CN1703216A - 用于治疗多发性骨髓瘤的埃坡霉素衍生物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及对患有骨髓瘤、尤其是患有对常规细胞毒化学疗法有抗性的骨髓瘤的温血动物、尤其是人进行治疗的方法，该方法包括将治疗有效量的埃坡霉素、尤其是式(I)埃坡霉素施用于所述动物；涉及用于同时、分别或依次使用的包含埃坡霉素的组合；并且还涉及包含所述组合的药物组合物和商业包装。

Description

用于治疗多发性骨髓瘤的埃坡霉素衍生物
本发明涉及对患有骨髓瘤、尤其是患有对常规细胞毒化学疗法有抗性的骨髓瘤的温血动物、尤其是人进行治疗的方法，该方法包括将治疗有效量的埃坡霉素、尤其是如本文所定义的式I埃坡霉素施用于所述动物；涉及用于同时、分别或依次使用的组合，该组合包含埃坡霉素和选自烷化剂、皮质类固醇和蒽环霉素类的化合物，以及任选至少一种可药用载体；并且还涉及包含所述组合的药物组合物和商业包装。
紫杉烷类，例如紫杉醇(paclitaxel)和多西他赛(docetaxel)，代表一类通常用于多种增殖性疾病、例如实体瘤疾病、如卵巢癌的微管稳定剂。然而，紫杉烷类在骨髓瘤的治疗中没有表现出很好的前景。埃坡霉素类，例如埃坡霉素A、B和D，及其类似物代表一类新的微管稳定剂(参见Gerth，K.等人，J.Antibiot. 49，560-3(1996)；或Hoefle等人，DE 41 38 042)。现在令人惊奇地发现：埃坡霉素类、尤其是如本文所定义的式I埃坡霉素、特别是埃坡霉素B可直接抑制骨髓瘤细胞的生长和存活。
另外，患者多发性骨髓瘤细胞对骨髓基质细胞(BMSC)的粘连可增强埃坡霉素抑制多发性骨髓瘤细胞增殖并促进与BMSC粘连的骨髓瘤细胞的细胞死亡的能力。
因此，本发明涉及治疗骨髓瘤、尤其是对常规细胞毒化学疗法有抗性的骨髓瘤的方法，该方法包括将治疗有效量的埃坡霉素、优选治疗有效量的式I埃坡霉素或其可药用盐：
其中，A表示O或NRN，其中RN为氢或低级烷基，R为氢或低级烷基，R’为甲基、甲氧基、乙氧基、氨基、甲氨基、二甲氨基或甲硫基，以及Z为O或键，施用于需要其的温血动物，优选是人。
本发明特别涉及治疗骨髓瘤的方法，其中
(a)可观察到多药耐药蛋白p170的过表达，和/或
(b)骨髓瘤对紫杉烷如紫杉醇或多西他赛有耐受性。
如此处所用的术语“骨髓瘤”涉及由通常在骨髓中所发现类型的细胞构成的肿瘤。如此处所用的术语“多发性骨髓瘤”指浆细胞的弥散性恶性肿瘤，其以多发性骨髓肿瘤病灶且分泌M成分(单克隆免疫球蛋白片段)为特征，伴有导致骨痛的散在性溶骨性病变、病理性骨折、高血钙症和正色素性正常红细胞性贫血(normochromic normocytic anaemia)。通过使用常规的细胞毒和高剂量化学疗法不能治愈多发性骨髓瘤。
在整个说明书和权利要求书中，骨髓瘤优选指多发性骨髓瘤(MM)。
除非另外指明，在本文所公开的内容中，指明为“低级”的有机基团和化合物含有不多于7个、优选不多于4个碳原子。
其中A表示O、R为氢、R’为甲基且Z为O的式I化合物称为埃坡霉素A；其中A表示O、R为甲基、R’为甲基且Z为O的式I化合物称为埃坡霉素B；其中A表示O、R为氢、R’为甲基且Z为键的式I化合物称为埃坡霉素C；其中A表示O、R为甲基、R’为甲基且Z为键的式I化合物称为埃坡霉素D。
