CN1771058B - 制备放射性标记的镓络合物的微波方法 - Google Patents

制备放射性标记的镓络合物的微波方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及产生放射性标记的镓络合物的方法，该络合物可用作诊断药剂，例如用于正电子发射断层(PET)成像。

Description

制备放射性标记的镓络合物的微波方法
本发明涉及产生放射性标记的镓络合物的方法。该络合物可用作诊断药剂，例如用于正电子发射断层(PET)成像。
PET成像是使用能发射正电子的放射性示踪分子的断层核成像技术。当正电子遇到电子时，两者被湮灭，结果是以λ射线形式释放能量，这被PET扫描器检测到。通过使用被身体用作示踪分子的天然物质，PET不仅提供关于身体中结构的信息，而且提供关于身体或其中某些部位的生理机能的信息。常见的示踪分子为例如加入18F原子的2-氟-2-脱氧-D-葡萄糖(FDG)，2-氟-2-脱氧-D-葡萄糖类似于天然存在的葡萄糖。由所述发射正电子的氟产生的λ辐射被PET扫描器检测，并显示FDG在身体某些部位或组织中例如在脑或心脏中的新陈代谢。示踪分子的选择取决于被扫描的目标。通常，选择能在所感兴趣的部位中积聚或被特定类型的组织例如癌细胞选择性吸收的示踪剂。扫描由放射性示踪分子进入所关心的生物化学过程的间隔后得到的动态序列或静态图像组成。扫描器检测示踪分子的空间和时间分布。PET还为允许测量放射性示踪分子的区域浓度的定量成像方法。
PET示踪剂中常用的放射性核素为11C、18F、15O、13N或76Br。最近，生产了基于放射性标记的金属络合物的新型PET示踪剂，其中该金属络合物包括双官能螯合剂和放射金属(radio metal)。双官能螯合剂为与金属离子配位并连接到靶载体(targeting vector)的螯合剂，其中该靶载体将结合到患者身体中的靶位上。这种靶载体可为结合到特定受体的肽，可能与身体中的特定部位或与特定疾病有关。靶载体还可为对例如活性致癌基因有特异性并因此瞄准肿瘤位置的低聚核苷酸。这种络合物的优势在于双官能螯合剂可用各种放射金属例如68Ga、213Bi或86Y标记。按照这种方式，具有特殊性能的放射性标记的络合物可被“训练”用于某些应用。
68Ga对产生用作PET成像中示踪分子的Ga放射性标记金属络合物特别有用。从68Ge/68Ga产生器得到68Ga，这意味着不需要回旋加速器。68Ga因2.92MeV的正电子发射而衰减至89％，它的68分钟半衰期足以追踪体内的多种生物化学过程而没有多余辐射。利用它的+III氧化态，68Ga与各种螯合剂形成稳定的络合物，68Ga示踪剂已用于脑、肾、骨、血库、肺和肿瘤成像。
J.Schumacher等人在Cancer Res.61，2001，3712-3717中描述了68Ga-N，N’[2-羟基-5-(乙烯基-β-羧基)苄基]乙二胺-N，N’-二乙酸(68Ga-HBED-CC)的合成。从68Ge/68Ga产生器得到的68Ga和Ga3+载体与螯合剂HBED-CC在醋酸盐缓冲液中在95℃下反应15分钟。使用阳离子交换柱从络合物中分离未络合的68Ga。完全的制备被报道需要70分钟。这种方法的缺点在于放射性标记的络合物的总制备时间非常长。由于加入“冷”Ga3+载体，反应的比放射性(specific activity)低。此外，在络合物形成反应后必须纯化放射性标记的络合物。
WO-A-99/56791公开了从68Ge/68Ga产生器得到的68GaCl3与四配位胺连三硫酸盐螯合剂三(2-巯基苄基)胺(S3N)的反应。在室温下进行络合物形成10分钟。所述方法的缺点在于在它可用于体内研究前必须通过液相色谱法纯化放射性标记的络合物。该方法的另一个缺点在于相对长的反应时间。
