CN1823066A - 取代的四氢－1h－吡唑并[3,4－c]吡啶、含有它们的组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及取代的四氢－1H－吡唑并[3，4－c]吡啶、含有它们的组合物以及它们的用途。本发明尤其涉及新的取代的四氢－1H－吡唑并[3，4－C]吡啶，它们具有治疗活性，可用于治疗癌症。
Description
本发明涉及新的化合物，特别是新的四氢-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶、含有它们的组合物以及它们作为药物的应用。
更具体而言，本发明涉及具有抗癌活性的新的四氢-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶，尤其是具有激酶抑制活性并特别是Tie2抑制活性的新的四氢-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶。
迄今为止，只有少数四氢-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶化合物是已知的。
WO 02/012442公开了在5位被可任选被取代的氨基基团所取代的四氢-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶化合物。这些化合物用于治疗癌症及其它与细胞增殖相关的疾病。
P.Krogsgaard-Larsen等在Eur.J.Med.Chemical-Chim.Ther.(1979)，14(2)，第157-164页中公开了两种在3位具有羟基基团取代基的取代的四氢-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶。
WO 96/12720公开了取代的四氢-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶化合物，它们在3位被选自下列的取代基所取代：H、烷基、亚烷基、环烷基和亚甲基环烷基，在1-和6-位上具有不同的取代基。这些化合物均被描述为(i)IV型磷酸二酯酶(PDE-IV)和(ii)肿瘤坏死因子(TNF)的抑制剂，所以它们被认为可以应用于治疗炎症疾病。但是，其中未公开任何本发明的化合物。
经过努力，过去已经成功的获得了有效的Tie2抑制剂(在这一方面，可以参见，例如WO 98/02434；WO 98/41525；WO 99/10325；WO 99/17770；WO 99/54286；WO 99/21859；WO 99/55335；WO 00/17202；WO 00/17203；WO 00/27822；WO 00/75139；WO 01/37835；WO 01/57008；WO 01/72751；WO 02/060382；WO 02/076396；WO 02/076463；WO 02/076954；WO02/076984；WO 02/076985；WO 02/080926；WO 03/004488)。然而，这些文献都没有公开如下所定义的具有对抗激酶、特别是Tie2的活性的4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶衍生物。
根据第一方面，本发明的化合物具有下列式(I)及其互变异构体：
其中：
L选自键、CH2、CO、SO2、CONH、COO、NHCO、NH、NHSO2、SO2NH、NHCONH、CH2NH和NHCH2；
X选自键、CH2、CO、SO2、CONH和COO；
R1选自OH、H、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，并任选被取代，并且当X为键时，R1也可以为卤素；
R2为H或者选自烷基、亚烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，并任选被取代；
所述取代基可独立选自R3、O-R3、卤素、NO2、SO2-R3、CO-R3、SO2NH-R3、CONH-R3、N-(R3)2、NHCO-R3、NHSO2-R3、NHCONH-R3、NHSO2NH-R3、OCO-R3、COO-R3、OSO2-R3、SO2O-R3、OCONH-R3和OSO2NH-R3，其中每一个R3均独立选自H、烷基、环烷基、烯基、芳基、杂芳基、杂环基，并任选被下列基团所取代：卤素、芳基、杂芳基、R4、OR4或N(R4)2，每一个R4可独立选自H、C1-C4烷基和卤代C1-C4烷基。
根据第一方面，本发明的化合物更特别是具有下列式(II)的化合物及其互变异构体：
其中：
X选自键、CH2、CO、SO2、CONH和COO；
R1选自烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，并任选被取代；
R2为H或选自烷基、亚烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，并任选被取代；
所述取代基可独立选自R3、O-R3、卤素、NO2、SO2-R3、CO-R3、SO2NH-R3、CONH-R3、N-(R3)2、NHCO-R3、NHSO2-R3、NHCONH-R3、NHSO2NH-R3、OCO-R3、COO-R3、OSO2-R3、SO2O-R3、OCONH-R3和OSO2NH-R3，其中每一个R3均独立选自H、烷基、环烷基、烯基、芳基、杂芳基、杂环基，并可任选被下列基团所取代：卤素、芳基、杂芳基、OR4或N(R4)2，其中每一个R4均独立选自H和C1-C4烷基。
根据第一方面，本发明的化合物更特别具有下列式(III)及其互变异构体：
其中：
X选自键、CH2、CO、SO2、CONH和COO；
R1选自烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，并任选被取代；
R2为H或选自烷基、亚烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，并任选被取代；
其中所述取代基可独立选自R3、O-R3、卤素、NO2、SO2-R3、CO-R3、SO2NH-R3、CONH-R3、N-(R3)2、NHCO-R3、NHSO2-R3、NHCONH-R3、NHSO2NH-R3、OCO-R3、COO-R3、OSO2-R3、SO2O-R3、OCONH-R3和OSO2NH-R3，其中每一个R3均独立选自H、烷基、环烷基、烯基、芳基、杂芳基、杂环基，并可任选被下列基团所取代：卤素、芳基、杂芳基、OR4或N(R4)2，其中每一个R4均独立选自H和C1-C4烷基。
本发明的化合物最好为如下定义的化合物，其中R1为可任选被取代的杂芳基，其中优选的杂芳基选自可任选被卤素、R4或O-R4所取代的苯并咪唑基、吲哚基、吡咯基。
更具体而言，优选的杂芳基选自可任选被卤素、R4或O-R4所取代的苯并咪唑-2-基、吲哚-2-基、吡咯-2-基。
优选如下定义的本发明的化合物：R2选自下列基团：苯基、吡啶基、噻吩基、C1-C4烷基和C3-C7环烷基，并任选被取代。
X最好选自CO和SO2。
根据第一方面，本发明的化合物最好选自其中R1为H的式(I)化合物。
优选的化合物最好选自其中R1为取代的芳基的式(I)化合物。
根据第一种优选实施方案，优选的化合物最好选自其中R1-L为R1-NH-CO的式(I)化合物，并更优选R1为H。
根据第二种优选实施方案，更优选选自如下定义的(i)式(I)化合物，或(ii)根据第一种优选实施方案的优选化合物，其中X为键，并且其中R2选自取代的芳基和取代的杂芳基。
根据第三种优选的实施方案，更优选的化合物选自根据第二种实施方案的本发明的化合物，其中R2选自：
被NHSO2-R3或NHCONH-R3所取代的芳基，和
被NHSO2-R3或NHCONH-R3所取代的杂芳基。
根据第三种优选实施方案的化合物最好选自：
被NHSO2-R3或NHCONH-R3所取代的芳基，和
被NHSO2-R3或NHCONH-R3所取代的杂芳基，
其中芳基为苯基，且杂芳基选自吡啶基和嘧啶基。
根据第四种实施方案，根据第三种优选实施方案的化合物最好选自：
被NHSO2-R3或NHCONH-R3所取代的芳基，和
被NHSO2-R3或NHCONH-R3所取代的杂芳基，
其中R3选自取代的芳基和取代的杂芳基，其中R3最好被选自下列的取代基所取代：卤素、R4、OR4和N(R4)2，其中每一个R4均可独立选自H、C1-C4烷基和卤代C1-C4烷基。
根据第五种实施方案，基于第四种优选实施方案的化合物最好选自：
根据其第一方面，本发明的化合物可以以下列形式存在：
1)外消旋形式，或
2)富集立体异构体的形式，或
3)富集对映体的形式；
并且也可以任选成盐。
根据第二方面，本发明涉及含有如上所定义的化合物和药学上可接受的赋形剂的药用组合物。
根据第三方面，本发明涉及如上所定义的化合物作为调节激酶活性的药物的用途。优选的激酶最好选自Tie2和KDR。更优选Tie2。
根据其第三方面，本发明涉及如上所定义的化合物用于制备药物的用途，该药物用于治疗病症，特别是癌症。
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的方法获得，特别是可以参考酸和胺之间的偶合技术方面的文献，参见，例如J.March，Advanced organic chemistry，(J.Wiley & Sons，ed.)，第四版，1992。
本发明化合物可以作为抑制由激酶所催化的反应的抑制剂。Tie2为本发明化合物特别用作抑制剂所抑制的一种激酶。这些化合物也可以作为其它激酶的抑制剂，如KDR。
选择激酶的原因如下所述：
Tie2
Tie-2(TEK)为内皮细胞特异的受体酪氨酸蛋白激酶家族成员。Tie2为具有酪氨酸蛋白激酶活性的第一受体，其激动剂(促血管生成素1或Ang1)(刺激受体自磷酸化和细胞信号[S.Davis等(1996)Cell 87，1161-1169])和拮抗剂(促血管生成素2或Ang2))[P.C Maisonpierre等(1997)Science 277，55-60]均为已知的。促血管生成素1可以与VEGF在新血管生成的最后阶段协同起效[Asahara T.Circ.Res.(1998)233-240]。在动物中进行的Tie2和Ang1表达的敲除实验和转基因处理结果显示血管生成缺陷[D.J.Dumont等(1994)Genes Dev.8，1897-1909和C.Suri(1996)Cell 87，1171-1180]。Ang1与其受体的结合导致Tie2激酶域的自动磷酸化，这对新血管生成以及对具有外皮细胞和平滑肌细胞的血管的募集和相互作用是必不可少的，这些现象促成了新形成血管的成熟和稳定[P.C.Maisonpierre等(1997)Science 277，55-60]。Lin等(1997)，J.Clin.Invest.100，8：2072-2078和LinP.(1998)PNAS 95，8829-8834已经揭示了腺病毒感染期间或乳房肿瘤和黑色素瘤xenograph模型的细胞外区注射Tie-2(Tek)期间肿瘤生长和血管生成的抑制。
Tie2抑制剂可以用于新血管生成不适当发生的情况(也就是说，在糖尿病视网膜病、慢性炎症、银屑病、卡波氏肉瘤、慢性新血管生成导致的黄斑变性、风湿性关节炎、婴儿血管瘤(haemoangioma)和癌症中)
KDR
KDR(蛋白激酶插入域受体)，也被称为VEGF-R2(血管内皮生长因子受体2)，只在内皮细胞中表达。该受体与血管生长因子结合，并通过其细胞内蛋白激酶区的激活作为转导信号的介质。在外源性VEGF(血管内皮生长因子)存在下，VEGF-R2蛋白激酶活性的直接抑制使得血管生成现象减少成为可能(Strawn等，Cancer Research，1996，56卷，第3540-3545页)。特别在使用VEGF-R2突变型时该过程得到了证明(Millauer等，CancerResearch，1996，56卷，第1615-1620页)。VEGF-R2受体似乎在成人中没有任何作用，除非涉及VEGF的血管生成活性。因此，VEGF-R2蛋白激酶活性的选择性抑制剂只显示轻微的毒性。
除了在动态血管生成过程中的这个重要作用外，近期的结果显示化疗和放疗后VEGF的表达有助于肿瘤细胞的存活，强调了KDR抑制剂与其它成分的潜在的协同作用(Lee等，Cancer Research，2000，60卷，第5565-5570页)。
实验部分
方法A：LC/MS分析
在与HP 1100设备相连接的Micromass LCT型设备上进行LC/MS分析。使用HP G1315A二级管阵列检测器在200-600nm的波长范围内和Sedex 65光散射检测器测定产物的量。在180-800的范围内获得质谱。用Micromass MassLynx软件分析数据。用Hypersil BDS C18，3μm(50×4.6mm)柱进行分离，用含有0.05％(v/v)三氟乙酸的5-90％的乙腈水溶液(含0.05％(v/v)TFA)进行线性梯度洗脱，以1ml/min的流速洗脱3.5分钟。总的分析时间(包括柱重新平衡时间)为7分钟。
方法B：LC/MS纯化
采用Waters FractionsLynx系统通过LC/MS纯化产物，该系统包括Waters 600型梯度泵、Waters 515型再生泵、Waters Reagent Manager稀释泵、Waters 2700型自动进样器、两个Rheodyne LabPro型阀、Waters996型二极管阵列检测器、Waters ZMD型质谱仪和Gilson 204型组分收集器。该系统通过Waters FractionLynx软件控制。可选择两种WatersSymmetry柱(C18，5μm、19×50mm，目录参考号186000210)进行分离，一个柱用含有0.07％(v/v)三氟乙酸的95/5(v/v)水/乙腈混合物进行再生，而另一个柱用于分离。以10ml/min的流速，用含有0.07％(v/v)三氟乙酸的5-95％的乙腈水溶液(含0.07％(v/v)TFA)线性梯度洗脱上述柱。在分离柱的出口，通过LC Packing Accurate方法将千分之一的洗脱液分离，以0.5ml/min的流速用甲醇稀释并送入检测器，75％送入二极管阵列检测器，剩余的25％送入质谱仪。其它的洗脱液(999/1000)送入组分收集器，待FractionLynx软件检测不到目标产物的量时将流动液丢弃。将目标产物的分子式提供给FractionLynx软件，当检测到的质谱信号符合离子[M+H]+和/或[M+Na]+时该软件就开始收集产物。在某些情况下，根据分析LC/MS的结果，当检测到符合[M+2H]++的高密度离子时，相应的计算分子量的一半(MW/2)的值也被提供给FractionLynx软件。在此情况下，当检测到离子[M+2H]++和/或[M+Na+H]++的质谱信号时，收集也会启动。
方法C：EI分析
通过在Finnigan SSQ 7000光谱仪上电子轰击(70eV)得到质谱。
方法D：NMR分析
在Bruker Avance 300光谱仪和Bruker Avance DRX 400光谱仪上得到NMR谱。
4-(叠氮基乙氧基羰基甲基)-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯
| CAS | 名称 | d | MM | eq | mmol | g | ml | |