尤其在专利和专利申请WO 93/10121、US 6,194,181、WO 98/25929、WO 98/08849、WO 99/43653、WO 98/22461和WO 00/31247中，特别是在其各自的化合物权利要求和实施例的终产物中，概括地和具体地公开了如下定义的式I埃坡霉素衍生物以及制备该埃坡霉素衍生物的方法：其中A表示O或NRN，其中RN为氢或低级烷基，R为氢或低级烷基，R’为甲基且Z为O或键；这些文献的终产物、药物制剂和权利要求的主题在此处被引入本申请作为公开内容的参考。同样还包括在所述文献中公开的相应的立体异构体和相应的结晶变体(crystal modifications)，如溶剂化物和多晶型物。式I埃坡霉素衍生物、尤其是埃坡霉素B可作为WO 99/39694中所公开的药物组合物的一部分施用。
尤其在专利申请WO 99/67252中，概括地和具体地公开了如下定义的式I埃坡霉素衍生物以及制备和施用该埃坡霉素衍生物的方法：其中A表示O或NRN，其中RN为氢或低级烷基，R为氢或低级烷基，R’为甲氧基、乙氧基、氨基、甲氨基、二甲氨基或甲硫基，以及Z为O或键；其在此处被引入本申请作为参考。同样还包括该文献所公开的相应的立体异构体和相应的结晶变体，如溶剂化物和多晶型物。
埃坡霉素B向相应的内酰胺的转化在WO 99/02514的流程图21(第31和32页)及实施例3(第48-50页)中公开。不同于埃坡霉素B的式I化合物向相应的内酰胺的转化也可类似地完成。其中RN为低级烷基的相应的式I埃坡霉素衍生物可通过本领域已知的方法如还原烷基化反应、以其中RN为氢的埃坡霉素衍生物为原料来制备。
应当理解，在方法的讨论部分中所提及的活性成分还包括可药用盐。如果这些活性成分具有例如至少一个碱性中心，则它们可形成酸加成盐。如果需要的话，还可形成存在有其它碱性中心的相应的酸加成盐。含酸性基团(例如COOH)的活性成分还可与碱形成盐。活性成分或其可药用盐也可以以水合物的形式使用或者包含在结晶过程中所用的其它溶剂。
在本发明的一个优选实施方案中，使用其中A表示O、R为低级烷基(尤其是甲基、乙基或正丙基)或氢、R’为甲基且Z为O或键的式I埃坡霉素衍生物。更优选使用其中A表示O、R为甲基、R’为甲基且Z为O的式I埃坡霉素衍生物，该化合物也称为埃坡霉素B。
如此处所用的术语“治疗”包括对患有骨髓瘤或处于所述疾病前期的患者进行的治疗，该治疗可在所述患者中延缓疾病的发展，并优选旨在对治疗完全响应、对治疗部分响应或使疾病稳定。
如此处所用的术语“完全响应”特别指所有可测定或可评价的疾病消除。
如此处所用的术语“部分响应”特别指在任何特定的疾病部位没有发展的情形下可测定或可评价疾病的消除高于或等于50％。
如此处所用的术语“疾病稳定”特别指可测定或可评价的疾病减少低于50％或增加低于25％。
本发明还涉及含有(a)埃坡霉素和(b)至少一种选自烷化剂、皮质类固醇和蒽环霉素类的化合物的组合。特别是用于同时、分别或依次使用来治疗骨髓瘤的组合。
如此处所用的术语“烷化剂”包括但不限于烷基磺酸酯类、吖丙啶类、环氧化物类、氮杂环丙烷类、甲基蜜胺类、氮芥类、亚硝基脲类、咪唑并四嗪酮类(imidazotetrazinones)、达卡巴嗪、甘露莫司汀、二溴甘露醇、二溴卫矛醇、哌泊溴烷和丙卡巴肼。
如此处所用的术语“烷基磺酸酯类”包括但不限于白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡。
如此处所用的术语“吖丙啶类”包括但不限于苯佐替派、卡波醌、美妥替哌和乌瑞替派。
如此处所用的术语“氮杂环丙烷类和甲基蜜胺类”包括但不限于六甲蜜胺、曲他胺、三乙烯磷酰胺(triethylenephosphoramide)、三乙烯硫代磷酰胺(塞替派)和三羟甲蜜胺。
如此处所用的术语“氮芥类”包括但不限于苯丁酸氮芥、萘氮芥、环磷氮芥、雌莫司汀、异环磷酰胺、氮芥、盐酸氧氮芥(mechlorethamine oxidehydrochloride)、美法仑、新氮芥、苯芥胆甾醇、泼尼莫司汀、曲磷胺和乌拉莫司汀。
