CN1686112B - 蛇床子素的用途及用于治疗脂肪肝的制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了蛇床子素在制备治疗脂肪肝和降低血脂的药物中的应用。同时公开了一种蛇床子素制剂，含有不少于5％的蛇床子素。本发明将蛇床子素用于制备治疗脂肪肝的药物，经动物试验证明，对于高脂性脂肪肝和酒精性脂肪肝均可以获得较好的效果；同时，蛇床子素毒性低，安全范围广，与现有的治疗脂肪肝的药物比较，本发明的制剂在治疗脂肪肝时更为安全。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药提取物的新用途，具体涉及一种蛇床子素的用途，以及利用蛇床子素获得的制剂。
背景技术
脂肪肝是由多种病因引起的肝脏脂肪性变所致，在我国的发病率为3.9～11.4％。目前临床上尚缺乏理想的治疗药物，主要使用调节血脂的药物，包括力平之、易善复、辛伐他汀等他汀类药物，也可选用甘糖酯、银杏叶片、脂必妥、降脂灵、月见草油胶丸等。
蛇床子是伞形科一年生草本植物蛇床的干燥成熟果实，传统中药学认为蛇床子有壮阳补肾、祛风燥湿、杀虫止痒之功效。近年来对蛇床子有效成分的研究主要集中在香豆素类，其中，最主要的是蛇床子素(osthol)，其含量最高，收得率为0.8％(按原生药计算)。
目前的研究认为，蛇床子素的药理作用主要包括抗心律失常、扩张血管、镇痛、镇静催眠、抗骨质疏松、抑制胃肠运动、减轻乙型肝炎引起的肝损伤、提高免疫功能等方面。其具有毒性低，安全范围广的优点，具有广阔的发展前景。但并未见到蛇床子素与脂肪肝相关的报道。
发明内容
本发明目的是在揭示蛇床子素对脂肪肝防治的药理作用的基础上提供蛇床子素的新用途；
本发明的另一个目的是提供一种可用于防治脂肪肝的蛇床子素制剂。
为达到上述目的，本发明给出了，蛇床子素在制备治疗脂肪肝的药物中的应用。
以及，蛇床子素在制备降低血脂的药物中的应用。
为达到上述第二发明目的，本发明采用的技术方案是，一种用于治疗脂肪肝的制剂，含有不少于5％的蛇床子素。
上述技术方案，也可以通过复配实施，复配可以进一步提高治疗脂肪肝的效果。
优选的复配方案列举如下：
包括有10％-90％的蛇床子素和90％-10％的贝特类药物。所述贝特类药物可以是力平之。
包括有10％-90％的蛇床子素和90％-10％的他汀类药物。所述他汀类药物可以是辛伐他汀。
包括有10％-90％的蛇床子素和90％-10％的抗氧化剂。所述抗氧化剂可以是维生素E。
包括有10％-90％的蛇床子素和90％-10％的第二组份，所述第二组份选自蛋氨酸、甜菜碱、肉毒碱、壳聚糖中的一种或几种。
包括有10％-90％的蛇床子素和90％-10％的第二组份，所述第二组份为中药提取物，选自丹参提取物、银杏提取物、首乌提取物、牛膝提取物、山楂提取物、泽泻提取物、水飞蓟提取物中的一种或几种。
本发明中的蛇床子素是从中药蛇床子中提取分离得到的有效单体成份，化学名是7-甲氧基-8-异戊烯基香豆素，经实验证实，蛇床子素对于高脂血症性脂肪肝和酒精性脂肪肝均有较好的治疗作用，同时能有效地降低血脂。
动物试验证实，高脂血症性脂肪肝的鹌鹑给予蛇床子素5～20毫克/千克治疗6周后，能降低血清TC、TG、LDL-C和FFA(P＜0.05或P＜0.01)，也能降低肝组织中的TC、TG含量和肝重系数(P＜0.05或P＜0.01)，并呈明显的剂量依赖性，蛇床子素也可提高肝组织中SOD和GSH-PX的活性(P＜0.05或P＜0.01)，显微镜检查结果显示，给予蛇床子素的鹌鹑肝细胞脂肪变性程度明显减轻。这些结果提示蛇床子素对高脂性脂肪肝有较好的治疗作用。
对酒精性脂肪肝大鼠给予蛇床子素5～20毫克/千克治疗6周后，可明显降低血清TC、TG、LDL-C(P＜0.01)，可显著降低肝重系数、肝脂质和MDA含量(P＜0.01)，升高肝组织中的SOD含量(P＜0.01)，病理检查结果显示，给予蛇床子素后可使肝细胞的脂肪变性程度明显减轻(P＜0.05或P＜0.01)。这些结果提示蛇床子素对酒精性脂肪肝有较好的治疗作用。