Ugur等人在Nucl.Med.Biol.29，2002，147-157中描述了68Ga标记的生长激素抑制素类似物DOTA-DPhe1-Tyr3-奥曲肽(DOTATOC)的合成。通过使从68Ge/68Ga产生器得到的68GaCl3与螯合剂DOTATOC在100℃下反应15分钟制备化合物。这种方法的缺点在于不得不在较高的温度下加热反应混合物。DOTA螯合剂用肽靶载体官能化，而肽和蛋白质为已知对热敏感的物质。因此，对于所述方法，存在热敏靶载体在络合物形成过程中被破坏的风险。另一个缺点在于在它可用于动物研究前必须通过HPLC纯化络合物。
US-A-5070346公开了螯合剂四乙基环己基-双-氨基乙硫醇(BAT-TECH)的68Ga标记的络合物。该络合物通过使从68Ge/68Ga产生器得到的68GaCl3与BAT-TECH在75℃下反应15分钟然后过滤来合成。该络合物的制备在40分钟内完成。由于高的反应温度，这种方法将不适用于包含热敏靶载体例如肽或蛋白质的双官能螯合剂。另一个缺点为络合物形成反应的长反应时间。
鉴于68Ga的相对短半衰期，需要合成68Ga标记的络合物的快速方法，该络合物可用作PET成像的示踪分子。
目前发现使用微波活化能大大提高68Ga-螯合剂络合物形成的效率和再现性。由于微波活化，可大大缩短化学反应时间；即反应在2分钟或更少内完成。这是明显的提高，因为反应时间不足10分钟节约约10％的68Ga放射性。此外，微波活化还导致更少的副反应和提高的放射化学产率，这是由于选择性提高造成的。通过回旋加速器或从产生器得到的66Ga3+、67Ga3+和68Ga3+放射性同位素的溶液包含所谓的假载体，即其它金属阳离子，例如Fe3+、Al3+、Cu2+、Zn2+和In3+。由于这些假载体在络合物形成反应中与Ga3+竞争，因此提高放射性标记反应的选择性是重要的。因此，微波活化对用全部Ga放射性同位素即用66Ga、67Ga和68Ga的放射性标记有正面作用。
微波活化已用于利用18F的亲核芳族放射性氟化中，并发现在较短反应时间内能得到与为热处理报道的那些相当或更好的产率(S.Stone-Elander等人，Appl.Rad.Isotopes 44(5)，1993，889-893)。但是，还没有描述在Ga-放射性标记反应中使用微波活化。
因此，本发明提供通过使Ga3+放射性同位素与螯合剂反应产生放射性标记的镓络合物的方法，特征在于使用微波活化进行反应。
根据本发明的合适Ga3+放射性同位素为66Ga3+、67Ga3+和68Ga3+，优选66Ga3+和68Ga3+，尤其优选68Ga3+。66Ga3+和68Ga3+尤其适合于生产PET成像中使用的放射性标记络合物，而67Ga3+尤其适合于生产单光子发射计算机断层扫描(SPECT)中使用的放射性标记的络合物。
66Ga3+可通过元素锌靶的辐射利用回旋加速器生产得到。为了使67Ga产生量最小，优选保持靶厚度使得下降的质子能量超过8MeV，并保持辐射时间短，例如＜4小时。可利用使用异丙醚和HCl的溶剂-溶剂萃取技术实现化学分离，如L.C.Brown在Int.J.Appl.Radiat.Isot.22，1971，710-713中所述。66Ga具有9.5小时的较长半衰期，发射的最大量正电子具有4.2MeV高能量。
67Ga3+可通过回旋加速器生产得到，通过回旋加速器生产得到的67GaCl3为市售化合物。67Ga的半衰期为78小时。
68Ga可从68Ge/68Ga产生器得到。这种产生器在本领域中是已知的，并例如由C.Loc’h等人在J.Nucl.Med.21，1980，171-173中描述。通常，68Ge被装载到由有机树脂或无机金属氧化物如二氧化锡、二氧化铝或二氧化钛组成的柱上。用HCl水溶液从柱中洗脱68Ga，产生68GaCl3。在根据本发明的方法中尤其优选68Ga3+，因为它的生产不需要回旋加速器，并且它的68min半衰期足以通过PET成像追踪体内多种生物化学过程而不用长期辐射。
