CN1727008A - 血栓诊断和/或治疗用含气干粉活性剂及其制备工艺 - Google Patents
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- CN1727008A CN1727008A CN 200510042767 CN200510042767A CN1727008A CN 1727008 A CN1727008 A CN 1727008A CN 200510042767 CN200510042767 CN 200510042767 CN 200510042767 A CN200510042767 A CN 200510042767A CN 1727008 A CN1727008 A CN 1727008A
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Abstract
本发明涉及一种血栓诊断和/或治疗用含气干粉活性剂及其制备工艺,该活性剂为冻干粉,由多肽分子,脂质,表面活性剂,稳定剂和气体构成;活性分子为多肽,能与血栓形成时活化的血小板高亲和力特异性结合,并对其有强烈的抑制作用,兼具血栓的靶向高亲和力和强的溶栓作用。使用时加入溶剂振荡形成药液,经静脉注射给药,可实现血栓靶向超声成像,同时有强的溶栓活性。
Description
技术领域
本发明涉及一种多肽分子导向的活性剂及其制备工艺,特别涉及一种血栓诊断和/或治疗用含气干粉活性剂及其制备工艺。
背景技术
血栓靶向诊断和治疗的药物(超声造影剂)用于研究和临床早已显出其作为诊断工具的价值,并已有几十年的历史了,例如用于心血管系统以及组织微循环灌流等。也有利用各种造影剂增强诊断声学图像的方法,包括固体微颗粒悬液,乳化的大纳米颗粒,气泡,其它物质包被的气泡、液体或其干粉制剂。靶向药物(超声造影剂)应该具有(1)能够与超声波辐射相互作用产生可检测的信号;(2)有特异性的靶点(例如病理学的特定组织细胞结构),并与靶分子具有亲和力和特异性;(3)保持药物的活性。
超声造影剂为许多公开的资料所记载,并有部分产品上市销售,如Bracco公司的产品Sonovue。这些声学造影剂由类似红细胞大小的含气微泡组成,注入静脉后在超声下,具有线性散射和非线性散射的特性,可使血流丰富的实质器官产生较强的对比显影。
导向的超声造影剂的例子有:例如EP-A-0727225描述了导向的超声造影剂,该报道组分与表面活性剂或白蛋白载体有关,包括作为载体的蛋白质、肽、糖—基质的细胞粘附分子配体,现在认识到这种方法会产生微泡的生长无法控制的问题,有潜在的引起血栓的可能(例如心脑血管血栓)。
WO-A-9320802描述了组织特异性配体(如抗体、肽)连接的单层脂质体用于增强超声成像,为没有气体的超声增强造影剂。本技术也描述了在血纤维蛋白,血栓,动脉粥样硬化症区域的导向造影应用。也有一些导向超声造影剂的出版物,谈到可利用单克隆抗体作为载体材料的,但都没有给出细节,例如WO-A-9300933,WO-A-9401140,WO-A-9428874。
CN1234742A和CN1302211A描述了由形成膜的表面活性剂物质单分子层所稳定的充气微泡,包括导向的诊断和/或治疗剂的组分,报道为水悬液,该组分表面活性剂采用磷脂及其衍生物、脂肽,可与受体结合的多种公开资料中的功能基团,其中也叙述了与血液粘度,出血,血栓,溶栓相关的已知的配体和受体,另外也给出了一个血栓导向脂肽和溶组织纤溶酶原激活物微泡的制备。这些报道组分的受体和配体为公开,其主要通过其组份的表面活性剂的特殊功能基团进行结合以形成稳定的微泡。对导向分子(即靶分子:特异性结合到体内某位置或组织的分子),具体的说就是结合到血栓的有效分子,没有给出详细的重要的实际细节。
发明内容
本发明的目的在于提供一种可保证长时间多肽,蛋白,药物的稳定性和活性,且具有使用的方便性的高亲和力的血栓诊断和/或治疗含气干粉活性剂及其制备工艺。
为达到上述目的,本发明采用的技术方案是:1)多肽H-Pro-A-B-C-Asp-D-Oh的合成:首先采用1mmol的氨基酸试剂瓶,在自动化肽合成仪上用Fmoc树脂以0.1mmol的规模将氨基酸合成多肽,在合成多肽之前用HBTU预活化氨基酸,将合成的多肽置于TFA溶液中2-3小时,得到粗品,再以5ml/分钟的流量及20-40%B梯度,用制备型HPLC纯化所得的粗品;2)脂质-H-Pro-Ser-Nva-Gly-Asp-Trp-OH的合成:先将所述的多肽融入预冷的PBS中搅拌直至完全溶解,使多肽的终浓度为0.1mol/L,室温放凉,在4℃下预冷2小时,在预冷的多肽PBS溶液中按脂质:H-Pro-A-B-C-Asp-D-OH为1∶99~99∶1的摩尔比加入脂质,在4℃条件下搅拌4小时,待完全成乳白色混悬液后,4℃以下冷冻干燥;3)DPPG和脂质-H-Pro-A-B-C-Asp-D-OH含气冻干粉的制备:将脂质-H-Pro-A-B-C-Asp-D-OH与DPPG按20∶1~1∶20的摩尔比溶解在水中,使脂质-H-Pro-A-B-C-Asp-D-OH和DPPG混合后的质量百分比浓度为0.5%,在40℃条件充分搅拌混匀约40~60分钟后,加入表面活性剂使表面活性剂的质量百分比浓度为1~20PPm的,室温下搅拌混匀后加入稳定剂,使稳定剂的质量百分比浓度为1-10%,混匀30分钟后加入冻干瓶中4℃以下低温下冷冻干燥,完全干燥后,加入0.01-1.0Mpa个大气压的气体封闭即可。
