CN1660889A - 低溶血性的抗菌胜肽及其使用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及环状短链的抗菌胜肽(少于10个氨基酸)，具有独特的带苯环和带正电氨基酸结构，化学式为(A1X1A2) N，形成一个具有广泛效力的抗菌胜肽，同时该抗菌胜肽也显现了低度溶血性。
Description
技术领域
本发明涉及抗菌胜肽，尤其是环状结构且只由9个带苯环和正电氨基酸所组成的短胜肽，该胜肽具有极佳的抗菌能力。相较于其它同样由苯环和正电氨基酸所组成的长胜肽而言，该短肽显现了出色的抗菌效力及低溶血性。
背景技术
由于出现了对传统抗生素产生抗药性的菌株，促进了新型治疗试剂的研究，包括许多动物性来源的抗菌胜肽。目前发现这些抗菌胜肽在一些宿主的与生俱来的防御机制中扮演着相当重要的角色，这些宿主包括植物、昆虫、两生类和哺乳动物等。这些胜肽可能还具有对抗细菌、真菌，甚至一些病毒的抗生素活性，其可与脂质结合(大于百分之九十五)，迅速地分离脂质双层，从而破坏膜的完整性。另一方面，这些胜肽也能在细菌的平形的脂双层上增加小而短暂的传导特性，使得细胞质膜部分去极化而破坏原本的电位梯度。
此类抗菌胜肽在宿主防御中的保护功能已在果蝇实验中得到证实；当果蝇被微生物感染后，若抗菌胜肽的表现量减少，则会大大降低微生物的存活率。在哺乳动物中，其功能也可由肺囊胞性纤维症病人和小鼠的缺陷性细菌致死(defective bacterial killing)实验得到证实。
在哺乳动物中所发现的抗菌胜肽可分为富含半胱氨酸的防御素(α、β防御素)和多样的卡色力西丁(cathelicidin)类。卡色力西丁(Cathelicidin)这类含有一段高度保留的讯号序列和前区域(卡色林“cathelin”)而具变异性的抗菌序列则位于C端区块。许多卡色力西丁(cathelicidins)在带负电的卡色林(cathelin)区块和带正电的C端区块之间并含有独特的弹性蛋白酵素切割作用位；已观察到此作用位的蛋白质水解反应存在于牛或猪的嗜中性淋巴球中且为抗菌活性所必须。根据氨基酸成分及构造，此卡色力西丁(cathelicidin)家族可分类为三类：第一类具有亲水脂的α-螺旋胜肽，比如LL-37、CRAMP、SMAP-29、PMAP-37，、BMAP-27和BMAP-28；第二类则是富含精氨酸/脯氨酸或色氨酸胜肽，如Bac5、Bac7、PR-39和吲哚力西丁(indolicidin)；第三类为含半胱氨酸胜肽，如波地金(protegrins)。
因为抗菌胜肽通常具有低分子量(<5kDa)、广泛的活性和构成宿主对抗微生物感染的防御系统中重要的环节等特性，因此可作为研发低分子量抗菌复合物的着手点。另外也因其兼具有疏水性和带电性区域，使其有潜力可折叠成亲水脂的结构，此特性也涉及其水解细胞质膜的能力。不过，虽然都具有广泛的抗菌效力，这些胜肽对于红血球却有不同的溶血活性，该特性大大限制了治疗方面的发展。
发明内容
综上所述，本发明的藉由对胜肽初级及二级结构的修饰，研究出具有对抗临床上重要菌株活性的胜肽，并借此了解胜肽构造上的一些重要特征。测试结果显示，藉由初级或二级结构的修饰，改善天然抗菌胜肽的活性或是毒性是可行的。此发明相关抗生素，且被认为是用途广泛的新型抗菌胜肽，该胜肽富含色氨酸序列，兼具抗菌活性和低溶血的特性。因此，本发明是直接针对广谱抗革兰氏阳性、阴性菌、原生动物、真菌和具封套的人类自体免疫缺失病毒而设计的抗生素。
本发明的目的在于提供一种新的抗菌肽，尤其是环状、短(胜)肽，该胜肽在广谱抗菌的同时具有改善的血清兼容性和低溶血性。
本发明还在于提供了该胜肽的广谱抗菌活性，包括抗革兰氏阳、阴性菌和具多重抗药性的致病原。
本发明提供一种抗菌胜肽，该胜肽含有少于10个氨基酸，化学式为：(A1X1A2)N，其中，
A1选自精氨酸(Arg)、赖氨酸(Lys)、缬氨酸(Val)及异白氨酸(Ile)；
X1选自色氨酸(Trp)、苯丙氨酸(Phe)及脯氨酸(Pro)；
A2选自精氨酸(Arg)、赖氨酸(Lys)、缬氨酸(Val)及异白氨酸(Ile)；
N为1，2或3。
