CN1709409B - 抗肿瘤试剂及其制备方法以及含有该试剂的饮料和食品 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了抗肿瘤试剂、使用该试剂的饮料和食品及该抗肿瘤试剂的制造方法。本发明的抗肿瘤试剂对人肿瘤细胞A4573及小鼠黑瘤B16细胞表现出特异作用。另外,根据活血细胞分析法进行显微镜观察发现其使血液中各红细胞分离且呈正圆形,并使棘红细胞等异常形状的红细胞变为正常,更使白细胞的直径变为红细胞的2.5倍以上。该抗肿瘤试剂除对肿瘤具有免疫活性外,还表现出多种免疫活性。含有所述抗肿瘤试剂的饮料和食品可作为保健食品等等。所述抗肿瘤试剂的制造方法包括:将麦胚芽等在110℃用蒸汽加热3小时后,在30℃下用曲类等微生物发酵48小时。
Description
技术领域
本发明涉及抗肿瘤试剂、其制备方法及含有该试剂的饮料和食品。更具体地,本发明涉及以曲类等微生物使麦胚芽、米胚芽和大豆胚芽等等发酵所得的抗肿瘤试剂、含有该试剂的饮料和食品及该抗肿瘤试剂的制备方法。本发明广泛应用于保健食品及疾病治疗等。
背景技术
一直以来,虽然有许多合成化合物的免疫增强剂,但更优选的是即使长时间服用也无毒副作用的天然免疫增强剂。有些天然免疫增强剂及抗肿瘤试剂是已知的(参见专利文献1至3)。另外,本发明人曾提出使污浊的血液变纯净的含酶食品(参见专利文献4)。
专利文献1:特开平6-9421号公报;
专利文献2:特开2000-224970号公报;
专利文献3:特开2003-335695号公报;
专利文献4:特开2001-120203号公报。
然而,现有技术中未知这样一类天然的抗肿瘤试剂,其能够(1)使引起脑血栓、脑梗塞及肺血栓栓塞的红细胞聚集体彼此分离、且呈正圆形,且(2)短时间内修复异常形状的红细胞,使之成为正常形状,从而治疗由这些异常形状的红细胞所引起的疾病。本发明人进行了大量研究,并根据活血细胞分析法(Live Blood Analysis)进行显微镜观察,发现某些发酵产物使红细胞聚集体彼此分离、且呈正圆形,并且使白细胞增大并刺激白细胞的活动。因此,所述发酵产物不仅能预防脑血栓、脑梗塞及肺血栓栓塞,并且能增强免疫力。在该发现的基础上开发出了本发明的抗肿瘤试剂。另外,本发明的抗肿瘤试剂能在短时间内修复异常形状的红细胞,使之成为正常形状,从而治疗各种相关疾病。
在大鼠体外实验中发现本发明的抗肿瘤试剂具有抗肿瘤效果。更特别地,通过活血细胞分析法发现本发明的抗肿瘤试剂不仅可用于肿瘤免疫,还能提供广泛的免疫增强作用,从而对多种疾病有效。
发明内容
本发明提供通过使米胚芽、麦胚芽和大豆胚芽发酵得到的抗肿瘤试剂,含有该试剂的饮料和食品以及该抗肿瘤试剂的制备方法。本发明的抗肿瘤试剂能够(1)增强对肿瘤的免疫力,(2)增强白细胞活性,从而增强对肿瘤以外的各种疾病的免疫力,(3)溶解血液中的尿酸结晶及其类似物,及(4)短时间内修复异常红细胞,使之成为正常形状,从而治疗由异常形状的红细胞引起的各种疾病。
本发明提供:
1、通过将含有至少一种选自麦胚芽、大豆胚芽及米胚芽的物质的原料用一种或多种选自曲类(leaven)、酵母及乳杆菌的微生物进行发酵得到的抗肿瘤试剂。
2、如上述第1项所述的抗肿瘤试剂,其中所述试剂使至少一种给药前已经存在的选自红细胞聚集体、棘红细胞、靶形红细胞、红细胞粘连、钝锯齿状红细胞、小红细胞、大红细胞、溶血红细胞、链状排列的红细胞、卵形红细胞及被自由基损伤的红细胞的异常红细胞在使用后变为正圆形,且各红细胞呈彼此分离的状态。
3、如上述第1项或第2项所述的抗肿瘤试剂,其中所述试剂给药后使血液中的白细胞直径变为正常红细胞直径的2.2倍或更高。
4、如上述第1项或第2项所述的抗肿瘤试剂,其能消除血液中的尿酸结晶。
5、如上述第3项所述的抗肿瘤试剂,其能消除血液中的尿酸结晶。
6、如上述第1项或第2项所述的抗肿瘤试剂,其还表现出至少一种附加效果,所述效果选自缓解关节痛、增强肝脏机能、缩小子宫肌瘤、减少癌细胞、降低胆固醇、降低中性脂肪及治疗特应性皮炎。
7、如上述第3项所述的抗肿瘤试剂,其还表现出至少一种附加效果,所述效果选自缓解关节痛、增强肝脏机能、缩小子宫肌瘤、减少癌细胞、降低胆固醇、降低中性脂肪及治疗特应性皮炎。
