CN1826521A - 用于对微粒计数的装置 - Google Patents
用于对微粒计数的装置 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1826521A CN1826521A CNA2004800208907A CN200480020890A CN1826521A CN 1826521 A CN1826521 A CN 1826521A CN A2004800208907 A CNA2004800208907 A CN A2004800208907A CN 200480020890 A CN200480020890 A CN 200480020890A CN 1826521 A CN1826521 A CN 1826521A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- subregion
- image
- specimen slide
- light
- sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 title claims abstract description 48
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 37
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 35
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 23
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 19
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 6
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 claims description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 3
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052724 xenon Inorganic materials 0.000 claims description 2
- FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N xenon atom Chemical compound [Xe] FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims 3
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims 1
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 abstract 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 11
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 239000012128 staining reagent Substances 0.000 description 4
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 3
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 3
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 description 2
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 description 2
- 241000235342 Saccharomycetes Species 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/02—Investigating particle size or size distribution
- G01N15/0205—Investigating particle size or size distribution by optical means
- G01N15/0227—Investigating particle size or size distribution by optical means using imaging; using holography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/01—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials specially adapted for biological cells, e.g. blood cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/59—Transmissivity
- G01N21/5907—Densitometers
- G01N2021/5957—Densitometers using an image detector type detector, e.g. CCD