如此处所用的术语“亚硝基脲类”包括但不限于卡莫司汀、氯脲菌素、cytemustine、福莫司汀、洛莫司汀(CCNU)、尼莫司汀和雷莫司汀。
如此处所用的术语“咪唑并四嗪酮类”包括但不限于替莫唑胺和米托唑胺。
“替莫唑胺”在US 5,260,291中有描述。替莫唑胺的合成是众所周知的，例如参见Wang等人，J.Org.Chem.1997，62，7288-7294。替莫唑胺可例如以商标TEMODALTM、TEMODARTM或TEMOXOLTM自商业购得，并且可例如按照US 5,942,247中的描述或根据包装说明书的信息来施用。术语“洛莫司汀”指例如在Johnson P等人，J.Med.Chem.1966，9，892中描述和制备的化合物。洛莫司汀可以以商标BETULUSTINETM自商业购得，并且可根据包装说明书的信息来施用。
如此处所用的术语“蒽环霉素类”包括但不限于多柔比星(doxorubicine)和柔红霉素(daunorubicine)。
另外，此处以名称提及的活性药物的结构可从标准概述“默克索引”的现行版本或数据库如Patents International(如IMS World Publications)中获得。其相应的内容在此处引入作为参考。基于这些参考资料，本领域的任何技术人员完全能够制备这些化合物并在体内和体外标准试验模型中测试其药学适应征和性质。
下文将包含下述成分的组合称为本发明的组合：(a)埃坡霉素和(b)至少一种选自烷化剂、皮质类固醇和蒽环霉素类的化合物，其中活性成分在每种情形下以游离形式或可药用盐的形式存在，并且还可任选包含至少一种可药用载体。
本发明的组合可以是组合制剂或药物组合物。
如此处所用的术语“组合制剂”特别定义为其中如上定义的活性成分单独给药或通过使用含不同量活性成分的不同固定组合给药、即同时或在不同时间点给药的“成套药盒”。因而药盒的各部分可例如同时施用或按时间顺序交替施用，所述的按时间顺序交替施用指成套药盒的任何部分在不同的时间点以相同或不同的时间间隔施用。非常优选地，选择时间间隔为具有下述效果的时间间隔：各部分组合使用对所治疗疾病的效果强于仅使用活性成分中的任何一种所获得的效果。在组合制剂中，所欲施用的活性成分1和活性成分2的总含量的比率可以有所变化，例如为了满足所欲治疗的患者亚群体的需要或满足单个患者的需要(所述需要因患者的年龄、性别和体重等而不同)而有所变化。优选至少有一种有益效果，例如，第一种活性成分和第二种活性成分的作用相互增强且特别是协同作用(如不止是累加作用)、额外的有利作用、副作用较少、第一种活性成分和第二种活性成分中的一种或两种的非有效剂量所获得的组合治疗效果且尤其是第一种活性成分和第二种活性成分具有强的协同作用。
另外，本发明提供了治疗骨髓瘤的方法，该方法包括将抗骨髓瘤的联合治疗有效量的本发明的组合施用于需要其的温血动物。
相关领域的技术人员完全能够选择相关的试验模型来证明在上下文中所提及的埃坡霉素或本发明的组合对骨髓瘤的有益效果。埃坡霉素或本发明的组合的药理学活性可例如在适宜的临床研究中或者通过下文所述的实施例来证明。通过下文所述的方法，可以证明：例如，埃坡霉素B可抑制MM细胞的生长和存活，其IC90为1至10nM。埃坡霉素B使MM细胞的G2M期停止，随后引起细胞凋亡。适宜的临床研究例如是在晚期骨髓瘤患者中进行的开放标记的非随机剂量递增研究。该研究特别证明了用本发明的组合所观察到的协同作用。对骨髓瘤的有益效果可直接由该研究的结果或通过改变研究方案来确定，其中所述的改变对本领域技术人员来说是已知的。例如，一种组合组分以固定剂量施用，第二种组合组分的剂量递增至达到最大耐受剂量(MTD)。或者，为了证明此处所提及的本发明的组合的有益效果，可进行安慰剂对照的双盲研究。
