CN106074662A - 一种具有解酒保肝作用的姜黄组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种以姜黄素、虾青素、金银花提取物为主要成分的组合物,该组合物具有解酒保肝作用。本发明组合物具有成分明确、以三种不同的药效物质组成,利用不同的药效物质作用原理和靶点发挥解酒保肝作用,具有服用剂量小、药食同源的特点,是一种安全有效的解酒保肝的保健品。实验证明,本发明组合物较单一姜黄素、虾青素及金银花提取物具有更强的解酒保肝活性。体现了复方组合物的协同作用的特点,可用于制备具有解酒保肝作用的药品、保健食品。
Description
技术领域
本发明涉及一种以姜黄素、虾青素、金银花提取物为主要成分的组合物,该组合物具有解酒保肝作用,可用于预防和治疗由饮酒过量引起中毒性肝脏疾病。本发明也涉及该药物的药物制剂,属于医药技术领域。
背景技术
酒精性肝损伤(ALD)是因长期过量饮酒引起的中毒性肝脏疾病,ALD是西方国家患者导致肝硬化的最主要原因。在我国酒精性肝病近年来有逐渐增加的趋势,目前已成为仅次于病毒性肝炎的第二大肝病病因。酒精性肝病是由于长期大量饮酒所致的肝脏疾病,初期通常表现为脂肪肝,进而可发展成酒精性肝炎、酒精性肝纤维化和酒精性肝硬化,严重酗酒时可诱发广泛肝细胞坏死甚或肝功能衰竭。至今临床上还没有有效防治肝脏疾病发生发展的理想药物。目前认为,酒精有直接损害肝细胞的毒性作用,是造成肝损害的基本原因,氧化应激和脂质过氧化是酒精引起肝脏损伤的重要因素之一。连续大量饮酒(每日饮酒150g),一般均可造成肝损伤,有40%~50%会发生肝硬化。目前ALD的发病机制并不十分清楚,自由基及其介导的脂质过氧化被认为是最主要的致病因素。乙醇在肝脏代谢时可产生大量自由基:O2 -、H2O2、OH-、C2H5O-和C2H5OH-,过量的自由基可引起肝细胞膜发生脂质过氧化反应,使细胞膜和细胞器结构破坏,膜流动性失常;大量肝细胞内酶(ALT、AST)释放入血,并可使清除自由基酶(SOD、GPx)耗竭,肝细胞损伤进一步加重,肝功能异常,脂肪代谢紊乱,最终导致肝细胞广泛坏死,细胞肿胀死亡。因此,清除自由基抑制脂质过氧化反应,保护肝细胞,恢复肝脏正常功能,是防治ALD发生和发展的关键。
乙醇性脂肪肝(alcoholic fatty liver disease,AFLD)是指由于乙醇摄入过量而导致的肝脏一系列损害病变。肝脏中过量的乙醇及其氧化代谢产物可诱导肝细胞微粒体酶细胞色素P450系统活性,特别是与乙醇代谢有关的高活性氧化代谢酶CYP2E1活性升高,进而通过CYP2E1的氧化代谢产生大量活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)。ROS具有极强的氧化攻击特性,可直接攻击细胞器、DNA及具有重要功能的蛋白信号因子,导致肝细胞损伤及肝功能异常等。
降低体内血中乙醇及其代谢产物的浓度是解酒药物的作用关键,减轻其对各器官的损伤。当前的解酒药物主要以下两个方面发挥解酒作用。第一,解酒药物抑制酒精的胃肠吸收,加强乙醇在胃肠道首过效应,降低血中乙醇浓度;第二,解酒药物直接作用于肝代谢的酶系,加速乙醇及其代谢产物的消除速率,减轻其对细胞和组织的损害。长期以来,通过化学合成的方法研制解酒护肝药物并未取得大的突破。
因此研究一种可以降低酒精毒性,并可对酒精所致肝损伤有恢复作用的药物有着较大的社会效益及应用前景。