由此，本发明将蛇床子素用于制备治疗脂肪肝的药物，以及用于制备治疗降低血脂的药物，可以获得较好的效果。
同时，蛇床子素毒性低，安全范围广，与现有的调节血脂类的药物比较，本发明的制剂在治疗脂肪肝时更为安全。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步描述，下列实施例仅用于证明本发明的实用性，便于对本发明的技术方案的理解，而并不限制本发明的保护范围：
实施例一：蛇床子素制剂用于治疗鹌鹑的高脂血症性脂肪肝。
1.蛇床子素制剂的配制：蛇床子素的纯度为95％，呈白色粉术状，临用时用0.5％的羧甲基纤维素钠溶液分别配制成0.25％、0.5％、1％的药物浓度。
2.对比试验制剂，采用法国利博福尼制药有限公司的力平之(非诺贝特胶囊)，白色粉末，临用时用0.5％的羧甲基纤维素钠溶液配制成1％的药物浓度。
3.实验动物为雄性鹌鹑，体重100～120克，实验期间饲养室温度为18±2℃。将鹌鹑随机分为2组，分别为正常对照组和造模组，造模组鹌鹑每天给予高脂饲料(猪油14％，胆固醇1％，花生油4％，普通饲料81％)，上下午各一次。经4周后随机抽查，提示高脂性脂肪肝已形成。继续给予高脂饲料，将已形成脂肪肝鹌鹑随机分成蛇床子素5mg/kg、10mg/kg和20mg/kg三个剂量组，力平之20mg/kg组和脂肪肝模型组，各给药组按不同剂量以0.2ml/100g体重灌胃，正常对照组和脂肪肝模型组给予等容积的0.5％羧甲基纤维素钠溶液，连续给药6周。
处理前12小时禁食、不禁水，然后颈动脉放血，制备血清后检测各项指标，取肝脏称重后分别用生理盐水和三氯甲烷∶甲醇(1∶1)混合液制成10％匀浆，供肝组织SOD、MDA和肝脂质测定，另取同一部位肝脏以10％福尔马林溶液固定，作显微镜检查。
4.对血清指标和肝重系数的影响参见下表1。与正常对照组相比较，脂肪肝模型组鹌鹑血清TC、TG、LDL-C、FFA和肝重系数明显升高(P＜0.05或P＜0.01)；结果显示，蛇床子素给药各组能显著地降低高脂性脂肪肝鹌鹑血清TG、FFA和肝重系数(P＜0.01)，蛇床子素大剂量组(20mg/kg)也能明显降低血清TC和LDL-C(P＜0.05)；阳性药力平之组能明显降低高脂性脂肪肝鹌鹑血清TC、TG、LDL-C含量和肝重系数(P＜0.05或P＜0.01)，但对FFA未见有明显的影响。
表1蛇床子素对鹌鹑高脂性脂肪肝血清指标和肝重系数的影响(n＝10)
| 组别 | TC(mmol/L) | TG(mmol/L) | LDL-C(mmol/L) | FFA(μmol/L) | 肝重系数(g/100g) |
| 正常对照组 | 5.74±0.51 | 0.68±0.14 | 0.31±0.23 | 963.21±231.70 | 1.89±0.16 |
| 脂肪肝模型组 | 9.53±3.92^^ | 0.89±0.21^ | 3.78±3.36^^ | 1303.77±372.58^ | 2.13±0.19^^ |
| 蛇床子素5mg/kg组 | 7.34±0.88 | 0.49±0.08<sup>**</sup> | 1.62±0.73 | 938.68±146.77<sup>**</sup> | 1.83±0.11<sup>**</sup> |
| 蛇床子素10mg/kg组 | 7.32±1.53 | 0.57±0.16<sup>**</sup> | 1.50±1.41 | 794.34±225.05<sup>**</sup> | 1.83±0.25<sup>**</sup> |
| 蛇床子素20mg/kg组 | 6.89±0.84<sup>*</sup> | 0.45±0.05<sup>**</sup> | 0.98±1.19<sup>*</sup> | 783.98±104.05<sup>**</sup> | 1.78±0.13<sup>**</sup> |
