CN1668731A - 在由培养基改变调节的絮凝作用下遗传修饰的微生物,质粒以及发酵过程 - Google Patents

在由培养基改变调节的絮凝作用下遗传修饰的微生物,质粒以及发酵过程 Download PDF

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CN1668731A
CN1668731A CN 03816341 CN03816341A CN1668731A CN 1668731 A CN1668731 A CN 1668731A CN 03816341 CN03816341 CN 03816341 CN 03816341 A CN03816341 A CN 03816341A CN 1668731 A CN1668731 A CN 1668731A
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johnston
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saccharomyces
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flocculating
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马科斯·戈梅斯·德·索萨
小阿尔维斯·佩雷拉·哈罗多
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Abstract

本发明提供了在由改变培养基调节的絮凝作用下遗传修饰的微生物,质粒以及发酵过程,本申请涉及遗传修饰的微生物,产生所述生物体的方法以及利用所述生物体的发酵过程。在发酵过程的末期这些微生物发生絮凝作用,更快速的沉淀在发酵容器的底部,从而于发酵过程中获得的终产物分离开来。

Description

在由改变培养基调节的絮凝作用 下遗传修饰的微生物,质粒以及发酵过程
发明背景
发明领域
本发明涉及在微生物中操作和加入絮凝剂基因用于生产工业原料以及利用所述微生物的方法。
更具体地说,本申请涉及遗传修饰的微生物,产生所述生物体的方法以及利用所述生物体的发酵过程。在发酵过程的末期絮凝,更迅速地沉降在发酵容器底部,从而与从发酵期间获得的终产物分离开来。这个过程是一个纯化过程。
现有技术的描述
自从人类早期历史,人类就知道利用微生物改变以及产生医药或者食物原料,一个基本的例子是富含糖的原料,诸如葡萄,大麦及其他成分发酵“汁液”的过程,发酵后所述原料通过厌氧反应转化成诸如葡萄酒,啤酒及其它产物的其它产品。
随着生物工艺学的出现,开始在分子水平进行许多这些转化,因此可以产生诸如蛋白及其衍生物的其它种类的原料,强有力地促进了制药工业合成人类生存的必需药品,诸如胰岛素,生长激素等。
不久以前,术语生物工艺学中的发酵必然是指厌氧发酵,其中微生物在缺少空气的条件下加工原料。厌氧发酵的主要产品为醇,乙醇,酒精饮料以及面包工业。
随着重组DNA技术的出现,发酵罐开始用于需氧发酵加工。利用需氧发酵,微生物被用于产生诸如蛋白,通过表达给定基因产生的药用,工业用酶的其它物质,所述基因天然存在于所述微生物中,或者利用重组DNA技术被引入这些微生物中。
发酵过程的一个重要工业问题是从目的终产物分离微生物。这个步骤就是纯化过程并且可以通过若干方式得以实现。
纯化技术被分成两大组。第一种技术包括从诸如微生物的较大组分中分离终产物。第二种技术包括回收后的产品纯化过程。
对于较大组分技术而言,一种方法是真空下利用离心或者旋转过滤,通过离心力迫使不同密度物质的加速分离,由此从微生物中分离终产物。
这种技术需要昂贵的设备,需要高成本的维持费并且在操作中产生过多损耗。
另一使用的方法是滗析。因为滗析是自然过程,因而进行的非常慢,诸如白兰地酒生产的过程中。此外,它可以引起早期细胞分裂,将不需要的物质投入某些步骤中,诸如葡萄酒的制造工艺。
当发现目标产品在细胞内时,即还未分泌时,细胞裂解是另一种使用的技术。裂解是通过化学或者机械试剂破碎细胞膜将产物释放到培养基中进行的。
吸附色谱法是另一种常用方法,虽然昂贵,对于每种目标产物而言却是高度特异性的。
所有的这些方法都由于延迟获得终产物或者因为进行加工所需的工厂的高成本都是昂贵的。
为了解决这些问题,人们尝试了各种方法以更强烈的发生絮凝现象(将微生物聚集成团),以此促使所述方法去除不需要的物质。
由于遗传修饰的可能性,絮凝现象可被用于各种工业目的,成为纯化目标产物的方法的一部分。条件启动子与絮凝基因的组合使发酵过程最佳化,由此在与第一个纯化阶段相连时使用被转化成产品的全部扣除物。基因是指编码肽或者蛋白的核苷酸序列。基因具有被称作启动子的非编码区,将基因细分为两类:远离任一刺激物表达的组成型基因,依赖于刺激物表达的调节基因。另一方面,每一启动子具有核苷酸序列的特有特性并且根据编码部分进行定位,而且可以根据发酵培养基的组分抑制或者诱导基因表达。例如,我们可以提及构建邻近于絮凝基因的ADH启动子,所述絮凝基因在缺乏葡萄糖的条件下进行表达并在缺乏所述糖的条件下受到抑制。
絮凝过程受到特异基因的控制,所述特异基因中的一些是文献中已知的,诸如来自Watari(J.Watari,Agric.Biol.Chem.Vol.55,n°6,1991--1547到1552)的FLO1,并且在一些专利中已知的,诸如专利PI 0001122-3中的Pereia(2000)以及美国申请5,585,271中的Watari(1996)。
在美国申请5,585,271中,Watari是指酵母中发现的絮凝基因FLO1。Watari专利主要集中于基因,但是Watari在实施例中提及了具有启动子ADH的FLO1基因的编码区在用酿酒酵母生产啤酒中的应用。
通常,这个参考文献涉及啤酒生产过程,但所述具有絮凝剂的过程存在几个缺点,诸如低发酵速度;在表面上形成浮动块而且使得在加工中的发酵以及发酵罐充气变得困难;在发酵泡沫以及结渣中损失细胞。
Pereira(2000)也提交了一个专利申请(PI 0001122-3 A),其中他也利用了具有ADH启动子的FLO1基因,只是应用到生产乙醇和葡萄酒中。所述专利主要具有3点限制:i)它限于酒精发酵,ii)它限于发酵过程(不包括微生物和质粒)以及iii)它限于应用于野生型微生物。
此外,在Pereira的专利(2000)中,使用FLO1基因,其对于大多数工业用酵母而言具有不完全的以及不能令人满意的絮凝标准。上述Watari(1996)提及的FLO1L以及FLO1S基因改正了这个问题,因为它们包括用于全部絮凝的更多部分。
另一涉及絮凝基因的专利是Kobayashi的(美国专利5,866,374)。所述专利是指利用Lg-FLO1基因用于啤酒生产。啤酒生产是一种乙醇和厌氧发酵过程,无需使用诸如药用以及工业用酶的其它物质。此外,这个过程不涉及发酵过程末期用具有敏感启动子的基因进行条件性调节。
那个过程试图通过利用完整的基因简单地阻断Lg-FLO1基因或者增加其表达加强啤酒发酵。总之,如果表达得以加强或者削弱,在整个发酵期间只有一种操作方式:刚好絮凝或者从不絮凝。
Oliver的专利GB 2353798也利用了由特异性启动子调节的絮凝基因。但是使用的絮凝基因是具有启动子SRB1和PSA1的PKC1。这个构建物只被用来生产啤酒。这种基因和启动子的组合及其在啤酒生产中的应用不是本发明的范围。
发明概述
本发明的目的是获得遗传修饰的微生物,其具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动或者抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发。
由于种种原因本申请不同于如上所述作为背景技术的专利。首先在于过程,因为所有上述作为背景技术的专利涉及的是厌氧发酵过程,而本申请涉及的是需氧发酵过程。这种差异引起科学上和经济上有价值的出乎意料的效果。厌氧发酵过程只生产乙醇产品,通常诸如葡萄酒,乙醇和酒精饮料。需氧发酵过程可以生产其它物质:例如蛋白,药物,胰岛素,疫苗,工业用酶和常用酶。这些其它物质的生产源于天然存在于所述微生物中或者通过重组DNA技术被引入所述微生物中的给定基因的表达。
本发明也涉及厌氧发酵过程但是,在本发明中,我们利用絮凝基因,启动子和微生物的组合,这不同于在现有技术专利中提及的。这些差异也引起具有科学上和经济重要性的出乎意料的效果。这些絮凝基因,启动子和微生物的不同组合也已经被用于可用于厌氧和需氧发酵过程的微生物,载体,质粒和基因盒的专利申请中。
本申请不仅要求方法专利而且要求遗传修饰的微生物的权利。并且还要求构建所述遗传修饰微生物所需的载体,质粒和基因盒的权利。
Watari和Oliver专利要求的只是作为遗传修饰微生物的酵母。在本申请中,我们还包括细菌,藻类,原生动物,真菌和古细菌。所有的这些微生物与酵母具有非常不同的特性,例如它们不是真核生物,对它们的操作更简单,它们能够在高温下生存并且能够产生光合作用。
Pereira的专利不要求微生物,载体,质粒和基因盒的权利,而是要求发酵过程的权利。
优选实施方案的详细说明
Watari的专利提及使用酿酒酵母菌株W204的FLO1基因和ADH启动子用于啤酒发酵。我们使用与酿酒酵母具有不同特性的酵母的FLO1基因和ADH,诸如巴斯德毕赤氏酵母(Pichia pastoris),多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomyces calsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)。这些其它酵母比酿酒酵母更高产或者具有不同的发酵效果。
巴斯德毕赤氏酵母(Pichia pastoris)和多形汉逊酵母(Hansenulapolymorpha)能够非常大量生产由位于给定区的基因编码的蛋白。它们可用作高效表达载体,比酿酒酵母更有效。
例如椭圆酵母用来发酵葡萄酒。例如卡尔酵母用于生产大量的啤酒,而酿酒酵母用于生产“麦芽”啤酒。产朊假丝酵母,解脂假丝酵母和乳酸克鲁维酵母用来发酵乙醇。
在有效菌株中,包括下列菌株:
956.X2180-1A,ATCC 26786 a SUC2 mal gal2 CUP1 R.K.Mortimer
957.X2180-1B,ATCC 26787 α SUC2 mal gal2 CUP1 R.K.Mortimer
857.158 a Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
858.159 αCan.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
713.KIL-k2来自散装鲜啤)Antonie van Leeuwenhoek,1978,44,59 M.Richards
738.KIL-k2(啤酒厂杂质)Antonie van Leeuwenhoek,1978,44,59A.P.Maule
761.KIL-k3来自棕榈酒),CBS 7903 J.Ferm.Technol.,1985,63,421-429 N.Okafor
1001.KIL-k2(酿酒酵母)Antonie van Leeuwenhoek,1978,44,59
1561.A8209B his4-864 KIL-k1 G.Fink via T.Young
958.X2928-3D-1A a ade1 gal1 leu1 his2 ura3 trp1 met14 R.K.Mortimer
959.X2928-3D-1C α ade1 gal1 leu1 his2 ura3 trp1 met14 R.K.Mortimer
1786.STX 147-4C α ade1 his7 tyr1 gal1 cly8 ade5 aro2 met13 lys5trp5 cyh2 arg4 lys1 ura4 gal2 ade2 rad56 L.Johnston
1620.STX77-6C α gal1 his4 trp1 hom3 ura3 CUP1 ilv3 ade3 rad52rna1 L.Johnston
1618.X4119-19C a his7 tyr1 cdc9 trp4 aro1B hom2 rad2 thr1 lys11gal2 ade2 L.Johnston
1661.X4120-19D αlys2 leu2 pet14 rad(?)rna3 ade8 aro1D met10ade5 leu1 CUP1 L.Johnston
1619.STX66-4A a rad18 lys4 trp1 prt3 CUP1 gal2 ade2 met2 pha2 L.Johnston
1617.K396-22B αspo11 ura3 ade1 his1 leu2 lys7 met3 trp5 L.Johnston
1614.K381-9Dαspo11 ura3 ade6 arg4 aro7 asp5 met14 lys2 pet17trp1 L.Johnston
1613.K398-4D a spo11 ura3 ade6 arg4 aro7 asp5 met14 lys2 pet17trp1 L.Johnston
1611.K382-23A a spo11 ura3 can1 cyh2 ade2 his7 hom3 L.Johnston
1612.K382-19D α spo11 ura3 can1 cyh2 ade2 his7 hom3 tyr1 L.Johnston
1616.K393-35C α spo11 ura3 his2 leu1 lys1 met4 pet8 L.Johnston
1615.K399-7D a spo11 ura3 his2 leu1 lys1 met4 pet8 L.Johnston
1383.DBY 747,ATCC 44774 a leu2-3 leu2-112 his3-DELTA1 trp4-289 ura3-52 Gene,1979,8,17-24.J.F.Makins
1392.MC16 α leu2-3 his4-712FS)SUF2 ade2-1 lys2-1 Nature,1981,275,104.J.F.Makins
1445.LL20 α his3-11 his3-15 leu2-3 leu2-112 J.Bacteriol.,1979,140,73-82 A.Coddington
1527.MD40/4C α leu2-3 leu2-112 his3-11 his3-15 ura2 trp1 CANs B.Bowen
1528.AH22 a leu2-3 leu2-112 his4 canR B.Bowen
1627.D13-1A(YNN6)a trp1 his3-532 gal2 L.Johnston
1771.cdc9-1(L89-6C)a cdc9-1 leu2 ade1 ade2 ura1 lys2 L.Johnston
804.D160 a ura3 his1 arg6 trp2 ade1 J.F.T.Spencer
805.A364A a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 J.Mol.Biol.,1976,105,427-443 J.F.T.Spencer
806.x112 α ade8-2 trp5-2 lys2-1 ura1-1 J.F.T.Spencer
808.GRH1 a trp1 ade1 his7 ura1 gal1 G.Stewart
1395.S1896D a met7 trp1 leu1 ade1 gal1 gal2 pet R.K.Mortimer
1396.F33 α met7 gal2 pet R.K.Mortimer
1623.X2181-1B a gal1 his2 trp1 ade1
1626.CG379 ade+αhis7-2 leu2-3 leu2-112 trp1-289 ura3-52(ade5rev)
1631.g440-7C α ade4 trp1 L.Johnston
1632.D273-11A α ade1 his1 trp2 L.Johnston
1662.α arg met L.Johnston
1663.a arg met L.Johnston
1664.α/α arg 2μ+L.Johnston
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1720.B635 a cyc1-115 his1-1lys2-1 trp2 L.Johnston
1772.L126-R9 a leu2 hom3-10 his1 L.Johnston
1790.a/a arg his 2μ+L.Johnston
1812.L126-2B a leu2 hom3-10 his1 L.Johnston
1821.S13 a his4 ura1 trp5 gal2 L.Johnston
1822.S49 a his4 ura1 trp5 gal2 ade6 L.Johnston
1961.GRF18 αleu2-3 leu2-212 his3-11 his3-15 canR G.Fink via D.MacKenzie
1356.A 137 αpho80-2 J.Bacteriol.,1973,113,727-738 A.Coddington
1357.A 138 a pho80-2 J.Bacteriol.,1973,113,727-738 A.Coddington
828.a ade1 J.F.T.Spencer
829.αade1 J.F.T.Spencer
1577.a ade1 leu1 B.Pearson
1652.a ade1 leu2 B.Pearson
830.a ade2 J.F.T.Spencer
802.αade2(lys)J.F.T.Spencer
832.a ade3 J.F.T.Spencer
833.αade3(ura)J.F.T.Spencer
834.a ade4 J.F.T.Spencer
835.αade4(ura)J.F.T.Spencer
836.a ade5 J.F.T.Spencer
837.αade5(ura)J.F.T.Spencer
838.a ade6 J.F.T.Spencer
839.αade6(trp)J.F.T.Spencer
840.a ade7 J.F.T.Spencer
841.αade7 J.F.T.Spencer
842.a ade8 J.F.T.Spencer
843.αade8(lys trp)J.F.T.Spencer
1654.cdc3-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc3-1 L.Johnston
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1718.JC2(L31-9a[a]/L31-2c[α])cdc9/cdc9 cdc28/cdc28 ade/+tyr1/tyr/1 canR/++/his1 L.Johnston
1797.cdc36(MH30)α/a gal1/gal1 ade1/+his1/+trp2/++/trp1+/ura1
961.2C-4αarg4-2/+arg4-17/+CUP1/+thr1/+;rec5 leu1 trp5 trp1his5 ade2 Radiation Res.,1972,49,133 & 148 R.K.Mortimer
960.2C-8αarg4-2/+arg4-17/+CUP1/+thr1/+;rec4 leu1 trp5 trp1his5 ade2 Radiation Res.,1972,49,133 & 148 R.K.Mortimer
1823.dbf1(L123-8A)αtrp1 ura3 dbf1 L.Johnston
1824.dbf2(L119-7D)αtrp?ura3 ade1 dbf2 L.Johnston
1750.dbf2-3(D128)αade1 his1 trp2 dbf2-3 L.Johnston
