CN1796574A - 一种鉴定不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法 - Google Patents

一种鉴定不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN1796574A
CN1796574A CN 200410100464 CN200410100464A CN1796574A CN 1796574 A CN1796574 A CN 1796574A CN 200410100464 CN200410100464 CN 200410100464 CN 200410100464 A CN200410100464 A CN 200410100464A CN 1796574 A CN1796574 A CN 1796574A
Authority
CN
China
Prior art keywords
wakame
sequence
dna
rubisco
rubisco gene
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN 200410100464
Other languages
English (en)
Other versions
CN100471959C (zh
Inventor
段德麟
王迪
胡自民
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Oceanology of CAS
Original Assignee
Institute of Oceanology of CAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Oceanology of CAS filed Critical Institute of Oceanology of CAS
Priority to CNB2004101004646A priority Critical patent/CN100471959C/zh
Publication of CN1796574A publication Critical patent/CN1796574A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN100471959C publication Critical patent/CN100471959C/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及来自中国不同养殖海区的经济海藻裙带菜(Undariapinnatifida)配子体Rubisco基因及两侧大小亚基(rbcL和rbcS)部分DNA序列的获得及利用该序列对不同来源的裙带菜配子体进行鉴定的方法。本发明首先建立了一套裙带菜配子体高质量DNA的制备方法，接着对裙带菜不同配子体Rubisco基因及两侧大小亚基DNA序列进行了测序，获得了Rubisco基因全序列及其大小亚基(rbcL和rbcS)的部分序列(见序列附表)；并与Genbank中已经注册的裙带菜Rubisco基因序列进行了同源性比较，比较了不同来源裙带菜配子体Rubisco基因全序列及其大小亚基核苷酸位点差异，分析了中国不同养殖地点的裙带菜起始来源地，方法简便，从分子角度出发，使鉴定结果更准确、可靠。

Description

一种鉴定不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法
技术领域
本发明涉及来自中国不同养殖海区的经济海藻裙带菜(Undariapinnatifida)配子体Rubisco基因及两侧大小亚基(rbcL和rbcS)部分DNA序列的获得及利用该序列对不同来源的裙带菜配子体进行鉴定的方法，也即获得经济海藻裙带菜(Undaria pinnatifida)配子体Rubisco基因全部序列和rbcL及rbcS亚基部分序列，及利用该序列鉴定不同来源的中国经济海藻裙带菜配子体的方法。
背景技术
裙带菜是海岸植物中个体较大，质柔味美，营养价值和经济价值较高的一种重要经济海藻，它是北太平洋特有种，多年来由于船舶运输的关系，它的配子体和幼孢子体被传播到世界各地。《中国海藻志》记载裙带菜有：无肋裙带菜(Undaria peterseniana)、叶囊裙带菜(U.undarioides)和裙带菜(U.pinnatifida Harv.Suringar)三种，后一种因有较高的食用价值而被广泛养殖。裙带菜营养价值较高，综合起来看，裙带菜干品中蛋白质含量在11％以上，最高可达22％；含糖分35％～40％；脂类0.5％～3％；灰分20％～38％，灰分中含Ca，Mg，Zn，Fe，Mn，Co，Ge，Se等各种矿质元素；裙带菜含有19种氨基酸，包括全部人体必需氨基酸；裙带菜还含有各种维生素，其中维生素K1含量可达到8μg/g；裙带菜的多糖组分较复杂，纤维素易于被人消化吸收。裙带菜的药用和保健作用也日益受到人们的重视。裙带菜还是重要的工业原料，综合利用可提取褐藻胶、碘、甘露醇和氯化钾等多种工业产品。除此之外，裙带菜还具有较高的经济价值，国际市场对裙带菜需求量的增加也证实了这一点。20世纪90年代初的统计表明，全世界裙带菜年产量约为9×105t干品，产值为2×108美元。近年来，裙带菜的市场需求不断扩大，应用范围不断扩展，显示出极好的市场潜力。
裙带菜是继海带和紫菜之后，从20世纪80年代中期开始在中国逐步形成的一个藻类养殖产业。到目前为止，尽管已先后在法国、英国、新西兰和澳大利亚发现了裙带菜，但裙带菜养殖产业主要集中在中国、日本和韩国。中国自然繁殖的裙带菜主要分布在浙江省舟山群岛的塖山岛附近，自然分布在大连附近及山东半岛地区的裙带菜则是早年从日本和朝鲜移植过来的。自从裙带菜雌雄配子体分离方法建立以来，随着养殖和杂交育种技术的发展，许多具有优良性状的裙带菜新品种在生产中得到了广泛应用。但是不同来源地的裙带菜或具有不同优良性状的同种裙带菜的配子体从肉眼是很难区分开来的，目前主要是借助显微镜观察。随着分子生物学的迅猛发展，一些分子标记技术诸如随机引物扩增多态性(RAPD)、限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)、扩增片段长度多态性(AFLP)和简单序列重复间区(ISSR)等已开始应用于重要经济海藻的鉴定和辅助育种。但是这几种标记方法稳定性和重复性不高、耗时耗力，极大的限制了它们在实际中的应用。
Rubisco基因(1，5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶)是1947年由Wildmen和Bonnor首先发现的。它具有催化CO2和RuBP(1，5-二磷酸核酮糖)形成PGA(3-磷酸甘油酸)的功能，是光合作用过程中一种非常重要的酶。后续研究证实在植物与微生物之间、不同植物之间、不同微生物之间Rubisco结构是不同的，其形式是由大亚基(rbcL)和小亚基(rbcS)共同组成的LxSy。Rubisco基因大亚基分子量一般在50～60KD之间，是由叶绿体DNA编码，小亚基分子量一般在12～18KD之间，是由核DNA编码。不同植物间和同一物种内Rubisco基因及大小亚基DNA同源性程度不同，因此可以用于系统进化、亲缘关系分析和物种鉴定等相关研究领域。近年来，随着PCR技术的发展和直接测序技术在分子生物学研究中的广泛应用，Rubisco基因及其两侧的大小亚基DNA序列必将在植物科内属间、属下种间的亲缘关系鉴定和系统进化等研究中发挥重要的作用。
发明内容
本发明的目的是提供一种简便的鉴定中国不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法，从分子角度出发，使鉴定结果更准确、可靠。本发明首先建立了一套裙带菜配子体高质量DNA的制备方法，接着对裙带菜不同配子体Rubisco基因及两侧大小亚基DNA序列进行了测序，获得了Rubisco基因全序列及其大小亚基(rbcL和rbcS)的部分序列(见序列附表)；并与Genbank中已经注册的裙带菜Rubisco基因序列进行了同源性比较，比较了不同来源裙带菜配子体Rubisco基因全序列及其大小亚基核苷酸位点差异，分析了中国不同养殖地点的裙带菜起始来源地。
一种鉴定来自中国不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法，其利用海藻裙带菜配子体Rubisco基因及两侧大小亚基(rbcL和rbcS)部分的DNA序列对不同来源(养殖海区)的裙带菜配子体进行鉴定。
具体过程为：
1)提取需要鉴定的海藻裙带菜总DNA：进行藻体材料收集、鉴定和保存工作，包括裙带菜雌雄配子体的分离，从确定的藻体中提取DNA(取培养中的新鲜健康藻体材料，用无菌水处理以除去杂质，在液氮种研磨成粉末，用CTAB抽提法提取总DNA)；
2)以获得的DNA为模板，以寡核苷酸作为聚合酶链式反应(PCR)的引物，扩增Rubisco基因及其两侧大小亚基(rbcL和rbcS)部分序列，所用的引物参照相近物种Rubisco基因两侧大小亚基的保守序列进行人工合成；
利用特异引物P1和P4的序列对总DNA进行Rubisco基因及其两侧大小亚基PCR扩增反应，
P1和P4的序列分别为：正向P1为5’GCCAAATGCACCAACTTCTT3’，位于rbcL上，反向P4为5’AGACCCCATAATTCCC3’，位于rbcS上；并以ddH2O代替模板DNA做空白对照；
3)对PCR扩增产物进行纯化；
4)应用直接测序技术对对纯化后的PCR产物测序；
5)对测定序列后的DNA序列数据分析(系统学分析)：用对位排列软件Clustal W和Genedoc进行对位排列，并辅以人工校对，用系统进化分析软件MEGA2.1和PHYLIP3.57分别分析各样品DNA序列与数据库中各个序列间的差异，进行亲缘和进化关系分析。
所述用于Rubisco基因及其两侧大小亚基扩增的反应液20μL中含10mmol/L Tris-HCl，pH8.3，50mmol/L KCl，1.5mmol/L MgCl2，Taqpolymerase 1U，4种dNTP各2mmol/L，两个引物各4-6mmol/L，DNA模板40-70ng；反应循环参数为：96℃预变性3分钟；94℃2分钟，53-57℃10秒钟，72℃1分钟；2个循环；94℃10秒钟，53-57℃10秒钟，72℃2分钟，33-38个循环；72℃延伸5分钟；扩增后测序所设计的引物为：
P1：5’GCCAAATGCACCAACTTCTT3’，P4：5’AGACCCCATAATTCCC3’。每一个样品至少重复2～3次。
裙带菜配子体保种因为一些主观和客观因素的影响，存在材料起始来源不明确的问题，本发明从分子水平上对该问题进行了解答。本发明提供了一种获得经济海藻裙带菜配子体的Rubisco基因及其两侧大小亚基(rbcL和rbcS)部分DNA序列的方法，并利用该序列对中国不同来源的经济海藻裙带菜进行鉴定和探讨这些不同养殖地点所用裙带菜的初始来源地。
海带和裙带菜都属于褐藻门，褐子纲，海带目，分属于海带科和翅藻科，它们的生活史比较相似，在养殖过程中都要经过配子体保种阶段，而且它们的配子体从外形上是很难区分的。本发明实施例给出了利用同源性较好的引物P1和P4比较裙带菜和海带配子体Rubisco基因扩增图谱差异；为海带和裙带菜配子体的鉴定提供了很好的依据。
附图说明
图1为本发明用Rubisco基因鉴别裙带菜和海带配子体的电泳图谱，其中1-17和19-24均为裙带菜样品，18为海带样品。
具体实施方式
实施例
下面详细描述所述方法：
(1)总DNA提取
首先，对培养的裙带菜配子体进行清洗，除去杂物，然后用吸水纸吸干水份。接着加液氮研磨成粉末，转移到预热的提取缓冲液[10mmol L-1Tris.HCl，pH8.0，20mmol L-1 ethylenediaminetetra-acetic acid(EDTA)，1.4MNaCl，3％ cetyltrimethyl ammonium bromide(CTAB)]中，加入β巯基乙醇，在65℃水浴1h加入1/3体积的2M(pH5.5)的KAC，冰浴15min后在10000rpm下离心10min。取上清液加氯仿∶异戊醇(24∶1)抽提两次，接着取上清液加2/3体积异丙醇沉淀DNA。DNA溶解在TE中，加入Rnase除去RNA后用氯仿∶异戊醇(24∶1)抽提一次，加2/3体积异丙醇沉淀DNA，干燥后的DNA重新溶解在TE中，-20℃保存。琼脂糖凝胶电泳后染色显示提取的基因组DNA大小在23Kb左右，OD260/280比值在1.60-1.90之间。
(2)PCR扩增