本发明的胜肽有如下特点：第一，该胜肽少于10个氨基酸，构形十分紧密，所以可有效地穿过细胞膜；第二，本发明筛选得到的胜肽可广泛地对抗已具有抗药性的菌株及医药上重要的真菌；此外，该胜肽还拥有抗内毒素的能力并可与传统抗生素一起使用。最重要的是，本发明改善了血清的兼容性，而且相较于波地金(protegrins)和吲哚力西丁(indolicidin)类似物，对于人的红血球有十分低的溶血性。
根据本发明具有下列形式的肽：
(A1X1A2)N
A1选自精氨酸(Arginine)、赖氨酸(Lysine)、缬氨酸(Val)及异白氨酸(Ile)；
X1选自色氨酸(Trp)、苯丙氨酸(Phe)及脯氨酸(Pro)；
A2选自精氨酸(Arg)、赖氨酸(Lys)、缬氨酸(Val)及异白氨酸(Ile)；
N为1、2或3；
其构形呈现环状或直链状。
下列为本发明的一些抗菌胜肽非限定性例子：
环状-Lys Phe Ile、
直链状-Lys Phe Ile、
环状-Arg Phe Ile、
直链状-Arg Phe Ile、
环状-Arg Phe Val、
直链状-Arg Phe Val、
环状-Lys Phe Arg、
直链状-Lys Phe Arg、
环状-Lys Trp Val、
直链状-Lys Trp Val、
环状-Lys Trp Ile、
直链状-Lys Trp Ile、
环状-Lys Trp Arg、
直链状-Lys Trp Arg、
环状-Arg Trp Val、
直链状-Arg Trp Val、
环状-Lys Trp Arg Arg Trp Ile、
直链状-Lys Trp Arg Arg Trp Ile、
环状-Lys Trp Arg Arg Trp Val、
直链状-Lys Trp Arg Arg Trp Val、
环状-Lys Trp Ile Lys Trp Arg、
直链状-Lys Trp Ile Lys Trp Arg、
环状-Lys Trp Val Lys Trp Ile、
直链状-Lys Trp Val Lys Trp Ile、
环状-Lys Trp Ile Lys Trp Ile、
直链状-Lys Trp Ile Lys Trp Ile、
环状-Lys Trp Ile Lys Trp Ile Lys Trp Ile、
直链状-Lys Trp Ile Lys Trp Ile Lys Trp Ile、
环状-Lys Phe Ile Lys Phe Ile Lys Phe Ile、
直链状-Lys Phe Ile Lys Phe Ile Lys Phe Ile、
环状-Lys Trp Arg Arg Trp Val Arg Trp Ile、
直链状-Lys Trp Arg Arg Trp Val Arg Trp Ile、
环状-Ile Trp Arg Val Trp Arg Trg Trp Lys、
直链状-Ile Trp Arg Val Trp Arg Arg Trp Lys、
环状-Lys Phe Arg Arg Phe Val Arg Phe Ile、
直链状-Lys Phe Arg Arg Phe Val Arg Phe Ile、
环状-Lys Pro Arg Arg Pro Val Arg Pro Ile、
直链状-Lys Pro Arg Arg Pro Val Arg Pro Ile、
环状-Lys Trp Ile Arg Trp Val Arg Trp Ile、及
直链状-Lys Trp Ile Arg Trp Val Arg Trp Ile。
本发明的胜肽可以是碳端氨基酸胺化的胜肽，也可为氮端氨基酸乙酰化的胜肽，或为碳端氨基酸酯化的胜肽。
上述胜肽，优选具有一个以上的D型氨基酸。
本发明还提供了一种具有抗菌活性的药物组合物，其包含选自上述任一所述的胜肽，及载剂或赋形剂。
应用实验结果显示：
通过适当方法和途径施与个体治疗有效量的本发明的肽，可以实现去除革兰氏阴性菌内毒素活性。
通过适当方法和途径施与个体治疗有效量的本发明的肽，可以实现处理或预防细菌或病毒感染。
通过适当方法和途径施与个体治疗有效量的本发明的肽，可以抑制微生物的生长。