本发明的一个目的是：提供包含有抗骨髓瘤的联合治疗有效量的本发明的组合的药物组合物。在该组合物中，组合组分可以以一个组合单位剂型或两个单独的单位剂型一起、相继或分别施用。该单位剂型还可以是固定组合。
根据本发明，用于分别施用组合组分和用于以含至少两种组合组分的固定组合(即单个盖仑组合物)施用的药物组合物可按照本身已知的方法制备，并且所述药物组合物是适于经肠内(如经口或直肠)和胃肠道外施用于哺乳动物(温血动物)、包括人的那些，其可仅包含治疗有效量的至少一种药理学活性的组合组分，或者还包含一种或多种可药用载体、尤其是适于经肠内或胃肠道外施用的载体。
新的药物组合物含有例如约10％至约100％、优选约20％至约60％的活性成分。用于经肠内或胃肠道外施用的组合疗法的药物制剂例如是单位剂型的那些，例如糖包衣片、片剂、胶囊或栓剂以及安瓿。如果没有另外指出，这些制剂以本身已知的方法制备，例如通过常规的混合、制粒、包糖衣、溶解或冷冻干燥方法来制备。可以理解的是，包含在各剂型的独立剂量中的组合组分的单位含量不一定构成其有效量，因为可通过施用多个剂量单位来达到必需有效量。
特别地，本发明的组合中治疗有效量的各组合组分可同时或以任何顺序依次施用，并且各组分可分别或作为固定组合施用。例如，本发明的治疗骨髓瘤的方法包括同时或以任何顺序依次施用联合治疗有效量的、优选协同有效量的(i)游离或可药用盐形式的组合组分(a)和(ii)游离或可药用盐形式的组合组分(b)，例如以与此处所述的量相一致的日剂量施用。本发明的组合的各组合组分可以以分开或单个的组合形式在治疗期间的不同时间分别施用或者同时施用。此外，术语施用还包括使用在体内可转化为所述组合组分的前药。因此，本发明应当理解为包含所有的同时或交替治疗的方案，并且术语“施用”也相应地被解释。
埃坡霉素及本发明的组合中所用的组合组分的有效剂量可根据所用的具体化合物或药物组合物、施用模式、所治疗的骨髓瘤类型及所治疗的骨髓瘤的严重程度而有所变化。因此，可根据多种因素来选择本发明的组合的给药方案，所述因素包括给药途径和患者的肝肾功能。具有普通技能的主治医师、临床医师或兽医可容易地确定并建议用于预防、逆转或停止病症发展所需的埃坡霉素或本发明的组合中单个活性成分的有效量。使活性成分的浓度位于有效但无毒的范围内的最佳处方量需要有基于活性成分被靶点利用的动力学的给药方案。
如果本文没有特别指出，则当本发明的组合中所用的组合组分以市售单个药物的形式使用时，可根据各市售药物的包装说明书上提供的信息来确定其剂量和施用模式，以获得此处所述的有益效果。
如果温血动物是人，则对成年患者而言，式I化合物的剂量优选为约0.1至75、优选0.25至50、例如2.5或6mg/m2，每周一次，共计2至4周，例如3周，之后6至8天停药。
在本发明的一个实施方案中，在前次治疗后间隔1至6周、尤其是间隔1周后，以约0.1至6mg/m2、优选0.1至3mg/m2、例如2.5mg/m2的剂量每周施用埃坡霉素B，共计3周。在本发明的另一实施方案中，所述埃坡霉素B优选以约0.5至7.5mg/m2的剂量每18至24天施用于人。
替莫唑胺优选以50至300mg/m2/天、最优选以200mg/m2/天的剂量每日施用，每28天为一周期，每周期连续施用5天。对于以前进行过化疗的患者，通常以150mg/m2/天的剂量开始治疗。
洛莫司汀优选以60至180mg/m2的单次剂量、优选以130mg/m2的剂量每6周施用一次。
此外，本发明提供了包含本发明的组合作为活性成分的商业包装，该包装还含有同时、分别或依次使用该组合来治疗骨髓瘤的说明。
本发明还提供了如此处所定义的式I化合物和本发明的组合在制备用于治疗骨髓瘤的药物中的用途。
实施例
概述