本发明所述的多肽H-Pro-A-B-C-Asp-D-Oh中的A为Ala(丙胺酸)或Arg(精胺酸)或Asn(天门冬酰胺)或Asp(天门冬胺酸)或Cys(半光胺酸)或Glu(麸胺酸)或Gln(麸胺酰胺)或Gly(甘胺酸)或Hi(组胺酸)或Ile(异白胺酸)或Leu(白胺酸)或Lys(离胺酸)或Met(甲硫胺酸)或Phe(苯丙胺酸)或Pro(脯胺酸)或Ser(丝胺酸)或Thr(酥胺酸)或Trp(色胺酸)或Tyr(酪胺酸)或Val(缬胺酸)残基;B为Ala(丙胺酸)或Arg(精胺酸)或Asn(天门冬酰胺)或Asp(天门冬胺酸)或Cys(半光胺酸)或Glu(麸胺酸)或Gln(麸胺酰胺)或Gly(甘胺酸)或Hi(组胺酸)或Ile(异白胺酸)或Leu(白胺酸)或Lys(离胺酸)或Met(甲硫胺酸)或Phe(苯丙胺酸)或Pro(脯胺酸)或Ser(丝胺酸)或Thr(酥胺酸)或Trp(色胺酸)或Tyr(酪胺酸)或Val(缬胺酸)残基;C为Ala(丙胺酸)或Arg(精胺酸)或Asn(天门冬酰胺)或Asp(天门冬胺酸)或Cys(半光胺酸)或Glu(麸胺酸)或Gln(麸胺酰胺)或Gly(甘胺酸)或Hi(组胺酸)或Ile(异白胺酸)或Leu(白胺酸)或Lys(离胺酸)或Met(甲硫胺酸)或Phe(苯丙胺酸)或Pro(脯胺酸)或Ser(丝胺酸)或Thr(酥胺酸)或Trp(色胺酸)或Tyr(酪胺酸)或Val(缬胺酸)残基;D为Ala(丙胺酸)或Arg(精胺酸)或Asn(天门冬酰胺)或Asp(天门冬胺酸)或Cys(半光胺酸)或Glu(麸胺酸)或Gln(麸胺酰胺)或Gly(甘胺酸)或rp(色胺酸)或Tyr(酪胺酸)或Val(缬胺酸)残基。Hi(组胺酸)或Ile(异白胺酸)或Leu(白胺酸)或Lys(离胺酸)或Met(甲硫胺酸)或Phe(苯丙胺酸)或Pro(脯胺酸)或Ser(丝胺酸)或Thr(酥胺酸)或Trp(色胺酸);脂质为二硬脂酸磷脂酰乙醇胺、二棕榈酸磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、胆固醇、神经鞘脂类、神经鞘氨醇,神经磷脂,神经酰胺,脑苷脂类,脑硫脂类,神经节苷脂,葡萄糖苷(脂)酰鞘氨醇,4-羟双氢(神经)鞘氨醇;L-a-磷酸卵磷脂、血小板激活因子、磷脂酰甘油,磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰肌醇-4-磷酸、磷脂酰肌醇-4、5-二磷酸盐、心磷脂,磷脂酸,溶血磷脂、与生物有关的磷脂的衍生物、磷脂酰乙醇胺的衍生物、磷酸卵磷酯的衍生物、磷脂酰肌醇和磷脂酰肌醇磷酸的衍生物、磷脂酸的衍生物、磷脂酰甘油的衍生物、心磷脂衍生物、甘油二酯的衍生物、磷脂酰乙醇胺-NH2末端基团、己酰胺基团、十二烷基酰胺基团、磷脂酰巯乙胺、丁二酰基团、戊二酰基团、十二烷羧基基团、生物素基团、磷脂酰乙二醇、生物素化的磷脂帽、脂肪酸修饰的衍生物、溶血磷脂胆碱、溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰甘油、溶血磷酸甘油酯、溶血磷脂酸、烷基磷酸胆碱、氧化的脂质、生物素化的脂质、缩醛磷脂、聚合的磷脂、卤代磷脂、氟化磷脂、同位素标记磷脂、聚PEG化的磷脂、PEG末端有功能基团的聚PEG化磷脂DSPE-mPEG-CarboxylicAcid、DSPE-mPEG-Maleimide、DSPE-mPEG-PDP、DSPE-mPEG-Amine、DSPE-mPEG-Biotin或DSPE-mPEG-BCT;表面活性剂为棕榈酸、油酸或亚麻酸;稳定剂为甘露醇、丙三醇或聚乙二醇;气体为氮气、氧气、二氧化碳、氢气、惰性气体、硫氟化物、全氟碳,全氟化的酮、全氟化的醚、六氟化硫、全氟丙烷、全氟丁烷或全氟戊烷。
按照本发明的制备方法制成的含气干粉活性剂每支药物含1-25mg的脂质-H-Pro-Ser-Nva-Gly-Asp-Trp-OH、25-1mg的DPPG、0.01-0.4mg的表面活性剂、0.1-5.0mg的稳定剂和0.01-1.0Mpa的气体。
本发明基于血栓的特异性结合分子,筛选合成了系列血栓特异性高亲和力的多肽分子,基于该分子的冻干粉报道物,其中冻干粉在一定的容器内并密封含有一定压力的气体。这样,例如,采用混合脂质形成弹性增强的微泡,其增强超声回波性能,其中高亲和力的活性分子的作用使聚集浓度增加,回波性加强。这样,应用的多肽分子是强烈的血小板抑制剂,有抗血栓形成作用。这样可保证长时间多肽,蛋白,药物的稳定性和活性,且具有使用的方便性。
附图说明
图1是本发明样品鉴定的质谱图,其中横坐标为分子量,纵坐标为百分比强度;
图2是本发明高效液相色谱图,其中横坐标为时间,纵坐标为强度;
图3是影像强度图,其中横坐标为注射前后,纵坐标为显影强度。
具体实施方式
下面结合附图对本发明作进一步详细说明。
本发明的一个有利的实施方案是基于另外的发现,即与病变组织血栓特异性结合的导向分子——合成多肽,能与血小板活化时的一个糖蛋白受体结合GPIIIa/IIb的有效部位结合,阻止血小板的进一步活化和聚集,该性质使它成为有效的显影溶栓剂。该性质是利用受体、配体结合,多肽分子拮抗了配体的激活作用而实现的。这些靶向药物可以借助合成的多肽分子有效的结合到正在形成的血栓表面,血栓的超声显影增强或原来不能显影的部位的血栓显影。另外一个利用该导向分子的有利的一个方面是能够在血栓形成的早期提供增强超声回波,血栓形成后(即陈旧性血栓),血小板激活渐弱或消失,导向分子结合渐弱,不提供增强的回波信号。本发明特别适于血栓的早期靶向定位诊断和新旧血栓的鉴别。
任何生物兼容性的气体均可存在于报道物内,并被密封在容器内。本发明所使用的气体包括在正常人体温37℃下实质上或完全为气体的任何物质,包括它们的混合物。例如,这些气体包括,空气;氮气;氧气;二氧化碳;氢气;惰性气体;硫氟化物;六氟化硒;卤代硅烷;低分子量的碳氢化合物;烷(如甲、乙、丙、丁、戊烷);环烷(如环丙烷,环丁烷,环戊烷);烯(如乙烯,丙烯,丙二烯或丁烯);炔(如乙炔,丙炔);醚;酮;酯;低分子量卤代碳氢化合物;卤代气体中的至少一个卤原子为氟所取代。本发明优选六氟化硫。