| 1 | 79099-07-3 | N-Boc-哌啶酮 | 199.25 | 1.00 | 50.19 | 10.00 | ||
| 2 | 623-73-4 | 重氮乙酸乙酯 | 1.085 | 114.1 | 1.05 | 52.70 | 6.01 | 5.54 |
| 3 | 109-72-8 | 1.6M BuLi的己烷溶液 | 1.60 | 80.30 | 50.19 | |||
| 4 | 108-18-9 | 二异丙基胺 | 0.720 | 101.19 | 1.60 | 80.30 | 8.13 | 11.29 |
| 5 | 109-99-9 | 在4A°分子筛上吸附的THF | 10vol. | 500 | ||||
| 6 | 64-19-7 | 100％AcOH | 1.050 | 60.05 | 5.00 | 250.94 | 15.07 | 14.35 |
于-78℃，在惰性气体中，将新制备的LDA溶液(在惰性气体中于-78℃将50.19ml的1.6M BuLi己烷溶液滴加到11.29ml二异丙基胺的200ml无水THF溶液中制备)滴加到10.0g N-Boc-哌啶酮悬浮液和5.54ml重氮乙酸乙酯的300ml无水THF中。将混合物于-78℃搅拌4小时，然后于-78℃用14.35ml浓AcOH分解。将获得的混合物置于室温下过夜，然后减压蒸发除去溶剂，至初始体积的1/10时，在二异丙基醚中稀释，并用饱和的碳酸氢钠溶液洗涤4次。用MgSO4干燥有机相。过滤除去含水盐，减压浓缩无水滤液得到15.12g粘性黄色油状物。LC/MS：RT＝2.84；[M+1]+＝304.33。产物用于后面的步骤。
4-(叠氮基乙氧基羰基甲基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯
| CAS | 名称 | d | MM | eq | mmol | g | ml | |
| 1 | P-31391-106-4 | 313.35 | 1 | 48.25 | 15.12 | |||
| 2 | 10025-87-3 | POCl3 | 1.67 | 153.33 | 2 | 96.51 | 14.80 | 8.86 |
| 3 | 110-86-1 | 吡啶(4A°.m.s.) | 0.983 | 79.1 | 20 | 965.06 | 76.34 | 77.66 |
| 4 | 108-20-3 | iPr2O | 5vol | 250 | ||||
| 5 | 1310-73-2 | 0.1M NaOH | 40 | 1 | 48.25 | 483 |
将78.0ml无水吡啶加到15.12g 4-(叠氮基乙氧基羰基甲基)-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯的250ml iPr2O溶液中。将混合物冷却到-10℃，在剧烈搅拌下缓慢加入8.86ml的POCl3。然后将混合物冷却至室温并于室温下搅拌12小时。用500ml的0.1M NaOH溶液分解反应混合物，然后用EtOAc萃取3次。用饱和的氯化钠溶液洗涤有机相并用硫酸镁干燥。过滤除去含水盐，减压浓缩无水滤液至初始体积的1/10。LC/MS：RT＝4.57；[M+1]+＝296.31。所得产物可用于后面的步骤。
2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶基-3，6-二甲酸6-叔丁基3-乙基酯
| CAS | 名称 | d | MM | eq | mmol | mg | ml | |
| 1 | P-31391-120-4 | 285.35 | 1.0 | 48.25 | ||||
| 2 | 108-83-3 | PhMe | 150 |
于回流下，将上面步骤获得的4-(叠氮基乙氧基羰基甲基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯的Py/EtOAc溶液滴加到150ml甲苯中。以与滴加速度相同的速度蒸馏Py/PhMe共沸物。滴加结束后1小时，将溶液冷却至室温，减压蒸发除去溶剂，将所得粗品产物(15.05g)经快速色谱(SiO2，CH2Cl2/MeOH 1％NH37M(MeOH)先40∶1然后30∶1再20∶1)纯化。蒸发除去溶剂得到10.05g(3步共71％)的黑色固体。LC/MS：RT＝3.88；[M+1]+＝296.27。
2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶基-6-甲酸叔丁酯)-3-甲酸
| CAS | 名称 | d | MM | eq | mmol | g | ml | |
| 1 | P-31391-123-1 | 295.34 | 1.0 | 34.03 | 10.05 | |||
| 2 | 1310-66-3 | LiOH·H2O | 41.96 | 1.1 | 37.43 | 1.57 | ||
| 3 | 67-56-1 | MeOH | 10vol. | 375 | ||||
| 4 | 7732-18-5 | H2O | 1vol | 38 |
将1.57g的LiOH和38ml的水加到10.05g 2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶基-3，6-二甲酸6-叔丁基3-乙基酯的375ml甲醇溶液中。将所得混合物加热回流过夜。将溶液冷却至室温，然后用50ml的1M HCl溶液酸化至pH＝2。然后用EtOAc萃取上述溶液4次。用饱和的氯化钠溶液洗涤有机相，然后用硫酸钠干燥。过滤除去得到的盐，减压蒸发溶剂得到8.90g(98％)的白色固体。LC/MS：RT＝3.21；[M+1]+＝268.23。
产物的实验室制备：
3-(烷基氨基甲酰基、芳基氨基甲酰基、杂芳基氨基甲酰基等)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯
| CAS | 名称 | d | MM | eq | mmol | g | ml | |
| 1 | P-31391-031-5 | 267.28 | 1.0 | 3.741 | 1.00 | |||
| 胺 | 2.0 | 6.744 | ||||||
| 2 | 538-75-0 | DCC | 206.33 | 1.0 | 3.741 | 0.772 | ||
| 3 | 2592-95-2 | HOBt·H2O | 153.13 | 1.5 | 5.612 | 0.859 | ||
| 4 | 68-12-2 | DMF | 5vol. | 19 |
通用方法：
将DCC和HOBT.H2O的DMF溶液及2eq的胺(R、Ar或Het)-NH2加到1eq的2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶基-6-甲酸叔丁酯)-3-甲酸的DMF溶液中，将混合物于室温下搅拌3小时。于35℃减压蒸发过夜除去溶剂。所得粗品产物经快速色谱(SiO2，CH2Cl2/MeOH 1％NH37M(MeOH)先20∶1然后10∶1然后5∶1，依产物而定)纯化。
所用胺R1-NH2如下表(表1)[注释：R1-NH2＝(R、Ar或Het)-NH2]：
| 胺的参考序号 | 结构 |
表1
3-(烷基氨基甲酰基、芳基氨基甲酰基、杂芳基氨基甲酰基等)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-鎓三氟乙酸盐
通用方法：
将16eq的TFA加到1eq的3-(烷基氨基甲酰基、芳基氨基甲酰基、杂芳基氨基甲酰基等)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯的1∶1THF/水溶液中，将溶液加热回流2小时。减压蒸发除去溶剂，将收集到的粘性油状物真空干燥过夜。所得产物不经纯化直接用于后面步骤。
6-(烷基、芳基、杂芳基等)羰基-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-(烷基、芳基、庚基等)酰胺
通用方法：
将2.5M HOBt·H2O(2eq)的DMF溶液、0.833M HBTU的DMF(2eq)溶液、2.5M DIPEA(4eq)的DMF溶液和适当浓度的R2COOHp(2eq)的DMF悬浮液或溶液按顺序加到1eq的3-(烷基氨基甲酰基、芳基氨基甲酰基、杂芳基氨基甲酰基等)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-鎓三氟乙酸盐的DMF溶液中。将溶液于室温下搅拌过夜，然后用100μl的100％AcOH酸化，过滤并经制备LC/MS纯化。
所用酸R2COOH列于下表(表2)：
| 酸的参考序号 | 命名 |
| 1 | 1-苯基-1-环丙基甲酸 |
| 2 | 乙酸 |
| 3 | 丙炔酸 |
| 4 | 丁烯酸 |
| 5 | 乙烯乙酸 |
| 6 | 丙酮酸 |
| 7 | 肌氨酸 |
| 8 | 甲氧乙酸 |
| 9 | 乳酸 |
| 10 | 3，3-二甲基丙烯酸 |
| 11 | 环丙基乙酸 |
| 12 | 戊酸 |
| 13 | N，N-二甲基氨基乙酸 |
| 14 | 3-巯基丙酸 |
| 15 | (甲硫基)乙酸 |
| 16 | 吡咯-2-甲酸 |
| 17 | 1-氰基环丙烷甲酸 |
| 18 | 2-呋喃甲酸 |
| 19 | 4-吡唑甲酸 |
| 20 | 咪唑-4-甲酸 |
| 21 | 1-环戊烯甲酸 |
| 22 | 酸 |
| 23 | 乙酰氧基乙酸 |
| 24 | 海因酸 |
| 25 | 苯甲酸 |
| 26 | 烟酸 |
| 27 | 2-吡嗪甲酸 |
| 28 | o-甲基苯甲酸 |
| 29 | 苯乙酸 |
| 30 | 水杨酸 |
| 31 | 2-氟苯甲酸 |
| 32 | 3-氰基苯甲酸 |
| 33 | 4-乙烯基苯甲酸 |
| 34 | 2-苯基丙酸 |
| 35 | N-甲基邻氨基苯甲酸 |
| 36 | 2-甲氧基苯甲酸 |
| 37 | 2-羟基苯乙酸 |
| 38 | 4-羟甲基苯甲酸 |
| 39 | 2-氟苯基苯甲酸 |
| 40 | 2，6-二氟苯甲酸 |
| 41 | 吲哚-3-甲酸 |
| 42 | 3，5-二甲基苯乙酸 |
| 43 | 3-(二甲基氨基)苯甲酸 |
| 44 | 胡椒基酸 |
| 45 | DL-托品酸 |
| 46 | 3-甲氧基苯乙酸 |
| 47 | 3-甲氧基水杨酸 |
| 48 | 4-(甲硫基)苯甲酸 |
| 49 | 2-氯苯乙酸 |
| 50 | 2-萘甲酸 |
| 51 | 2-氯-6-氟苯甲酸 |
| 52 | 1-甲基吲哚-3-甲酸 |
| 53 | 3-乙酰氨基苯甲酸 |
| 54 | 4-(二甲基氨基)水杨酸 |
| 55 | 2，3-二甲氧基苯甲酸 |
| 56 | 4-氯苯基丙酸 |
| 57 | 2-氯扁桃酸 |
| 58 | 2-氯-6-氟苯乙酸 |
| 59 | 1-苯基-1-环戊烷甲酸 |
| 60 | 2，6-二氯苯甲酸 |
| 61 | 3-甲基-2-苯基戊酸 |
| 62 | 4-苯基苯甲酸 |
| 63 | 2-氯-4-硝基苯甲酸 |
| 64 | 2-苄基苯甲酸 |
| 65 | 2-苯氧基苯甲酸 |
| 66 | 2-乙氧基-1-萘甲酸 |
| 67 | 4-(4-N-丙基苯基)苯甲酸 |
| 68 | 3，5-二溴水杨酸 |
| 69 | 2，6-二氯苯乙酸 |
| 70 | 氰乙酸 |
表2
结果
根据前面所述方法制备下列产物。
方法A
为了简化下面表3中产物的表达，方法A中所列示的吡唑并吡啶环采用字母H表示，与H相连接的胺R1-NH2用后面跟随数字1-15的字母B表示，与表1中的产物相对应，与H相连接的酸R2-COOH用后面跟随数字1-70的字母A表示，与表2所列示的产物相对应。
所以，A1-H-B1所代表的产物与下列结构相对应：
| A1-H-B1 | A2-H-B1 | A3-H-B1 | A4-H-B1 | A5-H-B1 | A6-H-B1 | A7-H-B1 |
| A1-H-B2 | A2-H-B2 | A3-H-B2 | A4-H-B2 | A5-H-B2 | A6-H-B2 | A7-H-B2 |
| A1-H-B3 | A2-H-B3 | A3-H-B3 | A4-H-B3 | A5-H-B3 | A6-H-B3 | A7-H-B3 |
| A1-H-B4 | A2-H-B4 | A3-H-B4 | A4-H-B4 | A5-H-B4 | A6-H-B4 | A7-H-B4 |
| A1-H-B5 | A2-H-B5 | A3-H-B5 | A4-H-B5 | A5-H-B5 | A6-H-B5 | A7-H-B5 |
| A1-H-B6 | A2-H-B6 | A3-H-B6 | A4-H-B6 | A5-H-B6 | A6-H-B6 | A7-H-B6 |
| A1-H-B7 | A2-H-B7 | A3-H-B7 | A4-H-B7 | A5-H-B7 | A6-H-B7 | A7-H-B7 |
| A1-H-B8 | A2-H-B8 | A3-H-B8 | A4-H-B8 | A5-H-B8 | A6-H-B8 | A7-H-B8 |
| A1-H-B9 | A2-H-B9 | A3-H-B9 | A4-H-B9 | A5-H-B9 | A6-H-B9 | A7-H-B9 |
| A1-H-B10 | A2-H-B10 | A3-H-B10 | A4-H-B10 | A5-H-B10 | A6-H-B10 | A7-H-B10 |
| A1-H-B11 | A2-H-B11 | A3-H-B11 | A4-H-B11 | A5-H-B11 | A6-H-B11 | A7-H-B11 |
| A1-H-B12 | A2-H-B12 | A3-H-B12 | A4-H-B12 | A5-H-B12 | A6-H-B12 | A7-H-B12 |
| A1-H-B13 | A2-H-B13 | A3-H-B13 | A4-H-B13 | A5-H-B13 | A6-H-B13 | A7-H-B13 |
| A1-H-B14 | A2-H-B14 | A3-H-B14 | A4-H-B14 | A5-H-B14 | A6-H-B14 | A7-H-B14 |
| A1-H-B15 | A2-H-B15 | A3-H-B15 | A4-H-B15 | A5-H-B15 | A6-H-B15 | A7-H-B15 |
| A8-H-B1 | A9-H-B1 | A10-H-B1 | A11-H-B1 | A12-H-B1 | A13-H-B1 | A14-H-B1 |
| A8-H-B2 | A9-H-B2 | A10-H-B2 | A11-H-B2 | A12-H-B2 | A13-H-B2 | A14-H-B2 |
| A8-H-B3 | A9-H-B3 | A10-H-B3 | A11-H-B3 | A12-H-B3 | A13-H-B3 | A14-H-B3 |
| A8-H-B4 | A9-H-B4 | A10-H-B4 | A11-H-B4 | A12-H-B4 | A13-H-B4 | A14-H-B4 |
| A8-H-B5 | A9-H-B5 | A10-H-B5 | A11-H-B5 | A12-H-B5 | A13-H-B5 | A14-H-B5 |