本发明就是将从天然植物中发现和提取的一种具有防治酒精性肝损伤的天然药物组合物。该组合物是由有效成分创新组合成天然产物组合物,从几种不同作用机制上入手治疗酒精性肝损伤,多组分多靶点协同作用,达到长短结合,标本兼治的效果,以期从疗效和安全性上有显著的突破和提高。
姜黄素(Curcumin)为姜科植物姜黄(Curcuma longa L.)的干燥根茎提取纯化得到,姜黄素具有抗心血管疾病、抗肿瘤、抗微生物、抗抑郁、抗纤维化、保肝等药理作用。姜黄素通过抗炎、抗氧化应激和保护线粒体等功能抵抗急性肝损伤。王政研究表明,姜黄素具有减轻酒精和脂肪导致的肝脏损伤的作用(食品科学,2007年第10期);彭景华综述说明了,姜黄素抗肝损伤的作用机理主要表现在清除肝脏自由基、抑制肝脏炎症反应以及抑制肝星状细胞活化等几大方面,姜黄素具有阻断、延缓肝损伤病理进程的作用(国外医学,消化系疾病分册,2005年06期);姜黄素对四氯化碳导致的酒精性肝损伤具有保护作用(中华现代临床医学杂志,2009年第7卷第1期);尹蓉研究表明,姜黄素对酒精性肝损伤具有保护作用,姜黄素能通过抑制酒精中毒大鼠脂质过氧化和肝组织中NF-κB的表达,从而减轻或防治酒精诱导的肝损伤(兰州大学,2008年硕士论文);沃兴德研究表明,姜黄素的毒性研究表明,其短期及长期用于正常动物未见不良反应、致畸及致癌反应(浙江中医学报,2000,24:55-56)。
虾青素是从红球藻属雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)中提取分离得到。虾青素是一种类胡萝卜素,主要以全反式异构体形式存在于海洋动物体、藻体及多数陆生植物体内并具有多种生物学功能,如抗氧化、防止心血管疾病、提高免疫力和抗癌等作用,其中总抗氧化能力为维生素E的近20倍(Trends Biotechnol,2003,21(5):210)。裴凌鹏研究表明,虾青素可以降低血清ALT,AST活性和肝脏组织中MDA含量,升高血清与肝组织中SOD,GSH-px活性,并降低肝细胞脂肪堆积,有效缓解乙醇对肝脏组织的损伤(江苏大学学报,医学版,2008年8月18卷4期);裴凌鹏研究表明,虾青素对四氯化碳引起的肝损伤具有防治作用(中国公共卫生,2009年5月25卷5期)。
金银花提取物为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或带初开的花经过提取得到。具有清热、解毒、凉风散热的功效,具有广谱抗菌及抗氧化的作用。周春晖研究表明,金银花提取物对小鼠化学性肝损伤具有保护作用(现代食品科技,2010年第26卷第4期);陈红莲研究表明,金银花对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤具有保护作用,金银花提取物能显著降低血清中ALT、AST水平(P<0.05或P<0.01),提高肝组织匀浆SOD、GSH-Px水平(P<0.05或P<0.01),减少TNF-α、MDA含量(P<0.05或P<0.01)(中国老年学杂志,2011年第16期);王东升研究表明,金银花提取物对对乙酰氨基酚所致的小鼠肝损伤具有保护作用(医药导报,2011年第8期)。
本发明完成前,还未发现由姜黄素、虾青素及金银花提取物组成的组合物具有防治酒精性肝损伤的作用,也未发现本发明组合物在防治酒精性肝损伤的药品和保健品中的应用。
发明内容
本发明人依据科学理论、经过反复试验,选用了姜黄素、虾青素及金银花提取物组方,通过增强肝脏解毒和酶解,以利尿作用加速体内乙醇的分解和排泄,阻止消化道对乙醇的吸收及中枢神经系统的作用,降低乙醇对肝脏的损害,促肝细胞再生,增加脑及冠状血管流量,缓解中毒症状等作用。本制剂具有原料天然可长期服用、易吸收、效果显著等特点。
