CN1745725A - 全人工培育斑节对虾亲体的方法 - Google Patents

Abstract

一种全人工培育斑节对虾亲体的方法：挑选的亲虾经促熟饲料添加剂强化培育，所产受精卵经人工培育成苗种；选健康苗种在养成池养殖90～120天，选体长11.5cm以上、体重20g以上雄虾，体长12.5cm、体重25g以上雌虾作为种虾；放入种虾养殖池养殖120～150天，在达到240～300日龄的大虾中，挑选体长13.5cm以上、体重35g以上雄虾，及体长17.5cm、体重80g以上雌虾作为后备亲虾；放入后备亲虾养殖池，养殖60～120天，在日龄300天以上者中选外观健康，器官完整、无伤口，雌虾已交配，雄虾精荚饱满的亲体；用PCR检测技术，挑选出未携带WSSV和MBV病毒的斑节对虾作为全人工育苗的亲体。本发明培育出的斑节对虾亲体催产后成熟比例达50％－86％。

Description

全人工培育斑节对虾亲体的方法

技术领域

本发明涉及一种全人工培育斑节对虾亲体的方法，适用于从池塘养殖的斑节对虾中挑选用于全人工育苗的亲体。

背景技术

虾类养殖是我国乃至全世界水产养殖业的支柱产业。斑节对虾(Penaeus monodon)是我国三大主要养殖对虾种类之一。目前，斑节对虾的苗种生产所需要的成熟亲体主要依靠捕捞从天然群体中获得。但是，由于野生斑节对虾资源量的变化，人们无法依靠捕捞来保证斑节对虾亲体的稳定供应和按时、按需供应；同时，由于白斑综合症病毒(White Spot SyndromeVirus，简称WSSV)的传播，野生斑节对虾及环境中的WSSV自然宿主中携带白斑综合症病毒的比例很高，难以保证野生斑节对虾亲体的质量；另外，如果不能人工培育斑节对虾亲体，就无法开展斑节对虾的良种培育。

我国在其它对虾种类如中国对虾(Penaeus orientalis Kishinoye)、近几年引进的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei Boone)早已突破全人工繁殖，并在家系建立和品种选育上取得一定进展，而国外通过选育获得的凡纳滨对虾优良品种早已经进入商业推广应用阶段。我国及其它一些国家(如菲律宾、泰国、澳大利亚等)早在上世纪八十年代就开始进行斑节对虾全人工繁殖及育苗的研究，虽然取得全人工繁殖的突破，但由于缺乏对斑节对虾性成熟规律及其繁殖机理的深入研究，远未能达到大规模生产应用，更谈不上对其家系建立和品种选育。

斑节对虾自然繁殖水域属于温暖海域，繁殖季节很长，虽然每年也有两次相对集中的长达几个月的繁殖期，但是几乎全年均有斑节对虾产卵，造成自然种群对虾的月龄结构复杂，使整个种群具有产卵期不集中的特性。因此，人们至今未弄清斑节对虾性腺成熟所需要的最小月龄和成熟应达到的最小规格(体重和体长)。采用人工养殖方法培育斑节对虾亲体时，由于不知道养殖出的斑节对虾性腺成熟所需要的月龄和成熟应达到的规格(体重和体长)，因此，在挑选养殖的斑节对虾作为亲体用于人工催产时，具有盲目性，不能保证催产的成熟率。

发明内容

本发明的目的在于提供一种全人工池塘养殖斑节对虾亲体的培育方法，即从斑节对虾生长的不同阶段中，不断挑选优质的个体继续养殖，利用健康的养殖体系和养殖技术作为保障，最终获得可供人工育苗的斑节对虾亲体的方法，以保证挑选出的亲体的能达到较高的成熟率、怀卵量、受精率，从而保证人工培育的亲体的质量。

经过调查研究，斑节对虾的性腺发育表现出如下的规律：

(1)在池塘养殖条件下，雄性斑节对虾精荚出现的最小生物学个体规格差异不大，生物学最小型为甲长3.1cm，体长11.1cm，体重20g左右。池塘养殖的雌性斑节对虾的性成熟最小型应考虑以纳精襄的发育完全(可与雄虾交配)为标准，其最小性成熟个体规格为甲长4.5cm、体长15.5cm、体重59g左右，不同养殖环境条件下，其最小性成熟个体规格没有差异。虽然通过营养强化培育，小个体的雌虾(体重小于50g)可以观察到卵巢的发育，但难以成熟、产卵。