可从Rockville，MD的美国典型培养物保藏中心(ATCC)获得RPMI8226和U266人MM细胞系。从患者BM样品中纯化得到源自患者的MM细胞，如Y.T.Tai，G.Teoh，Y.Shima等人在J.Immunol.Methods235：11，2000中所描述的。将所有的人MM细胞系在RPMI-1640培养基(Sigma Chemical，St.Louis，MO)中培养，该培养基含有10％胎牛血清(FBS)、2mmol/L L-谷氨酰胺(L-glut，GIBCO，Grand Island，NY)、100U/mL青霉素和100mg/mL链霉素(P/S，GIBCO)。MM患者的细胞≥95％为CD38+和CD45RA-。按照D.Gupta，S.Treon，Y.Shima等人在Leukemia，2001中以及S.Gartner和H.S.Kaplan在Proc.Natl.Acad.Sci.USA 77：4756，1980中所描述内容，从MM患者及健康捐献者的抽出物中制备骨髓基质细胞(BMSC)。细胞在含有20％FBS、2mmol/L L-glut和100ug/mL P/S的ISCOVE′s modified Dulbecco培养基中培养。从Clonetics，Biowhittaker购得人脐静脉内皮细胞(HUVEC P168)，并维持在EGM-2MV培养基(Clonetics，Biowhittaker)中。将埃坡霉素溶于二甲基亚砜(DMSO；Sigma)中，作为储备液于-20℃贮存备用。对于所有测定法，将化合物在培养基中稀释至浓度为例如0.01至100μM。测定由上述共培养系统得到的上清液中细胞因子的水平。使用商购ELISA试剂盒(R&D系统)测定VEGF和IL-6的浓度。
细胞蛋白溶解产物、免疫沉淀法和蛋白质印迹分析
将MM细胞在含有10％FBS的RPMI中饥饿培养12小时，然后在不含FBS但含有埃坡霉素或DMSO对照的RPMI-1640中培养1小时。然后如K.Podar，Y.T.Tai等人在Blood 98：428，2001中所描述的，用100nM VEGF165刺激这些细胞。然后将细胞在含有1mM PMSF、1mM钒酸钠和蛋白酶抑制剂混合物的RIPA缓冲液(Boehringer Mannheim)中溶解。将溶解产物直接在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE凝胶)上分析，或者用抗Flt-1抗体(Ab)和琼脂糖偶联的蛋白G(均来自于SantaCruz Biotechnology，CA)培养过夜。全细胞溶解产物(每泳道30μg)或免疫沉淀物在8％至10％的SDS-PAGE凝胶上进行分析；转移至Hybond CSuper paper(Amersham，Arlington Heights，IL)上；然后使用抗磷酸化ERK鼠单克隆抗体、抗磷酸化酪氨酸残基鼠单克隆抗体或者抗Flt-1或ERK2抗体(Santa Cruz)做探针进行检测；用HRP-偶联抗鼠或抗兔抗体(均来自于Santa Cruz)和增强型化学发光(ECL)底物溶液(Amersham)进行测定。
蛋白质印迹
使用RIPA缓冲液，在蛋白酶抑制剂混合物(Roche)、1mM PMSF和1mM原钒酸钠的存在下由经药物处理的MM细胞和对照MM细胞制备蛋白溶解产物。将溶解产物直接在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶上进行分析；转移至Hybond C Super paper(Amersham，Arlington Heights，IL)上；用抗bcl-2鼠单克隆抗体(Santa Cruz，CA)、bax(Santa Cruz)或PARP(Biomol，West Grove，PA)或者抗caspase-3兔多克隆抗体(Santa Cruz)以及抗肌动蛋白羊多克隆抗体(Santa Cruz)做探针进行检测；用HRP-偶联抗鼠或抗羊抗体(均来自于Santa Cruz)和增强型化学发光(ECL)底物溶液(Amersham)进行测定。