1825.dbf3(L124-11D)a ura3 dbf3 L.Johnston
1751.dbf3-1(D128)αade1 his1 trp2 dbf3-1 L.Johnston
1747.dbf8-1(D128)αade1 his1 trp2 dbf8-1 L.Johnston
1748.dbf9-1(D128)αade1 his1 trp2 dbf9-1 L.Johnston
1813.dbf10-1(D141)αade1 his1 trp2 dbf10-1 L.Johnston
1814.dbf11-1(D132)αade1 his1 trp2 dbf11-1 L.Johnston
1815.dbf13-1(D101)αade1 his1 trp2 dbf13-1 L.Johnston
1816.dbf14-1(D22)αade1 his1 trp2 dbf14-1 L.Johnston
1817.dbf14-2(D25)αade1 his1 trp2 dbf14-2 L.Johnston
1818.dbf14-3(D44)αade1 his1 trp2 dbf14-3 L.Johnston
1819.dbf15-1(D22)αade1 his1 trp2 dbf15-1 L.Johnston
1820.dbf20-1(D175)αade1 his1 trp2 dbf20-1 L.Johnston
1794.MH25α/a dbf2/dbf2 gal1-D5/gal1-A ade1/+his1/his1 trp2/trp2+/ura1+/tyr1+/ade2+/his L.Johnston
1795.MH26α/a dbf3/dbf3 gal1-D5/gal1-a ade1/ade1 his1/+trp2/++/lys2+/ura1+/tyr1+/ade2 L.Johnston
1796.MH27α/a dbf4/dbf4 gal1-D5/gal1-A ade1/ade1 his1/his1trp2/++/lys2+/tyr1+/ade2+/his7 L.Johnston
1621.g716-5a ho a can1 hom3-10 his1-7 L.Johnston
1622.309αade2-R8 metX can1-11 L.Johnston
1717.L39-8Cαtrp1 or trp2 lys2 canR L.Johnston
1628.320 a rme ade2 ura3 leu1 can1-11 cyh2-21 L.Johnston
1716.α131-20αade2-R8 cyh2 can1 leu1 ura3 L.Johnston
807.x 464-20Cαtrp1 ade1 his2 leu1 gal1 J.F.T.Spencer
859.168 a ade1 gal1 lys2 tyr1 his7 ura1 ade2 Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
1789.L58.3b gal1 ade1 or ade2 L.Johnston
1638.L57-15b gal1 his7 lys2 tyr1 L.Johnston
1625.Z65 a/αgal1-1/gal1-4 lys2-1/lys2-2 tyr1-1/tyr1-2 his7-2/his7-1ade1/++/ade2+/ura L.Johnston
1757.M1-2B(YNN 27)αtrp1 ura3-52 gal2 L.Johnston
865.205αgal7 lys2 tyr1 his4 leu2 thr4 MAL2 trp1 ade6 arg4 ura4suc-Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
866.206 a gal7 lys2 tyr1 his4 MAL2 trp1 ade6 arg4 suc-Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
1624.108-3A a gal80 ade6 thr4 trp1 his3 rho-L.Johnston
1636.L53-14C a gal80 gal1-A tyr1 lys2 his7 ade1(or ade2)ura1 L.Johnston
1635.L52-36αgal80 gal1-D5 ade1 his1(or his8)trp1(or trp8)L.Johnston
1787.106-3Dαgal80 ura1 his1 L.Johnston
1634.MH10α/a gal80/gal80 gal1-D5/gal1-A trp2/++/ura1+/tyr1+/lys2+/his2+/ade1 or 2 L.Johnston
867.207 a ade1 gal1 ura3 his2 trp5 leu1 lys7 met2 MAL3 SUC2 Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
864.194 a ade1 trp5 MAL6 suc-Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
862.191 a ade2 MAL3 SUC3 MEL1 MGL2 MGL3 Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
861.190 a his4 leu2 MAL2 suc-Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
863.192 a trp1 ura3 MAL4 MEL1 MGL3 suc-gal3 gal4 Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
2252.a/αtrp1/+his2/+ade1/+STA2/STA2 Biochem.J.,1988,249,163I.Evans
860.169αilv2 his FLO1FLO4)G.Stewart
868.209 a ilv2 FLO1FLO4)G.Stewart
869.209αFLO 1FLO4)G.Stewart
870.210 a ade1 gal1 trp1 ura3 his2 leu1 met14 FLO1FLO4)G.Stewart
1391.δ1278b wild type(parent)J.Bacteriol.,1970,103,770 R.Robbins
1390.2512C a gap1 J.Bacteriol.,1970,103,770 R.Robbins
1454.MP1,ATCC 42131 a/α ade2/+his8/+trp5-12/trp5-21 R.Fahrig
916.JCK5-5Aαhis4-A15 ade2-1 can(R)kar1-1 J.Conde
917.ABq 21αhis4-A15 ade2-1 can(R)kar1-2 nys(R)J.Conde
2266.BC3 leu2-3.112 trp1.1 ura3-52 pgk∷TRP1 Nucl.Acids Res.,1988,16,1333-1348 P.Piper
1639.a rad1 rad18 1799.CM31/1dαrad1 leu his ade lys L.Johnston
1800.CM26/4c rad4-3 his leu L.Johnston
1763.CM4/1dαrad5 ura L.Johnston
1764.CM5/1bαrad7 leu L.Johnston
1805.CM21/9a a rad9 ade arg leu lys L.Johnston
1806.CM30/2Cαradl1 ade arg his leu L.Johnston
1801.CM1/8aαrad18 ade2 leu2 his4 L.Johnston
1640.g739-2a a rad50-1 can1 his1 ade2(或者adeX)L.Johnston
1721.g739-2dαrad50-1 hom3-10 his1 trp2 L.Johnston
1802.CM1/1Cαrad51 lys2 leu2 his4 L.Johnston
1803.CM8/1a a rad54 ura his leu L.Johnston
1804.CM9/1a a rad55 leu his L.Johnston
1749.g725-12aαrad57-1 gal1-D5 hom3-10 his1-7 L.Johnston
1630.SK1(L57.15b/L58.3b)gal1 het3 his7/+lys2/+tyr1/+gal1-A/gal1-D5+/ade1(或者ade2)同宗配合L.Johnston
1637.g761-10A[α]/g763-5c[a]rad51-3/rad51-3 gal1-A/gal1-5 his1-1/his1-7+/his6+/his7 tyr?/+lys?/+trp?/++/hom3-10+/spo13-1+/lys?+/tyr1+/ura1+/ade2
1792.g650-4a[α]/g650-12a[a] rad52-1/rad52-1 CAN(s)/can(R)+/hom3-10+/his1-7+/trp ade4/+ho/ho
1745.rna3-3(D43)αade1 his1trp2 rna3-3 L.Johnston
1746.rna3-4(D167)αade1 his1 trp2 rna3-4 L.Johnston
1758.ts96αade1 his1 trp2 rna1 1-2 dds1-1 L.Johnston
1614.K381-9Dαspo11 ura3 ade6 arg4 aro7 asp5 met14 lys2 pet17trp1 L.Johnston
1612.K382-19Dαspo11 ura3 can1 cyh2 ade2 his7 hom3 tyr1 L.Johnston
1611.K382-23A a spo11 ura3 can1 cyh2 ade2 his7 hom3 L.Johnston
1616.K393-35Cαspo11 ura3 his2 leu1 lys1 met4 pet8 L.Johnston
1617.K396-22Bαspo11 ura3 ade1 his1 leu2 lys7 met3 trp5 L.Johnston
1613.K398-4D a spo11 ura3 ade6 arg4 aro7 asp5 met14 lys2 pet17trp1 L.Johnston
1615.K399-7D a spo11 ura3 his2 leu1lys1 met4 pet8 L.Johnston
227.菌株K,Manchester酿酒厂菌株,1∶5∶4∶2∶1.
228.菌株R,Sheffield酿酒厂菌株,5∶1∶1∶3∶5.
229.菌株T,London酿酒厂菌株,5∶1∶1∶4∶5.
230.菌株U,Birmingham酿酒厂菌株,5∶1∶1∶4∶5.
23 1.菌株V,Burton-on-Trent酿酒厂菌株,1∶5∶5∶3∶1.
232.菌株S,American酵母泡沫,ATCC 60782,1∶1∶3∶5∶1.
205.杂合体1(NCYC 227 x NCYC 228)
206.杂合体2(NCYC 227 x NCYC 229)
207.杂合体3(NCYC 227 x NCYC 230)
208.杂合体4(NCYC 227 x NCYC 230)
209.杂合体5(NCYC 227 x NCYC 231)
210.杂合体6(NCYC 227 x NCYC 231)
211.杂合体7(NCYC 230 x NCYC 231)
212.杂合体15(NCYC 227 x NCYC 232)
213.杂合体18(NCYC 220 x NCYC 232)
214.杂合体24(NCYC 222 x NCYC 221)
215.杂合体30(NCYC 223 x NCYC 221)
216.杂合体38(NCYC 224 x NCYC 226)
217.杂合体39(NCYC 225 x NCYC 226)
218.杂合体48(NCYC 226 x A162/1 ex NCYC 216)
219.杂合体64(NCYC 227 x A162/3 ex NCYC 216)
220.来自NCYC 212的单孢分离体A2/3菌株
221.来自NCYC 213的单孢分离体A38/3菌株
222.来自NCYC 213的单孢分离体A48/1菌株
223.来自NCYC 214的单孢分离体A85/1菌株
224.来自NCYC 214的单孢分离体A101/1菌株
225.来自NCYC 214的单孢分离体A101/2菌株
226.来自NCYC 214的单孢分离体A104/1菌株
646.x901-35C菌株;αhom2 aro1A trp5 leu1 ade6 lys1 his6 ura1arg4-1 thr1
647.x901-26A菌株;αhom2 aro1A trp5 leu1 ade6 his6 ura1 arg4-2thr1
648.x1069-1A菌株;a ade1 his4 leu2 thr4 met2 trp5 ura1
650.DV 147菌株;αade2,很容易转化成野生型
651.4B菌株;αhis4 leu3 lys10(?)ade6 ade2 met(?),
652.S400D菌株;a ilv1;具有其它未列举的必要条件
653.S288C-27菌株;αilv1,具有其它未列举的必要条件
654.S2583D菌株;αilv2,具有其它未列举的必要条件
655.S2582B菌株;αilv2,具有其它未列举的必要条件
656.JB19菌株;αleu1 ade2
657.JB143菌株;αleu2 ade2
658.JA36菌株;a leu3 ade2 lys10
659.x 764杂合二倍体菌株;分离标记trp5 leu1 ade6 ura3 hom3his6 lys1 arg4 mal1
660.x 373杂合四倍体菌株
661.x 362杂合六倍体菌株
663.xJ151杂合二倍体菌株;ATCC 60732;分离标记thr1 lys1ura3 aro1A hom2 trp4 ade8;ade2的纯合体
664.xJ107杂合二倍体菌株;分离标记leu1 ura3 lys7 gal7 his8ser1 ade2
264.S.Jackson Farmer′s二倍体菌株18,C53-8d x C24-13b)1959
402.A.A.Eddy F28c菌株,来自NCYC 264的单孢分离体)1953
593.W.F.F.Oppenoorth(R7,O.Winge′s C.L.303-9杂合体菌株)1959
594.W.F.F.Oppenoorth(K83 S 58杂合体菌株)1959
666.J.W.Millbank(来自麦芽酒酵母NCYC 239的呼吸缺陷型突变体)1963
673.H.Laser(由x-光照射面包酵母诱导的小菌落突变体)1963
505.CBS(1957).CBS 1171,ATCC 18824.酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的典型菌株。来自酿酒酵母。5∶1∶5∶5∶1
70.A.C.Chapman(1933).Saccharomyces anamensis.NCTC 3864.
72.Schmitt(1924).Saccharomyces brasiliensis.98 Carlsberg菌株,NCTC 1808.
74.ATCC(1945).卡氏酵母(Saccharomyces carlsbergensis).ATCC9080,ATCC 24904,CBS 23 54.
76.A.C.Chapman(1933).Saccharomyces cartilaginosus.NCTC3865.
77.A.Harden(1921).面包酵母菌株.需要硫胺素,泛酸盐合生物素(Arch.Biochem.,1947,14,369.J.Gen.Microbiol.,1983,128,2615-2620).
78.A.C.Chapman(1925).NCTC 2160
79.ATCC(1942).ATCC 7754,CBS 1368,NRRL Y-977,IFO 1346.Fleischmann面包菌株.生物素的分析.
80.H.B.Hutchinson(1930).GB 354,NCTC 5922.
81.ATCC(1942).ATCC 7752,CBS 1320,NRRL Y-973,IFO 1234.Gebrüder Mayer菌株.
82.A.Klocker(1920).NCTC 466.
83.A.Harden(1920).Carlsberg实验室菌株21,NCTC 381.
84.H.J.Bunker(1945).NCTC 7043.
85.A.J.Kluyver(1939).NCTC 5916.
86.ATCC(1942).ATCC 7753,CBS 1321,NCTC 6421.
87.ATCC(1947).ATCC 9763,NRRL Y-567,CBS 2978,NCTC10716和NCTC 7239.
89.ATCC(1946).ATCC 792 1.来自Fleischmann酵母块.(J.Phys.Chem.,1928,32,1094).
90.A.Castellani(1928).NCTC 2779.蒸馏酒酵母.
91.A.Guilliermond(1925).Saccharomyces chevalieri.CBS 400,ATCC 9804,NCTC 2054.Saccharomyces chevalieri的典型菌株.来自葡萄酒.
92.A.C.Chapman(1933).Saccharomyces delbrueckii.NCTC 3964.
93.A.C.Chapman(1 925).Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus.NCTC 2161.葡萄酒酵母.
94.A.Klocker(1920).椭圆酵母.NCTC 467,NRRL Y-129,ATCC2338.
95.A.C.Chapman(1933).Saccharomyces ellipsoideus var.cratericus.NCTC 3866.
96.M.B.Church(1922).Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus.NCTC 1344.用于从苹果汁生产醋.
97.H.B.Hutchinson(1945).椭圆酵母.Michigan 48菌株.ATCC10824,NCTC 7040.
99.J.L.Baker(1930).Saccharomyces festinans.来自污染的麦芽酒(J.Inst.Brew.,1929,35,466).
104.M.Kir(1934).匈牙利葡萄酒酵母.
107.A.J.Kluyver(1939).Saccharomyces intermedius.
108.T.Castelli(1939).Saccharomyces italicus.来自Chianti葡萄汁.
109.Carlsberg Laboratory(1924).乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyceslactis)。
110.A.Guilliermond(1925).Saccharomyces lindneri.CBS 403.来自西非的姜汁啤酒.
113.A.Guilliermond(1925).Saccharomyces vini.
118.Gray,McGill University(1932).Saccharomyces sake.
121.A.C.Chapman(1921).Saccharomyces thermantitonum.