本组合物与欧美、日本畅销的以添加兴奋剂、止痛剂、维生素和矿物质等类型解酒剂具有明显的不同,这些解酒剂只能暂时缓解醉酒引起的症状,但对于酒精引起的肝损伤并无确切疗效;同时与目前已有的护肝解酒类保健食品相比,具有作用更确切,药效物质组成更清楚的优势,具有明显的特色,这是本发明的突出贡献。
本发明的突出贡献在于:本发明组合物在相同剂量下较各单一组分活性更强。体现了该组合物复方药效成分相互协同、多靶点、多途径作用,也体现了中医传统复方用药的特点。本发明适用于饮酒较多造成酒精性肝损伤者,通过降低乙醇在血中的浓度,促进乙醇的清除,消除酒后体内产生的过量自由基,阻碍过氧化脂质的形成,从而减轻了乙醇对肝组织的损伤,起到对肝损伤的辅助保护功能。具有明显的创新性和技术进步。
本发明另一突出贡献在于:本发明组合物配方设计科学合理,制剂工艺简单可行,质量可控,安全性高,比相同剂量下的单一的姜黄素、虾青素及金银花提取物具有更优的改善酒精性肝损伤症状的作用,适宜于广大酒精性肝损伤人群的使用。
本发明所要解决的技术问题在于从天然植物姜黄、雨生红球藻及金银花中提取具有防治酒精性肝损伤作用的活性组分、制备天然产物组合物。
本发明提供了一种具有防治酒精性肝损伤的天然药物组合物,该组合物包括姜黄素20-150份,虾青素10-80份,金银花提取物30-300份。优选姜黄素100份,虾青素25份,金银花提取物250份。按照上述比例混合组成活性成份与药用辅料制成的。
本发明的另一目的是提供了本组合物的制备方法:
(1)将姜黄粉碎成粗粉,用6-10倍量50-90%食用乙醇提取2-3次,每次提取2-3小时,提取温度为50~80℃,提取液过滤,滤液回收乙醇,浓缩到含醇量为20%,通过预先处理好的D-101大孔树脂柱,先用20%乙醇洗脱,再用80%乙醇洗脱,收集80%乙醇洗脱液,回收乙醇,干燥,得姜黄素;
(2)将雨生红球藻置闪式提取器中用60-95%食用乙醇提取2-3次,每次提取2-3小时,提取温度为50-80℃,过滤,回收乙醇,干燥得得红球藻虾青素;
(3)将金银花用8-12倍的去离子水煮沸提取2-3次,每次提取2-3小时,滤取滤液,浓缩,干燥,得金银花提取物;
(4)将姜黄、虾青素及金银花提取物按照比例混合均匀后加入辅料均匀,制成口服制剂。
由于本发明首次公开了由姜黄素、虾青素及金银花提取物组成的组合物具有防治酒精性肝损伤的作用,因此,将本组合物单独或与其它活性组份或辅料配合制成药剂,只要是该药剂用于预防和治疗酒精性肝损伤,均属于本发明的保护范围。本发明的组合物在制成任何一种剂型时,均具有预防和治疗酒精性肝损伤的作用。
由姜黄素、虾青素及金银花提取物组成的组合物(简称组合物)具有防治酒精性肝损伤作用,通过以下药效学实验得到证实。
本发明需要的组合物(由实例4制备得到,姜黄素:虾青素:金银花提取物=2:0.5:5)、姜黄素、虾青素、金银花提取物均由吉林省中医药科学院植物化学研究所提供。阳性对照药联苯双酯滴丸由北京协和药厂生产(20151001)、东宝肝泰由吉林通化东宝药业股份有限公司生产(20151202)。
1、本发明组合物对酒精性肝损伤的保护作用
小鼠90只,随机分为9组,即本发明组合物分别按80、160及320mg/kg三个剂量组,姜黄素剂量组、虾青素剂量组、金银花提取物剂量组各320mg/kg灌胃小鼠,酒精模型组,空白对照组和阳性对照组(联苯双酯滴丸)50mg/kg,1次/d,共14d,酒精模型组和空白组对照组分别灌胃等体积蒸馏水,1次/d,共14d。末次给药后禁食12小时,除空白对照组仍然灌胃等量蒸馏水外,其他8组动物(本发明组合物低、中、高三个剂量组,姜黄素剂量组、虾青素剂量组、金银花提取物剂量组,阳性药对照组,酒精模型组)分别灌胃50%乙醇15mL/kg,6h后眼静脉取血,测定血清中ALT和AST含量,取小鼠肝脏称重,测定肝器指数,取右叶测定SOD,GSH-PX活性,MDA含量。