本发明报道物内的脂质原则上是任何在液相中可成膜的天然或人工合成脂质、类脂。有效的磷脂的例子包括脑磷脂和卵磷脂及其合成、半合成物,如二硬脂酸磷脂酰乙醇胺,二棕榈酸磷脂酰乙醇胺,磷脂酰甘油;
天然的磷脂包括去毒的脂质A;胆固醇;神经鞘脂类,如神经鞘氨醇,神经磷脂,神经酰胺,脑苷脂类,脑硫脂类,神经节苷脂,葡萄糖苷(脂)酰鞘氨醇,植物鞘氨醇及其衍生物(如4-羟双氢(神经)鞘氨醇);丙三醇为基本结构的脂类,如胆碱类(如L-a-磷酸卵磷脂,血小板激活因子),如磷脂酰甘油,如乙醇胺类(如磷脂酰乙醇胺),如肌醇类(如磷脂酰肌醇,磷脂酰肌醇-4-磷酸,磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸盐),心磷脂,磷脂酸,溶血磷脂。
合成类脂质包括:
1、与生物有关的脂质衍生物,
(1)如磷脂酰乙醇胺的衍生物(如不对称酰基基团上面为不同的碳链长度的脂肪酸所取代,对称的为相同的不同碳链长度的脂肪酸所取代);如下表所列
含有不对称碳链的磷脂酰乙醇胺的衍生物
碳数目 1-酰基 2-酰基16:0-18:1 棕榈酰 油酰16:0-18:2 棕榈酰 亚油酰16:0-20:4 棕榈酰 廿(烷)酸四酰16:0-22:6 棕榈酰 二十二六乙基18:0-18:1 硬脂酰 油酰18:0-18:2 硬脂酰 亚油酰18:0-20:4 硬脂酰 廿(烷)酸四酰18:0-22:6 硬脂酰 二十二六乙基 |
含有对称碳链的磷脂酰乙醇胺的衍生物
碳数目 衍生物
6:0 Dicaproyl二己酰基
8:0 Dioctanoyl二辛酰
10:0 Dicapryl二辛酸的
12:0 Dilauroyl二十二(烷)酰
14:0 Dimyristoyl二肉豆蔻酰
16:0 Dipalmitoyl二棕榈酰
16:0[(CH3)4] Diphytanoyl二植烷酰
16:1 Dipalmitoleoyl二棕榈油酰(基)
17:0 Diheptadecanoyl二-十七烷酰
18:0 Distearoyl二硬脂酰
18:1(delta 9-cis) Dioleoyl二油酰
18:1(delta 9-trans) Dielaidoyl二反油酰
18:2 Dilinoeoyl二亚油酰
18:3 Dilinolenoyl二亚麻油酰
20:4 Diarachidonoyl二花生四烯酰
Docosa-hexaenoyl
22:6
二二十二-六乙基
(2)磷酸卵磷酯的衍生物
含有不对称脂肪酸链的磷酸卵磷酯的衍生物
碳数目 | 1-酰基 | 2-酰基 |
14:0-16:0 | Myristoyl十四酰 | Palmitoyl |
14:0-18:0 | Myristoyl | Stearoyl十八(烷)酰 |
16:0-14:0 | Palmitoyl十六酰 | Myristoyl十四酰 |
16:0-18:0 | Palmitoyl十六酰 | Stearoyl十八(烷)酰 |
16:0-18:1 | Palmitoyl十六酰 | Oleoyl油酰 |
16:0-18:2 | Palmitoyl十六酰 | Linoleoyl亚油酰 |
16:0-20:4 | Palmitoyl十六酰 | Arachidonoyl花生四烯酰 |
16:0-22:6 | Palmitoyl十六酰 | Docosahexaenoyl二十二-六乙基 |
18:0-14:0 | Stearoyl十八(烷)酰 | Myristoyl十四酰 |
18:0-16:0 | Stearoyl十八(烷)酰 | Palmitoyl十六酰 |
18:0-18:1 | Stearoyl十八(烷)酰 | Oleoyl油酰 |
18:0-18:2 | Stearoyl十八(烷)酰 | Linoleoyl亚油酰 |
18:0-20:4 | Stearoyl十八(烷)酰 | Arachidonoyl花生四烯酰 |
18:0-22:6 | Stearoyl十八(烷)酰 | Docosahexaenoyl二十二-六乙基 |
18:1-14:0 | Oleoyl油酰 | Myristoyl十四酰 |
18:1-16:0 | Oleoyl油酰 | Palmitoyl十六酰 |
18:1-18:0 | Oleoyl油酰 | Stearoyl十八(烷)酰 |
含有对称脂肪酸链的磷酸卵磷酯的衍生物
碳数目 | 衍生物 |
3:0 | Propionoyl丙酰 |
4:0 | Butanoyl丁酰 |
5:0 | Pentanoyl戊酰 |
6:0 | Caproyl己酰基 |
7:0 | Heptanoyl庚酰 |
8:0 | Capryloyl辛酰(基) |
9:0 | Nonanoyl壬酰 |
10:0 | Capryl辛酰 |
11:0 | Undecanoyl癸酰 |
12:0 | Lauroyl十二(烷)酰 |
13:0 | Tridecanoyl十三(烷)酰 |
14:0 | Myristoyl十四酰 |
15:0 | Pentadecanoyl十五酰 |
16:0 | Palmitoyl十六酰 |
16:0[(CH3)4] | Phytanoyl植烷酰 |
17:0 | Heptadecanoyl十七烷酰 |
18:0 | Stearoyl十八(烷)酰 |
19:0 | Nonadecanoyl十 |
九(烷)酰 | |
20:0 | Arachidoyl廿(烷)酰 |
21:0 | Heniecosanoyl廿一(烷)酰 |
22:0 | Behenoyl廿二(烷)酰 |
23:0 | Trucisanoyl廿三(烷)酰 |
24:0 | Lignoceroyl二十四(烷)酰 |
碳数目 | 衍生物 |
14:1 | 9-cis-tetradecenoic9-顺-十四烯 |
14:1 | 9-trans-tetradecenoic9-反-十四烯 |