增殖和细胞成活力的测定
首先将MM细胞在含有10％胎牛血清的RPMI-1640培养基中饥饿培养12小时，然后在药物或DMSO对照的存在下，将其铺至96孔微量滴定板(Costar，Cambridge，MA)中。还可在有或无VEGF165的存在下进行试验(R和D系统)。通过引入[3H]-胸苷(NEN Products，波士顿，MA)测定增殖。具体而言，在48小时培养的最后6个小时，将细胞用[3H]-胸苷(0.5μCi/孔)进行脉冲，使用自动细胞收集器(Cambridge Technology，Cambridge，MA)将细胞收集至玻璃滤器上，使用LKB Betaplate闪烁计数仪(Wallac，Gaithersburg，MD)计数。使用CellTiter96AQueousOneSolution Reagent(Promega，Madison，WI)，由MTS测定法通过比色来测定细胞成活力。在48小时培养的最后2个小时，将细胞暴露于MTS，使用ELISA板读数仪(Molecular Devices Corp.，Sunnyvale，CA)于OD为570nm处测定吸收度。
细胞周期的分析
将MM细胞(1×106个细胞)在埃坡霉素B或DMSO对照的存在下培养24、48和72个小时。然后将细胞用磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)洗涤，用70％乙醇固定，并用RNAse(Sigma)处理。接着将细胞用碘化丙啶(PI，5μg/mL)染色，使用M软件在Epics流式细胞仪(Coulter Immunology，Hialeah，FL)上测定细胞周期性质。
实施例1：MM细胞在粘连体系中的增殖
将BMSC(1×104个细胞/孔)铺在96孔微量滴定板上并于37℃在ISCOVE′s培养基(20％FBS)中培养24小时。然后在埃坡霉素B或DMSO对照的存在下，将MM细胞加入含有BMSC的孔中(5×104个细胞/孔)。当使用MM.1S细胞时，将BMSC和MM细胞两者在含有2％FBS的RPMI-1640培养基中饥饿培养12小时。当使用患者PCL细胞时，在含有10％FBS的RPMI培养基中进行共培养。还可分别培养BMSC和MM细胞以作为对照。在48小时后，如上文所述分析增殖和细胞成活力。为确保收集所有细胞用于增殖测定法，在收集细胞前10分钟向每个孔中加入10×胰蛋白酶(Sigma)。
实施例2：MM细胞在改良Boyden Chamber Transwell系统中的增殖
在改良Boyden Chamber Transwell系统中，使用孔内径为0.4mm的24孔板(Costar)测定增殖。将BMSC(4×104个细胞/孔)铺在下室，进行饥饿培养，并如上所述在埃坡霉素B中培养。然后将MM细胞(20×104个细胞/孔)置入上室(嵌入)，如上文所述在48小时时测定各室中[3H]-胸苷摄取量。
实施例3：细胞因子浓度的测定
测定由上述共培养系统得到的上清液中细胞因子的水平。使用自商购ELISA试剂盒(R&D系统)测定VEGF和IL-6的浓度。
实施例4：埃坡霉素B对MM.1S细胞增殖的作用
将MM.1S细胞置于跨孔(transwell)共培养系统的上室，以避免MM细胞和BMSC直接接触，但是尽管如此，允许体液因子的扩散。虽然这两种细胞类型之间没有接触，但是用BMSC培养的MM.1S细胞所摄取的[3H]-dT在48小时时增加2.2倍(p＜0.0001)。与.之相反，共培养系统中BMSC所摄取的[3H]-dT没有显著增加。通过该共培养系统可以证明：埃坡霉素B可减少MM.1S细胞的增殖。