(2)精荚出现及精子成熟的时间与斑节对虾生长发育快慢相关，也与雄虾的日龄有关，池塘养殖的雄虾精荚出现的最早时间为日龄150天左右，其群体大部分个体成熟的时间约为250天。个体大小和日龄(时间)是雌性斑节对虾成熟的限制性因素。调查发现池塘养殖斑节对虾雌虾的性成熟日龄为300～360天，池塘养殖的雌性斑节对虾的性成熟个体在甲长5.0cm、体长17.5cm、体重80g以上，同时达到以上要求的亲虾催产后成熟比例在50％-86％，效果很好。

通过对斑节对虾整个生活史，特别是性成熟规律的生物学调查研究，本发明根据斑节对虾性腺发育的规律特点设计了一套适用于从池塘养殖的斑节对虾中选育全人工育苗的亲体的方法，其步骤如下：

1)挑选高健康野生或池塘养殖斑节对虾亲虾：

a)野生斑节对虾亲虾雌虾体长在20.5cm以上，体重120g以上，雄虾14.5cm以上，体重50g以上；

b)池塘养殖出的斑节对虾亲虾：雄虾日龄250天以上；雌虾日龄300天以上；雄虾体长13.5cm以上、体重35g以上；雌虾体长17.5cm以上、体重80g以上；

c)外观：身体各器官完整、无伤口，鳃丝呈健康的灰白色，无红鳃、黑鳃，虾体体表完整、光洁，呈健康的、充满光泽的青灰色；雌虾已交配，雄虾精荚饱满；

d)亲虾运回室内亲虾池前，在室内或室外水池隔离暂养3～5天；

e)经过PCR(聚合酶链反应)检测，证明挑选出的斑节对虾未携带白斑综合症病毒(WSSV)、斑节对虾杆状病毒(MBV)；

2)应用促熟饲料添加剂进行亲虾室内强化培育，所述的促熟饲料添加剂由以下以重量份数计的组份构成：

高度不饱和脂肪酸5-25；    纯度1.5％以上的虾青素5-10；

胆固醇5-10；              维生素C4-10；

维生素E1-3；              海带粉50-80；

所述的高度不饱和脂肪酸为液态，其中二十二碳六烯酸(DHA)加二十碳五烯酸(EPA)占重量的40.0～80.0％，且DHA/EPA在2.0～5.0之间；

所述的其余组份都通过100目的标准筛；

所得促熟饲料添加剂在亲虾鲜活饵料中拌入后投喂亲虾；

在实施亲虾强化培育过程中，还要按照现有的常规方法控制温度、盐度、pH、光照、水质及进行病害控制，按照常规方法摘除单侧眼柄；实施过程中可参照本领域所熟知的《对虾育苗操作规程》进行操作；

3)亲虾所产受精卵和孵化的幼体进行受精卵和无节幼体孵化处理技术处理：

a)产卵前亲虾的浸泡消毒，100～300ml/m3福尔马林浸泡1～3分钟；

b)受精卵→干净海水冲洗2～5分钟→100ml/m3福尔马林浸泡1分钟→0.1ml/m3聚维酮碘(碘液)浸泡1分钟→干净海水冲洗2～5分钟；

c)受精卵的孵化，无节幼体收集→干净海水冲洗2～5分钟→100ml/m3福尔马林浸泡30秒～1分钟→0.1ml/m3聚维酮碘液浸泡30秒～1分钟→干净海水冲洗2～5分钟；

4)受精卵和无节幼体处理后人工育苗培育30天以上，从中选择健康苗种放入室外成虾养殖池养殖；选择标准：

a)虾苗个体大小均匀，体长在1.1cm以上；

b)育苗池随机取样50尾虾苗，PCR检测100％为阴性；

c)虾苗体表及附肢清洁，无污物及寄生物，体形正常，无畸形，附肢完整；

d)虾苗日龄30日以上，尾扇打开、体色自然、成活率高于30％的育苗池的虾苗；摄食活动能力强，肠胃饱满，游泳身体伸直，能从水面游入底部；

e)应急反应测试：虾苗放入100ml/m3福尔马林浓度的海水中浸泡15～30分钟，成活率达95％以上；放入淡水15分钟后仍正常、再放回到正常育苗水中15分钟后仍正常的苗种；

f)饥饿实验：挑选50～100尾苗，放入无饵料的干净海水桶中，不充气，一天后成活率100％的苗种；

5)从室外成虾养殖池，养殖90～120天的成虾中挑选体长11.5cm以上、体重20g以上雄虾，体长12.5cm、体重25g以上雌虾作为种虾；

6)种虾放入种虾养殖池，养殖120～150天，在达到240～300日龄的大虾中，挑选体长13.5cm以上、体重35g以上雄虾，以及挑选体长17.5cm、体重80g以上雌虾作为后备亲虾；