16:1 | 9-cis-hexadecenoic9-顺-十六碳烯 |
16:1 | 9-trans-hexadecenoic9-反-十六碳烯 |
18:1 | 6-cis-octadecenoic6-顺-十八碳烯 |
18:1 | 9-cis-octadecenoic9-顺-十八碳烯 |
18:1 | 9-trans-octadecenoic9-反-十八碳烯 |
18:2 | 9-cis-12-cis-octadecadienoic9-顺-12-顺-十八碳二烯 |
18:3 | 9-cis-12-cis-15-cis-octadecatrienoic9-顺-12-顺-15-顺十八碳三烯 |
20:1 | 11-cis-eicosenoic11-顺-二十碳烯 |
20:4 | 5,8,11,14(all-cis) |
eicosatetraenoic5,8,11,14-全顺-二十碳烯 | |
22:1 | 13-cis-docosenoic13-顺-二十二碳烯 |
22:6 | 4,7,10,13,16,19(all-cis)docosahexaenoic4,7,10,13,16,19-全顺-二十二碳六烯 |
24:1 | 15-cis-tetracosenoic15-顺-二十四碳烯 |
(3)磷脂酰肌醇和磷脂酰肌醇磷酸的衍生物
1,2-Dioctanoyl-sn-Glycero-3-[Phosphoinositol-4,5-Bisphosphate]
1,2-二辛酰-甘油-3-[磷酸肌醇-4,5-二磷酸盐(酯)]
1,2-Dioctanoyl-sn-Glycero-3-[Phosphoinositol-3,5-Bisphosphate]
1,2-二辛酰-甘油-3-[磷酸肌醇-3,5-二磷酸盐(酯)]
1,2-Dioctanoyl-sn-Glycero-3-[Phosphoinositol-3,4-Bisphosphate]
1,2-二辛酰-甘油-3-[磷酸肌醇-3,4-二磷酸盐(酯)]
1,2-Dioctanoyl-sn-Glycero-3-[Phosphoinositol-3,4,5-Trisphosphate]
1,2-二辛酰-甘油-3-[磷酸肌醇-3,4,5-三磷酸盐(酯)]
L-α-Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate(brain)
L-α-磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸盐(酯)(脑)
L-α-Phosphatidylinositol-4-phosphate(brain)
L-α-磷脂酰肌醇-4-磷酸盐(酯)(脑)
L-α-Phosphatidylinositol(liver)
L-α-磷脂酰肌醇(肝)
L-α-Phosphatidylinositol(soy)
L-α-磷脂酰肌醇(大豆)
(4)磷脂酸的衍生物
含不对称脂肪酸链的磷脂酸的衍生物
碳数目 | 1-酰基 | 2-酰基 |
16:0-18:1 | Palmitoyl棕榈酰 | Oleoyl油酰 |
16:0-18:2 | Palmitoyl棕榈酰 | Linoleoyl亚油酰 |
16:0-20:4 | Palmitoyl棕榈酰 | Arachidonoyl花生四烯酰 |
16:0-22:6 | Palmitoyl棕榈酰 | Docosahexaenoyl |
18:0-18:1 | Stearoyl硬脂酰 | Oleoyl油酰 |
18:0-18:2 | Stearoyl硬脂酰 | Linoleoyl亚油酰 |
18:0-20:4 | Stearoyl硬脂酰 | Arachidonoyl花生四烯酰 |
18:0-22:6 | Stearoyl硬脂酰 | Docosahexaenoyl二十二-六乙基酰 |
含对称脂肪酸链的磷脂酸的衍生物
碳链 | 衍生物 |
6:0 | Dicaproyl二己酰基 |
8:0 | Dicapryloyl二辛酰 |
10:0 | Dicaopryl二辛酸 |
12:0 | Dilauroyl二十二(烷)酰 |
14:0 | Dimyristoyl二肉豆蔻酰 |
16:0 | Dipalmitoyl二棕榈酰 |
16:0[(CH3)4] | Diphytanoyl二植烷酰 |
17:0 | Diheptadecanoyl二-十七烷酰 |
18:0 | Distearoyl二硬脂酰 |
18:1 | Dioleoyl二油酰 |
18:2 | Dilinoleoyl二亚油酰 |
20:4 | Diarachidonoyl二花生四烯酰 |
22:6 | Didocosahexaenoyl二-二十二-六乙基酰 |
(5)磷脂酰甘油的衍生物
含不对称脂肪酸链的磷脂酰甘油的衍生物
碳数目 1-酰基 2-酰基16:0-18:1 棕榈酰 油酰16:0-18:2 棕榈酰 亚油酰16:0-20:4 棕榈酰 廿(烷)酸四酰16:0-22:6 棕榈酰 二十二六乙基18:0-18:1 硬脂酰 油酰18:0-18:2 硬脂酰 亚油酰18:0-20:4 硬脂酰 廿(烷)酸四酰18:0-22:6 硬脂酰 二十二六乙基 |
含对称脂肪酸链的磷脂酰甘油的衍生物
碳数目 衍生物
Dicaproyl二
6:0
己酰基
Dioctanoyl
8:0
二辛酰
Dicapryl二
10:0
辛酸的
12:0 Dilauroyl二十二(烷)酰
Dimyristoyl二
14:0
肉豆蔻酰
Dipalmitoyl二
16:0
棕榈酰
Diphytanoyl二
16:0[(CH3)4]
植烷酰
Dipalmitoleoyl二
16:1
棕榈油酰(基)
Diheptadecanoyl二-十七
17:0
烷酰
Distearoyl二