122.B.von Euler(1921).Saccharomyces thermantitonum.(Biochem.Z.,1919,97,156).
124.A.Klocker(1920).NRRL Y-2434 Saccharomyces turbidans.(J.Inst.Brew.,1950,56,192).
125.A.Heinemann(1933).椭圆酵母.(Exp.Cell.Res.,1958,15,214).
126.A.Klocker(1920).Saccharomyces validus.
167.B.W.Hammer(1922).Torula cremoris.来自发酵的奶油.
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177.Anheuser-Busch Inc.,U.S.A.(1927).Californian葡萄酒酵母.(J.Gen.Microbiol.,1982,128,2615-2620).
182.A.C.Chapman(1933).Fernbach 38菌株.
183.A.C.Chapman(1933).Fernbach 40菌株.
186.O.Winge via British Fermentation Products Ltd.(1942).杂合体K471.
187.A.C.Chapman(1921).克菲尔(克菲尔(Kefir))酵母.
190.A.C.Chapman(1931).Saccharomyces logos.ATCC 60731,NCTC 3341.杀伤特性K1(Antonie van Leeuwenhoek,1978,44,59-77).
192.G.Johnson(1936).Melbourne No.1菌株.
196.A.C.Chapman(1933).酵母Race V.
197.Mehta(1925).酵母Race II.
198.Institut für Garungsgewerbe(1925).酵母Race XII.
199.A.C.Chapman(1921).Saaz酵母.NCTC 906,ATCC 2704,NRRL Y-239.来自Bohemian酿酒厂.
200.A.C.Thaysen(1920).Sternberg 675菌株.用于生产甘油.
201.R.M.Nattrass(1943).61菌株.
202.Carlsberg Laboratory(1924).葡萄酒酵母,Johannesburg IIWortmann 76菌株.
232.R.S.W.Thorne(195 1).
S,American酵母泡沫.1∶1∶3∶5∶1 ATCC 60782.杀伤特性K1(Antonie van Leeuwenhoek,1978,44,59-77;J.Ferm.Technol.,1985,63,421-429).
235.B.M.Brown(1951).Whitbread菌株.ATCC 60733.杀伤特性K1(Antonie van Leeuwenhoek,1978,44,59-77).5∶1∶4∶4∶1.
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252.S.Jackson(1961).椭圆酵母.菌株6.
291.S.Jackson via C.C.Lindegren(1951).Mrak 93菌株.
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341.A.E.Wiles(1951).来自散装鲜啤酒.1∶1∶5∶5∶1
343.A.E.Wiles(1951).来自散装鲜啤酒.1∶1∶5∶5∶1(J.Inst.Brew.,1950,56,183).
344.A.E.Wiles(1951).Saccharomyces cerevisiae var.turbidans.来自散装鲜啤酒.(J.Inst.Brew.,1950,56,183).
345.A.E.Wiles(1951).Saccharomyces cerevisiae var.turbidans.来自散装鲜啤酒.(J.Inst.Brew.,1950,56,183).
346.A.E.Wiles(1951).Saccharomyces cerevisiae var.turbidans.来自散装鲜啤酒.(J.Inst.Brew.,1950,56,183).
356.C.H.Ridge(1953).蜂蜜酒酵母.
357.T.Gray(1951).Avize-Cramant蜂蜜酒酵母.
358.T.Gray(1951).Plum蜂蜜酒酵母.
360.D.R.Jackson(1952).Seagram & Sons.
361.R.B.Gilliland(1952).Saccharomyces diastaticus.CBS 1782,NRRL Y-2416,ATCC 13007,IFO 1046.Saccharomyces diastaticus的典型Saccharomyces diastaticus的典型菌株.来自啤酒麦芽汁.
365.F.W.Beech(1952).Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus.来自苹果汁.
374.L.Hemmons(1953).Saccharomyces oviformis.From hazy ale.
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我们也使用与W204具有完全不同特性的酿酒酵母菌株,诸如8,9,108和109专利申请中列举的菌株的FLO1基因和ADH。那些菌株具有诸如:自我阻断,二倍体,抗药,用于细胞分裂,渗透氨基酸和不同发酵时间和特性的重要特性。
最公知的絮凝基因是FLO1或FLO1S或FLO1L,FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO10,FLO11,PKC1和Lg-FLO1。当涉及微生物时,我们是指具有这些及其它絮凝基因的细菌,真菌和古细菌。
在本申请中,我们不仅要求微生物,基因盒,载体,质粒和基于上述其它专利中已经提及的基因,诸如FLO1,FLO1s,FLO1L和PKC1的方法。在本申请中,我们还要求微生物,基因盒,载体质粒和基于在上述专利中未提及这类基因(给由发酵过程调节的启动子加入絮凝基因的特性),诸如FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO10,FLO11和Lg-FLO1的方法权利。这些基因具有与基因FLO1,FLO1s,FLO1L和PKC1不同的特性。这些不同的特性是只用糖不需要酸就能解絮凝。这个特性对于通过加入下一个发酵周期的扣除物使所述方法可逆是非常重要的。因此,酵母可以无需生产周期的多余阶段就得以再利用,所述生产周期应该发生在加入酸的时候。此外,不用加入酸使得所述方法更便宜并且更简单。
在本申请中,我们也要求有关Watari专利中使用的基因FLO1,FLO1S和FLO1L基因组合并且是与其它启动子组合的专利的权利。Watari已经应用了这种具有ADH启动子的基因。在本申请中,我们使用具有启动子HSP30p,MOX和pMET3的这些基因。所有这些与ADH已经非常不同的特性,产生出乎意料的效果。ADH启动子通过葡萄糖的存在受到抑制因此此时培养基中不存在葡萄糖。通过利用ADH启动子调节絮凝基因使得絮凝只发生在培养基中葡萄糖的水平降到很低的时候。
通过利用HSP30启动子连同絮凝基因产生不同的效果,因为这种启动子受其它因子,诸如热击,缺少氮及其它营养素,pH值下降以及高乙醇浓度的控制。由于这些特性,可以通过其它机制控制发酵过程的结束以及絮凝作用的开始。因此可以不仅在葡萄糖消耗完时终结发酵,而且可以在之前或之后终结发酵。
通过利用MOX或pMET3启动子连同絮凝作用基因产生不同的效果,因为这些启动子比ADH具有更强的表达,产生絮凝作用所需的更大量的菌丝。
在本申请中,已经要求了通过利用基因sfl1ou,fsu1ou,fsu2ou,tup1ou,cyc8ou,cka2或FMC1基因,将这种基因与调节的启动子结合修饰的微生物的权利,所述的这些基因是在现有技术的任一专利申请中都没有的范围,以得到鉴定发酵过程结束的效果。在本申请中,这些基因通过一系列启动子,HSP30,pMET3,MOX以及ADH进行调节。
所有絮凝作用基因的编码部分与依赖于培养基的化学成分,pH或通过物理激发的特性启动或抑制的启动子结合产生用于各种生产过程的相关特性。
一些具有所述特性的启动子如下:ADH,Mox或HSP30p。通过将絮凝基因加入到编码部分,这种启动子可在发酵过程结束的时候启动或受到抑制,使得微生物絮凝和沉淀在发生所述发酵过程的容器的底部。所述效果是很有意义的,尤其是可以从目标终产物中分离微生物。
这种物质可以通过将养分和微生物放入发酵罐的方法产生,在所述发酵罐中微生物将生成目标物质同时消耗养分。
养份耗尽后,启动子激活絮凝基因并且微生物将沉淀在发酵罐的底部,与目标微生物分离开来。微生物消耗养分的生物过程可受需氧或厌氧呼吸的控制,并且目标物质可以是酒精发酵的结果或是特异基因转录而来的终产物。例如,生成药用,工业用,化妆品,农业上有意义的以及其它方面的蛋白质的编码基因。
在所述方法中,我们不仅提到乙醇(厌氧))发酵,而且还涉及需氧发酵。
应该重要强调的是,在第二种情况下,重组DNA技术可被用于表达微生物中已经存在的基因。尽管二者都是用术语发酵表示,但是生产方式是完全不同的。
在厌氧发酵中,乙醇由呼吸过程中糖的转化产生。在第二种过程中,存在微生物特异基因的转录,并且终产物不是细胞呼吸代谢循环的结果。需氧呼吸包括完全不同的代谢过程。这种差异可以产生除乙醇外的其它物质,诸如药剂(例如,胰岛素,抗生素,生长激素及其他),工业以及农业用酶(诸如黄原胶,氨基酸,有机酸,香料,维生素生物杀虫剂及其它物质))))。Pereira(2000)提及的厌氧呼吸过程不适合于产生上述物质只能用于生产乙醇。
此外,我们使用其它絮凝基因诸如FLO10,其它絮凝具有其它效果。
基因FLO10通过将糖再次导入培养基中进行解絮凝。这种效果是非常重要的,因为对于其它申请而言它可以再利用微生物。FLO1基因只能用于啤酒工业,因为酵母不能再利用。
FLO1基因可以随着导入硫酸而解絮凝,然而FLO10基因删除了这个高成本的阶段,因为当糖再导入到下一个发酵过程的培养基中时在下一个生产阶段培养物已经解絮凝。
另一方面是通过利用除ADH以外的启动子,诸如MOX以及HSP30p。这些启动子具有不同的特性。尽管也受到葡萄糖诸如ADH的调节,Mox具有比ADH更强的表达,从而产生更高的絮凝速度。HSP30p启动子具有其它的重要特性,因为它不仅可以通过缺乏葡萄糖得以激活,还可以通过缺乏氮,或通过物理刺激,诸如热击或pH下降进行激活。
另一特性是不仅使用野生株系,诸如由Pereira要求的,而且使用具有对项目的经济可行性至关重要的非野生株系。
非野生株系在实验室中最容易操作,并且可以因此被用于重组DNA技术,以及用于在受控制的需氧发酵中生产药用,工业用酶及其它产品。
此外,这种非野生株系(实验室)的生产,与由Pereira指出的野生株系相反对于在用遗传修饰的生物体在涉及环境污染风险的受到控制的生产环境下进行生产是非常理想的。
由Pereira(2000)指出的生产发生在使用糖-醇的工业用大发酵罐中,其中没有控制生物试样渗漏到环境中。更相反地,在离心和糖-醇usine发酵罐中,常常渗漏并蒸发生物材料。这种特性可以通过生物安全控制生物体使这类技术变得不能独立存在。
理论上,可能控制糖-醇乌辛渗漏到环境,但是所述控制可能在经济上不可行。
实验室用株系在这种发酵罐中不能生存,但是对于控制的实验室发酵罐是理想的,在所述发酵罐中生产诸如药用和工业用酶的蛋白,因为所述非野生型酵母具有已知的代谢分布图,其对于药品生产的严格质量控制是必不可少的。在药品生产中,质量和杂质的控制对于获得FDA认证是必不可少的。在生产工业用酶的过程中,也有这种控制,因为其中很多具有高附加值。在这种生产环境中,污染控制是必要的,因此从具有遗传修饰微生物的环境到发酵罐以及从发酵罐到环境的污染风险最小化。
此外,非野生株系的另一优点是它们具有众所周知的标记,由此促进了选择修饰的细胞并且避免了使用具有较高公共卫生风险的标记。野生株系的另一方面是它们是二倍体而非单倍体,诸如实验室株系。作为二倍体,野生型酵母具有更高的生产率,但是需要更多的工作产生遗传修饰,因为必须修饰两个拷贝的基因。在单倍体酵母中,只有一个拷贝需要修饰。在发酵罐中,除质粒改变更不稳定之外野生型酵母也具有自然选择方面不同的特性。
实施本发明的一种方式是将诸如ADH,MOX或者HSP30p的质粒启动子一起插入絮凝基因诸如FLO1的编码部分。在多种酵母中FLO1具有不充足的絮凝指数,因为这种基因存在重复部分并且频繁发生重组。FLO1L或者FLO1S基因具有更高的效力。然而,基因FLO1,FLO1L和FLO1S只在诸如硫酸的酸存在的条件下解絮凝。
FLO10基因在存在糖的条件下解絮凝,通过本身的下一个生产周期的原料产生解絮凝作用,使得发酵过程更简化并且更节约成本。
实施例:
基因和启动子被插入具有基因标记的质粒中,然后将其引入酵母。细胞生长在具有特异性抗生素标记的培养基中以只选择遗传修饰的酵母。然后上述选择的酵母安照启动子的表达特征能够有条件地絮凝。当葡萄糖消耗完时,氮消耗完时,发生热击或者突然的pH下降时它们可以絮凝。总之,令人感兴趣的是这种絮凝活化剂发生在发酵过程结束的时候,使得最大限度地使用养分。一旦激活絮凝,微生物沉淀在底部并且终发酵产品可以从发酵罐中较高部分取出。
逐步的实施方案的实施例
在这种重组质粒构建物(YEp)中,我们将由葡萄糖调节的启动子,诸如ADH与FLO5基因结合,我们使用了启动子末端的限制性内切酶NdeI和HindIII,并且由此在5’位点将启动子与相同阅读框架中的絮凝基因3’位点连接。在絮凝基因的3’位点,插入一终止密码子。在所述构建物中,使用具有尿嘧啶营养缺陷型(URAA3)的补充标记和抗生素抗性基因的质粒。这两个标记可以使实验室用酵母与尿苷和尿嘧啶营养缺陷型互补并且通过抗抑制剂的抗性标记选择转化的菌株。
实验室试验实施例
絮凝基因盒已经通过电穿孔法,利用下列标准被引入酵母中:1.5kV,200ohm和1.2cm小管。在培养基中选择缺乏尿苷和尿嘧啶的转化的酵母。发酵过程发生在补充有葡萄糖的基本培养基中。培养17小时后,发生絮凝。通过利用FLO10基因可以在絮凝发生后引入葡萄糖,使得絮凝过程明显地可逆。转化的菌株在培养期间保持稳定。

Claims (187)

1.遗传修饰的细菌,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
2.遗传修饰的真菌,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
3.遗传修饰的古细菌,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
4.遗传修饰的酵母,其特征在于它可以具有下列由启动子调节的絮凝基因的一种或者多种:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或者Lg-FLO1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者由物理激发的特征。
5.遗传修饰的酵母,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者由物理激发的特征。
6.遗传修饰的酵母,优选地为巴斯德毕赤氏酵母(Pichiapastoris),多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis),其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者由物理激发的特征。
7.遗传修饰的酵母,优选地为巴斯德毕赤氏酵母(Pichiapastoris),多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis),其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因FLO10,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者由物理激发的特征。
8.遗传修饰的酿酒酵母,选自下列株系:
956.X2180-1A,ATCC 26786 a SUC2 mal gal2 CUP1 R.K.Mortimer
957.X2180-1B,ATCC 26787 α SUC2 mal gal2 CUP1 R.K.Mortimer
857.158 a Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
858.159 αCan.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
713.KIL-k2来自散装鲜啤酒)Antonie van Leeuwenhoek,1978,44,59 M.Richards
738.KIL-k2(酿酒厂污染物)Antonie van Leeuwenhoek,1978,44,59 A.P.Maule
761.KIL-k3来自棕榈酒),CBS 7903 J.Ferm.Technol.,1985,63,421-429 N.Okafor
1001.KIL-k2(啤酒酵母)Antonie van Leeuwenhoek,1978,44,59
156 1.A8209B his4-864 KIL-k1 G.Fink via T.Young
958.X2928-3D-1A a ade1 gal1 leu1 his2 ura3 trp1 met14 R.K.Mortimer
959.X2928-3D-1C α ade1 gal1 leu1 his2 ura3 trp1 met14 R.K.Mortimer
1786.STX 147-4C αade1 his7 tyr1 gal1 cly8 ade5 aro2 met13 lys5trp 5 cyh2 arg4 lys1 ura4 gal2 ade2 rad56 L.Johnston
1620.STX77-6C α gal1 his4 trp1 hom3 ura3 CUP1 ilv3 ade3 rad52rna1 L.Johnston
1618.X4119-19C a his7 tyr1 cdc9 trp4 aro1B hom2 rad2 thr1 lys11gal2 ade2 L.Johnston
1661.X4120-19D αlys2 leu2 pet14 rad(?)rna3 ade8 aro1D met10ade5 leu1 CUP1 L.Johnston
1619.STX66-4A a rad18 lys4 trp1 prt3 CUP1 gal2 ade2 met2 pha2 L.Johnston
1617.K396-22B α spo11 ura3 ade1 his1 leu2 lys7 met3 trp5 L.Johnston
1614.K381-9D αspo11 ura3 ade6 arg4 aro7 asp5 met14 lys2 pet17trp1 L.Johnston
1613.K398-4D a spo11 ura3 ade6 arg4 aro7 asp5 met14 lys2 pet17trp1 L.Johnston
1611.K382-23A a spo11 ura3 can1 cyh2 ade2 his7 hom3 L.Johnston
1612.K382-19D αspo11 ura3 can1 cyh2 ade2 his7 hom3 tyr1 L.Johnston
1616.K393-35C αspo11 ura3 his2 leu1 lys1 met4 pet8 L.Johnston
1615.K399-7D a spo11 ura3 his2 leu1lys1 met4 pet8 L.Johnston
1383.DBY 747,ATCC 44774 a leu2-3 leu2-112 his3-DELTA1 trp4-289 ura3-52 Gene,1979,8,17-24.J.F.Makins
1392.MC16 αleu2-3 his4-712FS)SUF2 ade2-1 lys2-1 Nature,1981,275,104.J.F.Makins
1445.LL20 αhis3-11 his3-15 leu2-3 leu2-1 12 J.Bacteriol.,1979,140,73-82 A.Coddington
1527.MD40/4C αleu2-3 leu2-112 his3-11 his3-15 ura2 trp1 CAN sB.Bowen
1528.AH22 a leu2-3 leu2-112 his4 canR B.Bowen
1627.D13-1A(YNN6)a trp1 his3-532 gal2 L.Johnston
1771.cdc9-1(L89-6C)a cdc9-1 leu2 ade1 ade2 ura1 lys2 L.Johnston
804.D160 a ura3 his1 arg6 trp2 ade1 J.F.T.Spencer
805.A364A a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 J.Mol.Biol.,1976,105,427-443 J.F.T.Spencer
806.x112 αade8-2 trp5-2 lys2-1 ura1-1 J.F.T.Spencer
808.GRH1 a trp1 ade1 his7 ura1 gal1 G.Stewart
1395.S1896D a met7 trp1 leu1 ade1 gal1 gal2 pet R.K.Mortimer
1396.F33αmet7 gal2 pet R.K.Mortimer