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
提出了一种用于对微粒计数的装置。该装置包括光源；包含微粒的载片；物镜；CCD相机；计数部分；以及用于使所述载片位置移动的移动器。通过使用此装置，易于对微粒如红血细胞或体细胞的数目来记数。所述移动器在每个预定的时间间隔使所述载片的位置移动预定的距离，以使邻接于之前刚拍摄的区域的特定区域移动到光入射的点。从而，对所述载片上的子区域连续拍摄。所述计数部分对每个子区域中的微粒数目计数，并将它们加到一起以计算样本中微粒的总数。
Description
技术领域
本发明涉及用于对微粒如细胞的数目计数的装置。更具体地，本发明涉及用于对微粒计数的装置，其包括：样本载片，其中，包含颗粒的样本位于读部分；光源，其将光投射到样本载片处的子区域内；物镜，其放大在子区域处形成的样本的图像；图像拍摄部分，其拍摄样本的图像；微粒计数部分，其使用拍摄的图像对子区域中的微粒计数；以及载片移动部分，其使样本载片移动。
背景技术
对于患有AIDS、白血病、或贫血的患者，需要对患者血液中与这些疾病相关的白血球或红血球的颗粒的数目计数以诊断疾病、监视疾病的进展、并验证治疗的效果。
具体地，进行血测试不仅是为了诊断疾病，还为了监视已证明患有这些疾病的患者。
为血分析开发的分析装置，例如，丹麦Chemometecr的NeucleocounterTM太昂贵，且操作的方法难，以致不仅对普通人而且对分析专家来说，使用该装置也不容易。而且，由于用于该分析装置的样本载片是分开制造的并且太昂贵，使用这种装置是一个负担。
在这种环境下，几乎所有医院中医疗技术专家通过手工对血中白血球和红血球细胞计数。由于医疗技术专家通过手工对它们计数，检查中的错误频繁发生，且检查花费很多时间。
因此，对可快捷精准地对血中的白血球或红血球细胞的数目计数并且可以低成本方便地使用的装置，有很高的需求。
具体地，在收集和检查患者的尿、脑脊髓液、胃液或腹水等等的情况下，因为样本的特性，检查应在一小时内完成。因而，需要用于快捷地对样本中的特定细胞计数的装置。
此外，在使用以前开发的装置或以手工对细胞计数的情况下，存在的问题是人在实验过程中易于暴露于有害的染色试剂。
发明内容
提出本发明是为了解决所述问题，并且用于对微粒计数的本发明的装置包括：包含微粒的载片；光源；物镜；图像拍摄部分；计数部分；以及载片移动器。
通过使用该装置，有可能对样本中的微粒数目自动计数，如酵母菌、乳酸菌、酶原、动物细胞、红血球(红血细胞)、白血球(白血细胞)或体细胞。
具体地，载片移动器在每个预定的时间间隔使载片的位置移动预定的距离，以使邻接于之前刚由CCD相机拍摄的区域的特定区域移动到光入射的点。从而，对载片上的子区域连续拍摄。计数部分对每个子区域中的微粒数目计数，并将它们加到一起以计算样本中的微粒的总数。从而，有可能快捷精准地对样本中的微粒计数。所述装置的结构简单，且其可方便地使用，并且价格也低。
本发明的目的是提供用于对微粒的数目计数的装置。
本发明涉及用于对微粒的数目计数的装置。
更具体地，本发明涉及用于对微粒数目计数的装置，所述装置包括：
样本载片，其中，包含颗粒的样本位于读部分；
光源，其将光投射到所述样本载片上的子区域内；
物镜，其面向所述载片以放大所述样本的图像，该图像通过从所述光源入射的光形成在所述子区域上；
图像拍摄部分(例如，CCD相机)，其拍摄所述样本载片上的子区域中的所述样本的图像，该图像由所述物镜放大；
微粒计数部分，其从由所述图像拍摄部分拍摄的图像对所述子区域上的微粒计数；以及
载片移动器，其使所述样本载片的位置移动，以使邻接于之前刚拍摄的区域的特定区域移动到所述光入射的点。
在根据本发明的装置中，载片移动器在每个预定的时间间隔使样本载片移动预定的距离。例如，每次样本载片上光入射处的子区域由CCD相机拍摄时，载片移动器将该样本载片移动预定的距离，以使邻接于之前刚拍摄的区域的特定区域移动到光入射的点。
由于在每个预定的时间间隔使样本载片移动预定的距离，所以载片上邻接于之前刚由CCD相机拍摄的区域的子区域被连续拍摄。从而，有可能连续对样本载片上的所有区域拍摄。样本载片的准确位置可由载片移动器以高速控制，例如，齿条/齿轮类型或滚珠丝杠类型的X-Y台。
在微粒计数部分对由图像拍摄部分连续拍摄的子区域上的微粒计数之后，该计数部分可通过将每个子区域中的微粒的数目加到一起来计算样本中微粒的总数。特别对于已知其中包含样本的读部分的高度和由图像拍摄部分拍摄的子区域的面积尺寸的情况，可计算读部分的容积。因此，由于可得到总区域(在读部分中)的容积，从而计算了包含微粒的样本的体积。因而，从样本的总体积和微粒的总数，可计算微粒的平均浓度(即单位体积中微粒的数目)。
因而，根据本发明的微粒计数装置可增强计数的精确性，因为其通过每个子区域拍摄样本载片，并对颗粒计数。此外，尽管微粒分布不均，但由于其对样本的所有区域计数，所以不存在错误。
在本发明的装置中，依赖于颗粒的属性，选择性地将卤素灯、氙灯、汞灯、LED或激光器用作光源。例如，在对红血球计数的情形下，优选地使用发射紫外-可见光的灯或LED。在对包含细胞核的体细胞或白血球计数的情形下，优选地将LASER作为光使用。
根据本发明的装置可进一步包括入射光控制透镜，其控制从光源发射的光量的和到光源前方的样本载片上的焦距。
此外，根据本发明的装置可进一步包括光学过滤器，其在物镜和图像拍摄装置之间使具有特定波长的光通过。因而，可通过选择性地使由样本颗粒的特定颗粒发射的具有特定波长的光通过来对颗粒的数目计数并拍摄它们。