如同美国专利第6,303,575、6,180,604、5,821,224、5,547,939、5,459,325和5,324,716号中描述的富含色氨酸的胜肽，所有自然发生的胜肽都拥有超过10个氨基酸构成并在生物体内被迅速分解。吲哚力西丁(indolicidin)类似物通常具有I-L-P-W-K-W-P-W-W-P-W-X的氨基酸序列，X表示1或2个选定的氨基酸(美国专利第5,547,939号)。可见，现有技术对于富含色氨酸胜肽的记载都不同于本发明，本发明的抗菌胜肽是直接针对具有广泛抗菌性的环状短肽(少于10个氨基酸)并具有改善的选择性和低溶血性的胜肽。
环化直链的抗菌胜肽对于其选择性和稳定性有几个优点，如：
(1)未折叠的胜肽会因斥水性的作用力而形成沉淀聚积，导致被非特异性地吸收到正常的哺乳动物细胞且具有低溶解度。
若将未折叠的构形加以束缚并限制其斥水性氨基酸的暴露就可限制此斥水性的交互作用。另外，这些束缚可增加静电作用力在胜肽与带负电标的膜初始结合过程所扮演的角色；所以，实际上是增加胜肽对细菌或哺乳动物细胞的选择性。
(2)由于蛋白质分解酶作用需要胜肽延伸的结构并露出切割作用位，因此，环化短胜肽可能就可藉此被坚固且被束缚的结构而限制了其对蛋白质分解酶的感受度。
(3)因为环化似乎只会影响到其对革兰氏阴性菌的活性，更多的这方面的研究可有助于针对特别菌种溶解度的胜肽的研发设计。
附图说明
图1A-D为以Pac-525(实心圆)和Pac-524(空心圆)处理过的菌珠存活曲线图，其中：
图1A为枯草杆菌(Bacillus.Substilis)ATCC6633；图1B为金黄葡萄球菌(Staphylococcusaureus)ATCC9144；图1C为大肠杆菌(E.coli)ATCC25922；图1D绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)ATCC27853。
图2为以NPN摄入分析测量Pac-525诱导外膜通透度曲线，其中0μg/ml：实心方形；1μg/ml：空心圆；2μg/ml：空心方形；3μg/ml：空心三角形。
图3为利用色氨酸的荧光吸光记录由硫酸十二酯钠诱导Pac-525环境改变的情形。
图4A和图4B分别为Pac-525和Pac-526在磷酸盐缓冲液(空心圆)或10mM SDS(实心圆)的CD光谱。
图5显现了本发明胜肽对人类红血球细胞的非常低的溶血性，其中实心圆：蜂毒肽(melittin)；空心圆：Pac-525；实心三角形：Pac-527。
具体实施方式
实施例一：胜肽的设计、合成、纯化及特性
本发明胜肽相似物及其命名如下列表一所示，各个氨基酸皆由三个字母来替代表示。
表一
| 名称 | 氨基酸序列 | 序列编号 |
| Pac-301CPac-301LPac-302CPac-302LPac-303CPac-303LPac-304CPac-304LPac-305CPac-305LPac-521CPac-521LPac 522CPac-522LPac-525CPac-525LPac-526CPac-526LPac-527CPac-527LPac-528CPac-528LPac-529CPac-529L | Lys Trp Arg Arg Trp IleLys Trp Arg Arg Trp IleLys Trp Arg Arg Trp ValLys Trp Arg Arg Trp ValLys Trp Ile Lys Trp ArgLys Trp Ile Lys Trp ArgLys Trp Val Lys Trp IleLys Trp Val Lys Trp IleLys Trp Ile Lys Trp IleLys Trp Ile Lys Trp IleLys Trp Ile Lys Trp Ile Lys Trp IleLys Trp Ile Lys Trp Ile Lys Trp IleLys Phe Ile Lys Phe Ile Lys Phe IleLys Phe Ile Lys Phe Ile Lys Phe IleLys Trp Arg Arg Trp Val Arg Trp