伤所致。其效果为：细胞成熟中的加速生长和阻滞，导致被称作“白血病性母细胞(leukemic blast)”的细胞蓄积，其不起正常血细胞作用；和不能产生正常髓细胞，导致红细胞(贫血)、血小板和正常白细胞缺乏。母细胞一般由骨髓产生且通常发育成成熟血细胞，约占所有髓细胞的1％。在白血病中，母细胞无法适当成熟并在骨髓中蓄积。在急性髓性白血病(AML)中，它们称作成髓细胞，而在急性淋巴细胞白血病中(ALL)，它们称作成淋巴细胞。另一种白血病为混合谱系(mixed-lineage)的白血病(MLL)。

术语“具有三系脊髓发育不良的AML(AML/TMDS)”涉及一种不常见的白血病形式，其特征在于急性白血病伴随造血机能不全、对诱导化疗的反应差以及与单纯骨髓增生异常综合征复发的倾向。

术语“骨髓增生异常综合征(MDS)”涉及一组血液病症，其中骨髓停止正常发挥功能，导致健康血细胞数量缺乏。与一种类型的血细胞大量产生的白血病相比，在MDS中任意且有时是所有类型的血细胞均受到影响。在美国每年至少有10,000个新病例出现。诊断为MDS的患者中高达三分之一发生急性髓性白血病。由于这一原因，该病有时称作白血病前期。骨髓增生异常综合征有时也称作脊髓发育不良性髓细胞生成异常或原始少突神经胶质细胞性白血病。当高数量的母细胞保留在髓中时，MDS也称作隐袭性(smoldering)白血病。

骨髓增生异常综合征如白血病，由骨髓中单细胞DNA的基因损伤所致。MDS患者中出现染色体中的某些异常。这些异常称作易位，它在一条染色体的部分断裂且与不同染色体的断裂部分连接时发生。在急性髓性白血病中通常发现相同的缺陷。然而，MDS与白血病不同，因为患者的所有血细胞均异常，且均来源于相同损害的干细胞。在白血病患者中，骨髓含有患病和健康血细胞的混合物。

目前，使用高剂量的细胞毒性化疗药如阿糖胞苷和柔红霉素治疗AML和晚期骨髓增生异常综合征。这种类型的疗法使得约70％的患者进入血液学症状缓解。然而，尽管长期给予化疗，但是在进入缓解的患者中超过一半后来复发。几乎所有最初未能进入缓解或在获得缓解后复发的患者最终死于白血病。骨髓移植可以治愈达50-60％的接受该手术的患者，但在患有AML或MDS的所有患者中仅有约三分之一适宜接受移植物。迫切需要新的和有效的药物来治疗使用标准疗法未能进入缓解的患者、后期复发的患者和对干细胞移植不适宜的患者。此外，可以将有效的新药物加入到标准疗法中，并合理预期其将使所有患者的诱导化疗改善。

FGFR3是由4种不同基因编码的结构相关的酪氨酸激酶受体家族的组成部分。在FGFR3基因的不同结构域中的特异性点突变导致受体组成型活化，并与常染色体显性骨骼病症、多发性骨髓瘤和较大比例的膀胱和宫颈癌相关(Cappellen等，Nature，23卷)。位于小鼠FGFR3基因中的活化突变以及小鼠中被活化的FGFR3靶向生长板软骨可导致侏儒症。与我们的观点类似，小鼠中FGFR3的靶向破裂导致长骨和脊椎生长过度。此外，20-25％的多发性骨髓瘤细胞含有t(4；14)(p16.3；q32.3)染色体易位，断裂点在4p16，位于FGFR3着丝点的50-100kb处。在多发性骨髓瘤的罕有病例中，已经发现了以往在骨骼病症中观察到的FGFR3活化突变，且始终伴随该染色体易位。近来，已经在大比例的膀胱癌细胞和某些宫颈癌细胞中鉴定了FGFR3错义体细胞突变(R248C、S249C、G372C和K652E)，且它们实际上与导致致死性骨骼发育不良即新生儿期致命性的侏儒症形式的生殖活化突变相同。本发明的化合物可以通过比目前疗法更有效而可对多发性骨髓瘤具有治疗效用、通过避免改变生活的膀胱切除术而对膀胱癌具有治疗效用，并对那些希望保护未来生育力的患者中的宫颈癌具有治疗效用。

本发明的化合物不仅可以用作抑制肿瘤的物质，例如在小细胞肺癌中，而且可以作为活性剂用于治疗非恶性增殖性病症如动脉粥样硬化、血栓形成、银屑病、硬皮病和纤维化，以及用于保护干细胞，例如对抗化疗剂如5-氟尿嘧啶的血毒素作用，以及用于哮喘。本发明的化合物尤其可以用于治疗对PDGF受体激酶抑制应答的疾病。

本发明的化合物在治疗由移植例如异源移植所致的病症中表现出有用的作用，所述病症尤其是组织排斥，如尤其是闭塞性细支气管炎(OB)，即异源肺移植物的慢性排斥。与未患OB的患者相反，患有OB的那些患者通常表现出在支气管肺泡灌洗液中PDGF浓度升高。

本发明的化合物还对与血管平滑肌细胞迁移和增殖相关的疾病有效(其中PDGF和PDGF-R通常也起作用)，如再狭窄和动脉粥样硬化。这些对体外和体内血管平滑肌细胞增殖或迁移的作用和结果可以通过给予本发明的化合物、还可以通过研究它对体内机械性损伤后血管内膜增厚的作用来证实。

神经营养蛋白受体的trk家族(trkA、trkB、trkC)促进神经元和非神经元组织的存活、生长和分化。TrkB蛋白在小肠和结肠中的神经内分泌型细胞、胰腺的α细胞、淋巴结和脾的单核细胞和巨噬细胞以及表皮的颗粒层中表达(Shibayama和Koizumi，1996)。TrkB蛋白的表达已经与维尔姆斯瘤和神经母细胞瘤的不利发展有关。此外，TkrB在癌性前列腺细胞中表达，而不在正常细胞中表达。Trk受体的信号传导途径下游涉及MAPK通过Shc、活化的Ras、ERK-1和ERK-2基因以及PLC-gammal转导途径的活化级联(Sugimoto等，2001)。

激酶c-Src传导许多受体的致癌信号。例如，EGFR或HER2/neu在肿瘤中的过量表达导致c-src的组成型活化，它是恶性细胞的特征，但在正常细胞中不存在。另一方面，c-src表达缺陷的小鼠表现出石骨症表型，表明了c-src在破骨细胞功能中的关键参与和在相关病症中的可能关联。

成纤维细胞生长因子受体3已显示对骨生长发挥负面调节作用并抑制软骨细胞增殖。致死性骨发育不全是由成纤维细胞生长因子受体3中的不同突变导致，且一种突变即TDII FGFR3具有活化转录因子Statl的组成型酪氨酸激酶活性，导致细胞周期抑制剂表达、生长抑制和骨发育异常(Su等，Nature，1997，386，288-292)。FGFR3还通常在多发性骨髓瘤型癌症中表达。

Lck在T-细胞信号传导中起作用。缺乏Lck基因的小鼠发育胸腺细胞的能力差。Lck作为T-细胞信号传导正性活化剂的功能提示：Lck抑制剂可以用于治疗自身免疫疾病，如类风湿性关节炎。

按照上述，本发明进一步提供了在需要治疗的对象中预防或治疗上述疾病或病症的方法，该方法包括对所述对象给予治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐。就上述任意用途而言，所需剂量将根据给药方式、所治疗的具体疾病和所需的效果而改变。

给药和药物组合物

一般而言，通过本领域中公知的任意常用和可接受的方式、单独或与一种或多种治疗剂联用、以治疗有效量给予本发明的化合物。治疗有效量可以根据对象的疾病严重程度、年龄和相关健康情况、所用化合物的功效和其它因素的不同而宽泛地改变。一般而言，约0.03-2.5mg/kg体重的每日剂量显示获得全身性满意的效果。在较大哺乳动物、例如人中适合的每日剂量在约0.5mg-约100mg的范围内，例如每天至多分4次以分剂量或以缓释形式便利地给药。用于口服给药的合适单位剂型包含约1-50mg活性组分。

本发明的化合物可以作为药物组合物通过任意常规途径给药，特别是经肠给药，例如口服，例如以片剂或胶囊形式；或通过胃肠外给药，例如以可注射溶液或混悬液形式；通过局部方式，例如以洗剂、凝胶、软膏剂或霜剂形式，或以鼻用或栓剂形式。包含游离形式或药学上可接受的盐形式的本发明化合物与至少一种药学上可接受的载体或稀释剂的药物组合物可以以常规方式、通过混合、制粒或包衣法制备。例如，口服组合物可以为片剂或明胶胶囊，它们包含活性组分以及：a)稀释剂，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨醇、纤维素和/或甘氨酸；b)润滑剂，例如二氧化硅、滑石、硬脂酸、其镁或钙盐和/或聚乙二醇；用于片剂的还有c)粘合剂，例如硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮；如果需要，还有d)崩解剂，例如淀粉、琼脂、藻酸或其钠盐或泡腾混合物；和/或e)吸收剂、着色剂、矫味剂和甜味剂。可注射组合物可以为含水等渗溶液或混悬液，且栓剂可以由脂肪乳剂或混悬液制备。组合物可以是灭菌的和/或含有佐剂，如防腐剂、稳定剂、湿润剂或乳化剂、溶解促进剂、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂。此外，它们还可以含有其它治疗上有价值的物质。用于透皮施用的合适的制剂包括有效量的本发明化合物与载体。载体可以包括可吸收的药学上可接受的溶剂以有助于通过宿主皮肤。例如，透皮装置为绷带形式，包括背衬部分(backing member)、含有化合物任选以及载体的贮器、任选的速率控制屏障以以受控和预定速率在延长时期内将所述化合物递送至宿主皮肤，以及使装置与皮肤固定的手段。还可以使用基质透皮制剂。局部用于例如皮肤和眼的合适的制剂优选为本领域众所周知的水溶液、软膏剂、霜剂或凝胶。这类制剂可以含有增溶剂、稳定剂、张力增强剂、缓冲剂和防腐剂。