8、如上述第4项所述的抗肿瘤试剂,其还表现出至少一种附加效果,所述效果选自缓解关节痛、增强肝脏机能、缩小子宫肌瘤、减少癌细胞、降低胆固醇、降低中性脂肪及治疗特应性皮炎。
9、如上述第5项所述的抗肿瘤试剂,其还表现出至少一种附加效果,所述效果选自缓解关节痛、增强肝脏机能、缩小子宫肌瘤、减少癌细胞、降低胆固醇、降低中性脂肪及治疗特应性皮炎。
10、含有和使用上述第1项或第2项所述的抗肿瘤试剂的饮料和食品。
11、含有和使用上述第3项所述的抗肿瘤试剂的饮料和食品。
12、含有和使用上述第4项所述的抗肿瘤试剂的饮料和食品。
13、含有和使用上述第5项所述的抗肿瘤试剂的饮料和食品。
14、含有和使用上述第6项所述的抗肿瘤试剂的饮料和食品。
15、含有和使用上述第7项所述的抗肿瘤试剂的饮料和食品。
16、含有和使用上述第8项所述的抗肿瘤试剂的饮料和食品。
17、含有和使用上述第9项所述的抗肿瘤试剂的饮料和食品。
18、上述第1项或第2项中所述的抗肿瘤试剂的制备方法,包括如下步骤:
(1)将至少一种选自麦胚芽、大豆胚芽及米胚芽的物质在50至150℃用蒸汽加热,或者将所述物质在50至150℃烘焙后用蒸汽加热;及
(2)将所得的蒸汽加热产物用至少一种选自曲类、酵母及乳杆菌的微生物进行发酵。
19、如上述第18项所述的抗肿瘤试剂的制备方法,还包括用60至100℃的热水处理所得的发酵产物的步骤。
20、上述第9项所述的抗肿瘤试剂的制备方法,包括如下步骤:
(1)将至少一种选自麦胚芽、大豆胚芽及米胚芽的物质在50至150℃用蒸汽加热,或者将所述物质在50至150℃烘焙后用蒸汽加热;及
(2)将所得的蒸汽加热产物用至少一种选自曲类、酵母及乳杆菌的微生物进行发酵。
21、如上述第20项所述的抗肿瘤试剂的制备方法,还包括用60至100℃的热水处理所得的发酵产物的步骤。
附图的简要说明
图1所示为本发明抗肿瘤试剂对人A4573尤因氏肉瘤(Ewing’ssarcoma)的抗肿瘤效果。
图2所示为本发明抗肿瘤试剂对小鼠黑瘤B16细胞的抗肿瘤效果。
图3所示为用本发明抗肿瘤试剂接种后的小鼠的体重变化。
图4所示为在摄取本发明抗肿瘤试剂的小鼠皮下接种的B16细胞的增殖情况。
图5所示为摄取本发明抗肿瘤试剂的小鼠皮下接种B16细胞后的存活天数。
图6所示为摄取本发明抗肿瘤试剂的小鼠尾静脉接种B16后的体重变化。
图7所示为尾静脉接种B16细胞19天后的小鼠肺转移细胞(pulmonary metastasis)数。
图8所示为尾静脉接种B16细胞22天后的小鼠肺转移细胞数。
图9所示为存在棘红细胞的红细胞聚集体的照片。
图10所示为各血细胞彼此分离、呈正圆形,且不合棘红细胞的状态的照片。
图11所示为血液中的红细胞为棘红细胞的照片。
图12所示为血液中各红细胞彼此分离、呈正圆形,不含棘红细胞,且白细胞大小为红细胞的3倍或以上的状态的照片。
图13所示为血液中的红细胞呈靶形及卵形红细胞状态的照片。
图14所示为血液中的靶形红细胞及卵形红细胞变为正常红细胞状态的照片。
图15所示为红细胞产生聚集且存在尿酸结晶及霉菌的状态的照片。
图16所示为血液中的各红细胞彼此分离、呈正圆形,且尿酸结晶溶解,霉菌消失,白细胞变大的状态的照片。
图17所示为血液中明显存在红细胞聚集体,且白细胞尺寸很小并为红细胞所包围的状态的照片。
图18所示为血液中的红细胞聚集体消失,各血球彼此分离、呈正圆形的正常状态的照片。
图19所示为血液中的红细胞产生聚集,且一幅画面中存在3个白细胞(粒细胞)的状态的照片。
图20所示为血液中各红细胞彼此分离、呈正圆形,淋巴B细胞为变大的活化状态的照片。
本发明优选实施方案
下面对本发明进行详细的描述。
抗肿瘤试剂(发酵产物)
本发明的抗肿瘤试剂对作为原料的麦胚芽、大豆胚芽及米胚芽的种类并无特别限制。例如,所述麦胚芽可使用大麦、小麦、薏仁(adlay)、裸麦及燕麦等等中任一种的麦胚芽。也可结合使用其中两种或更多种类型的麦胚芽。现在已知的大豆种类约为200种,其中任一种的胚芽都可使用。例如可使用黑豆、丹波黑豆及青豆等等中任一种的大豆胚芽。也可结合使用其中两种或更多种类型的大豆胚芽。另外,米胚芽也可为任意种类的米的胚芽。例如,可使用长粒种(long-grain type)、中粒种及短粒种中任一种的米胚芽。另外,也可结合使用其中两种或更多种类型的米胚芽。而且,可单独使用麦胚芽、大豆胚芽或米胚芽,也可结合使用其中两种或更多种。另外,可适当选择上述原料的配合比例。例如麦胚芽∶大豆胚芽∶米胚芽的重量比可为1∶1∶1。上述原料的重量配比优选麦胚芽∶大豆胚芽∶米胚芽等于3-6∶3-6∶2-5,更优选4-6∶4-6∶3-5,特别优选5-6∶5-6∶4-5,最优选5∶5∶4。在上述范围内,容易发酵得到具有优异性能的抗肿瘤试剂。