裙带菜配子体Rubisco基因及其两侧大小亚基扩增的引物为P1和P4，序列如下：P1(正向)为5’GCCAAATGCACCAACTTCTT3’，位于rbcL上，P4(反向)为5’AGACCCCATAATTCCC3’，位于rbcS上。PCR反应扩增反应在20μL的体系中完成，反应液含10mmol/L Tris-HCl，pH8.3，50mmol/L KCl，1.5mmol/LMgCl2，Taq polymerase 1U，4种dNTP各2mmol/L，两个引物各5mmol/L，DNA模板约50ng。反应循环参数为96℃预变性3分钟；94℃2分钟，55℃10秒钟，72℃2分钟，2个循环；94℃10秒钟，55℃10秒钟，72℃2分钟，35个循环；72℃延伸5分钟。以ddH2O代替模板DNA做空白对照。
(3)PCR产物纯化
PCR产物用EZ spin column PCR product purification kit(生工，上海)进行纯化，具体操作按试剂盒使用指南进行。
(4)DNA序列测定
用BigDyeTM测序试剂盒进行测序反应，测序反应参数为：Mix 1μL，纯化后的DNA约30-50ng，Primer 1.5pmol，buffer 1.2μL，ddH2O适量。测序反应条件为：95℃1min，95℃30s，50℃30s，60℃4min，总共35各循环。用ABIPRISM377-96全自动测序仪上进行序列测定。
(5)DNA序列数据分析
Rubisco基因序列的起止范围参照Genbank中已经注册的部分海带和裙带菜Rubisco基因序列，所得序列输入计算机后用Clustal W和Genedoc软件进行比对排列，并辅以人工校对。用MEGA2.1和PHYLIP3.57分析软件包分别分析各样品DNA序列之间的差异，并构建亲缘关系树，根据系统进化树和每个个体之间的遗传分化距离，结合Genbank中已有的数列，推测中国不同养殖地点的裙带菜初始起源地。
发明人从中国沿海不同养殖海域获得包括辽宁大连，山东青岛、威海、荣成和日照，日本南型和北型，大连水产学院及课题组自己分离得到的裙带菜(Undaria pinnatifida)配子体共18个样品(包括野生型和养殖品系)，它们各自具有不同的生产性状，含盖了目前中国国内的裙带菜所有养殖类型，所有样品都经过相关领域专家的鉴定。
1)采用上述方法对18个待检测植物的样品总DNA提取：将待检样品用无菌水冲洗干净，除去杂质，在液氮中研成粉末，根据本专利提供的CTAB法提取基因组总DNA；
2)模板DNA的质量检测
运用引物P1和P4(P1、P4序列见上述方法步骤2中)对待检样品总DNA进行扩增，检测是否能扩增出目的片断，检验标准主要依据片段的亮度和片段分子量大小，以验证模板DNA的质量、调整模板DNA的浓度及PCR反应体系的组成；PCR扩增反应在20μL的体系中完成，反应液含10mmol/L Tris-HCl，pH8.3，50mmol/L KCl，1.5mmol/L MgCl2，Taqpolymerase 1U，4种dNTP各2mmol/L，两个引物各5mmol/L，DNA模板约50ng。反应循环参数为96℃预变性3分钟；94℃1分钟，53-57℃10秒钟，72℃1分钟；2个循环；94℃10秒钟，53-57℃10秒钟，72℃1分钟，30-38个循环；72℃延伸5分钟。以ddH2O代替模板DNA做空白对照。
3)运用同源性引物P1和P4对模板DNA进行扩增；电泳结果显示扩增产物非常理想(如图1所示)，所以同源性引物P1和P4能用于海带目海藻海带和裙带菜的鉴定分离。
(不同来源的中国经济海藻裙带菜配子体Rubisco基因的全序列(包括rbcL和rbcS部分序列))
1.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：539碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：生长在水温较高、水层较浅处的耐高温种，源于日本南型(明门)的裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)雄配子体Rubisco基因全序列(1-244，rbcL；245-512；Rubisco；513-539，rbcS)
序列描述：
TACTATAGGTCACCCTGATGGTATTCAATCTGGTGCAACAGCAAACCGTGTTGCT
CTAGAATCTATGGTTCTAGCTCGTAATGAAGGTCGTGATTATGTTGGAGAAGGTC
CTGAAATCTTACGTAATGCAGCGGCTACTTGTGGTCCTTTAAAAGCAGCGTTAGA
TTTATGGAAAGATATTACTTTTGAGTACACTTCAACAGATACACCTGATTTCGTTG
AACTTCCAACTGAAAGCAAATAGTATACTGAAATTAAACTCATAAAAGATTAAGT
TAAATTAATTCTAGTTATATTTAAATAGCTAGAAAATATATCTAATAATTTTATCT
ACTTTATTATTTAAAGTGATATTGTTATAAAATTAAGACTTAACTTTAAATTTATT
ATAATTTTAGAAAAATACTTAATACCCCAGATTATTTTAAGTGAAAGTAGAGAGT
AAATAAAAATTTTAGTATATAACTAAAAATAAAATTTCTATAATTTATCTTTAAG
GAATTTGAATAGTG ATGAGAGTTACACAAGGATGTTTTTCG
2.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：579碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：生长在水温较高、水层较浅处的耐高温种，源于日本南型(明门)的裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)雌配子体Rubisco基因全序列(1-268，rbcL；269-536；Rubisco；537-579，rbcS)
序列描述：
TGTGGTTCTACAATTTGGTGGTGGTACTATTGGTCACCCTGATGGTATTCAATCTG
GTGCAACAGCAAACCGTGTTGCTCTAGAATCTATGGTTCTAGCTCGTAATGAAGG
TCGTGATTATGTTGGAGAAGGTCCTGAAATCTTACGTAATGCAGCGGCTACTTGT
GGTCCTTTAAAAGCAGCGTTAGATTTATGGAAAGATATTACTTTTGAGTACACTTC
AACAGATACACCTGATTTCGTTGAACTTCCAACTGAAAGCAAATAGTATACTGAA
ATTAAACTCATAAAAGATTAAGTTAAATTAATTCTAGTTATATTTAAATAGCTAG
AAAATATATCTAATAATTTTATCTACTTTATTATTTAAAGTGATATTGTTATAAAA
TTAAGACTTAACTTTAAATTTATTATAATTTTAGAAAAATACTTAATACCCCAGAT
TATTTTAAGTGAAAGTAGAGAGTAAATAAAAATTTTAGTATATAACTAAAAATAA
AATTTCTATAATTTATCTTTAAGGAATTTGAATAGTGATGAGAGTTACACAAGGA
TGTTTTTCGTTTTTACCAGATTTAA
3.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：582碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：藻体较大，叶片上毛囊多，源于山东青岛野生种的裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)雄配子体Rubisco基因全序列(1-219，rbcL；220-487；Rubisco；488-582，rbcS)
序列描述：
CAATCTGGTGCAACAGCAAACCGTGTTGCTCTAGAATCTATGGTTCTAGCTCGTA
ATGAAGGTCGTGATTATGTTGGAGAAGGTCCTGAAATCTTACGTAATGCAGCGGC
TACTTGTGGTCCTTTAAAAGCAGCGTTAGATTTATGGAAAGATATTACTTTTGAGT
ACACTTCAACAGATACACCTGATTTCGTTGAACTTCCAACTGAAAGCAAATAGTA
TACTGAAATTAAACTCATAAAAGATTAAGTTAAATTAATTCTAGTTATATTTAAAT
AGCTAGAAAATATATCTAATAATTTTATCTACTTTATTATTTAAAGTGATATTGTT
ATAAAATTAAGACTTAACTTTAAATTTGTTATAATTTTAGAAAAATACTTAATACC
CCAGATTATTTTAAGTGAAAGTAGAGAGTAAATAAAAATTTTAGTATATAACTAA
AAATAAAATTCCTATAATTTATCTTTAAGGAATTTGAATAGTGGATGAGAGTTAC
ACAAGGATGTTTTTCGTTTTTACCAGATTTAACTGATGAGCAAATTAAAAAACAA
GTTGCTTATGCTATGTCAAAAGGGTGGG
4.序列表SEQ TD NO.1的信息
特征：长度：638碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：适合于低水温水域生长，不耐高温的养殖品系，源于日本北方的裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)雄配子体Rubisco基因全序列(1-265，rbcL；266-533；Rubisco；534-638，rbcS)
序列描述：
GGTTCTACAATTTGGTGGTGGTACTATTGGTCACCCTGATGGTATTCAATCTGGTG
CAACAGCAAACCGTGTTGCTCTAGAATCTATGGTTCTAGCTCGTAATGAAGGTCG
TGATTATGTTGGAGAAGGTCCTGAAATCTTACGTAATGCAGCGGCTACTTGTGGT
CCTTTAAAAGCAGCGTTAGATTTATGGAAAGATATTACTTTTGAGTACACTTCAA
CAGATACACCTGATTTCGTTGAACTTCCAACTGAAAGCAAATAGTATACTGAAAT
TAAACTCATAAAAGATTAAGTTAAATTAATTCTAGTTATATTTAAATAGCTAGAA
AATATATCTAATAATTTTATCTACTTTATTATTTAAAGTGATATTGTTATAAAATT
AAGACTTAACTTTAAATTTGTTATAATTTTAGAAAAATACTTAATACCCCAGATTA
TTTTAAGTGAAAGTAGAGAGTAAATAAAAATTTTAGTATATAACTAAAAATAAAA
TTTCTATAATTTATCTTTAAGGAATTTGAATAGTGATGAGAGTTACACAAGGATGT
TTTTCGTTTTTACCAGATTTAACTGATGAGCAAATTAAAAAACAAGTTGCTTATGC
TATGTCAAAAGGGTGGGCTGTTAGTGTA
5.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：609碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：适合于低水温水域生长，不耐高温的养殖品系，源于日本北方的裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)雌配子体Rubisco基因全序列(1-255，rbcL；256-523；Rubisco；524-609，rbcS)
序列描述：
GGTGTGGGTACTATTGGTCCACCCTGATGGTATTCAATCTGGGTGCAACCAGCAA
ACCGTGTTGCTCTAGAATCTATGGTTCTAGCTCGTAATGAAGGTCGTGATTATGTT
GGAGAAGGTCCTGAAATCTTACGTAATGCAGCGGCTACTTGTGGTCCTTTAAAAG
CAGCGTTAGATTTATGGAAAGATATTACTTTTGAGTACACTTCAACAGATACACC
TGATTTCGTTGAACTTCCAACTGAAAGCAAATAGTATACTGAAATTAAACTCATA
AAAGATTAAGTTAAATTAATTCTAGTTATATTTAAATAGCTAGAAAATATATCTA
ATAATTTTATCTACTTTATTATTTAAAGTGATATTGTTATAAAATTAAGACTTAAC
TTTAAATTTGTTATAATTTTAGAAAAATACTTAATACCCCAGATTATTTTAAGTGA
AAGTAGAGAGTAAATAAAAATTTTAGTATATAACTAAAAATAAAATTTCTATAAT
TTATCTTTAAGGAATTTGAATAGTGATGAGAGTTACACAAGGATGTTTTTCGTTTT
