CN109122445B - 一种提高凡纳滨对虾繁育性能的亲虾培育方法 - Google Patents
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Abstract
一种提高凡纳滨对虾繁育性能的亲虾培育方法,属于水产动物营养饲料领域,所述方法在凡纳滨对虾亲虾培育过程中分不同的阶段通过分别控制雌雄亲虾饲料中不同类型长链多不饱和脂肪酸的总量和比例来调控亲虾性腺发育和繁育性能。本发明方法能够显著提高凡纳滨对虾亲虾的性激素分泌、性腺发育、产卵量、受精卵孵化率及无节幼体变态率。该技术可减少凡纳滨对虾亲虾培育过程中对沙蚕和鱿鱼的依赖,且成本可控,可操作性强。
Description
技术领域
本发明属于水产动物营养饲料领域,具体地涉及一种调控凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)繁育性能的营养学方法。
背景技术
凡纳滨对虾又称南美白对虾,是我国目前产量最高的养殖对虾。原产南美洲太平洋沿岸,主要集中于秘鲁北部至墨西哥湾沿岸海域。该品种具有生长快、适应能力强、味道鲜美、成品虾规格均匀、常年可以繁殖等特点。凡纳滨对虾养殖是目前我国对虾养殖业的支柱。然而,凡纳滨对虾的亲虾却长期依赖于进口,这是限制我国凡纳滨对虾养殖业快速发展的重要因素。除了对虾种质资源库和选育体系建设方面的不足,不合理的营养策略也是限制我国凡纳滨对虾亲虾质量的重要因素。长期以来,我国的凡纳滨对虾亲虾培育都以鲜活饵料尤其是沙蚕及鱿鱼等为主,营养成分单一,无法充分满足对虾亲虾性腺快速发育的需求。
发明内容
本发明要解决的技术问题在于提供一种调控凡纳滨对虾亲虾性腺发育的营养学方法,所述方法聚焦凡纳滨对虾亲虾性腺发育中最重要的一类营养物质,即长链多不饱和脂肪酸二十二碳六烯酸(C22:6n-3,DHA)、二十碳五烯酸(C20:5n-3,EPA)和二十碳四烯酸(C20:4n-6,ARA),并结合沙蚕等生物饵料的使用,针对不同性腺发育阶段摸索出了雌雄亲虾的不同的长链多不饱和脂肪酸供给策略,通过改变饲料中各种长链多不饱和脂肪酸的添加量和比例来调控凡纳滨对虾亲虾性腺发育,增强繁育力和苗种质量,弥补该领域现有技术的不足。
本发明是通过如下技术方案来实现的:
一种提高凡纳滨对虾繁育性能的亲虾培育方法,技术路线如图1所示。所述方法把亲虾培育分为营养强化期和促熟期;所述的营养强化期为50d,起止时间为产卵前75d到产卵前25d;所述的促熟期为产卵前25d;
在营养强化期,雌雄亲虾分开饲养,控制雌虾饲料中DHA:EPA:ARA比例为3:3:1(重量比例),雄虾饲料中DHA:EPA:ARA比例为1.5:3:1(重量比例);控制雌虾饲料和雄虾饲料中DHA+EPA+ARA的总量为2%(占干物质重量比例);投喂频率为每天投喂2次,早晚各一次;
在促熟期,雌雄亲虾混合饲养,控制投喂的配合饲料中DHA:EPA:ARA比例均为2:3:2(重量比例);配合饲料中DHA+EPA+ARA的总量为3%(占干物质重量比例);促熟期投喂一半所述配合饲料,一半生物饵料,所述生物饵料为沙蚕和鱿鱼,沙蚕和鱿鱼的质量比为1:1;投喂频率为每天投喂2次,早晚各一次。
本发明与现有技术相比的有益效果:
(1)能够显著提高凡纳滨对虾的一系列繁育性能相关指标,如雌二醇的含量(平均提高12%)和雌虾的性腺指数(平均提高26%),并提高了平均产卵量(平均提高31%),受精卵孵化率(平均提高28%)及无节幼体变态率(平均提高35%)。
(2)该技术降低了亲虾培育过程对沙蚕和鱿鱼的依赖,优化了生产流程。
(3)成本在可控范围内,经济性高。
附图说明
图1、本方法实施的技术路线图。
图2、第一年实验中使用本方法描述的技术与全程使用沙蚕+鱿鱼的对照组相比,对雌虾产卵前血清雌二醇含量的影响。数据以平均值±标准误表示(n=3);不含相同字母的数据柱间具有显著性差异(P<0.05)。
图3、第一年实验中使用本方法描述的技术与全程使用沙蚕+鱿鱼的对照组相比,对雌虾产卵前性腺指数的影响。数据以平均值±标准误表示(n=3);不含相同字母的数据柱间具有显著性差异(P<0.05)。
图4、第一年实验中使用本方法描述的技术与全程使用沙蚕+鱿鱼的对照组相比,对雌虾平均产卵量的影响。数据以平均值±标准误表示(n=3);不含相同字母的数据柱间具有显著性差异(P<0.05)。