本发明的化合物可以与一种或多种治疗剂、包括放疗和骨髓移植联合(药物组合)、以治疗有效量给予。可以与本发明化合物联用的化合物的非限制性实例为：细胞毒性化疗药，如阿糖胞苷、柔红霉素、环磷酰胺、VP-16、米托蒽醌、柔红霉素、阿糖胞苷、甲氨蝶呤、长春新碱、6-硫鸟嘌呤、6-巯基嘌呤、紫杉醇等；抗血管生成药，例如但不限于环加氧酶抑制剂，如塞来昔布；免疫调节或抗炎物质，例如环孢霉素、雷帕霉素或子囊霉素，或其免疫抑制剂类似物，例如环孢霉素A(CsA)、环孢霉素G、FK-506、雷帕霉素或相当的化合物；皮质类固醇；环磷酰胺；硫唑嘌呤；甲氨蝶呤；白瑞夸尔；来氟洛米；咪唑立宾；麦酚酸；麦考酚酸吗啉乙酯；15-脱氧精胍菌素；免疫抑制剂抗体，尤其是白细胞受体的单克隆抗体，例如MHC、CD2、CD3、CD4、CD7、CD25、CD28、B7、CD45、CD58或其配体，或其它免疫调节化合物，如CTLA41g。此外，本发明的化合物可以与其它信号转导抑制剂或其它靶向癌基因的药物联用以获得显著的协同疗法。

当将本发明的化合物与其它疗法联合给予时，共同给予的化合物的剂量当然根据共同使用的药物的类型、所用的具体药物、所治疗的疾病等而改变。

本发明还提供了药物组合，例如药盒，包括：a)第一种活性剂，为本文披露的游离形式或药学上可接受的盐形式的本发明化合物；和b)至少一种活性助剂。该药盒可以包括给药说明书。

本文所用的术语“共同给药”或“联合给药”等用以包括对单一患者给予所选择的治疗剂，且用以包括活性剂不一定通过相同给药途径或在同时给予的治疗方案。

本文所用的“药物组合”指的是混合或合并一种以上活性组分而得到的产品，且包括固定和不固定的活性组分组合。术语“固定组合”指的是将活性组分、例如式I化合物和活性助剂以单一实体或剂量的形式同时对患者给药。术语“不固定的组合”指的是将活性组分、例如式I化合物和活性助剂作为分开的实体同时、共同或没有特定时间限制依次对患者给药，其中这类给药在患者体内提供了治疗有效水平的2种化合物。后者也适用于鸡尾酒疗法(cocktail therapy)，例如给予3种或3种以上活性组分。

制备本发明化合物的方法

本发明还包括制备本发明化合物的方法。在所述反应中，当在终产物中需要它们时，可能有必要保护反应官能基，例如羟基、氨基、亚氨基、硫代或羧基，以避免它们不必要地参与反应。可以按照标准实践使用常用的保护基，例如参见T.W.Greene和P.G.M.Wuts：《有机化学中的保护基》，John Wiley和Sons，1991。其中R5为氢的式I化合物可以通过进行如下的反应方案I而制备：

                      反应方案I

其中R₁、R₂、R₃和R₄如发明概述中对式I所定义，PG表示氮保护基(例如四氢-吡喃-2-基等)且Z表示卤素，例如碘或氯，优选氯。

式3化合物可以通过使式2化合物与NHR₃R₄在合适的溶剂(例如乙醇、丁醇、THF等)存在下、使用合适的碱(例如DIEA、Na₂CO₃等)反应而制备。式4化合物可以通过使式3化合物与R₁H在合适的溶剂(例如DME、乙醇、丁醇、THF等)、任选合适的催化剂(例如钯催化剂等)存在下、使用合适的碱(例如DIEA、Na₂CO₃等)反应而制备。式I化合物可以通过首先在合适的催化剂(例如p-TSA等)存在下、在合适的溶剂(例如MeOH等)中除去保护基(PG)而制备。反应继续进行，使脱保护的式4化合物与其中Y代表卤素、例如碘、溴和氯的R₂Y反应。反应在约70-约110℃的温度下、使用合适的碱(例如磷酸钾等)、在合适的溶剂(例如DMF、二噁烷等)存在下进行，并可以耗时达24小时完成。

式I化合物可以通过进行如下的反应方案II制备：

反应方案II

其中R₁、R₂、R₃和R₄如发明概述中对通式I所定义，PG表示氮保护基(例如四氢-吡喃-2-基等)且Z表示卤素，例如碘或氯，优选氯。

式3化合物可以通过使式2化合物与NHR₃R₄在合适的溶剂(例如乙醇、丁醇、THF等)存在下、使用合适的碱(例如DIEA、Na₂CO₃等)反应而制备。式5化合物可以通过首先在合适的催化剂(例如p-TSA等)存在下、在合适的溶剂(例如MeOH等)中除去保护基(PG)而制备。反应继续进行，使脱保护的式3化合物与R₂B(OH)₂在合适的溶剂(例如二噁烷、二氯甲烷等)和合适的催化剂(例如乙酸铜等)存在下、使用合适的碱(例如吡啶、TEA等)反应。反应在约20-约80℃的温度下进行，且可以耗时达168小时完成。式I化合物可以通过使式5化合物与R₁H在合适的溶剂(例如丁醇、乙醇等)存在下、使用合适的碱(例如DIEA、Na₂CO₃等)反应而制备。

式I化合物可以通过进行如下的反应方案III制备：

反应方案III

其中R₁、R₂、R₃和R₄如发明概述中对通式I所定义且Z表示卤素，例如碘或氯，优选氯。

式7化合物可以通过使式6化合物与R₂B(OH)₂在合适的溶剂(例如二噁烷、二氯甲烷等)和合适的催化剂(例如乙酸铜等)存在下、使用合适的碱(例如吡啶、TEA等)反应而制备。反应在约20-约80℃的温度下进行，且可耗时达168小时完成。式5化合物可以通过使式7化合物与NHR₃R₄在合适的溶剂(例如DME、乙醇、丁醇、THF等)存在下、任选使用合适的催化剂(例如钯催化剂等)并使用合适的碱(例如DIEA、Na₂CO₃等)反应而制备。式I化合物可以通过使式5化合物与R₁H在合适的溶剂(例如乙醇、丁醇、THF等)存在下、使用合适的碱(例如DIEA、Na₂CO₃等)反应而制备。

制备本发明化合物的其它方法

通过使游离碱形式的化合物与药学上可接受的无机酸或有机酸反应，可以将本发明的化合物制备成药学上可接受的酸加成盐。或者，通过使游离酸形式的化合物与药学上可接受的无机碱或有机碱反应，可以制备本发明化合物的药学上可接受的碱加成盐。或者，可以使用原料或中间体的盐制备本发明化合物的盐形式。

本发明化合物的游离酸或游离碱形式可以分别由相应的碱加成盐或酸加成盐形式制备。例如，通过用合适的碱(例如氢氧化铵溶液、氢氧化钠等)处理，可以将酸加成盐形式的本发明化合物转化成相应的游离碱。通过用合适的酸(例如盐酸等)处理，可以将碱加成盐形式的本发明化合物转化成相应的游离酸。

未氧化形式的本发明化合物可以由本发明化合物的N-氧化物、在0-80℃和合适的惰性有机溶剂(例如乙腈、乙醇、二噁烷水溶液等)中用还原剂(例如硫、二氧化硫、三苯膦、硼氢化锂、硼氢化钠、三氯化磷、三溴化磷等)处理而制备。

本发明化合物的前体药物衍生物可以通过本领域技术人员公知的方法制备(例如进一步的详细描述参见Saulnier等，(1994)，Bioorganic andMedicinal Chemistry Letters，第4卷，p.1985)。例如，通过使未衍生的本发明化合物与合适的氨基甲酰化试剂(例如1，1-acyloxyalkylcarbanochloridate、碳酸对-硝基苯基酯等)反应，可以制备合适的前体药物。

本发明化合物的被保护的衍生物可以通过本领域技术人员公知的方式制备。适用于生成保护基并将其除去的技术的详细描述可见于T.W.Greene，《有机化学中的保护基》第3版，John Wiley和Sons，Inc.，1999。

在本发明方法的过程中，可以便利地将本发明的化合物制成或使其形成溶剂合物(例如水合物)。通过使用有机溶剂如二氧芑、四氢呋喃或甲醇从水/有机溶剂混合物中重结晶，可以便利地制备本发明化合物的水合物。

本发明的化合物可以如下制备成它们的单独的立体异构体：使化合物的外消旋混合物与旋光活性拆分剂反应，生成非对映异构体化合物对，分离非对映体并回收光学纯的对映体。尽管可以使用本发明化合物的共价非对映异构衍生物进行对映体拆分，但是优选可离解的复合物(例如结晶非对映异构盐)。非对映体具有不同的物理特性(例如熔点、沸点、溶解度、反应性等)且可容易地通过利用这些差异进行分离。非对映体可以通过色谱法或优选通过基于溶解度差异的分离/拆分技术分离。然后通过任意不会导致外消旋化的实用方式回收光学纯的对映体与拆分剂。适用于从外消旋混合物中拆分化合物的立体异构体的技术的更详细描述可见于Jean Jacques，Andre Collet，Samuel H.Wilen，《对映体、外消旋物与拆分》，John Tiley和Sons，Inc.，1981。

概况而言，式I化合物可以通过包括下列步骤的方法制备：

(a)反应方案I、II和III的那些方法，例如按照反应方案II或III使式5化合物与R₁H偶联；和

(b)任选将本发明的化合物转化成药学上可接受的盐；

(c)任选将本发明化合物的盐形式转化成非盐形式；

(d)任选将本发明化合物的未氧化形式转化成药学可接受的N-氧化物；

(e)任选将本发明化合物的N-氧化物形式转化成其未氧化形式；

(f)任选从异构体混合物中拆分本发明化合物的单独的异构体；

(g)任选将本发明的未衍生化合物转化成药学上可接受的前体药物衍生物；和

(h)任选将本发明化合物的前体药物衍生物转化成其未衍生形式。

就原料的生产未特别描述而言，这些化合物是已知的或可以按照与本领域中公知的方法类似的方式或如下文实施例中披露的方法制备。

本领域技术人员将理解：上述转化仅是制备本发明化合物方法的代表且可以类似地使用其它众所周知的方法。

                            实施例

下列实施例提供了代表性化合物制备的详细描述，但其供以解释而非限定本发明。

                            实施例1

{4-[2-(4-氨基-环己基氨基)-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-哌啶-1-基-甲酮