IleLys Trp Arg Arg Trp Val Arg Trp IleIle Trp Arg Val Trp Arg Arg Trp LysIle Trp Arg Val Trp Arg Arg Trp LysLys Phe Arg Arg Phe Val Arg Phe IleLys Phe Arg Arg Phe Val Arg Phe IleLys Pro Arg Arg Pro Val Arg Pro IleLys Pro Arg Arg Pro Val Arg Pro IleLys Trp Ile Arg Trp Val Arg Trp IleLys Trp Ile Arg Trp Val Arg Trp Ile | SEQ ID NO：1SEQ ID NO：1SEQ ID NO：2SEQ ID NO：2SEQ ID NO：3SEQ ID NO：3SEQ ID NO：4SEQ ID NO：4SEQ ID NO：5SEQ ID NO：5SEQ ID NO：6SEQ ID NO：6SEQ ID NO：7SEQ ID NO：7SEQ ID NO：8SEQ ID NO：8SEQ ID NO：9SEQ ID NO：9SEQ ID NO：10SEQ ID NO：10SEQ ID NO：11SEQ ID NO：11SEQ ID NO：12SEQ ID NO：12 |
C：环状；L：直链状
所有的直链状胜肽都是以固态合成法合成，使用标准的Fmoc：(N-(9-芴基)甲氧羰基)在PAL树脂(5-(4-Fmoc-胺甲基-3，5-二甲氧苯氧)-戊酸-甲基苯氢胺树脂)上经化学合成；而这些树脂上的Fmoc保护基以20％的六氢吡啶/二甲基甲酰胺(piperidine/DMF)去除，反应时间大约1～1.5小时，之后以水和茚三酮测试(ninhydrin test)确定。接下来加入95％的三氟醋酸(TFA)混合1～1.5小时，由树脂上切下此未加工的胜肽；再以反相高效液相层析分析纯化。所使用的反相高效液相层析是半制备(semi-preparative)C18反相柱。纯化的流动相则是不同比例的乙腈(acetonitrile)和水混合；波长225和280纳米检测；流速4毫升/分钟。所得的主要胜肽产物再以快速原子撞击质谱分析(FAB-MS；fast atombombard mass spectropho tometry)去确定分子量。每个胜肽的纯度都经过反相高效液相层析分析柱确定。
实施例二：体外胜肽活性测试
一般而言，体外胜肽抗菌活性可用标准的临床实验室标准国家委员会(NCCLS)细菌抑制分析法或最小抑制浓度(MIC)测试。所谓最小抑制浓度是指抑制或减少微生物生长所需的最小胜肽浓度。以最小抑制浓度分析法测试的生物体如表二：
表二
| 用于最小抑制浓度(MIC)测定的测试菌株 | |
| 生物体 | 来源 |
| 枯草杆菌(Bacillus substilis) | ATCC 6633 |
| 金黄葡萄球菌(Staphylococcus aureus) | ATCC 9144 |
| 表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis) | ATCC 12228 |
| 金黄葡萄球菌(Staphylococcus aureus) | ATCC 29737 |
| 芽胞杆菌(Bacillus pumilus) | ATCC 14884 |
| 腊状杆菌(Bacillus cereus) | ATCC 11778 |
| 绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa) | ATCC 27853 |
| 金黄葡萄球菌(Staphylococcus aureus) | ATCC 29213 |
| 大肠杆菌(E.coli) | ATCC 25922 |