TACCAGATTTAACTGATGAGCAAATTAAAAAACAAGTTGCTTATGCTATGTCAAA
6.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：621碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：孢子叶成熟早，低温养殖品系，源于中国大连的裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)雄配子体Rubisco基因全序列(1-270，rbcL；271-538；Rubisco；539-621，rbcS)
序列描述：
GATGTGGTTCTACAATTTGGTGGTGGTACTATTGGTCACCCTGATGGTATTCAATC
TGGTGCAACAGCAAACCGTGTTGCTCTAGAATCTATGGTTCTAGCTCGTAATGAA
GGTCGTGATTATGTTGGAGAAGGTCCTGAAATCTTACGTAATGCAGCGGCTACTT
GTGGTCCTTTAAAAGCAGCGTTAGATTTATGGAAAGATATTACTTTTGAGTACAC
TTCAACAGATACACCTGATTTCGTTGAACTTCCAACTGAAAGCAAATAGTATACT
GAAATTAAACTCATAAAGATTAAGTTAAATTAATTCTAGTTATATTTAAATAGC
TAGAAAATATATCTAATAATTTTATCTACTTTATTATTTAAAGTGATATTGTTATA
AAATTAAGACTTAACTTTAAATTTGTTATAATTTTAGAAAAATACTTAATACCCCA
GATTATTTTAAGTGAAAGTAGAGAGTAAATAAAAATTTTAGTATATAACTAAAAA
TAAAATTTCTATAATTTATCTTTAAGGAATTTGAATAGTGATGAGAGTTACACAA
GGATGTTTTTCGTTTTTACCAGATTTAACTGATGAGCAAATTAAAAAACAAGTTG
CTTATGCTATGTC
7.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：674碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：孢子叶成熟早，低温养殖品系，源于中国大连的裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)雌配子体Rubisco基因全序列(1-276，rbcL；277-544；Rubisco；545-674，rbcS)
序列描述：
GGGGATGATGTGGTTCTACAATTTGGTGGTGGTACTATTGGTCACCCTGATGGTA
TTCAATCTGGTGCAACAGCAAACCGTGTTGCTCTAGAATCTATGGTTCTAGCTCGT
AATGAAGGTCGTGATTATGTTGGAGAAGGTCCTGAAATCTTACGTAATGCAGCGG
CTACTTGTGGTCCTTTAAAAGCAGCGTTAGATTTATGGAAAGATATTACTTTTGAG
TACACTTCAACAGATACACCTGATTTCGTTGAACTTCCAACTGAAAGCAAATAGT
ATACTGAAATTAAACTCATAAAAGATTAAGTTAAATTAATTCTAGTTATATTTAA
ATAGCTAGAAAATATATCTAATAATTTTATCTACTTTATTATTTAAAGTGATATTG
TTATAAAATTAAGACTTAACTTTAAATTTGTTATAATTTTAGAAAAATACTTAATA
CCCCAGATTATTTTAAGTGAAAGTAGAGAGTAAATAAAAATTTTAGTATATAACT
AAAAATAAAATTTCTATAATTTATCTTTAAGGAATTTGAATAGTGATGAGAGTTA
CACAAGGATGTTTTTCGTTTTTACCAGATTTAACTGATGAGCAAATTAAAAAACA
AGTTGCTTATGCTATGTCAAAAGGGTGGGCTGTTAGTGTAGAATGGACAGATGAT
CCACATCCAC
8.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：641碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：藻体生长快，成熟早，低温养殖品系，源于山东威海的的裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)雄配子体Rubisco基因全序列(1-275，rbcL；276-543；Rubisco；544-641，rbcS)
序列描述：
GGGGATGATGTGGTCTACAATTTGGTGGTGGTACTATTGGTCACCCTGATGGTAT
TCAATCTGGTGCAACAGCAAACCGTGTTGCTCTAGAATCTATGGTTCTAGCTCGT
AATGAAGGTCGTGATTATGTTGGAGAAGGTCCTGAAATCTTACGTAATGCAGCGG
CTACTTGTGGTCCTTTAAAAGCAGCGTTAGATTTATGGAAAGATATTACTTTTGAG
TACACTTCAACAGATACACCTGATTTCGTTGAACTTCCAACTGAAAGCAAATAGT
ATACTGAAATTAAACTCATAAAAGATTAAGTTAAATTAATTCTAGTTATATTTAA
ATAGCTAGAAAATATATCTAATAATTTTATCTACTTTATTATTTAAAGTGATATTG
TTATAAAATTAAGACTTAACTTTAAATTTGTTATAATTTTAGAAAAATACTTAATA
CCCCAGATTATTTTAAGTGAAAGTAGAGAGTAAATAAAAATTTTAGTATATAACT
AAAAATAAAATTTCTATAATTTATCTTTAAGGAATTTGAATAGTGATGAGAGTTA
CACAAGGATGTTTTTCGTTTTTACCAGATTTAACTGATGAGCAAATTAAAAAACA
AGTTGCTTATGCTATGTCAAAAGGGTGGGCTGG
9.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：675碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：藻体叶片较宽，成熟早，低温养殖品系，源于山东荣成的裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)雄配子体Rubisco基因全序列(1-277，rbcL；278-545；Rubisco；546-675，rbcS)
序列描述：
GGGGATGATGTGGTTCTACAATTTGGTGGTGGTACTATTGGTCACCCTGGATGGT
ATTCAATCTGGTGCAACAGCAAACCGTGTTGCTCTAGAATCTATGGTTCTAGCTC
GTAATGAAGGTCGTGATTATGTTGGAGAAGGTCCTGAAATCTTACGTAATGCAGC
GGCTACTTGTGGTCCTTTAAAAGCAGCGTTAGATTTATGGAAAGATATTACTTTTG
AGTACACTTCAACAGATACACCTGATTTCGTTGAACTTCCAACTGAAAGCAAATA
GTATACTGAAATTAAACTCATAAAAGATTAAGTTAAATTAATTCTAGTTATATTTA
AATAGCTAGAAAATATATCTAATAATTTTATCTACTTTATTATTTAAAGTGATATT
GTTATAAAATTAAGACTTAACTTTAAATTTGTTATAATTTTAGAAAAATACTTAAT
ACCCCAGATTATTTAAGTGAAAGTAGAGAGTAAATAAAAATTTTAGTATATAAC
TAAAAATAAAATTTCTATAATTTATCTTTAAGGAATTTGAATAGTGATGAGAGTT
ACACAAGGATGTTTTTCGTTTTTACCAGATTTAACTGATGAGCAAATTAAAAAAC
AAGTTGCTTATGCTATGTCAAAAGGGTGGGCTGTTAGTGTAGAATGGACAGATGA
TCCACATCCAC
10.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：669碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：藻体叶片较宽，成熟早，低温养殖品系，源于山东荣成的裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)雌配子体Rubisco基因全序列(1-276，rbcL；277-544；Rubisco；545-669，rbcS)
序列描述：
GGGGATGATGTGGTTCTACAATTTGGTGGGGGTACTATTGGTCACCCTGATGGTA
TTCAATCTGGTGCAACAGCAAACCGTGTTGCTCTAGAATCTATGGTTCTAGCTCGT
AATGAAGGTCGTGATTATGTTGGAGAAGGTCCTGAAATCTTACGTAATGCAGCGG
CTACTTGTGGTCCTTTAAAAGCAGCGTTAGATTTATGGAAAGATATTACTTTTGAG
TACACTTCAACAGATACACCTGATTTCGTTGAACTTCCAACTGAAAGCAAATAGT
ATACTGAAATTAAACTCATAAAAGATTAAGTTAAATTAATTCTAGTTATATTTAA
ATAGCTAGAAAATATATCTAATAATTTTATCTACTTTATTATTTAAAGTGATATTG
TTATAAAATTAAGACTTAACTTTAAATTTGTTATAATTTTAGAAAAATACTTAATA
CCCCAGATTATTTTAAGTGAAAGTAGAGAGTAAATAAAAATTTTAGTATATAACT
AAAAATAAAATTTCTATAATTTATCTTTAAGGAATTTGAATAGTGATGAGAGTTA
CACAAGGATGTTTTTCGTTTTTACCAGATTTAACTGATGAGCAAATTAAAAAACA
AGTTGCTTATGCTATGTCAAAAGGGTGGGCTGTTAGTGTAGGATGGACAGATGAT
CCACA
11.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：603碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：藻体较宽，成熟晚，较耐高温的养殖品系，源于山东日照的裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)雄配子体Rubisco基因全序列(1-271，rbcL；272-539；Rubisco；540-603，rbcS)
序列描述：
GATGTGGTTCTACAATTTGGTGGTGGTACTATTGGTCACCCTGGATGGTATTCAAT
CTGGTGCAACAGCAAACCGTGTTGCTCTAGAATCTATGGTTCTAGCTCGTAATGA
AGGTCGTGATTATGTTGGAGAAGGTCCTGAAATCTTACGTAATGCAGCGGCTACT
TGTGGTCCTTTAAAAGCAGCGTTAGATTTATGGAAAGATATTACTTTTGAGTACA
CTTCAACAGATACACCTGATTTCGTTGAACTTCCAACTGAAAGCAAATAGTATAC
TGAAATTAAACTCATAAAAGATTAAGTTAAATTAATTCTAGTTATATTTAAATAG
CTAGAAAATATATCTAATAATTTTATCTACTTTATTATTTAAAGTGATATTGTTAT
AAAATTAAGACTTAACTTTAAATTTGTTATAATTTTAGAAAAATACTTAATACCCC
AGATTATTTTAAGTGAAAGTAGAGAGTAAATAAAAATTTTAGTATATAACTAAAA
ATAAAATTTCTATAATTTATCTTTAAGGAATTTGAATAGTGATGAGAGTTACACA
AGGATGTTTTTCGTTTTTACCAGATTTAACTGATGAGCAAATTAAAAAAC