向0℃的哌啶(18.0g，211.8mmol)在二氯甲烷(360mL)中的溶液中分几部分谨慎加入4-硝基苯甲酰氯(18.6g，100mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌10分钟，此后用HCl(1％，2×200mL)溶液和水(300mL)洗涤并用Na₂SO₄干燥。在蒸发溶剂后，得到(4-硝基-苯基)-哌啶-1-基-甲酮(23.2g，99％)并直接用于氢化(含1.0g 10％Pd/C的400mL乙醇)。在过滤催化剂并蒸发乙醇后，得到(4-氨基-苯基)-哌啶-1-基-甲酮(19.6g，96％)。

将2，6-二氯嘌呤(18.80g，100mmol)、3，4-二氢-2H-吡喃(12.62g，150mmol)、对甲苯磺酸一水合物(1.90g，10mmol)和无水二氯甲烷(200mL)的混合物在室温下搅拌4小时。过滤后，将其用Na₂CO₃(10％水溶液，100mL)、水(100mL)洗涤并用Na₂SO₄干燥。蒸发溶剂，随后在乙酸乙酯(5mL)和己烷(60mL)中研磨，诱发沉淀，经过滤，得到2，6-二氯-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(24.01g，88％)。

将2，6-二氯-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(5.44g，20mmol)、(4-氨基-苯基)-哌啶-1-基-甲酮(4.08g，20mmol)、二异丙基乙胺(24mmol)和乙醇(100mL)的混合物回流24小时。然后加入反式-1，4-环己烷二胺(6.84g，60mmol)和二异丙基乙胺(24mmol)，并将该混合物再回流24小时。用乙酸乙酯(250mL)和水(200mL)处理蒸发乙醇后得到的油状残余物。用乙酸乙酯(2×100mL)萃取水相，用Na₂SO₄干燥合并的有机相。在蒸发后，在55℃用在甲醇(100mL)中的对甲苯磺酸一水合物(3.80g，20mmol)将获得的油状残余物处理4小时并监测反应，直到完成脱保护。

加入二异丙基乙胺以中和该混合物。对油状残余物进行柱色谱(EtOAc∶MeOH＝9∶1，然后CH₂Cl₂∶MeOH(含有～7N氨)＝9∶1)，得到2-(4-氨基-环己基氨基)-6-[4-(哌啶-1-羰基)-苯基氨基]-9H-嘌呤(6.50g，75％)。

将含有如上制备的2-(4-氨基-环己基氨基)-6-[4-(哌啶-1-羰基)-苯基氨基]-9H-嘌呤(86.8mg，0.2mmol)、碘化铜(I)(38.2mg，0.2mmol)和磷酸钾(170mg，0.8mmol)的混合物的反应瓶脱气并重新充填干燥的氮气。加入在DMF(700μL)中的N’N’-二甲基乙二胺(35.3mg，43μL，0.4mmol)和碘苯(40.8mg，0.2mmol)并将该混合物在88℃搅拌过夜。加入AcOH-MeOH(1∶10，1.5mL)以中和该混合物，随后通过注射器式滤器过滤。进行柱色谱(EtOAc∶MeOH＝9∶1，然后CH₂Cl₂∶MeOH(含有～7N氨)＝9∶1)，得到 {4-[2-(4-氨基-环 己基氨基)-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-哌啶-1-基-甲酮，为固体；¹HNMR 400MHz(CD₃OD)d 8.03(s，1H)，7.90-7.95(m，2H)，7.75-7.65(m，2H)，7.50-7.42(m，2H)，7.38-7.30(m，3H)，3.80-3.50(m，5H)，2.83-2.73(m，1H)，2.15-2.05(m，2H)，1.95-1.90(m，2H)，1.70-1.40(m，6H)，1.40-1.20(m，4H)；MSm/z 511.3(M+1)。

                            实施例2

[4-(2-氯-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]-哌啶-1-基-甲酮

将2，6-二氯-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(10g，36.6mmol)、(4-氨基-苯基)-哌啶-1-基-甲酮(7.48g，36.6mmol)和二异丙基乙胺(9.5g，73.5mmol)在乙醇(110mL)中的混合物回流过夜。将该混合物冷却至室温并在真空中浓缩，得到[4-(2-氯-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]-哌啶-1-基-甲酮(14.7g，91％)，为暗黄色固体。

将[4-(2-氯-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]-哌啶-1-基-甲酮(10g，22.7mmol)和对-甲苯磺酸一水合物(0.86g，4.5mmol)在甲醇(100mL)中的混合物在50℃搅拌2小时。将该混合物冷却至室温并悬浮于甲醇中。收集沉淀并用乙酸乙酯洗涤，得到[4-(2-氯-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]-哌啶-1-基-甲酮(7.69g，95％)，为浅黄色固体。

向活化的分子筛(4.2g)在二噁烷(35mL)中的混悬液中加入[4-(2-氯-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]-哌啶-1-基-甲酮(4g，11.2mmol)、苯基代硼酸(2.73g，22.4mmol)、乙酸铜(3.05g，16.8mmol)和吡啶(3.54g，44.8mmol)。将该混合物在室温下搅拌过夜且然后在40℃加热5小时。将该混合物冷却至室温，用THF(50mL)稀释，通过硅藻土过滤并用甲醇洗涤。在减压下浓缩滤液并通过快速柱色谱法纯化残余物(MeOH/二氯甲烷＝1/50)，得到 [4-(2-氯-9-苯 基-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]-哌啶-1-基-甲酮(3.89g，80％)，为黄色固体；¹HNMR 400MHz(CDCl₃)d 8.17(s，1H)，8.06(s，1H)，7.93(d，2H，J＝8.8Hz)，7.69(d，2H，J＝8.8Hz)，7.58(d，2H，J＝8Hz)，7.49(t，3H，J＝7.2Hz)，7.41(d，1H，J＝7.2Hz)，2.93-2.90(m，4H)，2.18-1.96(m，2H)，1.58-1.53(m，4H)，1.35-1.29(m，2H)；MS m/z 433.2(M+1)。

                              实施例3

{4-[2-(3-二甲基氨基-吡咯烷-1-基)-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-哌啶-1-基-甲酮

将[4-(2-氯-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]-哌啶-1-基甲酮(129mg，0.3mmol)和3-(二甲氨基)-吡咯烷(103mg，0.9mmol)在1-丁醇(0.6mL)中的混合物在120℃搅拌12小时。将该混合物冷却至室温并在减压下浓缩。通过快速柱色谱法纯化残余物(MeOH/二氯甲烷＝1/50)，得到 {4-[2-(3-二甲基氨 基-吡咯烷-1-基)-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-哌啶-1-基-甲酮(73.3mg，49％)，为暗粉红色固体；¹H NMR 400MHz(MeOH-d₄)d 8.22(s，1H)，7.95(d，2H，J＝8.4Hz)，7.83(d，2H，J＝7.6Hz)，7.53(t，2H，J＝7.6Hz)，7.43(d，1H，J＝7.6Hz)，7.40(d，2H，J＝8.8Hz)，4.04-3.96(m，1H)，3.94-3.83(m，1H)，3.70-3.36(m，6H)，2.95(s，6H)，2.51-2.46(m，1H)，2.25-2.19(m，1H)，1.78-1.47(m，6H)；MS m/z 511.3(M+1)。

                          实施例4

4-(2-咪唑-1-基-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]哌啶-1-基-甲酮

向石英反应容器(2mL)中加入在NMP(0.3mL)中的[4-(2-氯-9-苯基-9H-嘌呤-6-基-氨基)-苯基]-哌啶-1-基甲酮(43mg，0.1mmol)和咪唑(20.4mg，0.3mmol)。然后将该反应容器放入微波反应器的腔内(Emrys优化器)并在200℃照射30分钟。通过制备型HPLC纯化粗反应混合物，得到 4-(2-咪唑 -1-基-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]哌啶-1-基-甲酮的三氟乙酸盐(18.7mg)，为浅黄色固体；¹H NMR 400MHz(MeOH-d₄)d 9.52(s，1H)，8.58(s，1H)，8.26(s，1H)，7.91(d，2H，J＝6.8Hz)，7.86(d，2H，J＝8.8Hz)，7.65(m，3H)，7.56(d，1H，J＝7.6Hz)，7.51(d，2H，J＝8.8Hz)，3.70-3.49(m，4H)，1.77-1.60(m，6H)；MS m/z 465.3(M+1)。

                      实施例5

{4-[9-苯基-2-(喹啉-3-基氨基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-哌啶-1-基-甲酮

向试管内加入[4-(2-氯-9-苯基-9H-嘌呤-6-基氨基)-苯基]-哌啶-1-基甲酮(43mg，0.1mmol)、3-氨基喹啉(21.6mg，0.15mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(7mg，0.008mmol)、2-(二-叔-丁基膦基)联苯(8.9mg，0.03mmol)、磷酸钾(100mg，0.47mmol)，抽真空并反充氮气。在氮气下加入DME(0.7mL)。将该反应混合物在85℃搅拌16小时。将所得浅棕色混悬液冷却至室温并通过制备型HPLC纯化，得到 {4-[9-苯基-2-(喹啉-3-基氨基)-9H-嘌呤-6-基 氨基]-苯基}-哌啶-1-基-甲酮的三氟乙酸盐(24.5mg)，为黄色固；¹H NMR400MHz(MeOH-d₄)d 9.29(d，1H，J＝2.4Hz)，9.13(d，1H，J＝2.0Hz)，8.18(s，1H)，7.92(d，1H，J＝8.4Hz)，7.81-7.70(m，7H)，7.58(t，2H，J＝8.0Hz)，7.48(t，1H，J＝7.2Hz)，7.30(d，2H，J＝8.4Hz)，3.87-3.35(m，4H)，1.80-1.43(m，6H)；MS m/z 541.3(M+1)。