18:0
硬脂酰
Dioleoyl二
18:1(delta 9-cis)
油酰
18:1(delta 9-trans) Dielaidoyl二反油酰
18:2 Dilinoeoyl二亚油酰
Dilinolenoyl二亚麻油
18:3
酰
Diarachidonoyl二
20:4
花生四烯酰
Docosa-hexaenoyl
22:6
二-二十二-六乙基
(6)心磷脂衍生物:
碳链 | 衍生物 |
14:0 | Tetramyristoyl4-十四酰 |
14:0 | Tetramyristoyl4-十四酰 |
18:1 | Tetra oleoyl4-油酰 |
(7)甘油二酯的衍生物:
衍生物 |
1-Oleoyl-2-Acetoyl-sn-Glycerol1-油酰-2-丙酰-sn-丙三醇 |
1,2-Dioctanoyl-sn-Glycerol1,2-二辛酰-sn-丙三醇 |
1,2-Didecanoyl-sn-Glycerol1,2-二癸酰-sn-丙三醇 |
1,2-Dilauroyl-sn-Glycerol1,2-二月硅酰-sn-丙三醇 |
1,2-Dimyristoyl-sn-Glycerol1,2-二肉豆蔻酰-sn-丙三醇 |
1,2-Dipalmitoyl-sn-Glycerol1,2-二棕榈酰-sn-丙三醇 |
1,2-Dioleoyl-sn-Glycerol1,2-二油酰-sn-丙三醇 |
1-Palmitoyl-2-Oleoyl-sn-Glycerol1-棕榈酰-2-油酰-sn-丙三醇 |
1-Stearoyl-2-Linoleoyl-sn-Glycerol1-硬脂酰-2-亚油酰-sn-丙三醇 |
1-Stearoyl-2-Arachidonoyl-sn-Glycerol1-硬脂酰-2-花生四烯酰-sn-丙三醇 |
衍生物 |
1,2-Dioctanoyl Ethylene Glycol(8:0EG)1,2-二辛酰乙二醇(8:0EG) |
1,2-Dicapryl Ethylene Glycol(10:0EG)1,2-二辛酸的乙二醇(10:0EG) |
1,2-Dilauroyl Ethylene Glycol(12:0EG)1,2-二月硅酰乙二醇(12:0EG) |
1,2-Di myristoyl Ethylene Glycol(14:0EG)1,2-二肉豆蔻酰乙二醇(14:0EG) |
1,2-Dipalmitoyl Ethylene Glycol(16:0EG)1,2-二棕榈酰乙二醇(16:0EG) |
1,2-Dioleoyl Ethylene Glycol(18:1EG)1,2-二油酰乙二醇(18:0EG) |
2.头部含有修饰基团的衍生物
具有与蛋白、肽、药物连接的功能基团的衍生物,如下图所示
(1)磷脂酰乙醇胺Phosphatidylethanolamine,-NH2末端基团Phosphatidylethanolamine
(2)、N-Caproylamine-PE,己酰胺基团
N-Caproylamine-PE
(3)、N-Dodecanylamine-PE十二烷基酰胺基团
N-Dodecanylamine-PE
4、Phosphatidyl thioethanol 磷脂酰巯乙胺
Phosphatidylthioethanol
5、N-MCC-PE
N-MCC-PE
6、N-MPB-PE
N-MPB-PE
7、N-PDP-PE
N-PDP-PE
8、N-Succinyl-PE丁二酰基团
N-Succinyl-PE
9、N-Glutaryl-PE戊二酰基团
N-Glutaryl-PE
10、N-Dodecanyl-PE十二烷羧基基团
N-Dodecanyl-PE
11、N-Biotinyl-PE生物素基团
N-Biotinyl-PE
12、Phosphatidyl Ethylene Glycol磷脂酰乙二醇
Phosphatidyl Ethylene Glycol
13、N-Biotinyl Cap-PE生物素化的磷脂帽
N-Biotinyl Cap-PE
3.另外含有两个以上功能首基的衍生物:如烷基磷酸盐衍生物,甲基衍生物。PH敏感的脂质,如二葡基甘油二酯-琥珀酸盐(丁二酸盐)。
本发明优选的功能基团为苯丙三唑碳酸酯(BCT),如下图:
脂肪酸修饰的衍生物
溶解磷脂类,如溶血磷脂胆碱,溶血磷脂酰乙醇胺,溶血磷脂酰甘油,溶血磷酸甘油酯,溶血磷脂酸;烷基磷酸胆碱;氧化的脂质;生物素化的脂质;缩醛磷脂;聚合的磷脂(如丁二炔磷脂);卤代磷脂;氟化磷脂;同位素标记磷脂(如氘标记);聚PEG化的磷脂;PEG末端有功能基团的聚PEG化磷脂,如(DSPE-mPEG-CarboxylicAcid,DSPE-mPEG-Maleimide,DSPE-mPEG-PDP,DSPE-mPEG-Amine,DSPE-mPEG-Biotin,DSPE-mPEG-BCT)。本发明优选DSPE-mPEG-BCT。另外,本发明优选两种、两种以上的脂质按比例混合形成干粉剂的主要成分,优选的另外一种脂质为DPPG。
本发明报道物内所说的表面活性剂原则上可以是任何形式的膜形成材料。例如,阴离子表面活性剂(如羧酸盐类,硫酸酯盐类,磺酸盐类,磷酸酯盐类);阳离子表面活性剂(如胺盐类,季铵盐型,氨基酸型,甜菜碱型);非离子型表面活性剂(如聚乙二醇型,多元醇型);葡萄糖酸钠;硬脂酸锌;脂肪酸类(如油酸,亚油酸,棕榈酸)。
本发明优选棕榈酸。
本发明报道物所说的稳定剂(保护剂)原则上可以是任何冻干粉针剂的保护剂。例如醇类(如脂肪族醇,丁醇,丙三醇);多羟基化合物(如甘油);糖类(如蔗糖,甘露糖醇,葡聚糖);聚乙二醇(如聚乙二醇1000-10000)。优选聚乙二醇。