| 力平之20mg/kg组 | 6.74±0.73<sup>*</sup> | 0.55±0.10<sup>**</sup> | 0.62±0.53<sup>**</sup> | 1170.75±425.34 | 1.76±0.19*<sup>*</sup> |
与正常组相比^P＜0.05，^^P＜0.01，与模型组相比，*P＜0.05，**P＜0.01。
5.对肝组织中TC、TG、SOD及GSH-PX的影响参见下表2所示。与正常对照组相比较，高脂性脂肪肝模型组鹌鹑肝组织中TC、TG明显增加(P＜0.05或P＜0.01)，而SOD活性显著降低(P＜0.01)；蛇床子素给药组则能剂量依赖性降低高脂性脂肪肝鹌鹑肝组织中TC、TG含量(P＜0.05或P＜0.01)，并能显著升高SOD和GSH-PX的活性(P＜0.05或P＜0.01)。
表2蛇床子素对鹌鹑高脂性脂肪肝肝组织中指标的影响(n＝10)
| 组别 | TC(mg/g湿组织) | TG(mg/g湿组织) | SOD(U/mg prot) | GSH-PX(活力单位) |
| 正常对照组 | 2.26±0.56 | 11.42±4.37 | 368.10±21.60 | 121.53±20.88 |
| 脂肪肝模型组 | 6.94±3.25^^ | 17.34±5.90^ | 314.24±17.91^^ | 111.23±29.85 |
| 组别 | TC(mg/g湿组织) | TG(mg/g湿组织) | SOD(U/mg prot) | GSH-PX(活力单位) |
| 蛇床子素5mg/kg组 | 4.32±0.69<sup>*</sup> | 16.04±4.74 | 343.20±33.71<sup>*</sup> | 130.00±38.82 |
| 蛇床子素10mg/kg组 | 4.05±1.82<sup>*</sup> | 13.48±2.55 | 344.16±10.25<sup>**</sup> | 151.4±41.34<sup>*</sup> |
| 蛇床子素20mg/kg组 | 3.66±1.14<sup>**</sup> | 12.97±2.38<sup>*</sup> | 353.70±33.95<sup>**</sup> | 174.35±46.43<sup>**</sup> |
| 力平之20mg/kg组 | 4.05±1.06<sup>*</sup> | 14.87±6.21 | 357.98±16.08<sup>**</sup> | 150.05±46.54<sup>*</sup> |
与正常组相比^P＜0.05，^^P＜0.01，与模型组相比，*P＜0.05，**P＜0.01。
6.对肝组织进行病理检查，结果表明，正常对照组肝细胞排列呈索状结构，结构正常；模型组可见弥漫性的脂质空泡，并有融合现象，给予蛇床子素5～20mg/kg后，肝细胞脂肪变性的程度明显减轻，肝细胞结构趋于正常。
本实验表明，蛇床子素对于高脂性脂肪肝有较好的治疗作用，从而，蛇床子素可以用于制备治疗高脂性脂肪肝的药物。
实施例二：蛇床子素制剂用于治疗大鼠酒精性脂肪肝。
1.蛇床子素制剂的配制：蛇床子素的纯度为95％，呈白色粉末状，临用时用0.5％的羧甲基纤维素钠溶液分别配制成0.25％、0.5％、1％的药物浓度。
2.对比试验制剂，采用法国利博福尼制药有限公司的力平之(非诺贝特胶囊)，白色粉末，临用时用0.5％的羧甲基纤维素钠溶液配制成1％的药物浓度。
3.实验动物为雄性SD大鼠，体重200～230克，实验期间饲养室温度为20±2℃。将大鼠随机分为2组，分别为正常对照组和造模组，造模组大鼠每天灌服40％酒精1ml/100g体重和玉米胚芽油0.4ml/100g体重，经8周后随机抽查，提示酒精性脂肪肝已形成。此时停止灌服酒精和玉米胚芽油，将已形成脂肪肝大鼠随机分成蛇床子素5mg/kg、10mg/kg和20mg/kg三个剂量组，力平之20mg/kg组和脂肪肝模型组，各给药组按不同剂量以0.2ml/100g体重灌胃，正常对照组和脂肪肝模型组给予等容积的0.5％羧甲基纤维素钠溶液，连续给药6周。