                          实施例6

N²-(4-氨基-环己基)-N⁶-(4-吗啉-4-基-苯基)-9-苯基-9H-嘌呤-2，6-二胺

在150℃和真空下将分子筛(4A，12.0g)干燥过夜并冷却至室温。然后加入2-氟-6-氯-嘌呤(6.0g，35mmol)、苯基代硼酸(8.3g，70mmol)、乙酸铜(9.0g，52mmol)和三乙胺(19mL，140mmol)并在干燥二噁烷(100mL)中混合。以连接的干燥管将该反应混合物在室温下搅拌2天。在反应完成后，将该反应混合物在二氯甲烷(200mL)中稀释，通过硅藻土垫过滤并用二氯甲烷(200mL)洗涤。合并有机相并通过旋转蒸发除去溶剂。通过硅胶快速柱色谱法纯化粗产物，用己烷/乙酸乙酯(2∶1)作为洗脱剂，得到2-氟-6-氯-9-苯基-9H-嘌呤(2.1g，24％)，为淡黄色固体，MS m/z 249.1(M+1)。

将2-氟-6-氯-9-苯基-9H-嘌呤(50mg，0.20mmol)、4-吗啉-4-基-苯基胺(39mg，0.22mmol)和二异丙基乙胺(35μL，0.2mmol)在1-丁醇(0.4mL)中混合。将该反应在80℃搅拌2小时，此后加入反式1，4-环己烷二胺(68mg，0.6mmol)和二异丙基乙胺(70μL，0.4mmol)。将该反应混合物在110℃搅拌过夜。通过旋转蒸发除去溶剂。将粗混合物重新溶于DMSO并通过HPLC纯化，得到 N ² -(4-氨基-环己基)-N ⁶ -(4-吗啉-4-基-苯基)-9-苯基-9H-嘌呤-2，6- 二胺的三氟乙酸盐，为白色粉末；¹H NMR 400MHz(DMSO-d₆)δ9.29(s，1H)，8.23(1 1H)，7.84(t，4H，J＝9.4Hz)，7.51(t，2H，J＝8.0Hz)，7.35(t，1H，J＝7.2Hz)，6.84(d，2H，J＝9.2Hz)，6.48(d，1H，J＝7.2Hz)，3.71(t，4H，J＝4.8Hz)，3.57(s，1H)，3.01(t，4H，J＝4.8Hz)，1.93(d，2H，J＝12Hz)，1.77(d，2H，J＝11.2Hz)，1.24(m，4H)，0.90(t，1H，J＝7.2Hz)；MS m/z 485.3(M+1)。

                          实施例7

N²-(4-氨基-环己基)-N⁶-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-9-苯基-9H-嘌呤-2，6-二胺

将1-氯-3-硝基-苯(1.0g，7mmol)与1-甲基-哌嗪(2.0mL)混合并将该反应加盖，在190℃搅拌2小时。反应后，通过旋转蒸发除去过量的1-甲基-哌嗪，得到粗产物，为黄色油状物。通过硅胶快速柱纯化粗产物，得到1.2g1-甲基-4-(3-硝基-苯基)-哌嗪(产率78％)。

将1-甲基-4-(3-硝基-苯基)-哌嗪(1.2g，5.4mmol)溶于甲醇(50mL)并向该溶液中加入Pd/C(5％，120mg)。将氢气囊与烧瓶连接。将该溶液在室温下搅拌过夜。在反应完成后，过滤Pd/C，收集滤液且通过旋转蒸发浓缩，得到3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基胺。

将2-氟-6-氯-9-苯基-9H-嘌呤(50mg，0.20mmol)、3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基胺(42mg，0.22mmol)和二异丙基乙胺(35μL，0.2mmol)在1-丁醇(0.4mL)中混合。将该反应在80℃搅拌2小时，此后加入反式1，4-环己烷二胺(68mg，0.6mmol)和二异丙基乙胺(70μL，0.4mmol)。将该反应混合物在110℃搅拌过夜。通过旋转蒸发除去溶剂，将粗产物重新溶于DMSO并通过HPLC纯化，得到 N ² -(4-氨基-环己基)-N ⁶ -[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-9- 苯基-9H-嘌呤-2，6-二胺，为白色粉末；¹H NMR 400MHz(DMSO-d₆)δ9.12(s，1H)，8.16(s，1H)，7.78(d，2H，J＝6.0Hz)，7.58(d，1H，J＝7.6Hz)，7.42(m，2H)，7.24(m，2H)，7.00(t，1H，J＝8.0Hz)，6.48(m，2H)，3.53(s，1H)，3.25(m，4H)，3.01(t，4H，J＝4.8Hz)，2.09(s，3H)，1.74(m，2H)，1.66(s，2H)，0.92(m，4H)，0.79(t，1H，J＝7.2Hz)；MS m/z 498.3(M+1)。

                          实施例8

1-{4-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮

将1-(4-氨基-苯基)-乙酮(1.0g，7.4mmol)与2-氟-6-氯-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(1.90g，7.4mmol)、二异丙基乙胺(1.54mL，8.9mmol)和正丁醇50mL混合。将该反应在95℃搅拌14小时。在冷却至室温并除去溶剂后，通过使用MeOH/DCM(5％∶95％)的快速色谱法纯化粗产物，得到1-{4-[2-氟-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮，为白色固体2.49g。

将1-{4-[2-氟-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮(100mg，0.28mmol)与2-甲基-吗啉HCl盐(58mg，0.45mmol)、二异丙基乙胺(121μL，0.70mmol)和5mL正丁醇混合。将该反应在100℃搅拌14小时。在冷却并除去溶剂后，通过使用EA/己烷(1∶1)的快速色谱法纯化粗产物，得到1-{4-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮，为黄色固体115mg。

将1-{4-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮(115mg，0.26mmol)溶于10mL乙醇并与200μLTFA混合。将该反应在60℃搅拌2小时。在冷却至室温并完全除去溶剂和TFA后，将粗产物与碘化铜(I)(50mg，0.26mmol)和磷酸钾(220mg，0.8mmol)混合并脱气，重新填充干燥的氮气。加入在DMF(4mL)中的N′，N′-二甲基乙二胺(46mg，0.52mmol)和碘-噻唑(53mg，0.26mmol)，并将该混合物在90℃搅拌14小时。在冷却至室温后，加入AcOH-MeOH(1∶10，1.6mL)以中和该混合物，随后通过注射器式滤器过滤。在除去溶剂后，将粗产物溶于DMSO并通过制备型HPLC纯化，得到浅色固体1-{4-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮71mg。¹H NMR 600MHz(DMSO-d₆)δ10.21(s，1H)，9.26(d，1H，J＝2.2)，8.60(s，1H)，8.27(d，1H，J＝2.0Hz)，8.07(d，2H，J＝8.8Hz)，7.95(d，2H，J＝8.8Hz)，4.50(dd，2H，J＝3.0Hz)，3.95(dd，1H，J＝2.6Hz)，3.59(m，2H)，3.04(m，1H)，2.72(m，1H)，2.54(s，3H)，1.22(d，3H，J6.2Hz)；MS m/z 436.2(M+1)。

                          实施例9

(4-甲磺酰基-苯基)-[2-(4-吗啉-4-基-哌啶-1-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺

将4-甲磺酰基-苯基胺(1.27g，7.4mmol)与2-氟-6-氯-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(1.90g，7.4mmol)、二异丙基乙胺(1.54mL，8.9mmol)和正丁醇50mL混合。将该反应在95℃搅拌14小时。在冷却至室温并除去溶剂后，通过使用MeOH/DCM(7％∶93％)的快速色谱法纯化粗产物，得到[2-氟-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基]-(4-甲磺酰基-苯基)-胺，为白色固体2.75g。

将[2-氟-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基]-(4-甲磺酰基-苯基)-胺(110mg，0.28mmol)与4-哌啶-4-基-吗啉(76mg，0.45mmol)、二异丙基乙胺(121μL，0.70mmol)和5mL正丁醇混合。将该反应在100℃搅拌14小时。在冷却并除去溶剂后，通过使用EA/己烷(6∶4)的快速色谱法纯化粗产物，得到(4-甲磺酰基-苯基)-[2-(4-吗啉-4-基-哌啶-1-基)-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基]胺，为黄色固体145mg。

将(4-甲磺酰基-苯基)-[2-(4-吗啉-4-基-哌啶-1-基)-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基]-胺(145mg，0.26mmol)溶于10mL乙醇并与200μL TFA混合。将该反应在60℃搅拌2小时。在冷却至室温并完全除去溶剂和TFA后，将粗产物与碘化铜(I)(50mg，0.26mmol)和磷酸钾(220mg，0.8mmol)混合、脱气并重新充添干燥的氮气。加入在DMF(4mL)中的N′，N′-二甲基乙二胺(46mg，0.52mmol)和碘-噻唑(53mg，0.26mmol)并将该混合物在90℃搅拌14小时。在冷却至室温后，加入AcOH-MeOH(1∶10，1.6mL)以中和该混合物，随后通过注射器式滤器过滤。在除去溶剂后，将粗产物溶于DMSO并通过制备型HPLC纯化，得到白色固体(4-甲磺酰基-苯基)-[2-(4-吗啉-4-基-哌啶-1-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺95mg。¹H NMR 400MHz(DMSO-d₆)δ10.44(s，1H)，9.41(s，1H)，8.72(s，1H)，8.40(d，1H，J＝2.4Hz)，8.31(d，2H，J＝8.8Hz)，8.01(d，2H，J＝8.0Hz)，4.86(d，2H，J＝12.8Hz)，3.71(s，4H)，3.52(m，4H)，3.33(s，3H)，3.15(t，2H，J＝12.0Hz)，2.06(d，2H，J＝11.2Hz)，1.55(m，2H)；MS m/z 541.3(M+1)。

                          实施例10

N⁶-(4-甲磺酰基-苯基)-N²-吡啶-2-基甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺

将2-氟-6-氯嘌呤(17.26g，100mmol)、3，4-二氢-2H-吡喃(12.62g，150mmol)和对甲苯磺酸一水合物(1.90g，10mmol)的混合物溶于无水二氯甲烷(200mL)并在室温下搅拌4小时。过滤该反应混合物，用Na₂CO₃(10％水溶液，100mL)和水(100mL)洗涤并用Na₂SO₄干燥有机层。蒸发溶剂，得到油状物，将其与乙酸乙酯(10mL)和己烷(60mL)一起研磨以诱发沉淀形成。通过过滤收集产物2-氟-6-氯-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤。

