发明内容
本发明目的在于提供一种能简便快速去除尿液中的干扰物质,准确测定尿液中碘浓度的尿液碘测定试剂盒。
本发明的技术方案如下:
本发明提供的尿液碘测定试剂盒,主要包括尿液纯化装置、稀释液、显色液、复合氧化剂、标准比色板和尿标准液;
所述尿液纯化装置(如图1所示)为一种内装用来特异吸附尿液中干扰物质的选择性特异吸附剂的滴定式容器,所述选择性特异吸附剂为由0.2~1g的纯化活性炭和100~1000ug碘吸附拮抗剂组成的吸附剂;所述纯化活性炭经pH值pH3~6.5的缓冲液浸泡处理,选择性特异吸附剂在70~250℃烘烤4~72小时进行活化处理;经过活化的选择性特异吸附剂可以完全吸附去除尿中的干扰物质如胆红素、维生素C、肌酐等而对碘不吸附;
所述稀释液为由pH=3~6.5的缓冲液与碘吸附拮抗剂组成的混合稀释剂,所述碘吸附拮抗剂在所述混合稀释剂中质量百分浓度为0.1%~10%;
所述碘吸附拮抗剂为NaCl、MgCl2或NaBr;
所述缓冲液为柠檬酸缓冲液、乙酸盐缓冲液或磷酸盐缓冲液;
所述的显色液为由质量百分浓度为2~20%的四甲基联苯胺水溶液和质量百分浓度为5~20%的聚乙二醇6000~35000线性有机高分子化合物稳定剂组成的混合试剂;
所述的复合氧化剂为由质量百分浓度2~15%过氧乙酸、质量百分浓度2~15%H2O2和质量百分浓度0.1~3%蒽磺酸钠甲醛缩合物组成的混合氧化剂;
标准比色板为由由已知不同碘浓度的尿液反应90秒后的颜色作为色标组成的标准比色板;该标准比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L浓度尿液的色标。通过比较样品显色与色标的颜色深浅,即可判定样品浓度的范围。
尿标准液:收集健康人尿液,分装冻干后,用“国家冻干人尿中碘成分分析标准物质”确定浓度。
所述的乙酸盐缓冲液为乙酸钠盐缓冲液或乙酸钾盐缓冲液。所述的磷酸盐缓冲液为磷酸钠盐缓冲液或磷酸钾盐缓冲液。
使用本发明的试剂盒进行尿液碘测定的步骤如下:
(1)取1ml尿液用稀释液4ml稀释;
(2)取2ml稀释尿液从加样孔2加到尿液纯化装置的容器3(容器3中预先装有用来特异吸附尿液中干扰物质的选择性特异吸附剂)中,盖上注液嘴密封1,摇晃10次后,取下堵头帽5用注射器将尿液轻轻由出液咀4推出弃掉;
(3)重复步骤2,用注射器将尿液轻轻由出液咀4推出到反应试管中;
(4)滴5滴显色剂在纯化尿液中,摇匀;
(5)滴一滴复合氧化剂在纯化尿液中,开始记时并摇匀,90秒后与标准比色板上的色标对照或者用分光光度计或半自动生化分析仪630nm比色测定。
本发明提供的尿液碘测定试剂盒具有如下优点:
1.本发明的尿液碘测定试剂盒可选择性复合尿液中的干扰物,对测试结果没有影响,且操作简便。
2.标准液作为内对照和质控,可避免因干试剂垫保存不当,造成酶失活,产生不准确结果,提高了检测结果的准确性。
3.国内目前没有同类产品。
具体实施方式
本发明提供的尿液碘测定试剂盒,包括尿液纯化装置、稀释液、显色液、复合氧化剂和标准比色板;
所述尿液纯化装置(如图1所示)为一种内装用来特异吸附尿液中干扰物质的选择性特异吸附剂的滴定式容器,所述选择性特异吸附剂为由0.2~1g的纯化活性炭和100~1000ug碘吸附拮抗剂组成的吸附剂;所述纯化活性炭经pH值pH3~6.5的缓冲液浸泡处理,选择性特异吸附剂在70~250℃烘烤4~72小时进行活化处理;经过活化的选择性特异吸附剂可以完全吸附去除尿中的干扰物质如胆红素、维生素C、肌酐等而对碘不吸附;