1623.X2181-1B a gal1 his2 trp1 ade1
1626.CG379 ade+αhis7-2 leu2-3 leu2-112 trp1-289 ura3-52(ade5rev)
1631.g440-7Cαade4 trp1 L.Johnston
1632.D273-11A α ade1 his1 trp2 L.Johnston
1662.α arg met L.Johnston
1663.a arg met L.Johnston
1664.α/αarg 2μ+L.Johnston
1719.A364A rho-a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 rho-L.Johnston
1720.B635 a cyc1-115 his1-1 lys2-1 trp2 L.Johnston
1772.L126-R9 a leu2 hom3-10 his1 L.Johnston
1790.a/a arg his 2μ+L.Johnston
1812.L126-2B a leu2 hom3-10 his1 L.Johnston
1821.S13 a his4 ura1 trp5 gal2 L.Johnston
1822.S49 a his4 ura1 trp5 gal2 ade6 L.Johnston
1961.GRF18 αleu2-3 leu2-212 his3-11 his3-15 canR G.Fink via D.MacKenzie
1356.A 137 α pho80-2 J.Bacteriol.,1973,113,727-738 A.Coddington
1357.A 138 a pho80-2 J.Bacteriol.,1973,113,727-738 A.Coddington
828.a ade1 J.F.T.Spencer
829.αade1 J.F.T.Spencer
1577.a ade1 leu1 B.Pearson
1652.a ade1 leu2 B.Pearson
830.a ade2 J.F.T.Spencer
802.αade2(lys)J.F.T.Spencer
832.a ade3 J.F.T.Spencer
833.αade3(ura)J.F.T.Spencer
834.a ade4 J.F.T.Spencer
835.αade4(ura)J.F.T.Spencer
836.a ade5 J.F.T.Spencer
837.αade5(ura)J.F.T.Spencer
838.a ade6 J.F.T.Spencer
839.αade6(trp)J.F.T.Spencer
840.a ade7 J.F.T.Spencer
841.αade7 J.F.T.Spencer
842.a ade8 J.F.T.Spencer
843.αade8(lys trp)J.F.T.Spencer
1654.cdc3-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc3-1 L.Johnston
1642.cdc4-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc4-1 L.Johnston
1643.cdc5-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc5-1 L.Johnston
1723.cdc6-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc6-1 L.Johnston
1729.cdc7-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc7-1 L.Johnston
1730.cdc8-141 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc8-141 L.Johnston
1667.cdc8-198 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc8-198 L.Johnston
1771.cdc9-1(L89-6C)a cdc9-1 leu2 ade1 ade2 ura1 lys2 L.Johnston
1788.cdc9-1 rev1 cdc9-1 rev1 L.Johnston
1672.cdc9-12 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc9-12 L.Johnston
1673.cdc9-13 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc9-13 L.Johnston
1791.cdc9-3 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc9-3 2μ+L.Johnston
173 1.cdc9-4 a ade 1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc9-4 L.Johnston
1732.cdc9-6 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc9-6 L.Johnston
1807.cdc9-7(L82-2B)a cdc9-7 trp1 lys2 his7 L.Johnston
1808.cdc9-7(L94-4D)a cdc9-7 trp 1 ura3 L.Johnston
1670.cdc9-7 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc9-7 L.Johnston
1633.cdc9-7 rho-cdc9-7 rho-L.Johnston
1671.cdc9-8 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc9-8 L.Johnston
1674.cdc10-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc10-1 L.Johnston
1655.cdc1 1-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc11-1 L.Johnston
1733.cdc12-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc12-1 L.Johnston
1734.cdc13-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc13-1 L.Johnston
1735.cdc14-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc14-1 L.Johnston
1736.cdc18-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc18-1 L.Johnston
1737.cdc19-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc19-1 L.Johnston
1738.cdc26-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc26-1 L.Johnston
1665.cdc28-4 L31-7a a cdc28-4 tyr1 L.Johnston
1675.cdc30-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc30-1 L.Johnston
1676.cdc31-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc31-1 L.Johnston
1722.cdc36-16 SR661-2 a cdc36-16 trp1-1 ura1 L.Johnston
1666.cdc37-1 SR672-1 a cdc37-1 ura1 cyh2 L.Johnston
164 1.cdc39-1 SR665-1 αcdc39-1 met2 tyr1 cyh2 L.Johnston
1677.cdc41 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc41 L.Johnston
1753.cdc6(MH18)cdc6/cdc6 gal1/gal1 ade1/ade1+/ade2 his1/his7trp2/++/ura1+/lys2+/tyr1 2μ+L.Johnston
1754.cdc13(MH20)cdc13/cdc13 gal1/gal1 ade1/ade1+/ade2his1/his7 trp2/++/ura 1+/lys2+/tyr1 2μ+L.Johnston
1752.cdc15-1(MH15)cdc15-1/cdc15-1 gal1/gal1 ade1/ade1+/ade2his1/his7 trp2/++/ura1+/lys2+/tyr1 2μ+L.Johnston
1755.cdc17(MH21)cdc17/cdc17 gal1/gal1 ade1/ade1+/ade2his1/his7 trp2/++/ura1+/lys2+/tyr1 2μ+L.Johnston
1756.cdc21(MH21)cdc21/cdc21 gal1/gal1 ade1/ade1+/ade2his1/his7 trp2/++/ura1+/lys2+/tyr1 2μ+L.Johnston
1718.JC2(L31-9a[a]/L31-2c[α])cdc9/cdc9 cdc28/cdc28 ade/+tyr1/tyr/1 canR/++/his1 L.Johnston
1797.cdc36(MH30)α/a gal1/gal1 ade1/+his1/+trp2/++/trp1+/ura1
961.2C-4 αarg4-2/+arg4-17/+CUP1/+thr1/+;rec5 leu1 trp5 trp1his5 ade2 Radiation Res.,1972,49,133&148 R.K.Mortimer
960.2C-8 αarg4-2/+arg4-17/+CUP1/+thr1/+;rec4 leu1 trp5 trp1his5 ade2 Radiation Res.,1972,49,133&148 R.K.Mortimer
1823.dbf1(L123-8A)αtrp1 ura3 dbf1 L.Johnston
1824.dbf2(L119-7D)αtrp?ura3 ade1 dbf2 L.Johnston
1750.dbf2-3(D128)αade1 his1 trp2 dbf2-3 L.Johnston
1825.dbf3(L124-11D)a ura3 dbf3 L.Johnston
1751.dbf3-1(D128)αade1 his1 trp2 dbf3-1 L.Johnston
1747.dbf8-1(D128)αade1 his1 trp2 dbf8-1 L.Johnston
1748.dbf9-1(D128)αade1 his1 trp2 dbf9-1 L.Johnston
1813.dbf10-1(D141)αade1 his1 trp2 dbf10-1 L.Johnston
1814.dbf11-1(D132)αade1 his1 trp2 dbf11-1 L.Johnston
1815.dbf13-1(D101)αade1 his1 trp2 dbf13-1 L.Johnston
1816.dbf14-1(D22)αade1 his1 trp2 dbf14-1 L.Johnston
1817.dbf14-2(D25)αade1 his1 trp2 dbf14-2 L.Johnston
1818.dbf14-3(D44)αade1 his1 trp2 dbf14-3 L.Johnston
1819.dbf15-1(D22)αade1 his1 trp2 dbf15-1 L.Johnston
1820.dbf20-1(D175)αade1 his1 trp2 dbf20-1 L.Johnston
1794.MH25 α/a dbf2/dbf2 gal1-D5/gal1-A ade1/+his1/his1 trp2/trp2+/ura1+/tyr1+/ade2+/his L.Johnston
1795.MH26 α/a dbf3/dbf3 gal1-D5/gal1-a ade1/ade1 his1/+trp2/++/lys2+/ura1+/tyr1+/ade2 L.Johnston
1796.MH27 α/a dbf4/dbf4 gal1-D5/gal1-A ade1/ade1 his1/his1trp2/++/lys2+/tyr1+/ade2+/his7 L.Johnston
1621.g716-5a ho a can1 hom3-10 his1-7 L.Johnston
1622.309 αade2-R8 metX can1-11 L.Johnston
1717.L39-8C αtrp1 or trp2 lys2 canR.L.Johnston
1628.320 a rme ade2 ura3 leu1 can1-11 cyh2-21 L.Johnston
1716.α13 1-20 αade2-R8 cyh2 can1 leu1 ura3 L.Johnston
807.x 464-20C αtrp1 ade1 his2 leu1 gal1 J.F.T.Spencer
859.168 a ade1 gal1 lys2 tyr1 his7 ura1 ade2 Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
1789.L58.3b gal1 ade1 or ade2 L.Johnston
1638.L57-1 5b gal1 his7 lys2 tyr1 L.Johnston
1625.Z65 a/αgal1-1/gal1-4 lys2-1/lys2-2 tyr1-1/tyr1-2 his7-2/his7-1ade1/++/ade2+/ura L.Johnston
1757.M1-2B(YNN 27)α trp1 ura3-52 gal2 L.Johnston
865.205 αgal7 lys2 tyr1 his4 leu2 thr4 MAL2 trp1 ade6 arg4 ura4suc-Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
866.206 a gal7 lys2 tyr1 his4 MAL2 trp1 ade6 arg4 suc-Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
1624.108-3A a gal80 ade6 thr4 trp 1 his3 rho-L.Johnston
1636.L53-14C a gal80 gal1-A tyr1 lys2 his7 ade1(或者ade2)ura1 L.Johnston
1635.L52-36 αgal80 gal1-D5 ade1 his1(或者his8)trp1(或者trp8)L.Johnston
1787.106-3D αgal80 ura1 his1 L.Johnston
1634.MH10 α/a gal80/gal80 gal1-D5/gal1-A trp2/++/ura1+/tyr1+/lys2+/his2+/ade1或者2 L.Johnston
867.207 a ade1 gal1 ura3 his2 trp5 leu1 lys7 met2 MAL3 SUC2 Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
864.194 a ade1 trp5 MAL6 suc-Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
862.191 a ade2 MAL3 SUC3 MEL1 MGL2 MGL3 Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
861.190 a his4 leu2 MAL2 suc-Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
863.192 a trp1 ura3 MAL4 MEL1 MGL3 suc-gal3 gal4 Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
2252.a/α trp1/+his2/+ade1/+STA2/STA2 Biochem.J.,1988,249,163 I.Evans
860.169 αilv2 his FLO1FLO4)G.Stewart
868.209 a ilv2 FLO1FLO4)G.Stewart
869.209 αFLO1FLO4)G.Stewart
870.210 a ade1 gal1 trp1 ura3 his2 leu1 met14 FLO1FLO4)G.Stewart
1391.δ1278b wild type(parent)J.Bacteriol.,1970,103,770 R.Robbins
1390.2512C a gap1 J.Bacteriol.,1970,103,770 R.Robbins
1454.MP1,ATCC 42131 a/α ade2/+his8/+trp5-12/trp5-21 R.Fahrig
916.JCK5-5A αhis4-A15 ade2-1 can(R)kar1-1 J.Conde
917.ABq 21 αhis4-A15 ade2-1 can(R)kar1-2 nys(R)J.Conde
2266.BC3 leu2-3.112 trp1.1 ura3-52 pgk::TRP1 Nucl.Acids Res.,1988,16,1333-1348 P.Piper
1639.a rad1 rad18 1799.CM31/1d αrad1 leu his ade lys L.Johnston
1800.CM26/4c rad4-3 his leu L.Johnston
1763.CM4/1d αrad5 ura L.Johnston
1764.CM5/1b αrad7 leu L.Johnston
1805.CM2 1/9a a rad9 ade arg leu lys L.Johnston
1806.CM30/2C αrad11 ade arg his leu L.Johnston
1801.CM1/8aαrad18 ade2 leu2 his4 L.Johnston
1640.g739-2a a rad50-1 can1 his 1 ade2(or adeX)L.Johnston
1721.g739-2d αrad50-1 hom3-10 his1 trp2 L.Johnston
1802.CM1/1C αrad51 lys2 leu2 his4 L.Johnston
1803.CM8/1a a rad54 ura his leu L.Johnston
1804.CM9/1a a rad55 leu his L.Johnston
1749.g725-12aαrad57-1 gal1-D5 hom3-10 his1-7 L.Johnston
1630.SK1(L57.15b/L58.3b)gal1 het3 his7/+lys2/+tyr1/+gal1-A/gal1-D5+/ade1(或者ade2)同宗配合L.Johnston
1637.g761-10A[α]/g763-5c[a]rad51-3/rad51-3 gal1-A/gal1-5 his1-1/his1-7+/his6+/his7 tyr?/+lys?/+trp?/++/hom3-10+/spo13-1+/lys?+/tyr1+/ura1+/ade2
1792.g650-4a[α]/g650-12a[a] rad52-1/rad52-1 CAN(s)/can(R)+/hom3-10+/his1-7+/trp ade4/+ho/ho
1745.rna3-3(D43)αade1 his1 trp2 rna3-3 L.Johnston
1746.rna3-4(D167)αade1 his1 trp2 rna3-4 L.Johnston
1758.ts96 αade1 his1 trp2 rna11-2 dds1-1 L.Johnston
1614.K381-9D α spo11 ura3 ade6 arg4 aro7 asp5 met14 lys2 pet17trp1 L.Johnston
1612.K382-19D αspo11 ura3 can1 cyh2 ade2 his7 hom3 tyr1 L.Johnston
1611.K382-23A a spo11 ura3 can1 cyh2 ade2 his7 hom3 L.Johnston
1616.K393-35C αspo11 ura3 his2 leu1 lys1 met4 pet8 L.Johnston
1617.K396-22B αspo11 ura3 ade1 his1 leu2 lys7 met3 trp5 L.Johnston
1613.K398-4D a spo11 ura3 ade6 arg4 aro7 asp5 met14 lys2 pet17trp1 L.Johnston
161 5.K399-7D a spo11 ura3 his2 leu1 lys1 met4 pet8 L.Johnston
227.菌株K,Manchester酿酒厂菌株,1:5:4:2:1.