| A8-H-B6 | A9-H-B6 | A10-H-B6 | A11-H-B6 | A12-H-B6 | A13-H-B6 | A14-H-B6 |
| A8-H-B7 | A9-H-B7 | A10-H-B7 | A11-H-B7 | A12-H-B7 | A13-H-B7 | A14-H-B7 |
| A8-H-B8 | A9-H-B8 | A10-H-B8 | A11-H-B8 | A12-H-B8 | A13-H-B8 | A14-H-B8 |
| A8-H-B9 | A9-H-B9 | A10-H-B9 | A11-H-B9 | A12-H-B9 | A13-H-B9 | A14-H-B9 |
| A8-H-B10 | A9-H-B10 | A10-H-B10 | A11-H-B10 | A12-H-B10 | A13-H-B10 | A14-H-B10 |
| A8-H-B11 | A9-H-B11 | A10-H-B11 | A11-H-B11 | A12-H-B11 | A13-H-B11 | A14-H-B11 |
| A8-H-B12 | A9-H-B12 | A10-H-B12 | A11-H-B12 | A12-H-B12 | A13-H-B12 | A14-H-B12 |
| A8-H-B13 | A9-H-B13 | A10-H-B13 | A11-H-B13 | A12-H-B13 | A13-H-B13 | A14-H-B13 |
| A8-H-B14 | A9-H-B14 | A10-H-B14 | A11-H-B14 | A12-H-B14 | A13-H-B14 | A14-H-B14 |
| A8-H-B15 | A9-H-B15 | A10-H-B15 | A11-H-B15 | A12-H-B15 | A13-H-B15 | A14-H-B15 |
| A15-H-B1 | A16-H-B1 | A17-H-B1 | A18-H-B1 | A19-H-B1 | A20-H-B1 | A21-H-B1 |
| A15-H-B2 | A16-H-B2 | A17-H-B2 | A18-H-B2 | A19-H-B2 | A20-H-B2 | A21-H-B2 |
| A15-H-B3 | A16-H-B3 | A17-H-B3 | A18-H-B3 | A19-H-B3 | A20-H-B3 | A21-H-B3 |
| A15-H-B4 | A16-H-B4 | A17-H-B4 | A18-H-B4 | A19-H-B4 | A20-H-B4 | A21-H-B4 |
| A15-H-B5 | A16-H-B5 | A17-H-B5 | A18-H-B5 | A19-H-B5 | A20-H-B5 | A21-H-B5 |
| A15-H-B6 | A16-H-B6 | A17-H-B6 | A18-H-B6 | A19-H-B6 | A20-H-B6 | A21-H-B6 |
| A15-H-B7 | A16-H-B7 | A17-H-B7 | A18-H-B7 | A19-H-B7 | A20-H-B7 | A21-H-B7 |
| A15-H-B8 | A16-H-B8 | A17-H-B8 | A18-H-B8 | A19-H-B8 | A20-H-B8 | A21-H-B8 |
| A15-H-B9 | A16-H-B9 | A17-H-B9 | A18-H-B9 | A19-H-B9 | A20-H-B9 | A21-H-B9 |
| A15-H-B10 | A16-H-B10 | A17-H-B10 | A18-H-B10 | A19-H-B10 | A20-H-B10 | A21-H-B10 |
| A15-H-B11 | A16-H-B11 | A17-H-B11 | A18-H-B11 | A19-H-B11 | A20-H-B11 | A21-H-B11 |
| A15-H-B12 | A16-H-B12 | A17-H-B12 | A18-H-B12 | A19-H-B12 | A20-H-B12 | A21-H-B12 |
| A15-H-B13 | A16-H-B13 | A17-H-B13 | A18-H-B13 | A19-H-B13 | A20-H-B13 | A21-H-B13 |
| A15-H-B14 | A16-H-B14 | A17-H-B14 | A18-H-B14 | A19-H-B14 | A20-H-B14 | A21-H-B14 |
| A15-H-B15 | A16-H-B15 | A17-H-B15 | A18-H-B15 | A19-H-B15 | A20-H-B15 | A21-H-B15 |
| A22-H-B1 | A23-H-B1 | A24-H-B1 | A25-H-B1 | A26-H-B1 | A27-H-B1 | A28-H-B1 |
| A22-H-B2 | A23-H-B2 | A24-H-B2 | A25-H-B2 | A26-H-B2 | A27-H-B2 | A28-H-B2 |
| A22-H-B3 | A23-H-B3 | A24-H-B3 | A25-H-B3 | A26-H-B3 | A27-H-B3 | A28-H-B3 |
| A22-H-B4 | A23-H-B4 | A24-H-B4 | A25-H-B4 | A26-H-B4 | A27-H-B4 | A28-H-B4 |
| A22-H-B5 | A23-H-B5 | A24-H-B5 | A25-H-B5 | A26-H-B5 | A27-H-B5 | A28-H-B5 |
| A22-H-B6 | A23-H-B6 | A24-H-B6 | A25-H-B6 | A26-H-B6 | A27-H-B6 | A28-H-B6 |
| A22-H-B7 | A23-H-B7 | A24-H-B7 | A25-H-B7 | A26-H-B7 | A27-H-B7 | A28-H-B7 |
| A22-H-B8 | A23-H-B8 | A24-H-B8 | A25-H-B8 | A26-H-B8 | A27-H-B8 | A28-H-B8 |
| A22-H-B9 | A23-H-B9 | A24-H-B9 | A25-H-B9 | A26-H-B9 | A27-H-B9 | A28-H-B9 |
| A22-H-B10 | A23-H-B10 | A24-H-B10 | A25-H-B10 | A26-H-B10 | A27-H-B10 | A28-H-B10 |
| A22-H-B11 | A23-H-B11 | A24-H-B11 | A25-H-B11 | A26-H-B11 | A27-H-B11 | A28-H-B11 |
| A22-H-B12 | A23-H-B12 | A24-H-B12 | A25-H-B12 | A26-H-B12 | A27-H-B12 | A28-H-B12 |
| A22-H-B13 | A23-H-B13 | A24-H-B13 | A25-H-B13 | A26-H-B13 | A27-H-B13 | A28-H-B13 |
| A22-H-B14 | A23-H-B14 | A24-H-B14 | A25-H-B14 | A26-H-B14 | A27-H-B14 | A28-H-B14 |
| A22-H-B15 | A23-H-B15 | A24-H-B15 | A25-H-B15 | A26-H-B15 | A27-H-B15 | A28-H-B15 |
| A29-H-B1 | A30-H-B1 | A31-H-B1 | A32-H-B1 | A33-H-B1 | A34-H-B1 | A35-H-B1 |
| A29-H-B2 | A30-H-B2 | A31-H-B2 | A32-H-B2 | A33-H-B2 | A34-H-B2 | A35-H-B2 |
| A29-H-B3 | A30-H-B3 | A31-H-B3 | A32-H-B3 | A33-H-B3 | A34-H-B3 | A35-H-B3 |
| A29-H-B4 | A30-H-B4 | A31-H-B4 | A32-H-B4 | A33-H-B4 | A34-H-B4 | A35-H-B4 |
| A29-H-B5 | A30-H-B5 | A31-H-B5 | A32-H-B5 | A33-H-B5 | A34-H-B5 | A35-H-B5 |
| A29-H-B6 | A30-H-B6 | A31-H-B6 | A32-H-B6 | A33-H-B6 | A34-H-B6 | A35-H-B6 |
| A29-H-B7 | A30-H-B7 | A31-H-B7 | A32-H-B7 | A33-H-B7 | A34-H-B7 | A35-H-B7 |
| A29-H-B8 | A30-H-B8 | A31-H-B8 | A32-H-B8 | A33-H-B8 | A34-H-B8 | A35-H-B8 |
| A29-H-B9 | A30-H-B9 | A31-H-B9 | A32-H-B9 | A33-H-B9 | A34-H-B9 | A35-H-B9 |
| A29-H-B10 | A30-H-B10 | A31-H-B10 | A32-H-B10 | A33-H-B10 | A34-H-B10 | A35-H-B10 |
| A29-H-B11 | A30-H-B11 | A31-H-B11 | A32-H-B11 | A33-H-B11 | A34-H-B11 | A35-H-B11 |
| A29-H-B12 | A30-H-B12 | A31-H-B12 | A32-H-B12 | A33-H-B12 | A34-H-B12 | A35-H-B12 |
| A29-H-B13 | A30-H-B13 | A31-H-B13 | A32-H-B13 | A33-H-B13 | A34-H-B13 | A35-H-B13 |
| A29-H-B14 | A30-H-B14 | A31-H-B14 | A32-H-B14 | A33-H-B14 | A34-H-B14 | A35-H-B14 |
| A29-H-B15 | A30-H-B15 | A31-H-B15 | A32-H-B15 | A33-H-B15 | A34-H-B15 | A35-H-B15 |
| A36-H-B1 | A37-H-B1 | A38-H-B1 | A39-H-B1 | A40-H-B1 | A41-H-B1 | A42-H-B1 |
| A36-H-B2 | A37-H-B2 | A38-H-B2 | A39-H-B2 | A40-H-B2 | A41-H-B2 | A42-H-B2 |
| A36-H-B3 | A37-H-B3 | A38-H-B3 | A39-H-B3 | A40-H-B3 | A41-H-B3 | A42-H-B3 |
| A36-H-B4 | A37-H-B4 | A38-H-B4 | A39-H-B4 | A40-H-B4 | A41-H-B4 | A42-H-B4 |
| A36-H-B5 | A37-H-B5 | A38-H-B5 | A39-H-B5 | A40-H-B5 | A41-H-B5 | A42-H-B5 |
| A36-H-B6 | A37-H-B6 | A38-H-B6 | A39-H-B6 | A40-H-B6 | A41-H-B6 | A42-H-B6 |
| A36-H-B7 | A37-H-B7 | A38-H-B7 | A39-H-B7 | A40-H-B7 | A41-H-B7 | A42-H-B7 |
| A36-H-B8 | A37-H-B8 | A38-H-B8 | A39-H-B8 | A40-H-B8 | A41-H-B8 | A42-H-B8 |
| A36-H-B9 | A37-H-B9 | A38-H-B9 | A39-H-B9 | A40-H-B9 | A41-H-B9 | A42-H-B9 |
| A36-H-B10 | A37-H-B10 | A38-H-B10 | A39-H-B10 | A40-H-B10 | A41-H-B10 | A42-H-B10 |
| A36-H-B11 | A37-H-B11 | A38-H-B11 | A39-H-B11 | A40-H-B11 | A41-H-B11 | A42-H-B11 |
| A36-H-B12 | A37-H-B12 | A38-H-B12 | A39-H-B12 | A40-H-B12 | A41-H-B12 | A42-H-B12 |
| A36-H-B13 | A37-H-B13 | A38-H-B13 | A39-H-B13 | A40-H-B13 | A41-H-B13 | A42-H-B13 |
| A36-H-B14 | A37-H-B14 | A38-H-B14 | A39-H-B14 | A40-H-B14 | A41-H-B14 | A42-H-B14 |
| A36-H-B15 | A37-H-B15 | A38-H-B15 | A39-H-B15 | A40-H-B15 | A41-H-B15 | A42-H-B15 |
| A43-H-B1 | A44-H-B1 | A45-H-B1 | A46-H-B1 | A47-H-B1 | A48-H-B1 | A49-H-B1 |
| A43-H-B2 | A44-H-B2 | A45-H-B2 | A46-H-B2 | A47-H-B2 | A48-H-B2 | A49-H-B2 |
| A43-H-B3 | A44-H-B3 | A45-H-B3 | A46-H-B3 | A47-H-B3 | A48-H-B3 | A49-H-B3 |
| A43-H-B4 | A44-H-B4 | A45-H-B4 | A46-H-B4 | A47-H-B4 | A48-H-B4 | A49-H-B4 |
| A43-H-B5 | A44-H-B5 | A45-H-B5 | A46-H-B5 | A47-H-B5 | A48-H-B5 | A49-H-B5 |
| A43-H-B6 | A44-H-B6 | A45-H-B6 | A46-H-B6 | A47-H-B6 | A48-H-B6 | A49-H-B6 |
| A43-H-B7 | A44-H-B7 | A45-H-B7 | A46-H-B7 | A47-H-B7 | A48-H-B7 | A49-H-B7 |
| A43-H-B8 | A44-H-B8 | A45-H-B8 | A46-H-B8 | A47-H-B8 | A48-H-B8 | A49-H-B8 |
| A43-H-B9 | A44-H-B9 | A45-H-B9 | A46-H-B9 | A47-H-B9 | A48-H-B9 | A49-H-B9 |
| A43-H-B10 | A44-H-B10 | A45-H-B10 | A46-H-B10 | A47-H-B10 | A48-H-B10 | A49-H-B10 |
| A43-H-B11 | A44-H-B11 | A45-H-B11 | A46-H-B11 | A47-H-B11 | A48-H-B11 | A49-H-B11 |
| A43-H-B12 | A44-H-B12 | A45-H-B12 | A46-H-B12 | A47-H-B12 | A48-H-B12 | A49-H-B12 |