简单的说，就是将隔夜培养的菌液以米勒希顿(Meuller-Hinton)生长培养液稀释成大约含有105个菌落的接种体；胜肽也进行两次序列稀释，再加入稀释过的菌液当中。37℃、18小时培养后，分析其混浊度；每个胜肽的最小抑制浓度分别在不同时刻测量三次，求得平均值，如表三、图1及图2。根据结果，发现Pac521-530对于革兰氏阴、阳性菌具有最大的抗菌活性。另外，Pac-521～530相对Pac-301～310显现较大的抗菌活性。
表三 合成胜肽对于大肠杆菌及金黄葡萄球菌的最小抑制浓度值(μg/ml)
| 名称 | 大肠杆菌 | 金黄葡萄球菌 |
| Pac-301CPac-301LPac-303CPac-303LPac-305CPac-305LPac-521CPac-521LPac-522CPac-522LPac-525CPac-525LPac-526CPac-526LPac-527CPac-527LPac-528CPac-528LPac-529CPac-529L | ＞6416＞6424＞6424648648642644644642648 | ＞648＞6416＞64166416644644644644644644 |
C：环状；L：直链状
表四
| 生物体枯草杆菌 | 合成胜肽的最小抑制浓度值(MICμg/ml)无磷酸缓冲液 1X磷酸缓冲液 | |||
| Pac-525L4 | Pac-527L4 | Pac-525L4 | Pac-527L2 | |
| 表皮葡萄球菌 | 2 | 2 | 2 | 4 |
| 金黄葡萄球菌 | 4 | 4 | 8 | 4 |
| 芽胞杆菌 | 4 | 2 | 8 | 4 |
| 腊状杆菌 | 2 | 4 | 8 | 4 |
| 绿脓杆菌 | 2 | 4 | 4 | 8 |
| 大肠杆菌 | 2 | 4 | 8 | 8 |
实施例三：膜穿透度分析
胜肽外膜穿透度是由1-N-苯萘胺(NPN)的吸收测试来决定的。完整的大肠杆菌细胞NPN在液态环境中显示弱的荧光吸收；而在斥水性环境则有强的吸收值，因此表示NPN为斥水性，可用来直接测量外膜穿透程度。在一般正常情况下，大肠杆菌吸收少量NPN或甚至没有吸收；在一些具有膜穿透力的化合物存在情况下(乙二胺四乙酸，多粘菌素B(polymyxin B)，新霉素或是抗菌胜肽)，NPN会部分地穿透到细菌的外膜造成荧光吸收值的增加。
实验步骤简述如下：将1毫升隔夜培养的菌液加入50毫升的培养液中，37度震荡培养至OD600等于0.4～0.6，3500rpm、10分钟离心细胞。用缓冲液冲洗并所离心下来的悬浮细胞至OD600＝0.5。吸取1毫升至透明小试管(cuvette)中，测量2～5秒。加入0.5毫摩尔的NPN 20微升，混合均匀后再测量2～5秒。再加入100倍的抗生素10微升，混合均匀，测量至达到最大值为止(1-5分钟)。所以，荧光的吸收值是随着胜肽浓度而改变，而NPN的吸收达到增加最大值的百分之五十所需的胜肽浓度定义为P50。实验结果显示，在NPN吸收测试下，所有的胜肽都具有与膜结合的能力，数据如表五和图2。
表五
| 可以通透大肠杆菌外膜产促进NPN摄入之能力 | |
| 胜肽 | P50(μg/ml) |
| Pac 301 LPac 305 LPac 309 LPac 521 LPac 525 LPac 529 L | 8168224 |
实施例四：色氨酸环境的特征
由于色氨酸对于周围环境极化程度的敏感性，常被用来作为测量极化或结合方面的研究。利用LS-55荧光光度计(spectrofluorimeter)[Perkin-Elmer公司]在25℃5毫米石英试管(quartz cell)下完成了波长300和450纳米的荧光散射光谱；激发波长设定为280纳米；散射和激发闸宽皆为5纳米。在磷酸缓冲液中，这一系列的抗菌胜肽在波长357纳米下有最大的散射值；而在有十二烷基硫酸钠(SDS)存在下，最大散射波长则往蓝带位移(blue shift)了8纳米，强度也随之增加。这个结果显示出色氨酸的支链移向更斥水性的环境，结果如图3所示。
实施例五：由旋光分散光谱(CD)所检测到的胜肽二级结构