7)后备亲虾放入后备亲虾养殖池，在养殖期间，日常饵料除了配合饲料外，还需要根据其摄食量，每周至少投喂2次冰鲜活饵料进行营养强化；养殖60～120天，从其中挑选外观健康，器官完整、无伤口，鳃丝呈健康的灰白色，无红鳃、黑鳃，体表完整、光洁，呈健康的、充满光泽的青灰色，雌虾已交配，雄虾精荚饱满的亲体(日龄300天以上)；

8)雌雄亲体运回室内池隔离暂养，经过PCR检测，挑选出的斑节对虾未携带白斑综合症病毒(WSSV)、斑节对虾杆状病毒(MBV)的作为全人工育苗的亲体。

本发明实施中成虾养殖技术按照常规对虾养殖技术及操作规程，本领域技术人员可根据具体情况进行调整，但本发明在具体实施时，应该严格执行以下半封闭式健康养殖体系和养殖管理技术：

斑节对虾亲虾半封闭式健康养殖体系主要由贮水池、成虾养殖池、大规格种虾养殖池和后备亲虾养殖池四种功能不同的池塘组成，对池塘的大小、形状虽没有特殊要求，我们仍推荐使用具有规则形状(长方形、正方形或圆形)，养殖水深可达2m以上，面积在1000～6000m²的高位池塘组合。贮水池塘的面积和养殖池塘的总面积的比例要求在1∶3～10之间，每种不同功能的养殖池塘的个数最好是两个以上。本领域的技术人员可以根据实际情况进行调整。

实施过程的健康养殖体系是一种半封闭式健康的养殖模式，养殖池塘不与海域海水直接接触。四种不同功能池塘的作用不同，贮水池专门用于养殖用水的消毒处理和生物净化处理，消毒剂为水产常用的含氯、溴、碘的化学制剂，生物净化使用高活性芽孢杆菌制剂的“利生素”，还可促进贮水池单细胞藻类的生长，维持水环境的稳定，并为养殖池塘提供优质水源。不同养殖池塘用于斑节对虾不同生长规格的养殖。养殖整个过程使用高活性芽孢杆菌制剂的“利生素”来及时降解养殖过程产生的对虾排泄物、残存饲料、浮游生物残体、有机碎屑等有机物，矿化成为单细胞藻类生长所需的营养盐类，起到促进优良单细胞藻类的繁殖生长和避免有机物在池塘中的沉积的作用，有效地减少养虾池的有机耗氧，间接增加池中的溶氧，保证了有机物氧化-氨化-硝化-反硝化的正常循环，降低氨氮，亚硝酸盐，硫化物等有害物质，抑制有害病菌的生长繁殖，营造良好的生态环境，维持养殖池塘水环境稳定。

本发明实施中所使用的斑节对虾亲虾半封闭式健康养殖体系是养殖亲体选育必不可少的保障体系，尽管不使用该体系也可能获得养殖斑节对虾亲体，但其成功率将可能大大降低。

实施过程中的水质管理技术：定期进行NO₂-N、NO₃-N、NH₄-N、PO₄-P、COD(化学耗氧量)、DO(溶解氧)、DIN(溶解无机氮)和IP(无机磷)等化学因子的含量测定，用以计算水质各营养评价指数值。采样及样品分析均按《海洋监测规范》中规定的方法进行。对于养殖水质营养水平的划分，我国目前尚无统一的标准，实施中参照我国公布的《渔业水质标准(GB-11607-89)》和《海水水质标准(GB-3097-1997)》，表1所引用的养殖水质标准(二类海水水质标准)。当上述中的个别或一些水化因子超出限定范围，通过贮水池处理过的海水对养殖池塘换水。

养殖水质评价标准

评价因子	DO	COD	DIN	IP
					评价标准	＞5.0	≤3.0	21.43	0.968

表中DO、COD的单位为mg/L，DIN、IP的单位为μmol/L。

斑节对虾成虾养殖放苗密度为1～20尾/m²，优选放苗密度为5～20尾/m²，特别优选放苗密度为10～15尾/m²；种虾养殖密度为1～10尾/m²，优选放养密度为3～10尾/m²，特别优选放养密度为5～8尾/m²；后备亲虾养殖密度为1～5尾/m²，特别优选放养密度为3～4尾/m²。