| A43-H-B13 | A44-H-B13 | A45-H-B13 | A46-H-B13 | A47-H-B13 | A48-H-B13 | A49-H-B13 |
| A43-H-B14 | A44-H-B14 | A45-H-B14 | A46-H-B14 | A47-H-B14 | A48-H-B14 | A49-H-B14 |
| A43-H-B15 | A44-H-B15 | A45-H-B15 | A46-H-B15 | A47-H-B15 | A48-H-B15 | A49-H-B15 |
| A50-H-B1 | A51-H-B1 | A52-H-B1 | A53-H-B1 | A54-H-B1 | A55-H-B1 | A56-H-B1 |
| A50-H-B2 | A51-H-B2 | A52-H-B2 | A53-H-B2 | A54-H-B2 | A55-H-B2 | A56-H-B2 |
| A50-H-B3 | A51-H-B3 | A52-H-B3 | A53-H-B3 | A54-H-B3 | A55-H-B3 | A56-H-B3 |
| A50-H-B4 | A51-H-B4 | A52-H-B4 | A53-H-B4 | A54-H-B4 | A55-H-B4 | A56-H-B4 |
| A50-H-B5 | A51-H-B5 | A52-H-B5 | A53-H-B5 | A54-H-B5 | A55-H-B5 | A56-H-B5 |
| A50-H-B6 | A51-H-B6 | A52-H-B6 | A53-H-B6 | A54-H-B6 | A55-H-B6 | A56-H-B6 |
| A50-H-B7 | A51-H-B7 | A52-H-B7 | A53-H-B7 | A54-H-B7 | A55-H-B7 | A56-H-B7 |
| A50-H-B8 | A51-H-B8 | A52-H-B8 | A53-H-B8 | A54-H-B8 | A55-H-B8 | A56-H-B8 |
| A50-H-B9 | A51-H-B9 | A52-H-B9 | A53-H-B9 | A54-H-B9 | A55-H-B9 | A56-H-B9 |
| A50-H-B10 | A51-H-B10 | A52-H-B10 | A53-H-B10 | A54-H-B10 | A55-H-B10 | A56-H-B10 |
| A50-H-B11 | A51-H-B11 | A52-H-B11 | A53-H-B11 | A54-H-B11 | A55-H-B11 | A56-H-B11 |
| A50-H-B12 | A51-H-B12 | A52-H-B12 | A53-H-B12 | A54-H-B12 | A55-H-B12 | A56-H-B12 |
| A50-H-B13 | A51-H-B13 | A52-H-B13 | A53-H-B13 | A54-H-B13 | A55-H-B13 | A56-H-B13 |
| A50-H-B14 | A51-H-B14 | A52-H-B14 | A53-H-B14 | A54-H-B14 | A55-H-B14 | A56-H-B14 |
| A50-H-B15 | A51-H-B15 | A52-H-B15 | A53-H-B15 | A54-H-B15 | A55-H-B15 | A56-H-B15 |
| A57-H-B1 | A58-H-B1 | A59-H-B1 | A60-H-B1 | A61-H-B1 | A62-H-B1 | A63-H-B1 |
| A57-H-B2 | A58-H-B2 | A59-H-B2 | A60-H-B2 | A61-H-B2 | A62-H-B2 | A63-H-B2 |
| A57-H-B3 | A58-H-B3 | A59-H-B3 | A60-H-B3 | A61-H-B3 | A62-H-B3 | A63-H-B3 |
| A57-H-B4 | A58-H-B4 | A59-H-B4 | A60-H-B4 | A61-H-B4 | A62-H-B4 | A63-H-B4 |
| A57-H-B5 | A58-H-B5 | A59-H-B5 | A60-H-B5 | A61-H-B5 | A62-H-B5 | A63-H-B5 |
| A57-H-B6 | A58-H-B6 | A59-H-B6 | A60-H-B6 | A61-H-B6 | A62-H-B6 | A63-H-B6 |
| A57-H-B7 | A58-H-B7 | A59-H-B7 | A60-H-B7 | A61-H-B7 | A62-H-B7 | A63-H-B7 |
| A57-H-B8 | A58-H-B8 | A59-H-B8 | A60-H-B8 | A61-H-B8 | A62-H-B8 | A63-H-B8 |
| A57-H-B9 | A58-H-B9 | A59-H-B9 | A60-H-B9 | A61-H-B9 | A62-H-B9 | A63-H-B9 |
| A57-H-B10 | A58-H-B10 | A59-H-B10 | A60-H-B10 | A61-H-B10 | A62-H-B10 | A63-H-B10 |
| A57-H-B11 | A58-H-B11 | A59-H-B11 | A60-H-B11 | A61-H-B11 | A62-H-B11 | A63-H-B11 |
| A57-H-B12 | A58-H-B12 | A59-H-B12 | A60-H-B12 | A61-H-B12 | A62-H-B12 | A63-H-B12 |
| A57-H-B13 | A58-H-B13 | A59-H-B13 | A60-H-B13 | A61-H-B13 | A62-H-B13 | A63-H-B13 |
| A57-H-B14 | A58-H-B14 | A59-H-B14 | A60-H-B14 | A61-H-B14 | A62-H-B14 | A63-H-B14 |
| A57-H-B15 | A58-H-B15 | A59-H-B15 | A60-H-B15 | A61-H-B15 | A62-H-B15 | A63-H-B15 |
| A64-H-B1 | A65-H-B1 | A66-H-B1 | A67-H-B1 | A68-H-B1 | A69-H-B1 | A70-H-B1 |
| A64-H-B2 | A65-H-B2 | A66-H-B2 | A67-H-B2 | A68-H-B2 | A69-H-B2 | A70-H-B2 |
| A64-H-B3 | A65-H-B3 | A66-H-B3 | A67-H-B3 | A68-H-B3 | A69-H-B3 | A70-H-B3 |
| A64-H-B4 | A65-H-B4 | A66-H-B4 | A67-H-B4 | A68-H-B4 | A69-H-B4 | A70-H-B4 |
| A64-H-B5 | A65-H-B5 | A66-H-B5 | A67-H-B5 | A68-H-B5 | A69-H-B5 | A70-H-B5 |
| A64-H-B6 | A65-H-B6 | A66-H-B6 | A67-H-B6 | A68-H-B6 | A69-H-B6 | A70-H-B6 |
| A64-H-B7 | A65-H-B7 | A66-H-B7 | A67-H-B7 | A68-H-B7 | A69-H-B7 | A70-H-B7 |
| A64-H-B8 | A65-H-B8 | A66-H-B8 | A67-H-B8 | A68-H-B8 | A69-H-B8 | A70-H-B8 |
| A64-H-B9 | A65-H-B9 | A66-H-B9 | A67-H-B9 | A68-H-B9 | A69-H-B9 | A70-H-B9 |
| A64-H-B10 | A65-H-B10 | A66-H-B10 | A67-H-B10 | A68-H-B10 | A69-H-B10 | A70-H-B10 |
| A64-H-B11 | A65-H-B11 | A66-H-B11 | A67-H-B11 | A68-H-B11 | A69-H-B11 | A70-H-B11 |
| A64-H-B12 | A65-H-B12 | A66-H-B12 | A67-H-B12 | A68-H-B12 | A69-H-B12 | A70-H-B12 |
| A64-H-B13 | A65-H-B13 | A66-H-B13 | A67-H-B13 | A68-H-B13 | A69-H-B13 | A70-H-B13 |
| A64-H-B14 | A65-H-B14 | A66-H-B14 | A67-H-B14 | A68-H-B14 | A69-H-B14 | A70-H-B14 |
| A64-H-B15 | A65-H-B15 | A66-H-B15 | A67-H-B15 | A68-H-B15 | A69-H-B15 | A70-H-B15 |
表3
实施例1：3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸2-苯基乙胺
可以通过下列方法制备3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸2-苯基乙胺：
将10mg的3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶悬浮于0.3ml的四氢呋喃中。加入7.8μl的2-苯基乙基异氰酸酯，将反应混合物于室温下搅拌20小时，然后减压浓缩。
将蒸发所得残留物经LC/MS(方法B)纯化。经LC/MS纯化后，合并含有3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸2-苯基乙胺的部分，并将其置于SCX相上(500mg的CUBCX1-HL相)。随后用甲醇洗涤SCX相，然后用2M的氨水甲醇液萃取。所得萃取液经减压浓缩。从而得到1.2mg白色粉末状的3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸2-苯基乙胺，其特征如下：LC/MS(方法A)：分子离子：415.29；保留时间＝3.48分钟。
实施例2：3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-甲磺酰基-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶
可以通过下列方法制备3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-甲磺酰基-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶：
将10mg的3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶悬浮于0.3ml的二氯甲烷中。加入15.8μl的三乙胺，然后加入4.5μl的甲磺酰氯。将反应混合物于室温下搅拌20小时，然后减压浓缩。
将蒸发所得残留物经LC/MS(方法B)纯化。经LC/MS纯化后，合并含有3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-甲磺酰基-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶的部分，并将其置于SCX相上(500mg的CUBCX1-HL相)。随后用甲醇洗涤SCX相，然后用2M的氨水甲醇液萃取。将所得萃取液减压浓缩。从而得到4.2mg白色粉末状的3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-甲磺酰基-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶，其特征如下：LC/MS(方法A)：分子离子：346.30；保留时间＝3.08分钟。1H NMR(300MHz，(CD3)2SO，δ以ppm计)：2.32(宽峰：6H)；3.02(s：3H)；3.03(mt：2H)；3.52(宽峰t，J＝5Hz：2H)；4.45(宽峰：2H)；7.24(宽峰：1H)；7.42(宽峰：1H)；12.45(mf：1H)；13.07(mf：1H).
实施例3：[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-3-吡啶基甲酮
可以通过下列方法制备[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-3-吡啶基甲酮：
将10mg的3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶悬浮于0.3ml的DMF溶液中。加入6.9mg的烟酸，然后加入7.6mg的HOBT和8.7μl的二异丙基碳二亚胺。将反应混合物于室温下搅拌20小时，然后减压浓缩。
将蒸发所得残留物经LC/MS(方法B)纯化。经LC/MS纯化后，合并含有[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-3-吡啶基甲酮的部分，并将其置于SCX相上(500mg的CUBCX1-HL相)。随后用甲醇洗涤SCX相，然后用2M的氨水甲醇液萃取。将所得萃取液减压浓缩。从而得到5.3mg白色粉末状的[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-3-吡啶基甲酮，其特征如下：LC/MS(方法A)：分子离子：373.31；保留时间＝2.87分钟1H NMR(400MHz，(CD3)2SO，于373K温度下，δ以ppm计)：2.35(s：6H)；2.90-3.10(mt：2H)；3.76(mf：2H)；4.76(宽峰s：2H)；7.27(mf：1H)；7.40(mf：1H)；7.51(dd，J＝8和5Hz：1H)；7.90(宽峰d，J＝8Hz：1H)；8.70(mt：2H)；11.80-12.20(未确认的宽峰(broad unresolved peak)：1H)；12.50-13.00(未确认的宽峰：1H).
实施例4：6-(3-氯苄基)-3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶
可以根据下列方法制备6-(3-氯苄基)-3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶：
将10mg的3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶悬浮于0.3ml的甲醇中。加入12.7μl的3-氯苯甲醛，然后加入4.7mg的NaBH3CN。将反应混合物于室温下搅拌20小时，然后将其减压浓缩。