将2-氟-6-氯-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(2.56g，10mmol)、4-(甲硫基)苯胺(1.39g，10mmol)和DIEA(1.93g，15mmol)在乙醇(20mL)中的混合物在78℃搅拌过夜。将该混合物冷却至室温。蒸发溶剂，随后进行柱色谱(EtOAc/DCM 10％至30％)，得到[2-氟-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基]-(4-甲硫基-苯基)-胺，为白色固体。

向上述获得的化合物(3.33g，9.25mmol)在DCM(10mL)中的溶液中逐步缓慢地加入3-氯过氧苯甲酸(6.22g，最大77％，27.8mmol)(在冰浴中)。在添加后，将该混合物在室温下再搅拌2小时。用DCM(50ml)稀释该混合物并用饱和Na₂S₂O₃(50ml)和饱和NaHCO₃(50mL×2)洗涤混悬液，直到有机相澄清。用水(50ml)和盐水(50ml)进一步洗涤有机层并用MgSO₄干燥。蒸发溶剂，随后进行柱色谱(EtOAc/DCM 30％至70％)，得到[2-氟-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基]-(4-甲基磺酰基-苯基)-胺，为浅黄色固体。

将2-氟嘌呤底物(4.6g，11.8mmol)和2-(氨基甲基)吡啶(15.0g)的混合物在84℃的油浴中加热过夜。使该混合物分配在乙酸乙酯(200mL)与水(200mL)之间。用NH₄Cl(2×150mL，饱和水溶液)和水(200mL)洗涤有机相并用Na₂SO₄干燥。蒸发溶剂，得到粗产物，将其不经进一步纯化用于下一步反应。

在60℃将上述获得的化合物(1.93g，4.02mmol)与对甲苯磺酸一水合物(950mg，5.0mmol)在甲醇(20mL)中搅拌至不再检测出原料(通过TLC或LC-MS监测)。加入三乙胺(1.0mL)。随该反应混合物冷却至室温，沉淀形成，通过过滤收集，得到脱保护的产物。

将脱保护的2，6-二取代的嘌呤(1.98g，5.0mmol)、CuI(475mg，2.50mmol)和K₃PO₄(3.18g，15mmol)在烧瓶中合并(反充氮气)。加入在DMF(9.0mL)中的反式-N，N′-二甲基环己烷-1，2-二胺(355mg，2.50mmol)和4-溴噻唑(932mg，88％纯，5.0mmol)并将该混合物在88℃搅拌过夜。在将该混合物冷却至室温后，加入乙酸(1.0mL)并将该混合物通过注射器式滤器过滤(用DMF洗涤)。通过反相制备型LC-MS纯化滤液(乙腈/水/TFA梯度10-90％CH₃CN，7.5分钟内，Ultro 1205μM C18Q，75×30mmID)。将所收集的产物的水/MeCN溶液蒸发以除去乙腈。加入NaHCO₃(饱和水溶液)以使pH升至9。用DCM萃取产物并用Na₂SO₄干燥有机相。蒸发溶剂，得到产物，为游离碱N⁶-(4-甲磺酰基-苯基)-N²-吡啶-2-基甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺，为白色粉末；¹H NMR 400MHz(d-DMSO)δ10.21(s，1H)，9.26(s，1H)，8.53-7.70(m，9H)，7.42(d，1H，J＝8.0Hz)，7.24(t，1H，J＝6.0Hz)，4.67(d，2H，J＝5.6Hz)，3.17(s，3H)，MS m/z 479.3(M+1)。

                          实施例11

R-(4-甲磺酰基-苯基)-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺

将N-苄基乙醇胺(9.06g，60mmol)与(R)-(+)-氧化丙烯(6.96g，99％，120mmol)在密封试管内于45℃搅拌过夜。在真空中蒸发过量的氧化丙烯，得到二醇残余物，将其直接用于下一步。

将所述二醇溶于二噁烷(60mL，无水)。加入KOH(10.08g，180mmol)和三(3，6-二氧杂庚基)胺(200mg，0.62mmol)，并将该混合物冷却至0℃，此后滴加甲苯磺酰氯(12.58g，66mmol，在60mL无水二噁烷中)。将该反应混合物在0℃搅拌45分钟，此后将其温至室温并再搅拌4小时。过滤该反应混合物并在真空中蒸发滤液。向产物中加入HCl(2N，200mL)，并用乙酸乙酯(150mL×2)洗涤所得酸性水溶液，将该溶液冷却至0℃并通过添加NaOH中和。然后用乙酸乙酯萃取产物。用Na₂SO₄干燥有机相且然后进行蒸发。对残余物进行色谱处理(含5～20％乙酸乙酯的DCM)，得到环化产物(6.66g)。

将游离碱转化成HCl盐并如下重结晶：用HCl(2M乙醚溶液，50mL)处理上述获得的游离碱并进行蒸发，得到HCl盐。将该盐(6.0克)与乙酸乙酯(120mL)混合并加热至回流。谨慎滴加EtOH，直到全部固体溶解。然后将该体系冷却至室温并保持在冰箱内过夜。过滤获得的沉淀，得到纯产物(2.8g)。

在压力(55psi)和室温下用10％Pd/C(0.20g)氢化重结晶的盐(1.35g，5.94mmol)在乙醇(30mL)中的溶液。将该混合物通过硅藻土过滤(用EtOH洗涤)并蒸发滤液，得到油状物。添加乙醚且随后蒸发，得到R-2-甲基吗啉盐酸盐，为固体。

将2-氟嘌呤底物(4.6g，11.8mmol)、R-2-甲基吗啉盐酸盐(1.78g，12.9mmol)和DIEA(3.78g，29.4mmol)在乙醇(20ml)中的混合物回流过夜。蒸发乙醇并将残余物重新溶于DCM(100ml)。将其用饱和NaHCO₃(50ml)、水(50ml)、盐水(50ml)洗涤并用MgSO₄干燥。蒸发溶剂，随后进行柱色谱(EtOAc/DCM 30％至50％)，得到R-4-甲磺酰基-苯基)-(2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)-胺，为浅棕色固体。

在60℃将上述获得的化合物(1.90g，4.02mmol)与对甲苯磺酸一水合物(380mg，2.0mmol)在甲醇(20mL)中搅拌至不再检测出原料(通过TLC或LC-MS监测)。加入三乙胺(0.5mL)并蒸发乙醇。进行柱色谱(MeOH/DCM0至5％)，得到脱保护的产物。

将2，4-二溴噻唑(5.00g，20.7mmol)放入已经反充三次氩气的烧瓶中。加入无水乙醚(82mL)并将该溶液冷却至-78℃。加入正-丁基锂(2.5M环己烷溶液，10.0mL)并将该反应混合物在-78℃搅拌90分钟，此后用HCl/乙醚溶液(2.0m×15mL)猝灭。将该反应混合物温至室温。用NaHCO₃(饱和水溶液，60ml)洗涤该混合物并用Na₂SO₄干燥有机相。蒸发后，得到4-溴噻唑，为粗产物。

将脱保护的2，6-二取代的嘌呤(1.44g，3.71mmol)、CuI(352mg，1.86mmol)和CS₂CO₃(3.62g，3.0eq)在烧瓶中合并(预先用氩气反充)。加入在DMF(8.0mL)中的反式-N，N-二甲基环己烷-l，2-二胺(264mg，1.86mmol)和4-溴噻唑(691mg，88％纯，3.71mmol)并将该混合物在88℃搅拌过夜。在将该混合物冷却至室温后，加入乙酸(1.0mL)并通过注射器式滤器(用DMF洗涤)过滤该混合物。通过反相制备型LC-MS(乙腈/水/TFA梯度10-90 10％CH₃CN，7.5分钟内，Ultro 1205uM CI8Q，75×30mmID)纯化滤液。将所收集的产物的水/MeCN溶液蒸发以除去乙腈。加入NaHCO₃(饱和水溶液)以使pH升至9。用DCM萃取产物并用Na₂SO₄干燥有机相。蒸发溶剂，得到 R-(4-甲磺酰基-苯基)-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]- 胺，为游离碱/白色粉末；¹H NMR 400MHz(CDCl₃)δ9.69(s，1H)，8.87(d，1H，J＝2.4Hz)，8.83(s，1H)，8.26(d，1H，J＝2.4Hz)，8.07(d，2H，J＝8.8Hz)，7.95(d，2H，J＝8.8Hz)，4.53(t，2H，J＝10.8Hz)，4.10-4.07(m，1H)，3.74-3.65(m，2H)，3.25-3.10(m，1H)，3.08(s，3H)，2.90-2.84(m，1H)，1.33(d，3H，J＝6.4Hz)；MS m/z 472.3(M+1)。

                          实施例12

1-(4-{2-[甲基-(1-甲基-哌啶-4-基)-氨基]-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基}-苯基)-乙酮

将1-(4-氨基-苯基)-乙酮(1.0g，7.4mmol)与2-氟-6-氯-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(1.90g，7.4mmol)、二异丙基乙胺(1.54mL，8.9mmol)和正丁醇50mL混合。将该反应在95℃搅拌14小时。在冷却至室温并除去溶剂后，通过使用MeOH/DCM(5％∶95％)的快速色谱法纯化粗产物，得到1-{4-[2-氟-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮，为白色固体2.49g。

将1-{4-[2-氟-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮(100mg，0.28mmol)与甲基-(1-甲基-哌啶-4-基)-胺(58mg，0.45mmol)、二异丙基乙胺(121μL，0.70mmol)和5mL正丁醇混合。将该反应在100℃搅拌14小时。在冷却并除去溶剂后，通过使用EA/己烷(1∶1)的快速色谱法纯化粗产物，得到1-{4-[2-[甲基-(1-甲基-哌啶-4-基)-氨基]-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮，为黄色固体115mg。