CD光谱由经d-10-樟脑磺酸(camphorsulfonic acid)校正后的AVIV 62DS旋光光谱仪(spectropolarometer)获得；使用光径1毫米的透明小试管。实验条件为在pH值7.2、浓度10毫摩尔的磷酸钠缓冲液下，胜肽浓度30微摩尔。0.5纳米步长(stepsize)和平均时间一秒的情况下吸收波长190-260纳米的远紫外线光谱。在磷脂质不存在的情况下，Pac-301～310和Pac-521～530显现并无规则结构的特征(表六)；在SDS加入后，结构则被诱导出来(图4)。
表六
| 胜肽 | 在磷酸缓冲液的结构 | 在十二烷基硫酸钠的结构 |
| Pac-301 CPac-301 LPac-305 CPac-305 LPac-522 C | 无规则结构无规则结构无规则结构无规则结构无规则结构 | 无规则结构少许规则结构无规则结构少许规则结构无规则结构 |
| Pac-522 LPac-525 CPac-525 L | 无规则结构无规则结构无规则结构 | 少许规则结构无规则结构少许规则结构 |
实施例六：红血球溶解实验
利用人类红血球细胞测试Pac-521～530的血球溶解性。将带有乙二胺四乙酸的红血球以磷酸盐缓冲液(PBS)(800g，10分钟)润洗三次，最后悬浮在PBS中；稀释成10％后以每管50微升的体积分装。然后将溶解于PBS缓冲液的胜肽加入，37℃培养一小时(最后红血球浓度为5％v/v)；800g离心10分钟。将前处理过的红血球和不同浓度的胜肽培养而分别得到其溶血性百分比。结果显示Pac-525相较于其它抗菌胜肽而言对于红血球有明显较低的溶血性(表七和图5)。
表七
| 胜肽 | 在5μg/ml浓度下的溶胞百分比 | 在50μg/ml浓度下的溶胞百分比 | 在500μg/ml浓度下的溶胞百分比 |
| Pac-301 LPac-305 LPac-524 LPac-525 L | 0.850.740.820.81 | 6.87.27.37.2 | 14151514 |
以上描述了本发明的优选实施方式，然其并非用以限定本发明。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。
序列表
<110>沛进生物科技股份有限公司
<120>低溶血性的抗菌胜肽及其使用方法
<130>F0401011G
<160>12
<170>Patent In version 3.1
<210>1
<211>6
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>直链状或环状构形胜肽，具有抗菌活性
<400>1
Lys Trp Arg Arg Trp Ile
1 5
<210>2
<211>6
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>直链状或环状构形胜肽，具有抗菌活性
<400>2
Lys Trp Arg Arg Trp Val
1 5
<210>3
<211>6
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>直链状或环状构形胜肽，具有抗菌活性
<400>3
Lys Trp Ile Lys Trp Arg
<400> 5
<210>4
<211>6
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>直链状或环状构形胜肽，具有抗菌活性
<400>4
Lys Trp Val Lys Trp Ile
<400> 5
<210>5
<211>6
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>直链状或环状构形胜肽，具有抗菌活性
<400>5
Lys Trp Ile Lys Trp Ile
1 5
<210>6
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>直链状或环状构形胜肽，具有抗菌活性
<400>6
Lys Trp Ile Lys Trp Ile Lys Trp Ile
1 5
<210>7
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>直链状或环状构形胜肽，具有抗菌活性