上述原料中,可再添加至少一种选自薏仁、大豆及糙米的物质。添加该物质时,原料的发酵效率提高,并且促进了原料分子量的降低,从而使所述抗肿瘤试剂更容易在体内吸收。该物质可直接添加,也可以破碎状或粉末状添加。以添加后的原料总重量为100%,该物质的添加比例优选为5-60%重量比,更优选为5-50%,特别优选为10-40%。添加比例在上述范围内时,发酵效率提高。
使用一种或多种选自曲类、酵母及乳杆菌的微生物对上述原料进行发酵。所用曲类能使上述原料发酵即可,并无特别的限制。可使用米曲霉(Aspergillus oryzae)及酱油曲霉(Aspergillus sojae)等曲类。可仅使用一种曲类,也可结合使用两种或更多种曲类。其中,优选使用米曲霉。
另外,所述酵母的种类只要能发酵上述原料即可,并无特别的限制。可使用酿酒酵母(Saccharomyces cerevisie)及鲁氏酵母(Saccharomyces rouxii)等。可仅使用所述酵母中的一种,也可同时使用两种或以上。这些酵母中,优选使用酿酒酵母。
另外,所述乳杆菌的种类能发酵上述原料即可,并无特别的限制。例如,乳杆菌可使用植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)、乳酸链球菌(Streptococcus lactis)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)及粪肠球菌(Enterococcus faecalis)等。可仅使用这些乳杆菌中的一种,也可结合使用两种或更多种乳杆菌。这些乳杆菌中,优选使用植物乳杆菌、唾液乳杆菌、短乳杆菌、干酪乳杆菌及嗜酸乳杆菌。
可同时培养所述曲类、酵母及乳杆菌中的两种或更多种,或用其进行发酵。
在50至150℃对所述原料进行蒸汽加热,优选60至140℃,更优选70至130℃,最优选80至120℃。因为50℃以下时,胚芽中的淀粉或蛋白质等没有充分变性为适合发酵的形式。而在150℃以上时,胚芽中的后来成为抗肿瘤试剂的有效成分容易分解。
所述蒸汽加热的方法并无特别限制,虽然可使用常规装置,但通常使用高压灭菌釜。蒸汽加热的时间并无特别的限制,但优选30至500分钟,更优选50至480分钟,特别优选70至460分钟。如果加热时间少于30分钟,则蒸汽加热可能不充分,而500分钟以上时则必要成分可能会分解。
在蒸汽加热前,也可对所述原料进行烘焙。所述烘焙方法并无特别的限制,可使用公知的方法。其中,优选使用远红外线进行烘焙。烘焙时间为30至500分钟,优选50至480分钟,更优选70至460分钟。因为30分钟以下时不能充分烘焙而使发酵效率降低,而500分钟以上时则必要成分会分解。
通常,优选将蒸汽加热后或先烘焙再蒸汽加热后的原料冷却至20至50℃,更优选23至45℃,特别优选26至40℃。将冷却后的原料与上述曲类等混合,在发酵室中发酵。发酵室的温度优选24至42℃,更优选25至41℃,特别优选26至40℃;发酵时间优选为24至72小时,更优选28至68小时,特别优选32至64小时。
上述发酵温度与发酵时间的组合则优选在24至42℃发酵24至72小时,更优选在25至41℃发酵28至68小时,特别优选在26至40℃发酵32至64小时。
此后,将所得物质从发酵室中取出,干燥得到发酵产物(抗肿瘤试剂)。可使用公知的方法进行干燥,例如热风干燥法、减压干燥法及冷冻干燥法。其中优选热风干燥法,并且在35至45℃干燥10至20小时。随后如果需要可进行灭菌。根据使用目的可将所述抗肿瘤试剂制成粉末、颗粒、片剂或胶囊等。
另外,可用热水对上述发酵产物进行处理。所述热水处理优选在60至100℃进行,更优选65至98℃,特别优选70至96℃,时间优选为5至35分钟,更优选10至30分钟,特别优选15至25分钟。有时,经热水处理过的抗肿瘤试剂与未经热水处理的试剂相比较,具有更优异的效果(参见图1及图2)。