表1本发明组合物对酒精损伤小鼠血清ALT、AST及肝脏系数的影响
与空白对照组比较:*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001;
与酒精组比较Δp<0.05,ΔΔp<0.01。
从表1可知,灌胃酒精使小鼠肝指数显著增加,灌胃本发明组合物可使酒精损伤小鼠肝脏指数显著降低。灌胃酒精使小鼠血清ALT、AST显著增加,灌胃本发明组合物可使酒精损伤小鼠血清ALT、AST显著降低。阳性对照药可使小鼠血清ALT、AST显著降低,也可显著降低小鼠肝脏指数。相同剂量下组合物较各单一组分活性更强。
表2本发明组合物对酒精损伤小鼠肝脏MDA、GSH-PX、SOD的影响
与空白对照组比较:*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001;
与酒精组比较Δp<0.05,ΔΔp<0.01。
从表2结果表明,酒精能引起小鼠肝脏MDA含量显著升高、引起GSH-PX酶、SOD活性显著降低,而本发明组合物能显著降低MDA含量,能显著升高GSH-PX酶、SOD活性。阳性对照药也能显著降低MDA含量、显著升高GSH-PX酶、SOD活性。相同剂量下本发明组合物较各单一组分活性更强。
2、本发明组合物对酒精引起的脂肪肝的改善功能
试验大鼠90只,随机分为正常对照组;脂肪肝模型组;阳性对照药东宝肝泰500mg/kg,给药剂量组:本发明组合物设80mg/kg、160mg/kg和320mg/kg三个剂量组,姜黄素剂量组、虾青素剂量组、金银花提取物剂量组各320mg/kg。共9组,每组10只。除正常对照组外,其余各组大鼠每日上午8:30灌胃给予(56%乙醇+0.5mL鱼油)1次,乙醇剂量开始为7g/kg,随后每周递增0.2g/kg,连续4周。正常对照组大鼠灌胃给予等热量的56%葡萄糖+0.5mL鱼油。受试药物用蒸馏水配制成混悬液,每日灌胃给予1次,正常对照组与模型对照组大鼠灌胃给予等量的蒸馏水,灌胃体积为10ml/kg/d。试验过程中大鼠自由摄食饮水,每周称量体重1次,以调整给药剂量。于给药第四周末处死动物。标本采集及观测指标,试验结果以均数加减标准差表示,统计学处理方法采用组间t检验。实验结果见表3和表4。
表3本发明组合物对酒精性脂肪肝大鼠血清ALT、AST和LDH活性的影响
与正常对照组比较:*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001;
与模型组比较Δp<0.05,ΔΔp<0.01,ΔΔΔp<0.001。
本发明组合物高、中剂量组动物血清ALT和AST活性非常明显的低于模型组,本试验结果表明,本发明组合物可明显降低酒精性脂肪肝大鼠血清中异常升高的ALT、AST的活性,说明本发明组合物对肝细胞具有良好的保护作用。本发明组合物高、中剂量组对酒精性脂肪肝动物血清LDH水平的异常升高具有明显的降低作用,此项试验结果表明,本发明组合物对酒精所致脂肪肝有很好的保护作用。相同剂量下本发明组合物较各单一组分活性更强。
表4本发明组合物对酒精性脂肪肝大鼠血清TC、TG和MDA含量及肝组织TG含量的影响
与正常对照组比较:*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001;