所述装置可包括多个LASER，且可进一步包括带有对应于所述LASER的波长的多个光学过滤器的光学过滤器交换器。由于可选择性地使用令具有特定波长的光通过的特定光学过滤器，所以易于对期望的颗粒计数。
根据场合的需要，可选择性地使用物镜的放大率。优选地以低的放大率进行观察，以便总体算出样本载片的读部分上的颗粒的分布。
然而，在样本载片的每个预划分的子区域上照射光以通过图像拍摄部分和计数部分来观察的情形下，优选地使用具有高的放大率的物镜以便准确计数。
在由图像拍摄装置如CCD相机拍摄的图像传输到计算机以后，有可能通过执行计算机中装备的微粒计数部分中的与图像相关的程序以对特定颗粒的数目计数。如上所述，在微粒计数部分对样本载片上相继拍摄的子区域中的微粒计数之后，其可通过将每个子区域的微粒相加来对样本中所有颗粒计数。此外，根据读部分中的样本的总体积和微粒的总数，可计算微粒的平均浓度。
在通过使用紫外-可见射线的光源拍摄红血球的情形下，红血球以黑色表示。因而，红血球的数目可通过对黑颗粒计数而计数。在使用LASER光源的情形下，白血球以荧光染料染色并发射具有特定波长的光。因而，通过拍摄透过物镜的光中通过所述光学过滤器的具有特定波长的光，可对白血球的数目计数。
通过使用所述装置，不但有可能对每种类型的组织成份，如血中的红血球或白血球，也可能对体液中的体细胞和其他普通微粒立即计数。此外，通过快捷地计算白血球总数中特定白血球数目的比率，有可能立即报告疾病的进展。其还可用于对细胞活性的检查和对基因表达中的细胞计数。
由于所述装置的使用特别方便，在将样本滴入设置有根据本发明的装置的样本载片中以后，对微粒的数目自动计数。因而，不仅对于专家，而且对于普通人来说，易于使用该装置。
附图说明
图1是根据本发明的微粒计数装置的组成图。
图2a是用于包含样本的样本载片的平面图。
图2b是样本载片的截面图。
图3是一个实施例，其中将样本载片分为子区域以便微粒计数装置以子区域为单位对样本载片拍摄并对每个子区域中的颗粒计数。
图4是根据第一实施例带有LED光源的装置的组成图。
图5是根据第二实施例带有LASER光源的装置的组成图。
图6a和图6b是使用根据第二实施例的装置的对细胞计数的结果和图。
—用于附图的重要部分的参考编号的说明—
10：光源 11a：LED
11b：LASER光源
12a，12b：用于入射光线的控制透镜
13a：用于入射光线的过滤器 14，51：反射镜
20：样本载片 21：用于样本的输入孔
22：样本出口 23：读部分
24：用于样本载片的上基板
25：用于样本载片的下基板
27：用于样本载片的移动器 30：物镜
40：光学过滤器 50：CCD相机
60：微粒的计数部分
具体实施方式
将详细参照如附图示出的本发明。然而，本发明不由以下实施例所限定。
图1是根据本发明的微粒计数装置的组成图。
所述装置包括样本载片(20)，其中，包含颗粒的样本位于具有预定容积的读部分；
光源(10)，其将光投射到样本载片上的子区域内；
物镜(30)，其面向载片以放大样本的图像，该图像通过从光源入射的光形成在子区域处；
CCD相机(50)，其拍摄样本载片上的子区域中的样本的图像，该图像通过物镜放大；以及
微粒计数部分，其对由图像拍摄部分拍摄的子区域上的微粒计数。
样本载片(20)置于载片移动器(27)上，所述载片移动器可使样本载片的位置移动以便将特定区域移动到光入射的点。因而，可将邻接于之前刚由CCD相机(50)拍摄的区域的区域移动到光入射的点。
所述微粒计数装置可进一步包括光学过滤器(未示出)，所述光学过滤器使具有指定波长的光通过。
下文中，参照图1至图3说明本发明的操作。
从光源(10)发射的光入射到样本载片(20)的子区域上。其中，所述装置可进一步包括控制从光源(10)发射的光量和焦距的入射光控制透镜(未示出)。另外，所述装置可进一步包括入射光学过滤器(未示出)，所述入射光学过滤器使具有指定波长的光通过，并将光发射到样本载片(20)上。
图2a和图2b处描绘了用于包含样本的样本载片的一个实施例。图2a是样本载片的平面图，而图2b是样本载片的截面图。
所述样本载片包括上基板(24)和下基板(25)。在上基板和下基板之间的空间中形成有读部分(23)，用于装样本。通过形成具有预定的高度和预定的宽度的读部分(23)，可准确地获知样本的体积。优选地，通过形成10到100μm的高度，用于检验的微粒不浮动而是固定的。
此外，样本载片(20)被提供有连接到读部分(23)的样本输入孔(21)以便输入样本，以及样本出口(22)，用于排出空气和读部分(23)内的过量的样本。
样本载片(20)由塑料制成，并且一次性的样本载片可以方便地使用。
如果在样本载片(20)的读部分(23)内涂覆染色试剂以便将样本染色，则用户不会暴露于有害染色试剂。
如上所述，在通过在样本载片(20)上将包含微粒的样本滴过样本输入孔(21)来将样本装入读部分(23)之后，将样本载片(20)置于载片移动器(27)上。然后，载片移动器(27)将样本载片(20)移动到来自光源(10)的光入射的位置。
当来自光源(10)的光入射到样本载片(20)中的子区域上时，样本的图像由面向该样本载片(20)的物镜(30)放大，并且CCD相机(50)拍摄通过物镜(30)放大的样本的图像。
所述装置可进一步包括光学过滤器(未示出)，其使透过物镜(30)的光中具有特定波长的光通过。因而，通过选择性地使由样本颗粒中特定颗粒发射的具有特定波长的光通过，CCD相机(50)可只拍摄特定颗粒。
然后将由CCD相机(50)拍摄的图像传输到微粒计数部分(60)，通过执行在计算机中设置的微粒计数部分(60)中的与图像相关的程序，有可能对特定颗粒的数目计数。
然后，载片移动器(27)将载片的位置移动预定的距离以便将邻接于之前刚拍摄的区域的特定区域移动到光入射的点且可对子区域中的微粒计数。