将蒸发所得残留物经LC/MS(方法B)纯化。经LC/MS纯化后，合并含有6-(3-氯苄基)-3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶的部分，并将其置于SCX相上(500mg的CUBCX1-HL相)。随后用甲醇洗涤SCX相，然后用2M的氨水甲醇液萃取。将所得萃取液减压浓缩。从而得到4mg白色粉末状的6-(3-氯苄基)-3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶，其特征如下：LC/MS(方法A)：分子离子：392.26；保留时间＝3.18分钟。1H NMR(400MHz，(CD3)2SO，于373K温度下，δ以ppm计)：2.35和2.36(2s：总计6H)；2.83(t，J＝5.5Hz：2H)；2.90-3.00(mt：2H)；3.62(宽峰s：2H)；3.78(s：2H)；7.25-7.50(mt：6H)；11.91(mf：1H)；12.30-12.60(未确认的宽峰：1H)。
实施例5：[3-(1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-3-吡啶基甲酮
通过下列方法可以制备[3-(1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-3-吡啶基甲酮：
将15mg的3-(1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶盐酸盐悬浮于0.5ml的DMF中。加入24.3mg的二异丙基乙胺，然后加入12.7mg的HOBT、11.9mg的二异丙基碳二亚胺和11.6mg的烟酸。将反应混合物于室温下搅拌20小时，然后将其减压浓缩。
将蒸发所得残留物经LC/MS(方法B)纯化。经LC/MS纯化后，合并含有[3-(1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-3-吡啶基甲酮的部分，并将其置于SCX相上(500mg的CUBCX1-HL相)。随后用甲醇洗涤SCX相，然后用2M的氨水甲醇液萃取。将所得萃取液减压浓缩。从而得到7.7mg白色粉末状的[3-(1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-3-吡啶基甲酮，其特征如下：LC/MS(方法A)：分子离子：345.22；保留时间＝1.95分钟。
实施例6：6-(3-氯苄基)-3-(1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶
通过下列方法可以制备6-(3-氯苄基)-3-(1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶：
将15mg的3-(1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶盐酸盐悬浮于0.5ml的甲醇中。加入26.5mg的3-氯苯甲醛，然后加入7.9mg的NaBH3CN。将反应混合物于室温下搅拌20小时，然后将其减压浓缩。
将蒸发所得残留物经LC/MS(方法B)纯化。经LC/MS纯化后，合并含有6-(3-氯苄基)-3-(1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶的部分，并将其置于SCX相上(500mg的CUBCX1-HL相)。随后用甲醇洗涤SCX相，然后用2M的氨水甲醇液萃取。将所得萃取液减压浓缩。从而得到6.9mg白色粉末状的6-(3-氯苄基)-3-(1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶，其特征如下：LC/MS(方法A)：分子离子：364.22；保留时间＝2.19分钟。
实施例7：酰胺类化合物的制备
通过下列方法可以制备酰胺类化合物：
将19种酸(表4)称重并分别置于19个不同的实验试管中。
表4：使用的酸
| 编号 | 名称 | 量 |
| 1 | 异丁酸 | 3.3mg |
| 2 | 苯甲酸 | 4.6mg |
| 3 | 2，3-二氯苯甲酸 | 7.1mg |
| 4 | 苯乙酸 | 5.1mg |
| 5 | 乙酸 | 2.2mg |
| 6 | 环丙烷甲酸 | 3.2mg |
| 7 | 2-氯苯甲酸 | 5.9mg |
| 8 | 3-氯苯甲酸 | 5.9mg |
| 9 | 4-氯苯甲酸 | 5.9mg |
| 10 | 异戊酸 | 3.8mg |
| 11 | 氢化肉桂酸 | 5.6mg |
| 12 | 乙烯基乙酸 | 3.2mg |
| 13 | 丁酸 | 3.3mg |
| 14 | 2-呋喃甲酸 | 4.2mg |
| 15 | 新戊酸 | 3.8mg |
| 16 | N，N-二甲基氨基乙酸 | 3.9mg |
| 17 | 戊酸 | 3.8mg |
| 18 | 噻吩-2-甲酸 | 4.8mg |
| 19 | 4-甲基磺酰基苯甲酸 | 7.5mg |
将152mg的HOBT和142mg的二异丙基碳二亚胺溶于12ml的DMF中，将所得溶液分配于19个试管中，每个试管600μl。
在290mg的N，N-二异丙基乙胺存在下，将200mg的3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶悬浮于4ml的DMF中，将所得悬浮液分配到上述19个试管中，每个试管200μl。
将上述19个反应混合物于室温下通过轨道震摇方法震摇20小时。
自上述每一个反应混合物中取10μl样品，用40μl的DMSO稀释(Gilson Liquid Han dler Quad-Z215)。通过LC/MS(方法A)分析所得DMSO溶液中的每一个样品。
然后将19个反应混合物蒸发至干，将蒸发残留物分别溶于500μl的DMSO中，将所得溶液经LC/MS(方法B)纯化。
经LC/MS纯化后，将含有目标化合物的部分(任选合并)置于SCX相上(500mg的CUBCX1-HL相)。随后用甲醇洗涤SCX相，然后用2M的氨水甲醇液萃取。将萃取液收集到已称皮重的玻璃管中，蒸发至干(SavantAES 2000或Genevac HT8离心蒸发仪)，称重(Mettler Toledo AutomatedWorkstation LA200)并用DMSO稀释至10mM(Gilson Liquid HandlerQuad-Z 215)。通过LC/MS(方法A)分析所得每一个溶液。
通过质谱(方法A)测定其保留时间和分子峰的方法，分离并定性下列化合物(表5)。
表5：所得酰胺类化合物
| 序号 | 名称 | 所得产物的量 | 保留时间(分钟) | 分子离子 |
| 1 | 1-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-2-甲基丙-1-酮 | 5.8mg | 3.08 | 338.23 |
| 2 | [3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]苯基甲酮 | 6.8mg | 2.68 | 372.21 |
| 3 | (2，3-二氯苯基)-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-甲酮 | 12mg | 3.05 | 440.13 |
| 4 | 1-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-2-苯基乙酮 | 7.9mg | 2.99 | 386.23 |
| 5 | 1-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]乙酮 | 2.7mg | 2.4 | 310.19 |
| 6 | 环丙基-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-甲酮 | 3.4mg | 2.57 | 336.21 |
| 7 | 2-氯苯基)-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-甲酮 | 11.2mg | 2.97 | 406.18 |
| 8 | (3-氯苯基)-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-甲酮 | 12.1mg | 3.31 | 406.16 |
| 9 | (4-氯苯基)-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-甲酮 | 11.5mg | 3.51 | 406.17 |
| 10 | 1-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-3-甲基丁-1-酮 | 4.8mg | 2.72 | 352.24 |
| 11 | 1-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-3-苯基丙-1-酮 | 11.9mg | 2.95 | 400.24 |
| 12 | 1-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]丁-3-烯-1-酮 | 10.1mg | 2.72 | 336.22 |
| 13 | 1-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]丁-1-酮 | 7mg | 2.66 | 338.23 |
| 14 | [3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]呋喃-2-基-甲酮 | 9.5mg | 2.67 | 362.19 |
| 15 | 1-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-2，2-二甲基丙-1-酮 | 9.3mg | 2.8 | 352.24 |
| 16 | 2-二甲基氨基-1-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]乙酮 | 4.7mg | 2.55 | 353.23 |
| 17 | 1-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]戊-1-酮 | 5.4mg | 2.78 | 352.24 |
| 18 | [3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]噻吩-2-基-甲酮 | 7.2mg | 2.75 | 378.17 |
| 19 | [3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-(4-甲磺酰基-苯基)甲酮 | 14.3mg | 2.79 | 450.19 |
实施例8：磺酰胺类化合物的制备
磺酰胺类化合物可以通过下列方法制备：
在150μl的三乙胺存在下，将190mg的3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶盐酸盐悬浮于2ml的二氯甲烷中。将所得悬浮液分配到17个试管中，每个试管500μl。将17份磺酰氯(表6)称重，分别加到上述17个试管中。
表6：所用磺酰氯
| 序号 | 名称 | 重量 |
| 1 | 苯磺酰氯 | 9.9mg |
| 2 | α-甲苯磺酰氯 | 10.7mg |
| 3 | 2，3-二氯苯磺酰氯 | 13.8mg |
| 4 | 4-氯苯磺酰氯 | 11.9mg |
| 5 | 2，2，2-三氟乙磺酰氯 | 10.2mg |
| 6 | 乙磺酰氯 | 7.2mg |
| 7 | 1-丙磺酰氯 | 8mg |
| 8 | 1-丁磺酰氯 | 8.8mg |
| 9 | 2-氯苯磺酰氯 | 11.9mg |
| 10 | 3-氯苯磺酰氯 | 11.9mg |
| 11 | [(4-氟苯基)甲基]磺酰氯 | 11.7mg |
| 12 | 4-甲氧基苯磺酰氯 | 11.6mg |
| 13 | 对-甲苯磺酰氯 | 10.7mg |
| 14 | 邻-甲苯磺酰氯 | 10.7mg |
| 15 | 3-甲基苯磺酰氯 | 10.7mg |
| 16 | 3-甲氧基苯磺酰氯 | 11.6mg |
| 17 | 2-甲氧基-4-甲基苯磺酰氯 | 12.4mg |
将上述17个反应混合物于室温下通过轨道震摇方法震摇20小时。
自上述每一个反应混合物中取10μl样品，用40μl的DMSO稀释(Gilson Liquid Handler Quad-Z 215)。通过LC/MS(方法A)分析所得DMSO溶液中的每一个样品。
然后将17个反应混合物蒸发至干，在1滴5N盐酸水溶液存在下将蒸发残留物分别溶于1ml的DMSO中，将所得溶液经LC/MS(方法B)纯化。经LC/MS纯化后，将含有目标化合物的部分(任选合并)置于SCX相上(500mg的CUBCX1-HL相)。随后用甲醇洗涤SCX相，然后用2M的氨水甲醇液萃取。将萃取液收集到已称皮重的玻璃管中，蒸发至干(Savant AES2000或Genevac HT8离心蒸发仪)，称重(Mettler Toledo AutomatedWorkstation LA200)，并用DMSO稀释至10mM(Gilson Liquid HandlerQuad-Z 215)。通过LC/MS(方法A)分析所得每一个溶液。
通过质谱(方法A)测定其保留时间和分子峰的方法，分离并定性下列化合物(表7)。
表7：所得磺酰氯类化合物
| 序号 | 名称 | 所得产物的量 | 保留时间(分钟) | 分子离子 |
| 1 | 6-苯磺酰基-3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 1.4mg | 3.41 | 408.18 |
| 2 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-苯基甲磺酰基-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 0.7mg | 3.51 | 422.2 |
| 3 | 6-(2，3二氯苯磺酰基)-3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并-[3，4-c]吡啶 | 6.4mg | 3.25 | 476.1 |
| 4 | 6-(4-氯苯磺酰基)-3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 5.9mg | 3.19 | 442.12 |
| 5 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-(2，2，2-三氟乙磺酰基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并-[3，4-c]吡啶 | 1.7mg | 3.06 | 414.14 |
| 6 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-乙磺酰基-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 5.2mg | 2.63 | 360.17 |
| 7 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-(丙烷-1-磺酰基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c吡啶 | 4.3mg | 2.8 | 374.19 |