实施例5：埃坡霉素B在体内对人MM细胞的作用
将小鼠右腋皮下接种在100ml RPMI 1640中的3×107个MM细胞和100uL基质胶基底膜基质(matrigel basement membrane matrix)(BectonDickinson，Bedford，MA)。在注射后第6天，将小鼠分为两个接受埃坡霉素B的治疗组和一个对照组。从第6天开始，以2.5mg/kg剂量尾静脉注射埃坡霉素B进行治疗，每周一次，共计四周，或者在第6天一次给予4mg/kg剂量。对照组每周仅接受载体(30％PEG-300，在0.9％氯化钠中)。用卡钳每周两次测定肿瘤最长的垂直直径，使用公式4/3×(宽/2)2×(长/2)来估计肿瘤的体积，该公式表示椭圆体的三维体积。当肿瘤达2cm或当小鼠濒临死亡时，将动物处死。评价从肿瘤注射第一天起至死亡的存活率。

Claims (16)

1.治疗患有骨髓瘤的温血动物的方法，该方法包括施用治疗有效量的埃坡霉素。
2.权利要求1的方法，其中用于需要其的温血动物的埃坡霉素为式I化合物或其可药用盐：
Figure A2003801010650002C1
其中，A表示O或NRN，其中RN为氢或低级烷基，R为氢或低级烷基，R’为甲基、甲氧基、乙氧基、氨基、甲氨基、二甲氨基或甲硫基，以及Z为O或键。
3.根据权利要求1或2中所述的方法，其中温血动物为人。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中骨髓瘤对常规细胞毒化学疗法有抗性。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中可观察到多药耐药蛋白p170的过表达。
6.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中骨髓瘤对紫杉烷如紫杉醇有耐受性。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中该疾病为多发性骨髓瘤。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中式I化合物是埃坡霉素B。
9.根据权利要求8中所述的方法，该方法包括在前次治疗后间隔1至6周后，以约0.1至6mg/m2的剂量每周施用埃坡霉素B，共计3周。
10.用于同时、分别或依次使用来治疗骨髓瘤的组合，该组合包含(a)式I埃坡霉素：
Figure A2003801010650003C1
其中，A表示O或NRN，其中RN为氢或低级烷基，R为氢或低级烷基，R’为甲基、甲氧基、乙氧基、氨基、甲氨基、二甲氨基或甲硫基，以及Z为O或键，和(b)至少一种选自烷化剂、皮质类固醇和蒽环霉素类的化合物，其中活性成分(a)和(b)在每种情形下以游离形式或可药用盐的形式存在，并且还任选包含至少一种可药用载体。
11.根据权利要求10中所述的组合，其中埃坡霉素为埃坡霉素B。
12.用于同时、分别或依次使用来治疗多发性骨髓瘤的权利要求11或12的组合。
13.权利要求11或12的组合在制备用于治疗骨髓瘤的药物中的用途。
14.治疗骨髓瘤的方法，该方法包括将如权利要求11中所定义的组合以抗骨髓瘤的联合治疗有效量施用于需要其的温血动物。
15.药物组合物，该组合物包含抗骨髓瘤的联合治疗有效量的权利要求11的组合以及至少一种可药用载体。
16.商业包装，该商业包装包含如权利要求11中所定义的组合以及同时、分别或依次使用该组合来治疗骨髓瘤的说明。
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