图3是一个实施例，其中读部分被分成每个子区域，以使微粒计数部分可通过每个子区域对样本载片拍摄并可对颗粒计数。子区域(1)到(120)是可由CCD相机单独拍摄的每个子区域。因而，读部分上的边界线实际不存在，而是为便于解释而给出的虚拟线。子区域的面积和数目可考虑微粒计数的精度和操作速度来适当地调整。
在如图3所描绘的样本载片分成子区域的情形下，拍摄子区域(1)并移动样本载片以便将邻接于之前刚拍摄的子区域(1)的子区域(2)移动到光入射的点，然后拍摄该子区域(2)。通过重复这样的过程，可拍摄子区域(1)至子区域(120)中的所有子区域。
微粒计数部分对由图像拍摄部分拍摄的子区域上的微粒计数，然后，通过将每个子区域中的微粒数目相加计算样本中微粒的总数。特别在其中包含样本的读部分的高度已知和由图像拍摄部分拍摄的子区域(1)至子区域(120)的面积已知的情况下，可计算读部分的容积。因而，根据样本的总体积和微粒的总数，可计算微粒的平均浓度(即单位体积中微粒的数目)。
图4描绘了第一实施例，其包括LED光源。图4描绘的装置用于对红血球计数，其包括：
样本载片(20)，其中，包含红血球的样本位于具有预定容积的读部分；
LED(11a)，其将紫外或可见光投射到样本载片上的子区域内；
入射光控制透镜(12a)，其控制从LED(11a)发射的光量和焦距；
入射光学过滤器(13a)，其使透过入射光控制透镜(12a)的具有指定波长的光通过，将光发射到样本载片上；
物镜(30)，其面向载片以放大样本的图像；
光学过滤器(40)，其使透过物镜(30)的具有指定波长的光通过；
CCD相机(50)，其拍摄通过光学过滤器(40)的样本图像；
微粒计数部分(60)，其对由CCD相机(50)拍摄的子区域中的红血球计数；以及
载片移动器(27)，其使样本载片的位置移动，以使邻接于之前刚拍摄的区域的特定区域移动到光入射的点。
所述装置进一步包括反射镜(51)以改变光的路径以便使通过所述光学过滤器(40)的光入射到CCD相机(50)上。
图5描绘了第二实施例，其包括LASER光源(11b)。图5描绘的装置用于对包含细胞核的细胞计数，如白血球或体细胞，所述装置包括：
样本载片(20)，其中，包含细胞和染色试剂的样本位于具有预定容积的读部分；
LASER源(11b)，其将光投射到样本载片上的子区域内；
入射光控制透镜(12b)，其控制从LASER源(11b)发射的光的量和焦距，并将光发射到样本载片上；
物镜(30)，其面向载片以放大样本的图像；
光学过滤器(40)，其使透过物镜(30)的具有指定波长的光通过；
CCD相机(50)，其拍摄通过光学过滤器(40)的样本图像；
微粒计数部分(60)，其对由图像拍摄部分拍摄的子区域上的细胞计数；以及
载片移动器(27)，其使样本载片的位置移动，以使邻接于之前刚拍摄的区域的特定区域移动到光入射的点。
所述装置进一步包括：反射镜(14)，以改变光的路径以便使透过入射光控制透镜(12b)的光入射到样本载片(20)上；和另一个反射镜(51)，以改变光的路径以便使通过光学过滤器(40)的光入射到CCD相机(50)上。
如果将荧光染色试剂预先施加于样本载片(20)内，然后以样本填充该样本载片(20)，则CCD相机(50)可通过光学过滤器(40)对特定颗粒拍摄，所述光学过滤器(40)可使通过物镜(30)的光中对应于荧光染色试剂的波长的光通过。
图6a描绘了通过使用图4所描绘的微粒计数装置对样本载片中的样本中的动物细胞的数目计数的实验结果。
首先，在培养溶液中培养动物细胞，将20μl的样本和相同体积的包括荧光染料PI(碘化丙啶)的染色溶液混合，以便对样本染色。然后，通过使用吸管将20μl的被染色的样本注入到样本输入孔中，将被染色的样本填充到样本载片中。
在实验中，微粒计数装置将样本载片的读部分分成120个子区域(3×40)，拍摄每个子区域，并连续地对颗粒计数。所述子区域的尺寸是0.82mm宽、0.61mm长。图6a左下侧所描绘的图像是样本载片的第6子区域的图片。在该图片中，白点代表发射具有特定波长的荧光的动物细胞。
对全部120个子区域，分析了每个拍摄的图像，且对每个子区域中的微粒计数。通过将它们相加，动物细胞的总数是1016。由于在样本载片中读部分中的拍摄的区域的面积是60mm2，且读部分的高度是100μm，所以观测的样本的体积是6μl。因而，该样本中动物细胞的平均浓度经计算是1.69×105颗粒/ml。由于该样本通过将包括动物细胞的该样本与样本染色溶液以1∶1混合而被稀释，通过乘以稀释因子2，实际浓度是3.38×105颗粒/ml。
图6b的图示出了细胞尺寸、荧光强度、和通过分析120个拍摄的图像中的每个而获得的每个图像中细胞的数目。
左图示出了细胞尺寸的分布。x轴表示图像中显示的细胞的尺寸，而y轴表示细胞的数目。优选地将峰的x轴值设为细胞尺寸的最大值，并将峰的左边的x轴值设为细胞尺寸的最小值。由于易于将噪声像素作为细胞计数，优选地将最小值设为大于4微米。
中间的图示出了细胞发射的荧光的强度。x轴表示由0到255的范围的灰度级所显示的荧光强度，而y轴表示对应于荧光强度的像素的数目。灰度级为255的像素是一个发射荧光的细胞的位置，而灰度级为0的像素是一个间隙。因而，大多数像素的灰度级的值要么是0，要么是255。
右图示出了在120个图像的每个之中计数的细胞的数目。通过将每个图像示出的细胞的数目相加，可获得存在于样本载片中读部分中的细胞的总数。尽管在每个图像中细胞的数目是变化的，但不存在由该变化引起的错误，因为合计了所有图像中的细胞的数目。
前述实施例并不限于本说明，而在对于本领域技术人员明显的范围中可实施替换、调整和变化。
工业可应用性