尽管下列术语在本领域中广为人知，但为了便于理解，我们仍将对这些术语进行一些简要的解释。

本文中，“日龄”是指以亲虾产卵之日为计算初始日；“亲体”是指在自然条件下或人工培育条件下，生长达到一定年龄和个体规格，可达到性成熟并能繁衍后代的对虾个体。“性成熟”是指雌性亲虾的卵巢发育至IV期以上，外观上明显观察到卵巢的饱满的形状；雄性亲虾的精囊发育到外观明显可见白色的精囊形状。

以下是在实施过程中参照实施的一些国家或地方规范或标准：

DB 44/136     斑节对虾养殖技术规范  亲虾

DB 44/T137    斑节对虾养殖技术规范  人工繁殖技术

DB 44/T138    斑节对虾养殖技术规范  幼体培育技术

DB 44/T139    斑节对虾养殖技术规范  食用虾饲养技术

GB 11607      渔业水质标准

NY/T394       绿色食品    肥料使用准则

NY 5051       无公害食品  淡水养殖用水水质

NY 5052       无公害食品  海水养殖用水水质

NY/T5059-2001 无公害食品  对虾养殖技术规范

NY 5071    无公害食品  渔用药物使用规则

NY 5072    无公害食品  渔用配合饲料安全限量。

本发明的有益效果：本发明从斑节对虾生长的不同阶段中，不断挑选优质的个体继续养殖，利用健康的养殖体系和养殖技术作为保障，最终获得可供人工育苗的斑节对虾亲体，保证了挑选出的池塘人工养殖的亲体的催产效果与野生来源的亲虾催产效果相同或者接近，避免了在挑选人工养殖的斑节对虾亲虾时，挑选的盲目性以及催产效果的不确定性，按本发明从池塘养殖斑节对虾中选育出的用于人工育苗的亲体催产后成熟比例在50％-86％，效果很好。

附图说明

图1为全人工培育斑节对虾亲虾技术路线的方框流程图。

图2为斑节对虾亲虾健康养殖体系一半封闭式健康养殖体系图。

具体实施方式

下面结合附图及实施例对本发明做进一步的详细说明。

实施例1

1)选高健康野生斑节对虾亲虾：

a)从捕获的海南三亚海域野生斑节对虾中选择亲虾，要求雌虾体长在20.5cm、体重120g以上，雄虾14.5cm以上，体重50g以上；

b)外观：身体各器官完整、无伤口，鳃丝呈健康的灰白色，无红鳃、黑鳃等不正常的病变，虾体体表完整、光洁，呈健康的、充满光泽的青灰色；雌虾已交配，雄虾精荚饱满；

c)亲虾运回室内亲虾池前，在室内或室外水池隔离暂养3～5天；

d)经过PCR检测，挑选出的斑节对虾未携带白斑综合症病毒(WSSV)、斑节对虾杆状病毒(MBV)；

2)健康亲虾经过100ml/m³浓度的福尔马林消毒3分钟，移入亲虾室内培育室进行亲虾室内强化培育，并在亲虾鲜活饵料中拌入促熟饲料添加剂后投喂亲虾，促熟饲料添加剂由以下以重量份数计的组份构成：

高度不饱和脂肪酸5-25；    纯度1.5％以上的虾青素5-10；

胆固醇5-10；              维生素C4-10；

维生素E1-3；              海带粉50-80；

所述的高度不饱和脂肪酸为液态，其中二十二碳六烯酸(DHA)加二十碳五烯酸(EPA)占重量的40.0～80.0％，且DHA/EPA在2.0～5.0之间；

所述的其余组份都通过100目的标准筛；

3)在实施亲虾强化培育过程中，还要按照现有的常规方法控制温度、盐度、pH、光照、水质及进行病害控制，按照常规方法摘除单侧眼柄；实施过程中可参照本领域所熟知的《对虾育苗操作规程》进行操作，但本发明在以下几个环节应严格控制：虾所产受精卵和孵化的幼体进行受精卵和无节幼体孵化处理技术处理：

a)产卵前亲虾的浸泡消毒，100ml/m³福尔马林浸泡2分钟；

b)受精卵→干净海水冲洗3分钟→100ml/m³福尔马林浸泡1分钟→0.1ml/m³聚维酮碘(碘液)浸泡1分钟→干净海水冲洗3分钟；

c)受精卵的孵化，无节幼体收集→干净海水冲洗3分钟→100ml/m³福尔马林浸泡30秒→0.1ml/m³聚维酮碘(碘液)浸泡30秒→干净海水冲洗3分钟；

4)受精卵和无节幼体处理后经人工育苗培育32天(日龄)后，从中选择健康苗种放入半封闭式健康养殖系统的养成池养殖，健康苗种的选择参照以下几个原则：

a)虾苗个体大小均匀，体长在1.1cm以上；

b)育苗池随机取样50尾虾苗，PCR检测100％为阴性；

c)选择虾苗体表及附肢清洁，无污物及寄生物，体形正常，无畸形，附肢完整；

d)30日龄以上，尾扇打开、体色自然、成活率高于30％的育苗池的虾苗；摄食活动能力强，肠胃饱满，游泳身体伸直，能从水面游入底部；

e)应急反应测试：虾苗放入100ml/m³福尔马林浓度的海水中浸泡20分钟，成活率达95％以上；放入淡水15分钟后正常、再放回到正常育苗水中15分钟后仍正常的苗种；