12.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：663碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：藻体较宽，成熟晚，较耐高温的养殖品系，源于山东日照的裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)雌配子体Rubisco基因全序列(1-284，rbcL；285-552；Rubisco；553-663，rbcS)
序列描述：
TCTATTTAGGGGATGATGTGGTTCTACAATTTGGTGGTGGTACTATTGGTCACCCT
GATGGTATTCAATCTGGTGCAACAGCAAACCGTGTTGCTCTAGAATCTATGGTTC
TAGCTCGTAATGAAGGTCGTGATTATGTTGGAGAAGGTCCTGAAATCTTACGTAA
TGCAGCGGCTACTTGTGGTCCTTTAAAAGCAGCGTTAGATTTATGGAAAGATATT
ACTTTTGAGTACACTTCAACAGATACACCTGATTTCGTTGAACTTCCAACTGAAA
GCAAATAGTATACTGAAATTAAACTCATAAAAGATTAAGTTAAATTAATTCTAGT
TATATTTAAATAGCTAGAAAATATATCTAATAATTTTATCTACTTTATTATTTAAA
GTGATATTGTTATAAAATTAAGACTTAACTTTAAATTTGTTATAATTTTAGAAAAA
TACTTAATACCCCAGATTATTTTAAGTGAAAGTAGAGAGTAAATAAAAATTTTAG
TATATAACTAAAAATAAAATTTCTATAATTTATCTTTAAGGAATTTGAATAGTGAT
GAGAGTTACACAAGGATGTTTTTCGTTTTTACCAGATTTAACTGATGAGCAAATT
AAAAAACAAGTTGCTTATGCTATGTCAAAAGGGTGGGCTGTTAGTGTAGAATGG
13.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：659碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：引进的日本北方养殖品系，在中国养殖，通过采孢子分离获得的裙带菜雄配子体(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)Rubisco基因全序列(1-273，rbcL；274-541；Rubisco；542-659，rbcS)
序列描述：
ATGATGTGGTTCTACAATTTGGTGGTGGTACTATTGGTCACCCTGAATGGTATTCA
ATCTGGTGCAACAGCAAACCGTGTTGCTCTAGAATCTATGGTTCTAGCTCGTAAT
GAAGGTCGTGATTATGTTGGAGAAGGTCCTGAAATCTTACGTAATGCAGCGGCTA
CTTGTGGTCCTTTAAAAGCAGCGTTAGATTTATGGAAAGATATTACTTTTGAGTAC
ACTTCAACAGATACACCTGATTTCGTTGAACTTCCAACTGAAAGCAAATAGTATA
CTGAAATTAAACTCATAAAAGATTAAGTTAAATTAATTCTAGTTATATTTAAATA
GCTAGAAAATATATCTAATAATTTTATCTACTTTATTATTTAAAGTGATATTGTTA
TAAAATTAAGACTTAACTTTAAATTTGTTATAATTTTAGAAAAATACTTAATACCC
CAGATTATTTTAAGTGAAAGTAGAGAGTAAATAAAAATTTTAGTATATAACTAAA
AATAAAATTTCTATAATTTATCTTTAAGGAATTTGAATAGTGATGAGAGTTACAC
AAGGATGTTTTTCGTTTTTACCAGATTTAACTGATGAGCAAATTAAAAAACAAGT
TGCTTATGCTATGTCAAAAGGGTGGGCTGTTAGTGTAGAATGGACAGATG
14.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：636碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：引进的日本北方养殖品系，在中国养殖，通过采孢子分离获得的裙带菜雌配子体(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)Rubisco基因全序列(1-246，rbcL；247-514；Rubisco；515-636，rbcS)
序列描述：
GGTACTATTGGTCACCCTGATGGTATTCAATCTGGTGCAACAGCAAACCGTGTTG
CTCTAGAATCTATGGTTCTAGCTCGTAATGAAGGTCGTGATTATGTTGGAGAAGG
TCCTGAAATCTTACGTAATGCAGCGGCTACTTGTGGTCCTTTAAAAGCAGCGTTA
GATTTATGGAAAGATATTACTTTTGAGTACACTTCAACAGATACACCTGATTTCGT
TGAACTTCCAACTGAAAGCAAATAGTATACTGAAATTAAACTCATAAAAGATTAA
GTTAAATTAATTCTAGTTATATTTAAATAGCTAGAAAATATATCTAATAATTTTAT
CTACTTTATTATTTAAAGTGATATTGTTATAAAATTAAGACTTAACTTTAAATTTG
TTATAATTTTAGAAAAATACTTAATACCCCAGATTATTTTAAGTGAAAGTAGAGA
GTAAATAAAAATTTTAGTATATAACTAAAAATAAAATTTCTATAATTTATCTTTAA
GGAATTTGAATAGTGATGAGAGTTACACAAGGATGTTTTTCGTTTTTACCAGATTT
AACTGATGAGCAAATTAAAAAACAAGTTGCTTATGCTATGTCAAAAGGGTGGGCT
GTTAGTGTAGAATGGACAGATGATCC
15.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：624碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：藻体小，比较嫩，源于山东青岛的野生种的裙带菜(Undariapinnatifida Harv.Suringar)雄配字体Rubisco基因全序列(1-228，rbcL；229-496；Rubisco；497-624，rbcS)
序列描述：
GATGGTATTCAATCTGGTGCAACAGCAAACCGTGTTGCTCTAGAATCTATGGTTC
TAGCTCGTAATGAAGGTCGTGATTATGTTGGAGAAGGTCCTGAAATCTTACGTAA
TGCAGCGGCTACTTGTGGTCCTTTAAAAGCAGCGTTAGATTTATGGAAAGATATT
ACTTTTGAGTACACTTCAACAGATACACCTGATTTCGTTGAACTTCCAACTGAAA
GCAAATAGTATACTGAAATTAAACTCATAAAAGATTAAGTTAAATTAATTCTAGT
TATATTTAAATAGCTAGAAAATATATCTAATAATTTTATCTACTTTATTATTTAAA
GTGATATTGTTATAAAATTAAGACTTAACTTTAAATTTGTTATAATTTTAGAAAAA
TACTTAATACCCCAGATTATTTTAAGTGAAAGTAGAGAGTAAATAAAAATTTTAG
TATATAACTAAAAATAAAATTTCTATAATTTATCTTTAAGGAATTTGAATAGTGAT
GAGAGTTACACAAGGATGTTTTTCGTTTTTACCAGATTTAACTGATGAGCAAATT
AAAAAACAAGTTGCTTATGCTATGTCAAAAGGGTGGGCTGTTAGTGTAGAATGGA
CAGATGATCCACATCC
16.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：620碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：藻体小，比较嫩，源于山东青岛的野生种的裙带菜(Undariapinnatifida Harv.Suringar)雌配字体Rubisco基因全序列(1-252，rbcL；253-520；Rubisco；521-620，rbcS)
序列描述：
GGTGGTGGTACTATTGGTCACCCTGATGGTATTCAATCTGGTGCAACAGCAAACC
GTGTTGCTCTAGAATCTATGGTTCTAGCTCGTAATGAAGGTCGTGATTATGTTGGA
GAAGGTCCTGAAATCTTACGTAATGCAGCGGCTACTTGTGGTCCTTTAAAAGCAG
CGTTAGATTTATGGAAAGATATTACTTTTGAGTACACTTCAACAGATACACCTGA
TTTCGTTGAACTTCCAACTGAAAGCAAATAGTATACTGAAATTAAACTCATAAAA
GATTAAGTTAAATTAATTCTAGTTATATTTAAATAGCTAGAAAATATATCTAATA
ATTTTATCTACTTTATTATTTAAAGTGATATTGTTATAAAATTAAGACTTAACTTT
AAATTTGTTATAATTTTAGAAAAATACTTAATACCCCAGATTATTTTAAGTGAAA
GTAGAGAGTAAATAAAAATTTTAGTATATAACTAAAAATAAAATTTCTATAATTT
ATCTTTAAGGAATTTGAATAGTGATGAGAGTTACACAAGGATGTTTTCGTTTTTA
CCAGATTTAACTGATGAGCAAATTAAAAAACAAGTTGCTTATGCTATGTCAAAAG
GGTGGGCTGTTA
17.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：534碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：藻体较大，产量高，源于大连水产学院的裙带菜(Undariapinnatifid Harv.Suringar)雄配子体的Rubisco基因全序列(1-219，rbcL；220-487；Rubisco；488-534，rbcS)
序列描述：
CAATCTGGTGCAACAGCAAACCGTGTTGCTCTAGAATCTATGGTTCTAGCTCGTA
ATGAAGGTCGTGATTATGTTGGAGAAGGTCCTGAAATCTTACGTAATGCAGCGGC
TACTTGTGGTCCTTTAAAAGCAGCGTTAGATTTATGGAAAGATATTACTTTTGAGT
ACACTTCAACAGATACACCTGATTTCGTTGAACTTCCAACTGAAAGCAAATAGTA
TACTGAAATTAAACTCATAAAAGATTAAGTTAAATTAATTCTAGTTATATTTAAAT
AGCTAGAAAATATATCTAATAATTTTATCTACTTTATTATTTAAAGTGATATTGTT
ATAAAATTAAGACTTAACTTTAAATTTGTTATAATTTTAGAAGAATACTTAATACC
CCAGATTATTTTAAGTGAAAGTAGAGAGTAAATAACGATTTTAGTATATAACTAA
AAATAAAATTTCTATAATTTATCTTTAAGGAATTTGAATAGTGATGGAGAGTTAC
ACAAGGATGTTTTTCGTTTTTACCAGATTTAACTG
18.序列表SEQ ID NO.1的信息
特征：长度：571碱基对
类型：核酸
链型：双链
分子类型：cDNA
拓扑结构：线形
来源：藻体较大，产量高，源于大连水产学院的裙带菜(Undariapinnatifida Harv.Suringar)雌配子体的Rubisco基因全序列(1-243，rbcL；244-512；Rubisco；513-571，rbcS)
序列描述：
ACTATTGGTCACCCTGATGGTATTCAATCTGGTGCAACAGCAAACCGTGTTGCTCT
AGAATCTATGGTTCTAGCTCGTAATGAAGGTCGTGATTATGTTGGAGAAGGTCCT
GAAATCTTACGTAATGCAGCGGCTACTTGTGGTCCTTTAAAAGCAGCGTTAGATT
TATGGAAAGATATTACTTTTGAGTACACTTCAACAGATACACCTGATTTCGTTGA