将本发明的抗肿瘤试剂以1mg/ml的浓度加入在96孔板中培养的人A4573尤因氏肉瘤的培养液中。24小时后加入活细胞检测试剂(四唑盐:Nakarai Tesk生产),1小时后使用微板分析仪(microplate leader)(450nm)对显色反应进行检测,测定活细胞的数量。与未加本发明抗肿瘤试剂的情况(以下称为“对照组””)相比较,使用经热水处理过的抗肿瘤试剂时,活细胞数优选降至对照组活细胞数的90%或以下,更优选88%或以下,最优选85%或以下。
类似地,向96孔板中培养的小鼠黑瘤B16细胞培养液中,添加浓度为1mg/ml的本发明抗肿瘤试剂。24小时后向其中加入活细胞检测试剂(四唑盐:Nakarai Tesk生产),1小时后使用微板分析仪(450nm)检测显色反应来测定活细胞数量。与对照组相比较,使用未经热水处理的本发明抗肿瘤试剂时,活细胞数优选下降为对照组活细胞数的90%或以下,更优选88%或以下,最优选85%或以下。而使用热水处理过的本发明抗肿瘤试剂时,活细胞数优选下降为对照组活细胞数的90%或以下,更优选89%或以下,最优选88%或以下。
给5周龄的C57BL6小鼠喂食含0.4%的所述抗肿瘤试剂的固体食物,喂食2周后在其尾静脉接种B16细胞(5×105细胞/小鼠),接种22天后抗肿瘤试剂接种组的肿瘤体积优选缩小为对照组肿瘤体积的65%或以下,更优选为60%或以下,最优选为55%。
并且,接种22天后测定体重,肿瘤试剂给药组的平均体重优选为对照组的104%或以上,更优选为105%或以上,最优选为106%或以上。
另外,接种22天后,肺转移细胞数优选降低至对照组的45%或以下,更优选40%或以下,最优选35%或以下。
用上述抗肿瘤试剂(以上述方法获得的发酵产物)给药后,根据活血细胞分析法进行显微镜观察,发现血液中各红细胞变为正圆形,且彼此分离。所述活血细胞分析法即LBA(活血分析法)指用显微镜对未染色的活血液进行分析,在短时间内直接观察血液中的红细胞、诸如淋巴细胞、粒细胞及巨噬细胞等等的白细胞的方法。所述“正圆形”指通过显微镜观察时的平面形状呈基本圆形,如图10、12、14、16、18及20所示。所述“分离”指各红细胞未产生聚集的状态,如图10、12、14、16、18及20所示。
所述“血液中各红细胞呈正圆形”指全部或大部分的红细胞呈正圆形(优选90%或以上)。术语“分离”包括正圆形的红细胞平面接触,从而容易使各红细胞分离的状态。
图9显示了非正圆形的红细胞聚集形成聚集体的状态。分离成正圆形的红细胞尺寸为7至8微米。由于毛细血管的血管腔的直径约为5微米,因此如图9所示的红细胞为非分离状态的血液难以通过所述毛细血管。与之相对地,本发明的多数红细胞分离成正圆形的正常血液具有变形能力,可容易地通过所述毛细血管。因此,可预防因血流障碍引起的动脉硬化、心绞痛、脑血栓、脑梗塞、肺血栓栓塞症、心肌梗塞及心房内出血等。
另外,通过将本发明的抗肿瘤试剂(发酵产物)进行给药,可溶解血液中的尿酸结晶(参见图15)、胆固醇结晶及血小板(plaque)。溶解所述尿酸结晶等所需的时间优选在给药后90天以内,更优选60天以内,特别优选30天以内。血液中的这类尿酸结晶被认为是痛风的原因。如果尿酸结晶接触毛细血管壁,个体就会感到剧烈疼痛。在较短时间内,例如上述期限内所述疼痛即可消除。
给药后,本发明的抗肿瘤试剂(发酵产物)可使血液中的棘红细胞(参见图9及11)、靶形红细胞(参见图13)、链状排列的红细胞(参见图17)、卵形红细胞(参见图13)及被自由基损伤的红细胞等恢复为正圆形,并且通常使各红细胞彼此分离。正常的红细胞为正圆形,而棘红细胞等非正圆形的红细胞称为病态或异常红细胞。使肝脏机能下降的红细胞多为棘红细胞。对缺铁性贫血,存在许多靶形红细胞。对甲状腺异常或子宫肌瘤等引起的内分泌失调,则存在许多卵形红细胞。
图10、12、14、16、18及20显示上述各种变形的异常红细胞均可变为正常红细胞。所述异常红细胞如何变为正常红细胞的机理还没有明确的结论。但将本发明的抗肿瘤试剂(或上述方法制造的发酵产物)给药时,可产生至少一种有益效果,包括缓解胶原病引起的关节痛、增强肝脏机能、缩小子宫肌肿、减少癌细胞、降低胆固醇、降低中性脂肪及治疗特应性皮炎。