将1-{4-[2-[甲基-(1-甲基-哌啶-4-基)-氨基]-9-(四氢-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮(115mg，0.26mmol)溶于10mL乙醇并与200μL TFA混合。将该反应在60℃搅拌2小时。在冷却至室温并完全除去溶剂和TFA后，将粗产物与碘化铜(I)(50mg，0.26mmol)和磷酸钾(220mg，0.8mmol)混合、脱气且重新充填干燥的氮气。加入在DMF(4mL)中的N′，N′-二甲基乙二胺(46mg，0.52mmol)和碘-噻唑(53mg，0.26mmol)并将该混合物在90℃搅拌14小时。在冷却至室温后，加入AcOH-MeOH(1∶10，1.6mL)以中和该混合物，随后通过注射器式滤器过滤。在除去溶剂后，将粗产物溶于DMSO并通过制备型HPLC纯化，得到浅黄色固体1-(4-{2-[甲基-(1-甲基-哌啶-4-基)-氨基]-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基}-苯基)-乙酮：¹H NMR 400MHz(DMSO-d₆)δ10.22(s，1H)，9.28(d，1H，J＝2.3)，8.61(s，1H)，8.25(d，1H，J＝2.1Hz)，8.12(d，2H，J＝8.7Hz)，7.98(d，2H，J＝8.7Hz)，3.57(m，4H)，3.21(t，1H，J＝4.6Hz)，3.10(s，3H)，2.79(d，3H，J＝4.6Hz)，2.55(s，3H)，2.00(m，4H)(MS m/z 463.3(M+1)。

通过重复上述实施例中所述步骤、使用合适的原料获得如表1、2和3中确定的下列式I化合物。

表1

表1中的成分合并成式I化合物，例如，化合物13的成分合并成具有如下结构的N2-(1-苄基-哌啶-4-基)-9-苯基-N6-[4-(哌啶-1-磺酰基)-苯基]-9H-嘌呤-2，6-二胺：

类似地，表2中的成分合并成式I化合物，例如，化合物425的成分合并成具有如下结构的(4-{2-[2-(4-甲基-噻唑-5-基)-乙氧基]-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基氨基}-苯基)-哌啶-1-基-甲酮：

表2

表3

表3中的成分合并成式I化合物，例如，化合物605的成分合并成具有如下结构的[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-[4-(四氢-吡喃-4-磺酰基)-苯基]-胺：

                            试验

通过下列药理试验的结果(实施例10-13)阐释本发明化合物在治疗涉及Flt3和/或FGFR3受体酪氨酸激酶活性失调的疾病中的功效。这些实施例用于解释本发明，而不以任何方式限定本发明的范围。

                          实施例13

                   Flt-3：活性的产生和测定

在有或没有不同浓度抑制剂存在下，通过测定³³P从³³P-ATP向适宜底物的掺入来检测活性。

使用纯化的GST-Flt-3的酪氨酸蛋白激酶试验在40μL终体积中进行，所述终体积含有500ng酶于激酶缓冲液中(30mM Tris-HCl(pH7.5)、3mMMnCl₂、15mM MgCl₂、1.5mM DTT、15μM Na₃VO₄、7.5mg/ml PEG、0.25μM聚-EY(Glu，Tyr)、1％DMSO(在最高浓度化合物下)、10μM ATP和γ-³³P-ATP(0.1μCi))。制备两种溶液：第一种10μl溶液含有Flt-3酶和抑制剂。第二种溶液含有在30μl激酶缓冲液中的底物(聚-EY)、ATP和γ-³³P-ATP。将两种溶液在预先用70％乙醇湿润并用1M Tris(7.4)冲洗的96-孔PVDF滤板(Millipore，Bedford，MA，USA)上混合。将该反应在室温下孵育20分钟，用0.1％磷酸终止，然后用多头抽真空装置通过平板过滤，使底物与膜结合。然后用0.1％磷酸将平板洗涤5次，固定在PackardTopCount 96-孔连接平板并向各孔中加入50μL Microscint TM(Packard)，此后计数。

通过对每种化合物(一式两份)在8种浓度下(从1μM-0.0005μM按照1∶3稀释)的百分比抑制进行线性回归分析，计算IC₅₀值。在本试验中，本发明化合物的IC₅₀值在0.1nM-2μM范围内。

                          实施例14

一般技术包括将可能的抑制剂对依赖于突变体Flt3进行增殖的细胞系的作用与对不依赖于突变体Flt3进行增殖的细胞系的作用进行比较。选择在Flt3+细胞系与Flt3-细胞系之间具有不同活性(敏感性差异大于或等于10倍)的化合物用于进一步研究。

用于初步筛选的细胞系为Ba/F3细胞的亚系，其被设计以便在感染表达合适的Flt3 cDNA的反录病毒后过量表达突变体或野生型(未突变的)Flt3。母细胞系Ba/F3依赖于白细胞介素-3进行增殖，而当丧失IL-3时，细胞迅速停止增殖并死亡。反录病毒自反录病毒LTR表达Flt3和自IRES位点表达neo基因。在G418中选择Ba/F3细胞并通过荧光激活细胞分类术(FACS)分析Flt3的表达。使用具有两种不同Flt3突变的细胞系。一种突变体表达由外显子11编码的近膜结构域中具有14个氨基酸重复的Flt-3，具体的重复为…VDFREYEYDLKWEF…(称作Ba/F3-Flt3-ITD)。第二种突变具有将835位上的天冬酰胺转化成酪氨酸的点突变(称作Ba/F3-Flt3-D835Y)。两种突变均导致Flt-3激酶活化并使其不依赖于IL-3，表达的细胞在没有IL-3存在下生长。类似地产生表达野生型Flt3的Ba/F3细胞并将其用作“对照”细胞系。亲代(未感染的)细胞系和野生型“对照”细胞保持依赖于IL-3进行增殖。

将Ba/F3细胞(-对照、-Flt3-ITD或-Flt3-D835Y)培养至在30mL培养物中达到500,000个细胞/mL，用含有10％胎牛血清的RPMI 1640作为培养基。用于对照细胞(但不是突变体-Flt3细胞)的培养基含有来自WEHI-3B细胞系的10％条件培养基作为IL-3源。制备各化合物在二甲亚砜(DMSO)中的10mM“储备”溶液。然后在含有10％胎牛血清的RPMI 1640中制备稀释液，使最终药物浓度典型地为1nM-10μM。由DMSO制成类似的稀释液用作载体对照。在添加化合物后48小时，检测细胞的增殖率和细胞毒性。

向细胞中加入Yo-Pro-l碘化物(分子探针)，在NaCl/柠檬酸Na缓冲液中的终浓度为2.5μM。将细胞与Yo-Pro在室温下孵育10分钟，然后在荧光计上读数，以测定细胞毒性。接下来用NP40/EDTA/EGTA缓冲液将细胞裂解90分钟，在室温下孵育90分钟并读数，以测定增殖。

用表达Flt3-D835Y的细胞进一步测试选择性地对Ba/F3-Flt3-ITD细胞比对野生型对照Ba/F3细胞更具毒性的化合物。

另外，在暴露于不同浓度活性化合物前后，使用α-Flt3抗体免疫沉淀Flt3蛋白。通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶分离免疫沉淀的蛋白，通过电泳方式转至PVDF膜，并用α-磷-⁵⁹¹Y-Flt3抗体进行免疫印迹。本试验测定化合物是否可以降低突变形式受体特征性的Flt3“自磷酸化”水平。

本发明的化合物一般在纳摩尔范围内表现出对Flt3-ITD的抗增殖活性，而对对照-Flt3在达10μM下也没有毒性。本发明的化合物在纳摩尔范围内还减少细胞Flt-3的自磷酸化活性。

游离形式或药学上可接受的盐形式的式I化合物表现出有价值的药理学特性，例如，如本申请中所述的体外试验所示。例如，在上述试验中，式I化合物对Flt3表现出的IC₅₀优选在1×10^-10-2×10^-6M范围内，优选低于100nM。例如， {4-[2-(4-氨基-环己基氨基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基 氨基]-苯基}-哌啶-1-基-甲酮在实施例14所述试验中的IC₅₀为5nM，而在实施例13所述试验中表现出的IC₅₀为7nM。

                          实施例15

FGFR3：活性的测定

在有或没有不同浓度抑制剂存在下，通过使用HTRF测定肽底物的磷酸化来检测活性。

使用纯化的FGFR3(Upstate)的酪氨酸蛋白激酶试验在10μL终体积中进行，所述终体积含有激酶缓冲液(30mM Tris-HCl pH7.5、15mMMgCl₂、4.5mM MnCl₂、15μM Na₃VO₄和50μM/mL BSA)中的0.25μg/mL酶以及底物(5μg/mL生物素-聚-EY(Glu，Tyr)(CIS-US，Inc.)和3μMATP)。制备两种溶液：第一种5μl溶液含有在激酶缓冲液中的FGFR3酶，首先将其配入384-格Proxiplate_(Perkin-Elmer)，随后添加50nL溶于DMSO的化合物，然后向各孔中加入5μl第二种溶液，其含有在激酶缓冲液中的底物(聚-EY)和ATP。将反应在室温下孵育1小时，通过添加10μLHTRF检测混合物终止，所述检测混合物含有30mM Tris-HCl pH7.5、0.5MKF、50mM ETDA、0.2mg/mL BSA、15μg/mL链霉抗生物素蛋白-XL665(CIS-US，Inc.)和150ng/mL穴状化合物缀合的抗-磷酸酪氨酸抗体(CIS-US，Inc.)。在室温下孵育1小时以使链霉抗生物素蛋白-生物素相互作用后，在Analyst GT(Molecular Devices Corp.)上读取时间分辨荧光信号。

通过对每种化合物(一式两份)在12种浓度(从10μM-0.05nM按照1∶3稀释)下的百分比抑制进行线性回归分析，计算IC₅₀值。在本试验中，本发明化合物的IC₅₀值在0.1nM-2μM范围内。

                          实施例16

一般技术包括将可能的抑制剂对依赖于FGFR3进行增殖的细胞系的作用与对不依赖于FGFR3进行增殖的细胞系的作用进行比较。选择在FGFR3+细胞系与FGFR3-细胞系之间具有不同活性(敏感性差异大于或等于10倍)的化合物用于进一步研究。