228.菌株R,Sheffield酿酒厂菌株,5:1:1:3:5.
229.菌株T,London酿酒厂菌株,5:1:1:4:5.
230.菌株U,Birmingham酿酒厂菌株,5:1:1:4:5.
231.菌株V,Burton-on-Trent酿酒厂菌株,1:5:5:3:1.
232.菌株S,American酵母泡沫,ATCC 60782,1:1:3:5:1.
205.杂合体1(NCYC 227 x NCYC 228)
206.杂合体2(NCYC 227 x NCYC 229)
207.杂合体3(NCYC 227 x NCYC 230)
208.杂合体4(NCYC 227 x NCYC 230)
209.杂合体5(NCYC 227 x NCYC 231)
210.杂合体6(NCYC 227 x NCYC 231)
211.杂合体7(NCYC 230 x NCYC 231)
212.杂合体15(NCYC 227 x NCYC 232)
213.杂合体18(NCYC 220 x NCYC 232)
214.杂合体24(NCYC 222 x NCYC 221)
215.杂合体30(NCYC 223 x NCYC 221)
216.杂合体38(NCYC 224 x NCYC 226)
217.杂合体39(NCYC 225 x NCYC 226)
218.杂合体48(NCYC 226 x A162/1 ex NCYC 216)
219.杂合体64(NCYC 227 x A162/3 ex NCYC 216)
220.来自NCYC 212的单孢分离体A2/3菌株
221.来自NCYC 213的单孢分离体A38/3菌株
222.来自NCYC 213的单孢分离体A48/1菌株
223.来自NCYC 214的单孢分离体A85/1菌株
224.来自NCYC 214的单孢分离体A101/1菌株
225.来自NCYC 214的单孢分离体A101/2菌株
226.来自NCYC 214的单孢分离体A104/1菌株
646.x901-35C菌株;αhom2 aro1A trp5 leu1 ade6 lys1 his6 ura1arg4-1 thr1
647.x901-26A菌株;αhom2 aro1A trp5 leu1 ade6 his6 ura1 arg4-2thr1
648.x1069-1A菌株;a ade1 his4 leu2 thr4 met2 trp5 ura1
650.DV 147菌株;αade2,很容易回复到野生型
651.4B菌株;αhis4 leu3 lys10(?)ade6 ade2 met(?),
652.S400D菌株;a ilv1;具有其它未列举的必要条件
653.S288C-27菌株;αilv1,具有其它未列举的必要条件
654.S2583D菌株;αilv2,具有其它未列举的必要条件
655.S2582B菌株;αilv2,具有其它未列举的必要条件
656.JB19菌株;αleu1 ade2
657.JB143菌株;αleu2 ade2
658.JA36菌株;a leu3 ade2 lys10
659.x 764杂合二倍体菌株;分离标记trp5 leu1 ade6 ura3 hom3his6 lys1 arg4 mal1
660.x 373杂合四倍体菌株
661.x 362杂合六倍体菌株
663.xJ151杂合二倍体菌株;ATCC 60732;分离标记thr1 lys1ura3 aro1A hom2 trp4 ade8;ade2的纯合子
664.xJ107杂合二倍体菌株;分离标记leu1 ura3 lys7 gal7 his8ser1 ade2
264.S.Jackson Farmer′s二倍体菌株18,C53-8d x C24-13b)1959
402.A.A.Eddy F28c菌株,来自NCYC 264的单孢分离体)1953
593.W.F.F.Oppenoorth(R7,O.Winge′s C.L.303-9杂合体菌株)1959
594.W.F.F.Oppenoorth(K83 S 58杂合体菌株)1959
666.J.W.Millbank(来自麦芽酒酵母NCYC 239的呼吸缺陷型突变株)1963
673.H.Laser(由X-射线辐射面包酵母诱导的小菌落突变体)1963
其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者由物理激发的特征。
9.遗传修饰的酿酒酵母,选自下列株系:
505.CBS(1957).CBS 1171,ATCC 18824.酿酒酵母的典型菌株.来自啤酒酵母.5:1:5:5:1
70.A.C.Chapman(1933).Saccharomyces anamensis.NCTC 3864.
72.Schmitt(1924).Saccharomyces brasiliensis.98 Carlsberg菌株,NCTC 1808.
74.ATCC(1945).Saccharomyces carlsbergensis.ATCC 9080,ATCC 24904,CBS 2354.
76.A.C.Chapman(1933).Saccharomyces cartilaginosus.NCTC3865.
77.A.Harden(1921).Baker′s酵母菌株.需要硫胺素,泛酸酯和生物素(Arch.Biochem.,1947,14,369.J.Gen.Microbiol.,1983,128,2615-2620).
78.A.C.Chapman(1925).NCTC 2160
79.ATCC(1942).ATCC 7754,CBS 1368,NRRL Y-977,IFO 1346.Fleischmann baker菌株.生物素分析.
80.H.B.Hutchinson(1930).GB 354,NCTC 5922.
81.ATCC(1942).ATCC 7752,CBS 1320,NRRL Y-973,IFO 1234.Gebrüder Mayer菌株.
82.A.Klocker(1920).NCTC 466.
83.A.Harden(1920).Carlsberg实验室菌株21,NCTC 381.
84.H.J.Bunker(1945).NCTC 7043.
85.A.J.Kluyver(1939).NCTC 5916.
86.ATCC(1942).ATCC 7753,CBS 1321,NCTC 6421.
87.ATCC(1947).ATCC 9763,NRRL Y-567,CBS 2978,NCTC10716 and NCTC 7239.
89.ATCC(1946).ATCC 7921.来自Fleischmann酵母块.(J.Phys.Chem.,1928,32,1094).
90.A.Castellani(1928).NCTC 2779.Distiller′s酵母.
91.A.Guilliermond(1925).Saccharomyces chevalieri.CBS 400,ATCC 9804,NCTC 2054.Type菌株for Saccharomyces chevalieri.来自葡萄酒.
92.A.C.Chapman(1933).Saccharomyces delbrueckii.NCTC 3964.
93.A.C.Chapman(1925).Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus.NCTC 2161.葡萄酒酵母.
94.A.Klocker(1920).椭圆酵母.NCTC 467,NRRL Y-129,ATCC2338.
95.A.C.Chapman(1933).椭圆酵母var.cratericus.NCTC 3866.
96.M.B.Church(1922).Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus.NCTC 1344.用于从苹果汁生产醋.
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343.A.E.Wiles(1951).来自散装鲜啤酒.1:1:5:5:1(J.Inst.Brew.,1950,56,183).
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345.A.E.Wiles(1951).Saccharomyces cerevisiae var.turbidans.来自散装鲜啤酒.(J.Inst.Brew.,1950,56,183).
346.A.E.Wiles(1951).Saccharomyces cerevisiae var.turbidans.来自散装鲜啤酒.(J.Inst.Brew.,1950,56,183).
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489.J.Lodder(1957).来自面包酵母的单细胞分离体.需要肌醇,泛酸酯,生物素和硫胺素..
490.J.Lodder(1957).来自面包酵母的单细胞分离体.
491.J.Lodder(1957).来自面包酵母的单细胞分离体.需要肌醇,泛酸酯,生物素和硫胺素.
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其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
10.遗传修饰的酿酒酵母,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
11.遗传修饰的酿酒酵母,其特征在于它可以具有由下列启动子(Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子)调节的絮凝基因FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
12.用遗传修饰的酿酒酵母进行需氧发酵的方法,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的FLO1,FLO1S或者FLO1L中的絮凝基因中的一种或者多种,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
13.用遗传修饰的酵母进行需氧发酵的方法,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的FLO1,FLO1S或者FLO1L中的絮凝基因中的一种或者多种,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
14.遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由启动子MOX或者其部分调节的絮凝基因FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
15.遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由启动子MOX或者其部分调节的FLO1絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
16.用遗传修饰的微生物进行的需氧发酵过程,其特征在于所述微生物可以具有由启动子调节的絮凝基因PKC1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
17.用遗传修饰的微生物进行的需氧发酵过程,其特征在于所述微生物可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
18.在权利要求4和17的发酵过程中用于遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于包含由启动子调节的下列絮凝基因中一种或者多种:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或者Lg-FLO1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
19.在权利要求4和17的发酵过程中用于遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于包含由启动子调节的下列絮凝基因中一种或者多种:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO1 1或者Lg-FLO1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
20.在权利要求4和17的发酵过程中用于遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于包含由启动子调节的下列絮凝基因中一种或者多种:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或者Lg-FLO1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
21.在权利要求5,6,7,11,14和15的发酵过程中用于遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于包含由启动子调节的下列絮凝基因中一种或者多种.:FLO1,FLO1S,FLO1L或FLO10,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
22.用于权利要求5,6,7,8,9,10,11,14和15的发酵过程中遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于包含由启动子调节的下列絮凝基因中一种或者多种:FLO1,FLO1S,FLO1L或FLO10,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
23.用于权利要求5,6,7,8,9,10,11,14和15的发酵过程中遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于包含由启动子调节的下列絮凝基因中一种或者多种:FLO1,FLO1S,FLO1L或FLO10,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
24.权利要求1到23的遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
25.用于权利要求1到23的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
26.用于权利要求1到23的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
27.用于权利要求1到24的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
28.权利要求1到24的遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
29.用于权利要求1到23的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基中乙醇的存在或者缺乏。
30.用于权利要求1到23的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基中乙醇的存在或者缺乏。
31.用于权利要求1到23的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基中乙醇的存在或者缺乏。
32.权利要求1到23的遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基中发生的热击或者pH的下降。
33.用于权利要求1到23的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基中发生的热击或者pH的下降。
34.用于权利要求1到23的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基中发生的热击或者pH的下降。
35.用于权利要求1到23的遗传修饰的微生物中的基因载体,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基中发生的热击或者pH的下降。
36.权利要求4,6,12,13,16,17,18,19,20,24,25,26,27,28,29,30,31,32,33,34和35的遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
37.用于权利要求4,6,12,13,16,17,18,19,20,24,25,26,27,28,29,30,31,32,33,34,35和36的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
38.用于权利要求4,6,12,13,16,17,18,19,20,24,25,26,27,28,29,30,31,32,33,34,35和36的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
39.用于权利要求4,6,12,13,16,17,18,19,20,24,25,26,27,28,29,30,31,32,33,34,35和36的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
40.遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由下列启动子HSP30p或pMET3或者其部分中的一种或者多种调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:FLO1,FLO1S或者FLO1L,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
41.用于权利要求40的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由下列启动子HSP30p或pMET3或者其部分中的一种或者多种调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:FLO1,FLO1S或者FLO1L,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
42.用于权利要求40的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由下列启动子HSP30p或pMET3或者其部分中的一种或者多种调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:FLO1,FLO1S或者FLO1L,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
43.用于权利要求40的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由下列启动子HSP30p或pMET3或者其部分中的一种或者多种调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:FLO1S或者FLO1L,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
44.遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由启动子MOX或者其部分调节的FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
45.用于权利要求44的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由下列启动子Mox或者其部分调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:FLO1,FLO1S或者FLO1L,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
46.用于权利要求44的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由下列启动子Mox或者其部分调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:FLO1,FLO1S或者FLO1L,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
47.用于权利要求44的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由下列启动子Mox或者其部分调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:FLO1,FLO1S或者FLO1L,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
48.遗传修饰的微生物,其特征在于它们可以具有由下列启动子HSP30p或者pMET3或者其部分中的一种或者多种调节的絮凝基因FLO10,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
49.用于权利要求48的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由下列启动子HSP30p或pMET3或者其部分中的一种调节的FLO10絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
50.用于权利要求48的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由下列启动子HSP30p或pMET3或者其部分中的一种调节的FLO10絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
51.用于权利要求48的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由下列启动子HSP30p或pMET3或者其部分中的一种调节的FLO10絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
52.遗传修饰的微生物,其特征在于它们可以具有由下列启动子ADH或Mox或者其部分中的一种调节的絮凝基因FLO10,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
53.用于权利要求52的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH或Mox或者其部分中的一种调节的FLO10絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
54.用于权利要求52的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH或Mox或者其部分中的一种调节的絮凝基因FLO10,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
55.用于权利要求52的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH或Mox或者其部分中的一种调节的FLO10絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
56.遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的下列絮凝基因中的一种:sfl1ou,fsu1ou,fsu2ou,tup1ou,cyc8ou,cka2或FMC1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
57.用于权利要求56的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:sfl1ou,fsu1ou,fsu2ou,tup1ou,cyc8ou,cka2或FMC1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
58.用于权利要求56的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:sfl1ou,fsu1ou,fsu2ou,tup1ou,cyc8ou,cka2或FMC1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
59.用于权利要求56的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:sfl1ou,fsu1ou,fsu2ou,tup1ou,cyc8ou,cka2或FMC1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
60.权利要求1的遗传修饰的微生物,优选地包含来自巴斯德毕赤氏酵母(Pichia pastoris),多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的株系的酵母,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或Lg-FLO1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
61.遗传修饰的非野生型微生物,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
62.通过利用权利要求1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,14,15,24,28,32,36,40,44,48,52,56,60和61的遗传修饰的微生物进行的需氧发酵过程,其特征在于产生目的蛋白。
63.遗传修饰的啤酒酵母W204株系,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或者Lg-FLO1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
64.用于权利要求63的遗传修饰的啤酒酵母W204株系中的质粒,其特征在于包含由启动子调节的絮凝基因:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或者Lg-FLO1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
65.用于权利要求63的遗传修饰的啤酒酵母W204株系中的基因盒,其特征在于包含由启动子调节的絮凝基因:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或者Lg-FLO1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