因此,将含有至少一种选自麦胚芽、大豆胚芽及米胚芽的物质的原料用至少一种选自曲类、酵母及乳杆菌的微生物进行发酵所得的发酵产物除了作为抗肿瘤试剂以外,也可用于治疗一种或多种诸如痛风、各种癌症、脑梗塞、心肌梗塞、心绞痛、胶原病、贫血、内分泌失调、高胆固醇、高中性脂肪及特应性皮炎的疾病。
使上述诸如棘红细胞的异常红细胞成为正常红细胞所需的时间优选为给药后120分钟以内,更优选为60分钟以内,特别优选30分钟以内。必须尽快使异常的红细胞变为正常。本发明的抗肿瘤试剂(发酵产物)可在较短时间内使异常血液变为正常。
将所述抗肿瘤试剂给药后,根据活血细胞分析法进行显微镜观察,发现血液中白细胞的直径优选为正常红细胞的至少2.2倍,更优选至少2.5倍,最优选至少3.0倍。本文所述的白细胞大小指根据活血细胞分析法通过显微镜观察到的平面形状的直径。
另外,将上述抗肿瘤试剂给药后,血液中的白细胞直径与给药前相比(给药后的直径/给药前的直径)优选为1.5-4倍,更优选为2.0-3.0倍。当白细胞直径处于上述范围时,白细胞活性上升,从而增强免疫力。
本发明的抗肿瘤试剂能提高血液中的白细胞活性,从而提高免疫力。已知无活性的白细胞直径较小而且活动缓慢。根据活血细胞分析法进行显微镜观察发现,将本发明的抗肿瘤试剂给药后,血液中的白细胞变大,轮廓清晰,尤其观察到巨噬细胞活跃地四处活动(参见图12左上)。另外,在白细胞中,也可观察到攻击病毒或癌细胞的淋巴T细胞及B细胞,其也具有充分的活力。图12显示了给药后白细胞增大为正常红细胞的2.5倍以上并且轮廓清晰的状态。
本发明的抗肿瘤试剂的剂量并无特别的限制。依体重、年龄及性别等可适当地给药。例如,对成人优选1000至5000mg/天,更优选2000至4000mg/天,特别优选2500至3500mg/天。上述剂量通常每天分3至4次给药。剂量不足1000mg时,抗肿瘤效果不足。而给药超过5000mg时,不能得到与用量相符的肿瘤免疫效果。由于本发明的抗肿瘤试剂来源于天然物质,因此无副作用且安全性高。
本发明的抗肿瘤试剂中,可含有一种或多种诸如小麦胚芽、糙米、海藻矿物质、淀粉、维生素和氨基酸的物质。另外,本发明的抗肿瘤试剂可直接饮用或食用。可选择地,可将其添加入饮料或食品中使用。其也可制成具有特定保健效果的保健食品,或调控活体机能的功能食品或保健饮品。
抗肿瘤试剂的制造方法
上述抗肿瘤试剂的制造方法并无特别的限制,主要依据以下的方法进行。本发明的制造方法包括:(1)将至少一种选自麦胚芽、大豆胚芽及米胚芽的原料在50至150℃用蒸汽加热,或将其在50至150℃烘焙后用蒸汽加热,以及(2)使用至少一种选自曲类、酵母及乳杆菌的微生物对蒸汽加热产物进行发酵。
在蒸汽加热步骤(1)中,如上所述用于抗肿瘤试剂的麦胚芽、大豆胚芽及米胚芽均可使用。同时,上述的原料配合比例也可使用。上述的蒸汽加热方法也可使用。另外,蒸汽加热前也可在上述温度下对麦胚芽等等进行烘焙。可使用上述的烘焙方法。另外,在发酵步骤(2)中,可使用如上所述的曲类、酵母及乳杆菌及发酵方法。用上述方法制造的发酵产物不仅可用作抗肿瘤试剂,也可用于治疗各种疾病。
此外,所述方法还可包括对所得发酵产物用热水处理的步骤。所述热水处理的温度优选为60至100℃,更优选65至98℃,特别优选70至96℃。热水处理的时间优选为5至35分钟,更优选10至30分钟,特别优选15至25分钟。有时,经上述热水处理过的抗肿瘤试剂与未经热水处理的试剂相比较具有更优异的效果。
含有所述抗肿瘤试剂的饮料和食品(含所述发酵产物的饮料和食品)
含有本发明的抗肿瘤试剂的饮料和食品以使用所述的抗肿瘤试剂(发酵产物)为特征。本发明的“含所述抗肿瘤试剂的饮料和食品”包含饮料及固体食品等等。饮料和食品类型的例子包括具有特定保健效果的饮料和食品,或调控活体机能的功能食品。
将本发明的抗肿瘤试剂用于饮料和食品时,可将所述抗肿瘤试剂直接制成饮料和食品的形式,也可将所需量的抗肿瘤试剂加入饮料和食品原料中,通过常规制造方法加工成含所述抗肿瘤试剂的饮料和食品。例如,将所述抗肿瘤试剂作为添加剂直接添加入饮料,或诸如饼干等的固体食品中,作为含抗肿瘤试剂的预防癌症的饮料或食品、保健食品或功能食品等。