所述稀释液为由pH=3~6.5的缓冲液与碘吸附拮抗剂组成的混合稀释剂,所述碘吸附拮抗剂在所述混合稀释剂中质量百分浓度为0.1%~10%;
所述碘吸附拮抗剂为NaCl、MgCl2或NaBr;
所述缓冲液为柠檬酸缓冲液、乙酸盐缓冲液或磷酸盐缓冲液;
所述的显色液为由质量百分浓度为2~20%的四甲基联苯胺水溶液和质量百分浓度为5~20%的聚乙二醇6000~35000线性有机高分子化合物稳定剂组成的混合试剂;
所述的复合氧化剂为由质量百分浓度2~15%过氧乙酸、质量百分浓度2~15%H2O2和质量百分浓度0.1~3%蒽磺酸钠甲醛缩合物组成的混合氧化剂;
标准比色板为由由已知不同碘浓度的尿液反应90秒后的颜色作为色标组成的标准比色板;该标准比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L浓度尿液的色标。通过比较样品显色与色标的颜色深浅,即可判定样品浓度的范围。
尿标准液:收集健康人尿液,分装冻干后,用“国家冻干人尿中碘成分分析标准物质”确定浓度。
所述的乙酸盐缓冲液为乙酸钠盐缓冲液或乙酸钾盐缓冲液。所述的磷酸盐缓冲液为磷酸钠盐缓冲液或磷酸钾盐缓冲液。
实施例1
1、选择图1所示的尿液纯化装置10,该尿液纯化装置为一种滴定式容器,其滴定式容器3之内装有选择性特异吸附剂;本实施例的选择性特异吸附剂为0.5g的纯化活性炭和170ug的MgCl2组成的吸附剂;其中纯化活性炭经过pH=4.5的10mmol/L柠檬酸缓冲液浸泡处理;该选择性特异吸附剂在150℃烘烤36小时进行活化;经过活化的选择性特异吸附剂可以完全吸附去除尿中的干扰物质如胆红素、维生素C、肌酐等而对碘不吸附;
2、制备稀释液:pH=4.5的10mmol/L柠檬酸缓冲液与质量百分浓度为1.85%的MgCl2进行混配;
3、显色液:质量百分浓度9%的四甲基联苯胺(TMB)水溶液与质量百分浓度9%的聚乙二醇35000进行混配;
4、复合氧化剂:质量百分浓度8%过氧乙酸、质量百分浓度8%H2O2和质量百分浓度1.2%蒽磺酸钠甲醛缩合物混配;
标准比色板为由根据已知不同碘浓度的尿液反应90秒后的颜色确定的色标组成的标准比色板;该标准比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L浓度尿液的色标;
6、尿标准液:收集健康人尿液,分装冻干后,用“国家冻干人尿中碘成分分析标准物质”确定浓度。
进行尿液碘测定的步骤如下:
(1)取1ml尿液用稀释液4ml稀释;
(2)取2ml稀释尿液从加样孔2加到尿液纯化装置的容器3(容器3中预先装有本实施例配制的用来特异吸附尿液中干扰物质的选择性特异吸附剂)中,盖上注液嘴密封帽1,摇晃10次后,取下堵头帽5用注射器将尿液轻轻由出液咀4推出弃掉;
(3)重复步骤2,用注射器将尿液轻轻由出液咀推出到反应试管中;
(4)滴5滴显色剂在纯化尿液中,摇匀;
(5)滴一滴复合氧化剂在纯化尿液中,开始记时并摇匀,90秒后与标准比色板上的标准色标对照或者用分光光度计或半自动生化分析仪630nm比色测定。
实施例2