与模型组比较Δp<0.05,ΔΔp<0.01。
本发明组合物可降低脂肪肝模型动物血清MDA含量,抑制脂肪肝时肝细胞的脂质过氧化反应,从而发挥保护肝细胞免受损伤的作用。本发明组合物高、中两个剂量组动物血清中TC、TG含量及肝组织TG含量显著低于模型对照组。表明本发明组合物可以降低酒精所致脂肪肝大鼠血脂含量及肝脏脂类含量的升高,具有抑制肝脏脂肪堆积的作用。相同剂量下本发明组合物较各单一组分活性更强。
从以上的药效学实验可知,本发明组合物具有预防和治疗酒精性肝损伤、酒精性脂肪肝的作用,并且长期服用没有副作用。
本发明是通过下面的实施例进行详细的说明,但不意味着本发明仅限于此,具体实施方案如下:
实施例1、姜黄素的制备
姜黄5kg,粉碎成粗粉,用8倍量70%食用乙醇提取2次,每次提取2小时,提取温度为80℃,提取液过滤,滤液回收乙醇,浓缩到含醇量为20%,通过预先处理好的D-101大孔树脂柱,先用20%乙醇洗脱,再用80%乙醇洗脱,收集80%乙醇洗脱液,回收乙醇,干燥,得姜黄素。
实施例2、虾青素的制备
雨生红球藻5kg,置闪式提取器中用80%食用乙醇提取3次,每次提取2小时,提取温度为65℃,过滤,回收乙醇,干燥得得红球藻虾青素。
实施例3、金银花提取物的制备
金银花5kg,用10倍的去离子水煮沸提取2次,每次提取2小时,滤取滤液,浓缩,干燥,得金银花提取物。
实施例4、组合物的制备
取姜黄素20g,虾青素10g,金银花提取物50g,混合均匀,即得本发明组合物。
实施例5、胶囊剂的制备
取姜黄素80g,虾青素40g,金银花提取物200g,混合均匀,加入适量淀粉,用80%乙醇制粒,干燥,装胶囊,制成1000粒。
实施例6、片剂的制备
取姜黄素80g,虾青素40g,金银花提取物200g,混合均匀,加入适量淀粉,用80%乙醇制粒,干燥,压片,制成1000片。
Claims (5)
1.一种具有解酒保肝作用的组合物,其特征在于:活性成分由姜黄素,虾青素,金银花提取物组成。
2.根据权利要求1所述的一种具有解酒保肝作用的组合物,其特征在于,它是由下述重量份的原料制成:姜黄素20-150份,虾青素5-50份,金银花提取物30-300份。
3.根据权利要求2所述的一种具有解酒保肝作用的组合物,其特征在于,它是由下述重量份的原料制成:姜黄素100份,虾青素25份,金银花提取物250份。
4.根据权利要求1-3任意之一所述的具有解酒保肝作用组合物的制备方法,包括如下步骤:
(1)将姜黄粉碎成粗粉,用6-10倍量50-90%食用乙醇提取2-3次,每次提取2-3小时,提取温度为50~80℃,提取液过滤,滤液回收乙醇,浓缩到含醇量为20%,通过预先处理好的D-101大孔树脂柱,先用20%乙醇洗脱,再用80%乙醇洗脱,收集80%乙醇洗脱液,回收乙醇,干燥,得姜黄素;
(2)将雨生红球藻置闪式提取器中用60-95%食用乙醇提取2-3次,每次提取2-3小时,提取温度为50-80℃,过滤,回收乙醇,干燥得得红球藻虾青素;
(3)将金银花用8-12倍的去离子水煮沸提取2-3次,每次提取2-3小时,滤取滤液,浓缩,干燥,得金银花提取物;
(4)将姜黄、虾青素及金银花提取物按照比例混合均匀后加入辅料均匀,制成口服制剂。
5.一种具有解酒保肝作用的组合物口服制剂,其特征在于该制剂是由权利要求1-4任意之一所述的组合物与药用辅料制成,该口服制剂为选自胶囊、片剂,丸剂、颗粒剂中的任意一种。
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