可选择地,可将上述抗肿瘤试剂溶解于例如油脂、乙醇、丙二醇、甘油、表面活性剂或其混合物中制成液态或悬浮液,添加于饮料或固体食品中。如果需要,也可将其与诸如阿拉伯胶或糊精等等的胶粘剂混合制成粉末状或颗粒状,添加于饮料或固体食品中。添加本发明的抗肿瘤试剂的饮料和食品的种类并无特别的限制。
将所述抗肿瘤试剂添加入饮料和食品时,对于所述抗肿瘤试剂的添加量并无特别的限制,但因为其被作为保健食品、功能食品摄取来预防疾病及维持健康,所以需依年龄、体重及性别适当地调整添加量。以添加所述抗肿瘤试剂后的饮料和食品的重量为100%,所述抗肿瘤试剂的添加量优选1至30%重量比,更优选2至25%,特别优选3至20%。
本发明含抗肿瘤试剂的饮料和食品以传统的食品为原料,在安全性方面也很优异。
另外,也可以所述“发酵产物”取代本发明的“抗肿瘤试剂”用于饮料和食品。
实施例
以下参照实施例对本发明进行说明。本发明实施例中使用如下所述的条件:
根据活血细胞分析法进行显微镜观察:使用CH40型显微镜(Olympus公司制造),放大倍数为1000倍。以下实施例中提到的红细胞图片显示的是用显微镜观察到的放大1000倍的状态。
实施例1
原料的配合比例为250g的麦胚芽、250g的大豆胚芽及200g的米胚芽。将该混合物以110℃的蒸汽加热3小时,然后冷却。温度达到30℃时,将所得混合物与250g的小麦曲霉混合,薄薄地摊开在平盘上。将该平盘和混合物放入发酵室,在30℃发酵48小时。然后取出,撤掉平盘,将混合物在40℃干燥48小时而得到抗肿瘤试剂。
实施例2-使用小鼠的体外肿瘤免疫
(1)将上述抗肿瘤试剂制成干粉,溶解于磷酸缓冲溶液。由此制备未经热水处理的抗肿瘤试剂,以及用90℃的热水(沸腾后的)处理20分钟。将各溶液添加入96孔板中的人肿瘤细胞A4573及小鼠黑瘤B16细胞培养液中,使最终浓度为1mg/ml。添加6及24小时后,加入活细胞检测试剂(四唑盐:Nakarai Tesk生产),1小时后使用微板分析仪(450nm),测定显色反应。对未添加抗肿瘤试剂的对照组(以下简称为“对照组”)也进行了同样的测定。并重复测定4次。
结果如图1及图2所示。其证明与对照组相比,经热水处理过的抗肿瘤试剂可明显降低存活的人肿瘤细胞A4573的数量。对小鼠黑瘤B16细胞,也证明存活细胞数明显降低。
(2)制备含0.4%所述抗肿瘤试剂的固体饲料,将其对5周龄的C57BL6小鼠给食。估计自由取食的小鼠每日所摄取的抗肿瘤试剂量为人类的10倍。另外,以给予普通固体饲料的小鼠为对照组。为评估所述抗肿瘤试剂(1)对皮下移植肿瘤的抗肿瘤效果,在喂食2周后,对7只小鼠皮下接种B16细胞(5×105细胞/小鼠)。一段时间后检测肿瘤体积,并且计算接种肿瘤后的存活率。
结果如图3、4及5所示。对自由取食的小鼠,与给予普通固体饲料的对照组相比,未发现明显的体重变化(图3)。由此证明小鼠摄食与普通饲料等量的含抗肿瘤试剂的饲料。在给食2周后,对各组的7只小鼠皮下接种B16细胞(5×105细胞/小鼠)。接种22天后,抗肿瘤试剂接种组的肿瘤体积为对照组体积的55%,因此表明其具有显著的抗肿瘤效果(图4)。至于肿瘤接种组的存活天数,对皮下接种B16细胞(5×105细胞/小鼠)的抗肿瘤试剂给药组,接种28天后7只小鼠中有4只存活,而对照组的存活数为0(图5)。
(3)制备含0.4%所述抗肿瘤试剂的固体饲料,将其对5周龄的C57BL6小鼠给食。
以给予普通固体饲料的小鼠为对照组。为评估所述抗肿瘤试剂对转移瘤的抗肿瘤效果,在给食2周后,对各组的10只小鼠尾静脉接种B 16细胞(5×105细胞/小鼠)。一段时间后测定其体重,并且在接种19天及22天后,摘除各组中半数(5只)小鼠的肺,测定转移细胞数。
结果如图6、7及8所示。一段时间后测定小鼠体重,相对于对照组的平均体重18.6g,本发明抗肿瘤试剂给药组的平均体重为19.9g。本发明抗肿瘤试剂给药组的平均体重为对照组体重的107%(图6)。
接种19天及22天后,各组各摘除5只小鼠的肺,测定转移细胞数。结果如图7及8所示。接种19天后,对照组的平均转移数为12,而本发明抗肿瘤试剂给药组的平均转移数为8,为对照组平均转移数的66%,表明转移数减少。接种22天后,对照组的平均转移数39,而本发明抗肿瘤试剂给药组的平均转移数为17,为对照组平均转移数的44%,表明转移数明显减少。