图5、第一年实验中使用本方法描述的技术与全程使用沙蚕+鱿鱼的对照组相比,对受精卵孵化率的影响。数据以平均值±标准误表示(n=3);不含相同字母的数据柱间具有显著性差异(P<0.05)。
图6、第一年实验中使用本方法描述的技术与全程使用沙蚕+鱿鱼的对照组相比,对无节幼体变态率的影响。数据以平均值±标准误表示(n=3);不含相同字母的数据柱间具有显著性差异(P<0.05)。
图7、第二年重复实验中使用本方法描述的技术与全程使用沙蚕+鱿鱼的对照组相比,对雌虾产卵前血清雌二醇含量的影响。数据以平均值±标准误表示(n=3);不含相同字母的数据柱间具有显著性差异(P<0.05)。
图8、第二年重复实验中使用本方法描述的技术与全程使用沙蚕+鱿鱼的对照组相比,对雌虾产卵前性腺指数的影响。数据以平均值±标准误表示(n=3);不含相同字母的数据柱间具有显著性差异(P<0.05)。
图9、第二年重复实验中使用本方法描述的技术与全程使用沙蚕+鱿鱼的对照组相比,对雌虾平均产卵量的影响。数据以平均值±标准误表示(n=3);不含相同字母的数据柱间具有显著性差异(P<0.05)。
图10、第二年重复实验中使用本方法描述的技术与全程使用沙蚕+鱿鱼的对照组相比,对受精卵孵化率的影响。数据以平均值±标准误表示(n=3);不含相同字母的数据柱间具有显著性差异(P<0.05)。
图11、第二年重复实验中使用本方法描述的技术与全程使用沙蚕+鱿鱼的对照组相比,对无节幼体变态率的影响。数据以平均值±标准误表示(n=3);不含相同字母的数据柱间具有显著性差异(P<0.05)。
具体实施方式
下面通过实施例来对本发明的技术特征作进一步解释,但本发明的保护范围不受实施例任何形式上的限制。
实施例1、使用本方法强化凡纳滨对虾亲虾后亲虾繁殖性能表现
1、实验设计和实验饲料配方
以市场上常见的对虾饲料配方为基础配方(本参考配方不属于本专利申请保护范围),在基础饲料中添加2%(强化期)或3%(促熟期)的强化油(强化油为富含DHA、EPA和ARA的鱼油富集物),来配制达到本方法所描述的DHA:EPA:ARA比例及总量。饲料配方及脂肪酸组成分别见表1及表2。对照组全程投喂沙蚕+鱿鱼。
表1实验饲料的饲料配方和粗成分(%干物质)
1维生素混合料(mg or g/kg饲料):硫胺素25mg;核黄素,45mg;盐酸吡哆醇,20mg;维生素B12,0.1mg;维生素K3,10mg;肌醇,800mg;泛酸,60mg;烟酸,200mg;叶酸,20mg;生物素,1.2mg;视黄醇乙酸酯,32mg;胆钙化醇,5mg;α-生育酚,120mg;次粉,13.67g。
2矿物质混合料(mg or g/kg饲料):硫酸镁1200mg;硫酸铜10mg;硫酸锌50mg;硫酸铁80mg;硫酸锰45mg;氯化钴50mg;碘化钾0.8mg;磷酸二氢钙3000mg;氯化纳100mg;氟化钠2mg;沸石粉13.485g。
表2实验饲料的脂肪酸组成(g/kg)
1饱和脂肪酸。
2单不饱和脂肪酸。
3n-6系列多不饱和脂肪酸。
4n-3系列多不饱和脂肪酸。
2、实验用虾和养殖管理
本实验采用7月龄,试验前期无营养强化处理。雌虾平均体长8.3cm,平均体重15.7g,无性腺发育情况;雄虾平均体长7.1cm,平均体重17.56g。每个试验组三个平行,每个平行有30尾雌虾和30尾雄虾。对照组全程投喂沙蚕+鱿鱼,且雌雄混合饲养。实验处理组强化期雌雄分开饲养。强化期结束后,雌雄混合饲养(促熟期)。强化期50天,促熟期25天。强化期人工配合饲料的日投喂量为亲虾体重的3%~5%,促熟期投喂人工配合饲料的日投喂量为亲虾体重的1%~2%,另投喂亲虾体重20%左右的沙蚕和鱿鱼(1:1)。每天分早晚2次进行投喂。日换水量为水体总量的100%。强化期结束之后,对雌性亲虾进行单侧眼柄摘除手术;之后对每尾性腺发育成熟的雌性亲虾进行人工授精操作,使其繁殖产卵。
试验用水经沉淀、沙滤、消毒后使用,营养强化期间的水温维持在27~28℃、盐度27~32、pH8.0~8.5、溶氧>6mg/L、总氨氮<0.5mg/L、亚硝酸盐<0.1mg/L、水深50~60cm。
3、样品采集繁育性能指标分析
试验开始时,对每尾亲虾的单侧眼柄套上眼标来将亲虾个体得以区分。实验开始阶段雌虾体内无性腺发育。营养强化阶段结束后,当20%~30%的雌性亲虾出现性腺发育时,称量全部的亲虾体重,各处理组每个平行各取6尾性腺发育完全的雌性亲虾先迅速用无菌注射器自虾的头胸甲后插入围心腔取血淋巴液,置于离心管中,液氮保存,用于检测血清性固醇激素含量。取血结束之后,再迅速解剖取其性腺称重,计算营养强化之后的性腺指数。性腺指数=性腺重量/雌性亲虾体重×100%。