66.用于权利要求63的遗传修饰的啤酒酵母W204株系中的载体,其特征在于包含由启动子调节絮凝基因:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或者Lg-FLO1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
67.权利要求63的遗传修饰的啤酒酵母W204株系,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的下列絮凝基因中的一种:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或Lg-FLO1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
68.用于权利要求63和67的遗传修饰的啤酒酵母W204株系中的基因盒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的下列絮凝基因中的一种:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或Lg-FLO1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
69.用于权利要求63和67的遗传修饰分beer酵母W204株系中的质粒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的下列絮凝基因:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或Lg-FLO1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
70.用于权利要求63和67的遗传修饰分beer酵母W204株系株的载体,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的下列絮凝基因:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或Lg-FLO1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
71.利用权利要求63,64,65,66,67,68,69和70的遗传修饰的啤酒酵母W204株系进行的需氧发酵过程,其特征在于产生目的蛋白。
72.通过利用遗传修饰的酵母株系W204生产目的蛋白的需氧发酵过程,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的絮凝基因FLO1S和FLO1L,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征,因此微生物不是野生型微生物。
73.权利要求1的遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征,因此微生物不是野生型微生物。
74.通过利用遗传修饰的微生物生产目的蛋白的需氧发酵过程,其特征在于所述微生物具有由启动子调节的絮凝基因FLO1或FLO10,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征,因此微生物不是野生型微生物。
75.遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由启动子ADH,Mox,HSP30p或异源启动子调节的絮凝基因PKC1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
76.用于权利要求75的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于含有由启动子ADH,Mox,HSP30p或异源启动子调节的絮凝基因PKC1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
77.用于权利要求75的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于含有由启动子ADH,Mox,HSP30p或异源启动子调节的絮凝基因PKC1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
78.用于权利要求75的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于含有由启动子ADH,Mox,HSP30p或异源启动子调节的絮凝基因PKC1,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
79.用于生产目的蛋白的需氧发酵过程,其特征在于利用权利要求75的遗传修饰的微生物。
80.用于生产目的蛋白的厌氧发酵过程,其特征在于利用权利要求75的遗传修饰的微生物。
81.权利要求5,7,8,9,10,21,22和23的遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
82.用于权利要求5,7,8,9,10,21,22和23的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
83.用于权利要求5,7,8,9,10,21,22和23的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
84.用于权利要求5,7,8,9,10,21,22和23的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
85.用遗传修饰的酵母厌氧发酵的过程,优选地来自巴斯德毕赤氏酵母(Pichia pastoris),多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的酵母株系,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的絮凝基因FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
86.用来自多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的遗传修饰的酵母厌氧发酵的过程,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的一种或者多种絮凝基因FLO2,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
87.用来自多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的遗传修饰的酵母厌氧发酵的过程,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的一种或者多种絮凝基因FLO3,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
88.用来自多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的遗传修饰的酵母厌氧发酵的过程,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的一种或者多种絮凝基因FLO4,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
89.用来自多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的遗传修饰的酵母厌氧发酵的过程,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的一种或者多种絮凝基因FLO5,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
90.用来自多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的遗传修饰的酵母厌氧发酵的过程,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的一种或者多种絮凝基因FLO6,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
91.用来自多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的遗传修饰的酵母厌氧发酵的过程,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的一种或者多种絮凝基因FLO7,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
92.用来自多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的遗传修饰的酵母厌氧发酵的过程,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的一种或者多种絮凝基因FLO8,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
93.用来自多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的遗传修饰的酵母厌氧发酵的过程,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的一种或者多种絮凝基因FLO9,所述启动子依赖于包括培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征而启动。
94.用来自多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的遗传修饰的酵母厌氧发酵的过程,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的一种或者多种絮凝基因FLO7,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
95.用来自多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的遗传修饰的酵母厌氧发酵的过程,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的一种或者多种絮凝基因FLO8,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
96.用来自多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的遗传修饰的酵母厌氧发酵的过程,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的一种或者多种絮凝基因FLO9,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
97.用来自多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的遗传修饰的酵母厌氧发酵的过程,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的一种或者多种絮凝基因FLO10,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
98.遗传修饰的藻,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
99.遗传修饰的原生动物,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
100.用来自巴斯德毕赤氏酵母(Pichia pastoris)(Pichia pastoris)株系的遗传修饰的酵母进行厌氧发酵的过程,其特征在于它可以具有由启动子调节的一种或者多种絮凝基因FLO4,所述启动子的启动依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
101.遗传修饰的细菌,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
102.遗传修饰的真菌,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
103.遗传修饰的古细菌,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
104.遗传修饰地酵母,其特征在于它可以具有下列由启动子调节的絮凝基因的一种或者多种:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或者Lg-FLO1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
105.遗传修饰的酵母,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因FLO10,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
106.遗传修饰的酵母,优选地来自巴斯德毕赤氏酵母(Pichiapastoris),多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的株系,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
107.遗传修饰的酵母,优选地来自巴斯德毕赤氏酵母(Pichiapastoris),多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),脆壁酵母(Saccharomyces fragilis),椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)的株系,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因FLO10,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
108.遗传修饰的酿酒酵母,选自下列株系:
956.X2180-1A,ATCC 26786 a SUC2 mal gal2 CUP1 R.K.Mortimer
957.X2180-1B,ATCC 26787 αSUC2 mal gal2 CUP1 R.K.Mortimer
857.158 a Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
858.159 αCan.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
713.KIL-k2来自散装鲜啤酒)Antonie van Leeuwenhoek,1978,44,59 M.Richards
738.KIL-k2(酿酒厂污染物)Antonie van Leeuwenhoek,1978,44,59 A.P.Maule
761.KIL-k3来自棕榈酒),CBS 7903 J.Ferm.Technol.,1985,63,421-429 N.Okafor
1001.KIL-k2(啤酒酵母)Antonie van Leeuwenhoek,1978,44,59
156 1.A8209B his4-864 KIL-k1 G.Fink via T.Young
958.X2928-3D-1A a ade1 gal1 leu1 his2 ura3 trp1 met14 R.K.Mortimer
959.X2928-3D-1C αade1 gal1 leu1 his2 ura3 trp1 met14 R.K.Mortimer
1786.STX 147-4Cαade1 his7 tyr1 gal1 cly8 ade5 aro2 met13 lys5trp 5 cyh2 arg4 lys1 ura4 gal2 ade2 rad56 L.Johnston
1620.STX77-6C αgal1 his4 trp 1 hom3 ura3 CUP1 ilv3 ade3 rad52rna1 L.Johnston
1618.X41 19-19C a his7 tyr1 cdc9 trp4 aro1B hom2 rad2 thr1 lys11gal2 ade2 L.Johnston
1661.X4120-19D αlys2 leu2 pet14 rad(?)rna3 ade8 aro1D met10ade5 leu1 CUP1 L.Johnston
1619.STX66-4A a rad18 lys4 trp1 prt3 CUP1 gal2 ade2 met2 pha2 L.Johnston
1617.K396-22B αspo11 ura3 ade1 his1 leu2 lys7 met3 trp5 L.Johnston
1614.K381-9D αspo11 ura3 ade6 arg4 aro7 asp5 met14 lys2 pet17trp1 L.Johnston
1613.K398-4D a spo11 ura3 ade6 arg4 aro7 asp5 met14 lys2 pet17trp 1 L.Johnston
1611.K382-23A a spo11 ura3 can1 cyh2 ade2 his7 hom3 L.Johnston
1612.K382-19D αspo11 ura3 can1 cyh2 ade2 his7 hom3 tyr1 L.Johnston
1616.K393-35C αspo11 ura3 his2 leu1 lys1 met4 pet8 L.Johnston
1615.K399-7D a spo11 ura3 his2 leu1 lys1 met4 pet8 L.Johnston
1383.DBY 747,ATCC 44774 a leu2-3 leu2-112 his3-DELTA1 trp4-289 ura3-52 Gene,1979,8,17-24.J.F.Makins
1392.MC16 αleu2-3 his4-712FS)SUF2 ade2-1 lys2-1 Nature,1981,275,104.J.F.Makins
1445.LL20 αhis3-11 his3-15 leu2-3 leu2-112 J.Bacteriol.,1979,140,73-82 A.Coddington
1527.MD40/4C αleu2-3 leu2-112 his3-11 his3-15 ura2 trp1 CAN sB.Bowen
1528.AH22 a leu2-3 leu2-112 his4 canR B.Bowen
1627.D13-1A(YNN6)a trp1 his3-532 gal2 L.Johnston
1771.cdc9-1(L89-6C)a cdc9-1 leu2 ade1 ade2 ura1 lys2 L.Johnston
804.D160 a ura3 his1 arg6 trp2 ade1 J.F.T.Spencer
805.A364A a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 J.Mol.Biol.,1976,105,427-443 J.F.T.Spencer
806.x112 αade8-2 trp5-2 lys2-1 ura1-1 J.F.T.Spencer
808.GRH1 a trp1 ade1 his7 ura1 gal1 G.Stewart
1395.S1896D a met7 trp1 leu1 ade1 gal1 gal2 pet R.K.Mortimer
1396.F33αmet7 gal2 pet R.K.Mortimer
1623.X2181-1B a gal1 his2 trp1 ade1
1626.CG379 ade+α his7-2 leu2-3 leu2-112 trp1-289 ura3-52(ade5rev)
1631.g440-7Cαade4 trp1 L.Johnston
1632.D273-11A αade1 his1 trp2 L.Johnston
1662.αarg met L.Johnston
1663.a arg met L.Johnston
1664.α/α arg 2μ+L.Johnston
1719.A364A rho-a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 rho-L.Johnston
1720.B635 a cyc1-115 his1-1lys2-1 trp2 L.Johnston
1772.L126-R9 a leu2 hom3-10 his1 L.Johnston
1790.a/a arg his 2μ+L.Johnston
1812.L126-2B a leu2 hom3-10 his1 L.Johnston
1821.S13 a his4 ura1 trp5 gal2 L.Johnston
1822.S49 a his4 ura1 trp5 gal2 ade6 L.Johnston
1961.GRF18 αleu2-3 leu2-212 his3-11 his3-15 canR G.Fink via D.MacKenzie
1356.A 137 αpho80-2 J.Bacteriol.,1973,113,727-738 A.Coddington
1357.A 138 a pho80-2 J.Bacteriol.,1973,113,727-738 A.Coddington
828.a ade1 J.F.T.Spencer
829.αade1 J.F.T.Spencer
1577.a ade1 leu1 B.Pearson
1652.a ade1 leu2 B.Pearson
830.a ade2 J.F.T.Spencer
802.αade2(lys)J.F.T.Spencer
832.a ade3 J.F.T.Spencer
833.αade3(ura)J.F.T.Spencer
834.a ade4 J.F.T.Spencer
835.αade4(ura)J.F.T.Spencer
836.a ade5 J.F.T.Spencer
837.αade5(ura)J.F.T.Spencer
838.a ade6 J.F.T.Spencer
839.αade6(trp)J.F.T.Spencer
840.a ade7 J.F.T.Spencer
841.αade7 J.F.T.Spencer
842.a ade8 J.F.T.Spencer
843.αade8(lys trp)J.F.T.Spencer
1654.cdc3-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc3-1 L.Johnston
1642.cdc4-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc4-1 L.Johnston
1643.cdc5-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc5-1 L.Johnston
1723.cdc6-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc6-1 L.Johnston
1729.cdc7-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc7-1 L.Johnston
1730.cdc8-141 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc8-141 L.Johnston
1667.cdc8-198 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc8-198 L.Johnston
177 1.cdc9-1(L89-6C)a cdc9-1 leu2 ade1 ade2 ura1 lys2 L.Johnston
1788.cdc9-1 rev1 cdc9-1 rev1 L.Johnston
1672.cdc9-12 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc9-12 L.Johnston
1673.cdc9-13 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc9-13 L.Johnston
1791.cdc9-3 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc9-3 2μ+L.Johnston
1731.cdc9-4 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc9-4 L.Johnston
1732.cdc9-6 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc9-6 L.Johnston
1807.cdc9-7(L82-2B)a cdc9-7 trp 1 lys2 his7 L.Johnston
1808.cdc9-7(L94-4D)a cdc9-7 trp 1 ura3 L.Johnston
1670.cdc9-7 a ade 1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc9-7 L.Johnston
1633.cdc9-7 rho-cdc9-7 rho-L.Johnston
1671.cdc9-8 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc9-8 L.Johnston
1674.cdc10-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc10-1 L.Johnston
1655.cdc11-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc11-1 L.Johnston
1733.cdc12-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc12-1 L.Johnston
1734.cdc13-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc13-1 L.Johnston
1735.cdc14-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc14-1 L.Johnston
1736.cdc18-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc18-1 L.Johnston
1737.cdc19-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc19-1 L.Johnston