处理前12小时禁食、不禁水，然后以20％乌拉坦0.5ml/100g体重腹腔注射麻醉，腹主动脉取血，检测各项指标，取肝脏称重后分别用生理盐水和三氯甲烷∶甲醇(1∶1)混合液制成10％匀浆，供肝组织SOD、MDA和肝脂质测定，另取同一部位肝脏以10％福尔马林溶液固定，作显微镜检查。
4.对血清指标和肝重系数的影响参见下表3。与正常对照组相比较，脂肪肝模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C、FFA和肝重系数明显升高(P＜0.05或P＜0.01)；结果显示，蛇床子素给药各组能明显降低酒精性脂肪肝大鼠血清TC、TG、LDL-C的水平和肝重系数(P＜0.05或P＜0.01)，对FFA虽然有一定的降低作用，但未见有统计学上的差异。
表3蛇床子素对酒精性脂肪肝大鼠血清指标和肝重系数的影响(n＝10)
| 组别 | TC(mmol/L) | TG(mmol/L) | LDL-C(mmol/L) | FFA(μmol/L) | 肝重系数(g/100g) |
| 正常对照组 | 2.14±0.28 | 0.40±0.11 | 0.80±0.21 | 429.93±90.28 | 2.36±0.33 |
| 脂肪肝模型组 | 2.52±0.30^ | 0.51±0.09^ | 1.32±0.51^^ | 535.04±105.44^ | 2.82±0.28^^ |
| 蛇床子素5mg/kg组 | 1.72±0.18<sup>**</sup> | 0.38±0.08<sup>**</sup> | 0.64±0.34<sup>**</sup> | 477.37±109.47 | 2.30±0.14<sup>**</sup> |
| 蛇床子素10mg/kg组 | 1.69±0.29<sup>**</sup> | 0.36±0.11<sup>**</sup> | 0.50±0.17<sup>**</sup> | 473.79±196.55 | 2.30±0.12<sup>**</sup> |
| 蛇床子素20mg/kg组 | 1.60±0.36<sup>**</sup> | 0.37±0.06<sup>**</sup> | 0.43±0.21<sup>**</sup> | 487.59±130.79 | 2.37±0.19<sup>**</sup> |
| 力平之20mg/kg组 | 1.82±0.28<sup>**</sup> | 0.42±0.09<sup>*</sup> | 0.62±0.31<sup>**</sup> | 654.74±136.86<sup>*</sup> | 3.45±0.18<sup>**</sup> |
与正常组相比^P＜0.05，^^P＜0.01，与模型组相比，*P＜0.05，**P＜0.01。
5.对肝组织中TC、TG、SOD及MDA的影响参见下表4所示。与正常对照组相比较，酒精性脂肪肝模型组大鼠肝组织中TC、TG和MDA明显增加(P＜0.05)，而SOD活性明显降低(P＜0.05)；蛇床子素给药组则能剂量依赖性降低酒精性脂肪肝大鼠肝组织中TC、TG和MDA含量(P＜0.01)，并能升高SOD含量(P＜0.01)。
表4蛇床子素对酒精性脂肪肝大鼠肝组织中指标的影响(n＝10)
| 组别 | TC(mg/g湿组织) | TG(mg/g湿组织) | SOD(U/mg prot) | MDA(nmol/mg prot) |
| 正常对照组 | 1.94±0.24 | 15.27±3.35 | 58.33±4.28 | 4.14±1.34 |
| 脂肪肝模型组 | 2.25±0.36^ | 18.88±3.81^ | 50.04±8.20^ | 5.36±0.82^ |
| 蛇床子素5mg/kg组 | 1.82±0.38<sup>**</sup> | 16.19±4.21 | 61.11±3.26<sup>**</sup> | 3.90±1.35<sup>**</sup> |