选择图1所示的尿液纯化装置10,该尿液纯化装置为一种滴定式容器,其滴定式容器3之内装有选择性特异吸附剂;本实施例的选择性特异吸附剂为1g的纯化活性炭和500ug的MgCl2组成的吸附剂;其中纯化活性炭经过pH=3.8的10mmol/L柠檬酸缓冲液浸泡处理;该选择性特异吸附剂在70℃烘烤72小时进行活化;经过活化的选择性特异吸附剂可以完全吸附去除尿中的干扰物质如胆红素、维生素C、肌酐等而对碘不吸附;
制备稀释液:pH=3.8的10mmol/L柠檬酸缓冲液与质量百分浓度为5%的MgCl2进行混配;
显色液:质量百分浓度2%的四甲基联苯胺(TMB)水溶液与质量百分浓度5%的聚乙二醇6000进行混配;
复合氧化剂:质量百分浓度2%过氧乙酸、质量百分浓度2%H2O2和质量百分浓度0.1%蒽磺酸钠甲醛缩合物混配;
标准比色板为由根据已知不同碘浓度的尿液反应90秒后的颜色确定的色标组成的标准比色板;该标准比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L浓度尿液的色标;
尿液碘测定的步骤通实施例1。
实施例3
选择图1所示的尿液纯化装置10,该尿液纯化装置为一种滴定式容器,其滴定式容器3之内装有选择性特异吸附剂;本实施例的选择性特异吸附剂为0.2g的纯化活性炭和100ug的MgCl2组成的吸附剂;其中纯化活性炭经过pH=6.5的10mmol/L柠檬酸缓冲液浸泡处理;该选择性特异吸附剂在250℃烘烤4小时进行活化;经过活化的选择性特异吸附剂可以完全吸附去除尿中的干扰物质如胆红素、维生素C、肌酐等而对碘不吸附;
制备稀释液:pH=6.5的10mmol/L柠檬酸缓冲液与质量百分浓度为0.1%的MgCl2进行混配;
显色液:质量百分浓度20%的四甲基联苯胺(TMB)水溶液与质量百分浓度20%的聚乙二醇12000进行混配;
复合氧化剂:质量百分浓度15%过氧乙酸、质量百分浓度15%H2O2和质量百分浓度3%蒽磺酸钠甲醛缩合物混配;
标准比色板为由根据已知不同碘浓度的尿液反应90秒后的颜色确定的色标组成的标准比色板;该标准比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L浓度尿液的色标;
尿液碘测定的步骤通实施例1。
实施例4
选择图1所示的尿液纯化装置10,该尿液纯化装置为一种滴定式容器,其滴定式容器3之内装有选择性特异吸附剂;本实施例的选择性特异吸附剂为0.3g的纯化活性炭和225ug的NaCl组成的吸附剂;其中纯化活性炭经过pH=4.3的10mmol/L柠檬酸缓冲液浸泡处理;该选择性特异吸附剂在80℃烘烤72小时进行活化;经过活化的选择性特异吸附剂可以完全吸附去除尿中的干扰物质如胆红素、维生素C、肌酐等而对碘不吸附;
制备稀释液:pH=5.8的10mmol/L柠檬酸缓冲液与质量百分浓度为2.5%的NaCl进行混配;
显色液:质量百分浓度16%的四甲基联苯胺(TMB)水溶液与质量百分浓度16%的聚乙二醇25000进行混配;
复合氧化剂:质量百分浓度12%过氧乙酸、质量百分浓度12%H2O2和质量百分浓度2.4%蒽磺酸钠甲醛缩合物混配;
标准比色板为由根据已知不同碘浓度的尿液反应90秒后的颜色确定的色标组成的标准比色板;该标准比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L浓度尿液的色标;
尿液碘测定的步骤通实施例1。
实施例5