f)饥饿实验：挑选50～100尾苗，放入无饵料的干净海水桶中，不充气，一天后成活率100％的苗种；

5)室外养成池为水深2m以上，面积5000m²的高位池塘，放苗密度为10～15尾/m²；从在室外养成池中，养殖90～120天的成虾中挑选体长11.5cm以上、体重20g以上雄虾，体长12.5cm、体重25g以上雌虾作为种虾；

6)挑选出的种虾放入种虾养殖池，其为水深2m，面积4000m²的高位池塘，放苗密度为5～8尾/m²；养殖120～150天，在达到240～300日龄的大虾中，挑选体长13.5cm以上、体重35g以上雄虾，以及挑选体长17.5cm、体重80g以上雌虾作为后备亲虾；

7)后备亲虾放入后备亲虾养殖池，其水深2m以上，面积2000m²的高位池塘，放苗密度为3～4尾/m²。后备亲虾的日常饵料除了配合饲料外，还需要根据其摄食量，每周投喂至少2次(餐)以上冰鲜活饵料(冰鲜小杂鱼等)进行营养强化。养殖60～120天，用捕虾笼诱捕从其中挑选亲虾，共150尾(雌：92，雄：58)要求：外观健康，身体各器官完整、无伤口、日龄313天、雌虾已交配、雄虾精荚饱满，鳃丝呈健康的灰白色，无红鳃，黑鳃等不正常的病变，虾体体表完整、光洁，呈健康的、充满光泽的青灰色；鳃丝呈健康的灰白色，无红鳃、黑鳃，体表完整、光洁，呈健康的、充满光泽的青灰色，雄虾个体体长14.5cm以上、体重45g以上；雌虾的性成熟个体体长17.5cm以上、体重80g以上；

8)所选亲虾运回室内池隔离暂养，用专用的亲虾运输袋，装贮水池干净海水至1/3袋，亲虾额角套上塑料小管，视亲虾的大小，每袋放入4～10尾，充入纯氧，近距离运输不需降温，避免亲虾对温度升降的不适；如果是远距离运输，最好将亲虾运输袋放入专用泡沫塑料箱，可适当将运输水温降低2～3℃，并在泡沫塑料箱内放一小袋冰以防水温急升。这样运输的效果很好，成活率几乎达100％；本例所选亲虾经1小时运输，运回室内后，成活率100％，用100～300ml/m³福尔马林浸泡3分钟后放入事先准备好的水泥池隔离暂养；暂养3天后，逐尾取少许鳃样品，进行PCR检测，PCR检测为WSSV、MBV阴性的亲虾用于强化培育及催产，检测后最终获得不携带WSSV、MBV病毒的健康雌虾63尾，雄虾31尾，获得的健康亲虾暂养2天后，按照常规方法镊烫单侧眼柄后作为全人工育苗的亲体放入亲体培育池进行强化培育，其结果见下表：

实施例1亲体选育及促熟产卵情况

初始挑选亲虾(雌∶雄)	运输死亡虾(尾)(雌∶雄)	暂养死亡(尾)(雌∶雄)	PCR检测淘汰(雌∶雄)	最终健康亲体(尾)(雌∶雄)
					92∶58促熟手术雌虾(尾)60	0∶0术后死亡虾(尾)5	6∶5性腺发育雌虾数(尾)39	23∶22产卵雌虾数(尾)36	63∶31第一次总产卵量(万)1263

实施例2

也是从捕获的海南三亚海域野生斑节对虾中选择亲虾，各步骤同实施例1，在后备亲虾池共挑选亲虾150尾(雌：87，雄：63)，最终获得不携带WSSV、MBV病毒的健康亲体雌虾57尾，雄虾37尾作为全人工育苗的亲体放入亲体培育池进行强化培育，其结果见下表：