用于本发明方法的优选螯合剂为能提供生理学容许形式的Ga3+放射性同位素的那些。其它优选的螯合剂为能与Ga3+放射性同位素形成络合物的那些，其中Ga3+放射性同位素在使用放射性标记的络合物的诊断观察需要的时间中是稳定的。
合适的螯合剂为例如聚氨基多酸螯合剂，如DTPA、EDTA、DTPA-BMA、DOA3、DOTA、HP-DOA3、TMT或DPDP。这些螯合剂被熟知用于放射性药物和放射性诊断。它们的用途和合成描述在例如以下中：US-A-4647447、US-A-5362475、US-A-5534241、US-A-5358704、US-A-5198208、US-A-4963344、EP-A-230893、EP-A-130934、EP-A-606683、EP-A-438206、EP-A-434345、WO-A-97/00087、WO-A-96/40274、WO-A-96/30377、WO-A-96/28420、WO-A-96/16678、WO-A-96/11023、WO-A-95/32741、WO-A-95/27705、WO-A-95/26754、WO-A-95/28967、WO-A-95/28392、WO-A-95/24225、WO-A-95/17920、WO-A-95/15319、WO-A-95/09848、WO-A-94/27644、WO-A-94/22368、WO-A-94/08624、WO-A-93/16375、WO-A-93/06868、WO-A-92/11232、WO-A-92/09884、WO-A-92/08707、WO-A-91/15467、WO-A-91/10669、WO-A-91/10645、WO-A-91/07191、WO-A-91/05762、WO-A-90/12050、WO-A-90/03804、WO-A-89/00052、WO-A-89/00557、WO-A-88/01178、WO-A-86/02841和WO-A-86/02005。
合适的螯合剂包括大环螯合剂，例如如Zhang等人在Inorg.Chem.37(5)，1998，956-963中描述的卟啉类分子和五氮杂大环、酞菁、冠醚，例如氮冠醚如sepulchrates、穴状化合物等，氯化血红素(原卟啉IX氯化物)、亚铁原卟啉和正方平面对称的螯合剂。
在本发明的方法中优选使用大环螯合剂。在优选的实施方案中，这些大环螯合剂如在多氮杂-和多氧大环中包含至少一种硬供体原子如氧和/或氮。多氮杂大环螯合剂的优选例子包括DOTA、TRITA、TETA和HETA，DOTA是尤其优选的。
尤其优选的大环螯合剂包含官能团如羧基或胺基，它们对配位到Ga3+不是必需的，因此可用于偶合其它分子如靶载体到螯合剂上。包含官能团的这种大环螯合剂的例子为DOTA、TRITA或HETA。
在进一步优选的实施方案中，在根据本发明的方法中使用双官能螯合剂。本发明范围内的“双官能螯合剂”是指连接到靶载体的螯合剂。本发明方法中使用的双官能螯合剂用合适靶载体为结合到患者体中靶位的化学或生物部分，当包括所述靶载体的放射性标记的镓络合物被给药于患者身体时。本发明方法中使用的双官能螯合剂用合适靶载体为蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、多肽如抗体或抗体片段、糖多肽、脂多肽、肽、类RGD结合肽、糖肽、脂肽、糖类、核酸例如DNA、RNA、低聚核苷酸如抗敏低聚核苷酸或上述化合物的部分、片段、衍生物或络合物，或任何其它感兴趣的化合物，如较小的有机分子，尤其是小于2000Da的小有机分子。