通过使用根据本发明的微粒计数装置，有可能对样本中的微粒数目自动计数，如酵母菌、乳酸菌、酶原、红血球、白血球或体细胞。具体地，载片移动器在预定的时间间隔将载片的位置移动预定的距离，以便使邻接于之前刚由CCD相机拍摄的区域的特定区域移动到光入射点。从而，载片上的子区域被连续拍摄。计数部分对每个子区域中的微粒的数目计数，并将它们加起来以计算样本中的微粒的总数。从而，有可能快捷并精准地对样本中的微粒计数。该装置的结构简单，使用方便且成本低。
Claims (16)
1.一种用于对微粒的数目计数的装置，其包括：
样本载片，其中，包含颗粒的样本可位于读部分；
光源，其将光投射到所述样本载片上的子区域内；
物镜，其面向所述载片以放大所述样本的图像，该图像通过从所述光源照射的光形成在所述子区域上；
图像拍摄部分，其拍摄所述样本载片上的子区域中的所述样本的图像，该图像由所述物镜放大；
微粒计数部分，其从由所述图像拍摄部分拍摄的图像对所述子区域上的微粒计数；以及
载片移动器，其使所述样本载片的位置移动，以使邻接于之前刚拍摄的区域的特定区域移动到所述光入射的点。
2.如权利要求1的装置，其中所述载片移动器在每个预定的时间间隔使所述样本载片移动预定的距离，并且当所述样本载片被移动时，所述图像拍摄部分随后拍摄邻接于之前刚拍摄的子区域的特定子区域的图像。
3.如权利要求2的装置，其中所述微粒计数部分对由所述图像拍摄部分连续拍摄的子区域中的微粒计数，将每个子区域中的微粒数目加到一起，并计算所述样本中微粒的总数；然后，根据所述样本载片的读部分的总容积和所述微粒的总数来计算所述微粒的平均浓度。
4.如权利要求1至3中任何一个的装置，还包括光学过滤器，其使通过所述物镜的光中的具有特定波长的光通过。
5.如权利要求1至3中任何一个的装置，其中所述光源选自卤素灯、氙灯、汞灯、LED和LASER。
6.如权利要求1至3中任何一个的装置，还包括入射光控制透镜，其控制从所述光源发射的光量和焦距，并照射在所述样本载片上。
7.一种用于对红血球数目计数的装置，其包括：
样本载片，其中，包含红血球的样本可位于读部分；
灯或LED，其将光投射到所述样本载片上的子区域内；
物镜，其面向所述载片以放大所述样本的图像，该图像通过从所述灯或所述LED照射的光形成在所述子区域上；
CCD相机，其拍摄所述样本载片上的子区域中的所述样本的图像，该图像由所述物镜放大；
微粒计数部分，其从由所述CCD相机拍摄的图像来对所述子区域上的红血球计数；以及
载片移动器，其使所述样本载片的位置移动，以使邻接于之前刚由所述CCD相机拍摄的区域的特定区域移动到所述光入射的点。
8.如权利要求7的装置，其中所述载片移动器在每个预定的时间间隔使所述样本载片移动预定的距离，并且当所述样本载片被移动时，所述CCD相机随后拍摄邻接于之前刚拍摄的子区域的特定子区域的图像。
9.如权利要求8的装置，其中所述微粒计数部分对由所述CCD相机连续拍摄的子区域中的红血球计数，将每个子区域中的红血球数目加到一起，并计算所述样本中红血球的总数；然后，根据所述样本载片的读部分的总容积和所述红血球的总数计算所述红血球的平均浓度。
10.如权利要求7至9中任何一个的装置，还包括光学过滤器，其使通过所述物镜的光中的具有特定波长的光通过。
11.如权利要求7至9中任何一个的装置，还包括入射光控制透镜，其控制从来自所述灯或所述LED的光发射的光量和焦距，并照射在所述样本载片上。
12.一种用于对具有细胞核的细胞的数目计数的装置，其包括：
样本载片，其中，包含所述细胞和荧光染色试剂的样本可位于读部分；
LASER源，其将光投射到所述样本载片处的子区域内；
物镜，其面向所述载片以放大所述样本的图像，该图像通过从所述LASER源照射的光形成在所述子区域上；
CCD相机，其拍摄所述样本载片上的子区域中的所述样本的图像，该图像通过所述物镜放大；
微粒计数部分，其从由所述CCD相机拍摄的图像来对所述子区域上的细胞计数；以及
载片移动器，其使所述样本载片的位置移动，以使邻接于之前刚由所述CCD相机拍摄的区域的特定区域移动到所述光入射的点。
13.如权利要求12的装置，其中所述载片移动器在每个预定的时间间隔使所述样本载片移动预定的距离，并且当所述样本载片被移动时，所述CCD相机随后拍摄邻接于之前刚拍摄的子区域的特定子区域的图像。
14.如权利要求13的装置，其中所述微粒计数部分对由所述CCD相机连续拍摄的子区域中的细胞计数，将每个子区域中的细胞数目加到一起，并计算所述样本中细胞的总数；然后，根据所述样本载片的读部分的总容积和所述细胞的总数计算所述细胞的平均浓度。
15.如权利要求12至14中任何一个的装置，还包括光学过滤器，其使通过所述物镜的光中具有特定波长的光通过。
16.如权利要求12至14中任何一个的装置，还包括入射光控制透镜，其控制从所述LASER源发射的光量和焦距，并照射在所述样本载片上。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR20030049524 | 2003-07-19 | ||
| KR1020030049524 | 2003-07-19 | ||
| KR1020040053031 | 2004-07-08 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1826521A true CN1826521A (zh) | 2006-08-30 |
| CN100520374C CN100520374C (zh) | 2009-07-29 |
Family
ID=36936469