实施例2亲体选育及促熟产卵情况

初始挑选亲虾(雌∶雄)	运输死亡虾(尾)(雌∶雄)	暂养死亡(尾)(雌∶雄)	PCR检测淘汰(尾)(雌∶雄)	最终健康亲体(尾)(雌∶雄)
					87∶63促熟手术雌虾(尾)55	1∶2术后死亡虾(尾)3	4∶4性腺发育雌虾数(尾)42	25∶20产卵雌虾数(尾)40	57∶37第一次总产卵量(万)1433

实施例3

2003年2～5月从捕获的海南三亚海域野生斑节对虾中选择亲虾，各步骤同实施例1，共挑选亲虾1350尾(雌：792，雄：558)，所选亲虾经3小时运输，运回室内后，成活率98.3％，最终获得不携带WSSV、MBV病毒的健康雌虾543尾，雄虾331尾暂养2天后，按照常规方法镊烫单侧眼柄后作为全人工育苗的亲体放入亲体培育池进行强化培育，其结果见下表：

实施例3的亲体挑选情况

初始挑选亲虾(雌∶雄)	运输死亡虾(尾)(雌∶雄)	暂养死亡(尾)(雌∶雄)	PCR检测淘汰(尾)(雌∶雄)	最终健康亲体(尾)(雌∶雄)
					792∶558	13∶10	16∶15	220∶202	543∶331

在上述健康亲虾中，根据个体大小分为体长16.0～18.0cm和体长18.0cm以上两种规格亲体分别进行强化促熟实验，见比较例A和B。

比较例A

挑选规格：雌虾体长16.0～18.0cm，体重60.0～85.0g，雄虾体长13.5～15.0cm，体重35.0～50.0g，进行分组实验。分组前，对每尾实验雌虾进行切除单侧眼柄。实验组包括40尾雌虾和20尾雄虾(雌雄比为2∶1)，实验设三个平行实验组，投喂添加亲虾促熟饲料添加剂的鲜活饵料。对照组包括40尾雌虾和20尾雄虾(雌雄比为2∶1)，同样设三个平行组，直接投喂备用的鲜活饵料。实验组和对照组培育条件完全相同。经过35天繁殖试验，实验组斑节对虾雌虾性腺发育比率为64.5±6.4％，成熟率57.5±4.4％，产卵总量3422.4万，总产卵虾138尾次，平均每尾每次产卵248，000粒，总无节幼体数2056.9万，平均孵化率60.1±5.1％；雄虾成熟率76.5±6.8％。对照组斑节对虾雌虾性腺发育比率为14.7±2.4％，成熟率9.0±2.5％，产卵总量192.5万，总产卵虾11尾次，平均每尾每次产卵175,000粒，总无节幼体数96.3万，平均孵化率50.1±4.0％；雄虾成熟率60.5±4.3％。

比较例B

挑选规格达到雌虾体长18.0cm，体重80.0g以上，雄虾体长14.5～15.8cm，体重45.0～60.0g左右，进行分组实验。分组前，对每尾实验雌虾进行切除单侧眼柄。实验组包括30尾雌虾和15尾雄虾(雌雄比为2∶1)，实验设三个平行实验组，投喂添加亲虾促熟饲料添加剂的鲜活饵料。对照组包括30尾雌虾和15尾雄虾(雌雄比为2∶1)，同样设三个平行组，直接投喂备用的鲜活饵料。实验组和对照组培育条件完全相同。经过35天繁殖试验，实验组斑节对虾雌虾性腺发育比率为89.6±4.1％，成熟率86.0±4.4％，产卵总量4705.8万，总产卵虾138尾次，平均每尾每次产卵341,000粒，总无节幼体数2978.8万，平均孵化率68.3±5.1％；雄虾成熟率77.5±5.7％。对照组斑节对虾雌虾性腺发育比率为26.7±2.4％，成熟率18.0±3.5％，产卵总量470.0万，总产卵虾20尾次，平均每尾每次产卵235,000粒，总无节幼体数235.2万，平均孵化率50.1±4.3％；雄虾成熟率60.5±4.2％。