由上述可知,用所述抗肿瘤试剂接种小鼠可抑制肿瘤细胞的转移。实施例3-根据活血细胞分析法进行显微镜观察
(1)采取患有胶原病的成人女子的血液,根据活血细胞分析法进行显微镜观察。发现其中红细胞以异常形状产生聚集(图9)。肝脏机能较差,并发现棘红细胞(突起状)。糖酵解能力变差,还发现许多霉菌形式。给药1170mg所述抗肿瘤试剂30分钟后,再次进行活血细胞分析,结果显示各红细胞分离成正圆形,未发现棘红细胞(突起状)(图10)。
对所述患者,1日4次用上述剂量连续给药90天,结果胶原病特有的关节疼痛消失了。
(2)采取患有肝脏机能障碍的成人女子的血液,根据活血细胞分析法进行显微镜观察。发现许多棘红细胞(突起状)(图11)。该患者的HCV抗体的数值为88.9S/CO(对照HCV抗体为1.0S/CO)。给药1170mg所述抗肿瘤试剂30分钟后,再次进行活血细胞分析。结果显示各红细胞分离成正圆形,且未发现棘红细胞(突起状)(图12)。并且,如图12所示,所有白细胞的直径均为红细胞直径的至少2.7倍,从而增强了免疫力。对所述患者1日3次,用上述剂量连续给药90天,结果发现HCV抗体的数值为10.4S/CO,为给药前的1/8以下,因而改善了肝脏机能障碍。
(3)采取患有子宫肌瘤的成人女子的血液,根据活血细胞分析法进行显微镜观察。显示红细胞为卵形,且内分泌失调(图13)。观察到环状的靶形红细胞,由此可知为缺铁性贫血。该患者的血红蛋白值为8.4g/dl(正常值为11.5至15.5g/dl)。给药1170mg的抗肿瘤试剂30分钟后,再次进行活血细胞分析法的显微镜观察,结果显示各红细胞分离成正圆形并变为正常状态(图14)。对所述患者1日3次,用上述剂量连续给药90天,结果显示3cm的子宫瘤缩小至1cm。另外,贫血症状也得到改善,血红蛋白恢复正常值。
(4)采取患有子宫癌的成人女子的血液,根据活血细胞分析法进行显微镜观察。发现红细胞产生聚集,并观察到尿酸结晶及糖不能分解时出现的霉菌(图15)。给药1170mg所述抗肿瘤试剂30分钟后,再次进行活血细胞分析法的显微镜观察,结果显示各红细胞分离成正圆形,且尿酸结晶消失(图16)。1日3次,对所述患者用上述剂量连续给药90天。MRI(核磁共振成像)检查和在体检测(活组织检查)的结果诊断癌症已消除。
(5)采取患有高血脂、高胆固醇(261mg/dl)及高中性脂肪(1714mg/dl)的成人男子的血液,根据活血细胞分析法进行显微镜观察。发现红细胞呈链状排列且聚集状态很严重,而白细胞很小、被包围在红细胞中间而无法自行移动。并且,血液的流动非常差,在中医学上称为“瘀血”(图17)。给药1170mg所述抗肿瘤试剂30分钟后,再次进行活血细胞分析法的显微镜观察,结果显示各红细胞分离成正圆形,并认为是正常状态(图18)。1日3次,对所述患者用上述剂量连续给药120天并进行血液检查。结果显示胆固醇值为227mg/dl,而中性脂肪值大幅降低至169mg/dl接近正常值。
(6)采取患有特应性皮炎的成人女子的血液,根据活血细胞分析法进行显微镜观察。发现红细胞产生聚集,且一幅画面中观察到3个白细胞(粒细胞)(图19)。当一幅画面中存在2个以上的粒细胞时,即认为患有过敏性疾病(哮喘、鼻炎及花粉症等),且患处具有炎症。给药1170mg所述抗肿瘤试剂30分钟后,再次进行活血细胞分析法的显微镜观察。结果显示各红细胞分离成正圆形,且淋巴B细胞大小为红细胞的2.3倍并活化(图20)。由于淋巴细胞呈活化状态,因此使免疫力增强。1日3次,对所述患者用上述剂量连续给药90天,结果显示特应性皮炎完全治愈。
由以上描述可知,本发明的抗肿瘤试剂对于肿瘤具有免疫效果。
另外,将含有至少一种选自麦胚芽、大豆胚芽及米胚芽的物质的原料,用至少一种选自曲类、酵母及乳杆菌的微生物进行发酵所得的发酵产物,也可用于治疗一种或多种诸如痛风、各种癌症、脑梗塞、心肌梗塞、心绞痛、胶原病、贫血、内分泌失调、高胆固醇、高中性脂肪及特应性皮炎等的疾病。
本发明的抗肿瘤试剂除对肿瘤具有免疫效果外,对许多肿瘤以外的疾病也具有免疫效果。