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNB2004800208907A Active CN100520374C (zh) | 2003-07-19 | 2004-07-13 | 用于对微粒计数的装置 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR100608498B1 (zh) |
| CN (1) | CN100520374C (zh) |
Cited By (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101086496B (zh) * | 2007-07-16 | 2012-05-23 | 山东优生医疗科技有限公司 | 全自动血液常规智能分析仪及其分析方法 |
| CN102608017A (zh) * | 2007-03-29 | 2012-07-25 | 希森美康株式会社 | 生物试样的分析仪 |
| CN101520401B (zh) * | 2008-02-29 | 2012-08-29 | 鸿富锦精密工业（深圳）有限公司 | 粒子统计方法及装置 |
| CN101382499B (zh) * | 2007-09-04 | 2012-10-03 | 索尼株式会社 | 光照射装置、微粒分析装置和光照射方法 |
| CN103471979A (zh) * | 2013-08-14 | 2013-12-25 | 镇江耐丝新型材料有限公司 | 一种金刚线表面颗粒的计算方法 |
| CN101583972B (zh) * | 2007-01-17 | 2014-02-26 | 海莫库公司 | 用于确定在样本中包含的对象的位置的装置 |
| CN103620619A (zh) * | 2011-05-31 | 2014-03-05 | 伯乐实验室有限公司 | 细胞计数系统和方法 |
| CN103725604A (zh) * | 2014-01-08 | 2014-04-16 | 爱威科技股份有限公司 | 一种细胞计数板 |
| CN103773679A (zh) * | 2012-10-19 | 2014-05-07 | 青岛理工大学琴岛学院 | 自动菌落计数仪 |
| CN104486549A (zh) * | 2014-12-29 | 2015-04-01 | 中国科学院长春光学精密机械与物理研究所 | 一种用于成像流式细胞仪的高通量拍摄方法 |
| CN104619828A (zh) * | 2012-08-24 | 2015-05-13 | 株式会社佐竹 | 微生物的检查方法及其装置 |
| CN107860754A (zh) * | 2017-10-30 | 2018-03-30 | 中国农业科学院油料作物研究所 | 大豆褐化胞囊线虫胞囊自动计数方法 |
| CN107917870A (zh) * | 2018-01-09 | 2018-04-17 | 中国农业科学院油料作物研究所 | 一种根瘤计数方法 |
| CN110987768A (zh) * | 2019-12-11 | 2020-04-10 | 上海睿钰生物科技有限公司 | 酵母计数方法 |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2011099809A2 (ko) * | 2010-02-12 | 2011-08-18 | (주)로고스바이오시스템스 | 정량 미세입자 계수 챔버 및 이를 이용한 시료 이미지 분석장치 |
| KR101139858B1 (ko) * | 2010-04-13 | 2012-05-02 | 광주과학기술원 | 입자계수기 |
| KR101139854B1 (ko) * | 2010-04-13 | 2012-05-02 | 광주과학기술원 | 입자계수기 |
| KR101414247B1 (ko) * | 2011-12-12 | 2014-07-02 | (주)로고스바이오시스템스 | 셀 카운터 및 이를 제조하는 방법 |
| KR101681179B1 (ko) | 2015-03-16 | 2016-11-30 | 고려대학교 산학협력단 | 미세입자 분석 및 정량을 위한 세포계수 칩 |
| WO2017057966A1 (ko) * | 2015-09-30 | 2017-04-06 | 주식회사 싸이토젠 | 세포 이미징 장치 및 그 방법 |
| KR101873318B1 (ko) | 2015-09-30 | 2018-07-03 | 주식회사 싸이토젠 | 세포 이미징 장치 및 그 방법 |
| KR102088028B1 (ko) | 2018-12-11 | 2020-03-11 | 건양대학교 산학협력단 | 다중 부피를 이용한 세포 계수장치 |
| BG67480B1 (bg) | 2019-10-30 | 2022-12-15 | "Милкотроник" Оод | Устройство за диференциално броене на микрочастици в биологични течности |
| KR102505687B1 (ko) * | 2020-11-30 | 2023-03-03 | 디투이모션(주) | 혈구계산기를 이용한 반자동 세포 계수 방법 |
| KR102458411B1 (ko) | 2020-11-30 | 2022-10-26 | 에스팩 주식회사 | 입자 계수 장치 및 방법 |