ACTTCCAACTGAAAGCAAATAGTATACTGAAATTAAACTCATAAAAGATTAAGTT
AAATTAATTCTAGTTATATTTAAATAGCTAGAAAATATATCTAATAATTTTATCTA
CTTTATTATTTAAAGTGATATTGTTATAAAATTAAGACTTAACTTTAAATTTGTTA
TAATTTTAGAAAAATACTTAATAGCCCAGATTATTTTAAGTGAAAGTAGAGAGTA
AATAAAAATTTTAGTATATAACTAAAAATAAAATTTCTATAATTTATCCTTTAAGG
AATTTGAATAGTGATGAGAGTTACACAAGGATGTTTTTCGTTTTTACCAGATTTAA
CTGGATGAGCAAATTA
                   SEQUENCE LISTING
<110>中国科学院海洋研究所
<120>一种鉴定不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法
<130>
<160>18
<170>PatentIn version 3.1
<210>1
<211>539
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcL
<222>(1)..(244)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(245)..(512)
<223>
<220>
<221>rbcS
<222>(513)..(539)
<223>
<400>1
tactataggt caccctgatg gtattcaatc tggtgcaaca gcaaaccgtg ttgctctaga    60
atctatggtt ctagctcgta atgaaggtcg tgattatgtt ggagaaggtc ctgaaatctt    120
acgtaatgca gcggctactt gtggtccttt aaaagcagcg ttagatttat ggaaagatat    180
tacttttgag tacacttcaa cagatacacc tgatttcgtt gaacttccaa ctgaaagcaa    240
atagtatact gaaattaaac tcataaaaga ttaagttaaa ttaattctag ttatatttaa    300
atagctagaa aatatatcta ataattttat ctactttatt atttaaagtg atattgttat    360
aaaattaaga cttaacttta aatttattat aattttagaa aaatacttaa taccccagat    420
 tattttaagt gaaagtagag agtaaataaa aattttagta tataactaaa aataaaattt    480
 ctataattta tctttaagga atttgaatag tgatgagagt tacacaagga tgtttttcg     539
<210>2
<211>579
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcL
<222>(1)..(268)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(269)..(536)
<223>
<220>
<221>rbcS
<222>(537)..(579)
<223>
<400>2
tgtggttcta caatttggtg gtggtactat tggtcaccct gatggtattc aatctggtgc    60
aacagcaaac cgtgttgctc tagaatctat ggttctagct cgtaatgaag gtcgtgatta    120
tgttggagaa ggtcctgaaa tcttacgtaa tgcagcggct acttgtggtc ctttaaaagc    180
agcgttagat ttatggaaag atattacttt tgagtacact tcaacagata cacctgattt    240
cgttgaactt ccaactgaaa gcaaatagta tactgaaatt aaactcataa aagattaagt    300
taaattaatt ctagttatat ttaaatagct agaaaatata tctaataatt ttatctactt    360
tattatttaa agtgatattg ttataaaatt aagacttaac tttaaattta ttataatttt    420
agaaaaatac ttaatacccc agattatttt aagtgaaagt agagagtaaa taaaaatttt    480
agtatataac taaaaataaa atttctataa tttatcttta aggaatttga atagtgatga    540
gagttacaca aggatgtttt tcgtttttac cagatttaa                           579
<210>3
<211>582
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcL
<222>(1)..(219)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(220)..(487)
<223>
<220>
<221>rbcS
<222>(488)..(582)
<223>
<400>3
caatctggtg caacagcaaa ccgtgttgct ctagaatcta tggttctagc tcgtaatgaa    60
ggtcgtgatt atgttggaga aggtcctgaa atcttacgta atgcagcggc tacttgtggt    120
cctttaaaag cagcgttaga tttatggaaa gatattactt ttgagtacac ttcaacagat    180
acacctgatt tcgttgaact tccaactgaa agcaaatagt atactgaaat taaactcata    240
aaagattaag ttaaattaat tctagttata tttaaatagc tagaaaatat atctaataat    300
tttatctact ttattattta aagtgatatt gttataaaat taagacttaa ctttaaattt    360
gttataattt tagaaaaata cttaataccc cagattattt taagtgaaag tagagagtaa    420
ataaaaattt tagtatataa ctaaaaataa aattcctata atttatcttt aaggaatttg    480
aatagtggat gagagttaca caaggatgtt tttcgttttt accagattta actgatgagc    540
aaattaaaaa acaagttgct tatgctatgt caaaagggtg gg                       582
<210>4
<211>638
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcl
<222>(1)..(265)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(266)..(533)
<223>
<220>
<221>rbcs
<222>(534)..(638)
<223>
<400>4
ggttctacaa tttggtggtg gtactattgg tcaccctgat ggtattcaat ctggtgcaac    60
agcaaaccgt gttgctctag aatctatggt tctagctcgt aatgaaggtc gtgattatgt    120
tggagaaggt cctgaaatct tacgtaatgc agcggctact tgtggtcctt taaaagcagc    180
gttagattta tggaaagata ttacttttga gtacacttca acagatacac ctgatttcgt    240
tgaacttcca actgaaagca aatagtatac tgaaattaaa ctcataaaag attaagttaa    300
attaattcta gttatattta aatagctaga aaatatatct aataatttta tctactttat    360
tatttaaagt gatattgtta taaaattaag acttaacttt aaatttgtta taattttaga    420
aaaatactta ataccccaga ttattttaag tgaaagtaga gagtaaataa aaattttagt    480
atataactaa aaataaaatt tctataattt atctttaagg aatttgaata gtgatgagag    540
ttacacaagg atgtttttcg tttttaccag atttaactga tgagcaaatt aaaaaacaag    600
ttgcttatgc tatgtcaaaa gggtgggctg ttagtgta                            638
<210>5
<211>609
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcl
<222>(1)..(255)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(256)..(523)
<223>
<220>
<221>rbcs
<222>(524)..(609)
<223>
<400>5
ggtgtgggta ctattggtcc accctgatgg tattcaatct gggtgcaacc agcaaaccgt    60
gttgctctag aatctatggt tctagctcgt aatgaaggtc gtgattatgt tggagaaggt    120
cctgaaatct tacgtaatgc agcggctact tgtggtcctt taaaagcagc gttagattta    180
tggaaagata ttacttttga gtacacttca acagatacac ctgatttcgt tgaacttcca    240
actgaaagca aatagtatac tgaaattaaa ctcataaaag attaagttaa attaattcta    300
gttatattta aatagctaga aaatatatct aataatttta tctactttat tatttaaagt    360
gatattgtta taaaattaag acttaacttt aaatttgtta taattttaga aaaatactta    420
ataccccaga ttattttaag tgaaagtaga gagtaaataa aaattttagt atataactaa    480
aaataaaatt tctataattt atctttaagg aatttgaata gtgatgagag ttacacaagg    540
atgtttttcg tttttaccag atttaactga tgagcaaatt aaaaaacaag ttgcttatgc    600
tatgtcaaa                                                            609
<210>6
<211>621
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcl
<222>(1)..(270)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(271)..(538)
<223>
<220>
<221>rbcS
<222>(539)..(621)
<223>
<400>6
gatgtggttc tacaatttgg tggtggtact attggtcacc ctgatggtat tcaatctggt    60
gcaacagcaa accgtgttgc tctagaatct atggttctag ctcgtaatga aggtcgtgat    120