用于初步筛选的细胞系为Ba/F3细胞的亚系，其被设计成在感染表达TEL-FGFR3 cDNA的反录病毒后过量表达TEL-FGFR3融合体。母细胞系Ba/F3依赖于白细胞介素-3(IL-3)进行增殖，而当丧失IL-3时，细胞迅速停止增殖并死亡。相反，在FGFR3过量表达的Ba/F3细胞中，TEL-FGFR3融合体导致配体-独立性FGFR3二聚化和随后的FGFR3激酶活化，使得过量表达的Ba/F3细胞在没有IL-3存在下生长。

将野生型Ba/F3和转化的Ba/F3(-TEL-FGFR3)细胞在混悬液中培养至800,000个细胞/mL，使用补充了10％胎牛血清的RPMI 1640作为培养基。用于对照细胞的培养基含有10ng/ml重组IL-3(R&D Research)。制备各化合物在二甲亚砜(DMSO)中的10mM“储备”溶液。然后稀释入DMSO中，使最终药物浓度典型地为0.05nM-10μM。在添加化合物后48小时，检测细胞的增殖率。将AlamarBlue_(TREK Diagnostic Systems)加入到细胞中，在细胞培养基中的终浓度为10％。将细胞与AlamarBlue_在37℃组织培养箱内孵育4小时，然后在荧光读出器中读数，以测定增殖。

另外，在用抗-磷酸化-FGFR3抗体免疫印迹的Western印迹中，检测暴露于不同浓度活性化合物后过量表达Ba/F3的裂解物中的磷酸化TEL-FGFR3蛋白水平。本试验测定化合物是否可以降低突变型受体特征性的FGFR3的“自磷酸化”水平。

本发明的化合物一般在纳摩尔范围内表现出对TEL-FGFR3的抗增殖活性，而对野生型Ba/F3在达10μM下也没有毒性。本发明的化合物在纳摩尔范围内还降低细胞TEL-FGFR3的自磷酸化活性。

                          实施例17

Upstate KinaseProfiler^TM-放射酶滤膜结合试验

对本发明化合物抑制一组激酶(部分非限制性激酶目录包括：cSRC、Lck、FGFR3、F1t3、TrkB和PFGFRα)中各成员的能力进行评价。按照该一般性方案一式两份以终浓度10μM测试化合物。注意激酶缓冲液组成和底物因“Upstate KinaseProfiler^TM”组中包括的不同激酶而改变。按照该一般性方案一式两份以终浓度10μM测试化合物。注意激酶缓冲液组成和底物因“Upstate KinaseProfiler^TM”组中包括的不同激酶而改变。将激酶缓冲液(2.5μL，10x-如果需要含有MnCl₂)、活性激酶(0.001-0.01单位；2.5μL)、在激酶缓冲液中的特异性或聚(Glu4-Tyr)肽(5-500μM或.01mg/ml)和激酶缓冲液(50μM；5μL)在冰上的eppendorf管中混合。加入Mg/ATP混合物(10μL；67.5(或33.75)mM MgCl₂、450(或225)μMATP和1μCi/μl[γ-³²P]-ATP(3000Ci/mmol))，并将该反应在约30℃孵育约10分钟。将该反应混合物点样(20μL)在2cm×2cm P81(磷酸纤维素，用于带正电荷的肽底物)或Whatman No.1(用于聚(Glu4-Tyr)肽底物)正方形纸块上。用0.75％磷酸将试验正方形纸块洗涤4次，每次5分钟，并用丙酮洗涤一次5分钟。将试验正方形纸块转入闪烁瓶，加入5mL闪烁合剂，使用Beckman闪烁计数器对肽底物中掺入的³²P(cpm)进行定量。对每次反应计算抑制百分比。

优选地，式I化合物在10μM浓度下对cSRC、Lck、FGFR3、Flt3、TrkB和PFGFR α激酶表现出的抑制百分比大于50％，优选大于60％，更优选大于70％。例如：

(i)化合物539： N ² -甲基-N ² -(1-甲基-哌啶-4-基)-N ⁶ -(4吗啉-4-基-苯基)-9- 噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺表现出下列抑制特性：Bmx(90％)；c-Src(97％)；Lck(99％)；FIt3(100％)；Rsk1(82％)；和TrkB(99％)；

(ii)化合物554(实施例10)： N ⁶ -(4-甲磺酰基-苯基)-N ² -吡啶-2-基甲基-9- 噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺表现出下列抑制特性：Abl(98％)；Bmx(86％)；c-Src(99％)；Lck(95％)；FIt3(100％)；FGFR3(98％)；和TrkB(99％)；和

(iii)化合物503： (4-甲磺酰基-苯基)-(2-吗啉-4-基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤 -6-基)-胺表现出下列抑制特性：Abl(81％)；Bmx(71％)；c-Src(98％)：Lck(99％)；FIt3(99％)；TrkB(99％)。

应理解，本文所述实施例和实施方案仅用于解释目的，且提示本领域技术人员可以依据它们进行各种修改和改变，这些修改和改变应包括在本申请以及待批权利要求的的实质和范围内。本文引述的所有公开文献、专利和专利申请在此引入作为参考用于所有目的。

Claims (10)

1.式I化合物及其药学上可接受的盐、水合物、溶剂合物、异构体和前体药物：

其中：

R₁选自氢、卤素、C_1-6烷基、卤素-取代的-C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤素-取代的-C_1-6烷氧基、-OXOR⁵、-OXR⁶、-OXNR₅R₆、-OXONR₅R₆、-XR₆、-XNR₅R₆和-XNR₇XNR₇R₇；其中X选自键、C_1-6亚烷基、C_2-6亚链烯基和C_2-6亚炔基；其中R₇独立地选自氢或C_1-6烷基；

R₅选自氢、C_1-6烷基和-XOR₇；其中X选自键、C_1-6亚烷基、C_2-6亚链烯基和C_2-6亚炔基；且R₇独立地选自氢或C_1-6烷基；

R₆选自氢、C_1-6烷基、C_3-12环烷基C_0-4烷基、C_3-8杂环烷基C_0-4烷基、C_6-10芳基C_0-4烷基和C_5-10杂芳基C_0-4烷基；或

R₅和R₆与R₅和R₆所连接的氮原子一起形成C_3-8杂环烷基或C_5-8杂芳基；其中R₅和R₆所形成的任意杂环烷基中的亚甲基可以任选被-C(O)-或-S(O)₂-替代；

其中R₆的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基或R₅和R₆的组合可以任选被1-3个基团取代，所述基团独立地选自-XNR₇R₇、-XOR₇、-XNR₇R₇、-XC(O)NR₇R₇、-XNR₇C(O)R₇、-XOR₇、-XC(O)OR₇、-XC(O)R₇、C_1-6烷基、C_3-8杂环烷基、C_5-10杂芳基、C_3-12环烷基和C_6-10芳基C_0-4烷基；其中R₁的任意烷基或亚烷基可以任选带有被二价基团替代的亚甲基，所述二价基团选自-NR₇C(O)-、-C(O)NR₇-、-NR₇-、-C(O)-、-O-、-S-、-S(O)-和-S(O)₂-；且其中R₆的任意烷基或亚烷基可以任选被1-3个基团取代，所述基团独立地选自C_5-8杂芳基、-NR₇R₇、-C(O)NR₇R₇、-NR₇C(O)R₇、卤素和羟基；其中R₇独立地选自氢或C_1-6烷基；

R₂选自氢、C_6-10芳基和C_5-10杂芳基；其中R₂的任意芳基或杂芳基任选被1-3个基团取代，所述基团独立地选自-XNR₇R₇、-XOR₇、-XOR₈、-XC(O)OR₇、-XC(O)R₇、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、硝基、氰基、羟基、卤素和卤素-取代的-C_1-6烷基；其中X和R₇如上所述；且R₈为C_6-10芳基C_0-4烷基；

R₃选自氢和C_1-6烷基；

R₄选自C_3-12环烷基C_0-4烷基、C_3-8杂环烷基C_0-4烷基、C_6-10芳基C_0-4烷基和C_5-10杂芳基C_0-4烷基；其中R₄的任意亚烷基可以任选带有被二价基团替代的亚甲基，所述二价基团选自-C(O)-、-S-、-S(O)-和-S(O)₂-；其中R₄的所述芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基任选被1-3个基团取代，所述基团选自卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤素-取代的-C_1-6烷基、卤素-取代的-C_1-6烷氧基、-XR₉、-XOR₉、-XS(O)_0-2R₇、-XS(O)_0-2R₉、-XC(O)R₇、-XC(O)OR₇、-XP(O)R₇R₇、-XC(O)R₉、-XC(O)NR₇XNR₇R₇、-XC(O)NR₇R₇、-XC(O)NR₇R₉和-XC(O)NR₇XOR₇；其中X和R₇如上所述；其中R₉选自C_3-12环烷基C_0-4烷基、C_3-8杂环烷基C_0-4烷基、C_6-10芳基和C_5-10杂芳基；其中R₉的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基任选被1-3个选自C_1-6烷基、-XC(O)R₇和-XC(O)NR₇R₇的基团取代；其中X和R₇如上所述。

2.权利要求1的化合物，其中：

R₁选自氢、卤素、C_1-6烷氧基、-OXOR⁵、-OXR⁶、-OXNR₅R₆、-OXONR₅R₆、-XR₆、-XNR₇XNR₇R₇和-XNR₅R₆；其中X选自键、C_1-6亚烷基、C_2-6亚链烯基和C_2-6亚炔基；

R₅选自氢、C_1-6烷基和-XOR₇；其中X选自键、C_1-6亚烷基、C_2-6亚链烯基和C_2-6亚炔基；且R₇独立地选自氢或C_1-6烷基；

R₆选自氢、C_1-6烷基、C_3-12环烷基C_0-4烷基、C_3-8杂环烷基C_0-4烷基、C_6-10芳基C_0-4烷基和C_5-10杂芳基C_0-4烷基；R₆为氢或C_1-6烷基；或

R₅和R₆与R₅和R₆所连接的氮原子一起形成C_3-8杂环烷基或C_5-8杂芳基；其中R₅和R₆所形成的任意杂环烷基中的亚甲基可以任选被-C(O)-或-S(O)₂-替代；