| 8 | 6-(丁烷-1-磺酰基)-3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c吡啶 | 5.6mg | 2.94 | 388.2 |
| 9 | 6-(2-氯苯磺酰基)-3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 5.6mg | 3.38 | 442.13 |
| 10 | 6-(3-氯苯磺酰基)-3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 6.9mg | 3.71 | 442.13 |
| 11 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-(4-氟苯基甲磺酰基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并-3，4-c]吡啶 | 0.7mg | 3.05 | 440.18 |
| 12 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-(4-甲氧基苯磺酰基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 7.5mg | 2.99 | 438.19 |
| 13 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-(甲苯-4-磺酰基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 7.3mg | 3.22 | 422.2 |
| 14 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-(甲苯-2-磺酰基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 4.8mg | 3.16 | 422.19 |
| 15 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-(甲苯-3-磺酰基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 5.1mg | 3.13 | 422.19 |
| 16 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-(3-甲氧基苯磺酰基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 6.9mg | 3.07 | 438.18 |
| 17 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-(2-甲氧基-4-甲基-苯磺酰基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 0.8mg | 3.34 | 452.19 |
实施例9：胺类化合物的制备
胺类化合物可以通过下列方法制备：
将180mg的3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶盐酸盐悬浮于2.7ml的甲醇中，将所得悬浮液分配于16个试管中，每个试管150μl。
将16种醛(表8)称重，分别加到上述16个试管中。
表8：所用醛
| 序号 | 名称 | 重量 |
| 1 | 异丁醛 | 8.1mg |
| 2 | 甲醛 | 3.4mg |
| 3 | 苯甲醛 | 11.9mg |
| 4 | 苯乙醛 | 13.5mg |
| 5 | 2，3-二氯苯甲醛 | 19.6mg |
| 6 | 糠醛 | 10.8mg |
| 7 | 4-氯苯甲醛 | 15.8mg |
| 8 | 2-噻吩甲醛 | 12.6mg |
| 9 | 烟醛(NICOTINALDEHYDE) | 12mg |
| 10 | 三甲基乙醛 | 9.7mg |
| 11 | 乙醛 | 4.9mg |
| 12 | 异戊醛 | 9.7mg |
| 13 | 丙醛 | 6.5mg |
| 14 | 3-苯基丙醛 | 15.1mg |
| 15 | 丁醛 | 8.1mg |
| 16 | 环丙烷甲醛 | 7.9mg |
然后将85mg的NaBH3CN的2.7ml的甲醇溶液也分配到上述16个试管中，每个试管150μl。将上述反应混合物以轨道震摇的方式于室温下震摇20小时。然后将100μl的甲醇加到上述16个试管中的每一个。
自上述每一个反应混合物中取10μl样品，用40μl的DMSO稀释(Gilson Liquid Handler Quad-Z 215)。通过LC/MS(方法A)分析所得DMSO溶液中的每一个样品。
然后将16个反应混合物蒸发至干，将蒸发残留物分别溶于500μl的DMSO中，通过烧结玻璃过滤，将残留溶液经LC/MS(方法B)纯化。经LC/MS纯化后，将含有目标化合物的部分(任选合并)置于SCX相上(500mg的CUBCX1-HL相)。随后用甲醇洗涤SCX相，然后用2M的氨水甲醇液萃取。将萃取液收集到已称皮重的玻璃管中，蒸发至干(Savant AES 2000或Genevac HT8离心蒸发仪)，称重(Mettler Toledo AutomatedWorkstation LA200)，并用DMSO稀释至10mM(Gilson Liquid HandlerQuad-Z 215)。通过LC/MS(方法A)分析所得每一个溶液。
通过质谱(方法A)测定其保留时间和分子峰的方法，分离并定性下列化合物(表9)。
表9：所得胺类化合物
| 序号 | 名称 | 所得产物的量 | 保留时间(分钟) | 分子离子 |
| 1 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-异丁基-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 5.9mg | 2.62 | 324.32 |
| 2 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-甲基-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 3.5mg | 2.49 | 282.29 |
| 3 | 6-苄基-3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 8.2mg | 2.74 | 358.3 |
| 4 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-苯乙基-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 6.4mg | 2.84 | 372.32 |
| 5 | 6-(2，3-二氯苄基)-3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并 | 8.6mg | 2.95 | 426.23 |
| 3，4-c]吡啶 | ||||
| 6 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-呋喃-2-基甲基-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c吡啶 | 5.9mg | 2.64 | 348.27 |
| 7 | 6-(4-氯苄基)-3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 4.7mg | 2.9 | 392.26 |
| 8 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-噻吩-2-基甲基-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c吡啶 | 8.4mg | 2.71 | 364.24 |
| 9 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-吡啶-3-基甲基-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c吡啶 | 11.7mg | 2.55 | 359.29 |
| 10 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-(2，2-二甲基丙基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并3，4-c]吡啶 | 3.7mg | 2.72 | 338.32 |
| 11 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-乙基-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 5mg | 2.55 | 296.27 |
| 12 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-(3-甲基丁基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 5.9mg | 2.76 | 338.3 |
| 13 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-丙基-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 6.4mg | 2.62 | 310.29 |
| 14 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-(3-苯基丙基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 4.2mg | 2.97 | 386.31 |
| 15 | 6-丁基-3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 4.5mg | 2.68 | 324.28 |
| 16 | 6-环丙基甲基-3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶 | 3.9mg | 2.62 | 322.27 |
实施例10：脲类化合物的制备
脲类化合物可以通过下列方法制备：
在190μl的三乙胺存在下，将120mg的3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶盐酸盐悬浮于3.6ml的四氢呋喃中，将所得悬浮液分配到9个试管中，每个试管300μl。
将9种异氰酸酯(表10)称重并分别加到上述9个试管中。
表10：所用异氰酸酯化合物
| 序号 | 名称 | 量 |
| 1 | 异氰酸苯基酯 | 6.7mg |
| 2 | 异氰酸苄基酯 | 7.5mg |
| 3 | 2-氯苯基异氰酸酯 | 8.6mg |
| 4 | 3-氯苯基异氰酸酯 | 8.6mg |
| 5 | 4-氯苯基异氰酸酯 | 8.6mg |
| 6 | 异氰酸正丁基酯 | 5.6mg |
| 7 | 2-噻吩基异氰酸酯 | 7mg |
| 8 | 2-甲氧基苯基异氰酸酯 | 8.4mg |
| 9 | 邻-甲苯基异氰酸酯 | 7.5mg |
将9个反应混合物以轨道震摇的方式于室温下震摇2小时，然后将其蒸发至干。
将蒸发残留物分别溶于1ml的DMSO中，自上述每一份溶液中取10μl样品，用40μl的DMSO稀释(Gilson Liquid Handler Quad-Z 215)。通过LC/MS(方法A)分析所得每一个样品的DMSO溶液。
将残留溶液经LC/MS(方法B)纯化。经LC/MS纯化后，将含有目标化合物的部分(任选合并)蒸发至干(序号1、3、6、8和9)或者置于SCX相上(500mg的CUBCX1-HL相；序号2、4、5和7)。随后用甲醇洗涤SCX相，然后用2M的氨水甲醇液萃取。将萃取液收集到已称皮重的玻璃管中，蒸发至干(Savant AES 2000或Genevac HT8离心蒸发仪)，称重(MettlerToledo Automated Workstation LA200)，并用DMSO稀释至10mM(Gilson Liquid Handler Quad-Z 215)。通过LC/MS(方法A)分析所得每一个溶液。
通过质谱(方法A)测定其保留时间和分子峰的方法，分离并定性下列化合物(表11)。
表11.所得脲类化合物
| 序号 | 名称 | 所得化合物的量 | 保留时间(分钟) | 分子离子 |
| 1 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸苯基酰胺双三氟乙酸盐 | 14.6mg | 3.04 | 387.28 |
| 2 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸苄基酰胺 | 1.8mg | 2.78 | 401.29 |
| 3 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸(2-氯苯基)酰胺双三氟乙酸盐 | 16mg | 2.92 | 421.25 |
| 4 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸(3-氯苯基)酰胺 | 7.9mg | 3.89 | 421.24 |
| 5 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸(4-氯苯基)酰胺 | 9.8mg | 3.36 | 421.25 |
| 6 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸丁酰胺双三氟乙酸盐 | 2.4mg | 2.8 | 367.31 |
| 7 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸噻吩-2-基酰胺 | 3.8mg | 2.77 | 393.24 |
| 8 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸(2-甲氧基苯基)酰胺双三氟乙酸盐 | 14.4mg | 3.14 | 417.28 |
| 9 | 3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸o-甲苯基酰胺双三氟乙酸盐 | 16.2mg | 2.68 | 401.29 |
实施例11：3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶
3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶可以根据下列方法制备：