tatgttggag aaggtcctga aatcttacgt aatgcagcgg ctacttgtgg tcctttaaaa    180
gcagcgttag atttatggaa agatattact tttgagtaca cttcaacaga tacacctgat    240
ttcgttgaac ttccaactga aagcaaatag tatactgaaa ttaaactcat aaaagattaa    300
gttaaattaa ttctagttat atttaaatag ctagaaaata tatctaataa ttttatctac    360
tttattattt aaagtgatat tgttataaaa ttaagactta actttaaatt tgttataatt    420
ttagaaaaat acttaatacc ccagattatt ttaagtgaaa gtagagagta aataaaaatt    480
ttagtatata actaaaaata aaatttctat aatttatctt taaggaattt gaatagtgat    540
gagagttaca caaggatgtt tttcgttttt accagattta actgatgagc aaattaaaaa    600
acaagttgct tatgctatgt c                                              621
<210>7
<211>674
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcL
<222>(1)..(276)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(277)..(544)
<223>
<220>
<221>rbcS
<222>(545)..(674)
<223>
<400>7
ggggatgatg tggttctaca atttggtggt ggtactattg gtcaccctga tggtattcaa    60
tctggtgcaa cagcaaaccg tgttgctcta gaatctatgg ttctagctcg taatgaaggt    120
cgtgattatg ttggagaagg tcctgaaatc ttacgtaatg cagcggctac ttgtggtcct    180
ttaaaagcag cgttagattt atggaaagat attacttttg agtacacttc aacagataca    240
cctgatttcg ttgaacttcc aactgaaagc aaatagtata ctgaaattaa actcataaaa    300
gattaagtta aattaattct agttatattt aaatagctag aaaatatatc taataatttt    360
atctacttta ttatttaaag tgatattgtt ataaaattaa gacttaactt taaatttgtt    420
ataattttag aaaaatactt aataccccag attattttaa gtgaaagtag agagtaaata    480
aaaattttag tatataacta aaaataaaat ttctataatt tatctttaag gaatttgaat    540
agtgatgaga gttacacaag gatgtttttc gtttttacca gatttaactg atgagcaaat    600
taaaaaacaa gttgcttatg ctatgtcaaa agggtgggct gttagtgtag aatggacaga    660
tgatccacat ccac                                                      674
<210>8
<211>641
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcL
<222>(1)..(275)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(276)..(543)
<223>
<220>
<221>rbcS
<222>(544)..(641)
<223>
<400>8
ggggatgatg tggtctacaa tttggtggtg gtactattgg tcaccctgat ggtattcaat    60
ctggtgcaac agcaaaccgt gttgctctag aatctatggt tctagctcgt aatgaaggtc    120
gtgattatgt tggagaaggt cctgaaatct tacgtaatgc agcggctact tgtggtcctt    180
taaaagcagc gttagattta tggaaagata ttacttttga gtacacttca acagatacac    240
ctgatttcgt tgaacttcca actgaaagca aatagtatac tgaaattaaa ctcataaaag    300
attaagttaa attaattcta gttatattta aatagctaga aaatatatct aataatttta    360
tctactttat tatttaaagt gatattgtta taaaattaag acttaacttt aaatttgtta    420
taattttaga aaaatactta ataccccaga ttattttaag tgaaagtaga gagtaaataa    480
aaattttagt atataactaa aaataaaatt tctataattt atctttaagg aatttgaata    540
gtgatgagag ttacacaagg atgtttttcg tttttaccag atttaactga tgagcaaatt    600
aaaaaacaag ttgcttatgc tatgtcaaaa gggtgggctg g                        641
<210>9
<211>675
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcL
<222>(1)..(277)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(278)..(545)
<223>
<220>
<221>rbcS
<222>(546)..(675)
<223>
<400>9
ggggatgatg tggttctaca atttggtggt ggtactattg gtcaccctgg atggtattca    60
atctggtgca acagcaaacc gtgttgctct agaatctatg gttctagctc gtaatgaagg    120
tcgtgattat gttggagaag gtcctgaaat cttacgtaat gcagcggcta cttgtggtcc    180
tttaaaagca gcgttagatt tatggaaaga tattactttt gagtacactt caacagatac    240
acctgatttc gttgaacttc caactgaaag caaatagtat actgaaatta aactcataaa    300
agattaagtt aaattaattc tagttatatt taaatagcta gaaaatatat ctaataattt    360
tatctacttt attatttaaa gtgatattgt tataaaatta agacttaact ttaaatttgt    420
tataatttta gaaaaatact taatacccca gattatttta agtgaaagta gagagtaaat    480
aaaaatttta gtatataact aaaaataaaa tttctataat ttatctttaa ggaatttgaa    540
tagtgatgag agttacacaa ggatgttttt cgtttttacc agatttaact gatgagcaaa    600
ttaaaaaaca agttgcttat gctatgtcaa aagggtgggc tgttagtgta gaatggacag    660
atgatccaca tccac                                                     675
<210>10
<211>669
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcL
<222>(1)..(276)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(277)..(544)
<223>
<220>
<221>rbcS
<222>(545)..(669)
<223>
<400>10
ggggatgatg tggttctaca atttggtggg ggtactattg gtcaccctga tggtattcaa    60
tctggtgcaa cagcaaaccg tgttgctcta gaatctatgg ttctagctcg taatgaaggt    120
cgtgattatg ttggagaagg tcctgaaatc ttacgtaatg cagcggctac ttgtggtcct    180
ttaaaagcag cgttagattt atggaaagat attacttttg agtacacttc aacagataca    240
cctgatttcg ttgaacttcc aactgaaagc aaatagtata ctgaaattaa actcataaaa    300
gattaagtta aattaattct agttatattt aaatagctag aaaatatatc taataatttt    360
atctacttta ttatttaaag tgatattgtt ataaaattaa gacttaactt taaatttgtt    420
ataattttag aaaaatactt aataccccag attattttaa gtgaaagtag agagtaaata    480
aaaattttag tatataacta aaaataaaat ttctataatt tatctttaag gaatttgaat    540
agtgatgaga gttacacaag gatgtttttc gtttttacca gatttaactg atgagcaaat    600
taaaaaacaa gttgcttatg ctatgtcaaa agggtgggct gttagtgtag gatggacaga    660
tgatccaca                                                            669
<210>11
<211>603
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcL
<222>(1)..(271)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(272)..(539)
<223>
<220>
<221>rbcS
<222>(540)..(603)
<223>
<400>11
gatgtggttc tacaatttgg tggtggtact attggtcacc ctggatggta ttcaatctgg    60
tgcaacagca aaccgtgttg ctctagaatc tatggttcta gctcgtaatg aaggtcgtga    120
ttatgttgga gaaggtcctg aaatcttacg taatgcagcg gctacttgtg gtcctttaaa    180
agcagcgtta gatttatgga aagatattac ttttgagtac acttcaacag atacacctga    240
tttcgttgaa cttccaactg aaagcaaata gtatactgaa attaaactca taaaagatta    300
agttaaatta attctagtta tatttaaata gctagaaaat atatctaata attttatcta    360
ctttattatt taaagtgata ttgttataaa attaagactt aactttaaat ttgttataat    420