| WO2022158940A1 (ko) | 2021-01-25 | 2022-07-28 | 주식회사 나노엔텍 | 다채널 시료 칩을 이용한 미세입자 계수방법 및 이를 구현한 미세입자 계수장치 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4580895A (en) * | 1983-10-28 | 1986-04-08 | Dynatech Laboratories, Incorporated | Sample-scanning photometer |
| GB8927742D0 (en) * | 1989-12-07 | 1990-02-07 | Diatec A S | Process and apparatus |
| DE69311944T2 (de) | 1992-04-01 | 1997-11-20 | Nihon Millipore Kogyo K K | Verfahren zur Bestimmung der Anzahl lebender Mikroorganismen |
| FR2719602B1 (fr) * | 1994-05-05 | 1996-07-26 | Biocom Sa | Procédé et installation pour la numérisation de cellules et micro-organismes, notamment des produits alimentaires ou des fluides biologiques. |
| WO1999024831A1 (fr) * | 1997-11-11 | 1999-05-20 | Kowa Company, Ltd. | Procede et dispositif de numeration de globules blancs |
| EP1067199A4 (en) | 1998-12-28 | 2006-09-27 | Sapporo Breweries | METHOD FOR COUNTING MICROORGANISMS AND DEVICE FOR PERFORMING SAID COUNT |
| KR20010017092A (ko) * | 1999-08-07 | 2001-03-05 | 김판구 | 혈구세포의 형태 자동 분석 및 카운트 방법 |
-
2004
- 2004-07-08 KR KR1020040053031A patent/KR100608498B1/ko active IP Right Review Request
- 2004-07-13 CN CNB2004800208907A patent/CN100520374C/zh active Active
Cited By (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101583972B (zh) * | 2007-01-17 | 2014-02-26 | 海莫库公司 | 用于确定在样本中包含的对象的位置的装置 |
| CN102608017A (zh) * | 2007-03-29 | 2012-07-25 | 希森美康株式会社 | 生物试样的分析仪 |
| CN102608017B (zh) * | 2007-03-29 | 2014-10-29 | 希森美康株式会社 | 生物试样的分析仪 |
| CN101086496B (zh) * | 2007-07-16 | 2012-05-23 | 山东优生医疗科技有限公司 | 全自动血液常规智能分析仪及其分析方法 |
| CN101382499B (zh) * | 2007-09-04 | 2012-10-03 | 索尼株式会社 | 光照射装置、微粒分析装置和光照射方法 |
| CN101520401B (zh) * | 2008-02-29 | 2012-08-29 | 鸿富锦精密工业（深圳）有限公司 | 粒子统计方法及装置 |
| CN103620619A (zh) * | 2011-05-31 | 2014-03-05 | 伯乐实验室有限公司 | 细胞计数系统和方法 |
| CN104619828A (zh) * | 2012-08-24 | 2015-05-13 | 株式会社佐竹 | 微生物的检查方法及其装置 |
| US9915601B2 (en) | 2012-08-24 | 2018-03-13 | Satake Corporation | Method for examining microorganisms and examination apparatus for microorganisms |
| CN103773679A (zh) * | 2012-10-19 | 2014-05-07 | 青岛理工大学琴岛学院 | 自动菌落计数仪 |
| CN103471979A (zh) * | 2013-08-14 | 2013-12-25 | 镇江耐丝新型材料有限公司 | 一种金刚线表面颗粒的计算方法 |
| CN103471979B (zh) * | 2013-08-14 | 2016-08-31 | 镇江耐丝新型材料有限公司 | 一种金刚线表面颗粒的计算方法 |
| CN103725604A (zh) * | 2014-01-08 | 2014-04-16 | 爱威科技股份有限公司 | 一种细胞计数板 |
| CN104486549A (zh) * | 2014-12-29 | 2015-04-01 | 中国科学院长春光学精密机械与物理研究所 | 一种用于成像流式细胞仪的高通量拍摄方法 |