将9ml的水和2.8ml的三氟乙酸加到670mg的3-(2-氨基-4，5-二甲基苯基氨基甲酰基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯的9ml THF溶液中。于80℃搅拌2小时后，将反应介质减压浓缩。然后将其置于水中，形成的沉淀通过烧结玻璃过滤回收，用1N氢氧化钠溶液洗涤并干燥。随后用二氯甲烷萃取所得水相部分，有机相用硫酸镁干燥并减压浓缩。合并所得残留物和沉淀，然后将其溶于含有几滴DMF的甲醇。然后将该溶液置于MEGA BE-SCX相上。随后用甲醇洗涤SCX相，然后用2M的氨水甲醇液萃取。将所得萃取液减压浓缩。
得到46mg浅褐色粉末状的3-(5，6-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶，其特征如下：
EI：m/z＝267M+.屯基峰
m/z＝238[M-NHCH2]+
m/z＝209[M-C3H8N]+. 1H NMR(300MHz，(CD3)2SO，δ以ppm计)：2.31和2.32(2s：总共6H)；2.81(宽峰t，J＝5Hz：2H)；2.92(宽峰t，J＝5Hz：2H)；3.83(宽峰s：2H)；7.22(宽峰s：1H)；7.40(宽峰s：1H)；12.28(mf：1H)；12.73(mf：1H)。
实施例12：3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶盐酸盐
3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶可以根据下列方法制备：
将9ml的5N的盐酸水溶液加到1.7g的3-(2-氨基-4，5-二甲基苯基氨基甲酰基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯的40ml乙醇中。于80℃搅拌60小时后，将反应介质冷却至室温。通过烧结玻璃过滤回收形成的沉淀，干燥。得到1.04g为浅褐色粉末状的3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶盐酸盐，其特征如下：
EI：m/z＝267M+.基峰
m/z＝238[M-CH2NH]+
m/z＝209[M-C3H8N]+.
m/z＝36[HCl]+ 1H NMR(300MHz，含几滴CD3COOD的(CD3)2SO，δ以ppm计)：2.40(s：6H)；3.23(宽峰t，J＝5.5Hz：2H)；3.45(t，J＝5.5Hz：2H)；4.45(s：2H)；7.54(s：2H)。
3-(2-氨基-4，5-二甲基苯基氨基甲酰基)-2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯可以根据下列方法制备：
于室温下将8.5g的HBTU和2.9g的二异丙基乙胺加到3g的(2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯)-3-甲酸的50ml无水DMF溶液中。于室温下搅拌20分钟后，加入3.06g的4，5-二氨基-o-二甲苯。于室温下搅拌60小时后，用含有20g氯化钠的pH大于7的3L碳酸氢钠水溶液稀释反应物。水相用1L乙酸乙酯萃取3次，然后用硫酸镁干燥合并的有机相并减压浓缩。所得粗品残留物溶于150ml二氯甲烷，通过烧结玻璃过滤除去不溶物。然后将滤液减压浓缩并经硅胶(20-45μm Amicon)色谱纯化，用50-100％乙酸乙酯环己烷溶液梯度洗脱。合并含有目标化合物的部分并减压浓缩。如此得到4.37g为浅褐色粉末状的3-(2-氨基苯基氨基甲酰基)-2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯，其特征如下：
EI：m/z＝385M+.基峰
m/z＝329[M-C4H8]+.
m/z＝312[M-C4H9O]+
m/z＝57[C4H9]+ 1H NMR(300MHz，(CD3)2SO，δ以ppm计)：1.46(s：9H)；2.10和2.12(2s：每一个为3H)；2.77(mt：2H)；3.58(t，J＝5.5Hz：2H)；4.53(s：2H)；4.57(未确定峰：2H)；6.60(s：1H)；7.14(宽峰s：1H)；9.10(mf：1H)；13.08(mf：1H)。
实施例13：3-(1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶盐酸盐
3-(1H-苯并咪唑-2基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶盐酸盐可以根据下列方法制备：
将2.2ml的5N盐酸水溶液加到200mg的3-(2-氨基苯基氨基甲酰基)-2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯的1ml乙醇溶液中。于80℃搅拌20小时后，将反应物冷却至室温。通过烧结玻璃过滤除去不溶物，将滤液减压浓缩。得到84mg为橙色粉末状的3-(1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶盐酸盐，其特征如下：LC/MS(方法A)：分子离子测定：240.26；保留时间＝1.68分钟。
3-(2-氨基苯基氨基甲酰基)-2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯可以通过下列方法制备：
于室温下将425mg的HBTU和145mg的二异丙基乙胺加到150mg的(2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯)-3-甲酸的1ml无水DMF中。于室温下搅拌20分钟后，加入121mg邻苯二胺。
于室温下搅拌20小时后，将反应物用100ml水和50ml乙酸乙酯稀释。水相用50ml乙酸乙酯萃取3次，然后将合并的有机相用硫酸镁干燥并减压浓缩。所得粗品残留物经HPLC(反相C18 Lichroprep 12μm)纯化，用含有0.07％(v/v)三氟乙酸的5-95％的乙腈水(含0.07％(v/v)的三氟乙酸)线性梯度洗脱，流速为10ml/min。合并含有目标化合物的部分并将其置于MEGA BE-SCX相。随后用甲醇洗涤SCX相，并用2M氨水甲醇溶液萃取。然后将合并的萃取液减压浓缩。如此得到200mg为橙色粉末状的3-(2-氨基苯基氨基甲酰基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-甲酸叔丁酯，其特征如下：LC/MS(方法A)：分子离子：358.34；保留时间＝3.19分钟。
实施例14：磺酰胺类化合物的制备
磺酰胺类化合物可以通过下列方法制备：
将40mg的6-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]吡啶-3-基胺混悬于2ml的二氯甲烷中，将所得溶液分配到4试管中，每一个试管500μl。
将4种磺酰氯(表12)称重，分别加到上述4个试管中，然后加入15.6μl三乙胺。
表12：所用磺酰氯
| 序号 | 名称 | 量 |
| 1 | 噻吩-2-磺酰氯 | 5.6mg |
| 2 | 4-甲氧基苯磺酰氯 | 6.3mg |
| 3 | 2-氯苯磺酰氯 | 6.4mg |
| 4 | 2-甲氧基-4-甲基苯磺酰氯 | 6.8mg |
将上述4种反应混合物以轨道震摇的方式于40℃震摇15小时。
自上述每一个反应混合物中取5μl样品，用100μl的DMSO稀释(Gilson Liquid Handler Quad-Z 215)。通过LC/MS(方法A)分析所得每一个样品的DMSO溶液。
然后将4种反应混合物蒸发至干，将蒸发残留物分别溶于500μl的DMSO中，所得溶液经LC/MS(方法B)纯化。经LC/MS纯化后，将含有目标化合物的部分(任选合并)置于SCX相上(500mg的CUBCX1-HL相)。随后用甲醇洗涤SCX相，然后用2M的氨水甲醇液萃取。将萃取液收集到已称皮重的玻璃管中，蒸发至干(Savant AES 2000或Genevac HT8离心蒸发仪)，称重(Mettler Toledo Automated Workstation LA200)，并用DMSO稀释至10mM(Gilson Liquid Handler Quad-Z 215)。通过LC/MS(方法A)分析所得每一个溶液。
通过质谱(方法A)测定其保留时间和分子峰的方法，分离并定性下列化合物(表13)。
表13：所得磺酰胺类化合物
| 序号 | 名称 | 所得化合物的量 | 保留时间(分钟) | 分子离子 |
| 1 | N-{6-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]吡啶-3基}噻吩-2-磺酰胺 | 2.9mg | 3.07 | 506.21 |
| 2 | N-{6-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]吡啶-3-基}-4-甲氧基-苯磺酰胺 | 3.0mg | 3.20 | 530.25 |
| 3 | 2-氯-N-{6-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并 | 3.0mg | 3.38 | 534.21 |
| [3，4-c]吡啶-6-基]吡啶-3-基}苯磺酰胺 | ||||
| 4 | N-{6-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]吡啶-3-基}-2-甲氧基-4-甲基苯磺酰胺 | 3.8mg | 3.38 | 544.26 |
实施例15：6-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢-吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]吡啶-3-基胺
6-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]吡啶-3-基胺可以通过下列方法制备：
将55mg10％的Pd/CaCO3加到545mg的3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-(5-硝基吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶60ml乙醇溶于中。于35℃、3巴氢气压下搅拌15小时，然后将反应物冷却至室温，通过硅藻土过滤并减压浓缩。如此得到300mg为棕色粉末状的6-[3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶-6-基]-吡啶-3-基胺，其特征如下：
EI m/z＝359M+.基峰
m/z＝266(M-C5H5N2)+
实施例16：3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-(5-硝基吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶
3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-(5-硝基吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶可以通过下列方法制备：
将287mg的2-氯-5-硝基吡啶和500mg碳酸钾加到500mg的3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶盐酸盐的5ml二甲基甲酰胺溶液中。于室温下搅拌20小时后，将反应物加到50ml水中。通过烧结玻璃过滤回收形成的沉淀，用15ml水洗涤3次，然后减压干燥。如此得到548mg为黄色粉末状的3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-6-(5-硝基吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶，其特征如下：
EI：m/z＝389M+.基峰
m/z＝266(M-C5H3N2O2)+
实施例17：6-{5-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]吡啶-2-基}-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酰胺
6-{5-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)脲基]吡啶-2-基}-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酰胺可以通过下列方法自6-(5-叔丁氧基羰基氨基吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酸乙酯制备：
采用氨水溶液，通过酰胺化反应，将6-(5-叔丁氧基羰基氨基吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酸乙酯的乙基酯转化为甲酰胺，结果得到6-(5-叔丁氧基羰基氨基吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酰胺。
EI：m/z＝358
在酸性介质(三氟乙酸的二氯甲烷液中)中，将6-(5-叔丁氧基羰基氨基吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酰胺的氨基基团去保护，结果得到6-(5-氨基吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酰胺。
EI：m/z＝258
采用异氰酸2-氟-5-(三氟甲基)苯基酯，根据实施例1中所述方法，将脲官能团引入6-(5-氨基吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酰胺，结果得到6-{5-[3-(2-氟-5-三氟甲基苯基)-脲基]吡啶-2-基}-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酰胺。
EI：m/z＝463
实施例18：6-(5-叔丁氧基羰基氨基吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酸乙酯
6-(5-叔丁氧基羰基氨基吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酸乙酯可以通过下列方法制备：
将5mg 10％的Pd/C和38mg的二碳酸二叔丁酯加到50mg的6-(5-硝基吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酸乙酯的6ml甲醇溶液中。于室温、3巴氢气下搅拌12小时，将反应物通过硅藻土过滤并减压浓缩。所得反应粗化合物经快速色谱(SiO2，CH2Cl2/MeOH的梯度为75/25-25/75)纯化。如此得到20mg为白色粉末状的6-(5-叔丁氧基羰基氨基吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酸乙酯，其特征如下：
EI：m/z＝387M+.