tttagaaaaa tacttaatac cccagattat tttaagtgaa agtagagagt aaataaaaat    480
tttagtatat aactaaaaat aaaatttcta taatttatct ttaaggaatt tgaatagtga    540
tgagagttac acaaggatgt ttttcgtttt taccagattt aactgatgag caaattaaaa    600
aac                                                                  603
<210>12
<211>663
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcL
<222>(1)..(284)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(285)..(552)
<223>
<220>
<221>rbcS
<222>(553)..(663)
<223>
<400>12
tctatttagg ggatgatgtg gttctacaat ttggtggtgg tactattggt caccctgatg    60
gtattcaatc tggtgcaaca gcaaaccgtg ttgctctaga atctatggtt ctagctcgta    120
atgaaggtcg tgattatgtt ggagaaggtc ctgaaatctt acgtaatgca gcggctactt    180
gtggtccttt aaaagcagcg ttagatttat ggaaagatat tacttttgag tacacttcaa    240
cagatacacc tgatttcgtt gaacttccaa ctgaaagcaa atagtatact gaaattaaac    300
tcataaaaga ttaagttaaa ttaattctag ttatatttaa atagctagaa aatatatcta    360
ataattttat ctactttatt atttaaagtg atattgttat aaaattaaga cttaacttta    420
aatttgttat aattttagaa aaatacttaa taccccagat tattttaagt gaaagtagag    480
agtaaataaa aattttagta tataactaaa aataaaattt ctataattta tctttaagga    540
atttgaatag tgatgagagt tacacaagga tgtttttcgt ttttaccaga tttaactgat    600
gagcaaatta aaaaacaagt tgcttatgct atgtcaaaag ggtgggctgt tagtgtagaa    660
tgg                                                                  663
<210>13
<211>659
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcL
<222>(1)..(273)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(274)..(541)
<223>
<220>
<221>rbcS
<222>(542)..(659)
<223>
<400>13
atgatgtggt tctacaattt ggtggtggta ctattggtca ccctgaatgg tattcaatct    60
ggtgcaacag caaaccgtgt tgctctagaa tctatggttc tagctcgtaa tgaaggtcgt    120
gattatgttg gagaaggtcc tgaaatctta cgtaatgcag cggctacttg tggtccttta    180
aaagcagcgt tagatttatg gaaagatatt acttttgagt acacttcaac agatacacct    240
gatttcgttg aacttccaac tgaaagcaaa tagtatactg aaattaaact cataaaagat    300
taagttaaat taattctagt tatatttaaa tagctagaaa atatatctaa taattttatc    360
tactttatta tttaaagtga tattgttata aaattaagac ttaactttaa atttgttata    420
attttagaaa aatacttaat accccagatt attttaagtg aaagtagaga gtaaataaaa    480
attttagtat ataactaaaa ataaaatttc tataatttat ctttaaggaa tttgaatagt    540
gatgagagtt acacaaggat gtttttcgtt tttaccagat ttaactgatg agcaaattaa    600
aaaacaagtt gcttatgcta tgtcaaaagg gtgggctgtt agtgtagaat ggacagatg     659
<210>14
<211>636
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcL
<222>(1)..(246)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(247)..(514)
<223>
<220>
<221>rbcS
<222>(515)..(636)
<223>
<400>14
ggtactattg gtcaccctga tggtattcaa tctggtgcaa cagcaaaccg tgttgctcta    60
gaatctatgg ttctagctcg taatgaaggt cgtgattatg ttggagaagg tcctgaaatc    120
ttacgtaatg cagcggctac ttgtggtcct ttaaaagcag cgttagattt atggaaagat    180
attacttttg agtacacttc aacagataca cctgatttcg ttgaacttcc aactgaaagc    240
aaatagtata ctgaaattaa actcataaaa gattaagtta aattaattct agttatattt    300
aaatagctag aaaatatatc taataatttt atctacttta ttatttaaag tgatattgtt    360
ataaaattaa gacttaactt taaatttgtt ataattttag aaaaatactt aataccccag    420
attattttaa gtgaaagtag agagtaaata aaaattttag tatataacta aaaataaaat    480
ttctataatt tatctttaag gaatttgaat agtgatgaga gttacacaag gatgtttttc    540
gtttttacca gatttaactg atgagcaaat taaaaaacaa gttgcttatg ctatgtcaaa    600
agggtgggct gttagtgtag aatggacaga tgatcc                              636
<210>15
<211>624
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcL
<222>(1)..(228)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(229)..(496)
<223>
<220>
<221>rbcS
<222>(497)..(624)
<223>
<400>15
gatggtattc aatctggtgc aacagcaaac cgtgttgctc tagaatctat ggttctagct    60
cgtaatgaag gtcgtgatta tgttggagaa ggtcctgaaa tcttacgtaa tgcagcggct    120
acttgtggtc ctttaaaagc agcgttagat ttatggaaag atattacttt tgagtacact    180
tcaacagata cacctgattt cgttgaactt ccaactgaaa gcaaatagta tactgaaatt    240
aaactcataa aagattaagt taaattaatt ctagttatat ttaaatagct agaaaatata    300
tctaataatt ttatctactt tattatttaa agtgatattg ttataaaatt aagacttaac    360
tttaaatttg ttataatttt agaaaaatac ttaatacccc agattatttt aagtgaaagt    420
agagagtaaa taaaaatttt agtatataac taaaaataaa atttctataa tttatcttta    480
aggaatttga atagtgatga gagttacaca aggatgtttt tcgtttttac cagatttaac    540
tgatgagcaa attaaaaaac aagttgctta tgctatgtca aaagggtggg ctgttagtgt    600
agaatggaca gatgatccac atcc                                           624
<210>16
<211>620
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcL
<222>(1)..(252)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(253)..(520)
<223>
<220>
<221>rbcS
<222>(521)..(620)
<223>
<400>16
ggtggtggta ctattggtca ccctgatggt attcaatctg gtgcaacagc aaaccgtgtt    60
gctctagaat ctatggttct agctcgtaat gaaggtcgtg attatgttgg agaaggtcct    120
gaaatcttac gtaatgcagc ggctacttgt ggtcctttaa aagcagcgtt agatttatgg    180
aaagatatta cttttgagta cacttcaaca gatacacctg atttcgttga acttccaact    240
gaaagcaaat agtatactga aattaaactc ataaaagatt aagttaaatt aattctagtt    300
atatttaaat agctagaaaa tatatctaat aattttatct actttattat ttaaagtgat    360
attgttataa aattaagact taactttaaa tttgttataa ttttagaaaa atacttaata    420
ccccagatta ttttaagtga aagtagagag taaataaaaa ttttagtata taactaaaaa    480
taaaatttct ataatttatc tttaaggaat ttgaatagtg atgagagtta cacaaggatg    540
tttttcgttt ttaccagatt taactgatga gcaaattaaa aaacaagttg cttatgctat    600
gtcaaaaggg tgggctgtta                                                620
<210>17
<211>534
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcL
<222>(1)..(219)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(220)..(487)
<223>
<220>
<221>rbcS
<222>(488)..(534)
<223>
<400>17