在尤其优选的实施方案中，在根据本发明的方法中使用大环双官能螯合剂。优选的大环双官能螯合剂包括连接到靶载体的DOTA、TRITA或HETA，优选连接到选自以下的靶载体：蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、多肽、糖多肽、脂多肽、肽、糖肽、脂肽、糖类、核酸、低聚核苷酸或上述化合物的部分、片段、衍生物或络合物，和小有机分子；尤其优选连接到选自肽和低聚核苷酸的靶载体上。
靶载体可通过连接基或通过间隔基分子连接到螯合剂上。连接基的例子为二硫化物、酯或酰胺，间隔基分子的例子为链状分子，例如细胞溶素或己胺或短肽基间隔基。在优选的实施方案中，靶载体和放射性标记镓络合物的螯合剂部分之间的键使得靶载体可与身体中它的靶相互作用，不因为放射性标记的镓络合物的存在而被封锁或阻止。
通过使用微波炉优选通过使用单峰(monomodal)微波炉适当地进行根据本发明的微波活化。合适地，在80-120W下，优选在90-110W下，尤其优选在约100W下进行微波活化。合适的微波活化时间从20s到2min，优选从30s到90s，尤其优选从45s到60s。
当在根据本发明的方法中使用温度敏感型螯合剂，象例如包括肽或蛋白质作为靶载体的双官能螯合剂时，建议对反应进行温度控制。应这样调整微波活化的持续时间，即反应混合物的温度不会引起螯合剂和/或靶载体的分解。如果根据本发明的方法中使用的螯合剂包含肽或蛋白质，则应用较短时间的较高温度比应用较长时间的较低温度通常更有利。
在反应过程中，可连续或在几次微波活化循环中进行微波活化。
在优选的实施方案中，本发明提供通过使68Ga3+与包含硬供体原子的大环双官能螯合剂反应生产68Ga放射性标记的PET成像示踪剂的方法，特征在于使用微波活化进行反应。
在上一段中所述方法的尤其优选的实施方案中，在90-110W下进行微波活化30s-90s。
如果在根据本发明的方法中使用68Ga3+，则优选通过使来自68Ge/68Ga产生器的洗出液与阴离子交换剂接触并从所述阴离子交换剂中洗脱68Ga3+得到68Ga3+。在优选的实施方案中，阴离子交换剂为包含HCO3 -作为平衡离子的阴离子交换剂。
使用阴离子交换剂处理从68Ge/68Ga产生器得到的68Ga洗出液由J.Schuhmacher等人描述在Int.J.appl.Radiat.Isotopes 32，1981，31-36中。使用Bio-Rad AG 1×8阴离子交换剂处理从68Ge/68Ga产生器得到的4.5N HCl68Ga洗出液，以便降低洗出液中存在的68Ge量。
现在发现使用包含HCO3 -作为平衡离子的阴离子交换剂尤其适合于纯化和浓缩产生器洗出液。不仅洗出液中存在的68Ge量可被减少，而且所谓的假载体即与68Ga3+一起从产生器被洗脱的其它金属离子如Fe3+、Al3+、Cu2+、Zn2+和In3+的量也被降低。由于这些假载体在随后的络合物形成反应中与68Ga3+竞争，因此在标记反应前尽可能地减少这些阳离子的量是尤其有利的。阴离子交换纯化步骤的另一个优点在于，洗脱后在皮体积摩尔到纳体积摩尔的范围内的68Ga3+浓度可被增加达到纳体积摩尔到微体积摩尔水平。因此，可在随后的络合物形成反应中减少螯合剂的数量，这大大增加了比放射性。这种结果对生产包含双官能螯合剂即与靶载体连接的螯合剂的68Ga放射性标记PET示踪剂是重要的，因为比放射性的增加能降低这种示踪剂在患者中的使用量。
因此，根据本发明的方法的另一优选实施方案为通过使用微波活化使68Ga3+与螯合剂反应生产68Ga放射性标记的络合物的方法，其中通过使来自68Ge/68Ga产生器的洗出液与阴离子交换剂优选包含HCO3 -作为平衡离子的阴离子交换剂接触并从所述阴离子交换剂中洗脱68Ga3+得到68Ga3+。