实施例4

2004年5月，用实例3中野生斑节对虾亲虾的后代经池塘养殖培育出的子一代亲虾，在人工强化培育下，性成熟后繁殖的后代经过人工培育获得的子二代种苗，并经过PCR检测确定为健康的种苗。投放到海南红沙池塘养殖，2005年3月起，从池塘养殖出的子二代亲体(已知303日龄)，完全满足性成熟的需要：雄虾日龄应在250天以上；雌虾日龄达到300天以上。用捕虾笼诱捕亲虾，初步挑选亲虾的标准是：雄性斑节对虾个体在雌性斑节对虾的性成熟个体体长14.5cm以上、体重45g以上；雌性斑节对虾的性成熟个体体长17.5cm以上、体重80g以上。共挑选亲虾197尾(雌：128，雄：69)，所选亲虾经1小时运输，运回室内后，成活率100％，用100～300ml/m³福尔马林浸泡3分钟后放入事先准备好的水泥池隔离暂养。暂养3天后，逐尾取少许鳃样品，进行PCR检测，PCR检测为WSSV、MBV阴性的亲虾用于强化培育及催产。检测后获得不携带WSSV、MBV病毒的健康雌虾85尾，雄虾36尾。获得的健康虾暂养2天后，按照常规方法镊烫单侧眼柄后，放入亲体培育池进行强化培育，其结果见下表：

实施例4亲体选育及促熟产卵情况

初始挑选亲虾(雌∶雄)	运输死亡虾(尾)(雌∶雄)	暂养死亡(尾)(雌∶雄)	PCR检测淘汰(雌∶雄)	健康亲虾(尾)(雌∶雄)
					128∶69促熟手术雌虾(尾)	0∶0术后死亡虾(尾)	3∶2性腺发育雌虾数(尾)	40∶31产卵雌虾数(尾)	85∶36第一次总产卵量(万)

70

5

51

48

1723

实施例5

用实例3中培育出的子二代健康苗种，投放到海南红沙池塘养殖。各步骤同实施例1。2005年5月，从海南红沙池塘养殖出的子二代亲体(年龄已知360日龄)，完全满足性成熟的需要：雄虾日龄应在250天以上；雌虾日龄达到300天以上。用捕虾笼诱捕亲虾。初步挑选亲虾的标准是：雄性斑节对虾个体在雌性斑节对虾的性成熟个体体长14.5cm以上、体重45g以上；雌性斑节对虾的性成熟个体体长18.5cm以上、体重90g以上。共挑选亲虾173尾(雌：107，雄：66)，所选亲虾经1小时运输，运回室内后，死亡5尾(3雌2雄)，成活率97％，用100～300ml/m³福尔马林浸泡3分钟后放入事先准备好的池隔离暂养。暂养3天后，逐尾取少许鳃样品，进行PCR检测，PCR检测为WSSV、MBV阴性者用于强化培育及催产。检测后获得不携带WSSV、MBV病毒的健康亲体雌虾83尾，雄虾41尾。获得的健康虾暂养2天后，按照常规方法镊烫单侧眼柄后，放入亲体培育池进行强化培育，其结果见下表：

实施例5亲体选育及促熟产卵情况

初始挑选亲虾(雌∶雄)	运输死亡虾(尾)(雌∶雄)	暂养死亡(尾)(雌∶雄)	PCR检测淘汰(尾)(雌∶雄)	健康亲虾(尾)(雌∶雄)
					107∶66促熟手术雌虾(尾)80	3∶2术后死亡虾(尾)4	2∶0性腺发育雌虾数(尾)57	19∶23产卵雌虾数(尾)54	83∶41第一次总产卵量(万)2011

上述结果表明，本发明所提供的一种从池塘养殖的斑节对虾群体中挑选可供催产的亲体的方法，可以有效保证挑选出的亲体的能达到较高的成熟率、怀卵量、受精率，从而保证人工培育的斑节对虾的质量。

本发明并不局限于上述特定的实施方案的范围内，上述实施方案仅仅是为了能够对本发明的挑选养殖斑节对虾亲虾方法及过程进行详细地说明，而且有相同功能的挑选方法也属于本发明内容的一部分。事实上，本领域技术人员根据前文的描述，就能够根据各自需要在不同的养殖环境条件下(池塘、鱼塭)，从符合上述条件的养殖斑节对虾中挑选斑节对虾亲体，这些调整都应在本文所所附的权利要求书的范围内。

Claims (4)