本发明报道物的干粉制剂在水中相当容易的重构,加入溶剂(例如无菌蒸馏水),在密闭的容器内(优选5-20ml注玻璃瓶),用手振荡约30秒。产生的微泡的大小是均匀的,达到了相当好的可控的大小和比利分配范围。冷冻干燥物的优势,在于蛋白、多肽类的药物可以保存相当长的时间活性,本发明的实验已经证实在4℃条件下,药物活性可以稳定保存18个月以上。水中重构产生的微泡弥散物可在密闭的容器内保存至少数个小时。
本发明提供了多肽导向的血栓靶向定位成象的报道物,另一个有效地实施例通过该报道物携带溶栓性治疗性药物。虽然在例如CN1234742A、CN1302211A和WO-A-9507072中已经提出了将超声造影剂和药物组合,但这些产品缺乏与位点具特异性的载体,或已有载体(配体),但载体(配体)均为公开。本发明配体(多肽)为本发明所专有,对血栓上的糖蛋白受体具有高度亲和力和特异性。按照本发明所利用的溶栓治疗性药物可在微泡的内部被携带,或附着在或掺入到微泡的膜上,部分药物可在干粉剂中最终溶于溶剂中。这样,治疗药物可通过本文提到的活性基团共价结合或离子键结合,或物理性的与报道物混合在一起。
本发明有用的药物的代表性例子包括组织抑制因子如单克隆抗体及其片段;血小板抑制剂如凝血酶受体抑制剂,GP IIb/IIIa受体抑制剂(如阿昔单抗),ADP受体抑制剂,前列腺素,阿司匹林,磷酸二酯酶抑制剂;组织因子,肝素,水蛭素;t-PA,尿激酶,纤溶酶,链激酶,rt-纤溶酶原激活物,r-葡萄球菌激酶,阿尼普酶。
按照本发明的产品,可用于体外诊断系统,如体外血栓诊断试剂盒。在体外本发明利用有效的靶分子和那些已知的血栓诊断技术、方法,利用荧光标记技术、纳米标记技术等实现体外血栓诊断。
按照本发利用的脂质(衍生物)具有连接基团,官能团则与连接基团相连,模式为:脂质-连接基团-官能团,本发明优选脂质-mPEG(聚乙二醇)-官能团。mPEG为目前生物技术和生物药物应用中研究较多的一种聚合物,PEG在水中有良好的溶解性,每个PEG与两个或三个水分子结合而高度水化,可阻止PEG修饰物表面被其它聚合物或蛋白质吸附或遮盖,另外PEG对蛋白质和细胞的活性无损,共价结合的PEG为非免疫原性和非抗原性,PEG修饰对修饰分子的化学性质、活性影响很小,PEG连接物可使体内网状内皮系统的摄取减少。本发明所用的PEG选用合适的分子量,例如200道尔顿和20千道尔顿之间。优选3400道尔顿。
由于本发明的导向分子及其成分可以允许其它造影剂组件如X线造影剂,光造影剂,放射性造影剂,磁共振造影剂连接在报道物上,因此本发明的诊断和/或治疗药物也包括上述情况。
实施例1:DSPE DPPG含气冻干粉的制备与微泡重建
将DSPE∶DPPG按1∶5(摩尔比)溶解在水中,在40℃条件充分混匀约40-60分钟。显微镜镜检没有大的颗粒后,加入8PPm的棕榈酸表面活性剂,室温下混匀15分钟;后加入PEG4000作为稳定剂,混匀30分钟;后加入冻干瓶中低温下冷冻干燥,完全干燥后,加入1个大气压的六氟化硫气体封闭。重新加入溶剂(蒸馏水)约10倍体积,振荡形成含有微泡的悬液,粒度分析仪分析微泡特性。如下:
·浓度 2-5×108/ml
·D50 4.0μm
·90%阈值 8μm
·SF6包被体积 8μl/ml
·pH: 6.0 to 6.5
·重构后稳定性: 6hours
实施例2:包含DPPG和DSPE-PEG3400-BTC-H-Pro-Ser-Nva-Gly-Asp-Trp-OH含气冻干粉及生物评估
该实施例为导向型微泡,该微泡含有线性结构的本发明权利要求的多肽分子。
1)多肽H-Pro-Ser-Nva-Gly-Asp-Trp-Oh的合成
首先采用1mmol的氨基酸试剂瓶,在自动化肽合成仪上用Fmoc树脂以0.1mmol的规模将氨基酸合成多肽,在合成多肽之前用HBTU预活化所有氨基酸,将合成的多肽置于TFA溶液中2-3小时,可从树脂上同时移走肽和侧链保护基,得到100mg粗品,再以5ml/分钟的流量及20-40%B梯度,用制备型HPLC纯化所得的粗品得89mg;冷冻干燥后,将获得纯品进行分析型HPLC分析和质谱法鉴定,如图1,预期分子量656.6,实测656.57,参见图2,其纯度为98.2%。
2)DSPE-PEG3400-BTC-H-Pro-Ser-Nva-Gly-Asp-Trp-OH的合成
先将多肽溶入预冷的PBS中搅拌直至完全溶解,使多肽的终浓度为0.1mol/L,室温放凉,在4℃下预冷2小时,在预冷的多肽PBS溶液中按DSPE-PEG3400-BTC:H-Pro-Ser-Nva-Gly-Asp-Trp-OH摩尔比为5∶1的摩尔比加入脂质,在4℃条件下搅拌4小时,待完全成乳白色混悬液后,冷冻干燥,由质谱法和磁共振确认形成产物的结构;
3)DPPG和DSPE-PEG3400-BTC-H-Pro-Ser-Nva-Gly-Asp-Trp-OH含气冻干粉的制备
将DSPE-PEG3400-BTC-H-Pro-Ser-Nva-Gly-Asp-Trp-OH与DPPG按1∶5的摩尔比溶解在水中,使DSPE-PEG3400-BTC-H-Pro-Ser-Nva-Gly-Asp-Trp-OH和DPPG混合后的质量百分比浓度为0.5%,在40℃条件充分搅拌混匀约40-60分钟后,加入8Ppm的棕榈酸表面活性剂,室温下搅拌混匀后加入1mgPEG4000作为稳定剂,混匀30分钟后加入冻干瓶中低温下冷冻干燥,完全干燥后,加入0.01-1.0Mpa个大气压的六氟化硫气体封闭,重新加入溶剂(蒸馏水)约10倍体积,振荡形成含有微泡的悬液,粒度分析仪分析微泡特性。如下:
·浓度 2-5×108/ml
·D50 4.0μm
·90%阈值 8μm
·SF6包被体积 8μl/ml
·pH: 6.0 to 6.5
·重构后稳定性: 6hours
具有导向分子的含有DSPE、DPPG的干粉剂重构后的充气微泡的体外研究:血栓结合试验研究