| 蛇床子素10mg/kg组 | 1.80±0.25<sup>**</sup> | 14.25±3.10<sup>**</sup> | 61.45±3.62<sup>**</sup> | 3.74±0.99<sup>**</sup> |
| 蛇床子素20mg/kg组 | 1.76±0.21<sup>**</sup> | 13.67±4.30<sup>**</sup> | 58.91±3.72<sup>**</sup> | 2.88±0.92<sup>**</sup> |
| 组别 | TC(mg/g湿组织) | TG(mg/g湿组织) | SOD(U/mg prot) | MDA(nmol/mg prot) |
| 力平之20mg/kg组 | 1.61±0.20<sup>**</sup> | 12.84±3.22<sup>**</sup> | 53.80±2.49 | 2.59±0.54<sup>**</sup> |
与正常组相比^P＜0.05，^^P＜0.01，与模型组相比，*P＜0.05，**P＜0.01。
6.对肝组织进行病理检查，结果表明，正常对照组肝细胞排列呈索状结构，结构正常；模型组出现+到++的肝细胞脂肪变性，尤以中央静脉区较为严重，并有空泡融合现象，给予蛇床子素5～20mg/kg后，肝细胞脂肪变性的程度呈剂量依赖性减轻，部分动物肝脏未见有脂变细胞。
本实验表明，蛇床子素对于酒精性脂肪肝有较好的治疗作用，从而，蛇床子素可以用于制备治疗酒精性脂肪肝的药物。
实施例三：一种用于治疗脂肪肝的制剂，取蛇床子素，按重量计80％，添加20％的力平之，充分混合均匀，制成所需的制剂。通过添加通用的辅助成份，可以制成片剂、胶囊剂、冲剂、滴剂或颗粒剂。
实施例四：一种用于治疗脂肪肝的制剂，取蛇床子素，按重量计70％，添加30％的辛伐他汀，充分混合均匀，制成所需的制剂。通过添加通用的辅助成份，可以制成片剂、胶囊剂、冲剂、滴剂或颗粒剂。
实施例五：一种用于治疗脂肪肝的制剂，取蛇床子素，按重量计50％，添加30％的甜菜碱，20％的维生素E，充分混合均匀，制成所需的制剂。通过添加通用的辅助成份，可以制成片剂、胶囊剂、冲剂、滴剂或颗粒剂。
实施例六：一种用于治疗脂肪肝的制剂，取蛇床子素，按重量计55％，添加45％的银杏提取物，充分混合均匀，制成所需的制剂。通过添加通用的辅助成份，可以制成片剂、胶囊剂、冲剂、滴剂或颗粒剂。
实施例七：一种用于治疗脂肪肝的制剂，取蛇床子素，按重量计80％，添加20％的丹参提取物，充分混合均匀，制成所需的制剂。通过添加通用的辅助成份，可以制成片剂、胶囊剂、冲剂、滴剂或颗粒剂。
实施例八：一种用于治疗脂肪肝的制剂，取蛇床子素，按重量计30％，添加40％的首乌提取物，30％的维生素E，充分混合均匀，制成所需的制剂。通过添加通用的辅助成份，可以制成片剂、胶囊剂、冲剂、滴剂或颗粒剂。
实施例九：一种用于治疗脂肪肝的制剂，由纯度为95％的蛇床子素构成，通过添加通用的药用辅助成份，可以制成片剂、胶囊剂、冲剂、滴剂、颗粒剂或针剂。
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| C10 | Entry into substantive examination | ||
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| C14 | Grant of patent or utility model | ||
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| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
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