| CN104486549B (zh) * | 2014-12-29 | 2017-07-25 | 中国科学院长春光学精密机械与物理研究所 | 一种用于成像流式细胞仪的高通量拍摄方法 |
| CN107860754A (zh) * | 2017-10-30 | 2018-03-30 | 中国农业科学院油料作物研究所 | 大豆褐化胞囊线虫胞囊自动计数方法 |
| CN107917870A (zh) * | 2018-01-09 | 2018-04-17 | 中国农业科学院油料作物研究所 | 一种根瘤计数方法 |
| CN110987768A (zh) * | 2019-12-11 | 2020-04-10 | 上海睿钰生物科技有限公司 | 酵母计数方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR100608498B1 (ko) | 2006-08-08 |
| CN100520374C (zh) | 2009-07-29 |
| KR20050010709A (ko) | 2005-01-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1826521A (zh) | 用于对微粒计数的装置 | |
| EP1651947B1 (en) | Device for counting micro particles | |
| JP7227202B2 (ja) | サンプルを代表する光を検出すること及び利用すること | |
| CA2714903C (en) | Method and apparatus for analysis of particles in a liquid sample | |
| US20140152801A1 (en) | Detecting and Using Light Representative of a Sample | |
| WO2013137247A1 (ja) | 蛍光検出装置及び蛍光検出方法 | |
| JP6336697B2 (ja) | 少量のサンプル容積から形成された血液構成成分沈降速度の迅速な測定 | |
| CN1116708A (zh) | 细胞分析装置 | |
| JP6829950B2 (ja) | 分析方法、分析装置および分析システム | |
| JP2017504027A (ja) | 少量のサンプル容積から形成された血液構成成分沈降速度の迅速な測定 | |
| CN1148890A (zh) | 用于检测毒性的方法、装置及其应用 | |
| JP2003294604A (ja) | フローセルイメージングによる粒子の画像化装置及びその方法 | |
| CN1777804A (zh) | 光学检查装置 | |
| Liu et al. | Multi-Modal Multi-Spectral Intravital Microscopic Imaging of Signaling Dynamics in Real-Time during Tumor–Immune Interactions | |
| JP2008116422A (ja) | 微粒子検出装置 | |
| JP6747908B2 (ja) | バッファ吸取装置及びがん解析システム | |
| CN110057729A (zh) | 一种人体颗粒物被动沉降浓度测试方法 | |
| US20070153280A1 (en) | Diagnostic imaging device for the analysis of circulating rare cells | |
| US20200040295A1 (en) | Cell transfer apparatus | |
| US20190079071A1 (en) | Cancer analysis system and cancer analysis method | |
| Zheng et al. | An automated and intelligent microfluidic platform for microalgae detection and monitoring | |
| CN216979098U (zh) | 颗粒检测装置 | |
| US8963105B2 (en) | Image obtaining apparatus, image obtaining method, and image obtaining program | |
| JP2017015671A (ja) | 生体関連物質の定量システム | |
| CN114002448A (zh) | 颗粒检测装置 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| ASS | Succession or assignment of patent right |
Owner name: NA ENTAI CO., LTD. Free format text: FORMER OWNER: DIGITAL BIO TECHNOLOGY Effective date: 20120328 |
|
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20120328 Address after: Seoul, South Kerean Patentee after: Naentai Co. Ltd. Address before: Seoul, South Kerean Patentee before: Digital Bio Technology |