m/z＝331(M-C4H8)+.基峰
m/z＝286(m/z＝331-CO2H)+
m/z＝194 C9H12N3O2 +
m/z＝57C4H9 +
实施例19：6-(5-硝基吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酸乙酯
6-(5-硝基吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酸乙酯可以通过下列方法制备：
将522mg的2-氯-5-硝基吡啶加到1g的3-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶三氟乙酸盐的10ml吡啶溶液中。于室温下搅拌20小时后，将反应物减压浓缩。通过烧结玻璃过滤回收形成的沉淀，用15ml水洗涤三次并减压干燥。所得反应粗产物经快速色谱(SiO2，环己烷/EtOAc的梯度为75/25-25/75)纯化。如此得到450mg为黄色粉末状的6-(5-硝基-吡啶-2-基)-4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酸乙酯，其特征如下：
EI：m/z＝317M+.基峰
m/z＝271(M-NO2)+.
m/z＝194(M-C5H3N2O2)+
m/z＝148(m/z＝194-C2H6O)+
实施例20：4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酸乙酯三氟乙酸盐
4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酸乙酯三氟乙酸盐可以通过下列方法制备：
将50ml水和12ml的三氟乙酸先后加到3g的2，4，5，7-四氢吡唑并[3，4-c]吡啶基-3，6-甲酸6-叔丁基3-乙基酯的50ml四氢呋喃溶液中。于回流下搅拌2小时后，将反应物冷却至室温，加入饱和的碳酸钠水溶液直到获得碱性pH。所得水相用乙酸乙酯萃取3次。用硫酸镁干燥合并的有机相并减压浓缩。如此得到1.49g的4，5，6，7-四氢-2H-吡唑并[3，4-c]吡啶-3-甲酸乙酯三氟乙酸盐，其特征如下：
EI：m/z＝195M+.
m/z＝166(M-CH3N)+.基峰
m/z＝138(M-C3H7N)+.
m/z＝120(m/z＝166-C2H6O)+.
m/z＝92(m/z＝120-CO)+.
化合物对Tie2和KDR激酶活性的抑制效果的测定
按照下面所述的实验方案测试化合物对Tie2和KDR激酶的抑制活性
1.Tie2
采用自人胎盘中分离的cDNA为模板，通过PCR技术获得与细胞域776-1124氨基酸相应的人Tie2编码序列。将该序列引入GST融合蛋白形式的杆状病毒表达载体pFastBacGT中。
在纯化至约80％同源性的GST-Tie2存在下，通过Tie2对PLC磷酸化的分析测定上述分子的抑制效果。底物由PLC的SH2-SH3片段组成，后者能够以GST融合蛋白的形式表达。
在pH为7.2的含有10mM MgCl2、10mM MnCl2、1mM DTT和10mM的甘油磷酸的20mM MOPS缓冲液中测定Tie2的激酶活性。向保持于冰上的96孔Flashplate板中，每孔加入含有100ng GST-Tie2酶的70μl激酶缓冲液。然后加入DMSO(最大浓度为10％)稀释的10μl待测化合物。对于给定的浓度，每个测定以一式四份进行。通过加入含有2μg的GST-PLC、冷2μM ATP和1μCi的33P[ATP]的20μl溶液开始上述反应。于37℃温育1小时后，通过加入1个体积单位(100μl)的200mM EDTA终止反应。移除培养缓冲液后，用300μl的PBS冲洗孔三次。在Wallac MicroBeta 1450上测定放射性。
计算Tie2抑制的活性并以相对于没有化合物存在时所测定的对照活性的百分抑制率表示。
2.KDR
采用闪烁技术(96孔，NEN)，通过KDR酶在体外对底物磷酸化测定化合物的抑制作用。
将人KDR酶的细胞质域以GST融合形式在杆状病毒表达载体pFastBac中克隆。使上述蛋白质在SF21细胞中表达并纯化至同源性约为60％。
在10mM MgCl2、100μM Na3VO4和1mM NaF存在下，在20mMMOPS、10mM MgCl2、10mM MnCl2、1mM DTT、2.5mM EGTA、10mMb-甘油磷酸中于pH＝7.2测定KDR激酶活性。于4℃将10μl的化合物加到含有100ng KDR酶的70μl的激酶缓冲液中。通过加入20μl含有2μg底物(以GST融合蛋白形式表达的PLCγ的SH2-SH3片段)、2μCi的γ33P[ATP]及2μM冷ATP的溶液开始反应。于37℃温育1小时后，通过加入1体积单位(100μl)的200mM EDTA终止反应。移除培养缓冲液后，用300μl的PBS冲洗孔三次。采用Top Count NXT(Packard)放射性计数器测定每一个孔的放射性。
通过测定含有放射活性ATP以及只含有底物的四个不同孔的放射性确定基础值。
测定含有所有上述成分(γ33P-[ATP]、KDR和PLC-γ底物)但不含有化合物的四个不同孔的总对照活性。
本发明化合物对KDR活性的抑制以没有化合物存在时所测定的对照活性的百分抑制率表示。
化合物SU5614(Calbiochem)(1μM)包括在每一个板中作为抑制对照品。
结果：
Claims (24)
1.通式(I)化合物及其互变异构体，
其特征在于：
L选自键、CH2、CO、SO2、CONH、COO、NHCO、NH、NHSO2、SO2NH、NHCONH、CH2NH和NHCH2；
X选自键、CH2、CO、SO2、CONH和COO；
R1选自OH、H、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，并任选被取代，并且当X为键时，R1也可以为卤素；
R2为H或者选自烷基、亚烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，并任选被取代；
其中所述取代基可独立选自R3、O-R3、卤素、NO2、SO2-R3、CO-R3、SO2NH-R3、CONH-R3、N-(R3)2、NHCO-R3、NHSO2-R3、NHCONH-R3、NHSO2NH-R3、OCO-R3、COO-R3、OSO2-R3、SO2O-R3、OCONH-R3和OSO2NH-R3，其中每一个R3均独立选自H、烷基、环烷基、烯基、芳基、杂芳基、杂环基，并任选被下列基团所取代：卤素、芳基、杂芳基、R4、OR4或N(R4)2，每一个R4可独立选自H、C1-C4烷基和卤代C1-C4烷基。
2.权利要求1的化合物，其具有下式(II)及其互变异构体，
其特征为：
X选自键、CH2、CO、SO2、CONH和COO；
R1选自烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，并任选被取代；R2为H或选自烷基、亚烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，并任选被取代；
其中所述取代基可独立选自R3、O-R3、卤素、NO2、SO2-R3、CO-R3、SO2NH-R3、CONH-R3、N-(R3)2、NHCO-R3、NHSO2-R3、NHCONH-R3、NHSO2NH-R3、OCO-R3、COO-R3、OSO2-R3、SO2O-R3、OCONH-R3和OSO2NH-R3，其中每一个R3均独立选自H、烷基、环烷基、烯基、芳基、杂芳基、杂环基，并可任选被下列基团所取代：卤素、芳基、杂芳基、OR4或N(R4)2，其中每一个R4均独立选自H和C1-C4烷基。
3.权利要求1的化合物，其具有下式(III)及其互变异构体，
其特征为：
X选自键、CH2、CO、SO2、CONH和COO；
R1选自烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，并任选被取代；R2为H或选自烷基、亚烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，并任选被取代；
其中所述取代基可独立选自R3、O-R3、卤素、NO2、SO2-R3、CO-R3、SO2NH-R3、CONH-R3、N-(R3)2、NHCO-R3、NHSO2-R3、NHCONH-R3、NHSO2NH-R3、OCO-R3、COO-R3、OSO2-R3、SO2O-R3、OCONH-R3和OSO2NH-R3，其中每一个R3均独立选自H、烷基、环烷基、烯基、芳基、杂芳基、杂环基，并可任选被下列基团所取代：卤素、芳基、杂芳基、OR4或N(R4)2，其中每一个R4均独立选自H和C1-C4烷基。
4.权利要求1-3任一项的化合物，其特征在于R1为可任选被取代的杂芳基。
5.权利要求4的化合物，其特征在于R1选自可任选被卤素、R4或O-R4所取代的苯并咪唑基、吲哚基、吡咯基。
6.权利要求5的化合物，其特征在于R1选自可任选被卤素、R4或O-R4所取代的苯并咪唑-2-基、吲哚-2-基、吡咯-2-基。
7.权利要求1-6任一项的化合物，其特征在于R2选自可任选被取代的苯基、吡啶基、噻吩基、C1-C4烷基和C3-C7环烷基。
8.权利要求1-7任一项的化合物，其特征在于X选自CO和SO2。
9.权利要求1的化合物，其特征在于R1为H。
10.权利要求1的化合物，其特征在于R1为取代的芳基。
11.权利要求1的化合物，其特征在于R1-L为R1-NH-CO。
12.权利要求11的化合物，其特征在于R1为H。
13.权利要求1、11或12的化合物，其特征在于X为键且R2选自取代的芳基和取代的杂芳基。
14.权利要求13的化合物，其特征在于R2选自：
NHSO2-R3或NHCONH-R3取代的芳基，和
NHSO2-R3或NHCONH-R3取代的杂芳基。
15.权利要求14的化合物，其特征在于芳基为苯基且杂芳基选自吡啶基和嘧啶基。
16.权利要求14的化合物，其特征在于R3选自取代的芳基和取代的杂芳基。
17.权利要求16的化合物，其特征在于R3被选自下列基团的取代基所取代：卤素、R4、OR4和N(R4)2，其中每一个R4可独立选自H、C1-C4烷基和卤代C1-C4烷基。
18.权利要求17的化合物，其特征在于它选自：
19.前面任一项权利要求的化合物，其特征在于它是以下列形式存在的：
4)外消旋形式，或
5)富集立体异构体的形式，或
6)富集对映体的形式；
并且也可以任选为成盐的形式存在。
20.药用组合物，该药用组合物含有前面任一项权利要求的化合物以及药学上可接受的赋形剂。
21.权利要求1-19任一项的化合物作为激酶活性调节剂的用途。
22.权利要求21的化合物的用途，其中激酶选自Tie2和KDR。
23.权利要求1-19任一项的化合物的用途，用于生产用于治疗疾病的药物。
24.权利要求23的用途，其中所述疾病为癌症。
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Cited By (10)
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