本发明不局限于上述的具体实施例,根据目的及用途不同,可在本发明的范围内对其作出各种改变。例如,可用由含有至少一种选自麦胚芽、大豆胚芽及米胚芽的物质的原料,用至少一种选自曲类、酵母及乳杆菌的微生物发酵所得的发酵产物来取代上述的抗肿瘤试剂,直接用于各实施例。因此,所述发酵产物也可用于改善一种或多种诸如痛风、各种癌症、脑梗塞、心肌梗塞、心绞痛、胶原病、贫血、内分泌失调、高胆固醇、高中性脂肪及特应性皮炎等的疾病。
本发明广泛地用于保健饮料、保健食品、保健辅助食品、特定保健食品及医药品等等。例如,将本发明的抗肿瘤试剂直接制成或添加入饮料和食品。另外,可将所述抗肿瘤试剂制成胶囊、片剂、药囊、糖浆剂、栓剂及注射剂等作为药物。
本发明的抗肿瘤试剂具有优异的抗肿瘤效果。并且,因为本发明的抗肿瘤试剂以天然物质为原料,所以安全性高。
另外,本发明的抗肿瘤试剂使给药前血液中已有的红细胞聚集体、棘红细胞、靶形红细胞、红细胞粘连、钝锯齿状红细胞、小红细胞、大红细胞、溶血红细胞、链状排列的红细胞、卵形红细胞及/或自由基损伤的红细胞在给药后变为正圆形,而且使各红细胞呈分离状态。其不仅具有优良的抗肿瘤效果,而且对由上述异常形状的红细胞所引起的疾病也具有治疗效果。
本发明的抗肿瘤试剂使给药后血液中的白细胞直径变为正常红细胞直径的2.2倍或以上,并且粒细胞活动旺盛,抗肿瘤效果更强。
本发明的抗肿瘤试剂可消除血液中的尿酸结晶,进而消除因痛风引起的疼痛。
另外,本发明的抗肿瘤试剂具有至少一种如下效果:缓解关节痛、提高肝脏机能、缩小子宫肌瘤、减少癌细胞、降低胆固醇、降低中性脂肪及改善特应性皮炎,可广泛用于保健食品等等。
本发明的饮料和食品在预防肿瘤、增强免疫力、增进人体健康方面具有良好效果,并且其源自天然物质,因此无副作用且安全性高。
根据本发明的制造方法可简单且有效地制造所述抗肿瘤试剂。
另外,根据本发明方法制备的抗肿瘤试剂,再经过60至100℃的热水处理步骤,其抗肿瘤效果更佳。
Claims (3)
1.一种抗肿瘤试剂,其通过将麦胚芽、大豆胚芽及米胚芽的混合物用曲类进行发酵得到,其中麦胚芽、大豆胚芽及米胚芽之间的重量配比为250份∶250份∶200份,并且所述曲类为小麦曲霉,所述抗肿瘤试剂通过如下步骤制备:(1)将所述混合物在110℃用蒸汽加热180分钟;(2)将所得的蒸汽加热产物在30℃用250重量份的所述曲类发酵48小时;并将所得的发酵产物在40℃干燥48小时。
2.含有权利要求1所述的抗肿瘤试剂的饮料或食品。
3.权利要求1所述的抗肿瘤试剂的制备方法,包括如下步骤:
(1)将麦胚芽、大豆胚芽及米胚芽混合物在110℃用蒸汽加热180分钟;(2)将所得的蒸汽加热产物在30℃用250重量份的所述曲类发酵48小时;并将所得的发酵产物在40℃干燥48小时,其中所述麦胚芽、大豆胚芽及米胚芽之间的重量配比为250份∶250份∶200份,并且所述曲类为小麦曲霉。
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- 2005-05-16 CN CN2005100693928A patent/CN1709409B/zh not_active Expired - Fee Related
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2006
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Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN87106491A (zh) * | 1986-09-25 | 1988-04-27 | 丹羽耕三 | 活性氧抑制组合物的制造方法 |
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范镇基.芽类食品的开发前景.广州食品工业科技11 4.1995,11(4),18-20,3. |
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邓放明等.应用芽类食品制备类咖啡饮料的研究.饮料工业5 2.2002,5(2),36-38,42. |
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