雌性亲虾摘除眼柄后进入繁殖产卵阶段,每个试验组的各个平行分别取性腺发育成熟的雌性亲虾(此时,只要性腺发育成熟就可以取样,不拘束于雌性亲虾数量)取其围心腔血淋巴液和性腺,同样测量性腺指数。人工授精后,统计各处理组产卵量、受精卵孵化率及无节幼体变态率。
4、实验结果
与对照组相比,使用本方法的处理组显著提高了雌虾血清中雌二醇的含量(提高10%,图2)和雌虾的性腺指数(提高23%,图3),并提高了平均产卵量(提高28%,图4),受精卵孵化率(25%,图5)及无节幼体变态率(22%,图6)。
实施例2、第二年育苗季重复实验
1、实验设计和实验饲料配方
本实验采用跟实施例1中完全一样的实验饲料。于第二年育苗季节进行重复实验。
2、实验用虾和养殖管理
本实验采用8月龄,试验前期无营养强化处理。雌虾平均体长9.1cm,平均体重17.2g,无性腺发育情况;雄虾平均体长8.3cm,平均体重18.4g。每个试验组三个平行,每个平行有30尾雌虾和30尾雄虾。对照组全程投喂沙蚕+鱿鱼,且雌雄混合饲养。实验处理组强化期雌雄分开饲养。强化期结束后,雌雄混合饲养(促熟期)。强化期50天,促熟期25天。强化期人工配合饲料的日投喂量为亲虾体重的3%~5%,促熟期投喂人工配合饲料的日投喂量为亲虾体重的1%~2%,另投喂亲虾体重20%左右的沙蚕和鱿鱼(1:1)。每天分早晚2次进行投喂。日换水量为水体总量的100%。强化期结束之后,对雌性亲虾进行单侧眼柄摘除手术;之后对每尾性腺发育成熟的雌性亲虾进行人工授精操作,使其繁殖产卵。
试验用水经沉淀、沙滤、消毒后使用,营养强化期间的水温维持在25~28℃、盐度28~33、pH8.0~8.5、溶氧>6mg/L、总氨氮<0.5mg/L、亚硝酸盐<0.1mg/L、水深50~60cm。
3、样品采集繁育性能指标分析
试验开始时,对每尾亲虾的单侧眼柄套上眼标来将亲虾个体得以区分。开始阶段雌虾体内无性腺发育。营养强化阶段结束后,当20%~30%的雌性亲虾出现性腺发育时,称量全部的亲虾体重,各处理组每个平行各取6尾性腺发育完全的雌性亲虾先迅速用无菌注射器自虾的头胸甲后插入围心腔取血淋巴液,置于离心管中,液氮保存,用于检测血清性固醇激素含量。取血结束之后,再迅速解剖取其性腺称重,计算营养强化之后的性腺指数。性腺指数=性腺重量/雌性亲虾体重×100%。
雌性亲虾摘除眼柄后进入繁殖产卵阶段,每个试验组的各个平行分别取性腺发育成熟的雌性亲虾(此时,只要性腺发育成熟就可以取样,不拘束于雌性亲虾数量)取其围心腔血淋巴液和性腺,同样测量性腺指数。人工授精后,统计各处理组产卵量、受精卵孵化率及无节幼体变态率。
4、实验结果
大部分繁育指标比第一年实验有进一步提升。与对照组相比,使用本方法的处理组显著提高了雌虾血清中雌二醇的含量(提高14%,图7)和雌虾的性腺指数(提高29%,图8),并提高了平均产卵量(提高34%,图9),受精卵孵化率(提高31%,图10)及无节幼体变态率(提高48%,图11)。
Claims (1)
1.一种提高凡纳滨对虾繁育性能的亲虾培育方法,其特征在于所述方法把亲虾培育分为营养强化期和促熟期;所述的营养强化期为50d,起止时间为产卵前75d到产卵前25d;所述的促熟期为产卵前25d;
在营养强化期,雌雄亲虾分开饲养,控制雌虾饲料中DHA: EPA: ARA 的重量比例为3:3:1,雄虾饲料中DHA:EPA:ARA的重量比例为1.5:3:1;控制雌虾饲料和雄虾饲料中DHA+EPA+ARA 的总量为占干物质重量的2%;投喂频率为每天投喂2次,早晚各一次;
在促熟期,雌雄亲虾混合饲养,控制投喂的配合饲料中DHA:EPA:ARA的重量比例均为2:3:2;配合饲料中DHA+EPA+ARA的总量占干物质重量比例为3%;促熟期投喂一半所述配合饲料,一半生物饵料,所述生物饵料为沙蚕和鱿鱼,沙蚕和鱿鱼的质量比为1:1;投喂频率为每天投喂2次,早晚各一次。
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GR01 | Patent grant | ||
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