1、一种全人工培育斑节对虾亲体的方法，其特征是：包括以下步骤：

1)挑选高健康野生或池塘养殖斑节对虾亲虾：

A、野生斑节对虾亲虾雌虾体长在20.5cm以上，体重120g以上，雄虾14.5cm以上，体重50g以上；

B、池塘养殖出的斑节对虾亲虾：雄虾日龄250天以上；雌虾日龄300天以上；雄虾体长13.5cm以上、体重35g以上；雌虾体长17.5cm以上、体重80g以上；

C、外观：器官完整、无伤口，鳃丝呈健康的灰白色，无红鳃、黑鳃，体表光洁，呈健康的、充满光泽的青灰色；雌虾已交配，雄虾精荚饱满；

D、亲虾运回室内亲虾池前，在室内或室外水池隔离暂养3～5天；

E、经过聚合酶链反应检测，证明挑选出的斑节对虾未携带白斑综合症病毒、斑节对虾杆状病毒；

2)应用促熟饲料添加剂进行亲虾室内强化培育，所述的促熟饲料添加剂由以下以重量份数计的组份构成：

高度不饱和脂肪酸5-25；   纯度1.5％以上的虾青素5-10；

胆固醇5-10；             维生素C4-10；

维生素E1-3；             海带粉50-80；

所述的高度不饱和脂肪酸为液态，其中二十二碳六烯酸(DHA)加二十碳五烯酸(EPA)占重量的40.0～80.0％，且DHA/EPA在2.0～5.0之间；

所述的其余组份都通过100目的标准筛；

所得促熟饲料添加剂在亲虾鲜活饵料中拌匀后投喂亲虾；

3)亲虾所产受精卵和孵化的幼体进行受精卵和无节幼体孵化处理技术处理：

A、产卵前亲虾的浸泡消毒，100～300ml/m³福尔马林浸泡1～3分钟；

B、受精卵→干净海水冲洗2～5分钟→100ml/m³福尔马林浸泡1分钟→0.1ml/m³聚维酮碘液浸泡1分钟→干净海水冲洗2～5分钟；

C、受精卵的孵化，无节幼体收集→干净海水冲洗2～5分钟→100ml/m³福尔马林浸泡30秒～1分钟→0.1ml/m³聚维酮碘液浸泡30秒～1分钟→干净海水冲洗2～5分钟；

4)处理后的受精卵经人工育苗培育30天以上，从中选择健康苗种放入室外养成池塘养殖；苗种选择标准：

A、虾苗个体大小均匀，体长在1.1cm以上；

B、育苗池随机取样50尾虾苗，PCR检测100％为阴性。

C、虾苗体表及附肢清洁，无污物及寄生物，体形正常，无畸形，附肢完整；

D、虾苗日龄30日以上，尾扇打开、体色自然、成活率高于30％的育苗池的虾苗；摄食活动能力强，肠胃饱满，游泳身体伸直，能从水面游入底部；

E、应急反应测试：虾苗放入100ml/m³福尔马林浓度的海水中浸泡15～30分钟，成活率达95％以上；放入淡水15分钟后仍正常、再放回到正常育苗水中15分钟后仍正常的苗种；

F、饥饿实验：挑选50～100尾苗，放入无饵料的干净海水桶中，不充气，一天后成活率100％的苗种；

5)从在室外养成池中，养殖90～120天的成虾中挑选体长11.5cm以上、体重20g以上雄虾，体长12.5cm、体重25g以上雌虾作为种虾；

6)种虾放入种虾养殖池，养殖120～150天，在达到240～300日龄的大虾中，挑选体长13.5cm以上、体重35g以上雄虾，以及挑选体长17.5cm、体重80g以上雌虾作为后备亲虾；

7)后备亲虾放入后备亲虾养殖池，养殖60～120天，从其中挑选外观健康，器官完整、无伤口，鳃丝呈健康的灰白色，无红鳃、黑鳃，体表完整、光洁，呈健康的、充满光泽的青灰色，雌虾已交配，雄虾精荚饱满的亲体；

8)雌雄亲体运回室内池隔离暂养，经过PCR检测，挑选出的斑节对虾未携带白斑综合症病毒、斑节对虾杆状病毒的作为全人工育苗的亲体。

2、根据权利要求1所述的全人工培育斑节对虾亲体的方法，其特征在于：所述的亲体选育全过程的各养殖池处于半封闭式养殖体系中，由贮水池、成虾养殖池、种虾养殖池、后备亲虾养殖池组成，贮水池和其它三种池的面积比是1∶3～10；各养殖池相互独立，养殖用水先经过贮水池，消毒处理和生物净化后再进入其它养殖池。

3、根据权利要求1所述的全人工培育斑节对虾亲体的方法，其特征在于：所述的斑节对虾成虾养殖放苗密度为1～20尾/m²，优选放苗密度为5～20尾/m²，特别优选放苗密度为10～15尾/m²；种虾养殖密度为1～10尾/m²，优选放养密度为3～10尾/m²，特别优选放养密度为5～8尾/m²；后备亲虾养殖密度为1～5尾/m²，特别优选放养密度为3～4尾/m²。

4、根据权利要求1所述的全人工培育斑节对虾亲体的方法，其特征在于：在后备亲虾养殖期间，后备亲虾的日常饵料除了配合饲料外，还需要根据其摄食量，每周至少投喂2次冰鲜活饵料进行营养强化。

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