68Ge/68Ga产生器在本领域中是已知的，参见例如C.Loc’h等人，J.Nucl.Med.21，1980，171-173或J.Schuhmacher等人，Int.J.appl.Radiat.Isotopes 32，1981，31-36。68Ge可利用回旋加速器通过例如具有20MeV质子的Ga2(SO4)3的辐射得到。它也可在商业上得到，例如在0.5M HCl中的68Ge。通常，68Ge被装载到由有机树脂或无机金属氧化物如二氧化锡、二氧化铝或二氧化钛组成的柱上。用HCl水溶液从柱中洗脱68Ga产生68GaCl3。
68Ge/68Ga产生器的合适柱由无机氧化物如二氧化铝、二氧化钛或二氧化锡或有机树脂如包含酚式羟基(US-A-4264468)或连苯三酚(J.Schuhmacher等人，Int.J.appl.Radiat.Isotopes 32，1981，31-36)的树脂组成。在优选的实施方案中，包括包含二氧化钛的柱的68Ge/68Ga产生器用于根据本发明的方法中。
用于从68Ge/68Ga产生器柱洗脱68Ga的HCl水溶液的浓度取决于柱材料。合适地，0.05-5M HCl用于68Ga的洗脱。在优选的实施方案中，从包括包含二氧化钛的柱的68Ge/68Ga产生器得到洗出液，使用0.05-0.1M HCl、优选约0.1M HCl洗脱68Ga。
在根据本发明的方法的优选实施方案中，使用包含HCO3 -作为平衡离子的强阴离子交换剂，优选包含HCO3 -作为平衡离子的强阴离子交换剂。在进一步优选的实施方案中，这种阴离子交换剂包含季胺官能基团。在另一优选的实施方案中，这种阴离子交换剂为基于聚苯乙烯-二乙烯基苯的强阴离子交换树脂。在一种特别优选的实施方案中，根据本发明的方法中使用的阴离子交换剂为包含HCO3 -作为平衡离子、季胺官能基团的强阴离子交换树脂，并且该树脂基于聚苯乙烯-二乙烯基苯。
合适地，在根据本发明的方法中，使用水从阴离子交换剂中洗脱68Ga。
实施例
实施例1：
使用常规加热和微波活化的DOTA-D-Phe1-Tyr3-奥曲肽(DOTA-TOC)的68Ga-放射性标记比较
1a)使用常规加热的DOTA-TOC的68Ga-放射性标记
向来自68Ge/68Ga产生器的洗出液(36mg-1mL)中加入醋酸钠调整洗出液的pH为大约5.5，并充分旋流混合物。加入DOTA-TOC(20nmol)，在96℃下加热混合物25min。冷却反应混合物至室温，并施加到C-18 SPE柱(HyperSEP S C18)上，然后用2mL H2O洗涤，用乙醇∶水＝50∶50(1mL)洗脱产物。
使用Vydac RP和Fast Desalting HR 10/10FPLC凝胶过滤柱通过HPLC分析反应混合物和产物。
分析放射化学产率(RCY)为67％。
离析(isolated)RCY为34％。
在Fisons Platform(Micromass，Manchester，UK)上进行电喷涂电离质谱分析、ESI-MS，使用正模式(positive mode)扫描和检测[M+2H]2+。在m/z＝711.26处检测到DOTATOC，在m/z＝746.0(计算m/z＝746.5)处检测到可信(authentic)Ga-DOTATOC。
1b)使用微波活化的DOTA-TOC的68Ga-放射性标记
按1a)所述同样制备反应混合物，并转移到Pyrex玻璃瓶中，在100W下微波活化1分钟。冷却反应混合物至室温，并施加到C-18SPE柱(HyperSEP S C18)上，然后用2mL H2O洗涤，用乙醇∶水＝50∶50(1mL)洗脱产物。
使用Vydac RP和Fast Desalting HR 10/10FPLC凝胶过滤柱通过HPLC分析反应混合物和产物。