<400>7
Lys Phe Ile Lys Phe Ile Lys Phe Ile
1 5
<210>8
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>直链状或环状构形胜肽，具有抗菌活性
<400>8
Lys Trp Arg Arg Trp Val Arg Trp Ile
1 5
<210>9
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>直链状或环状构形胜肽，具有抗菌活性
<400>9
Ile Trp Arg Val Trp Arg Arg Trp Lys
1 5
<210>10
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>直链状或环状构形胜肽，具有抗菌活性
<400>10
Lys Phe Arg Arg Phe Val Arg Phe Ile
1 5
<210>11
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>直链状或环状构形胜肽，具有抗菌活性
<400>11
Lys Pro Arg Arg Pro Val Arg Pro Ile
1 5
<210>12
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>直链状或环状构形胜肽，具有抗菌活性
<400>12
Lys Trp Ile Arg Trp Val Arg Trp Ile
1 5
Claims (11)
1、一种具抗菌活性的胜肽，其化学式如下：
(A1X1A2)N
其中，
A1选自Arg、Lys、Val及Ile；
X1选自Trp、Phe及Pro；
A2选自Arg、Lys、Val或及Ile；
N为1、2或3。
2、如权利要求1的胜肽，其选自以下序列：
Lys Trp Arg Arg Trp Ile (SEQ ID NO：1)、
Lys Trp Arg Arg Trp Val (SEQ ID NO：2)、
Lys Trp Ile Lys Trp Arg (SEQ ID NO：3)、
Lys Trp Val Lys Trp Ile (SEQ ID NO：4)、
Lys Trp Ile Lys Trp Ile (SEQ ID NO：5)、
Lys Trp Ile Lys Trp Ile Lys Trp Ile (SEQ ID NO：6)、
Lys Phe Ile Lys Phe Ile Lys Phe Ile (SEQ ID NO：7)、
Lys Trp Arg Arg Trp Val Arg Trp Ile (SEQ ID NO：8)、
Ile Trp Arg Val Trp Arg Arg Trp Lys (SEQ ID NO：9)、
Lys Phe Arg Arg Phe Val Arg Phe Ile (SEQ ID NO：10)、
Lys Pro Arg Arg Pro Val Arg Pro Ile (SEQ ID NO：11)、
Lys Trp Ile Arg Trp Val Arg Trp Ile (SEQ ID NO：12)。
3、如权利要求2的胜肽，其为直链状或环状拓朴结构的胜肽。
4、如权利要求3的胜肽，其为碳端氨基酸胺化的胜肽。
5、如权利要求3的胜肽，其为氮端氨基酸乙酰化的胜肽。
6、如权利要求3的胜肽，其为碳端氨基酸酯化的胜肽。
7、如权利要求3的胜肽，其具有一个以上的D型氨基酸。
8、一种具有抗菌活性的药物组合物，其包含选自权利要求1至7任一项的胜肽，及载剂或赋形剂。
9、一种去除革兰氏阴性菌内毒素活性的方法，至少包含施与治疗有效量的选自权利要求1至7任一项的胜肽的方法。
10、一种处理或预防细菌或病毒感染的方法，至少包含施与治疗有效量的选自权利要求1至7任一项的胜肽的方法。
11、一种抑制微生物生长的方法，至少包含施与有效量的选自权利要求1至7任一项的胜肽的方法。
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