1738.cdc26-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc26-1 L.Johnston
1665.cdc28-4 L31-7a a cdc28-4 tyr1 L.Johnston
1675.cdc30-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc30-1 L.Johnston
1676.cdc31-1 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc31-1 L.Johnston
1722.cdc36-16 SR661-2 a cdc36-16 trp1-1 ura1 L.Johnston
1666.cdc37-1 SR672-1 a cdc37-1 ura1 cyh2 L.Johnston
1641.cdc39-1 SR665-1 αcdc39-1 met2 tyr1 cyh2 L.Johnston
1677.cdc41 a ade1 ade2 ura1 his7 lys2 tyr1 gal1 cdc41 L.Johnston
1753.cdc6(MH1 8)cdc6/cdc6 gal1/gal1 ade1/ade1+/ade2 his1/his7trp2/++/ura1+/lys2+/tyr1 2μ+L.Johnston
1754.cdc13(MH20)cdc13/cdc13 gal1/gal1 ade1/ade1+/ade2his1/his7 trp2/++/ura1+/lys2+/tyr1 2μ+L.Johnston
1752.cdc15-1(MH15)cdc15-1/cdc15-1 gal1/gal1 ade1/ade1+/ade2his1/his7 trp2/++/ura1+/lys2+/tyr1 2μ+L.Johnston
1755.cdc17(MH21)cdc17/cdc17 gal1/gal1 ade1/ade1+/ade2his1/his7 trp2/++/ura1+/lys2+/tyr1 2μ+L.Johnston
1756.cdc21(MH21)cdc21/cdc21 gal1/gal1 ade1/ade1+/ade2his1/his7 trp2/++/ura1+/lys2+/tyr1 2μ+L.Johnston
1718.JC2(L31-9a[a]/L31-2c[α])cdc9/cdc9 cdc28/cdc28 ade/+tyr1/tyr/1 canR/++/his 1 L.Johnston
1797.cdc36(MH30)α/a gal1/gal1 ade1/+his1/+trp2/++/trp1+/ura1
961.2C-4 αarg4-2/+arg4-17/+CUP1/+thr1/+;rec5 leu1 trp5 trp1his5 ade2 Radiation Res.,1972,49,133&148 R.K.Mortimer
960.2C-8 αarg4-2/+arg4-17/+CUP1/+thr1/+;rec4 leu1 trp5 trp1his5 ade2 Radiation Res.,1972,49,133&148 R.K.Mortimer
1823.dbf1(L123-8A)αtrp1 ura3 dbf1 L.Johnston
1824.dbf2(L119-7D)αtrp?ura3 ade1 dbf2 L.Johnston
1750.dbf2-3(D128)αade1 his1 trp2 dbf2-3 L.Johnston
1825.dbf3(L124-11D)a ura3 dbf3 L.Johnston
1751.dbf3-1(D128)αade1 his1 trp2 dbf3-1 L.Johnston
1747.dbf8-1(D128)αade1 his1 trp2 dbf8-1 L.Johnston
1748.dbf9-1(D128)αade1 his1 trp2 dbf9-1 L.Johnston
1813.dbf10-1(D141)αade1 his1 trp2 dbf10-1 L.Johnston
1814.dbf11-1(D132)αade1 his1 trp2 dbf11-1 L.Johnston
1815.dbf13-1(D101)αade1 his1 trp2 dbf13-1 L.Johnston
1816.dbf14-1(D22)αade1 his1 trp2 dbf14-1 L.Johnston
1817.dbf14-2(D25)αade1 his1 trp2 dbf14-2 L.Johnston
1818.dbf14-3(D44)αade1 his1 trp2 dbf14-3 L.Johnston
1819.dbf15-1(D22)αade1 his1 trp2 dbf15-1 L.Johnston
1820.dbf20-1(D175)αade1 his1 trp2 dbf20-1 L.Johnston
1794.MH25 α/a dbf2/dbf2 gal1-D5/gal1-A ade1/+his1/his1 trp2/trp2+/ura1+/tyr1+/ade2+/his L.Johnston
1795.MH26α/a dbf3/dbf3 gal1-D5/gal1-a ade1/ade1 his1/+trp2/++/lys2+/ura1+/tyr1+/ade2 L.Johnston
1796.MH27 α/a dbf4/dbf4 gal1-D5/gal1-A ade1/ade1 his1/his1trp2/++/lys2+/tyr1+/ade2+/his7 L.Johnston
1621.g716-5a ho a can1 hom3-10 his1-7 L.Johnston
1622.309 αade2-R8 metX can1-11 L.Johnston
1717.L39-8C αtrp1 or trp2 lys2 canR.L.Johnston
1628.320 a rme ade2 ura3 leu1 can1-11 cyh2-21 L.Johnston
1716.α131-20 αade2-R8 cyh2 can1 leu1 ura3 L.Johnston
807.x 464-20C αtrp1 ade1 his2 leu1 gal1 J.F.T.Spencer
859.168 a ade1 gal1 lys2 tyr1 his7 ura1 ade2 Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
1789.L58.3b gal1 ade1 or ade2 L.Johnston
1638.L57-15b gal1 his7 lys2 tyr1 L.Johnston
1625.Z65 a/α gal1-1/gal1-4 lys2-1/lys2-2 tyr1-1/tyr1-2 his7-2/his7-1ade1/++/ade2+/ura L.Johnston
1757.M1-2B(YNN 27)αtrp1 ura3-52 gal2 L.Johnston
865.205 αgal7 lys2 tyr1 his4 leu2 thr4 MAL2 trp1 ade6 arg4 ura4suc-Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
866.206 a gal7 lys2 tyr1 his4 MAL2 trp1 ade6 arg4 suc-Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
1624.108-3A a gal80 ade6 thr4 trp1 his3 rho-L.Johnston
1636.L53-14C a gal80 gal1-A tyr1 lys2 his7 ade1(or ade2)ura1 L.Johnston
1635.L52-36 αgal80 gal1-D5 ade1 his1(or his8)trp1(or trp8)L.Johnston
1787.106-3D αgal80 ura1 his1 L.Johnston
1634.MH10 α/a gal80/gal80 gal1-D5/gal 1-A trp2/++/ura1+/tyr1+/lys2+/his2+/ade 1 or 2 L.Johnston
867.207 a ade1 gal1 ura3 his2 trp5 leu1 lys7 met2 MAL3 SUC2 Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
864.194 a ade1 trp5 MAL6 suc-Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
862.191 a ade2 MAL3 SUC3 MEL1 MGL2 MGL3 Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
861.190 a his4 leu2 MAL2 suc-Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
863.192 a trp1 ura3 MAL4 MEL1 MGL3 suc-gal3 gal4 Can.J.Microbiol.,1977,23,441 G.Stewart
2252.a/αtrp1/+his2/+ade1/+STA2/STA2 Biochem.J.,1988,249,163 I.Evans
860.169 αilv2 his FLO1FLO4)G.Stewart
868.209 a ilv2 FLO1FLO4)G.Stewart
869.209 αFLO1FLO4)G.Stewart
870.210 a ade1 gal1 trp1 ura3 his2 leu1 met14 FLO1FLO4)G.Stewart
1391.δ1278b wild type(parent)J.Bacteriol.,1970,103,770 R.Robbins
1390.2512C a gap1 J.Bacteriol.,1970,103,770 R.Robbins
1454.MP1,ATCC 42131a/αade2/+his8/+trp5-12/trp5-21 R.Fahrig
916.JCK5-5Aαhis4-A15 ade2-1 can(R)kar1-1 J.Conde
917.ABq 21αhis4-A15 ade2-1 can(R)kar1-2 nys(R)J.Conde
2266.BC3 leu2-3.112 trp1.1 ura3-52 pgk::TRP1 Nucl.Acids Res.,1988,16,1333-1348 P.Piper
1639.a rad1 rad18(+other unlisted requirements)L.Johnston
1799.CM3 1/1d αrad1 leu his ade lys L.Johnston
1800.CM26/4c rad4-3 his leu L.Johnston
1763.CM4/1d αrad5 ura L.Johnston
1764.CM5/1b αrad7 leu L.Johnston
1805.CM21/9a a rad9 ade arg leu lys L.Johnston
1806.CM30/2C αrad11 ade arg his leu L.Johnston
1801.CM1/8a αrad18 ade2 leu2 his4 L.Johnston
1640.g739-2a a rad50-1 can1 his1 ade2(or adeX)L.Johnston
1721.g739-2dαrad50-1 hom3-10 his1 trp2 L.Johnston
1802.CM1/1C αrad51 lys2 leu2 his4 L.Johnston
1803.CM8/1a a rad54 ura his leu L.Johnston
1804.CM9/1a a rad55 leu his L.Johnston
1749.g725-12a αrad57-1 gal1-D5 hom3-10 his1-7 L.Johnston
1630.SK1(L57.15b/L58.3b)gal1 het3 his7/+lys2/+tyr1/+gal1-A/gal1-D5+/ade1(or ade2)同宗配合L.Johnston
1637.g761-10A[α]/g763-5c[a]rad51-3/rad51-3 gal1-A/gal1-5 his1-1/his1-7+/his6+/his7 tyr?/+lys?/+trp?/++/hom3-10+/spo13-1+/lys?+/tyr1+/ura1+/ade2
1792.g650-4a[α]/g650-12a[a] rad52-1/rad52-1 CAN(s)/can(R)+/hom3-10+/his1-7+/trp ade4/+ho/ho
1745.rna3-3(D43)αade1 his1 trp2 rna3-3 L.Johnston
1746.rna3-4(D167)αade1 his1 trp2 rna3-4 L.Johnston
1758.ts96 αade1 his1 trp2 rna1 1-2 dds1-1 L.Johnston
1614.K381-9D αspo11 ura3 ade6 arg4 aro7 asp5 met14 lys2 pet17trp1 L.Johnston
1612.K382-19D αspo11 ura3 can1 cyh2 ade2 his7 hom3 tyr1 L.Johnston
1611.K382-23A a spo11 ura3 can1 cyh2 ade2 his7 hom3 L.Johnston
1616.K393-35C αspo11 ura3 his2 leu1 lys1 met4 pet8 L.Johnston
1617.K396-22B αspo11 ura3 ade1 his1 leu2 lys7 met3 trp5 L.Johnston
1613.K398-4D a spo11 ura3 ade6 arg4 aro7 asp5 met14 lys2 pet17trp1 L.Johnston
1615.K399-7D a spo11 ura3 his2 leu1 lys1 met4 pet8 L.Johnston
227.菌株K,Manchester酿酒厂菌株,1:5:4:2:1.
228.菌株R,Sheffield酿酒厂菌株,5:1:1:3:5.
229.菌株T,London酿酒厂菌株,5:1:1:4:5.
230.菌株U,Birmingham酿酒厂菌株,5:1:1:4:5.
231.菌株V,Burton-on-Trent酿酒厂菌株,1:5:5:3:1.
232.菌株S,American酵母泡沫,ATCC 60782,1:1:3:5:1.
205.杂合体1(NCYC 227 x NCYC 228)
206.杂合体2(NCYC 227 x NCYC 229)
207.杂合体3(NCYC 227 x NCYC 230)
208.杂合体4(NCYC 227 x NCYC 230)
209.杂合体5(NCYC 227 x NCYC 231)
210.杂合体6(NCYC 227 x NCYC 231)
211.杂合体7(NCYC 230 x NCYC 231)
212.杂合体15(NCYC 227 x NCYC 232)
213.杂合体18(NCYC 220 x NCYC 232)
214.杂合体24(NCYC 222 x NCYC 221)
215.杂合体30(NCYC 223 x NCYC 221)
216.杂合体38(NCYC 224 x NCYC 226)
217.杂合体39(NCYC 225 x NCYC 226)
218.杂合体48(NCYC 226 x A162/1 ex NCYC 216)
219.杂合体64(NCYC 227 x A162/3 ex NCYC 216)
220.来自NCYC 212的单孢分离体A2/3菌株
221.来自NCYC 213的单孢分离体A38/3菌株
222.来自NCYC 213的单孢分离体A48/1菌株
223.来自NCYC 214的单孢分离体A85/1菌株
224.来自NCYC 214的单孢分离体A101/1菌株
225.来自NCYC 214的单孢分离体A101/2菌株
226.来自NCYC 214的单孢分离体A104/1菌株
646.x901-35C菌株;αhom2 aro1A trp5 leu1 ade6 lys1 his6 ura1arg4-1 thr1
647.x901-26A菌株;αhom2 aro1A trp5 leu1 ade6 his6 ura1 arg4-2thr1
648.x1069-1A菌株;a ade1 his4 leu2 thr4 met2 trp5 ura1
650.DV 147菌株;αade2,很容易回复到野生型
651.4B菌株;αhis4 leu3 lys10(?)ade6 ade2 met(?),
leaky mutant disomic for chromosome III,mates and sporulates well
652.S400D菌株;a ilv1;具有其它未列举的必要条件
653.S288C-27菌株;αilv1,具有其它未列举的必要条件
654.S2583D菌株;αilv2,具有其它未列举的必要条件
655.S2582B菌株;αilv2,具有其它未列举的必要条件
656.JB19菌株;αleu1 ade2
657.JB143菌株;αleu2 ade2
658.JA36菌株;a leu3 ade2 lys10
659.x 764杂合二倍体菌株;分离标记trp5 leu1 ade6 ura3 hom3his6 lys1 arg4 mal1
660.x 373杂合四倍体菌株
661.x 362杂合六倍体菌株
663.xJ151杂合二倍体菌株;ATCC 60732;分离标记thr1 lys1ura3 aro1A hom2 trp4 ade8;ade2的纯合子
664.xJ107杂合二倍体菌株;分离标记leu1 ura3 lys7 gal7 his8ser1 ade2
264.S.Jackson Farmer′s二倍体菌株18,C53-8d x C24-13b)1959
402.A.A.Eddy F28c菌株,来自NCYC 264的单孢分离体)1953
593.W.F.F.Oppenoorth(R7,O.Winge′s C.L.303-9杂合体菌株)1959
594.W.F.F.Oppenoorth(K83 S 58杂合体菌株)1959
666.J.W.Millbank(respiratory deficient mutant derived from ale酵母NCYC 239)1963
673.H.Laser(由X-射线辐射面包酵母诱导的小菌落突变体)1963
其特征在于它可以具有由启动子调节的FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
109.遗传修饰的酿酒酵母,来自下列株系中的一种:
505.CBS(1957).CBS 1171,ATCC 18824.
70.A.C.Chapman(1933).Saccharomyces anamensis.NCTC 3864.
72.Schmitt(1924).Saccharomyces brasiliensis.98 Carlsberg菌株,NCTC 1808.
74.ATCC(1945).Saccharomyces carlsbergensis.ATCC 9080,ATCC 24904,CBS 23 54.
76.A.C.Chapman(1933).Saccharomyces cartilaginosus.NCTC3865.
77.A.Harden(1921).Baker′s酵母菌株.
78.A.C.Chapman(1925).NCTC 2160
79.ATCC(1942).ATCC 7754,CBS 1368,NRRL Y-977,IFO 1346.
80.H.B.Hutchinson(1930).GB 354,NCTC 5922.
81.ATCC(1942).ATCC 7752,CBS 1320,NRRL Y-973,IFO 1234.
82.A.Klocker(1920).NCTC 466.
83.A.Harden(1920).Carlsberg实验室菌株21,NCTC 381.
84.H.J.Bunker(1945).NCTC 7043.
85.A.J.Kluyver(1939).NCTC 5916.
86.ATCC(1942).ATCC 7753,CBS 1321,NCTC 6421.
87.ATCC(1947).ATCC 9763,NRRL Y-567,CBS 2978,NCTC10716 and NCTC 7239.
89.ATCC(1946).ATCC 7921.
90.A.Castellani(1928).NCTC 2779.Distiller′s酵母.
91.A.Guilliermond(1925).Saccharomyces chevalieri.CBS 400,ATCC 9804,NCTC 2054.Type菌株for Saccharomyces chevalieri.来自葡萄酒.
92.A.C.Chapman(1933).Saccharomyces delbrueckii.NCTC 3964.
93.A.C.Chapman(1925).Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus.NCTC 2161.葡萄酒酵母.
94.A.Klocker(1920).椭圆酵母.NCTC 467,NRRL Y-129,ATCC2338.
95.A.C.Chapman(1933).椭圆酵母var.cratericus.NCTC 3866.
96.M.B.Church(1922).Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus.NCTC 1344.
97.H.B.Hutchinson(1945).椭圆酵母.Michigan 48菌株.ATCC10824,NCTC 7040.
99.J.L.Baker(1930).Saccharomyces festinans.
104.M.Kir(1934).Hungarian葡萄酒酵母.
107.A.J.Kluyver(1939).Saccharomyces intermedius.
108.T.Castelli(1939).Saccharomyces italicus.来自Chianti葡萄汁.
109.Carlsberg Laboratory(1924).Saccharomyces lactis.
110.A.Guilliermond(1925).Saccharomyces lindneri.CBS 403.
113.A.Guilliermond(1925).Saccharomyces vini.
118.Gray,McGill University(1932).Saccharomyces sake.
121.A.C.Chapman(1921).Saccharomyces thermantitonum.
122.B.von Euler(1921).Saccharomyces thermantitonum.(Biochem.Z.,1919,97,156).
124.A.Klocker(1920).NRRL Y-2434 Saccharomyces turbidans.
125.A.Heinemann(1933).椭圆酵母.(Exp.Cell.Res.,1958,15,214).
126.A.Klocker(1920).Saccharomyces validus.
167.B.W.Hammer(1922).Torula cremoris.来自发酵的奶油.
176.A.J.Kluyver(1934).Zygosaccharomyces priorianus.
177.Anheuser-Busch Inc.,U.S.A.(1927).
182.A.C.Chapman(1933).Fernbach 38菌株.
183.A.C.Chapman(1933).Fernbach 40菌株.
186..Winge via British Fermentation Products Ltd.(1942).杂合体K471.
187.A.C.Chapman(1921).克菲尔(Kefir)酵母.
190.A.C.Chapman(1931).Saccharomyces logos.ATCC 60731,NCTC 3341.
192.G.Johnson(1936).Melbourne No.1菌株.
196.A.C.Chapman(1933).酵母Race V.
197.Mehta(1925).酵母Race II.
198.Institut für Garungsgewerbe(1925).酵母Race XII.
199.A.C.Chapman(1921).Saaz酵母.NCTC 906,ATCC 2704,NRRL Y-239.
200.A.C.Thaysen(1920).Sternberg 675菌株.用于生产甘油.
201.R.M.Nattrass(1943).61菌株.
202.Carlsberg Laboratory(1924).葡萄酒酵母,Johannesburg IIWortmann 76菌株.
232.R.S.W.Thorne(1951).
S,American酵母泡沫.1:1:3:5:1 ATCC 60782.
235.B.M.Brown(1951).Whitbread菌株.ATCC 60733.
244.CMI(1951).Saccharomyces intermedius.IMI 46336.
252.S.Jackson(1961).椭圆酵母.菌株6.
291.S.Jackson via C.C.Lindegren(195 1).Mrak 93菌株.
311.S.Jackson(1951).Benskin′s酿酒厂菌株65.
325.A.E.Wiles(1951).T43 Yorkshire type酵母.(J.Inst.Brew.,1950,56,183).
341.A.E.Wiles(1951).来自散装鲜啤酒.1:1:5:5:1
343.A.E.Wiles(1951).来自散装鲜啤酒.1:1:5:5:1(J.Inst.Brew.,1950,56,183).
344.A.E.Wiles(1951).Saccharomyces cerevisiae var.turbidans.
345.A.E.Wiles(1951).Saccharomyces cerevisiae var.turbidans.
346.A.E.Wiles(1951).Saccharomyces cerevisiae var.turbidans.
356.C.H.Ridge(1953).蜂蜜酒酵母.
357.T.Gray(1951).Avize-Cramant蜂蜜酒酵母.
358.T.Gray(1951).Plum蜂蜜酒酵母.
360.D.R.Jackson(1952).Seagram & Sons.
361.R.B.Gilliland(1952).Saccharomyces diastaticus.CBS 1782,NRRL Y-2416,ATCC 13007,IFO 1046.Saccharomyces diastaticus的典型菌株.来自啤酒麦芽汁.