取人外周静脉血,将静脉血涂于玻片上,室温下干燥。取c)所形成的微泡悬液,悬液逐滴滴于玻片,悬液完全覆盖玻片上形成的血栓。37℃孵育10分钟,PBS冲洗三次,显微镜下观察微泡结合血栓情况。
狗体内血栓成像实验
用戊巴比妥麻醉20公斤左右的杂种狗。分离暴露两侧髂静脉,两侧髂静脉内人工造血栓。取c)所形成的微泡悬液经上肢静脉注射后,分别在注射0,1,3,5,10,15,25分钟采用多普勒超声成像观察血栓强度变化。并与实施例1的干粉剂重构后的微泡进行比较,参见图3,采用本发明的影像强度达到1200。
实施例3:包含DPPG和DSPE-PEG3400-BTC-抗纤维蛋白原单抗的含气冻干粉
利用实施例2中所描述的相同的方法制备含有抗纤维蛋白原单克隆抗体的冻干粉。另外,抗纤维蛋白原单克隆抗体可以物理性或通过离子键分散在干粉剂中。
实施例4:包含DPPG和DSPE-PEG3400-BTC-抗纤维蛋白单抗的含气冻干粉
利用实施例2中所描述的相同的方法制备含有抗纤维蛋白单克隆抗体的冻干粉。另外,抗纤维蛋白单克隆抗体可以物理性或通过离子键分散在干粉剂中。
实施例5:包含DPPG和DSPE-PEG3400-BTC-抗GP IIb/IIIa单抗的含气冻干粉
利用实施例2中所描述的相同的方法制备含有抗GP IIb/IIIa受体的单克隆抗体的冻干粉。另外,抗GP IIb/IIIa受体的单克隆抗体可以物理性或通过离子键分散在干粉剂中。
实施例6:包含DPPG和DSPE-PEG3400-BTC-H-Pro-Ser-Nva-Gly-Asp-Trp-OH和t-PA官能团化的含气冻干粉
A、血栓亲和性的脂肽DSPE-PEG3400-BTC-H-Pro-Ser-Nva-Gly-Asp-Trp-OH的合成利用实施例21)和22)中所描述的相同的方法制备合成血栓亲和脂肽。
B、具有的t-PA的修饰
1mg t-PA溶于0.2ml碳酸铵缓冲液中(a)。0.4mg硫-SMPB溶解在0.5mlDMSO中(b)。a液与b液室温下混合振荡反应1小时。层析柱纯化分离收集,质谱法,磁共振鉴定合成物,冷冻干燥成干粉状。
C、磷脂酰巯乙胺-硫-SMPB-t-PA的合成
室温下磷脂酰巯乙胺与B按摩尔比3∶1比例溶于PBS中振荡1-2小时,制备型HPLC分离纯化,质谱法鉴定纯化产物。
D、包含DPPG和DSPE-PEG3400-BTC-H-Pro-Ser-Nva-Gly-Asp-Trp-OH和t-PA官能团化的含气冻干粉的制备
利用施例23)中所描述的相同的方法制备含有t-PA官能团化的含气冻干粉。t-PA可以物理性或通过离子键分散在干粉剂中。
实施例7:包含DPPG和DSPE-PEG3400-BTC-H-Pro-Ser-Nva-Gly-Asp-Trp-OH和尿激酶官能团化的含气冻干粉
利用实施例6中所描述的相同的方法制备含有尿激酶官能团化的,或离子键,或物理性分散的含气冻干粉剂。
实施例8:包含DPPG和DSPE-PEG3400-BTC-H-Pro-Ser-Nva-Gly-Asp-Trp-OH和链激酶官能团化的含气冻干粉
利用实施例6中所描述的相同的方法制备含有链激酶官能团化的,或离子键,或物理性分散的含气冻干粉剂。
实施例9:包含DPPG和DSPE-PEG3400-BTC-凝血酶的含气冻干粉
利用实施例2中所描述的相同的方法,多肽分子被凝血酶取代合成包含DPPG和DSPE-PEG3400-BTC-凝血酶的含气冻干粉,分离纯化鉴定方法也同实施例2的方法。
Claims (7)
1、一种血栓诊断和/或治疗用含气干粉活性剂的制备工艺,其特征在于:
1)多肽H-Pro-A-B-C-Asp-D-Oh的合成
首先采用1mmol的氨基酸试剂瓶,在自动化肽合成仪上用Fmoc树脂以0.1mmol的规模将氨基酸合成多肽,在合成多肽之前用HBTU预活化氨基酸,将合成的多肽置于TFA溶液中2-3小时,得到粗品,再以5ml/分钟的流量及20-40%B梯度,用制备型HPLC纯化所得的粗品;
2)脂质-H-Pro-Ser-Nva-Gly-Asp-Trp-OH的合成
先将所述的多肽融入预冷的PBS中搅拌直至完全溶解,使多肽的终浓度为0.1mol/L,室温放凉,在4℃下预冷2小时,在预冷的多肽PBS溶液中按脂质:H-Pro-A-B-C-Asp-D-OH为1∶99~99∶1的摩尔比加入脂质,在4℃条件下搅拌4小时,待完全成乳白色混悬液后,4℃以下冷冻干燥;
3)DPPG和脂质-H-Pro-A-B-C-Asp-D-OH含气冻干粉的制备
将脂质-H-Pro-A-B-C-Asp-D-OH与DPPG按20∶1~1∶20的摩尔比溶解在水中,使脂质-H-Pro-A-B-C-Asp-D-OH和DPPG混合后的质量百分比浓度为0.5%,在40℃条件充分搅拌混匀约40~60分钟后,加入表面活性剂使表面活性剂的质量百分比浓度为1~20PPm的,室温下搅拌混匀后加入稳定剂,使稳定剂的质量百分比浓度为1-10%,混匀30分钟后加入冻干瓶中4℃以下低温下冷冻干燥,完全干燥后,加入0.01-1.0Mpa个大气压的气体封闭即可。