其中R₆的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基或R₅和R₆的组合可以任选被1-3个基团取代，所述基团独立地选自-XNR₇R₇、-XC(O)NR₇R₇、-XOR₇、-XNR₇R₇、-XNR₇C(O)R₇、-XOR₇、-XC(O)R₇、C_1-6烷基、C_3-8杂环烷基和C_6-10芳基C_0-4烷基；其中R₁的任意烷基或亚烷基可以任选带有被二价基团替代的亚甲基，所述二价基团选自-NR₇C(O)-、-C(O)NR₇-、-NR₇-、-O-；且其中R₁的任意烷基或亚烷基可以任选被1-3个基团取代，所述基团独立地选自C_5-8杂芳基、-NR₇R₇、-C(O)NR₇R₇、-NR₇C(O)R₇、卤素和羟基；其中R₇独立地选自氢或C_1-6烷基；

R₂选自氢、C_6-10芳基和C_5-10杂芳基；其中R₂的任意芳基或杂芳基任选被1-3个基团取代，所述基团独立地选自-XNR₇R₇、-XOR₇、-XOR₈、-XC(O)OR₇、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、硝基、氰基、卤素、卤素-取代的-C_1-6烷氧基和卤素-取代的-C_1-6烷基；其中X和R₇如上所述；且R₈为C_6-10芳基C_0-4烷基；

R₃为氢；且

R₄选自C_6-10芳基C_0-4烷基和C_5-10杂芳基C_0-4烷基；其中R₄的所述芳基或杂芳基被1-3个基团取代，所述基团选自卤素、-XR₉、-XOR₉、-XS(O)₂R₇、-XS(O)₂R₉、-XC(O)R₇、-XC(O)OR₇、-XP(O)R₇R₇、-XC(O)R₉、-XC(O)NR₇XNR₇R₇、-XC(O)NR₇R₇、-XC(O)NR₇R₉和-XC(O)NR₇XOR₇；其中X和R₇如上所述；R₉为C_3-8杂环烷基C_0-4烷基；其中R₉任选被1-3个选自C_1-6烷基、-XC(O)R₇和-XC(O)NR₇R₇的基团取代；其中X和R₇如上所述。

3.权利要求2的化合物，其中R₁选自氢、卤素、C_1-6烷氧基、-OXOR⁵、-OXR⁶、-OXNR₅R₆、-OXONR₅R₆、-XR₆和-XNR₅R₆；其中X选自键、C_1-6亚烷基、C_2-6亚链烯基和C_2-6亚炔基；R₅选自氢、甲基、羟基-乙基和甲氧基-乙基；R₆选自氢、苯基、苄基、环戊基、环丁基、二甲氨基-丙烯基、环己基、2，3-二羟基-丙基、哌啶基、氨基-羰基-乙基、甲基-羰基-氨基-乙基、甲基-氨基-乙基、氨基-丙基、甲基-氨基-丙基、1-羟基甲基-丁基、戊基、丁基、丙基、甲氧基-乙炔基、甲氧基-乙烯基、二甲基-氨基-丁基、二甲基-氨基-乙基、二甲基-氨基-丙基、四氢吡喃基、四氢呋喃基-甲基、吡啶基-甲基、氮杂庚环-1-基、[1，4]氧氮杂庚环-4-基、哌啶基-乙基、二乙基-氨基-乙基、氨基-丁基、氨基-异丙基、氨基-乙基、羟基-乙基、2-乙酰基氨基-乙基、氨基甲酰基-乙基、4-甲基-[1，4]二氮杂庚环-1-基、2-羟基-丙基、羟基-丙基、2-羟基-2-甲基-丙基、甲氧基-乙基、氨基-丙基、甲基-氨基-丙基、2-羟基-2-苯基-乙基、吡啶基-乙基、吗啉代-丙基、吗啉代-乙基、吡咯烷基、吡咯烷基-甲基、吡咯烷基-乙基、吡咯烷基-丙基、吡嗪基、喹啉-3-基、喹啉-5-基、咪唑基-乙基、吡啶基-甲基、苯乙基、四氢-吡喃-4-基、嘧啶基、呋喃基、异噁唑基-甲基、吡啶基、苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基、噻唑基-乙基和噻唑基-甲基；或R₅和R₆与R₅和R₆所连接的氮原子一起形成吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、咪唑基、3-氧代-哌嗪-1-基、[1，4]二氮杂庚环-1-基、吗啉代、3-氧代-哌嗪-1-基、1，1-二氧代-lλ6-硫代吗啉-4-基或吡唑基；

其中R₆的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基或R₅和R₆的组合可以任选被1-3个基团取代，所述基团独立地选自甲基-羰基、氨基-甲基、氨基-羰基、甲基-磺酰基、甲氧基、甲氧基-甲基、甲酰基、氟-乙基、羟基-乙基、氨基、二甲基-氨基、羟基、甲基、乙基、乙酰基、异丙基、吡咯烷基、嘧啶基、吗啉代、吡啶基和苄基；其中R₆的任意烷基或亚烷基可以任选带有被选自-NHC(O)-或-C(O)NH-的二价基团替代的亚甲基；且其中R₆的任意烷基或亚烷基可以任选被1-2个独立地选自氨基、卤素、哌啶基和羟基的基团取代。

4.权利要求2的化合物，其中R₂选自氢、苯基、噻吩基、吡啶基、吡唑基、噻唑基、吡嗪基、萘基、呋喃基、苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基、异噻唑基、咪唑基和嘧啶基；其中R₂的任意芳基或杂芳基任选被1-3个基团取代，所述基团独立地选自甲基、异丙基、卤素、乙酰基、三氟甲基、硝基、1-羟基-乙基、1-羟基-1-甲基-乙基、羟基-乙基、羟基-甲基、氨基甲酰基、甲氧基、苄氧基、羧基、氨基、氰基、氨基-羰基、氨基-甲基和乙氧基。

5.权利要求2的化合物，其中R₄选自苯基、苄基、吡啶基和1-氧代-茚满-5-基；其中所述苯基、苄基、茚满基或吡啶基任选被以下取代：卤素、乙酰基、三氟甲基、环丙基-氨基-羰基、氮杂环丁烷-1-羰基、哌啶基-羰基、吗啉代、甲基-羰基、哌嗪基、甲基-磺酰基、哌啶基-磺酰基、4-甲基-哌嗪基-羰基、二甲基-氨基-乙基-氨基-羰基、吗啉代-羰基、吗啉代-甲基、氨基-羰基、丙基-氨基-羰基、羟基-乙基-氨基-羰基、吗啉代-乙基-氨基-羰基、4-乙酰基-哌嗪-1-羰基、4-氨基-羰基-哌嗪-1-羰基、苯基-羰基、吡咯烷基-1-羰基、丙基-羰基、丁基、异丙基-氧基-羰基、环己基-羰基、环丙基-羰基、甲基-磺酰基、二甲基-次膦酰基、4-甲基-哌嗪基-磺酰基、1-氧代-茚满-5-基、氧杂环丁烷-3-磺酰基、氨基-磺酰基和四氢-吡喃-4-磺酰基。

6.权利要求2的化合物，选自：N⁶-(4-甲亚磺酰基-苯基)-N²-甲基-N²-(四氢-吡喃-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；(4-甲磺酰基-苯基)-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；1-{4-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮；[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；氮杂环丁烷-1-基-{4-[2-(4-吗啉-4-基-哌啶-1-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-甲酮；1-(4-{2-[甲基-(1-甲基-哌啶-4-基)-氨基]-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基}-苯基)-乙酮；1-{4-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯基}-乙酮；(4-甲磺酰基-苯基)-[2-(4-吗啉-4-基-哌啶-1-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；N⁶-(4-甲磺酰基-苯基)-N²-甲基-N²-(1-甲基-哌啶-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺；N²-甲基-N²-(1-甲基-哌啶-4-基)-N⁶-(4-吗啉-4-基-苯基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N²-甲基-N²-(1-甲基-哌啶-4-基)-N⁶-(4-吗啉-4-基-苯基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；[2-(2，2-二甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-(4-甲磺酰基-苯基)-胺；[2-(2，6-二甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-(4-甲磺酰基-苯基)-胺；[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-[2-(2-乙基-吗啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-[2-(2-氟甲基-吗啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；[2-(2，6-二甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-胺；[2-(2，6-二甲基-吗啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基]-[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-胺；[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-[2-(3-甲基-哌啶-1-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；N⁶-(4-甲磺酰基-苯基)-N²-甲基-N²-吡啶-2-基甲基-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N²-甲基-N⁶-(4-吗啉-4-基-苯基)-N²-吡啶-2-基甲基-9-噻吩-3-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；(2-氮杂庚环-1-基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基)-[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-胺；N²-环己基-N⁶-[4-(二甲基-次膦酰基)-苯基]-N²-甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N⁶-(4-甲磺酰基-苯基)-N²-甲基-N²-(四氢-吡喃-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N⁶-(4-甲磺酰基-苯基)-N²-吡啶-2-基甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；N²-环己基-N⁶-(4-甲亚磺酰基-苯基)-N²-甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；R-(4-甲亚磺酰基-苯基)-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；N⁶-(4-甲磺酰基-苯基)-N²-甲基-N²-吡啶-2-基甲基-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-2，6-二胺；{4-[6-(4-甲磺酰基-苯基氨基)-2-(甲基-吡啶-2-基甲基-氨基)-嘌呤-9-基]-苯基}-甲醇；R-(4-甲磺酰基-苯基)-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基]-胺；R-4-[2-(2-甲基-吗啉-4-基)-9-噻唑-4-基-9H-嘌呤-6-基氨基]-苯磺酰胺；和{4-[6-(4-甲磺酰基-苯基氨基)-2-(2-甲基-吗啉-4-基)-嘌呤-9-基]-苯基}-甲醇。

7.药物组合物，包含治疗有效量的权利要求1的化合物以及药学上可接受的赋形剂。

8.治疗动物疾病的方法，其中抑制激酶活性可以预防、抑制或改善所述疾病的病理和/或症状，该方法包括对所述动物给予治疗有效量的权利要求1的化合物。

9.权利要求8的方法，其中所述激酶选自cSRC、Lck、FGFR3、F1t3、TrkB和Bmx激酶。

10.权利要求1的化合物在制备用于治疗动物疾病的药物中的用途，其中cSRC、Lck、FGFR3、F1t3、TrkB和/或Bmx的激酶活性对所述疾病的病理和/或症状起作用。