365.F.W.Beech(1952).Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus.来自苹果汁.
374.L.Hemmons(1953).Saccharomyces oviformis.来自hazy ale.
394.A.A.Eddy(1954).Saccharomyces chevalieri.
406.R.B.Gilliland(1954).Saccharomyces steineri.
410.R.B.Gilliland(1954).Saccharomyces fructuum.
429.L.J.Wickerham(1955).Flor酵母.NRRL Y-2036.
430.L.J.Wickerham(1955).Riesling葡萄酒酵母.NRRL Y-2037.
431.L.J.Wickerham(1955).NRRL Y-132,ATCC 2345,ATCC44732,NCYC 73.
447.J.S.Hough(1955).Saccharomyces diastaticus.来自散装鲜啤酒.
463.H.Aebi(1955).Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus.
478.IFO(1956).Koykai 6菌株日本米酒酵母(Sake酵母).
479.IFO(1956).Koykai 7菌株日本米酒酵母(Sake酵母).
480.IFO(1956).R28.Awamori酵母.
481.IFO(1956).K71.Awamori酵母.
482.R.Barrington-Brock(1956).Saccharomyces oviformis.
487.J.Lodder(1957).
488.J.Lodder(1957).
489.J.Lodder(1957).
490.J.Lodder(1957).来自面包酵母的单细胞分离体.
491.J.Lodder(1957).
506.CBS(1957).Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus.CBS1395,NRRL Y-1529.
510.CBS(1957).Saccharomyces validus.CBS 1541.
525.R.Ryden(1958).面包酵母.
592.W.F.F.Oppenoorth(1959).Saccharomyces chevalieri.W332.
609.M.P.Scarr(1960).Saccharomyces fructuum.来自西印度群岛的糖蜜.
618.A.A.Eddy(1962).Saccharomyces cartilis.
619.CBS(1962).CBS 2184.来自Feduchy的Jerez雪利酒(sherry)酵母.
620.CBS(1962).Saccharomyces fructuum.CBS 3012.
621.CBS(1962).Saccharomyces fructuum.CBS 3013.
625.R.B.Gilliland(1960).Saccharomyces diastaticus.絮凝菌株.
626.CBS(1962).Saccharomyces oviformis.CBS 429,NRRL Y-1356,IFO 0262.
667.ATCC(1963).LK2 G12,ATCC 12341.
671.F.W.Beech(1964).Saccharomyces capensis.AWRI 81.雪利酒(sherry)酵母.
672.F.W.Beech(1964).VY22.雪利酒(sherry)酵母.
673.H.Laser(1963).由X-射线辐射诱导的细小菌落突变体.
684.H.J.Bunker(1965).椭圆酵母.Steinberg葡萄酒酵母.
694.F.R.Elliot(1966).杂合体面包酵母.Distillers菌株DCL2984 695.ATCC(1966).ATCC 9896.Fleischmann 139菌株.
700.CBS(1966).Saccharomyces steineri.CBS 423,NRRL Y-1536,ATCC 2367,IFO 0253.Type菌株for Saccharomyces steineri.来自葡萄酒.
703.S.C.Hall(1967).来自散装鲜啤酒.Non-fining酵母.
713.M.Richards(1967).Saccharomyces diastaticus.ATCC 36902.
716.E.Minárik(1968).嗜热菌株.
726.R.B.Gilliland(1970).1430 Gilliland Class IV.
727.R.B.Gilliland(1970).1511 Gilliland Class I.
738.A.P.Maule(1972).ATCC 36900.
739.L.Penasse(1972).来自空气.高甾醇含量.
748.B.E.Kirsop(1972).来自发酵酒(bees wine)培养物.
753.B.H.Kirsop(1973).From NCYC 240.不能发酵麦芽三糖.
754.B.H.Kirsop(1973).From NCYC 240.能发酵麦芽三糖.
755.G.G.Stewart(1973).Labatt′s A.(Proc.Amer.Soc.Brew.Chem.,1972,3,1-176,118).
756.G.G.Stewart(1973).Labatt′s B.(Proc.Amer.Soc.Brew.Chem.,1972,3,1-176,118).
757.R.A.Coutts(1972).
760.N.Okafor(1973).Saccharomyces capensis.来自棕榈酒.
761.N.Okafor(1973).Saccharomyces capensis.ATCC 36899.
767.I.Campbell(1974).Saccharomyces prostoserdovii.as CBS5155.
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其特征在于它可以具有由启动子调节的FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
110.遗传修饰的酿酒酵母,其特征在于它可以具有由启动子调节的FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
111.遗传修饰的酿酒酵母,其特征在于它可以具有由下列启动子:Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子调节的FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
112.用遗传修饰的酿酒酵母进行需氧发酵的方法,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的絮凝基因FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
113.用遗传修饰的酵母进行需氧发酵的方法,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的絮凝基因FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
114.遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由启动子MOX或者其部分调节的絮凝基因FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
115.遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由启动子MOX或者其部分调节的絮凝基因FLO10,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
116.用遗传修饰的微生物进行的需氧发酵过程,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因PKC1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
117.用遗传修饰的微生物进行的需氧发酵过程,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
118.用于权利要求104和117的发酵过程的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于包含由启动子调节的下列絮凝基因中一种或者多种:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或者Lg-FLO1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
119.用于权利要求104和117的发酵过程的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于包含由启动子调节的下列絮凝基因中一种或者多种:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或者Lg-FLO1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
120.用于权利要求104和117的发酵过程的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于包含由启动子调节的下列絮凝基因中一种或者多种:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或者Lg-FLO1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
121.用于权利要求105,106,107,111,114和115的发酵过程的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于包含由启动子调节的下列絮凝基因中一种或者多种:FLO1,FLO1S,FLO1L或FLO10,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
122.用于权利要求105,106,107,108,109,110,111,114和115发酵过程的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于包含由启动子调节的下列絮凝基因中一种或者多种:FLO1,FLO1S,FLO1L或FLO10,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
123.用于权利要求105,106,107,108,109,110,111,114和115发酵过程的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于包含由启动子调节的下列絮凝基因中一种或者多种:FLO1,FLO1S,FLO1L或FLO10,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
124.权利要求101,102,103,104,105,106,107,108,109,110,111,112,113,114,115,116,117,118,119,120,121,122和123的遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基中诸如糖和氮养分的存在或缺乏。
125.用于权利要求101,102,103,104,105,106,107,108,109,110,111,112,113,114,115,116,117,118,119,120,121,122和123的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基中诸如糖和氮养分的存在或缺乏。
126.用于权利要求101,102,103,104,105,106,107,108,109,110,111,112,113,114,115,116,117,118,119,120,121,122和123的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基中诸如糖和氮养分的存在或缺乏。
127.用于权利要求101,102,103,104,105,106,107,108,109,110,111,112,113,114,115,116,117,118,119,120,121,122和123的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基中诸如糖和氮养分的存在或缺乏。
128.权利要求101,102,103,104,105,106,107,108,109,110,111,112,113,114,115,116,117,118,119,120,121,122和123的遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基中乙醇的存在或缺乏。
129.用于权利要求101,102,103,104,105,106,107,108,109,110,111,112,113,114,115,116,117,118,119,120,121,122和123的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基中乙醇的存在或缺乏。
130.用于权利要求101,102,103,104,105,106,107,108,109,110,111,112,113,114,115,116,117,118,119,120,121,122和123的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基中乙醇的存在或缺乏。
131.用于权利要求101,102,103,104,105,106,107,108,109,110,111,112,113,114,115,116,117,118,119,120,121,122和123的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基中乙醇的存在或缺乏。
132.权利要求101,102,103,104,105,106,107,108,109,110,111,112,113,114,115,116,117,118,119,120,121,122和123的遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基中发生的热击或者pH的下降。
133.用于权利要求101,102,103,104,105,106,107,108,109,110,111,112,113,114,115,116,117,118,119,120,121,122和123的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基中发生的热击或者pH的下降。
134.用于权利要求101,102,103,104,105,106,107,108,109,110,111,112,113,114,115,116,117,118,119,120,121,122和123的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基中发生的热击或者pH的下降。
135.用于权利要求101,102,103,104,105,106,107,108,109,110,111,112,113,114,115,116,117,118,119,120,121,122和123的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基中发生的热击或者pH的下降。
136.权利要求104,106,112,113,116,117,118,119,120,124,125,126,127,128,129,130,131,132,133,134和135的遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
137.用于权利要求104,106,112,113,116,117,118,119,120,124,125,126,127,128,129,130,131,132,133,134,135和136的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
138.用于权利要求104,106,112,113,116,117,118,119,120,124,125,126,127,128,129,130,131,132,133,134,135和136的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
139.用于权利要求104,106,112,113,116,117,118,119,120,124,125,126,127,128,129,130,131,132,133,134,135和136的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
140.遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由下列启动子HSP30p或者pMET3或者其部分的一种或者多种调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:FLO1,FLO1S或者FLO1L所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
141.用于权利要求140的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由下列启动子HSP30p或者pMET3或者其部分的一种或者多种调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:FLO1,FLO1S或者FLO1L,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
142.用于权利要求140的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由下列启动子HSP30p或者pMET3或者其部分的一种或者多种调节的下列絮凝基因的一种或者多种絮凝基因:FLO1,FLO1S或者FLO1L,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
143.用于权利要求140的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由下列启动子HSP30p或者pMET3或者其部分的一种或者多种调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:FLO1,FLO1S或者FLO1L,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
144.遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由下列启动子Mox或者其部分调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:FLO1,FLO1S或者FLO1L,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
145.用于权利要求144的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由下列启动子Mox或者其部分调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:FLO1,FLO1S或者FLO1L,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
146.用于权利要求144的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由下列启动子Mox或者其部分调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:FLO1,FLO1S或者FLO1L,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
147.用于权利要求144的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由下列启动子Mox或者其部分调节的下列絮凝基因的一种或者多种:FLO1,FLO1S或者FLO1L,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
148.遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由下列启动子HSP30p或者pMET3或者其部分中的一种调节的絮凝基因FLO10,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
149.用于权利要求148的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由下列启动子HSP30p或pMET3或者其部分中的一种调节的絮凝基因FLO10,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
150.用于权利要求148的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由下列启动子HSP30p或pMET3或者其部分中的一种调节的絮凝基因FLO10,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
151.用于权利要求148的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由下列启动子HSP30p或pMET3或者其部分中的一种调节的絮凝基因FLO10,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
152.遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由下列启动子或者其部分(ADH或Mox)中的一种调节的絮凝基因FLO10,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
153.用于权利要求152的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH或Mox或者其部分中的一种调节的絮凝基因FLO10,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
154.用于权利要求152的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH或Mox或者其部分中的一种或者多种调节的絮凝基因FLO10,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
155.用于权利要求152的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH或Mox或者其部分调节的絮凝基因FLO10,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
156.遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的下列絮凝基因中的一种:sfl1ou,fsu1ou,fsu2ou,tup1ou,cyc8ou,cka2或FMC1,所述启动子的抑制依赖于包括培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
157.用于权利要求156的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:sfl1ou,fsu1ou,fsu2ou,tup1ou,cyc8ou,cka2或FMC1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
158.用于权利要求156的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的下列絮凝基因中的一种或者多种:sfl1ou,fsu1ou,fsu2ou,tup1ou,cyc8ou,cka2或FMC1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
159.用于权利要求156的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的下列絮凝基因中的一种:sfl1ou,fsu1ou,fsu2ou,tup1ou,cyc8ou,cka2或FMC1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
160.遗传修饰的微生物,优选地来自巴斯德毕赤氏酵母,多形汉逊酵母,脆壁酵母,椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomycescalsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)株系的酵母,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或Lg-FLO1,所述启动子的抑制依赖于包括培养基的化学成分,pH或物理激发的特征。
161.遗传修饰的非野生型微生物,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
162.利用权利要求101,102,103,104,105,106,107,108,109,110,111,114,115,124,128,132,136,140,144,148,152,156,160和161的遗传修饰的微生物进行需氧发酵的过程,其特征在于产生目的蛋白。
163.遗传修饰的啤酒酵母W204株系,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或者Lg-FLO1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
164.用于权利要求163的遗传修饰的啤酒酵母W204株系中的质粒,其特征在于包含由启动子调节的下列絮凝基因:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或者Lg-FLO1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
165.用于权利要求163的遗传修饰的啤酒酵母W204株系中的基因盒,其特征在于包含由启动子调节的絮凝基因:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或者Lg-FLO1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
166.用于权利要求163的遗传修饰的啤酒酵母W204株系中的载体,其特征在于包含由启动子调节絮凝基因FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或者Lg-FLO1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
167.权利要求163的遗传修饰的啤酒酵母W204株系,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的下列絮凝基因中的一种:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或Lg-FLO1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
168.用于权利要求163和167的遗传修饰的啤酒酵母W204株系中的基因盒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的下列絮凝基因中的一种:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或Lg-FLO1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
169.用于权利要求163和167的遗传修饰的啤酒酵母W204株系中的质粒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的下列絮凝基因中的一种:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或Lg-FLO1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
170.用于权利要求163和167的遗传修饰的啤酒酵母W204株系中的载体,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的下列絮凝基因中的一种:FLO2,FLO3,FLO4,FLO5,FLO6,FLO7,FLO8,FLO9,FLO11或Lg-FLO1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
171.利用权利要求163,164,165,166,167,168,169和170的遗传修饰的啤酒酵母W204株系进行的需氧发酵过程,其特征在于产生目的蛋白。
172.通过利用遗传修饰的啤酒酵母株系W204生产目的蛋白的需氧发酵过程,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的絮凝基因FLO1S和FLO1L,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征,因此所述微生物不是野生型微生物。
173.权利要求101的遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征,因此微生物不是野生型微生物。
174.通过利用遗传修饰的微生物生产目的蛋白的需氧发酵过程,其特征在于所述微生物可以具有由启动子调节的絮凝基因FLO1或FLO10,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或物理激发的特征,因此所述微生物不是野生型微生物。
175.遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p或异源启动子调节的絮凝基因PKC1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
176.用于权利要求175的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于含有由启动子ADH,Mox,HSP30p或异源启动子调节的絮凝基因PKC1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或物理激发的特征。
177.用于权利要求175的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于含有由启动子ADH,Mox,HSP30p或异源启动子调节的絮凝基因PKC1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,或物理激发的特征。
178.用于权利要求175的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于含有由启动子ADH,Mox,HSP30p或异源启动子调节的絮凝基因PKC1,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,或物理激发的特征。
179.用于生产目的蛋白的需氧发酵过程,其特征在于利用权利要求175的遗传修饰的微生物。
180.用于生产目的蛋白的厌氧发酵过程,其特征在于利用权利要求175的遗传修饰的微生物。
181.权利要求105,107,108,109,110,121,122和123的遗传修饰的微生物,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
182.用于权利要求105,107,108,109,110,121,122,123和181的遗传修饰的微生物中的质粒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
183.用于权利要求105,107,108,109,110,121,122,123和181的遗传修饰的微生物中的基因盒,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
184.用于权利要求105,107,108,109,110,121,122,123和181的遗传修饰的微生物中的载体,其特征在于它可以具有由下列启动子ADH,Mox,HSP30p,pMET3或者异源启动子或者其部分中的一种调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
185.用来自巴斯德毕赤氏酵母,多形汉逊酵母,脆壁酵母,椭圆酵母,卡尔酵母(Saccharomyces calsbergensis),产朊假丝酵母,解脂假丝酵母或者乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)株系的遗传修饰的酵母进行厌氧发酵的过程,其特征在于所述酵母可以具有由启动子调节的絮凝基因FLO1,FLO1S或者FLO1L中的一种或者多种,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
186.遗传修饰的藻,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
187.遗传修饰的原生动物,其特征在于它可以具有由启动子调节的絮凝基因,所述启动子的抑制依赖于培养基的化学成分,pH或者物理激发的特征。
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