选择图1所示的尿液纯化装置10,该尿液纯化装置为一种滴定式容器,其滴定式容器3之内装有选择性特异吸附剂;本实施例的选择性特异吸附剂为0.8g的纯化活性炭和743ug的NaCl组成的吸附剂;其中纯化活性炭经过pH=3的10mmol/L柠檬酸缓冲液浸泡处理;该选择性特异吸附剂在150℃烘烤36小时进行活化;经过活化的选择性特异吸附剂可以完全吸附去除尿中的干扰物质如胆红素、维生素C、肌酐等而对碘不吸附;
制备稀释液:pH=3的10mmol/L柠檬酸缓冲液与质量百分浓度为7.5%的NaCl进行混配;
显色液:质量百分浓度8%的四甲基联苯胺(TMB)水溶液与质量百分浓度8%的聚乙二醇25000进行混配;
复合氧化剂:质量百分浓度6%过氧乙酸、质量百分浓度6%H2O2和质量百分浓度0.8%蒽磺酸钠甲醛缩合物混配;
标准比色板为由根据已知不同碘浓度的尿液反应90秒后的颜色确定的色标组成的标准比色板;该标准比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L浓度尿液的色标;
尿液碘测定的步骤通实施例1。
实施例6
选择图1所示的尿液纯化装置10,该尿液纯化装置为一种滴定式容器,其滴定式容器3之内装有选择性特异吸附剂;本实施例的选择性特异吸附剂为1g的纯化活性炭和1000ug的NaBr组成的吸附剂;其中纯化活性炭经过pH=4.8的10mmol/L柠檬酸缓冲液浸泡处理;该选择性特异吸附剂在70℃烘烤72小时进行活化;经过活化的选择性特异吸附剂可以完全吸附去除尿中的干扰物质如胆红素、维生素C、肌酐等而对碘不吸附;
制备稀释液:pH=4.8的10mmol/L柠檬酸缓冲液与质量百分浓度为10%的NaBr进行混配;
显色液:质量百分浓度5%的四甲基联苯胺(TMB)水溶液与质量百分浓度5%的聚乙二醇35000进行混配;
复合氧化剂:质量百分浓度2%过氧乙酸、质量百分浓度2%H2O2和质量百分浓度0.1%蒽磺酸钠甲醛缩合物混配;
标准比色板为由根据已知不同碘浓度的尿液反应90秒后的颜色确定的色标组成的标准比色板;该标准比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L浓度尿液的色标;
尿液碘测定的步骤通实施例1。
实施例7
选择图1所示的尿液纯化装置10,该尿液纯化装置为一种滴定式容器,其滴定式容器3之内装有选择性特异吸附剂;本实施例的选择性特异吸附剂为0.4g的纯化活性炭和247ug的NaBr组成的吸附剂;其中纯化活性炭经过pH=3的10mmol/L柠檬酸缓冲液浸泡处理;该选择性特异吸附剂在250℃烘烤4小时进行活化;经过活化的选择性特异吸附剂可以完全吸附去除尿中的干扰物质如胆红素、维生素C、肌酐等而对碘不吸附;
制备稀释液:pH=3的10mmol/L柠檬酸缓冲液与质量百分浓度为0.1%的NaBr进行混配;
显色液:质量百分浓度20%的四甲基联苯胺(TMB)水溶液与质量百分浓度20%的聚乙二醇35000进行混配;
复合氧化剂:质量百分浓度15%过氧乙酸、质量百分浓度15%H2O2和质量百分浓度3%蒽磺酸钠甲醛缩合物混配;
标准比色板为由根据已知不同碘浓度的尿液反应90秒后的颜色确定的色标组成的标准比色板;该标准比色板包括50ug/L、90ug/L、100ug/L、200ug/L、300ug/L和400ug/L浓度尿液的色标;
尿液碘测定的步骤通实施例1。