2、根据权利要求1所述的血栓诊断和/或治疗用含气干粉活性剂的制备工艺,其特征在于:所说的多肽H-Pro-A-B-C-Asp-D-Oh中的A为Ala(丙胺酸)或Arg(精胺酸)或Asn(天门冬酰胺)或Asp(天门冬胺酸)或Cys(半光胺酸)或Glu(麸胺酸)或Gln(麸胺酰胺)或Gly(甘胺酸)或Hi(组胺酸)或Ile(异白胺酸)或Leu(白胺酸)或Lys(离胺酸)或Met(甲硫胺酸)或Phe(苯丙胺酸)或Pro(脯胺酸)或Ser(丝胺酸)或Thr(酥胺酸)或Trp(色胺酸)或Tyr(酪胺酸)或Val(缬胺酸)残基;B为Ala(丙胺酸)或Arg(精胺酸)或Asn(天门冬酰胺)或Asp(天门冬胺酸)或Cys(半光胺酸)或Glu(麸胺酸)或Gln(麸胺酰胺)或Gly(甘胺酸)或Hi(组胺酸)或Ile(异白胺酸)或Leu(白胺酸)或Lys(离胺酸)或Met(甲硫胺酸)或Phe(苯丙胺酸)或Pro(脯胺酸)或Ser(丝胺酸)或Thr(酥胺酸)或Trp(色胺酸)或Tyr(酪胺酸)或Val(缬胺酸)残基;C为Ala(丙胺酸)或Arg(精胺酸)或Asn(天门冬酰胺)或Asp(天门冬胺酸)或Cys(半光胺酸)或Glu(麸胺酸)或Gln(麸胺酰胺)或Gly(甘胺酸)或Hi(组胺酸)或Ile(异白胺酸)或Leu(白胺酸)或Lys(离胺酸)或Met(甲硫胺酸)或Phe(苯丙胺酸)或Pro(脯胺酸)或Ser(丝胺酸)或Thr(酥胺酸)或Trp(色胺酸)或Tyr(酪胺酸)或Val(缬胺酸)残基;D为Ala(丙胺酸)或Arg(精胺酸)或Asn(天门冬酰胺)或Asp(天门冬胺酸)或Cys(半光胺酸)或Glu(麸胺酸)或Gln(麸胺酰胺)或Gly(甘胺酸)或rp(色胺酸)或Tyr(酪胺酸)或Val(缬胺酸)残基。Hi(组胺酸)或Ile(异白胺酸)或Leu(白胺酸)或Lys(离胺酸)或Met(甲硫胺酸)或Phe(苯丙胺酸)或Pro(脯胺酸)或Ser(丝胺酸)或Thr(酥胺酸)或Trp(色胺酸)。
3、根据权利要求1所述的血栓诊断和/或治疗用含气干粉活性剂的制备工艺,其特征在于:所说的脂质为二硬脂酸磷脂酰乙醇胺、二棕榈酸磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、胆固醇、神经鞘脂类、神经鞘氨醇,神经磷脂,神经酰胺,脑苷脂类,脑硫脂类,神经节苷脂,葡萄糖苷(脂)酰鞘氨醇,4-羟双氢(神经)鞘氨醇;L-a-磷酸卵磷脂、血小板激活因子、磷脂酰甘油,磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰肌醇-4-磷酸、磷脂酰肌醇-4、5-二磷酸盐、心磷脂,磷脂酸,溶血磷脂、与生物有关的磷脂的衍生物、磷脂酰乙醇胺的衍生物、磷酸卵磷酯的衍生物、磷脂酰肌醇和磷脂酰肌醇磷酸的衍生物、磷脂酸的衍生物、磷脂酰甘油的衍生物、心磷脂衍生物、甘油二酯的衍生物、磷脂酰乙醇胺-NH2末端基团、己酰胺基团、十二烷基酰胺基团、磷脂酰巯乙胺、丁二酰基团、戊二酰基团、十二烷羧基基团、生物素基团、磷脂酰乙二醇、生物素化的磷脂帽、脂肪酸修饰的衍生物、溶血磷脂胆碱、溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰甘油、溶血磷酸甘油酯、溶血磷脂酸、烷基磷酸胆碱、氧化的脂质、生物素化的脂质、缩醛磷脂、聚合的磷脂、卤代磷脂、氟化磷脂、同位素标记磷脂、聚PEG化的磷脂、PEG末端有功能基团的聚PEG化磷脂DSPE-mPEG-Carboxylic Acid、DSPE-mPEG-Maleimide、DSPE-mPEG-PDP、DSPE-mPEG-Amine、DSPE-mPEG-Biotin或DSPE-mPEG-BCT。
4、根据权利要求1所述的血栓诊断和/或治疗用含气干粉活性剂的制备工艺,其特征在于:所说的表面活性剂为棕榈酸、油酸或亚麻酸。
5、根据权利要求1所述的血栓诊断和/或治疗用含气干粉活性剂的制备工艺,其特征在于:所说的稳定剂为甘露醇、丙三醇或聚乙二醇。
6、根据权利要求1所述的血栓诊断和/或治疗用含气干粉活性剂的制备工艺,其特征在于:所说的气体为氮气、氧气、二氧化碳、氢气、惰性气体、硫氟化物、全氟碳,全氟化的酮、全氟化的醚、六氟化硫、全氟丙烷、全氟丁烷或全氟戊烷。
7、按照权利要求1所述的血栓诊断和/或治疗用含气干粉活性剂的制备工艺制得的活性剂,其特征在于:每支药物含1-25mg的脂质-H-Pro-Ser-Nva-Gly-Asp-Trp-OH、25-1mg的DPPG、0.01-0.4mg的表面活性剂、0.1-5.0mg的稳定剂和0.01-1.0Mpa的气体。
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN101745126B (zh) * | 2008-12-10 | 2012-04-25 | 温州医学院 | 一种包载水溶性药物超声造影剂的制备方法 |
CN105854035A (zh) * | 2016-03-29 | 2016-08-17 | 中山大学附属第三医院 | 一种单链抗体修饰的靶向微泡超声造影剂的制备方法 |
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ZA907743B (en) * | 1989-10-03 | 1991-07-31 | Merrell Dow Pharma | Radiolabeled anticoagulant peptides |
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Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101745126B (zh) * | 2008-12-10 | 2012-04-25 | 温州医学院 | 一种包载水溶性药物超声造影剂的制备方法 |
CN105854035A (zh) * | 2016-03-29 | 2016-08-17 | 中山大学附属第三医院 | 一种单链抗体修饰的靶向微泡超声造影剂的制备方法 |
CN107586316A (zh) * | 2017-08-25 | 2018-01-16 | 北京博肽聚康生物技术有限公司 | 具有血栓溶解活性的多肽 |
WO2019037482A1 (zh) * | 2017-08-25 | 2019-02-28 | 北京博肽聚康生物技术有限公司 | 具有血栓溶解活性的多肽 |
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