caatctggtg caacagcaaa ccgtgttgct ctagaatcta tggttctagc tcgtaatgaa    60
ggtcgtgatt atgttggaga aggtcctgaa atcttacgta atgcagcggc tacttgtggt    120
cctttaaaag cagcgttaga tttatggaaa gatattactt ttgagtacac ttcaacagat    180
acacctgatt tcgttgaact tccaactgaa agcaaatagt atactgaaat taaactcata    240
aaagattaag ttaaattaat tctagttata tttaaatagc tagaaaatat atctaataat    300
tttatctact ttattattta aagtgatatt gttataaaat taagacttaa ctttaaattt    360
gttataattt tagaagaata cttaataccc cagattattt taagtgaaag tagagagtaa    420
ataacgattt tagtatataa ctaaaaataa aatttctata atttatcttt aaggaatttg    480
aatagtgatg gagagttaca caaggatgtt tttcgttttt accagattta actg          534
<210>18
<211>571
<212>DNA
<213>裙带菜(Undaria pinnatifida Harv.Suringar)
<220>
<221>rbcL
<222>(1)..(243)
<223>
<220>
<221>Rubisco
<222>(244)..(512)
<223>
<220>
<221>rbcS
<222>(513)..(571)
<223>
<400>18
actattggtc accctgatgg tattcaatct ggtgcaacag caaaccgtgt tgctctagaa    60
tctatggttc tagctcgtaa tgaaggtcgt gattatgttg gagaaggtcc tgaaatctta    120
cgtaatgcag cggctacttg tggtccttta aaagcagcgt tagatttatg gaaagatatt    180
acttttgagt acacttcaac agatacacct gatttcgttg aacttccaac tgaaagcaaa    240
tagtatactg aaattaaact cataaaagat taagttaaat taattctagt tatatttaaa    300
tagctagaaa atatatctaa taattttatc tactttatta tttaaagtga tattgttata    360
aaattaagac ttaactttaa atttgttata attttagaaa aatacttaat agcccagatt    420
attttaagtg aaagtagaga gtaaataaaa attttagtat ataactaaaa ataaaatttc    480
tataatttat cctttaagga atttgaatag tgatgagagt tacacaagga tgtttttcgt    540
ttttaccaga tttaactgga tgagcaaatt a                                   571

Claims (6)

1.一种鉴定不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法，其特征在于：利用海藻裙带菜配子体Rubisco基因及两侧大小亚基部分的DNA序列对不同来源的裙带菜配子体进行鉴定。
2.按照权利要求1所述的鉴定不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法，其特征在于：
1)提取需要鉴定的海藻裙带菜总DNA；
2)利用特异引物P1和P4的序列对总DNA进行Rubisco基因及其两侧大小亚基PCR扩增反应，
P1和P4的序列分别为：正向P1为5’GCCAAATGCACCAACTTCTT3’，位于rbcL上，反向P4为5’AGACCCCATAATTCCC 3’，位于rbcS上；
3)对PCR产物进行纯化；
4)对纯化后的PCR产物进行测序；
5)对获得的DNA序列进行数据分析：用对位排列软件Clustal W和Genedoc进行对位排列，并辅以人工校对，用系统进化分析软件MEGA2.1和PHYLIP 3.57分别分析各样品DNA序列与数据库中各个序列间的差异，进行亲缘和进化关系分析。
3.按照权利要求2所述的鉴定不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法，其特征在于：用于Rubisco基因及其两侧大小亚基扩增的反应液20μL中含10mmol/L Tris-HCl，pH 8.3，50mmol/L KCl，1.5mmol/LMgCl2，Taq polymerase 1U，4种dNTP各2mmol/L，两个引物各4-6mmol/L，DNA模板40-70ng。
4.按照权利要求2所述的鉴定不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法，其特征在于：用于Rubisco基因及其两侧大小亚基扩增反应循环参数为：96℃预变性3分钟；94℃2分钟，53-57℃10秒钟，72℃1分钟；2个循环；94℃10秒钟，53-57℃10秒钟，72℃2分钟，33-38个循环；72℃延伸5分钟。
5.按照权利要求2所述的鉴定不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法，其特征在于：用于Rubisco基因及其两侧大小亚基扩增后测序所设计的引物为：
P1：5’GCCAAATGCACCAACTTCTT3’，P4：5’AGACCCCATAATTCCC3’。
6.按照权利要求2所述的鉴定不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法，其特征在于：用P1和P4进行裙带菜配子体Rubisco基因扩增后，获得的序列长度在534-675bp之间，其中Rubisco基因序列长度为268bp。
CNB2004101004646A 2004-12-24 2004-12-24 一种鉴定不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法 Expired - Fee Related CN100471959C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2004101004646A CN100471959C (zh) 2004-12-24 2004-12-24 一种鉴定不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2004101004646A CN100471959C (zh) 2004-12-24 2004-12-24 一种鉴定不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1796574A true CN1796574A (zh) 2006-07-05
CN100471959C CN100471959C (zh) 2009-03-25

Family

ID=36817889

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB2004101004646A Expired - Fee Related CN100471959C (zh) 2004-12-24 2004-12-24 一种鉴定不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN100471959C (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103305620A (zh) * 2013-06-26 2013-09-18 中国科学院植物研究所 用于进行陆地植物物种鉴定的基于rbcL基因的特异引物对及其应用
CN106021976A (zh) * 2016-06-23 2016-10-12 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所 一种检测柽柳科植物rbcL基因适应性进化与结构建模的方法
CN110747216A (zh) * 2019-11-07 2020-02-04 中国科学院遗传与发育生物学研究所 一种多基因共表达成套载体及其应用

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103305620A (zh) * 2013-06-26 2013-09-18 中国科学院植物研究所 用于进行陆地植物物种鉴定的基于rbcL基因的特异引物对及其应用
CN103305620B (zh) * 2013-06-26 2014-12-31 中国科学院植物研究所 用于进行陆地植物物种鉴定的基于rbcL基因的特异引物对及其应用
CN106021976A (zh) * 2016-06-23 2016-10-12 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所 一种检测柽柳科植物rbcL基因适应性进化与结构建模的方法
CN110747216A (zh) * 2019-11-07 2020-02-04 中国科学院遗传与发育生物学研究所 一种多基因共表达成套载体及其应用
WO2021088943A1 (zh) * 2019-11-07 2021-05-14 中国科学院遗传与发育生物学研究所 一种多基因共表达成套载体及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN100471959C (zh) 2009-03-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1260363C (zh) 由腈化合物生产酰胺的方法
CN1156587C (zh) 中国石斛属植物及其药材的dna分子鉴定方法
CN1151252C (zh) 生产微生物转谷氨酰胺酶的方法
CN1622998A (zh) 丝状真菌来源的赖氨酰氧化酶
CN101074435A (zh) α－半乳糖苷酶基因、其编码蛋白及其制备方法和应用
CN1524127A (zh) 核苷酸多态性的检测方法
CN101037699A (zh) 3－磷酸甘油脱氢酶基因及其用途
CN1582335A (zh) 水稻转座子基因
CN1840696A (zh) 水稻广谱抗稻瘟病基因的分子鉴别及转育技术
CN1313491C (zh) 猫ω干扰素及其编码基因与应用
CN1796574A (zh) 一种鉴定不同养殖海区的经济海藻裙带菜配子体的方法
CN1778930A (zh) 激发机体抗鸡球虫感染的融合基因及其编码蛋白与应用
CN1216989C (zh) 一种新的青霉素g酰化酶及其应用
CN1875095A (zh) 重组微生物
CN1756841A (zh) 来自于曲霉菌的磷脂酶a2
CN1840664A (zh) 受高盐诱导的盐藻基因片段和钠／磷共转运通道基因
CN1891718A (zh) 融合免疫毒素ml－l－sec2和基因及其制备
CN1763086A (zh) 一个新的控制真菌菌落生长与致病力的ank蛋白及其编码基因与利用
CN1606622A (zh) 通过全面检测和定量食物中毒细菌的热稳定直接溶血素相关的基因 ( t d h ) 相关溶血素基因)对产溶血素细菌进行检测和定量的方法
CN1211484C (zh) 提高基因表达水平的dna片段
CN1869232A (zh) 一种水稻杂种育性基因及其应用
CN1769436A (zh) 南京椴3－羟基－3－甲基戊二酰辅酶a还原酶蛋白编码序列
CN1174093C (zh) 有耐低温丙酮酸磷酸双激酶活性的多肽及相应dna、重组载体和转型植物细胞
CN1252270C (zh) 红豆杉3－羟基－3－甲基戊二酰辅酶a合成酶蛋白编码序列
CN1614031A (zh) 经济海藻紫菜种质资源鉴定的方法及部分dna序列

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C17 Cessation of patent right
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20090325

Termination date: 20111224