分析RCY超过98％。
离析RCY为70％。
在Fisons Platform(Micromass，Manchester，UK)上进行电喷涂电离质谱分析、ESI-MS，使用正模式扫描和检测[M+2H]2+。在m/z＝711.26处检测到DOTATOC，在m/z＝746.0(计算m/z＝746.5)处检测到可信Ga-DOTATOC。
1c)比较结果
在微波活化的情况下，放射性材料的量和产物比放射性提高21％。与利用常规加热得到的结果相比，密析放射化学产率增加2倍。由于微波活化时反应混合物的放射化学产率超过98％，因此进一步纯化将不再需要，粗的反应混合物可用于体内应用。
实施例2：
连接到低聚核苷酸的DOTA的68Ga放射性标记
在第一步中，对活化的人K-ras致癌基因有特异性的四种不同抗敏低聚核苷酸被连接到DOTA：
在5’端处具有己基氨基接头的17-聚体磷酸二酯低聚核苷酸；
在3’端处具有己基氨基接头的17-聚体磷酸二酯低聚核苷酸；
在5’端处具有己基氨基接头的17-聚体硫代磷酸酯低聚核苷酸；和
在5’端处具有己基氨基连接的2’-O-甲基磷酸二酯。
2a)DOTA到低聚核苷酸的结合
向在H2O(250μl)中的EDC(13mg，68μmol)中加入在H2O(250μl)中的DOTA(32mg，66μmol)和磺基-NHS(14mg，65μmol)，在冰上搅拌30分钟，然后升温至室温得到DOTA-磺基-NHS。向在1M碳酸盐缓冲液(pH 9)中的低聚核苷酸(70-450nmol)中滴加过量100倍的DOTA-NHS溶液，然后在冰上冷却。将该混合物在室温下放置10小时。首先通过有NAP 5柱的凝胶过滤纯化反应混合物，用H2O洗脱，并向1mL产物洗出液中加入100μl的1M TEAA(醋酸三乙铵缓冲液)。然后将产物洗出液施加到C-18SPE柱(Supelco)上，用50mM TEAA(5mL)、含5％乙腈的50mM TEAA(3mL)洗涤柱，并用水∶乙腈＝50∶50(1mL)洗脱DOTA-低聚核苷酸。使用真空离心机干燥水-乙腈馏分。利用电喷涂电离质谱分析分析产物。直接注入后的负模式分析产生以下数据：1.DOTA-磷酸二酯：MS(ESI-)m/z：662.27[M-8H]8-；756.36[M-7H]7-；882.91[M-6H]6-。数据的重建得到M＝5303.71；2.DOTA-硫代磷酸酯：MS(ESI-)m/z：656.58[M-8H]9-；738.56[M-7H]8-。数据的重建得到M＝5917.35；3.DOTA-2’-O-甲基磷酸二酯：MS(ESI-)m/z：674.02[M-6H]9-；770.19[M-8H]8-；885.00[M-7H]7-。数据的重建得到M＝6148.84。
2b)68Ga-放射性标记
向来自68Ge/68Ga产生器的洗出液(36mg-1mL)中加入醋酸钠调整洗出液的pH为大约5.5，并充分旋流混合物。加入DOTA-低聚核苷酸(10-100nmol)，并转移该混合物到Pyrex玻璃瓶中，在100W下微波活化1分钟。冷却反应混合物至室温，然后加入1mL在H2O中的150mMTEAA。将混合物施加到C-18SPE柱(Supelco)上，然后用50mM TEAA(1mL)、含5％乙腈的50mMTEAA(1mL)洗涤。用乙醇∶水＝50∶50(1mL)或水∶乙腈＝50∶50(1mL)洗脱产物。使用Vydac RP和Fast DesaltingHR 10/10FPLC凝胶过滤柱通过HPLC分析反应混合物。分析RCY范围从50％到70％，密析RCY范围从30-52％。较大量的较强洗脱剂可提高密析RCY。
实施例3：
连接到肽的DOTA的68Ga放射性标记
在第一步中，四种不同的肽被连接到DOTA上：
·血管活性肠肽(VIP)；28个氨基酸残基；
·神经肽Y片段18-36(NPY)；19个氨基酸残基；
·胰抑制素片段37-52(P)；16个氨基酸残基；和
·血管紧张素II(A)；8个氨基酸残基。
3a)DOTA到肽的结合
使用肽(0.5-3μmol)代替低聚核苷酸按2a)中所述进行结合。
使用Vydac RP和Fast DesaltingHR 10/10FPLC凝胶过滤柱通过HPLC分析反应混合物和产物。在Fisons Platform(Micromass，Manchester，UK)上进行电喷涂电离质谱分析、ESI-MS，使用正模式扫描和检测[M+2H]2+、[M+4H]4+和[M+5H]5+。在m/z＝832.07[M+4H]4+处检测到VIP。在m/z＝1025.00[M+4H]4+处检测到(DOTA)2-VIP。在m/z＝1122.0[M+4H]4+处检测到(DOTA)3-VIP。在m/z＝1218.00[M+4H]4+处检测到(DOTA)4-VIP。在m/z＝819.31[M+3H]3+处检测到NPY。在m/z＝948.18[M+3H]3+处检测到DOTA-NPY。在m/z＝909.55[M+2H]2+处检测到P。在m/z＝1103.02[M+2H]2+处检测到DOTA-P。在m/z＝524.1[M+2H]2+处检测到A，和在m/z＝717.20[M+2H]2+处检测到DOTA-A。
3b)68Ga-放射性标记
使用10-20nmol的DOTA-肽按2b)中所述进行68Ga-放射性标记。
使用Vydac RP和Fast Desalting HR 10/10FPLC凝胶过滤柱通过HPLC分析反应混合物。分析RCY范围从80％到90％，密析RCY范围从60-70％。较大量的较强洗脱剂可提高密析RCY。

Claims (19)

1.通过使Ga3+放射性同位素与大环双官能螯合剂反应产生放射性标记的镓络合物的方法，特征在于使用20s-2min的微波活化进行反应，其中在80-120W下进行微波活化。
2.根据权利要求1的方法，其中Ga3+放射性同位素选自66Ga3+、67Ga3+和68Ga3+。
3.根据权利要求1或2的方法，其中Ga3+放射性同位素为68Ga3+。
4.根据权利要求1-3任何一项的方法，其中螯合剂包含硬供体原子。
5.根据权利要求4的方法，其中所述硬供体原子选自O和N原子。
6.根据权利要求1-5任何一项的方法，其中螯合剂为包含靶载体的双官能螯合剂，靶载体选自蛋白质、肽、糖类和核酸。
7.根据权利要求6的方法，其中靶载体为肽或低聚核苷酸。
8.根据权利要求6的方法，其中蛋白质为糖蛋白或脂蛋白。
9.根据权利要求6的方法，其中肽为多肽。
10.根据权利要求9的方法，其中多肽为糖多肽或脂多肽。
11.根据权利要求6的方法，其中肽为糖肽或脂肽。
12.根据权利要求6的方法，其中靶载体为低聚核苷酸。
13.根据权利要求1的方法，其中在90-110W下进行微波活化。
14.根据权利要求1-13任何一项的方法，其中进行微波活化30s-90s。
15.根据权利要求3-14任何一项的方法，其中通过使来自68Ge/68Ga产生器的洗出液与阴离子交换剂接触，并从所述阴离子交换剂中洗脱68Ga3+得到68Ga3+。
16.根据权利要求15的方法，其中68Ge/68Ga产生器包括包含二氧化钛的柱。
17.根据权利要求15-16任何一项的方法，其中阴离子交换剂包含HCO3 -作为平衡离子。
18.根据权利要求15-17任何一项的方法，其中阴离子交换剂为强阴离子交换剂。
19.根据权利要求1-18任何一项的方法，其用于生产68Ga放射性标记的正电子发射断层示踪剂。
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